Evitarea hemolizei Majoritatea cazurilor de hemoliz pot fi evitate dac se respect urm toarele: Folosi i un ac standard nu mai mic de 21-22 G( uneori poate fi necesar s se foloseasc ace de m rimea 22-23 Gpentru pacien ii vrstnici cu vene dificil de punc ionat) Dac aerul poate intra pe lng ac sau n tubul de recoltat , nlocui i vacutainerul Dac folosi i propriul echipament de recoltare i nu cel furnizat de laborator , asigura i-v ca folosi i un materiale curate, uscate,sterile(tuburi,seringi,ace) Recolta i sngele n vacutainere inute la temperatura camerei Cnd vacutainerul se umple prea greu cu snge datorit unei venopunc ii dificile , acest fapt poate determina spargerea hematiilor Alege i alt loc de recoltare i un alt vacutainer i recolta i al doilea specimen.

1

HEMOLIZA Nu retrage i acul din ven pn n momentul n care vacutainerul nu este complet umplut.Retragerea prematur poate determina intrarea aerului n tub i se distrug hematiile. Permite i uscarea dup dezinfec ia locului de recoltare Permite i vacutainerului recoltat s sedimenteze nainte de centrifugare Permite i tubului s se umple complet pentru a fi asigurat propor ia corect ntre sngele recoltat i aditivul din vacutainer 10.Asigura i-v c s-a produs amestecul sngelui cu anticoagulantul, rotind u or vacutainerul cu o mi care de rota ie din ncheietura minii sau agita i u or pe vertical tubul de 5-6 ori.Agitarea energic poate determina hemoliza sau formarea de cheaguri.

2

FOSFATAZA ALCALINA (ALP) Fosfataza alcalina reprezinta o enzima pe baza de zinc cu rol in scindarea gruparii fosfat terminale a esterilor organici.Functioneaza optim in mediu alcalin(ph-10). Prezinta mai multe forme moleculare, cu distributie si origine variata,cele mai reprezentative fiind fractiunile:hepatica,osoasa.intestinala. Avand in vedere principalele localizari ale ALP,modificarea valorilor serice ale acestei enzime tradeaza o suferinta hepatica,biliara sau osoasa.

3

FOSFATAZA ALCALINA Formele principale ale ALP in sange sunt multiple,fiecare forma fiind caracterizata de o structura chimica diferita.Pentru organe diferite,se diferentiaza anumite tipuri de ALP numite izoenzime:la nivel hepatic-izoenzima ALP-1,la nivel osos izoenzimaALP-2. Formele moleculare ale fosfatazei alcaline sunt: - fosfataza alcalina hepatica(LAP) - fosfataza alcalina osoasa(BAP) - fosfataza alcalina intestinala(IAP)4

Forme moleculare ale ALP:fosfataza alcalina fosfataza alcalina fosfataza alcalina fosfataza alcalina renali proximali). corticosteroida(CAP) leucocitara(neutrofilica)(NAP) placentara(PLAP) renala(sintetizata la nivelul tubilor

Aceste forme moleculare difera prin structura situsului catalitic,secventa de aminoacizi,mobilitatea electroforetica,imunogenitate si activitate enzimatica.

5

Recomandari pt determinarea ALP: Determinarea nivelelor serice ale ALP se recomanda in: - investigarea functiei hepatice - colestaza - rahitism sau alte boli osoase - monitorizarea terapiei cu vitamina D la copiii rahitici

6

Valori de referinta In mod fiziologic,valoarea acestei enzime in sange creste tranzitoriu ,la copii in perioada de crestere(poate ajunge la valori de 3 ori mai mari comparativ cu ale adultului) si la gravide. Adulti: femei: 35-130U/l barbati: 40-145U/l Copii in perioada de crestere: pana la 500U/l.

7

Variatii patologice VALORILE CRESCUTE pot apare in urmatoarele situatii,cel mai frecvent inregistrandu-se in cazul afectiunilor care cauzeaza sinteza crescuta la nivel hepatic,osos sau al epiteliului cailor biliare: Congestie/colestaza hepatica: - pancreatita obstructiva - hepatita/mononucleoza - parazitoze8

Valori crescute Afectiuni osoase/osteoblastice - boala Paget- afectare osoasa - rahitism- deficienta vitaminei D - poliartrita reumatoida - tratamentul osteoporozei - osteomalacie - osteosarcoame(forme severe de cancer osos)

9

Valori crescute ALP Afectiuni osoase/non-hepatice - sarcina(placenta produce ALP ale carei valori pot ajunge la o valoare dubla fata de normal) - afectiuni gastro-intestinale:colita ulcerativa,boala Crohn,ulcer - artrita reumatoida - Herpes Zoster - limfom Hodgkin sau alte neoplazii10

Valori scazute ALP Hipofosfatemie Postmenopauza(indus de actiunea hormonilor estrogenici administrati pt tratamentul osteoporozei) Insuficienta tiroidiana Lipsa de vit D,Zn,acid folic,vit B6 Malnutritia asociata cu asimilarea scazuta a proteinelor.

11

GAMA-GLUTAMIL TRANSFERAZA(GGT) GGTeste prezenta(in ordinea descrescatoare a cantitatilor)in tubii renali proximali,ficat,pancreas si intestin.Este localizata la nivelul memebranei citoplasmatice a numeroase celule,centrul activ al enzimei fiind situat la exterior. GGT din ser provine in special din ficat.Cea mai mare parte este legata de lipoproteine,in special HDL,dar si de LDL.GGT legat de HDL predomina in bolile hepatice non-icterice,in timp ce GGT legat de LDL este crescut in colestaza,12

GGT iar forma hidrosolubila intr-o varietate de boli hepatice. GGT este cel mai sensibil indicator pt depistarea alcoolismului,cresterea activitatii acestei enzime fiind constant si la valori mult mai mari comparativ cu celelalte enzime hepatice dozate in mod curent.La alcoolici nivelul seric al GGTpoate ajunge la valori de 50 ori peste valoarea normala,gradul de crestere depinzand atat de cantitatea de alcool consumata,cat mai alesde persistenta indelungata a consumului.Are rol de asemenea in monitorizarea abstinentei de la alcool. In bolile hepato-biliare GGT se coreleaza cu nivelurileALP.Cresterile nu sunt totusi specifice si pot fi asociate si cu afectiuni pancreatice,cardiace,renale,diabet zaharat.13

Valori de referinta: 500mg/dl semnifica Hipertrigliceridemia extrema in prezenta pancreatitei diagnosticate >1000mg/dl prezinta risc extrem pentru Pancreatita

39

Variatii fiziologice si patologice Variatii fiziologice ale TG. Valorile TG in sange sunt usor mai mari la femei decat la barbati,fiind corelate cu greutatea si varsta. Nivelul acestora se modifica tranzitoriu in sarcina, consumul de alcool si dupa unele medicamente(contraceptive orale,estrogeni,vit C,antiinflamatoare steroide/nesteroide).

40

Variatii patologice Valori crescute >200mg/dl sunt asociate cu un risc crescut de ateroscleroza,boala coronariana,infarct de miocard.Nivelul ridicat al TG poate apare intro varietate mare de dereglari: - afectare hepatica prin boli inflamatorii(hepatite)sau alcoolism - obezitate - ficat gras - pancreatita - infarct de miocard

41

Variatii patologice Valori scazute - Valorile extreme si foarte reduse ale TG(mai putin de 10mg/dl) reprezinta de asemenea o problema.De cele mai multe ori,aceste valori sunt sugestivept un organism malnutrit sau existenta unei malabsorbtii. - Nivele reduse de TG se pot inregistra ins asi la pacientii cu: insuficienta hepatica,hipertiroidism,hiperparatoridism,neoplazii. Colesterolul total si TG sunt dozarile folosite in prima etapa de evaluare a riscului aterogen,in evaluarea prevalentei si diagnosticului bollilor coronariene.42

Dozarea TG Realizarea unui profil lipidic complet lipidograma-se impune ca o necesitate in diagnosticul diferential al dislipidemiilor. TG reprezinta cel mai important depozit de rezerve energetice ale organismului. Sunt partial sintetizate in ficat,mucoaza intestinala si tesutul adipos(endogene) si o parte provin din alimentatie(exogene).

43

Dozarea colesterolului Colesterolul este un alcool policiclic de care se leaga acizii grasi,intalnindu-se in aproape toate alimentele de origine animala.El este transportat prin sange doar in combinatie cu proteinele,sub forma de lipoproteine. Principalele roluri constau in: - Structura membranelor celulare(unde actioneaza ca un agent stabilizator si modulator al fluidititatii membranare) - Precursor in formarea de acizi biliari,hormoni sexuali,vit D. Organismul isi fabrica singur colesterolul necesar(ficat,mucoasa intestinala) si nu are nevoie de nici un aport alimentar de acest fel.Daca alimentele contin o cantitate prea mare de grasimi,colesterolul se depune pe peretii vaselor de sange sub forme de placute numite ateroame.44

Dozarea colesterolului Colesterolul crescut peste valorile normale este un factor de risc important care anunta dezvoltarea unor boli cardiovasculare(cardiopatia ischemica) si cerebrale(AVC). Colesterolul este transportat la nivelul tesuturilor,cuplat cu apoproteinele,sub forma de lipoproteine de tip: - HDL-colesterol(colesterolul bun pt ca este cel responsabil de extragerea colesterolului din tesuturi si transportul acestuia la nivelul ficatului unde poate fi degradat sau convertit in alti metaboliti,cu reducerea deci a nivelului sau plasmatic) si45

Dozarea colesterolului- LDL- colesterol(colesterol rau pt ca este cel ce aprovizioneaza tesuturile cu colesterol),riscul de aparitie al placilor de aterom depinzand mai ales de raportul dintre cele 2 forme de colesterol. Calea principala de excretie a colesterolului este bila in care,alaturi de colesterol,se afla si acizi biliari(produsi de degradare a colesterolului). Recomandari pt determinarea colesterolului:screening-ul factorilor de risc in boala coronariana screening-ul si monitorizarea dislipidemiilor primare si secundare evaluarea riscului de ATS46

Valori de referinta Colesterol total : 160 200 mg/dl Valori de alerta clinica >300 mg/dl. LDL-COL