БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙУНИВЕРСИТЕТ

Биологическийфакультет

AOCТIDКEHH.RСОВРЕМЕННОЙ вновсгвн

И БИОЛОГИЧЕСКОЕ06РАЗОВАНИЕ

Труды научной конференции,посвященной 75-летию биологического

факультета Белгосуниверситета

МИНСК 1997

УДК 57

Редакционная коллегия

профессор В.М. Юрии (председатель); профессор И.К. Лопа-тии; член-нор. АН Беларуси А.Н. Оетапеня; кандидаты био-логических наук В.В. Лыеак, В.В. Сенчук, А.И. Сокелик;кандидат сельскохозяйственных наук в.д. Пелавсевова

ДОСТИЖЕНИЯ СОВРЕМЕННОЙ БИОЛОГИИ ИБИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБРАЗОВАНИЕ. Труды науч-ной конференции, посвященной 75-летию биологи-ческого факультета Белгосуниверситета.- Мн.:БГУ, 1997.- 268 с.

Представлевы лучшие научные и методические работы пре-подавателей, СОТРУДНИКОВ и аспирантов биологического факульте-та Велгосувиверситета, посвященные актуальным проблемам био-логии.

ISBN 985-6144-81-7 ©Белrосувиверситет, 1997

Научное издание

ДОСТИЖЕНИЯ СОВРЕМЕIШОЙ БИОЛОГИИ ИБИОЛОГИЧЕСКОЕ ОБРАЗОВАНИЕ

Труды научной конференции,посвященной 75 ...летию биологического

факультета БелгосуниверситетаОтветственные за выпуск:

ТоН. Выряновв, В.М. ЛавроваТехнический редактор

в.г ..КалютаРедактор г.А. Путин

Корректоры:Н ..Ф. Акулич, Г.В. Лозовская

Подписано в печать 04..11.97. Формат 60xB4j16. Бумага тип. ~1.Печать офсетная. Усл.печ.л. 16~6. Уч.эиад.л. 16775.

Тираж 200 ЭКЗ. Заказ 1'12 307.Велгооувиверситет, 2200507 Минск, пр. Ф.С:КОРИНЫ7 4.

Отпечатано на ризографе ЦИТ БГУ.

очерк истории

Баяаш А.В. Некоториу ляции сороки (Рiсаг. Минска .Бибиков Ю.А., :-СV'11t1ll,.1

ник В.В. ИзучениеЮЩИХ региоВоВ ••••••••••••Буга С.В., Камиискийитоги и перспективынасекомых Беларуси ..Бурко Н.Е. Возрастныетвой ткани у ВОДЯНОЙиспользование дляБурко Н.Е., Дрозд л.лмелких млекопитающкоторые популяционноропейской рыжей полеГричик В.В. Уникальр. Щары (БрестскаяГулис В.И.,ях исследований UVI- •••.I[.I.,u.l..I1

ченности в Беларуси. . ..Джус М.А. Обзор сеБеларуси .Мелешко Ж.Е. п- ·..,· ,-,диагностики иутовидов рода PolydrusuBМихеева Т.М. ТаксономзБеларуси .Сацукевич Н.В. Некогологии бедокопытниковоdoubleday) (Lepidoptera:Шалапенок Е.С. О состокариоза и фасциолеза в

Литература

1. Влажевич О.В., Максимова Н.П. II Известия РАН.- 1994.- 1>l!с. 205-210. 2,,,20 Максимова н.п, I I Веств. Белорусского ун-та. Сер. Геог., ВИол

ИИя.-1991.- ~2.- с. 41-44. " ~1t .•

З. Олехвовнч И.Н., Максимова Н.П., Фомичев ю.к., I Гепети:ка.- 198Т. 21., оМI0.- С. 1627-1633. 5.,

4. Олехнович И.Н., Максимова Н.П., Фомичев Ю.К. I I Гепети:ка.- 1987Т. 23., N28.- Со 414-420. .<,

5. Миллер Дж. Эксперименты в моле.кулярноИ генетике.- М., 1976.-6. Мавиатис Т., Фрич В., Сэмбрук Дж. Молекулярное КЛОНИРованпМ., 1984. е.__7. Eckhard Т. I I Plasmid. 1978.- v. 1.- Р. 584-588.В. Lorenzo V., Herrero М., Jacubzic U. et Щ. I I J.Вacteriol.- 1990._ V.

172.- Р. 6568-6572.9. Девио Р., Ботстайи Д., Рот Д. Методы генетической инженерии. Ген

на бактериЙ.- М., 1984. ) eT1i_10. Ely В. I/ Mol. Gen. Genet. 1985.- V. 200.- Р. 802-804.Н. Титок М.А., Олехнович И.Н., Евтушенков А.Н. I I Мол. тенет. микроб

ол, и вирусология.- 1991.- 3'&8.- С. 16-21. и-12. LowК.В. II СеПMol. Biol.- 1997.- У. 2.- Р. 1184-1189.

НОВЫЕ АНТАГОНИСТЫ НЕКОТОРЫХПАТОГЕНОВ ЛУКА РЕПЧАТОГО

А.К. Храмцов. А.С. ШукановКафедра ботаники

Биологический метод защиты растений от болезней _самый прогресСИВНЫЙ, поскольку является ЭКОлогическиЧИстым. Поэтому ВЫявление организмов, проявляющих ан-тагоНизмк -.фитопатогенам, но ЯВляющихс.я безвреднымиДЛЯ человека, ЖИВОТНЫХ и растений, представляет собойактуальную задачу в теоретическом и практическом плане.

Настоящая работа Посвящена изысканию среди бактерийи грибов антагоНИстов некоторых патогенов лука репчатого.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА

Поиск организмов, антагонистических Фитопатогенам,пр~водил:ся среди. ~TaмMOB РИЗОСферных и ЭПИфитных бакте-рии Ваайив sиhtzlz8 494, Рвешiотопав putida М, почвенныхгрибов Trichoderma viride 408, 434, 457, Т. hamatum 431, Т.polysporum 407 (штаммы бактерий ПОлучены из коллекцииНИЛ молекулярной генетики бактерий Белгосуниверситета агрибов рода Тriсhоderma ех Рг. - из лаборатории миколо~института экспериментальной ботаники Академии Наук Бела-

152

В). Тест-организм являлись Botrytis allii Мипп, В..~r:erea Perв., Еивапит sambucinum Fuck., Aspergillus niger и.f'iegh. - микромицеты, наряду с другими организмами ВЫЗЫ-

....~щиегнили луковиц Allium сера L. при хранении. Основнымp~ ~JCритерием оценки антагонистических своиств исследуемыхб8J(терий и почвенных грибов являлось влияние их на вегета-1'fIВIIYЮ и генеративную фУНКЦИИ патогенов.

Бактерии исследуемых штаммов засевали кольцом(г :::= 20 мм) на луковую агариэованную среду (на 1 лдистиллированной воды 800 г лука: 20 г агар-агара, рН = 7,2)IIинкубировали при температуре 28 С.в течение 24 ч.

В центр сформировавшегося бактериального кольцапомещали мицелий тест-объекта (В.. allii, F. ватбистит, А.nigеr) и культивировали при комнатной температуре в тече-ние 15 СУТОК. Учет радиуса колонии, характера роста тест-организмов производили ежедневно, интенсивность их спорооб-разования измеряли через 15 cyтo~ от начала опыта.?о [1].·. ,

На картофельно ...глюковнон агаризированнои среде пометодике, указанной в [2], иаучались взаимоотношения гри-бов рода Тriсhоdеrmа ех Fr. и факультативного паравитаBotrytis cinerea Репе. Производился одновременный и разно-временный (через 4 суток роста тест ..объекта) посев грибов,

Степень угнетения В. сinеrеа учитывали по шкале,предложенной в [8], а интенсивность его спорообравова ..ния - no [1].

Микопаразитическую активность штаммов Тriсhоdеrmаопределяли биологическим методом [4], используя средуТОГО же состава. Влияииепрорастающих спор этих грибовна прорастание спор тест-объекта изучали, при t = +220с(рН = 8,5) по [1, В, 5] (спора считалась проросшей, если рос-тковая трубка была больше половины длины споры).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Проведеиные исследования показали, что из числаIIЗучеввых штаммов бактерий по отношению к грибам В.allii, F. sambucinuт, А.. nigеr высокую степень антагонизмаПРоявили бактерии Васillus 8ubtilis 494. Это выразилось как8 Изменении скорости линейного роста колоний патогенов,Так и в снижении интенсивности спорообразования грибов.Так, максимальные радиусы колоний В. allii, F. sambucinumII А. nigеr составили 30/0, 28,60/0 и 5,1 % соответственно поСравнению с контролем (100-0/0). В кольце бактерий линей-IIыIйрост колоний прекращался на В-и сутки у В. allii, 7-е -

153

Р. ватбисйпит, б-е - А niger, тогда как в контроле - на 7-е10-е и 14-е сутки соответственно (рис. 1, 2, 8). ,,'

N 7000:I~ 6000s-sз:: 5000оа АООО~..о~ 3000;rо

2000с;t:

1000

о3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

Время, сутки

Рис 1. Динамика роста иаолята В. allt! в присутствии бактерий: А) В..8ubtili8494, Б) Р.putida М.

~ 7000~ 6000s-

5000sжо 4000с:е3000..Q

~ 20003'о 1000t;t:

О3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16

время; сутки

Рис. 2. Динамика роста иаолята F.sambuctnuт в присутствии бактерий: А) В.subtiliв 494, Б) Р. putida М

N 7000::е~ 6000ss 5000::rос:: 4000о~.о 3000~3' 2000ос:

1000t:

О3 4 5 6 7 . 8· . ·9 10 11 12 13 14 15 16

время, сyrкИ

Рис. 3. Динамика роста иаолята А nigеr в присутствии бактерий: А) В·8ubtilis 494, Б) Р. putida М

154

Интенсивность спорообразования в присутствии бакте-р"Й В.. subtilis 494 у F. ватбистит уменьmилась почти в48 раз и составила 2,80/0 от контроля (1000/0). Этот покааа-"ель У А. nigеr достиг 480/0 (уменьшение в 2,1 раза). Спороо-бразование у В. allii в опыте с В. 8ubtilis 494 подавлялооьна1000/0 (РИСо 4).

2

1

80о 20 40 10060

.Контроль шд. niger I:JF. sambuсiпum(макроконидии)ШВ.·аllii

Рис. 4. Интенсивность спорообразования (I) изучаемых грибов в присутствиибактерий 1 - В. 8ubtilis 494, 2 - Р. putida М

Бактерии Р. putida М проявил и значительно меньшуюстепень антагонизма в отношении испытанных фитопатоге-нов. Имело место лишь снижение скоростизровга. колонийВ. allii и А. niger, ане полная его остановка {рис. 1,3).Скорость роста колонии F. sambucinuт по сравнению с кон-тролем не измениласъ (рис. 2).

Интенсивность споруляции изучаемых микромицетоввПрисутствии бактерий Р. putida М была снижена в 10.Рf!з.;уВ. allii, в 5,1 и 1,6 раза у Р. sambucinuт и А. nigеr осответо-Твенно (рис. 4).

"Полученные результаты можно объяснить различнымимеха~измами антимикробного действия изучаемых бакте-Рий [6].:·Грибы-тест-объекты проявили высокую чувстви-Тельность к антибиотику, продуцируемому бактериями В.8ubtilis 494. Статический эффект оидерофорной природы,IJЫзываемый бактериями Р. putida М, наиболее четко выра-jftеи в замедлении вегетативного роста В. allii. Изъятие же-JIеза из среды отразилось на снижении генеративных спосо-б1l0стей всех тест-организмов.

Установлено, что колонии всех исследуемых штаммовТriсhоdеrmа нарастают на поверхность колонии В. сinеrеа какПРи одновременном, так и разновременном посеве, проявляяРазличную степень фунгицидного парааитического антаго низ-~8... Скорость угнетения В. сinеrеа не одинакова у разных

155

штаммов. Наиболее активными среди них были Т. viride 408484, 457, То hаmаtum 481. Полное-варастание колонии тес 'объе u икоф 'l'..кта колониен м ила при одновременном ПосеВеТ. hаmatum 431 отмечалось за 4,5 суток, у Т. uiтide 408, 4аI457 - за 5 СУТОК. При равновременном посеве подобный 'фект У Т. hаmatum 431 наблюдался за 6, а у Т. uiride 408, 4~'457 - за 7 СУТОК. При одновременном посеве грибов омерТВе:иие мицелия тест-объекта начинается через 8 суток, что выIа а,жается в потемнении и сжатии содержимого клеток (штs.ммъТ. uiride 408, 434, 457, T.hamatY11J. 481),: Антагонизм ГРи60~Т. viride 408, 484, 457, Т. hamatum 481 проявляется IIв ПОдав ..лении склероциеобразоваиия у Во сinerеа как при оДНовремен..ном, так и разновременн~~ посевах (штаммы Т. viride 408,Т. hаmаtum 481). Интенсивность спорообразования тест~объект8.на 15-е сутки снижена по сравнению с контролем в 85 раз(Т. hamatum 431), 28,8 раза (Т. viride 484), в 17,5 раза (Т. viride457), 2,5 раза (Т. viride 408). Степень угнетения тест-объектагрибами Т. hamatum 481, Т. viride 408, 457, 484 составляла2-8 балла. Гриб Т. polysporum 407 проявил низкую степеньантагонистической активности в отношении тест-объекта. Пол.ного зарастания колонии В. сinerеа им не было и на 17-е сутки.Склероциеобразование тест-объекта не ингибировалооь. Отме..чена стимуляция спороношения В. сinerеа в 1,4-1,5 раза.

Изучаемые штаммы грибов рода Trichoderma, за ИСК-

лючением Т. polysporum 407, показали высокую микопарааи-тическую активность на склероциях В. сinеrеа. Это выража-лось в сплошном обрастании последних мицелием микофи-лов и полном подавлении жизнеспособности склероциев за10 СУТОК. Частичное обрастание склероциев тест-объектамицелием Т. polysporum 407 незначительно снижало их жи-знеспособность как при малой (50 конидий в 0,01 мл воды),так и при большой (200 конидий в 0,01 мл воды) споровойнагрузке (табл. 1).

Исследования непосредственного влияния прораетаю-щих спор грибов штаммов Тriсhоdеrmа на прорастание спорВ. cinerea' показали, что при заданной температуре актив-ность штаммов составила от 2 доВ' баллов. Конидни штам-мов Т. viride··484 и Т. viride:457 ингибвроваяи прорастакиеконидий тест-объекта на 93,1 0/0, 'проявляя максимальнуюак:гивность в 3 балла. Споры других изученных грибов родаTnchoderma подавляли прорастание спор ·В. сinеrеа 11&

62,0-89, 70/0 (активность 2 балла).

156

Таблица 1ОJ1редеJIевиестепени :микопаразитической активности у штаммов1'riChOderтaбиологическим методом

~ Штамм Титр ковидяааьвой суспензии в 0,01 мл50 100 200

""",..---Т..virtde 408 ++ ++ ++~ Т. vtride 434 + ++ ++~ Т. viride 457 + ++ ++~ Т. hamatum 481 ++ ++ ++~T. polysporum 407 + + +•.•••........ " "I1римечание. + - частичное обрастание склероциев микопаравитом и

снижение их жизнеспособности."++" - сплошное обрастание. еклероциев микопаревитом иполное подавление их жизнеспособности.

Таким образом, исследованные бактерии и почвенныегрибы проявляют разную степень антагонизма к изученнымнами возбудителям гнилей лука репчатого. Наиболее актив-ные штаммы антагонистов могут стать интересными объек-тами исследований по разработке экологически безопасныхмер борьбы С указанными микромицетами в системе защитырастений.

Авторы выражают благодарность сотрудникам НИЛмолекулярной генетики бактерий БГУ и лаборатории мико-логии ИЗБ АН Беларуси за представленные для работыштаммы бактерий и грибов.

Литература

1. Методы экспериментальной .микодогии / Дудка· И.А., Вассер С.П.,ЭллавсICaЯ И.А. и др.- :Киев, 1982. "

2. Бабушкина И.Н. / / Микология и фитопатология.- 1974.- Т. В, М5:-С.395-401.

3. Руданов о.л. Микофилъвые грибы, их биология и практичеокое аначе-вие.- М., 1981.

4. Лихачев А.Н., Ваоин В.Б. / / Микология и фитопатология.- 1975.-Т. 9, М3.- с. 248-250.

5. Лихачев А.Н., Басив В.Б. /1 МИКОЛОГИЯ и фитопатология.- 1970.-Т. 4, M5.~ с. 472-473.

6. Максимова Н.П., Поликсевова В.Д., Лысак В.В. / / Экояого-аковомичес-кие основы усовершенствования интегрированных систем защиты рвоте-ВИЙ: отвредителей, болезней и сорняков: Тез. докл. вауч.чгроиав. конф.,посвящ. 25-летию БЕЛНИИЗР. Ч. 1.- Минок, 1996.--- С.147-149.

157