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UNIVERSIDAD DE CHILE
Facultad de Medicina
Escuela de Kinesiología
“EFECTO DE Mangifera indica SOBRE LA
HIPERGLICEMIA AGUDA EN RATAS
NORMOGLICEMICAS”
Adrián García Moreira
Rafael Ignacio Rocha González.
2005
“EFECTO DE MANGIFERA INDICA SOBRE LA HIPERGLICEMIA AGUDA
EN RATAS NORMOGLICEMICAS”
Tesis entregada a la
UNIVERSIDAD DE CHILE En cumplimiento parcial de los requisitos
para optar al grado de LICENCIADO EN KINESIOLOGÍA
FACULTAD DE MEDICINA
Por
Adrián García Moreira
Rafael Ignacio Rocha González
2005
DIRECTOR DE TESIS:
Sandro Edgardo Bustamante Delgado.
PATROCINADOR:
Sylvia Ortiz Zúñiga
FACULTAD DE MEDICINA
UNIVERSIDAD DE CHILE
INFIRME DE APROBACION
TESIS DE LICENCIATURA
Se informa a la Escuela de Kinesiología de la Facultad de Medicina que la Tesis de
Licenciatura presentada por los candidatos:
Adrián García Moreira
Rafael Ignacio Rocha González
Ha sido aprobada por la Comisión Informante de Tesis como requisito para optar al
grado de Licenciado en Kinesiología, en el examen de defensa de Tesis rendido el
21 de Diciembre del 2005.
DIRECTOR DE TESIS
Sandro Bustamante Delgado ……………………….
COMISION INFORMANTE DE TESIS
Nombre:………………………………………….…. Firma:……………………….
Nombre:………………………………………….…. Firma:……………………….
Nombre:………………………………………….…. Firma:……………………….
Nombre:………………………………………….…. Firma:……………………….
A mi familia y especialmente a mis padres
por educarme con tanta paciencia, comprensión, dedicación y amor.
Adrián García.
A mis padres, por apoyarme
incondicionalmente en todo y por creer en mí.
Rafael Rocha.
AGRADECIMIENTOS
A Don Juan por su ayuda y asistencia desinteresada,
a nuestro tutor por guiarnos y soportarnos constantemente,
al Dr. Francisco Baldor por sus revisiones y consejos,
a Don Victor Díaz (Ph.D.) por su incomparable análisis estadístico,
a mi suegra Mari por su búsqueda y cooperación en el trabajo,
a mi novia Sol por apoyarme.
A todos aquellos quienes nos colaboraron en el
desarrollo de este trabajo, como mi tia Gabriela y mi tio
Roberto y mi polola Fernanda por su apoyo.
ÍNDICE
RESUMEN.................................................................................................................... i
ABSTRAC ………………………………………………………………………..…. ii
ABREVIATURAS ……….………………………………………………………... . iii
INTRODUCCIÓN ……………………………………………………………………1
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA …………………………………………… 2
Pregunta de investigación……………………..………..……………2
Justificación………………………………………………………..………..… 2
Viabilidad……………………………………………………………………… 2
REVISION BIBLIOGRAFICA ………………………….…………………………... 3
Regulación de la Glicemia ………………………..……………………….… 3
Importancia de la regulación de la Glicemia ………………………………… 4
Diabetes mellitus ……………………………………………………………. 5
- Diabetes mellitus tipo 1 ………………………….………………………… 5
- Diabetes mellitus tipo 2 ………………………….……………………….. 9
Tratamiento de la Diabetes …………………………………………………. 10
Mangifera indica ……………………………………………………………. 12
OBJETIVOS ………………………………………………………………………… 15
HIPÓTESIS …………………………………………………………………………. 15
MATERIAL Y MÉTODO ………………………………………………..………… 15
Método …………………………………………………………………………… 15
Población de estudio …………………………………… ……………..……. 15
Tipo de Estudio ………………………………………… …………….……. 15
Diseño de Investigación ………………………………… … ………………. 16
Variables ………………………………………………… … ……………… 16
Muestra ………………………………………………………… ……………….. 16
Diseño Experimental ……………………………………… … ……………. 17
Materiales ………………………………………………………… …………….. 17
Recurso físico ………………………………………………………………... 17
Animales ……………………………………………………………………. 17
Procedimiento …………………………………………………………… ……… 18
Preparación y administración de la glucosa y el extracto ……………….…... 18
Determinación de la glicemia ………………………………………………. 18
Descripción del procedimiento ……………………………………………….19
Análisis estadístico …………………………………………………….....…. 19
RESULTADOS …………………………………………………………………….... 20
DISCUSION ………………………………………………………………………..... 21
CONCLUSION ……………………………………………………………………... 23
PROYECCIONES …………………………………………………………………... 24
REFERENCIAS Y BIBLIOGRAFIA..…………………………………………….... 25
ANEXO 1 ……………………………………………………………………………. 28
ANEXO 2 ……………………………………………………………………………. 29
ANEXO 3 ……………………………………………………………………………. 30
ANEXO 4 ………………………………………………………………………….... 31
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Evolución temporal de los niveles plasmáticos de glucosa ……………..…. 19
Figura 2. Variación porcentual de los distintos grupos respecto al Grupo (0) en T30….29
Figura 3. Variación porcentual de los distintos grupos con respecto al Grupo (0)
en los distintos tiempos………………………………………….…………...29
LISTA DE TABLAS
Tabla 1. Valores de los promedios y desviaciones estándar de los distintos
grupos a los distintos tiempos ……………………..………….……………30
RESUMEN
La Mangifera indica (Anacardiacea) ha sido utilizada ampliamente en la etnomedicina de los países
de zonas tropicales y subtropicales con diferentes indicaciones de uso, tanto con los extractos
acuosos de sus partes aéreas como de las partes leñosas. Se ha reportado el uso de las decocciones de
hojas para el tratamiento de la diabetes y del extracto acuoso de sus hojas por su acción
hipoglicemiante. No obstante, los resultados son contradictorios.
El extracto etanólico de las hojas ha mostrado ser hipoglicémico, pero no el extracto acuoso de las
hojas. Por otra parte, en ratas diabéticas tipo 1, el extracto acuoso no muestra ser activo.
La hiperglicemia aguda y crónica provoca múltiples efectos deleterios como hipertensión, aumento
del riesgo de infarto agudo del miocardio, enfermedad renal terminal, retinopatía diabética y
ceguera, entre otras.
Los distintos tratamientos farmacológicos para el control de la glicemia demandan control y
supervisión médica para el éxito del tratamiento en el paciente diabético y no están exentos de
reacciones adversas. La utilización de un fármaco de origen natural (fitofármaco) tendría ventajas
respecto de los fármacos alopáticos actuales en el tratamiento de la diabetes, debido a que los
primeros tienen igual eficacia y por lo general poseen incidencia de reacciones adversas y de menor
severidad que los segundos.
El objetivo de esta tesis fue determinar las propiedades antihiperglicemiantes del liofilizado del
extracto acuoso de alta temperatura de la corteza del tronco de Mangifera indica (EMI), en ratas
hiperglicémicas agudas. Determinamos el efecto antihiperglicemiante utilizando tres
concentraciones (50, 250 y 750 mg/Kg/ml.) de EMI en un modelo de hiperglicemia aguda in vivo en
ratas normoglicémicas. Se midió la evolución temporal de la glicemia tras la administración de EMI
(30 minutos antes de la glucosa) por vo, utilizando un sistema de bioamperometría.
Nuestros resultados mostraron que el tratamiento con EMI (50 mg/Kg) presenta una actividad
antihiperglicemiante significativa (p<0,05, 90,25 mg/dL) a los 90 minutos después de administrada
la glucosa, lo que no sucedió con los Grupos 250 y 750 (107,25 98,5 mg/dL respectivamente). El
Grupo 250 tuvo la menor actividad antihipergrlicemiante.
Nosotros concluimos que el EMI tiene propiedades antihiperglicemiantes, y que su acción no tiene
un comportamiento dosis-dependiente en un modelo de hiperglicemia aguda in vivo en ratas
normoglicémicas.
Palabras claves: Mangifera indica, diabetes mellitus.
ABSTRAC
The Mangifera indica (Anacardiacea) has been widely used in the etnomedicine of countries from
tropical and subtropical zones with different indications of use, with the aqueous extracts of its aerial
parts as well as its bark. The use of the boiling of its leaves for the treatment of the diabetes has been
reported. In addition, the aqueous of its leaves has been reported to have hypoglycemic action.
However, the results are contradictory in relation to the hypoglycemic capacity in the treatment of
diabetes. The ethanol extract of the leaves has shown to have hypoglycemic action, but not the
aqueous extract of the leaves. On the other hand, in diabetic rats type 1, the aqueous extract does not
show to be active.
The different pharmacological treatments for the control of glycemia demand control and medical
supervision for the success of the treatment in diabetic patients, not being free from adverse
reactions. The use of a natural origin drug would have advantages over present allopathic drugs in
the treatment of diabetes, taking into cosideration that natural origin drugs are as effectiveness as
allopathic drugs and generally have minor incidence of adverse reactions and less severity.
The objective of this thesis was to determine the antihyperglycemic properties of the lyophilization
of the aqueous extract of high temperature of the crust of the trunk of Mangifera indica (EMI) in
acute hyperglycemic rats. We determined the antihyperglycemic effect using three concentrations
(50, 250 and 750 mg/Kg/ml.) of EMI in an acute model of hyperglycemia in live normoglycemic
rats. The temporary evolution of glycemia mediated after the administration of EMI (30 minutes
before the glucose) orally, using a bioamperometry system. Our results indicated that he treatment
with EMI (50 mg/Kg) demonstrated to present a significant antihyperglycemic activity (p<0,05,
90,25 mg/dL) 90 minutes after the glucose was adminitered. Groups 250 and 750 did not have same
antihyperglycemic activity (107,25 and 98,5 mg/dL respectively). Group 250 had the lowest
antihyperglycemic activity. We conclude that EMI have antihyperglycemic properties and his action
does not have a dose–effect behavior in a hyperglycemia acute model in live normoglycemic rats.
Key words: Mangifera indica, diabetes mellitus.
ABREVIATURAS
ANOVA: Análisis de varianza.
DM-1: Diabetes mellitus insulino dependiente.
DM-2: Diabetes mellitus no insulino dependiente.
EMI: Extracto seco liofilizado de la corteza de Mangifera indica.
INTRODUCCIÓN
La diabetes es un conocido síndrome endocrino metabólico que, debido a las lesiones
tisulares que provoca, conlleva a complicaciones tales como: infarto de miocardio, ictus,
enfermedad renal terminal, retinopatía diabética y ceguera entre varias otras (Guyton
and Hall, 2002).
La Mangifera indica, familia Anacardiacea, contiene mangiferina, un componente del
cual se tienen reportes tanto como hipoglicemiante (Aderibigbe y cols, 1999, 2001),
antiviral (Zheng and Lu, 1990; Zhu y cols, 1993; Yoosook y cols, 2000) e inmuno
moduladora (Guha y cols, 1996; Leiro y cols, 2004).
Existen resultados contradictorios en relación a la capacidad antihiperglicemiante del
extracto en el tratamiento de la diabetes. El extracto etanólico de las hojas ha mostrado
ser hipoglicemiante (Sharma y cols, 1977; Aderibidge y cols, 2001), pero no el extracto
acuoso de las hojas (Teixeira y cols, 1998). En ratas diabéticas tipo 1, el extracto acuoso
no muestra ser activo (Aderibidge y cols, 1999; 2001).
En vista de los datos expuestos y teniendo en cuenta que existen pacientes que poseen
factores de riesgo tales como sobre peso y resistencia a la insulina pero aún no son
candidatos al tratamiento farmacológico, es de interés poder determinar si el liofilizado
del extracto acuoso de alta temperatura de la corteza del tronco de M. indica, posee
propiedades antihiperglicemiantes, ya que si se ha demostrado la actividad
antihiperglicemiante del extracto etanólico de las hojas, es probable que el liofilizado
del extracto acuoso de la corteza pueda presentar efectos sobre el curso temporal de los
niveles plasmáticos de glucosa en ratas hiperglicémicas agudas.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
Pregunta de Investigación
¿Es el extracto seco liofilizado de la corteza de Mangifera indica capaz de evitar el alza
transciente de glicemia en ratas normales después de una carga de glucosa?
Justificación:
Debido a los conocidos efectos deletéreos que provocan los altos niveles de glucosa en
sangre, la calidad de vida se ve disminuida, por lo que nos resulta de interés buscar
distintas alternativas farmacológicas al tratamiento de estas irregularidades.
Viabilidad:
La realización de este estudio se vio facilitada debido a que se efectuó en el Laboratorio
de Farmacodinamia y Fitofarmacología de la Facultad de Medicina de la Universidad de
Chile, recinto que cuenta con los implementos necesarios y a disposición de nuestro
proyecto. Sumado a la disponibilidad de recursos, cabe destacar, la colaboración y
disposición de profesionales competentes y con gran experiencia en materias
relacionadas al presente estudio.
REVISION BIBLIOGRÁFICA
Regulación de la Glicemia:
La concentración de glucosa plasmática de una persona sana está sometida a un
riguroso control. Habitualmente oscila entre 80 y 90 mg/dL de sangre por la mañana
antes del desayuno. Esta concentración se eleva hasta 120 a 140 mg/dL en la primera
hora después de las comidas, si bien los sistemas de retroalimentación devuelven la
glicemia de inmediato a sus valores habituales, casi siempre a las 2 horas desde la
última absorción de carbohidratos. En cambio, en el ayuno prolongado, la
glucogenólisis y la gluconeogénesis hepática suministran la glucosa que se requiere para
el mantenimiento de los valores en ayunas (Guyton and Hall, 2002).
Los mecanismos involucrados en este control riguroso son los siguientes:
1. El hígado funciona como un importante sistema amortiguador de glicemia.
Posterior a la ingesta de alimentos, el aumento de la concentración de glucosa
plasmática al sobrepasar un nivel crítico, induce un alza en la liberación de
insulina, lo que hace que hasta dos tercios de la glucosa absorbida sea
almacenada en el hígado en forma de glucógeno. Luego, en las horas sucesivas,
cuando la concentración de la glucosa en la sangre y la tasa de secreción de
insulina empiezan a disminuir, el hígado devuelve glucosa a la sangre. De esta
manera, el hígado reduce las fluctuaciones de la glicemia, hasta en un tercio de
lo que sucedería en caso contrario. De hecho, los enfermos con una hepatopatía
grave no logran mantener la glicemia dentro de estos límites tan estrechos.
2. La insulina y el glucagón operan como sistemas retroactivos esenciales para
mantener la glicemia dentro de límites normales. Cuando la concentración de
glucosa aumenta, se secreta insulina; a su vez, la insulina reduce la glicemia
hasta valores normales. En cambio, el descenso de la glicemia estimula la
secreción de glucagón; éste actúa de forma contraria y aumenta la glicemia en
las condiciones habituales. El mecanismo retroactivo de la insulina tiene
mucha más importancia que el del glucagón, pero en caso de ayuno o de
utilización exagerada de la glucosa durante el ejercicio u otras situaciones de
estrés, también se recurre al mecanismo del glucagón.
3. Además, en las hipoglicemias graves, el efecto directo del descenso de la
glicemia en el hipotálamo estimula el sistema nervioso simpático. Por su parte,
la adrenalina, secretada por glándulas suprarrenales, continúa propiciando la
liberación de glucosa por el hígado. De esta manera se evita una hipoglicemia
grave.
4. Por último, durante unas horas o días, tanto la hormona de crecimiento como el
cortisol se liberan cuando existe una hipoglicemia prolongada; estas dos
hormonas reducen la tasa de utilización de la glucosa por casi todas las células
del organismo, que empiezan, en cambio, a consumir más lípidos. De este modo,
también se ayuda a la normalización de la glicemia.
Importancia de la Regulación de la Glicemia:
Cabe preguntarse: ¿por qué es tan importante mantener la glicemia constante, sobre todo
si la mayoría de los tejidos pueden pasar a la utilización de grasas y proteínas con fines
energéticos cuando falta glucosa? La respuesta radica en el hecho que la glucosa es el
único nutriente que utilizan de forma habitual el encéfalo, la retina y el epitelio germinal
de gónadas en cantidad suficiente para disponer de energía. Por eso, resulta esencial
mantener la glicemia dentro de valores fisiológicos (Guyton and Hall, 2001).
Casi toda la glucosa formada por gluconeogénesis durante el período interprandrial se
destina al metabolismo encefálico. De hecho, conviene que el páncreas no secrete insulina
en esta fase ya que, de otro modo, las escasas cantidades de glucosa disponibles pasarían
al músculo y a otros tejidos periféricos y privarían al encéfalo de su fuente de energía. Un
valor elevado de glicemia, promueve al menos cuatro efectos deletéreos sobre el
organismo: en primer lugar, la glucosa puede ejercer presión osmótica intensa en el
líquido extracelular, y si aumentara hasta valores exagerados, provocaría una
deshidratación celular llamativa. En segundo lugar, la concentración exagerada de glucosa
en la sangre induce una pérdida de la misma por la orina. En tercer lugar esta pérdida
causa una diuresis osmótica renal que disminuye los líquidos y electrolitos orgánicos. En
cuarto lugar, el incremento a largo plazo de la glicemia puede dañar muchos tejidos, sobre
todo, los vasos sanguíneos. Las lesiones vasculares, junto con una diabetes mellitus no
controlada, aumentan el riesgo de ataques al corazón, ictus, enfermedad renal terminal y
ceguera (Guyton and Hall, 2001).
Diabetes Mellitus:
La diabetes mellitus es un síndrome endocrino metabólico donde se altera el
metabolismo de los hidratos de carbono, grasas y proteínas, bien por falta de secreción
de insulina o por disminución de la sensibilidad tisular a esta hormona. Se conocen dos
grandes tipos de diabetes mellitus:
1.- La diabetes mellitus de tipo 1, también denominada diabetes mellitus
insulinodependiente (DMID), debida a una falta de secreción de insulina.
La lesión de las células beta del páncreas, o las enfermedades que alteran la
producción de insulina, pueden ocasionar una diabetes de tipo I. Las infecciones
víricas y los trastornos autoinmunitarios pueden contribuir a destruir las células
beta de muchos enfermos con diabetes de tipo 1. La herencia también desempeña
una función primordial que establece la vulnerabilidad de estas células a su
destrucción. En algunos casos, puede existir una tendencia hereditaria a la
degeneración de las células beta sin ninguna infección vírica ni enfermedad
autoinmunitaria (Guyton and Hall, 2001).
Suele empezar a los 14 años de edad y, por esta razón, también se denomina
diabetes mellitus juvenil. La diabetes de tipo 1 puede empezar de manera muy
brusca, en tan solo unos días o semanas, con tres secuelas esenciales: 1)
hiperglicemia, 2) aumento de la utilización de las grasas con fines energéticos y
de la síntesis de colesterol en el hígado y 3) reducción de las proteínas orgánicas.
La falta de insulina reduce la eficacia en la utilización periférica de la glucosa
y aumenta la producción de ésta, con lo que sus valores plasmáticos suben
hasta 300 a 1200 mg/dL. El incremento de la glucosa plasmática ejerce
numerosos efectos por todo el organismo (Guyton and Hall, 2001).
Características de la diabetes mellitus tipo 1:
- Pérdida de glucosa por la orina (Glucosuria):
La elevación de la glicemia hace que se filtre más glucosa al túbulo renal de la que
puede reabsorberse; el exceso de glucosa se elimina con la orina. Así sucede, de
ordinario, cuando la glicemia aumenta por encima de 180 mg/dL, valor que se
denomina «umbral» sanguíneo para la aparición de glucosa en la orina. Si la
glicemia se eleva entre 300 a 500 mg/dL —valores habituales entre las
personas con diabetes grave no tratada—, no es raro que se pierdan 100 o más
gramos de glucosa todos los días por la orina (Guyton and Hall, 2001).
- Deshidratación:
Niveles altos de glicemia (a veces, hasta de 8 a 10 veces mayores que las de un
enfermo con diabetes grave no tratada) pueden ocasionar una deshidratación
celular grave. Esto sucede sólo en parte porque la glucosa no difunde con
facilidad por los poros de la membrana celular y porque el incremento de la
presión osmótica del líquido extracelular provoca la salida de agua fuera de la
célula.
Además del efecto deshidratador celular directo del exceso de glucosa, la
pérdida de glucosa en la orina induce una diuresis osmótica. Esto significa
que el efecto osmótico de la glucosa en el túbulo renal reduce mucho la
reabsorción tubular de líquidos. El resultado neto es la pérdida masiva de
líquidos con la orina, la deshidratación consiguiente del compartimiento
extracelular y, por último, la deshidratación compensadora del compartimiento
intracelular. Los síntomas clásicos de la diabetes son, por tanto, poliuria (elimi-
nación excesiva de orina), deshidratación intra y extracelular y polidipsia
(aumento de la sed) (Guyton and Hall, 2001).
- Lesiones tisulares:
Si la glicemia no se controla bien durante períodos prolongados, los vasos
sanguíneos de muchos tejidos del organismo empiezan a alterarse y experi-
mentan cambios estructurales que determinan un aporte insuficiente de sangre a
los tejidos en la diabetes mellitus. A su vez, todo ello incrementa el riesgo de
infarto de miocardio, ictus, enfermedad renal terminal, retinopatía y ceguera, así
como isquemia y gangrena en las extremidades.
La hiperglicemia crónica también daña muchos otros tejidos. Por ejemplo la
neuropatía periférica (función anómala de los nervios periféricos) y las alteraciones
del sistema nervioso autónomo representan complicaciones frecuentes de la diabetes
mellitus crónica no controlada. Estas alteraciones del control vesical, disminución
de la sensibilidad en los miembros y otros síntomas de daño de los nervios
periféricos.
Los mecanismos exactos que inducen las lesiones tisulares de la diabetes no se
conocen del todo, pero probablemente obedecen a numerosos efectos que la
hiperglicemia y otras anomalías metabólicas ejercen sobre las proteínas de las
células endoteliales y del músculo liso vascular, así como de otros tejidos. Además,
los enfermos con diabetes sufren a menudo hipertensión, secundaria a la lesión
renal, y aterosclerosis, secundaria al metabolismo anómalo de los lípidos, que
multiplican el daño tisular causado por la hiperglicemia.
- Reducción de las proteínas del organismo:
La falta del uso de la glucosa con fines energéticos determina una mayor utilización
y un menor almacenamiento de las proteínas y de la grasa. Por tanto, una persona
con una diabetes, no tratada, sufre un adelgazamiento rápido y astenia (cansancio
físico), aunque consuma grandes cantidades de alimento (polifagia). Si no se aplica
tratamiento, estas alteraciones metabólicas determinan una grave atrofia de los
tejidos corporales y la muerte a las pocas semanas. (Guyton and Hall, 2001)
2. La diabetes mellitus de tipo 2, también denominada diabetes mellitus no
insulinodependiente
(DMNID) está producida por una sensibilidad muy mermada de los tejidos efectores
a las acciones metabólicas de la insulina, estado conocido como resistencia a la
insulina. Este síndrome, al igual que la diabetes de tipo 1, se acompaña de
numerosas alteraciones metabólicas, pero los cetoácidos no suelen elevarse.
La diabetes tipo 2 es mucho más común que la de tipo 1, y supone del 80% al 90%
de todos los casos de diabetes. En general, empieza a partir de los 40 años, a
menudo en la década de los 50 a los 60, y se instaura de manera gradual. Por eso, a
este síndrome se le conoce como diabetes del adulto (Guyton and Hall, 2001).
Características de la diabetes mellitus tipo 2:
- Aumento de la insulina plasmática:
A diferencia de la tipo 1, la diabetes de tipo 2 se asocia con un incremento de la
insulina plasmática. Esto se debe a una respuesta compensadora de las células beta
del páncreas por el descenso en la utilización y depósito de los carbohidratos y el
incremento consiguiente de la glicemia. No obstante, incluso estas cantidades
mayores de insulina no bastan para mantener normal la regulación de la glucosa por
la falta de sensibilidad tan considerable de los tejidos periféricos a la insulina. El
resultado es una hiperglicemia discreta tras la ingestión de carbohidratos en las
primeras fases de la enfermedad. En las últimas etapas de la diabetes de tipo 2, las
células beta del páncreas se «agotan» y no son capaces de producir la insulina
suficiente para evitar una hiperglicemia más intensa, sobre todo tras ingerir
una comida rica en carbohidratos (Guyton and Hall, 2001).
- La mayoría de los enfermos son obesos:
La resistencia a la insulina es secundaria, casi siempre, a la obesidad. Sin embargo,
los mecanismos que vinculan la obesidad con la resistencia a la insulina se conocen
mal. En algunos estudios, se sugiere que el número de receptores, sobre todo del
músculo esquelético, hígado y tejido adiposo, de los sujetos obesos es menor que el
de los sujetos delgados. Sin embargo, casi toda la resistencia a la insulina parece
obedecer a alteraciones de las vías señalizadoras que vinculan la activación de los
receptores con los múltiples efectos celulares.
Ciertas personas obesas, pese a una resistencia a la insulina considerable y aumentos
posprandiales de la glicemia superiores a los normales, jamás sufren una diabetes
mellitus; al parecer, el páncreas de estas personas produce la insulina suficiente para
evitar anomalías graves del metabolismo de la glucosa. No obstante, el páncreas de
otros se va agotando poco a poco tras secretar grandes cantidades de insulina y el
enfermo presenta una diabetes mellitus florida.
En muchos casos, la diabetes de tipo 2 responde muy bien al tratamiento, por lo
menos en sus etapas iniciales, que se basa en una restricción calórica y en el
adelgazamiento, y no es necesario administrar insulina por vía exógena. Los
medicamentos que aumentan la sensibilidad a la insulina, como las tiazolidindionas
y la metformina, o aquellas que determinan una liberación adicional de insulina por
el páncreas, como las sulfonilureas, son también útiles. No obstante, en las fases
finales, a menudo hay que administrar insulina para controlar la glucosa plasmática.
(Guyton and Hall, 2001)
Tratamiento de la Diabetes:
La teoría del tratamiento de la diabetes mellitus de tipo 1 se basa en administrar la
insulina suficiente para que el metabolismo de los carbohidratos, lipídico y proteico del
enfermo se normalice lo más posible. La insulina se expende en varias formas. La
insulina «regular» se caracteriza por una duración de sus efectos de 3 a 8 horas,
mientras que otras formas de insulina (precipitadas con zinc o con diversos
derivados proteicos) se absorben lentamente desde el lugar de inyección y sus
efectos se prolongan hasta 10 a 48 horas. En general, un paciente con diabetes de
tipo 1 grave recibe una sola dosis de una de las insulinas de acción prolongada al
día para aumentar el metabolismo de los carbohidratos general durante el día.
Luego, se inyectan cantidades suplementarias de insulina regular durante el día en
los momentos en que la glicemia tiende a elevarse en exceso, como sucede en las
comidas. Así pues, cada paciente recibe una pauta personalizada de tratamiento.
La dieta y el ejercicio se recomiendan, a menudo, a los enfermos con diabetes tipo
2, con la idea de que adelgacen y de que reviertan la resistencia a la insulina. Si
estas medidas fracasan, se pueden administrar fármacos que aumentan la
sensibilidad a la insulina o estimulen la producción de insulina por el páncreas.
Sin embargo, muchos enfermos precisan insulina por vía exógena para regular la
glicemia.
En otras épocas, la insulina utilizada para el tratamiento provenía de páncreas de
animales. Sin embargo, desde hace poco, se produce insulina humana mediante
técnicas de recombinación del ADN, porque algunos enfermos presentaban
reacciones inmunitarias y alérgicas frente a la insulina animal, que limitaba su
eficiencia (Guyton and Hall, 2001).
- Relación entre el tratamiento y la arteriosclerosis:
Los enfermos diabéticos presentan aterosclerosis, arteriosclerosis, enfermedad coronaria
grave y numerosas lesiones microcirculatorias con mucha más frecuencia que las
personas sanas, sobre todo por la elevación del colesterol y de otros lípidos en sangre
circulante. De hecho, aquellos con una diabetes relativamente mal controlada en la
infancia tienen más probabilidad de fallecer por cardiopatía en los albores de la vida
adulta.
La tendencia actual es que el enfermo siga una dieta con un contenido casi normal de
carbohidratos y reciba insulina en cantidades suficientes para metabolizar dichos
hidratos. Así se reduce la tasa del metabolismo lipídico y también las cifras elevadas de
colesterol en la sangre.
Debido a que las complicaciones de la diabetes -como aterosclerosis, aumento de las
infecciones, retinopatía diabética, cataratas, hipertensión y enfermedad renal crónica- se
relacionan íntimamente con los valores sanguíneos de los lípidos y de la glucosa, la
mayoría de los médicos también administran fármacos hipolipemiantes para evitar estas
alteraciones. (Guyton and Hall, 2001)
Mangifera indica:
En numerosos países, las plantas medicinales poseen un gran impacto cultural y
económico. Los métodos de la Medicina Tradicional se pasan de generación en
generación, heredando claves importantes respecto de la preparación de los remedios
derivados de plantas y, especificando la parte a utilizar para el logro del beneficio
medicinal. La Mangifera indica L. (Anacardiaceae) es un árbol muy común en los
países de las regiones tropicales y subtropicales, ampliamente utilizado en la medicina
tradicional. Para estos efectos, tanto las partes aéreas como las leñosas de algunas
especies de Anacardiaceae se utilizan en extractos acuosos o alcohólicos.
El uso etnomédico de las Anacardiaceae está bien documentado; se utilizan extractos
acuosos calientes de la corteza como antidiarreicos y para tratar la disentería (Le Grand,
1989; Akendengue, 1992; Coe and Anderson, 1997). Se ha descrito la utilidad de la
administración oral de los extractos acuosos de sus tallos leñosos para el tratamiento del
dolor de estómago (Jamir, 1990). Del mismo modo, se describe que la ingestión de las
hojas (Wilbert y cols, 1991) o de su extracto acuoso (Morton, 1968) son de utilidad
como antidiarreico y contra la disentería respectivamente.
Se han reportado efectos cardiovasculares con extractos de sus hojas, como
antihipertensivo (Morton, 1968) y para aliviar la angina (Le Grand, 1989). Los
extractos metanólicos de las semillas han demostrado ser biológicamente activos en
pruebas antinflamatorias de edema pedal inducido por carragenina, serotonina,
bradikinina y prostaglandinas (Das, 1989). Los extractos alcohólicos de la corteza del
tronco inducen actividad espasmolítica en íleon de cuye (Kambu y cols, 1990),
mostrando una significativa reducción de la actividad inducida por acetilcolina, con un
orden de potencia de un 87% a 34% de acuerdo a la naturaleza del alcohol utilizado en
la extracción (extracto en alcohol isopentanílico, butanólico y metanólico). El extracto
butanólico también ha mostrado ser efectivo en reducir la contracción ileal inducida por
soluciones despolarizantes (70 mM a 100 mM K+) (Kambu y cols, 1990).
Los extractos acuosos de la corteza han mostrado capacidad antioxidante en diversos
modelos experimentales, en parte por la gran cantidad de polifenoles presentes en esta
fracción acuosa, el más abundante y más largamente estudiado en forma pura es la
mangiferina (Anexo 1).
El proceso de extracción separa compuestos polares que están presentes en algunas de
las fracciones, pero no en otras, por la naturaleza de los solventes utilizados
(Samuelsson, 1991). Como los extractos acuosos son difíciles de dosificar, pueden ser
diluidos pero no concentrados con facilidad, siempre se tiende a utilizar alguna forma
sólida del extracto. La más común es la liofilización de extractos acuosos, ya sean
extraídos a alta o baja temperatura.
Trabajos preliminares en el Laboratorio de Farmacodinamia y Fitofarmacología han
mostrado que el liofilizado del extracto acuoso de alta temperatura de la corteza del
tronco de M. indica (EMI), desarrollado por el Centro de Química Farmacéutica (CQF,
1998), posee propiedades farmacológicas interesantes, ya que exhibe mayor potencia
comparado a su extracto madre (acuoso), como actividad antiespasmódica en íleon de
rata, actividad vasorrelajadora dependiente de endotelio y directa sobre el músculo liso
vascular (Bustamante y cols, 2005) y actividad estabilizadora de radicales hidroxilo y
anión superóxido (Acuña y cols, 2002; 2005).
Existen resultados contradictorios en relación a la capacidad antihiperglicemiante y en
el tratamiento de la diabetes. El extracto etanólico de las hojas ha mostrado ser
antihiperglicémico (Sharma y cols, 1977; Aderibidge y cols, 2001), pero no el extracto
acuoso de las hojas (Teixeira y cols, 1998). En ratas diabéticas tipo 1, el extracto acuoso
no muestra ser activo (Aderibidge y cols, 1999; 2001).
OBJETIVOS
Objetivo general:
Determinar si el extracto seco liofilizado de la corteza de Mangifera indica tiene
capacidad antihiperglicemiante en ratas normoglicémicas.
Objetivos específicos:
- Analizar la evolución temporal de la glicemia en ratas normoglicémicas con
hiperglicemia aguda inducida.
- Determinar si la actividad antihiperglicemiante del extracto seco liofilizado de la
corteza de
Mangifera indica tiene relación dosis efecto en ratas normoglicémicas.
HIPOTESIS
H11: El extracto seco liofilizado de la corteza de Mangifera indica suministrado 30
minutos antes de una carga de glucosa es capaz de evitar el alza transciente de
glicemia en ratas normoglicémicas.
H21: La actividad antihiperglicemiante de el extracto seco liofilizado de la corteza
Mangifera indica suministrado 30 minutos antes de una carga de glucosa tiene relación
dosis efecto en ratas normoglicemicas.
MATERIAL Y MÉTODO
METODO
Población de estudio: Ratas Sprague-Dawley. N=20
Tipo de estudio: Explicativo.
Diseño de investigación: - Experimental in vivo.
- Longitudinal prospectivo.
Variables
Variable Dependiente, cuantitativa numérica: Nivel de glicemia.
Definición conceptual: Glucosa presente en el plasma sanguíneo.
Definición operacional: Cuantificación de la glucosa (mg/dL) en sangre capilar
completa mediante el dispositivo ACCUTREND®
Complete (Laboratorio Roche).
Variable Independiente, cuantitativa numérica: Extracto de Mangifera
indica.
Definición conceptual: Extracto liofilizado de la fase acuosa de la corteza de
Mangifera indica.
Definición operacional: Administración de las distintas concentraciones
disueltas en agua destilada a 37º C por vía gástrica.
Variables Desconcertantes:
- Variación interindividual e intraindividual del operador en la
aplicación del protocolo experimental.
- Variación del estado de la rata durante la toma de muestras.
MUESTRA
- Criterios de inclusión: cepa Sprague-Dawley, de ambos sexos, 270 ± 50 g de
peso, glicemia 70 ± 20 mg/dL y ayuno de 24 horas.
- Criterios de exclusión: menor de 220 g y mayores de 325 g de peso, con
alteraciones en el comportamiento de la glicemia.
Diseño Experimental:
Las ratas fueron asignadas aleatoriamente en 5 grupos a razón de 4 ratas por grupo.
A cada grupo se le administró 2 mg de glucosa por Kg de peso corporal disueltos en 4
mL de agua. Al Grupo Control sólo se le administró 4 mL de agua (0 mg de glucosa/Kg
de peso).
Las distintas concentraciones de EMI administradas a cada grupo (Grupo 0: 0 mg,
Grupo 50: 50 mg, Grupo 250: 250 mg y Grupo 750: 750 mg) fueron disueltas en 2 mL
de agua destilada y administradas a 30 minutos antes de la administración de Glucosa.
La siguiente tabla resume la descripción anterior:
MATERIALES
Recurso físico:
Los experimentos fueron realizados utilizando la infraestructura instalada del
Laboratorio de Farmacodinamia y Fitofarmacología, Programa de Farmacología
Molecular y Clínica, Instituto de Ciencias Biomédicas (ICBM), de la Facultad de
Medicina de la Universidad de Chile, considerando además los animales equipos y
reactivos.
Animales:
Se utilizaron ratas de ambos sexo Sprague-Dawley, de 270 ± 50 g de peso, obtenidas del
Bioterio Central del Instituto de Ciencias Biomédicas (ICBM). Se mantuvieron con
GRUPOS Concentración de Glucosa(2 mg/Kg/4 mL)
Concentración de EMI (mg/Kg/2 mL)
(Control) - - (0) + 0 (50) + 50 (250) + 250 (750) + 750
dieta normal de alimento (Champion Nutrición Animal, Santiago, Chile) y agua
proporcionados ad libitum, de acuerdo a las normas internacionales dadas por la Guía
para el Cuidado y uso de Animales de Laboratorio, publicada por el National Institute of
Health (publicación 85-23, Revisión 1985).
PROCEDIMIENTO
Preparación y administración de la glucosa y el extracto:
La glucosa fue pesada en una balanza analítica Sartorius (± 0.0001 mg), luego se
preparó en agua destilada a concentración 2mg/4mL y se mantuvo almacenada por 24
horas a -7 °C. Se calentó con baño termorregulado a 37º C y se administró por vía
gástrica mediante una sonda gastro-esofágica aguda con una jeringuilla desechable de 5
mL.
El extracto de M. indica fue pesado y se preparó, a la concentración especificada según
el grupo, en agua destilada y se mantuvo almacenada por 24 horas a -7 °C. Se calentó
con baño termorregulado a 37º C y se administró por vía gástrica mediante una sonda
gastro-esofágica aguda con una jeringuilla desechable de 1 mL.
Todas las ratas fueron previamente pesadas en una balanza digital (± 0,0001 Kg) para
adecuar las dosis de glucosa y extracto a sus pesos. Se utilizaron 3 jaulas para su
transporte.
Determinación de la glicemia:
Se realizó un corte de 2 mm de la punta de la cola con una tijera, para obtener una gota
de sangre capilar la cual se dejó caer sobre la cinta reactiva ACCU-check® de glicemia
del dispositivo ACCUTREND® Complete (Laboratorio Roche) (Anexo 2).
Descripción del procedimiento:
Se determinaron los niveles de glicemia después de un ayuno de 24 horas a todas las
ratas. (T0). A los grupos tratados con las distintas concentraciones de EMI (cantidad
especificada según peso), el extracto se le administró 30 minutos antes de la
administración de glucosa. Después de transcurridos 30 (T30), 60 (T60), 90 (T90), 120
(T120), 180 (T180) y 240 (T240) minutos se volvió a medir la glicemia.
Los datos recolectados se muestran en el ANEXO 4 en una tabla que incluye grupos de
estudios, tiempos, promedios y desviación estándar.
Análisis Estadístico:
Los datos primarios obtenidos dentro de los tratamientos de cada grupo fueron
sometidos primeramente a un análisis descriptivo estimándose la media aritmética,
desviación típica, error típico, el límite inferior y superior del intervalo de confianza de
cada tratamiento, así como el valor mínimo y máximo de cada uno de ellos.
Para comparar si existían o no diferencias de los tratamientos analizados en cada uno de
los grupos examinados, se realizó un análisis de varianza (ANOVA) para un factor con
datos balanceados y empleando el modelo I de acuerdo con Díaz, 2005. En todos los
casos se procedió a realizar la comparación múltiple de medias Duncan, de acuerdo con
Lerch, 1977.
Ambos análisis fueron realizados en una comparación entre todos los grupos desde T0
hasta T240.
El nivel de significación utilizado es de α = 0,05.
0
50
100
150
200
TIEMPO (min)
GL
ICE
MIA
(mg/
dL)
G-0 G-50 G-250 G-750 G-Control
RESULTADOS
Todos los valores obtenidos de glicemia están presentados en el ANEXO 4.
En T0 y T240 el ANOVA no determinó diferencia significativa (p>0,05).
Para los tiempos desde T30 hasta T120, el Grupo Control mostró una diferencia
significativa (p<0,05) con respecto al resto de los grupos.
Dentro de los grupos tratados, el Grupo 50 en T90, mostró tener el mayor efecto
antihiperglicemiante (p<0,05, glicemia de 90,25 mg/dL), sin embargo llama la atención
que el Grupo 250 tuvo el menor efecto en todos los tiempos y el Grupo 750 tuvo un
efecto mayor que el Grupo 250 (98,5 frente a 107,25 mg/dL) a T90 pero no tan
significativo como el Grupo 50. (Figura 1). Esta variación se muestra en el ANEXO 3
donde se aprecia la variación porcentual con respecto al estímulo de glicemia del Grupo
0 a T30 (Figura 2) y la variación porcentual de los valores de la glicemia con respecto a
Grupo 0 en cada tiempo (Figura 3).
ŧ * * * *
0 30 60 90 120 180 240
Figura 1: Evolución temporal de los niveles plasmáticos de glucosa (mg/dL). (*p<0,05) (ŧ p<0,5).
DISCUSIÓN
Nuestros resultados muestran que entre los tiempos T0 y T240 no existe diferencia
significativa entre los niveles plasmáticos de glucosa del Grupo Control. Estos
resultados demuestran que las ratas eran normoglicémicas ya que los mecanismos de
regulación, tanto en un ayuno de veinte y cuatro horas como después de cuatro horas de
haber ingerido glucosa, estabilizaron los niveles de glicemia como lo documenta
Guyton and Hall, 2002.
Del mismo modo podemos evidenciar el funcionamiento de dichos mecanismos de
regulación en los tiempos T120 y T180, donde dos horas después de la carga de glucosa
inicial (2 mg/Kg/4mL) los niveles plasmáticos de glucosa comienzan a mostrar una
tendencia a la estabilización (Guyton and Hall, 2002).
El análisis de los tiempos T30 y T60, muestran una diferencia significativa en los
niveles de glicemia de los Grupos 0, 50, 250 y 750 con respecto al Grupo Control. Estos
resultados no son sorprendentes ya que este último grupo sólo fue tratado con el
vehículo tanto de la glucosa como del extracto. Esta misma tendencia se mantuvo para
los tiempos T120 y T180.
Al comparar los resultados de los grupos en el tiempo T90, encontramos un
efecto antihiperglicemiante de los Grupos 50, 250 y 750. Sin embrago, nos llama la
atención que el Grupo 750, aunque presenta un menor efecto que el Grupo 50, su
capacidad antihiperglicemiante es mayor que la del Grupo 250. Dicho otro modo en el
Grupo 250 la actividad farmacológica parece estar disminuida. Esto evidencia un
comportamiento trifásico del extracto seco liofilizado de la corteza de la M .indica con
lo que comprobamos que el extracto no posee relación dosis – efecto. Se ha reportado
un efecto similar para el EMI en la relajación muscular de los vasos aórticos de ratas
donde bajas dosis (50 mg/mL in vitro) del extracto producía vaso relajación, en cambio,
concentraciones por encima de los 100 mg/mL producían una notable vaso constricción,
evidencia del efecto bifásico sobre la musculatura lisa vascular (Bustamante y cols,
1998).
Podríamos suponer que, dada la distinta composición y distribución de los
compuestos presentes en el extracto, la dosis de 50 mg/Kg contiene una mayor
proporción de compuestos farmacológicamente activos sobre la actividad
antihiperglicemiante.
Nuestro modelo experimental no nos permite determinar mecanismos de acción,
sin embargo, los resultados obtenidos nos llevan a pensar en el posible mecanismo de
acción, que en primera instancia supondríamos que estaría dado por una disminución de
la absorción de glucosa a nivel del tubo digestivo. Por otro lado hay evidencia de que el
extracto acuoso de las hojas no presenta efecto antihiperglicemiante en ratas diabéticas
tipo I (Aderibigbe y cols, 1999 – 2001) y frente a nuestro modelo con ratas
normoglicémicas, el extracto seco liofilizado de la corteza de Mangifera indica sí
presenta efecto antihiperglicemiante; por lo tanto también podríamos suponer que el
EMI actúa en presencia de insulina, ya sea aumentando su secreción o mejorando la
sensibilidad.
CONCLUSION
• El extracto seco liofilizado de la corteza de Mangifera indica suministrado 30
minutos antes de una carga de glucosa es capaz de evitar el alza transciente de
glicemia en ratas normoglicémicas, por lo que se aprueba la hipótesis H11.
• La actividad antihiperglicemiante del extracto seco liofilizado de la corteza de
Mangifera indica no tiene relación dosis efecto en ratas normoglicémicas, por lo
que se rechaza nuestra hipótesis H21.
• El máximo efecto antihiperglicemiante del extracto seco liofilizado de la corteza
de Mangifera indica se observa con dosis de 50 mg/kg a los 90 minutos después
de suministrada la glucosa en ratas normoglicémicas.
PROYECCIONES
A partir de los resultados obtenidos en nuestro estudio, podemos establecer que
el extracto seco liofilizado de la corteza de Mangifera indica posee efecto
antihiperglicemiante en ratas normoglicémicas. Esta propiedad es independiente de la
relación dosis – efecto. Estos resultados podrían guiar el proceso de obtención del
extracto a mejorar la distribución y composición del mismo, para lograr así un producto
con una mayor proporción de compuestos farmacológicamente activos sobre la
actividad antihiperglicemiante, para así acercarnos a la obtención de nuevas opciones
fitofarmacológicas al tratamiento de la distintas enfermedades metabólicas como la
Diabetes Mellitus.
Pensamos que son necesarios estudios futuros a corto plazo para dilucidar
aspectos farmacocinéticas y farmacodinámicos que nos ayuden a determinar el
mecanismo de acción, como por ejemplo medir la absorción de glucosa intestinal frente
al extracto seco liofilizado de la corteza de Mangifera indica.
La investigación de los parámetros farmacocinéticos del EMI como su capacidad
de absorción, biodisponibilidad, metabolización, unión a proteínas plasmáticas y
toxicidad aumentarían los conocimientos en general de los fitofármacos.
REFERENCIAS Y BIBLIOGRAFIA
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ANEXO 1
Composición cualitativa y cuantitativa de la mezcla de polifenoles, terpenoides,
esteroides, ácidos grasos y microelementos del extracto seco liofilizado de Mangifera
indica. (CQF, 1998)
COMPONENTES CONTENIDO (%)
Polifenoles Totales 20 – 60
1.1 Manguiferina 10 – 20
1.2 3-Pentadecilfenol 5 – 10
1.3 3-Octilfenol 5 – 10
1.4 Amentoflavona 10 – 20
Terpenoides Totales 10 – 40
2.1 Ácido mangiferónico 15 – 30
2.2 Beta-elemeno 5 – 10
2.3 Alfa-guaieno 5 – 10
2.4 Aromandreno 5 – 10
2.5 Hinesol 1 – 5
2.6 Cicloartanoles 1 – 5
2.7 Ledol 1 – 5
2.8 Taraxerol 1 – 5
Esteroides Totales 5 – 15
3.1 Gamma-sitoesteroles 2 – 8
3.2 Beta-sitoesterol 2 – 8
3.3 Campesterol 1 – 5
3.4 Daucoesterol 0,5 – 3
3.4 Multifluorenona 0,5 – 3
Ácidos Grasos Totales 1 – 5
4.1 Mirístico 0,1 – 3
4.2 Palmítico 35 – 45
4.3 Linoléico 15 – 35
4.4 Oléico 20 – 40
4.5 Esteárico 0,1 – 1
4.6 Eicosatrienóico 1 – 3
Microelementos Totales 1 – 3
5.1 Potasio 0,8 – 1
5.2 Calcio 0,2 – 0,4
5.3 Magnesio 0,1 – 0,2
5.4 Hierro 0,1 – 0,2
5.5 Cobre < 0,01
5.6 Zinc < 0,01
5.7 Selenio 0,03 – 0,08
ANEXO 2
ACCUTREND® Complete (Laboratorio Roche).
Equipo diseñado para el control de la glicemia.
Utiliza cintas reactivas Accutrend Glucosa.
El test requiere una gota de sangre capilar fresca la cual se deja caer en la cinta reactiva.
Rangos de lectura:
Glicemia: 20 – 600 mg/dL.
Tiempo de reacción:
Glucosa: 12 segundos.
Principio por el cual se realiza la determinación:
La glicemia se determina por bioamperometría, por la reacción de conversión de
glucosa en gluconolactona mediante la enzima glucosa-deshidrogenasa.
-70%
-60%
-50%
-40%
-30%
-20%
-10%
0%
TIEMPO (minutos))
POR
CEN
TAJE
DE
VA
RIA
CIÓ
N
-60%-50%-40%-30%-20%-10%
0%10%20%
TIEMPO (minutos)
POR
CEN
TAJE
DE
VA
RIA
CIO
N
ANEXO 3 T30 T60 T90 T120 T180 T 240 Figura 2: Variación Porcentual de los distintos grupos con respecto al Grupo (0) en T30. Grupo Control n = 4. Grupo 0 n = 4. Grupo 50 n = 4. Grupo 250 n = 4. Grupo 750 n = 4.
* ŧ * * * * T30 T60 T90 T120 T180 T 240 Figura 3: Variación Porcentual de los distintos grupos con respecto al Grupo (0) en los distintos tiempos. Grupo Control n = 4. Grupo 0 n = 4. Grupo 50 n = 4. Grupo 250 n = 4. Grupo 750 n = 4. (*p<0,05) (ŧ p<0,5)
ANEXO 4 Tabla 1: Valores de los promedios y desviaciones estándar de los distintos Grupos a los distintos tiempos.
GRUPO 0 GRUPO 50 GRUPO 250 GRUPO 750 GRUPO Control TIEMPO PROMEDIO SD PROMEDIO SD PROMEDIO SD PROMEDIO SD PROMEDIO SD
EMI - 30 55,75 13,38 58,5 7,9 56,25 7,8 0 51,50 4,65 63,25 11,18 59,25 7,04 60,50 10,97 66,75 7,93
30 133,50 25,09 116,25 8,81 120,75 5,12 113,25 24,24 69,50 8,89 60 123,75 20,01 111,00 13,37 123,75 15,80 115,50 11,39 69,75 10,7890 117,00 17,57 90,25 11,32 107,25 6,85 98,50 11,15 61,75 9,54 120 92,75 14,27 82,25 7,41 96,25 9,50 84,00 8,45 59,25 14,45180 69,00 1,41 70,25 7,63 73,50 2,89 72,75 5,68 55,00 11,05240 66,75 11,24 75,50 13,20 73,25 6,18 74,25 6,80 58,75 9,25
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