Arie Arhy_ Laporan Kromatografi Kolom

20/4/2014 Arie arhy: LAPORAN KROMATOGRAFI KOLOM

http://arikimia.blogspot.com/2013/06/laporan-kromatografi-kolom.html 1/7

Mahasiswa Jurusan Kimia Universitas Islam Negeri (UIN) Alauddin Makassar

Arie arhy

Sunday, June 2, 2013

LAPORAN KROMATOGRAFI KOLOM

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Kromatografi adalah suatu teknik pemisahan molekul berdasarkan perbedaan pola

pergerakan antara fase gerak dan fase diam untuk memisahkan komponen berupa molekul yang

berada pada larutan. Molekul yang terlarut dalam fase gerak akan melewati kolom yang merupakan

fase diam. Molekul yang memiliki ikatan yang kuat dengan kolom akan cenderung bergerak lebih

lambat dibanding molekul yang berikatan lemah. Dengan ini, berbagai macam tipe molekul dapat

dipisahkan berdasarkan pergerakan pada kolom. Setelah komponen terelusi dari kolom, komponen

tersebut dapat dianalisis dengan menggunakan detektor atau dapat dikumpulkan untuk analisis

lebih lanjut (Anonim, 2012).

Kromatografi pertukaran ion biasa digunakan untuk pemurnian materi biologis seperti

asam amino, peptida, protein. Metode ini dapat dilakukan dalam dua tipe, yaitu dalam kolom

maupun ruang datar (planar). Terdapat dua tipe pertukaran ion, yaitu pertukaran kation dan

pertukaran anion. Pada pertukaran kation, fase stasioner bermuatan negatif sedangkan pada

pertukaran anion, fase stasioner bermuatan positif. Molekul bermuatan yang berada pada fase

cair akan melewati kolom. Jika muatan pada molekul sama dengan kolom, maka molekul tersebut

akan terelusi. Namun jika muatan pada molekul tidak sama dengan kolom, maka molekul

tersebut akan membentuk ikatan ionik dengan kolom. Untuk mengelusi molekul yang menempel

pada kolom diperlukan penambahan larutan dengan pH dan kekuatan ionik tertentu. Pemisahan

dengan metode ini sangat selektif karena biaya untuk menjalankan metode ini murah serta

kapasitasnya tinggi, maka metode ini biasa digunakan pada awal proses keseluruhan (Anonim,

2012)

Berdasarkan penjabaran di atas maka untuk memperdalam pengetahuan tentang resin

pertukaran ion maka dilakukanlah percobaan tentang teknik pemisahan kromatografi kolom.

B. Rumusan Masalah

Rumusan masalah dari percobaan ini adalah:

1. Bagaimana cara mengetahui teknik pemisahan kromatografi kolom ?

2. Berapa kapasitas resin (C) pada percobaan ini ?

C. Tujuan Percobaan

Tujuan dari percobaan ini adalah:

1. Mengetahui teknik pemisahan kimia dengan cara kromatografi kolom.

2013 (14)

June (14)

LAPORAN TURBIDITAS &GRAIN SIZE

LAPORAN REDUKSIGARAM BESI (III)OKSALAT

LAPORAN PENENTUANKADAR TIMBAL (Pb)DENGAN AAS

LAPORAN PENENTUANKADAR KALSIUM (Ca)& MAGNESIUM (...

LAPORAN PEMBUATANTERUSI

LAPORANKROMATOGRAFIKOLOM

LAPORAN HALOGEN

LAPORAN EKSTRAKSIPELARUT CAIR-CAIR

LAPORAN EKSTRAKSIPELARUT PADAT-CAIR

LAPORAN BOMKALORIMETER

PART 4 INGINKU BUKANHANYA JADI TEMANMU

PART 3 KIMIA KINI DANSELAMANYA

PART 1 TAKDIR VSIMPIAN

PART 2 MAHASISWABARU

Blog Archive

Arie arhy

Follow 0

View my complete profile

About Me

Bagikan 1 Lainnya Blog Berikut Buat Blog Masuk



2. Menghitung kapasitas resin dari sampel yang digunakan pada percobaan ini.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

Dalam kromatografi partisi cair-cair, suatu pemisahan dipengaruhi oleh distribusi sampel

antara fase cair diam dan fase cair bergerak dengan membatasi kemampuan pencampuran. Jika

suatu zat terlarut dikocok dalam sistem dua pelarut yang tidak bercampur atau saling melarutkan

maka zat terlarut akan terdistribusi di antara kedua fase (Khopkar, 2008, hal: 155).

Kromatografi kolom adalah kromatografi yang menggunakan kolom sebagai alat untuk

memisahkan komponen-komponen dalam campuran. Alat tersebut berupa pipa gelas yang

dilengkapi suatu kran dibagian bawah kolom untuk mengendalikan aliran zat cair, ukuran kolom

tergantung dari banyaknya zat yang akan dipindahkan. Secara umum perbandingan panjang dan

diameter kolom sekitar 8:1 sedangkan daya penyerapnya adlah 25-30 kali berat bahan yang akan

dipisahkan. Teknik banyak digunakan dalam pemisahan senyawa-senyawa organic dan

konstituen-konstituen yang sukar menguap sedangkan untuk pemisahan jenis logan-logam atau

senyawa anorganik jarang dipakai (Yazid, 2005, hal: 98).

Dalam proses kromatografi selalu terdapat salah satu kecenderungan molekul-molekul

komponen untuk melarut dalam cairan, melekat pada permukaan padatan halus, bereaksi secara

kimia dan terekslusi pada pori-pori fasa diam. Komponen yang dipisahkan harus larut dalam fasa

gerak dan harus mempunyai kemampuan untuk berinteraksi dengan fasa diam dengan cara

melarut di dalamnya, teradsorpsi atau bereaksi secara kimia. Pemisahan terjadi berdasarkan

perbedaan migrasi zat-zat yang menyusun suatu sampel. Hasil pemisahan dapat digunakan untuk

keperluan analisis kualitatif, analisis kuantitatif dan pemurnian suatu senyawa. Dalam beberapa

hal metode pemisahan kromatografi mempunyai kemiripan dengan metode pemisahan ekstraksi.

Kedua metode ini sama-sama menggunakan dua fasa, dimana fasa satu bergerak terhadap fasa

lainnya, kesetimbangan solut selalu terjadi di antara kedua fasa ( Alimin dkk, 2007, hal: 74-75).

Pemisahan kromatografi kolom adsorpsi didasarkan pada adsorpsi komponen-

komponen campuran dengan afinitas berbeda-beda terhadap permukaan fase diam.

Kromatografi kolom terabsorpsi termasuk pada cara pemisahan cair padat, substrat padat

bertindak sebagai fasa diam yang sifafnya tidak larut dalam fasa cair, fasa bergeraknya adalah

cairan atau pelarut yang mengalir membawa komponen campuran sepanjang kolom. Pemisahan

bergantung pada kesetimbangan yang terbentuk pada bidang antar muka diantara butiran-butiran

adsorben dan fase bergerak serta kelarutan relatif komponen pada fasa bergeraknya. Antara

molekul-molekul komponen dan pelarut terjadi kompetisi untuk teradsorpsi pada permukaan

adsorben sehingga menimbulkan proses dinamis. Keduanya secara bergantian tertahan beberapa

saat di permukaan adsorben dan masuk kembali pada fasa bergerak (Yazid, 2005, hal: 100).

Pada saat teradsorpsi komponen dipaksa untuk berpindah oleh aliran fasa bergerak yang

ditambahkan secara kontinu, akibatnya hanya komponen yang mempunyai afinitas lebih besar

terhadap adsorben akan secara selektif tertahan. Komponen afinitas paling kecil akan bergerak

lebih cepat mengikuti aliran pelarut. Pada kromatografi adsorpsi, besarnya koefisien distribusi

sama dengan konsentrasi zat terlarut pada fasa teradsorpsi dibagi konsentrasinya pada fasa

larutan. Ketergantungan jumlah zat terlarut yang teradsorpsi terhadap konsentrasi zat terlarut

dalam larutan dinyatakan dengan isoterm adsorpsi Langmuir (Yazid, 2005, hal: 100).

Metode pemisahan kromatografi kolom ini memerlukan bahan kimia yang cukup

banyak sebagai fasa diam dan fasa bergerak bergantung pada ukuran kolom gelas. Untuk

melakukan pemisahan campuran dengan metode kromatografi kolom diperlukan waktu



yangcukup lama, bias berjam-jam hanya untuk memisahkan satu campuran. Selain itu, hasil

pemisahan kurang jelas artinya kadang-kadang sukar mendapatkan pemisahan secara sempurna

karena pita komponen yang satu bertumpang tindih dengan komponen lainnya. Masalah waktu

yang lama disebabkan laju alir fasa gerak hanya dipengaruhi oleh gaya gravitasi bumi, ukuran

diameter partikel yang cukup besar membuat luas permukaan fasa diam relative kecil sehingga

tempat untuk berinteraksi antara komponen-komponen dengan fasa diam menjadi terbatas.

Apabila ukuran diameter partikel diperkecil supaya luas permukaan fasa diam bertambah

menyebabkan semakin lambatnya aliran fasa gerak atau fasa gerak tidak mengalir sama sekali.

Selain itu fasa diam yang sudah terpakai tidak dapat digunakan lagi untuk pemisahan campuran

yang lain karena sukar meregenerasi fasa diam (Hendayana, 2006, hal: 2-3).

Untuk memisahkan campuran, kolom yang telah dipilih sesuai campuran diisi dengan

bahan penyerap seperti alumina dalam keadaan kering atau dibuat seperti bubur dengan pelarut.

Pengisian dilakukan dengan bantuan batang pengaduk untuk memanfaatkan adsorben dan gelas

wool pada dasar kolom. Pengisian harus dilakukan secara hat-hati dan sepadat mungkin agar rata

sehingga terhindar dari gelembung-gelembung udara, untuk membantu homogenitas biasanya

kolom setelah diisi divibrasi diketok-ketok. Sejumlah cuplikan yang dilarutkan dalam sedikit

pelarut, dituangkan melalui sebelah atas kolom dan dibiarkan mengalir ke dalam adsorben.

Komponen-komponen dalam campuran diadsorpsi dari larutan secara kuantitatif oleh bahan

penyerap berupa pita sempit pada permukaan atas kolom. Dengan penambahan pelarut secara

terus-menerus, masing-masing komponen akan bergerak turun melalui kolom dan pada bagian

atas kolom akan terjadi kesetimbangan baru antara bahan penyerap, komponen campuran dan

eluen. Kesetimbangan dikatakan tetap apabila suatu komponen yang satu dengan yang lainnya

bergerak ke bagian bawah kolom dengan waktu atau kecepatan berbeda-beda sehingga terjadi

pemisahan (Yazid, 2005, hal: 200-2001).

Menurut Alimin (2007, hal: 75) keuntungan pemisahan dengan metode kromatografi adalah

a. Dapat digunakan untuk sampel atau konstituen yang sangat kecil.

b. Cukup selektif terutama untuk senyawa-senyawa organik multi komponen.

c. Proses pemisahan dalam dilakukan dalam waktu yang relatif singkat.

d. Seringkali murah dan sederhana karena umumnya tidak memerlukan alat yang mahal dan

rumit.

BAB III

METODE PERCOBAAN

A. Waktu dan Tempat

Hari/tanggal : Senin/22 Mei 2012

Pukul : 13.30 16. 30 WITA

Tempat : Laboratorium Kimia Analitik Universitas Islam Negeri (UIN) Alauddin

Makassar

B. Alat dan Bahan

1. Alat

Adapun alat yang digunakan pada percobaan ini adalah :



a. Botol fial 1 buah

b. Botol semprot 1 buah

c. Bulp 1 buah

d. Chamber 2 buah

e. Gelas kimia 400 mL 1 buah

f. Penggaris 1 buah

g. Penotol sampel 1 buah

h. Pensil 1 buah

i. Pinset 1 buah

j. Pipet skala 5 mL 2 buah

2.

Bahan

Adapun bahan yang digunakan pada percobaan ini adalah :

a. Aquadest (H2O)

b. Etanol : kloroform (1:4, 1:1 dan 4:1)

c. Lempeng KLT

d. Sampel ekstraksi daun bayam

e. Tissue

C. Prosedur Kerja

Prosedur kerja dari percobaan ini adalah:

1. Menyediakan alat dan bahan yang akan digunakan.

2. Membuat pelarut dengan campuran etanol-kloroform dengan perbandingan 1:4, 1:1 dan 4:1.

3. Memasukkan pelarut ke dalam chamber (misalnya pelarut dengan perbandingan 1:4) kemudian di

kocok hingga pelarut homogen.

4. Menyiapkan lempeng KLT, kemudian memberi tanda berupa garis sepanjang plat dengan

menggunakan pensil.

5. Menotol sampel bayam hasil ekstraksi pada garis yang telah dibuat pada lempeng KLT tersebut.

6. Meletakkan plat KLT ke dalam chamber yang berisi larutan dengan posisi plat yang telah ditetesi

dengan sampel berada di bawah.

7. Mendiamkan beberapa saat dan mengamati perubahan warna dan noda yang terjadi pada plat

tersebut.

8. Menghitung Rf dari masing-masing plat dengan perbandingan pelarut yang berbeda.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Pengamatan

1. Tabel Pengamatan



Perlakuan Hasil pengamatan CHCl3 : CH3CH2OH

4 : 1 1 : 1 1 : 4

Rf

sampel ekstraksi daun

bayam

Hijau

Hijau

Kuning

Hijau

0,53

0,63

0,63

0,8

2. Analisa Data

a.

B. Pembahasan

BAB V

PENUTUP

A. Kesimpulan

1. Kromatografi kolom merupakan teknik pemisahan kimia berdasarkan pertukaran ion

anion dan ion kation.

2. Kapasitas resin pada percobaan ini sebesar 6 x 10-5 gram.mol.

B. Saran

Saran dari percobaan ini sebaiknya untuk percobaan selanjutnya digunakan sampel

sampel air laut atau air sungai agar dapat diketahui perbandingan kapasitas resin dari sampel

tersebut.

DAFTAR PUSTAKA

Alimin, dkk. Kimia Analitik. Makassar: Alauddin Press, 2007

Anonim. kromatografi. http//id. Wikipedia. Org/ 8 Mei 2012



Posted by Arie arhy at 3:28 AM

Anonim. Kromatografi Kolom. http//id. Wikipedia. Org/ 8 Mei 2012

Anonim. Pemisahan Kromatografi. http//www. Chem.-is-try. Org/ 8 Mei 2012

Hendayana, Sumar. Kimia Pemisahan. Bandung: PT. Remaja Rosdakarya, 2006

Khopkar, S.M. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: Erlangga, 2008

Yazid, Estien. Kimia Fisika Paramedis. Yogyakarta: Andi, 2005

LEMBAR PENGESAHAN

Laporan lengkap paktikum Dasar-dasar Pemisahan Kimia dengan judul

Kromatografi kolom disusun oleh :

Nama : Abdul Rahman Arif

NIM : 60500110002

Kelompok : I (Satu)

telah diperiksa dan dikonsultasikan oleh koordinator asisten/asisten dan dinyatakan

diterima.

Samata, Mei 2012

Koordinator Asisten, Asisten,

( Wahyuni S.Si ) ( Ahmad Yani S.Si )

MengetahuiDosen Penanggung Jawab

( Dra. Sitti Chadijah M. Si ) Nip : 19680216 199903 2001

+1 Recommend this on Google

Enter your comment...

Comment as: Google Account

Publish

Preview

No comments:

Post a Comment



Newer Post Older PostHome

Subscribe to: Post Comments (Atom)

Awesome Inc. template. Powered by Blogger.

Documents

Arie Arhy_ Laporan Kromatografi Kolom