Upload
diamondnadina
View
249
Download
1
Embed Size (px)
Citation preview
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
1/15
LTM BIOKIMIA
Nama : Nadina Sabila AmanyKelompok/Program Studi : 10 / Teknologi Bioproses
Materi : Kinetika Pertumbuhan Sel
utline :
o Siklus Selo Parameter Pertumbuhan Selo Teknik Analisis Sel
PENGERTIAN DAN TAHAPAN SIKLUS SEL
Siklus sel adalah serangkaian peristi!a berulang yang dilalui sel" siklus sel termasuk pertumbuhan#sintesis $NA# dan pembelahan sel" $alam sel eukariotik# ada dua %ase pertumbuhan# dan pembelahan seltermasuk mitosis" Siklus sel dikendalikan oleh protein regulator pada tiga pos pemeriksaan utama dalamsiklus" Protein memberi sinyal sel untuk memulai atau menunda %ase berikutnya dari siklus"
Sel eukariotik menghabiskan sebagian dari &kehidupan' pada tahap inter%ase dari siklus sel# yang dapatdibagi ke dalam tiga %ase# (1# S dan ()" Selama inter%ase# sel melakukan apa yang seharusnya dilakukan"Meskipun sel memiliki banyak %ungsi umum# seperti replikasi $NA# mereka *uga memiliki %ungsispesi%ik tertentu" Artinya# selama kehidupan sel *antung# sel *elas akan melakukan kegiatan tertentu yang
berbeda dari sel gin*al atau sel hati"
Pada sel prokariot yang tidak memiliki inti sel# siklus sel terjadi elalui suatu proses !a"# dise$utpe$ela%a" $i"er# sedang pada sel eukariot yang memiliki inti sel# siklus sel terbagi men*adi dua %ase%ungsional# &ase S da" M' da" &ase persiapa"' G( da" G):
(* +asa S ,si"tesis-
Merupakan tahap ter*adinya replikasi $NA" Pada umumnya# sel tubuh manusia membutuhkan !aktusekitar + *am untuk menyelesaikan tahap ini" ,asil replikasi kromosom yang telah utuh# segera dipilah bersama dengan dua nuklei masing-masing guna proses mitosis pada %ase M"
)* +asa M ,itosis-
.nteral !aktu %ase M kurang lebih 1 *am" Tahap di mana ter*adi pembelahan sel baik pembelahan biner atau pembentukan tunas" Pada mitosis# sel membelah dirinya membentuk dua sel anak yang terpisah"
.* +asa G ,#ap-
http://www.biologi-sel.com/2012/06/struktur-sel-dan-fungsi-sel-prokariotik.htmlhttp://www.biologi-sel.com/2012/06/struktur-sel-dan-fungsi-sel-prokariotik.htmlhttp://www.biologi-sel.com/2012/06/struktur-sel-dan-fungsi-sel-prokariotik.htmlhttp://www.biologi-sel.com/2013/01/nukleus.htmlhttp://www.biologi-sel.com/2013/01/nukleus.htmlhttp://www.biologi-sel.com/2012/06/struktur-sel-dan-fungsi-sel-prokariotik.htmlhttp://www.biologi-sel.com/2012/06/struktur-sel-dan-fungsi-sel-prokariotik.htmlhttp://id.wikipedia.org/wiki/Replikasi_DNAhttp://id.wikipedia.org/wiki/Replikasi_DNAhttp://id.wikipedia.org/wiki/Sel_(biologi)http://id.wikipedia.org/wiki/Tubuhhttp://id.wikipedia.org/wiki/Manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Kromosomhttp://id.wikipedia.org/wiki/Kromosomhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Nuklei&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Nuklei&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Mitosishttp://www.biologi-sel.com/2013/01/nukleus.htmlhttp://www.biologi-sel.com/2012/06/struktur-sel-dan-fungsi-sel-prokariotik.htmlhttp://id.wikipedia.org/wiki/Replikasi_DNAhttp://id.wikipedia.org/wiki/Sel_(biologi)http://id.wikipedia.org/wiki/Tubuhhttp://id.wikipedia.org/wiki/Manusiahttp://id.wikipedia.org/wiki/Kromosomhttp://id.wikipedia.org/w/index.php?title=Nuklei&action=edit&redlink=1http://id.wikipedia.org/wiki/Mitosishttp://www.biologi-sel.com/2012/06/struktur-sel-dan-fungsi-sel-prokariotik.html
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
2/15
2asa ( yang terdiri dari (1 dan () adalah %ase sintesis 3at yang diperlukan pada %ase berikutnya" Pada selmamalia# interal %ase () sekitar ) *am# sedangkan interal %ase (1 sangat berariasi antara 4 *am hingga beberapa hari" Sel yang berada pada %ase ( 1 terlalu lama# dikatakan berada pada %ase (0 atau &5uies6ent'"Pada %ase ini# sel tetap men*alankan %ungsi metabolisnya dengan akti%# tetapi tidak lagi melakukan proli%erasi se6ara akti%" Sebuah sel yang berada pada %ase (0 dapat memasuki siklus sel kembali# atau
tetap pada %ase tersebut hingga ter*adi apoptosis"
Pada umumnya# sel pada orang de!asa berada pada %ase ( 0" Sel tersebut dapat masuk kembali ke %ase ( 1oleh stimulasi antara lain berupa: perubahan kepadatan sel# mitogen atau %aktor pertumbuhan# atau asupannutrisi"
/* I"ter&ase
Merupakan sebuah *edah pan*ang antara satu mitosis dengan yang lain" 7edah tersebut termasuk %ase ( 1#S# ()"
PEMBELAHAN SEL8eproduksi sel dapatter*adi karena peristi!a pembelahan sel" Pembelahan sel ini dia!alidengan adanya pembelahan kromosom dalam beberapa tahap pembelahan" Pada setiap tahap pembelahan mempunyai 6iri-6iri tertentu yang dapat diamati proses-prosesnya melalui teknik atau perlakuan tertentu yang diberikan pada kromosom dalam sel tersebut"
Adapun pembelahan sel dibedakan men*adi dua ma6am# yaitu Pe$ela%a" Mitosis danPe$ela%a" Meiosis" Pe$ela%a" Mitosis adalah peristi!a pembelahan sel yang ter*adi pada sel-sel somatis sangat akti% pada *aringan meristem yang mengha silkan dua sel anak yang memilikigenotip sama dan identik dengan sel induknya" Sedangkan Pe$ela%a" Meiosis# ter*adi pada sel-selgerminal gamet dengan hasil akhir empat buah sel anak yang haploid dengan komposisi genotip yang
mungkin berbeda dengan sel induknya"
Sebelum ter*adinya peristi!a pembelahan sel# terdapat beberapa peristi!a penting seperti pembelahan kromosom" $alam inti sel terdapat kromosom yaitu benda9benda halus berbentuk batang pan*ang atau pendek dan lurus atau bengkok" Kromosom merupakan pemba!a bahanketurunan" Kromosom dapat terlihat pada tahap-tahap tertentu pada pembelahan inti" Biasanyakromosom digambarkan pada tahap meta%ase"
MITOSIS
MITOSIS adalah 6ara reproduksi sel dimana sel membelah melalui tahap-tahap yang teratur#yaitu Pro%ase Meta%ase-Ana%ase-Telo%ase" Antara tahap telo%ase ke tahap pro%ase berikutnya terdapat masa
istirahat sel yang dinarnakan .nter%ase tahap ini tidak termasuk tahap pembelahan sel" Pada tahapinter%ase inti sel melakukan sintesis bahan-bahan inti
Se6ara garis besar 6iri dari setiap tahap pembelahan pada mitosis adalah sebagai berikut:
a* I"ter&ase
iri-6iri %ase inter%ase sebagai berikut :
http://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_organikhttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_organikhttp://id.wikipedia.org/wiki/Mamaliahttp://id.wikipedia.org/wiki/Apoptosishttp://id.wikipedia.org/wiki/Mitogenhttp://id.wikipedia.org/wiki/Mitogenhttp://id.wikipedia.org/wiki/Nutrisihttp://id.wikipedia.org/wiki/Senyawa_organikhttp://id.wikipedia.org/wiki/Mamaliahttp://id.wikipedia.org/wiki/Apoptosishttp://id.wikipedia.org/wiki/Mitogenhttp://id.wikipedia.org/wiki/Nutrisi
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
3/15
• Selaput nukleus membatasi nukleus
• Nukleus mengandung satu atau lebih nukleolus
• $ua sentrosom telah terbentuk memlalaui replikasi sentrosom
tunggal
• Pada sel he!an# setiap sentrosom memiliki dua sentrosom
• Kromosom yang diduplikasikan selama %ase S# tidak bisa dilihat se6ara indiidual karena belumterkondensasi"
$* Pro&ase
iri-6iri %ase pro%ase sebagai berikut :
• Serat-serat kromatin men*adi terkumpar lebih rapat#
terkondensasi men*adi kromosom diskret yang dapat diamatidengan mikroskop 6ahaya"
• Nukleolus lenyap
• ; (elendong mitotik mulai terbentuk" (elendong ini terdiri
atas sentrsom dan mikrotubulus yang men*ulur dari sentrosom"
• Sentrosom-sentrosom bergerak saling men*auhi# tampaknya didorong oleh mikrotubulus yangmeman*ang di antaranya"
0* Proeta&ase
iri-6iri %ase prometa%ase sebagai berikut :
• Selaput nukleus ter%ragmentasi
• Mikrotubulus yang men*ulur dari masing-masingsentrosom kini dapat memasuki !ilayah nukleus"
• Kromosom men*adi semakin terkondensasi
• Masing-masing dari kedua kromatid pada setiapkromosom kini memiliki kinetokor# struktur proteinterspesialisasi yang terletak pada sentromer"
• Beberapa mikrotubulus melekat pada kinetokor men*adi mikrotubulus kinetokor"
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
4/15
• Mikrotubulus nonkinetokor berinteraksi dengan se*enisnya yang berasal dari kutub gelendongyang bersebrangan
d* Meta&ase
iri-6iri %ase meta%ase sebagai berikut :
• Merupakan tahap mitosis yang paling lama# seringkali berlangsungsekitar )0 menit"
• Sentrosom kini berada pada kutub-kutub sel yang bersebrangan"
• Kromosom ber*e*er pada lempeng meta%ase# bidang khayal yang berada di pertengahan *arak antara kedua kutub gelendong" Sentromer-sentromer kromosom berada di lempeng meta%ase"
•
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
5/15
• Selaput nukleus mun6ul dari %ragmen-%ragmen selaput nukleus selinduk dan bagian-bagaian lain dari sistem endomembran"
• Nukleolus mun6ul kembali"
• Kromosom men*adi kurang terkondensasi
• Mitosis# pembelahan satu nukleus men*adi nukleus yang identik se6aragenetik# sekarang sudah selesai"
GAMBARAN UMUM +ASE MITOSIS
MEIOSIS
Meiosis yaitu tipe pembelahan sel yang mengurangi *umlah set kromosom dari dua men*adi satudalam gamet# mengimbangi penggandaan saat %ertilisasi" Pada he!an meiosis hanya ter*adi pada oariumatau testis" Akibatnya# setiap sperma dan sel telur manusia bersi%at haploid n=)>" 2ertilisasimengembalikan kondisi diploid dengan 6ara mengombinasikan dua set haploid kromosom# dan siklushidup manusia diulangi lagi# generasi demi generasi" 2ertilisasi dan meiosis merupakan 6iri khas darireproduksi seksual pada tumbuhan maupun he!an" 2ertilisasi dan meiosis silih berganti dalam siklushidup seksual# mempertahankan *umlah kromosom yang konstan pada setiap spesies dari satu generasi kegenerasi berikutnya" Sel haploid atau diploid dapat membelah melalui mitosis# bergantung pada tipesiklushidup" Akan tetapi# hanya sel-sel diploid yang dapat mengalami meiosis# karena sel-sel haploid memilikisatu set kromosom yang tidak dapat dikurangi lagi"
Ti#a perisi1a !a"# %a"!a terjadi pada eiosis selaa eiosis l2
1" Sinapsis dan pindah silang" Selama pro%ase l# homolog tereplikasi berpasangan dan terhubung se6ara%isik di sepan*ang lengan oleh struktur protein serupa ritsleting# kompleks sinaptonemal" Proses inidisebut sinapsis" Penataan ulang genetik antara-antara kromatid nonsaudara# dikenal sebagai pindah
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
6/15
silang 6rossing oer# diselesaikan pada tahap ini" Setelah penguraian kompleks sinaptonemal pada pro%ase akhir# kedua homolog sedikit memisah namun tetap terhubung# setidaknya pada satu daerahyang berbentuk-? yang disebut kiasmata" Kiasmata merupakan per!u*udan %isik dari pindah silang"Kiasma tampak seperi palang karena kohesi kromatid saudara masih tetap menyambungkan keduakromatid saudara a!al# bahkan di daerah-daerah yang salah satu kromatidnya kini men*adi bagian
dari homolog lain" Sinapsis dan pindah silang normalnya tidak ter*adi saat mitosis"
)" ,omolog di lempeng meta%ase" Pada meta%ase l meiosis# kromosom ber*e*er sebagai pasanganhomolog di lempeng meta%ase# bukan sebagai kromosom indiidual# seperti pada meta%ase mitosis"
>" Pemisahan homolog" Pada ana%ase l meiosis# kromosom-kromosom tereplikasi pada setiap pasanganhomolog bergerak kearah kutub yang berla!anan# namun kromatid-kromatid saudara dari setiapkromosom tereplikasi tetap melekat" Sebaliknya# pada ana%ase mitosis# kromatid-kromatid saudaramemisah"
GAMBARAN UMUM +ASE MEIOSIS2
PERBANDINGAN MITOSIS DAN MEIOSIS
Pe$a"di"# Mitosis Meiosis
8eplikasi Ter*adi saat inter%ase sebelummitosis dimulai
Ter*adi saat inter%ase sebelummeiosis l dimulai
7umlah pembelahan Satu kali men6akup pro%ase#meta%ase# ana%ase dan
telo%ase
$ua kali# masing-masingmen6akup pro%ase# meta%ase#
ana%ase dan telo%ase
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
7/15
Sinapsis dan kromosomhomolog
Tidak ter*adi Ter*adi saat pro%ase l bersama pindah silang antara kromatidnonsaudara# kiasmata yangdihasilkan men*aga pasangankromosom tetap bersama akibat
kohesi kromatid saudara
7umlah sel anakan dankomposisi genetik
$ua# masing-masing diploid )ndan identik se6ara genetik dengansel induk
@mpat# masing-masing haploidn# mengandung separuh *umlahkromosom sel induk# berbedase6ara genetik dari sel induk dandari satu sama lain
Peran dalam tubuh he!an Memungkinkan de!asamultiselular bertumbuh-kembangdari 3igot# menghasilkan sel-seluntuk pertumbuhan# perbaikan dan pada beberapa spesies# reproduksiaseksual
Menghasilkan gamet#mengurangi *umlah kromosommen*adi separuh danmenyebabkan ariabilitas genetik di anatara gamet
PARAMETER PERTUMBUHAN SEL
Pertumbuhan merupakan proses bertambahnya ukuran atau subtansi atau masa 3at suatu organisme#misalnya kita makhluk makro ini dikatakan tumbuh ketika bertambah tinggi# bertambah besar atau bertambah berat" Pada organisme bersel satu pertumbuhan lebih diartikan sebagai pertumbuhan koloni#yaitu pertambahan *umlah koloni# ukuran koloni yang semakin besar atau subtansi atau masssa mikrobadalam koloni tersebut semakin banyak# pertumbuhan pada mikroba diartikan sebagai pertambahan *umlahsel mikroba itu sendiri" Pertumbuhan merupakan suatu proses kehidupan yang irreersible artinya tidak dapat dibalik ke*adiannya" Pertumbuhan dide%inisikan sebagai pertambahan kuantitas konstituen seluler dan struktur organisme yang dapat dinyatakan dengan ukuran# diikuti pertambahan *umlah# pertambahan
ukuran sel# pertambahan berat atau massa dan parameter lain" Sebagai hasil pertambahan ukuran dan pembelahan sel atau pertambahan *umlah sel maka ter*adi pertumbuhan populasi mikroba .5balali#)00+"
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
8/15
Pertu$u%a" SeL
Pertumbuhan dapat dide%inisikan sebagai peningkatan komponen - komponen seluler" Terdapat duama6am pertumbuhan sel# yaitu pertumbuhan yang berakibat peningkatan ukuran sel tetapi tidak *umlahsel" $an yang kedua adalah pertumbuhan yang diikuti dengan peningkatan *umlah sel" $alam halyang pertama# inti sel membelah tetapi tidak diikuti oleh pembelahan sel"
(ambar 1 Kura Pertumbuhan Sel
,amdiyati# )011
Tahap-tahap pertumbuhan sel yaitu:
1" 2ase ag
Pada saat pertama kali organisme ditumbuhkan pada media kultur yang baru biasanya tidak
segera didapati peningkatan *umlah atau massa sel" alaupun demikian sel tetap mensintesiskomponen seluller" 2ase lag dapat ter*adi karena beberapa %aktor antara lain karena sel yang sudahtua dan kekurangan ATP# essential 6o%a6tors serta ribosom" Substansi substansi ini harus terlebihdahulu disintesis sebelum pertumbuhan berlangsung" Kemungkinan yang lain adalah media pertumbuhan yang berbeda dengan media pertumbuhan sebelumnya" $alam hal ini en3im- en3im baru akan diperlukan untuk penggunaan nutrisi yang berbeda" Selain itu lag %ase dapat ter*adiapabila sel mengalami kerusakan sehingga membutuhkan !aktu untuk perbaikan kembali" amanya lag phase berariasi tergantung pada kondisi sel dan si%at dari media" Sel yang sudah tua atau baru sa*adikeluarkan dan tempat penyimpanan refrigerated atau dikultur dalam suatu media dengankandungan nutrisi yang berbeda akan membutuhkan lag %ase yang lebih pan*ang *ika dibandingkandengan sel yang masih muda dan dikulturkan pada media baru yang sama"
)" 2ase @ksponensial
2ase ini disebut *uga dengan %ase log" rganisme tumbuh dan membelah pada ke6epatanmaksimum tergantung pada si%at genetik# medium dan kondisi pertumbuhan" ke6epatan pertumbuhan konstant# sel membelah dan meningkat *umlahnya doubling dalam interal yangteratur" Pada %ase ini sel mempunyai kesamaan si%at kimia dan %isiologi sehingga banyak digunakandalam studi - studi biokimia dan %isiologi"
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
9/15
>" 2ase Stationer
Pada %ase ini kura pertumbuhan berhenti dan kura horisontal" ,al ini disebabkanketidakseimbagan nutrient dan )# keseimbangan *umlah sel yang membelah dan yang mati# tipeorganisme serta akumulasi limbah toksik seperti asam laktat" Bakteri mampu tumbuh padamaksimum populasi sel cell density 1 C sel/ml sedangkan proto3oa dan alga hanya mamputumbuh pada tingkat populasi 1 C 104 sel/ml"
D" 2ase Kematian
Pada %ase kematian adanya perubahan lingkungan tumbuh seperti kehabisan nutrisi danakumulasi limbah toksik men*adi %aktor penyebab menurunnya *umlah sel hidup" Sel mengalamikernatian dalam pola logaritmik Biyobe# )01)
Ki"etika Pertu$u%a" Sel
Kinetika pertumbuhan sel digunakan untuk menyatakan bagaimana suatu sel tumbuh"Pertumbuhan sel# dalam hal ini mikroba# umumnya mengikuti suatu pola pertumbuhan berupa kura pertumbuhan EsigmoidF model Monod" Kura pertumbuhan sel menyatakan besarnya atau banyaknyakonsentrasi sel yang hidup pada berbagai %ase pertumbuhan selama !aktu tertentu" Terkait dengan la*u pertumbuhannya# hal ini berariasi bergantung pada %ase pertumbuhannya"
(ambar G" Kura pertumbuhan selSumber: Pauline M" $oran# )00)
Kura pertumbuhan sel dia!ali dengan %ase yang bernama 2ase ag" Pada %ase atau tahap ini# selmangalami adaptasi terhadap lingkungannya" Pada %ase ini# sel akan mensistesis berbagai en3im-en3im baru serta komponen struktural yang ia butuhkan" Setelah tahap ini# sel akan mengalami %ase pertumbuhan dan dia!ali pada titik yang bernama 2ase Akselerasi Acceleration Phase" Pertumbuhan selterus dilan*utkan hingga men6apai titik yang bernama 2ase Penurunan Decline Phase" 7ika pertumbuhannya eksponensial# maka pada gra%ik semi-logaritmik %ase pertumbuhan Growth Phase akanterlihat sebagai suatu garis lurus"
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
10/15
Selama proses pertumbuhan terus berlan*ut# akan ter*adi kondisi dimana nutrisi dalam mediumhabis atau ter*adinya akumulasi suatu produk inhibitor" Kondisi ini yang kemudian menyebabkan pertumbuhan menurun dan sel memasuki %ase penurunan" Setelah masa transisi ini# sel akan memasuki%ase stasioner dimana tidak lagi ter*adi pertumbuhan sel yang berarti" Selan*utnya kultur perlahan-lahanmemasuki masa kematian sel Death Phase atau penghan6uran sel seperti lisis"
a*u pertumbuhan sel dapat dinyatakan dalam persamaan berikut:
r X 3 4 x
dimana r X adalah la*u olumetrik dari produksi biomassa kgm ->s-1" Nilai x menyatakan konsentrasi selyang hidup kgm->" Sedangkan H menyatakan la*u pertumbuhan spesi%ik specific growth rate" a*u pertumbuhan spesi%ik menyatakan besarnya peningkatan massa sel per satuan !aktu" a*u pertumbuhanspesi%ik memiliki dimensi T-1"
Tabel 1" Pertumbuhan sel
+ase Deskripsi Laju Pertu$u%a" Spesi&ik
La#
Sel beradaptasi denganlingkunganI pertumbuhan seltidak ada atau sangat ke6il
H J 0
Akselerasi , Acceleration- Pertumbuhan dimulai H HmaC
Pertu$u%a" ,Growth- Pertumbuhan men6apai la*umaksimum H J HmaC
Pe"uru"a" , Decline-
Pertumbuhan melambatdikarenakan nutrisi berkurangatau akumulasi produk inhibitor
H HmaC
Stasio"er Pertumbuhan berhenti H = 0
Keatia" , Death- Sel tidak mampu lagi bertahanhidup dan lisis
H 0
Sumber: Pauline M" $oran#)00)
TEKNIK ANALISIS SEL
Klasi%ikasi 6ara memempela*ari sel dapat dipandang dari si%at selnya# missalnya adalah 6ar mempela*ari
sel hidup dan 6ar mempela*ari sel yang mati" Bisa *uga dipandang dari teknik bagaimana sel itu dipela*ari"
1
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
11/15
$alam uraian ini dipilih alternati% terakhir# yaitu mempela*ari ma6am-ma6am teknik mempela*ari sel"
Pada prinsipnya# ada dua teknik umum mempela*ari selI yaitu:
1" Teknik Analisis .nstrumental
$ua si%at sel yang men*adi dasar pengembangan teknik analisis instrumental pada sel# ialah ukuran
sel dan si%at sel yang tembus 6ahaya" Sel mempunyai ukuran yang sangat ke6il yang dinyatakan dalammi6ron 1 mikron =1/1000 mm = 1/)L"D00 in6i" Sel he!an terke6il men6apai D mu milimikron"
Meskipun demikian# ada beberapa sel proto3oayang mempunyai ukuran men6apai beberapa mm#
misalnya spirostomum dari golongan 6iliata men6apai ukuran > mm Storer dan
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
12/15
diperbesar sesuai dengan kemampuan perbesaran masing-masing lensa pembesarnya" Nilai
perbesaran ini dapat diperoleh dari kombinasi kemampuan perbesaran lensa okuler dengan lensa
ob*ekti%"
$engan mikroskop 6ahaya maka suatu ob*ek mikroskopis dapat diperbesar dari 10 C ke
perbesaran 1000 C" ebih dari itu# mikroskop 6ahaya akan mengalami kesulitan daya pisah atauresolusi" Nilai resolusi adalah kemampuan titik bayangan dapat dipisahkan di ba!ah mikroskop
6ahaya" Kemampuan pemisahan atau nilai resolusi gambar dituliskan dalam persamaan berikut :
D3 ,5'6( 7- 8 ," si" 9-
Keterangan :
• $= kemampuan atau daya pisah bayangan benda terke6il yang dapat di6apai oleh mikroskop
6ahaya"
• 0#41= besaran tetap yamg merupakan dera*at titik bayangn yang tumpang tindih tetapi masih
dapat dilihat terpisah oleh mata pengamat"
• = pan*ang gelombang 6ahaya yang digunakan pada mikroskop 6ahaya" Pan*ang gelombang
minimum 6ahaya yang tampak adalah DL0 nm"
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
13/15
lembaran phase plate pada *alannya 6ahaya" Bayangan %ase kontras dapat memperbaiki daya
pandang tanpa pe!arnaan"
6" Mikroskop 6ahaya terpolarisasi"
Mikroskop ini dilengkapi dengan %ilter polarisasi sekunder yang diletakkan pada sisi antara
preparat dengan lensa ob*ekti% atau pada sisi sebelum lensa kondenser" .ni bertu*uan untuk memperoleh bayangan benda dengan pola susunan molekul yang teratur ter%ibrasi 6ahaya pada
satu sisi sa*a"
d" Mikroskop %loresen
Mikroskop ini diran6ang untuk melihat 6ahaya yang dipan6arkan dari benda-benda
mikroskopis berpendar %loresen" Benda pada preparat diberi penanda molekul yang
berpendar pada struktur tertentu misalnya mikrotubul atau mikro%ilamen"
)" Mikroskop elektron"Mikroskop ini menggunakan tembakan gelombang elektron sebagai sumber iluminasi untuk
mendapatkan man%aat besarnya daya pisah atau daya resolusi bayangan benda yang sangat ke6il
dengam memperke6il pan*ang gelombang yang sangat pendek" (una mendapatkan bayangan#
maka gelombang elektron di%okuskan tidak dengan lensa kondenser melainkan dengan magnet
atau medan listrik elektrostatik" Perbesaran bayangan benda di6apai dengan mengatur lensa"
8uang di dalam mikroskop yang men*adi tempat le!atnya gelombang elektron harus tanpa udara
untuk menghindari kekaburan gambar akibat penyebaran absorbsi gelombang elektron oleh
molekul gas pada ruang udara" ,al lain yang penting adalah preparat mikroskopis harus disiapkandalam keadaan kering dan bebas dari gas olatil" Keuntungan mikroskop elektron adalah
memperoleh gambar bayangan yang perbesarannya sampai 10"000->00"000 C sehingga sekaligus
memiliki daya pisah bayangan benda yang ke6il"
Beberapa ma6am mikroskop elektron sebagai berikut :
a" Mikroskop T@M Transmission @le6tron Mi6ros6ope"
Mikroskop elektron dimana gelombang elektron ditransmisikan melalui preparat" Mekanisme
ker*anya yaitu pada pun6ak tabung pokok diletakkan pistol elektron yang terdiri dari %ilamen
dan anoda" Pada saat beker*a# %ilamen berada pada tegangan listrik yang tinggi L0-10 ribuolt" @lektron yang terlepas dari %ilamen tertangkap oleh anoda dengan ke6epatan elektraon
0#00L-0#00> nm bergantung pada perbedaan tegangan di kedua lokasi tersebut" $i ba!ah
pistol elektron terdapat serangkaian lensa kondensor yang mem%okuskan titik spot elektron
yang intens pada preparat" $i ba!ah lensa proyektor dan layar berpendar# lembaran
%otogra%ik dapat dibuat sehinga akhirnya didapatkan ultra mikroskopis dari preparat tersebut"
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
14/15
b" Mikroskop S@M S6anning @le6tron Mi6ros6ope"
Mikroskop elektron yang ditu*ukan untuk melihat permukaaan tiga dimensi benda yang ke6il
permukaan tiga dimensi sel atau permukaan subseluler" ara ker*a mikroskop elektron yaitu
sumber elektron dipan6arkan dan elektron di%okuskan se6ara intens pada permukaan preparat
dengan bantuan sistem lensa magnetik yang menyerupai lensa kondenser pada T@M" Spotelektron yang ter%okus bergerak bolak-balik ke preparat" $ibandingkan dengan mikroskop
S@M# daya resolusi mikroskop S@M kurang tinggi"
)" Teknik Analisis Sitologi dan Sitokimia
Tu*uan utama mempela*ari sitokimia adalah untuk identi%ikasi dan lokalisasi komponen kimia!i sel#
baik yang si%atnya kualitati% maupun kuantitati%" Selain itu *uga adalah untuk mempela*ari dinamika
perubahan dinamika organisasi sitokimianya yang ter*adi atas perbedaan %ungsinya" $engan demikian#
dapat diharapkan ditemukan peran perbedaan komponen selular dalam proses metabolik sel" Sitokimiamodern# mengikuti tiga metode pendekatan utama# yaitu :
a" Metode %raksionasi
ara ini meliputi homogenasi dan dekstruksi sel# melalui prosedur kimia!i maupun mekanik# diikuti
pemisahan %raksi selular tergantung pada massa# permukaan# graitasispesi%ik"
b" Mikrokimia dan
8/18/2019 Biokim Pertumbuhan Sel
15/15
$A2TA8 P