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Se prohíbe su reproducción total o parcial sin la autorización de BIOANALITIC. Se considera copia no controlada a toda copia impresa que no lleve el sello de COPIA CONTROLADA. Documento de uso exclusivo de BIANALITIC. LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA MANUAL CODIGO: BA – BJ – LC - 01 Manual de Procedimientos de Coprocultivo VERSIÓN: 01 SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 1 - 20 Elaborado por: Revisado por: Aprobado por: Baneza Katy Janampa Coras Nilda Aurea Apayco Espinoza Homero Ango Aguilar MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE COPROCULTIVO

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Manual de Procedimientos de Coprocultivo VERSIÓN: 01SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 1 - 20

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Baneza Katy Janampa Coras Nilda Aurea Apayco Espinoza Homero Ango Aguilar

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE

COPROCULTIVO

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Manual de Procedimientos de Coprocultivo VERSIÓN: 01SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 2 - 20

CONTENIDO

CARATULA 1

I. INTRODUCCIÓN 2

II. OBJETIVOS Y CAMPO DE APLICACIÓN 4

2.1. Objetivos

2.2. Campo de aplicación

III. NORMAS DE REFERENCIA 4

IV. DEFINICIONES 4

V. PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDARIZADO DE COPROCULTIVO 6

5.1. PROCEDIMIENTO DE COPROCULTIVO EN BACTERIOLOGÍA 6

5.1.1. PROCESO PRE-ANALÍTICO

a) Metodología

b) Control de Calidad 7

c) Registro 8

5.1.2. PROCESO ANALÍTICO 9

a) Metodología

b) Control de Calidad 10

c) Registro 12

5.1.3. PROCESO POST-ANALÍTICO 13

a) Metodología

b) Control de Calidad 16

c) Registro 17

VI. ANEXOS 18

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VII. BIBLIOGRAFIAS 20

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I. INTRODUCCIÓN

La porción inferior del intestino tiene una flora bacteriana normal excesivamente amplia. Los microorganismos con mayor prevalencia son los anaerobios ( Bacteroides, bácilos gram positivos, Estreptococos), microorganismos entéricos gran negativos y Enterococcus faecalis. Cualquier intento por aislar bacterias patógenas de las heces implica la separación de las especies patógenas, usualmente a través del empleo de medios selectivos diferenciales y de cultivos enriquecidos. Las principales causas de trastornos gastrointestinales agudos incluyen a los virus, las toxinas (de: Estafilococos, Vibriones, Escherichia coli ), bacilos entéricos gran negativos invasores, los fermentadores lentos de la lactosa, la Shigella, la Salmonella y la Campilobacterias. La importancia relativa de estos grupos tiene grandes discrepancias en las distintas partes del mundo.

Las heces y los raspados rectales son los especimenes de que se dispone con mayor facilidad. Debe anotarse, en el examen macrocópico la presencia de sangre, moco o helmintos en la inspección inicial. Se suspenden los especímenes en un caldo selectivo como el Caldo de Tetrationato y se cultivan sobre medios ordinarios así como en medios selectivos diferenciales, por ejemplo Agar EMB, Agar McConkey, Agar S-S, para permitir la separación de los bacilos gran negativos que no fermentan la lactosa de otras bacterias entéricas comunes.

Los frotis teñidos pueden revelar una prevalencia de leucocitos y de ciertos microorganismos anormales como Cándida o estafilococos, pero no pueden utilizarse para diferenciar las bacterias entéricas patógenas de las de la flora normal, por lo que deben realizarse otro tipo de pruebas para discriminar los tipos de bacterias presentes en la muestra como son las pruebas bioquímicas.

II. OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓNII.1. OBJETIVO GENERALES El objetivo del presente manual, es describir los Procedimientos Operativos

Estandarizados del Coprocultivo. Identificar las posibles especies patógenas de microorganismos presentes en las vías

gastrointestinales (Heces) a través del coprocultivo.

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II.2. OBJETIVO ESPECÍFICOS Conocer un conjunto de técnicas que nos permita diferenciar la morfología, y

características, para la Identificación el microorganismo patógeno, que se encuentran en la materia fecal.

Conocer cómo obtener la muestra de heces para un determinado coprocultivo. Interpretar resultados, validación, emisión del informe.

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Realizar el respectivo control de calidad en cada uno de procesos operativos estandarizados del coprocultivo.

Realizar registros de control de calidad por cada proceso operativo establecido.

II.3. CAMPO DE APLICACIÓNBajo los alcances del presente manual, se encuentran todas las actividades relacionadas a los Procedimientos Operativos Estandarizado de coprocultivo, que se llevan a cabo en el Laboratorio de Microbiología Clínica Bioanalitic, que incluyen los procesos pre-analíticos, analíticos y post-analíticos.

III. NORMAS DE REFERENCIA NTS Nº 072-2008 UPS de Patología Clínica NTS Nº 018 ISO N° 17025

IV. DEFINICIONES

Cepa: en microbiología, conjunto de virus, bacterias u hongos que tienen el mismo patrimonio genético.

Enfermedad: alteración o desviación del estado fisiológico en una o varias partes del cuerpo, por causas en general conocidas, manifestada por síntomas y signos característicos, y cuya evolución es más o menos previsible.

Enzima: catalizador biológico, normalmente una proteína, que mediatiza y promueve un proceso químico sin ser ella misma alterada o destruida. Son catalizadores extremadamente eficientes y muy específicamente vinculados a reacciones particulares.

Fermentación: conversión biológica anaeróbica (sin oxígeno) de las moléculas orgánicas, generalmente hidratos de carbono, en alcohol, ácido láctico y gases, mediante la acción de ciertos enzimas que actúan bien directamente o como componentes de ciertas bacterias y levaduras. En su uso más coloquial, el término

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hace referencia a menudo a bioprocesos que no están estrictamente relacionados con la fermentación. Infección: invasión de un ser vivo por un agente patógeno que desencadena una enfermedad.

Microorganismo: organismos microscópicos pertenecientes por regla general a virus, bacterias, algas, hongos o protozoos.

Organismo: entidad biológica capaz de reproducirse o de transferir material genético, incluyéndose dentro de este concepto a las entidades microbiológicas, sean o no celulares. Casi todo organismo está formado por células, que pueden agruparse en órganos, y éstos a su vez en sistemas, cada uno de los cuales realizan funciones específicas.

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Patógeno: productor o causante de enfermedad.

Toxina: proteína responsable de la especificidad funcional de ciertas bacterias, que es venenosa para determinados organismos. Entre las mejor conocidas, tanto por su estructura como por los mecanismos de acción, figuran las toxinas colérica y tetánica que interaccionan con las células diana a través de gangliósidos de membrana.

Vacuna: Antígeno procedente de uno o varios organismos patógenos que se administra para inducir la inmunidad activa protegiendo contra la infección de dichos organismos. Es una aplicación práctica de la inmunidad adquirida.

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PROCEDIMIENTOCODIGO: BA – BJ – LC - 01

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO

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V. PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO

En consideración a los procesos desarrollados en el Laboratorio de Microbiología Clínica, se estableció los siguientes POEs de Análisis Coprológico, como se detalla a continuación:

5.1. PROCEDIMIENTO COPROLÓGICO EN BACTERIOLOGÍA

5.1.1. FASE PRE-ANALÍTICO

1. TOMA DE MUESTRA DE HECESToma de muestra - Heces: Hisopos rectales.

- Heces fresca o líquida (especialmente diarreicas).- Si la muestra es sólida enviar 2 gramos de deposición y si es líquida de 3 a 5 mL. - Para bebés y niños pequeños que usan pañales, se puede cubrir el pañal con un

envoltorio plástico.Materiales - Frasco estériles de boca ancha

- Hisopo rectal- Envolturas plásticas

Protocolo Heces:- Recipientes limpios de boca ancha (necesariamente estéril) y con cierre hermético.- Seleccionar zonas con sangre, moco o pus- Heces pastosas: usar espátula del recipiente (no papel higiénico).Hisopo rectal:- Introducir el hisopo sobrepasando un poco el esfínter anal.- Luego introducir el hisopo en medio de transporte Cary-Blair y enviar al laboratorio.- Etiquetar muestra adecuadamente.

Trasporte al - Trasladar prontamente la muestra a laboratorio, pues la rápida proliferación de las

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laboratorio bacterias comensales llevan a la destrucción de los Enteropatógenos, en especial si se trata de gérmenes lábiles como la Shigella.

- Cary-Blair es un medio de conservación para el coprocultivo, tiene como máximo de tiempo de 5 días a temperatura ambiental.

- Si la muestra no se procesa en 2h, se mantiene en refrigeración sólo hasta 48h.Condiciones Parabasales

- Antes de recoger las heces evitar tomar medicamentos (antiácidos, antidiarreicos, antiparasitarios, antibióticos y laxantes), dependiendo del motivo del análisis.

- Evitar que las heces se contaminen con la orina.- No se deben recoger las heces del sanitario o mezcladas con papel higiénico.- Incluir en la muestra de deposición los trozos de epitelio o moco, sangre y pus.- Datos clínicos del paciente: Edad, síntomas, tiempo de evolución del cuadro diarreico,

tipo de alimentos ingeridos, contacto con animales y cuáles, procedencia, ocupación.Criterio - Salmonella, Shigella, bacilos tuberculosos, es preciso que se encuentren en grandes

cantidades y se hallen en varios exámenes.- La presencia de sangre, suponer infección de E. coli, Shigella, Yersinia, etc.- Presencia de sangre o pus, suponer proceso inflamatorio más o menos intenso

(enteritis y colitis)

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2. CONTROL DE CALIDAD DE LA FASE PRE-ANALÍTICA

Supervisar que la toma muestra se haya tomado de forma correcta, observando sus características macroscópicas de la muestra.

Conocer el verdadero tiempo transcurrido después de la toma de muestra, según la supervisión en el laboratorio.

Los frascos e hisopos rectales se le haya proporcionado al paciente, estén en condiciones estériles.

Supervisar de qué manera estaba conservado la muestra, para su traslado al laboratorio de microbiología clínica.

Comprobar la efectividad del medio Cary-Blair, utilizando cepas patrón ATCC de Salmonella y Shigella.

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REGISTRO DE LA FASE PRE-ANALÍTICA DE COPROCULTIVO VERSIÓN: 01SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 8 - 20

3. REGISTRO DE LA FASE PRE-ANALÍTICA

CLAW LABORATORIOREGISTRO DE FASE PRE-ANALÍTICA

REGISTRO N°COP/PA-001

COPROCULTIVOApellidos y nombre: ……………………………………………..………………………………………..…. Edad: ….…………….Cama: ……………………… H.Cl.: …………………… Servicio: …………..…………………………. Fecha: ………………Procedencia: ……………………………………………… Ocupación: …………………………………... Sexo: ……………….

CARACTERÍSTICAS ANTES DE LA TOMA DE MUESTRA RESPUESTA DEL PACIENTE

Datos clínicos del paciente: Síntomas, Tiempo de evolución.

¿Qué tipo de alimentos ha ingerido?

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¿Tuvo contacto con animales? y cuáles son.¿Cuándo se tomó la muestra: fecha y hora¿Qué medio de conservación usó?¿La muestra estaba en refrigeración?Antes de recoger la muestra ¿Evitó tomar medicamentos, cuáles fueron?

¿Evitó que las heces se contaminen con la orina?

¿Recogió las heces del sanitario o mezcló con papel higiénico?

¿Observó presencia de moco, sangre y pus en toma de muestra?

¿Observó que el recipiente se encontraba limpio y estéril con cierre hermético de boca ancha?Observaciones: _______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

……..……………………….. …………………………………. Fecha: / / Bioanalista Jefe

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5.1.2. FASE ANALÍTICO

1. COPROCULTIVO

Objetivo Identificar agentes infecciosos patógenos y oportunistas en estados agudos o crónicos del tracto intestinal.

Muestra - Recolectar la muestra de heces, en frasco de boca ancha.- En ciertos casos la muestra se toma por hisopado rectal en medio Cary-Blair.

Materiales - 01 Tubo con medio Cary-Blair- 5 mL de Solución Salina Fisiológica- 5 mL de Caldo Selenito o Tetrationato- 5 mL de Agua Peptonada Alcalina- 01 Placa con Agar MK (Mac Conkey)- 01 Placa con Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato)- 01 Placa con Agar SS (Salmonella-Shigella)- 01 Placa con Agar TCBS (Tiosulfato-Citrato-Sales Biliares)- 01 Placa con Agar Tripticasa Soya (TS)- Reactivo para las pruebas Bioquimicas (TSI, LIA, SIM, Urea, Citrato, etc)

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- Azul de metileno. Set de Gram- Placa con Agar Mueller Hinton- Discos de antibióticos- 01 Microscopio y 01 estufa- 01 Mechero de Bunsen, portaobjeto, cubreobjeto, otros.

Criterios

Antes de pasar a las placas con medios selectivo y diferenciales realizar:- Tinción Gram (Para observar bacterias)- Tinción de Azul de Metileno (Para observar levaduras). Después proseguir con el protocolo

Protocolo

Sembrar con una pipeta de Pasteur aproximadamente 1ml de heces en Solución Salina Fisiológica, Caldo Selenito y o Caldo Tetrationato y en Agua Peptonada Alcalina.1. Suspensión fecal con SSF (siembra directa a los medios)Tomar una asada y sembrar por agotamiento de superficie a los siguientes medios de cultivo selectivos y diferenciales:

- Placa con Agar MK (Mac Conkey), incubar a 37°C por 24h en aerobiosis.- Placa con Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato) , incubar a 37°C por 24h en

aerobiosis.- Placa con Agar CIN (Cefsulodin-Irgasan-Novoviocina), incubar a 25°C o

temperatura ambiente por 48 Hrs.- Placa con Agar PM (Preston Modificado), incubar a 42°C por 48h en microaerofilia.

2. Caldo Selenito o TetrationatoIncubar 6-8 horas a 36°C y sembrar en placas con Agar Salmonella-Shigella, debe ser sembrada paralelamente por el método de estrías por agotamiento por 24 horas a 37° en aerobiosis. Agua Peptonada AlcalinaIncubar 6-8 horas a 36°C y sembrar en placas con Agar Tiosulfato Citrato Sale Biliares, debe ser sembrada paralelamente por el método de estrías por agotamiento por 24 horas a 37° en aerobiosis.

3. Después de la incubación de todas las placas, inocular por 18h por estrías al medio Agar Soya Tripticasa, para identificar con las pruebas bioquímicas, de la siguiente forma:

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Identificación

Pruebas bioquímicas - Agar Mac Conkey (TSI, LI, SIM, MIO, Citrato, Urea, Fenilalanina, RM)- Agar XLD (TSI, LI, SIM, MIO, Citrato, Urea, Fenilalanina, RM)- Agar CIN (Manitol, Kligler, Oxidasa, SIM 36 y 22°C)- Agar PM (Oxidasa, Catalasa)- Agar Salmonella-Shigella (TSI, LI, SIM, Citrato, Urea)- TCBS (Kligler, LIA MIO, Fermen. inositol)

Antibiograma Preparación del Agar Mueller Hinton- Inocular la superficie seca de la placa de Mueller Hinton, estriando con el

hisopo en tres direcciones para asegurar una distribución uniforme del inóculo. Antes de colocar los discos dejar secar la placa a temperatura ambiente durante 3 a 5 minutos para que cualquier exceso de humedad superficial sea

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absorbido.- Colocar los discos individuales o multidiscos sobre la superficie del agar con la

ayuda de una pinza estéril o la punta de una aguja presionando suavemente sobre cada disco para asegurar un contacto completo con la superficie del agar.

- Incubar lar placas en posición invertida a 35°C dentro de los 15 minutos posteriores a la aplicación de los discos.

Nota: Distribuir los discos uniformemente, de modo que estén a una distancia mínima de 25 mm uno del otro. No deben colocarse más de 12 discos en una placa de 150 mm, ni más de 6 en una placa de 100 mm de diámetro interno, para evitar la superposición de las zonas de inhibición. Un disco no debe ser removido una vez que tomó contacto con la superficie del agar debido a que algunos antibióticos se difunden rápidamente.

2. CONTROL DE CALIDAD DE LA FASE ANALÍTICO

2.1. CONTROL DE REACTIVOS:

Medios de CultivosPara conocer la efectividad de los medios selectivos y diferenciales, en caso que haya expirado o sufrido algún cambio por la temperatura o almacenamiento del reactivo, entonces es necesario enfrentar cepas patrón ATCC bien conocidas disponibles para el crecimiento positivo de los siguientes medios: Agar Mac Conkey, Agar XLD , Agar CIN, Agar PM, Agar SS , Agar TCBS y Agar Tripticasa Soya .

Solución salina fisiológicaDependiendo del lugar de almacenamiento de la solución salina fisiológica (NaCl al 0.85%), sufren cambios estructurales en su composición química, teniendo un tiempo determina de uso. Para hacer el control respectivo de este reactivo no basta con fijarse la fecha de vencimiento, en qué condiciones se almacena dicho reactivo.

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Set de GramPara poder conocer la efectividad de los colorantes, en caso que haya expirado o sufrido algún cambio molecular por la temperatura o almacenamiento, entonces es necesario tener a nuestra disposición dos cepas patrón ATCC bien definidas, que sean Gram positivos o Gram negativos respectivamente. Luego enfrentarlos con nuestros colorantes y después observar al microscopio. De esta manera conoceremos en realidad que tan confiables son nuestros colorantes Gram.

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2.1. EQUIPOS:

Microscopio compuesto binocularPara conocer el estado actual de nuestro microscopio, es muy importante verificar los lentes oculares (limpiarlo con paños especiales), regular la intensidad del foco, también la mesa de desplazamiento debe correr gradualmente a medida que se giran los tornillos de desplazamiento, el micrométrico y el macrométrico. Para tal efecto es importante tener a nuestra disposición lentes oculares y lentes objetivos de repuesto compatible a nuestro microscopio compuesto. De esta manera nos permita distinguir las diferencias que existen con los lentes anteriores.

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REGISTROSCODIGO: BA – BJ – LC - 01

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4. REGISTRO DE LA FASE ANALÍTICA

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CLAW LABORATORIOREGISTRO DE FASE ANALÍTICA

REGISTRO N°COP/AN-001

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COPROCULTIVO - CANTIDAD DE UTILIZACIÓN DE INSUMOS (grs) POR MES Nombre del laboratorista: ……………………………………………………………………………………..………………………………………….…….…………Mes: …………………………….. Distrito: …………………………….. Provincia: ………..………………………. Dpto.: ……………………………………..

FECHACaldo

SelenitoAgar MK

Agar XLD

Agar CIN

Agar PM

Agar TCBS

Agar TS

AgarMH

AgarSS

GramDisc. ATB

Azul de Metilo

FECHAAgarTSI

Agar LIA

Agar SIM

Agar MIO

Agar Urea

Agar Indol

Agar Citrat.

AgarKligler

AgarRojo M

AgarFenil.

AgarManitol

Agar VP

Observaciones: ___________________________________________________________________

……..……………………….. …………………………………. Fecha: / / Laboratorista Jefe

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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO

VERSIÓN: 01

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5.1.3. FASE POST-ANALÍTICO

1. REPORTE DE LOS RESULTADOSExamen

MacroscópicoCrecimiento en

Placas

- Agar MK: Si el crecimiento de colonias es de color rosa, se trata de Escherichia coli; Cuando el crecimiento de colonias es incoloras, inhibición (parcial de proliferación) se trata de Proteus mirabilis; si el crecimiento de las colonias son pequeñas, magenta es Enterococcus faecalis; si el crecimiento de colonias de color rosa a verde se trata de Pseudomonas

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aeruginosa; si el crecimiento de colonias de incoloras a color rosa trata de Shigella dysenteriae; si el crecimiento de colonias es pequeñas opacas, rosa se trata de Staphylococcus aureus.

- Agar XLD Cuando el crecimiento de colonias es grandes, planos, de color amarillo, pueden haber algunas cepas inhibidas es Escherichia coli; Si el crecimiento de las colonias son mucoides, amarillos son Enterobacter/Klebsiella; Si el crecimiento de colonias de color rojo a amarillo, la mayoría tienen centros de color negro se trata de Proteus; si el crecimiento es de color rojo a amarillo con centros de color negro se trata de Salmonella, positiva a H2S; si el crecimiento es de color rojo de colonias se trata de Pseudomonas/Shigella. Crecimiento escaso o nulo son bacterias Gram positivas.

- Agar CIN: Presencia de colonias típicas es Yersinia sp. Si da colonias no fermentadoras y mucosas se trata de Aeromonas sp.

- Agar Preston Modificado: Las colonias de Campylobacter sp. son redondos irregular con bordes lisos. Ellos pueden tener colonias translúcidas, de color blanco a la difusión, el crecimiento plano, transparente. Algunas cepas parecen tan o ligeramente rosado.

- Agar SS: Cuando el crecimiento de colonias es de color de rosa claro a incoloras se trata de Shigella sp. Mientras el crecimiento de colonias sea incoloro, generalmente con centro de color negro se trata de Salmonella sp. Pero sin inocular es de color rojo anaranjado, tono rosado.

- Agar TCBS: Dan colonias de tamaño mediano, lisas, opacas, de color amarillo es el crecimiento de Vibrio sp.

- Agar Tripticasa Soya: Dan crecimiento para organismo aerobios y anaerobios, Gram positivo y negativo, levaduras y hongos. Utilizados para diferenciar especies de Haemophylus.

TSI (AGAR TRIPLE AZÚCAR HIERRO)

Reporte de resultados:1. K/A (Fermentación sólo de glucosa) = Pico de flauta alcalina/profundidad ácida.2. A/A (Fermentación de glucosa y lactosa) = Pico de flauta ácida/profundidad ácida.3. K/K (No fermentación de glucosa y lactosa) = Pico de flauta alcalina/profundidad alcalina.4. K/A/H2S (Fermentación de glucosa solamente producción de H2S)

= Pico de flauta alcalina/profundidad ácida (negra).

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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO

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Especie bacteriana Superficie inclinada

Fondo Gas H2S

Enterobacter sp. A K ++ -Hafnia sp. K A + -Klebsiella A A ++ -

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Escherichia coli A A + -Shigella sp. K A - -Salmonella typhi K A + -Citrobacter sp. K A + +++Edwarsiella K A + +++Serratia sp. K A - -Proteus vulgaris K A + +++Providencia sp. K A + o - -

RESULTADOS DEL MEDIO TSI

LIA (AGAR LISINA HIERRO)

Interpretación: A = ÁcidoK = AlcalinoN = NeutraR = Rojo (desaminación oxidativa)

Reporte de resultados:

1. K/K = Azul de Prusia / azul de Prusia (Desaminación oxidativa/descarboxilación)2. K/A = Azul de Prusia / lila ( No desaminación)3. Producción de H2S = Ennegrecimiento del medio4. Producción de gas = Burbujas o levantamiento del medio de cultivo de las paredes del tubo.

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PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO

VERSIÓN: 01

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RESULTADOS DEL MEDIO LIA

MIO (Movilidad, Indol y Ornitina)

Fundamento: 1 = Descarboxilación de ornitina2 = Producción de indol3 = Movilidad

Reporte de resultados

Prueba Movilidad Indol OrnitinaPositivo + + +Negativo - - -

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Especie bacteriana Superficie inclinada

Fondo Gas H2S

E. coli K K o N - o + -Shigella K A - -Salmonella typhi K K - + o -Salmonella paratyphi K A + o - + o -Arizona sp. K K o N - +Citrobacter sp. K A - o + - o +Edwarsiella sp. K K - o + -Klebsiella sp. K K o N + o - -Enterobacter cloacae K A + o - -Proteus vulgaris R A - -Proteus mirabilis R A - -

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PROCEDIMIENTOPROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE

ANÁLISIS COPROLÓGICOVERSIÓN: 01

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APLICACIÓN

Especies Bacterianas Microorganismos Ornitina Positivo

Especies Bacterianas Microorganismos Ornitina negativo

Enterobacter + Klebsiella -Proteus mirabilis + Enterobacter aglomerans -Proteus morganii + Proteus vulgaris -Yersinia enterocolitica + Yersinia pestis -

Yersinia pseudotuberculosis -

RESULTADOS DEL MEDIO MIO

2. CONTROL DE LA FASE POST-ANALÍTICA

Los resultados obtenidos después de procesar la muestra, pasa por un control de calidad interno, que consiste en relacionar los valores obtenidos con los valores establecidos permisibles, implantada por el gobierno MINSA.Si el resultado no coincide con valores establecidos y la evidencia del paciente es sintomática, se deben realizar una nueva prueba, para el descarte de un falso negativo.

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LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA

REGISTROSCODIGO: BA – BJ – LC - 01

REGISTRO DE LA FASE POST -ANALÍTICA DE COPROCULTIVO VERSIÓN: 01

SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 17 - 20

3. REGISTRO DE LA FASE POST-ANALÍTICA

CLAW LABORATORIOREGISTRO DE FASE POST-ANALÍTICA

REGISTRO N°COP/PA-001

RESULTADO DEL COPROCULTIVOApellidos y nombre: ……………………………………………..……………………………………………………..…. Edad: ….…………….Cama N°: ……………………… H.Cl.: …………………… Servicio: …………..…………………….……………. Fecha: ………………

Procedencia: ……………………………………………… Ocupación: ………………………………………………... Sexo: ……………….

Tipo de muestra: ( ) Heces sólida ( ) Heces líquida ( ) Heces disentérica

Toma de muestra: ( ) Hisopo rectal ( ) Frasco de boca ancha

EXAMEN FÍSICO RESULTADO COPROCULTIVO TINCIÓN GRAM

Color: _________________________________

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_________________________________

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_________________________________

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_________________________________

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Leuc. Polimorfonucleares:……………………..

Bacilos Gram negativos………………………….

Aspecto: Bacilos cortos Gram negativos:………………

Diplococos Gram Negativos:…………………..

Mucosidad: TINCIÓN AZUL DE METILENO

Epitelio por Campo:……………………………….

Sangre: Levaduras:……………………………………………..

Piocitos:…………………………………………………

Observaciones: ______________________________________________________________________________________________________________________________________________________

……..……………………….. …………………………………. Fecha: / / Laboratorista Jefe

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VI. ANEXOS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA

PROCEDIMIENTOCODIGO: BA – BJ – LC - 01

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO

VERSIÓN: 01

SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 18 - 20

FLUJOGRAMA N° 01: PROCEDIMIENTO COPROLÓGICO EN BACTERIOLOGÍA

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LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA

PROCEDIMIENTOCODIGO: BA – BJ – LC - 01

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE ANÁLISIS COPROLÓGICO

VERSIÓN: 01

SISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 19 - 20

COPROCULTIVO

Hisopado rectal(3cm ampolla rectal)

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37°C / 24 hrs

TSI LIA

K = Alcalino (rojo) K= alcalino (lila)

A= Acido (amarillo) A= Acido (amarillo)

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA CLINICA

PROCEDIMIENTOCODIGO: BA – BJ – LC - 01

PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDARIZADOS DE VERSIÓN: 01

Transporte

Medio Cary Blair

Aislamiento Secundari

o Primario

Se realiza la siembra en agar Mac conkey o

Crecimiento de colonias de shigella- transparente

Siembra en caldo selenito 37° C / 24 hrs

Siembra en medio SS selenito 37° C /

Colonias de salmonella transparente +

MEDIOS DIFERENCIALES

TSI LIA

Repicar las colonias características

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ANÁLISIS COPROLÓGICOSISTEMA DE GESTON DE CALIDAD PÁGINA: 20 - 20

VII. BIBLIOGRAFIA.

http://www.google.com.pe/search?q=coprocultivo+pdf&bav=on . http://procedimientosmicrobiologicos.wikispaces.com/COPROCULTIVO http://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/Manual

%20Hongos.pdf

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTOBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICASESCUELA DE FORMACION PROFESIONAL DE

BIOLOGIA

CODIGO: BA – BJ – LC - 01

PRACTICA N°4 VERSIÓN: 01MICROBIOLOGIA CLININCA BM 544 PÁGINA: 1 - 1

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE

COPROCULTIVO

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Baneza Katy Janampa Coras Nilda Aurea Apayco Espinoza Homero Ango Aguilar