Breve introducción al mundo de la Hemoterapia.

TOMA DE MUESTRA: a cargo de Técnicos de hemoterapia.

• Donante ingresa a sala de extracción conetiqueta de código de barra asignadoúnicamente para esa donación, el cual semantendrá a lo largo de todos losprocedimientos a seguir.

• Lavado del antebrazo con agua y jabón.(Clorhexidina) Secado.

• Desinfección del pliegue del codo con alcoholyodado y/o etanol al 70%.

• Ligado y venopunción con aguja incluida en elsistema de la bolsa (sist. Cerrado y esteril).

• Carga de tubos previamente ETIQUETADOS.

HEMOCOMPONENTES

Son los componentes de la sangre que se utilizan en tratamientos hemoterapéuticos.

A PARTIR DE SANGRE ENTERA SE PREPARAN :

• Concentrado de Eritrocitos o G.Rojos

• Concentrado de Leucocitos o G.Blancos

• Concentrado Plaquetario

• Plasma Fresco Congelado (PFC)

• Plasma simple ó modificado ó de Banco

• Crioprecipitados

La sangre entera se recolecta en bolsas que contienen una

solución anticoagulante y conservante.

Anticoagulante conservante: CPDA(citrato- fosfato – dextrosa - adenina)

• Dextrosa: Para seguir alimentando las células.

• Adenina: Sustrato para la síntesis de ATP mant. la energía celular

• Fosfato: Amortiguador . Controla el ph.

• Citrato: Quelante del Ca ++.

Las bolsas están preparadas p/ recolectar 450 ml de sangre entera CPDA: 60-70 ml.

Si se recolecta menos volumen = Unidad de bajo volumen. Diluida.(Se estudia pero no se transfunde)

Preparación de hemocomponentes: centrifugación yseparación de los componentes sanguíneos en un sistemacerrado. A diferentes tiempos y T°

Bolsa Triple

Glóbulos rojos Plasma Plaquetas

GLOBULOS ROJOS

• Se obtienen 250 ml aprox.

• Almacenamiento: 1-6 ºC.

• Vto: CPDA: 35 días.

• GR congelados con glicerol: 10 años.

• Compatibilidad donante Receptor (ABO-Rh)

Determinante antigénico en su membrana

PLASMA FRESCO CONGELADO

• Es el plasma separado de los elementoscelulares de la sangre total y congeladodentro de las 8 horas siguientes a lacolección.

• Contiene todos los factores de lacoagulación y todos los inhibidoresnaturales.

PFC

• Almacenamiento -20ºc o menos:

• Vida útil: 12 meses.

• Volumen: 200-250 ml Excedentes

• Industria Farmacéutica Planta de Hemoderivados de

Cordoba.

PLAQUETAS

Se preparan a partir de sangre total, se obtiene plasma

rico en plaquetas, luego se concentran las plaquetas

por centrifugación y remoción del plasma.

• Almacenamiento: 20°C a 24°C: rotación continua.

• Volumen: 50 -70 ml

• Duración: 3 - 5 días agitación continua.

• Dosis:1 unidad cada 10 Kg de peso c/24 hs.

• Se espera aumento de 50.000 plaq/mm3 /unidad

Compatibilidad en transfusión de GR

ROL DE TÉCNICOS DE LABORATORIO EN BANCO DE

SANGRE

Misión. Función y Tareas.

Responsabilidad, honestidad, cumplimiento

Contribuir a la armonía y buen ambiente laboral. Trabajo en equipo.

Agentes de salud: Promoción

Control de insumos

Procesamiento y validación de muestras y controles

Controles de calidad de hemocomponentes.

Validación de resultados

Colaborar c/ Bioquímicos en todas las tareas inherentes a su función.

Colaborar con Médicos si fuera necesario

LABORATORIO ITT

(INFECCIONES TRANSMISIBLES POR TRANSFUSION)

SEROLOGÍA BIOLOGIA MOLECULAR

POE: Procedimiento operativo estándar

Método ordenado de los pasos a seguir (Inicio a fin de jornada laboral)

Secuencias exactas

Manera eficiente y segura de llevar a cabo las practicas de lab.

Detallan funciones y responsabilidades

Garantizan la calidad

REGISTROS

• Las T° de todas las heladeras y baño María se controlan 4 veces/ día.

• Fecha apertura, Lote, Vto, operador: todoreactivo que se abre.

• Fecha y operador de todos los mantenimientos

• Toda planilla diaria: fecha, doble operador (seguridad)

APARATOLOGIA

Heladeras, Baño María, Centrifugas,Termómetros, Pipetas: estrictamente

controlados y calibrados para que lastemperaturas y cantidades sean exactas ó seencuentren dentro del rango aceptable devariación.

También a los equipos de ELISA,Quimioluminiscencia y BM se les realizanmantenimientos diarios, semanales,semestrales y anuales para su correctofuncionamiento evitando que surjaninconvenientes durante los procesos.

Uso de elementos de Bioseguridad obligatorios

Guardapolvo de la Institución

Guantes de látex (sin polvo BM)

Gafas

BUENAS PRACTICAS DE LAB!

Limpieza de mesadas. Soluciones

• Hipoclorito de Sodio 10%

• Agua destilada/desionizada

• Alcohol etílico 70%

(Acción: antibacteriana, fungicida, bactericida)

• BM: se preparan diariamente.

• Pisetas rotuladas c/u

• Mesadas divididas aéreas: sucia ó limpia

ETAPAS DE TRABAJO EN EL LABORATORIO

• Retiro de tubos etiquetados con código de barra de la sala de extracción.

• Ingreso a la planilla diaria de trabajo.

1. PREPARACION DE MUESTRAS

2. PROCESAMIENTO DE MUESTRAS

3. COMPAGINACION DE RESULTADOS

4. INFORME DE RESULTADOS

MUESTRAS

LABORATORIO DE INMUNOSEROLOGIA

Dos tubos de khan de plástico BD Vacutainer 3 ml sellados al vacío (c/s gel acelerador ó gránulos) SUERO

LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR

Un tubo de hemólisis de plástico 6 ml BD Vacutainer sellado al vacío con anticoagulante (EDTA K2) PLASMA

¡HOMOGENEIZAR!

LABORATORIO DE SEROLOGIA

1.Preparación muestras

• Baño María 37°C- 20 min; centrifugados 20 min a4000 RPM observando que queden libres defibrina, varillando y repitiendo cent si fueranecesario.

• Centrífuga con programa pre-establecido.

• Ligera hemolisis o lipemia no alteran los resultados.

2. Procesamiento. Técnicas

A. ELISA: Inmunoensayo con Ag inmovilizado

B. HAI: detecta Ac mediante la exposición de suero frente a GR sensibilizados con Ag plasmático

C. Aglutinación directa en placa: detección de Ac

D. Quimioluminiscencia (Architect i2000sr): analizador modular de ensayos de alto rendimiento. Tecnología: CMIA( Inmunoanálisisquimioluminiscente en macropartículas)

2.Procesamiento. Mantenimientos y controles

• Se realizan diariamente en todos los equipos

• Controles internos: monitorear el desempeño de las técnicas empleadas p/cada marcador, p/ reducir, detectar y corregir eventuales defectos. Dos: Kit comercial y Multireactivo Htal.Garrahan.

• Evaluación diaria de curvas de controles de todos los ensayos.

• Calibración en caso de necesidad.

LEY NACIONAL DE SANGRE 22.990

Pruebas de tamizaje ó screening

Determinación obligatoria:

1. Sífilis

2. Brucelosis

3. Chagas

4. HTLV (I yII)

5. HIV (Ag/Ac)

6. HCV (Ac o Ag/Ac)

7. HBV (HBsAg y Anti- Core)

SIFILIS BRUCELOSIS

Treponema Pallidum Brucellas (5 sp)

BACTERIAS

Técnicas de aglutinación directa en placa.

Detectan Anticuerpos.

• RPR: reagina plasmática. Prueba no treponémica

• Rosa de Bengala: Anticuerpos anti- Bruc. (IgG-IgM)

ROSA DE BENGALA

RPR

PRUEBAS DE AGLUTINACION DIRECTA

CHAGAS: parasitaria. Trypanosoma Cruzi

• Obligatorio 2 Métodos: CMIA (Chagasrecombinante) y ELISA (Chagas lisado)

• Tercer método: HAI (Orientación médico cardiólogo)

Detecta Ac diferentes fragmentos ó segmentos del parasito.

VIRUS

HTLV (IyII) * HIV I/II *HBV *HCV

QUIMIOLUMINISCENCIA (CMIA)

* Combo: Ag-Ac.

BIOLOGIA MOLECULAR

DA VINCI : ELISA (Chagas)

ARCHITECT i2000: CMIA

En la mayoría de los bancos de sangre se utilizan pruebas de tamizaje con valores

de corte (cut off) establecidos por el fabricante.

Todo donante reactivo en banco de sangre debe ser derivado a un efector de

salud para confirmar el diagnóstico y recibir la atención médica pertinente.

LABORATORIO BIOLOGIA MOLECULAR

• ACCESO RESTRINGIDO

• Extrema limpieza y orden. (Contaminación)

• Fundamento: búsqueda de ADN/ARN viral

• Equipos: HAMILTON/ COBAS: AMPLIPREP Y TAQMAN

• Muestras: Plasma. Centrifuga: 20 min a 3200 RPM.

• Por largada: max.120 muestras. Pooles de 6. Con 4 controles/largada y control interno.

• Muestras individuales: REACTIVIDAD.

• Proceso dura 5-6 hs.

HAMILTON: POOL DE MUESTRAS

COBAS AMPLIPREP: PREPARACION DE MUESTRAS

COBAS TAQMAN: AMPLIFICACIÓN

TRAZABILIDAD

• La asignación de un número de identificación único a cada donación permite el seguimiento de los productos generados.

• De esta forma corroboramos que toda muestra se corresponda con la bolsa madre(tubo-bolsa). Como también que al momento de transfundir la unidad se conozca el origen y la trayectoria de la misma. (Donante – Receptor)

3 y 4. Compaginación e informe de resultados.

Doble control de informes de resultados, en DOS registros: sistema informático y registro en papel LEGAL

Validación Bioquímica. Liberación diaria.

Criterios de citación de donantes reactivos.

¡MUCHAS GRACIAS!

PROGRAMA DE EDUCACIÓN CONTINUA PARA TÉCNICOS DE LABORATORIO – PECTL

EDICIÓN 2019