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BIOL 3725BIOL 3725MicrobiologíaMicrobiologíaEjercicio #1Ejercicio #1
ProntuarioProntuario
��El prontuario del laboratorio lo El prontuario del laboratorio lo podrán podrán accesaraccesar en la siguiente en la siguiente dirección electrónica:dirección electrónica:
http://academic.uprm.edu/~lrios/3725http://academic.uprm.edu/~lrios/3725http://academic.uprm.edu/~lrios/3725http://academic.uprm.edu/~lrios/3725/Prontuario3725Lab.pdf/Prontuario3725Lab.pdf
��Todas las presentaciones están Todas las presentaciones están disponibles en esta dirección.disponibles en esta dirección.
http://academic.uprm.edu/~lrios/3725http://academic.uprm.edu/~lrios/3725
REGLAS DE SEGURIDADREGLAS DE SEGURIDADY NORMAS GENERALES Y NORMAS GENERALES
TÉCNICAS ASÉPTICASTÉCNICAS ASÉPTICAS
�� Lavarse las manos con jabón y secarse con papel Lavarse las manos con jabón y secarse con papel toalla al inicio y final de la sesión .toalla al inicio y final de la sesión .
�� Mantener el pelo recogido para evitar accidentes.Mantener el pelo recogido para evitar accidentes.�� Utilizar los “rack” o gradillas para transportar los Utilizar los “rack” o gradillas para transportar los
tubos de ensayos.tubos de ensayos.�� Ante un derrame o contaminación, cubrir el área con Ante un derrame o contaminación, cubrir el área con �� Ante un derrame o contaminación, cubrir el área con Ante un derrame o contaminación, cubrir el área con
papel toalla, bañar con desinfectante y avisar al papel toalla, bañar con desinfectante y avisar al instructor.instructor.
�� Prohibido pipetear con la boca, utilice los Prohibido pipetear con la boca, utilice los pipeteadorespipeteadores..
�� No marque el material de vidrio con marcadores o No marque el material de vidrio con marcadores o labelslabels permanentespermanentes
�� Material de metal utilizado, desinfectarlo mediante Material de metal utilizado, desinfectarlo mediante flameadoflameado
�� Trabajar las muestras biológicas ante la protección Trabajar las muestras biológicas ante la protección de una flama y/o de una cámara de flujo laminar.de una flama y/o de una cámara de flujo laminar.
�� No colocar material contaminado en contacto No colocar material contaminado en contacto con las superficies de trabajocon las superficies de trabajo
�� Mantenga cerradas puertas y ventanas.Mantenga cerradas puertas y ventanas.�� Material de vidrio contaminado colocarlo en Material de vidrio contaminado colocarlo en
soluciones desinfectantes o en depósitos para soluciones desinfectantes o en depósitos para manejo de este tipo de materialmanejo de este tipo de material
�� ManejarManejar TODOSTODOS los los microorganismosmicroorganismos comocomoposiblesposibles patógenospatógenos..posiblesposibles patógenospatógenos..
�� ColocarColocar laslas banquetasbanquetas o o sillassillas bajobajo la mesa.la mesa.
��FirmarFirmar laslas normasnormas y y reglasreglasde de seguridadseguridad en el en el laboratoriolaboratorio
PruebaPrueba DiagnósticaDiagnóstica
��15 15 minutosminutos
��NO NO escribirescribir la la pruebaprueba!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
��Al Al terminarterminar entregarentregar al instructor!!!!!al instructor!!!!!
MICROSCOPÍA:MICROSCOPÍA:Tipos de MicroscopioTipos de MicroscopioTipos de MicroscopioTipos de Microscopio
Uso y manejoUso y manejo
MicroscopioMicroscopio
�� Simple: a finales de los 1600 Simple: a finales de los 1600 porpor Antony Van Antony Van Leeuwenhoek. Leeuwenhoek.
�� CompuestoCompuesto: Robert Hooke : Robert Hooke inventainventa el el microscpiomicroscpiocompuestocompuesto ((muymuy similar al de similar al de hoyhoy díadía). ).
�� Se Se utilizautiliza parapara aumentaraumentar el el tamañotamaño de de imágenesimágenes�� Se Se utilizautiliza parapara aumentaraumentar el el tamañotamaño de de imágenesimágenesmicroscópicasmicroscópicas y y poderpoder ser vistas ser vistas porpor el el ojoojohumanohumano..
�� InicióInició el campo de la el campo de la microbiologíamicrobiología
�� AnatomíaAnatomía compuestacompuesta porpor dos dos partespartes básicasbásicas: : SistemasSistemas ópticosópticos y y SistemaSistema mecánicomecánico. .
Anatomía del MicroscopioAnatomía del Microscopio
Los Objetivos:Los Objetivos:��Comunes:Comunes:
––4X 4X
––10X10X
––40X40X
––100X (inmersión de aceite)100X (inmersión de aceite)Ocular
––100X (inmersión de aceite)100X (inmersión de aceite)
––Calcular la magnificación total:Calcular la magnificación total:
(magnificación del objetivo X (magnificación del objetivo X magnificación del ocular)magnificación del ocular)
Ejemplo: 10X * 20X = 200XEjemplo: 10X * 20X = 200X
Ocular
Objetivos
Tipos de MicroscopioTipos de Microscopio
��Microscopio de Campo claroMicroscopio de Campo claro
��Microscopio de Campo oscuroMicroscopio de Campo oscuro
��Microscopio de Contraste de FaseMicroscopio de Contraste de Fase
Microscopio de FluorescenciaMicroscopio de Fluorescencia��Microscopio de FluorescenciaMicroscopio de Fluorescencia
��Microscopio Electrónico de Microscopio Electrónico de Transmisión (TEM)Transmisión (TEM)
��Microscopio Electrónico de Rastreo Microscopio Electrónico de Rastreo (SEM)(SEM)
Microscopio de LuzMicroscopio de Luz
��Secciones Secciones ultrafinasultrafinas de la muestra de la muestra
��Magnificación máximaMagnificación máxima-- 1,000X1,000X
��ResoluciónResolución-- menor distancia menor distancia discernible entre dos puntos (0.2µm)discernible entre dos puntos (0.2µm)discernible entre dos puntos (0.2µm)discernible entre dos puntos (0.2µm)
��Fuente de iluminaciónFuente de iluminación––lámparalámpara
��Tinción diferencialTinción diferencial
��Micrografías a coloresMicrografías a colores
Microscopio de Campo ClaroMicroscopio de Campo Claro
Microscopio de Campo OscuroMicroscopio de Campo Oscuro
Contraste de Fase:Contraste de Fase:
Fluorescencia:Fluorescencia:
Microscopía ElectrónicaMicroscopía Electrónica
�� Fuente de iluminaciónFuente de iluminación-- haz de haz de electrones (por filamento de tungsteno)electrones (por filamento de tungsteno)
�� Magnificación máxima 200,000XMagnificación máxima 200,000X
�� Colores artificiales con computadorColores artificiales con computador
M.E. de Transmisión (TEM):M.E. de Transmisión (TEM):
M.E. de Rastreo o Scanning (SEM):M.E. de Rastreo o Scanning (SEM):
TrabajoTrabajo del del diadia de de hoyhoy
1) Aprender a usar el instrumento de trabajo: Microscopio.
2) Observar laminillas
3) Hacer dibujos de lo observado a diversas magnificacionesSiempre comenzamos con la menos magnificación