Upload
mihai66666633333
View
221
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
7/30/2019 carte micro
1/121
MARGARETA ZARA
MICROBIOLOGIE SPECIAL
- 2007 -
7/30/2019 carte micro
2/121
1
CUPRINS
Pg.
CAP. I - CONSIDERAII GENERALE PRIVIND
MICROBIOTA ALIMENTELORI INCIDENA
MICROORGANISMELOR CONTAMINANTE.. 5
-Microbiota specific.......................................................... 6
. -Microbiota nespecific.................................................. 6
- Clasificarea microorganis contaminante...................... 6
CAP. II - MICROBIOLOGIA PRODUSELOR DE
ORIGINE ANIMAL. .....................14
2.1.MICROBIOLOGIA LAPTELUI................................................ 14
2.1.1. Contaminarea intern....................................................14
2.1.2.Contaminarea extern.................................................. 17
2.1.3. Grupele de microorganisme din lapte isemnificaia lor............................................................... 18
2.1.4.Fazele de dezvoltare a microbiotei laptelui..19
2.2. MICROBIOTA LAPTELUI PASTEURIZAT.........................20
2.3.MICROBIOLOGIA LAPTELUI PRAF.......................................20
2.4. DEFECTELE DE NATUR MICROBIAN ALE
LAPTELUI I ALE LAPTELUI PASTEURIZAT..21
2.5. MICROBIOLOGIA PRODUSELE LACTATE
ACIDE.................................................................................... 22
2.5.1.Defecte de natur microbian...................................... .26
2.6. MICROBIOLOGIA UNTULUI.................................................26
2.7. MICROBIOLOGIA BRNZETURILOR............................... 28
7/30/2019 carte micro
3/121
2
2.7.1.Alterri microbiene ale brnzeturilor....................... 30
2.8.PROCESE MICROBIOLOGICE LA PRELUCRA
- REA I CONSERVAREA CRNII 32
2.8.1.Surse de contaminare microbian a crnii............... 33
2.8.2.Factorii care condiioneaz dezvoltarea
microorganismelor n carne. 35
2.8.3.Particulariti ale microbiotei crnii de pasre....... 39
2.8.4.Particulariti ale microbiotei crnii de pete. ...... 40
2.8.5.Microorganisme transmisibile prin carne i factori
de risc............................................................................ 41
2.8.6. Microbiologia preparatelor din carne ................... 41
2.8.7.Defecte i alterri microbiene................................... 43
2.8.8.Culturi starter utilizate n industria preparatelor
din carne...................................................................... 44
2.9. MICROBIOLOGIA OULOR..................................................462.9.1.Alterri microbiene ale oulor...................................... 48
CAP. III - MICROBIOLOGIA PRODUSELOR DE
ORIGINE VEGETAL................................. 49
3.1. PROCESE MICROBIOLOGICE LA FABRI
- CAREA BERII..........................................................................49
3.1.1.Alterri microbiene ale berii.
.......................................... 553.2. MICROBIOLOGIA VINULUI................................................ 57
3.2.1.Microbiota strugurilor i a mustului............................ 58
3.2.2.Rolul drojdiilor n fermentarea mustului.................... 60
3.2.3.Fermentaia spontan a mustului de struguri............... 62
3.2.4.Fermentaia malo-lactic.................................................... 63
7/30/2019 carte micro
4/121
3
3.2.5.Boli i defecte microbiene ale vinurilor.......................... 64
3.3. PROCESE MICROBIOLOGICE LA FABRI -
- CAREA SPIRTULUI........................................................ 69
3.3.1.Obinerea spirtului din materii prime
amidonoase................................................................. 69
3.3.2.Obinerea spirtului din melas..................................... 70
3.4. BIOTEHNOLOGIA OBINERII DROJ -
-DIEI COMPRIMATE............................................................ 73
3.4.1.Procese ce au loc la pstrarea drojdiei
comprimate................................................................... 74
3.4.2.Defecte microbiene.......................................................... 75
3.5. PROCESE MICROBIOLOGICE N INDUSTRIA
DE MORRIT-PANIFICAIE.................................. 76
3.5.1.Microbiologia cerealelor................................................76
3.5.2.Modificri ale microbiotei i calitii boa-
-belor la conservare. ................................................... 79
3.5.3.Microbiologia finurilor................................................... 82
3.5.4.Procese microbiologice la fabricarea pinii.................. 83
3.5.5.Defecte microbiene ale pinii n timpul pstrrii......... 87
3.6. PROCESEMICROBIOLOGICE LA FABRICA
- REA PASTELOR FINOASE......................................... 89
3.7. PROCESE MICROBIOLOGICE LA FABRICA -- REA BISCUIILOR.......................................................... 90
3.8. PROCESE MICROBIOLOGICE LA PSTRA -
- REA SEMINELOR OLEGINOASE I LA FABRICA -
-REA ULEIULUI......................................................................90
3.9. MICROBIOLOGIA ZAHRULUI I A PRODUSELOR
7/30/2019 carte micro
5/121
4
ZAHAROASE. . 92
3.9.1. Procese microbiologice la cultivarea ipstrarea sfeclei de zahr..... 92
3.9.2 Alterri microbiene ale sfeclei n siloz........................... 93
3.9.3.Incidena proceselor microbiologice n
etapele tehnologice...................................................... 94
3.9.4.Microbiologia zahrului brut i rafinat........................ 97
3.9.5.Procese microbiologice la fabricarea
produselor zaharoase.................................................. 98
3.10. MICROBIOIOGIA FRUCTELOR......................101
3.10.1.Microorganisme ageni de alterare a fructelor.... 102
3.10.2.Microbiologia sucurilor i a buturilor
rcoritoare.......................................................... 104
3.11. MICROBIOLOGIA LEGUMELOR.............................. 105
3.11.1.Alterri microbiene ale legumelor....................... 1053.11.2.Procese microbiologice la murare.......................... 107
3.11.3. Microbiologia conservelor.................................... 108.
CAP IV. MICROBIOLOGIA PREVIZIONAL........ 110
4.1. ETAPELE MODELRII CRETERII MICROBIENE... 111
4.1.1.Clasificarea modelelor.............................................. 113
4.1.2.Aplicaiile microbiologiei previzionale................... 114
4.1.3.Baze de modele............................................................ 116
BIBLIOGRAFIE....................................................................... 118
7/30/2019 carte micro
6/121
5
CAP. I - CONSIDERAII GENERALE PRIVIND
MICROBIOTA ALIMENTELORI INCIDENA
MICROORGANISMELOR CONTAMINANTE
Produsele alimentare conin, n mod constant i n numr destul de
mare, diferite microorganisme. Studiul microbiotei alimentelor a condus la
stabilirea n diferite ri a unor norme microbiologice privind ncrcarea cu
microorganisme a alimentelor, formarea microbiotei n condiiile proceselor
tehnologice de prelucrare a alimentelor, rolul microorganismelor la cretereavalorii biologice i alimentare i rolul etiologic al unor alimente n
transmiterea microoganismelor patogene.
Valoarea alimentar este dat de: valoarea nutritiv, valoarea
senzoriali gradul de inocuitate (absena din alimente a microorganismelor
patogene, a substanelor toxice microbiene i a organismelor care produc
infestarea: oulor de parazii, insecte).
Poluarea microbian se refer la cile prin care, n produselealimentare, pot ajunge, ocazional, microorganisme de alterare a alimentelor,
ce pot forma n aliment substane toxice sau microorganisme
patogene/toxicogene, ageni ai mbolnvirilor prin consum de alimente
contaminate.
Microorganismele benefice, introduse n mod dirijat sub form de
culturi pure pentru creterea calitii produselor alimentare, nu sunt
considerate contaminani dei, n funcie de condiiile de activitate i de
durata n care ele sunt active, acestea pot s produc uneori defecte
senzoriale.
Microbiota alimentelor poate fi difereniat n microbiota specifici
nespecific.
7/30/2019 carte micro
7/121
6
Microbiota specific. Este alctuit din microorganisme (culturi
starter) introduse dirijat n produs n scopul obinerii unor transformri
dorite. n aceeai categorie intr i microbiota care se formeaz n etape
tehnologice determinate (la murarea verzei i a altor legume, la fermentarea
mustului .a.) i care realizeaz nsuiri senzoriale i de compoziie
obligatorii, cu o influen pozitiv asupra alimentelor.
Microbiota nespecific. Include microorganismele care ajung n
organe i n esuturi ale organismelor vii, n cazul mbolnvirii sau
distrugerii funciilor de barier, n condiii de traume, nfometare,
supranclzire/suprarcire a acestora. Cnd nu se pstreaz condiiile
sanitare n etapele de pregtire, prelucrare, transport i pstrare este posibil
o contaminare secundar. Microbiota nespecific poate fi reprezentat de
microorganisme organotrofe (saprofite) i patogene. Microorganismele
saprofite prezente n produse pot condiiona, ntr-o serie de cazuri,
dezvoltarea unor procese biochimice obligatorii i, deci, s condiioneze
calitatea alimentelor. n acest caz, ele devin specifice pentru microbiotadat
a produsului. Avnd nsuiri antagoniste n raport cu alte microorganisme,
acestea, adesea, asigur conservarea produselor alimentare i consumul este
lipsit de pericol epidemiologie.
Clasificarea microorganismelor contaminante. Microorganismele
contaminante pot fi grupate, n funcie de proprietile fiziologice i de
aciunea lor asupra alimentelor, n urmtoarele categorii: organotrofe,
patogene/facultativ patogene i strict patogene.
Microorganismele organotrofe (saprofi te). Sunt foarte
rspndite n natur i produc degradri ale alimentelor cnd se afl n
numr mare, ca rezultat al aciunii lor asupra compuilor organici din
aliment. Microorganismele care produc alterarea produselor alimentare au
mai ales activitate proteolitic. Contaminarea produselor alimentare i
7/30/2019 carte micro
8/121
7
nmulirea microorganismelor n produse este nedorit, deoarece ele scad
valoarea nutritiv i biologic i, n unele cazuri, fac imposibil folosireaprodusului n nutriie. Alturi de modificarea nsuirilor senzoriale, micro-
organismele pot produce compui toxici. Din aceast categorie de
microorganisme fac parte cele prezentate n continuare.
Bacteriile de putrefacie degradeaz alimentele bogate n proteine n
care, prin acest proces, se pot acumula substane toxice (amine biogene
toxice). Aminele produc i modificri de gust i miros, ceea ce avertizeaz
consumatorul de prezena produilor de putrefacie. Histamina, ns, estelipsit de gust i miros, astfel nct este posibil consumarea produselori
mbolnvirea. Histamina este produs prin aciunea lui Achromobacter
histaminicus n produsele de carne, dar a fost detectati n vinuri, unde se
formeaz sub aciunea bacteriilor din genulPediococcus.
Microorganismele toxicogene cauzeaz mbolnviri prin consum de
alimente n/pe care s-au dezvoltat, producnd metabolii cu efect toxic
asupra celor care le consum. Perioada de incubaie i simptomeleevideniate prin investigaii pot fi corelate cu alimentul ingerat.
Dintre agenii intoxicaiilor prin alimente contaminate fac parte
urmtoarele microorganisme:
- Clostridium botulinum, care produce intoxicaii grave (botulism)
datorate elaborrii n alimente de neurotoxine ce produc sindrom
neuroparalitic cu efect letal. Manifestarea strii de boal (uscciunea gurii,
viziunea dubl, constipaie, moartea datorit paraliziei muchilor ce
funcioneaz reflex) are loc dup 1-10 zile i cazurile letale ajung pn la
68%. Toxinele botulinice au o toxicitate ridicat, nct o doz de 1g poate
omor un om de 70 kg. Intoxicaia se produce mai ales prin consum de pete
i conserve de pete, produse vegetale, conserve insuficient sterilizate.
Aceasta se explic prin faptul c bacteriile sporulate sunt inactivate la
120C, n timp de 4-10 min, n timp ce la fierbere sunt necesare 6 h pentru
7/30/2019 carte micro
9/121
8
inactivarea lor pe cale termic. Dac sterilizarea nu este suficient la
pregtirea conservelor, endosporii supravieuitori ai tratamentului termicpot germina la pstrare i, n stare activ de cretere, produc toxine. Tulpini
non-proteolitice tip E au un minim de cretere la temperatura de 3C i
prezint risc la conservarea produselor refrigerate;
- Staphylococcus aureus, care produce intoxicaii cu rat redus de
letalitate i cu o perioad scurt de incubare, chiar dup 30 min de la
ingerare. Se transmite de la indivizii purttori de tulpini enterotoxice prin
intermediul unor alimente gata preparate pstrate la temperatura camerei:creme, produse de patiserie, carne, lapte de la animale bolnave. Specia S.
aureus se dezvolt i se nmulete bine la 37C, dar poate crete n
domeniul 6...45C. Dei bacteriile pot fi distruse uor, au indicele de
reducere decimal D60=2-5 min, enterotoxinele sunt mai termostabile, astfel
nct la 60C sunt inactivate n 16h, iar la 80C n 5-19 min. Toxinele sunt
exogene, iar starea de boal se manifest la scurt timp dup ingerare. Riscul
de intoxicaie crete deoarece, prin dezvoltarea acestor bacterii, nu apar nmod obligatoriu modificri de gust i miros ale alimentului. Specii ale
genului Staphylococcus: S. faecalis, S. bovis, S. durans provoac posibile
stri de toxiinfecie, cnd concentraia bacteriilor n produs este de
106- 107/g;
- Bacillus cereus i, n ultimii ani, Bacillus licheniformis i Bacillus
subtilispot fi implicate n producerea de intoxicaii.B. cereuspoate produce
dou tipuri de toxine. Astfel, poate produce sindrom emetic (greuri, stri de
vom) observat dup 1 - 5 ore de la consum, frecvent prin consum de orez
fiert/prjit sau sindrom manifestat prin stri diareice, dup 8-16 ore, ca
urmare a consumului de alimente renclzite, preparate cu boia de ardei sau
alte condimente ce pot conine un numr mare de spori;
Mucegaiurile toxicogene produc intoxicaii denumite micotoxicoze,
cu o perioad de incubare prelungit, nct este dificil asocierea
7/30/2019 carte micro
10/121
9
mbolnvirii cu alimentul incriminat. Mucegaiurile pot forma colonii la
suprafaa produsului i n etapa de cretere colonial, o dat cu apariiasporilor, pot s sintetizeze produi secundari de metabolism de natur
hidrocarbonat, cu o toxicitate deosebit de ridicat. Omul i animalele pot
s sufere intoxicaii prin consum de alimente mucegite, intoxicaii care se
manifest prin mbolnviri ale diferitelor organe (ficat, rinichi). Dintre bolile
produse se amintesc: ergotism, aleucie toxic alimentar (ATA),
hepatocarcinogenez, nefrotoxicoze, sindrom hemoragic, poliurie .a. Mico-
toxinele fungice au o toxicitate ridicat i concentraia maxim admispentru produse mucegite pentru a fi acceptate n consum este foarte redus
(CMA = 5-30g/kg produs alimentar). Majoritatea micotoxinelor acioneaz
prin inhibarea aciunii enzimelor implicate n sinteza de proteine, pot
produce modificri n structura acizilor nucleici i efectul se manifest printr-
o nmulire anarhic a celulelor cu apariia tumorilor maligne. Deoarece
aceste micotoxine nu conin azot n molecul, ele nu pot fi inactivate pe cale
termic, fiind deosebit de termostabile. Sunt rezistente la aciunea factoriJorde mediu, se oxideaz foarte greu i efectul lor se poate manifesta ani de zile.
Acelai mucegai poate s produc mai multe tipuri de micotoxine i aceeai
micotoxin poate fi produs de mai multe specii sau genuri.
Nu se cunosc metode eficiente pentru eliminarea total a micotoxinelor din
alimente. Calea unic pentru evitarea formrii lor este prevenirea
dezvoltrii mucegaiurilor pe alimente. Dei nu toate mucegaiurile produc
micotoxine, este recomandat a nu se consuma produse mucegite pentru
eliminarea riscului de intoxicaie.
Produc micotoxine specii aparinnd urmtoarelor genuri:
- genulAspergillus - reprezentanii genului produc aflatoxine denumite
astfel de la speciaAspergillus flavus; se cunosc 12 aflatoxine, dintre care cele
mai toxice sunt: B1, B2, G1, G2. Iniialele provin de la fluorescena pe care o
dau aceste toxine prin expunerea plcii cromatografice la radiaii UV cu
7/30/2019 carte micro
11/121
10
=360nm (blue = albastru, green = verde), n timp ce numerele se refer la
ordinea de migrare pe cromatogram.
Aflatoxinele M1, M2, cu toxicitate mai redus, pot fi detectate n laptele
provenit de la animale hrnite cu furaje mucegite cu specii toxicogene.
Mai produc aflatoxine tulpini ale speciilor: Aspergillus niger,
Aspergillus parasiticus, Aspergillus wenti. Aflatoxinele au efect toxicogen
asupra animalelori produc ciroze n 3 sptmni de la hrnirea acestora cu 1
mg /kg corp. nclzirea la 120C, timp de 4 h, nu distruge n totalitate aceste
micotoxine. Aflatoxinele nu sunt solubile n ap, ci n solveni organici, daracetia nu pot fi folosii pentru ndeprtarea micotoxinelor, deoarece prin
extracie se pierde valoarea alimentar a produsului.
Alte micotoxine (sterigmatocistine, ochratoxine, clavacina) au o
toxicitate mai redus i sunt produse de unele tulpini aparinnd speciilor:
Aspergillus niger, Aspergillus clavatus, Aspergillus ochraceus;
- genulPenicillium - specii ale genului pot produce peste 60 de toxine,
mai ales cnd se dezvolt pe cereale i furaje.Dintre speciile productoarefac parte: P islandicum care se dezvolt pe orez i produce 2 micotoxine:
islanditoxina i luteoskirina. Pe fructe se dezvoltP. expansum, care produce
putrezirea albastri sticloas a merelori sintetizeaz patulina. Patulina este
rezistent la temperaturi ridicate, la pH acid i are efect cancerigen. Dac
sucul de fructe este supus fermentaiei, o parte din toxin se elimin din
lichidul fermentat.
Alte specii: P. citrinum produce citrinina; P. citreoviridae -
citreoviridina; P. cyclopium - cyclopiazina;
- genul Fusarium, care produce trichotecene ce pot fi sintetizate i la
temperaturi sczute, deosebit de rezistente n timp (mucegaiurile pot s moar
dar toxina rezist ani de zile). Specii toxicogene: F. sporotrichoidesproduce
sporofusariogenina; F. nivali produce nivalenol. Prin consum de produse
alimentare contaminate se produce ATA;
7/30/2019 carte micro
12/121
11
- genulRhizopus - specii ale genului produc micotoxine care determin
stri de oboseali poliurie.
Mucegaiuri din genurile Cladosporium, Ustilago, Stachybotris,
Walemia produc toxine la mucegirea cerealelor. Consumul de furaje
contaminate cu mucegaiuri toxicogene poate cauza moartea animalelor
(cazuri mai frecvent ntlnite la oi i la cai), iar dac animalul nu a ingerat
doza letal, micotoxinele se acumuleaz n diverse esuturi/ organe, sau se
pot elimina prin lapte, iar n cazul psrilor, prin ou.
Microorganismele patogene/facultativ patogene transmisibil e
prin alimente. Microrganismele care produc toxiinfecii alimentare sunt
patogene sau facultativ patogene. Ele se dezvolt pe alimente i produc
mbolnviri la om, atunci cnd gradul de contaminare al alimentului
respectiv este mare. Starea de boal apare n scurt timp de la ingerarea
alimentului (2-12 h) i se caracterizeaz prin stri de vom, diaree, dureri
abdominale acute care determin scderea capacitii de munc a omului i,
funcie de cantitatea de substan toxic ingerati de starea organismului,efectul este letal. n general, starea de toxiinfecie poate dura cteva zile,
dup care are loc vindecarea.
Dintre agenii toxiinfeciilor alimentare fac parte bacterii aparinnd
urmtoarelor genuri/specii:
- Salmonella, care cuprinde specii ce sunt ageni importani ai
toxiinfeciilor alimentare: Salmonella enteridis, S. dublin, S.virchow, S.
typhymurium .a. Toxinele sunt intracelulare, deci se formeazi rmn n
celula bacteriei. Dup consumul produsului are loc, sub aciunea HCI din
stomac, distrugerea celulei bacteriene i eliminarea toxinei din celule.
Aceste bacterii se pot nmuli pe alimente, dar nu produc modificri
senzoriale. Dintre alimentele cu risc de contaminare fac parte produsele
lactate, carnea de pui, oule. n gastroenterite, bacteriile se multiplic n
lumenul intestinal i sindromul este evident dup 12-24 ore de la consum.
7/30/2019 carte micro
13/121
12
Pot produce febra enteric, cnd infecia se face cu Salmonella typhi i
Salmonella paratyphi;
- Listeria monocytogenes, care produce rar listerioze (letalitate n 30-
50% din cazuri), cu o perioad de incubaie de cteva sptmni. Recent s-a
stabilit c aceste bacterii, foarte rspndite n ap, sol, plante, pot fi
vehiculate prin alimente. Este o bacterie psihrotrof i crete n alimente
pstrate prin refrigerare, alimente gata preparate, consumate dup
renclzire, n care produc listeriolizin;
-Escherichia coli, care poate prezenta tulpini oportunist patogene cu
serotipuri enterotoxice - ageni ai enteritei infantile, enteropatogene care se
pot dezvolta pe epiteliul intestinal, verocytotoxice - produc colite
hemoragice (se transmit prin alimente i produc infecia chiar atunci cnd
numrul de celule este foarte redus) i serotipuri enteroinvazive
asemntoare taxonomic cu bacterii din genul Shigella dysenterie.
Majoritatea tulpinilor normal ntlnite n microbiota intestinal, aparinnd
luiE. coli, sunt lipsite de risc i pot fi folosite ca indicatori igienico-sanitarin controlul microbiologic al alimentelor;
- Yersinia enterocolitica, care produce enterite caracterizate prin
diaree, febr i dureri abdominale (manifestri similare apendicitei), n
special la copii. La btrni poate produce septicemii i complicaii cum ar fi
artrite, meningite. Este o bacterie psihrotrof i poate crete i la
temperaturi de 0...4C; a fost izolat din lapte, ngheat, carne de porc;
-
Vibrio parahemolyticus, care este o bacterie halofil izolat din apemarine (zone tropicale). Se transmite prin scoici, crustacee, pete. Dup
consumul produsului contaminat, dup o perioad de 12-24 ore,
toxiinfecia se manifest prin diaree, asociat cu dureri abdominale acute;
- Vibrio cholerae, care poate produce holera i o diaree exploziv, cu
efect letal n peste 40% cazuri, dac nu se aplic un tratament adecvat. Poate
7/30/2019 carte micro
14/121
13
crete pe diferite alimente i se consider c holera demareaz ca o
toxiinfecie alimentar;- Aeromonas, care cuprinde bacterii ce sunt contaminai comuni ai
alimentelor cu aciditate redusi awridicat, pstrate la temperatura camerei
sau prin refrigerare. Produce cytotoxina i hemolizina dnd stri diareice la
copii;
- Clostridium perfringens, care se elimin prin materiile de dejecie
i, prin nerespectarea condiiilor de igien, poate contamina alimentele.
Creterea lui pe produse (alimente cu carne gata preparate, insuficient tratatetermic) este asociat cu formare de acid butiric i gaze; CI. perfringens tip C
produce enterite necrotice.
n calitate de ageni ai toxiinfeciilor alimentare, sunt vizate i genuri
mai puin studiate ca: Citrobacter, Hafnia, Klebsiella, i altele crora n
ultimii ani li se acord o mare importan.
Microorganismele str ict patogene. Acestea nu se pot nmuli
n alimente, dar pot fi transferate de la om i animale bolnave, prin ingerarede produse ocazional contaminate, la indivizi sntoi, dnd prin infecie,
dup o perioad de incubare, mbolnviri specifice. Rspndirea patogenilor
poate fi oprit fie prin evitarea cilor de acces la aliment, fie prin tratamente
care asigur distrugerea sau eliminarea lor.
Bacteriile-ageni ai toxiinfeciilori i ntoxicaiilorprin consum
de alimente contaminate pot ptrunde n organism att pe cale digestiv ct
i pe cale sanguin, devenind strict patogene, producnd boli ca:
furunculoze i infecii cutanate (Staphylococcus aureus), colibaciloze
(Escherichia coli), febra tifoid(Salmonella sp.). n unele cazuri, alimentele
produse de la animale bolnav: pot fi o surs de infecie cu bacterii-ageni ai
tuberculozei {Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovis), ai
brucelozei (Brucella abortus, Brucella melitens), si difteriei
7/30/2019 carte micro
15/121
14
(Corynebacterium diphteriae), diareei infecioase (Campylobacter),
antraxului {Bacillus anthracis).
Ricketsiilepot produce febra Q. Dintre acestea, Coxiella burnetii se
poate transmite prin laptele provenit de la vaci bolnave, are o
termorezisten ridicat i poate supravieui n produse insuficient
pasteurizate.
Virusurile (enterovirusuri, adenovirusuri, rotavirusuri) pot produce
gastroenterite, hepatite (Enterovirus 72 tip A), encefalite, poliomielit.a.
CAP. II - MICROBIOLOGIA PRODUSELOR DE
ORIGINE ANIMAL
Pentru diverse subramuri ale industriei alimentare, n tratarea
micrcbiologiei produselor de origine animali vegetal se prezint sursele
posibile de contaminare (intern sau extern), utilizarea culturilor starter n
biotehnologii alimentare i rolul proceselor microbiologice n fabricarea,conservarea i asigurarea calitii produselor alimentare.
2.1.MICROBIOLOGIA LAPTELUI
Datorit compoziiei sale, laptele este un mediu excelent pentru dezvoltarea
numeroaselor microorganisme, condiii mai favorabile avndu-le bacteriile
lactice. Contaminarea laptelui se poate produce din dou surse: interni
extern.
2.1.1. Contaminarea intern
Contaminarea intern are loc n timpul producerii laptelui, ca urmare
a ptrunderii unor microorganisme patogene transmisibile prin lapte, de la
animalul bolnav. Alte microorganisme pot ajunge de pe canalele galactofore
ale animalului, unde formeaz o microbiot natural ce este antrenat la
7/30/2019 carte micro
16/121
15
mulgere. Dintre microorganismele ce provin din surse interne fac parte cele
patogene i nepatogene.
Microorganisme patogene.
Din aceastcategorie fac parte:
- genul Mycobacteriumcu speciaM. tuberculosis (tip bovis), care se
transmite de la animalele bolnave de tuberculoz. Nu se nmulete n lapte,
dar poate supravieui chiar zile i sptmni. Dei se pare c tipul bovis nu
ar provoca mbolnviri la om, au existat situaii n care indivizii cu imunitate
sczut s-au mbolnvit prin consum de lapte contaminat. Pentru evitarea
oricrui risc, laptele posibil contaminat este preluat de ctre ntreprinderea
de industrializare a laptelui pe linii separate i, n mod obligatoriu, este
supus unui tratament termic corespunztor pentru a distruge aceast bacterie
patogen, care are o termorezisten superioar altor patogeni transmisibili
prin lapte.
Cnd laptele colectat de la animale cu TBC are o ncrctur
microbian mare i nu poate suferi pasteurizarea, se poate folosi la
fabricarea caului cu o perioad de maturizare prelungit, sau la fabricarea
brnzei topite, cnd se folosete un tratament termic adecvat pentru
inactivarea bacteriilor-ageni ai tuberculozei;
- genul Brucella cu speciile B. abortus, B. melitens, care se pot
transmite prin lapte de vac, ovine, caprine i pot produce mbolnviri
manifestate prin avort spontan i septicemii. Bacteriile din genulBrucella
sunt inactivate rapid la temperaturi mai mari de 60...65C, n schimb n
laptele nepasteurizat pot rezista mult timp;
-genul Streptococcus cu specia Streptococcus pyogenes, care produce
inflamaii ale esuturilor; Streptococcus agalactiae este agentul mastitei
(inflamarea ugerului);
7/30/2019 carte micro
17/121
16
- genul Staphylococcus cu specia Staphylococcus aureus, care poate
produce ulceraii ale ugerului sau pielii; se nmulete n lapte i poateproduce enterotoxine.
Prin lapte se mai pot transmite i virusuri, ageni ai bolilor virale ca:
poliomielita, hepatita i altele.
Microorganismele nepatogene.
Dintre acestea fac parte: streptococii lactici: genul Lactococcus -
prezena lor este normal n lapte, n timp ce bacterii ale genului
Lactobaccillus sunt mai rar ntlnite. Numrul microorganismelor ce ajung
n lapte din surse interne poate varia ntre 1000 i 1500 celulecm-3; cnd are
loc recoltarea primelor poriuni din lapte, indiferent de condiiile igienico-
sanitare aplicate.
Prin contaminare intern mai pot ajunge, accidental, n lapte
antibiotice, atunci cnd animalele au fost sub tratament care influeneaz
negativ activitatea bacteriilor lactice, sensibile la antibiotice. Cnd
animalele au fost furajate cu produse mucegite i au ingerat eventual
micotoxine, acestea pot fi transformate n organismul animal i eliminate n
lapte sub form de aflatoxine: M1, M2 cu efect toxic mai sczut dect al
celor de tip B1,B2.
Alte substane ce se pot elimina n mod normal prin lapte (intrnd n
compoziia acestuia), sunt:
- imunoglobulinele - substane cu efect antimicrobian;
- lizozimul - cu activitate litic asupra peretelui celulei microbiene;
- sistemul lactoperoxidaz - tiocianat - ap oxigenat;
- lactoferina;
- aglutininele (lacteninele).
7/30/2019 carte micro
18/121
17
Aceste substane fac ca laptele s protejeze ftul n prima perioad de
via de mbolnviri i determin o stagnare a creterii bacteriilor n lapteimediat dup mulgere (faza bacteriostatic).
2.1.2.Contaminarea extern
Acest contaminare are loc n timpul mulgerii pn n momentul
prelucrrii laptelui, prin contact cu vasele, aparatele de muls, aerul, sau n
timpul transportului. O surs important o reprezint prul animalului ipielea (10818109 celule/g pr).
Contaminarea prin intermediul aerului din grajd este mai mare dac s-a
fcut furajarea, datorit prafului, motiv pentru care mulgerea se face nainte
de hrnirea animalelor. Contaminarea poate avea loc, frecvent, prin
intermediul apei, al blegarului (109-1010 celule/g) i prin intermediul vaselor
de colectare, deoarece laptele formeaz pe suprafaa vaselor o pelicul, iar pe
suprafaa recipientului n care se face nclzirea se formeaz piatra de lapte
(un amestec de fosfai, sruri minerale), deosebit de rezistent, care face
dificil ndeprtarea microorganismelor aderente. Prin intermediul materiilor
fecale, de la om i de la animalele bolnave se pot transmite microorganisme
patogene i anume:Bacillus anthracis (produce antraxul); genul Salmonella
- microorganismele se pot nmuli n lapte sau rezist n lapte, fiind ageni ai
toxiinfeciilor alimentare; genul Shigella microrganismele din acest gen
sunt ageni ai dizenteriei; genul Proteus; Pseudomonas; genul Klebsiella.
Contaminarea extern este ocazional cu numeroase alte grupe de
microorganisme care pot fi, n marea lor majoritate, ageni de alterare.
7/30/2019 carte micro
19/121
18
2.1.3. Grupele de microorganisme din lapte i semnificaia lor
Dintre grupele de microorganisme ce alctuiesc microbiota laptelui i
pot fi active n lapte fac parte:
- bacterii le l actice;prezena bacteriilor lactice este de neevitat;
dintre acestea fac parte streptococii lactici din genul Lactococcus i
reprezentanii genuluiLactobacillus;
- bacteri i le propionice;provin din surse externe, se dezvolt lent n
lapte i pot fi utilizate industrial la maturarea brnzeturilor speciale;
-bacterii le coli forme;au habitatul n colon. n condiii neigienice de
recoltare a laptelui pot ajunge i n lapte. Au caracterul comun de a
fermenta lactoza cu formare de acid lactic, dioxid de carbon i hidrogen i
sunt folosite n controlul microbiologic ca indicator al gradului de igien la
recoltarea i pstrarea laptelui. Din grupul coliform fac parte bacteriile din
genurile: Escherichia (Escherichia coli), Enterobacter (E. aerogenes),
Klebsiella, Citrobacter. Prezena lor n cantiti mari n lapte denot o stare
precar de igien. Dac nu sunt distruse la pasteurizare, pot cauza defectul de
balonare timpurie a brnzeturilor;
-bacteriile deputrefacie, care acioneaz asupra proteinelor laptelui
i provin din surse externe. Pot produce numeroase defecte la pstrarea i
prelucrarea laptelui; bacteriile dingenul Pseudomonas se pot dezvolta ntr-o
gam larg de temperaturi (inclusiv la refrigerare). Dintre specii, se
amintescP. fluorescens, P. mephita, P. fragi, P. syncyanea, P. aeruginosa.
Prin aciunea lor asupra lipidelor, laptele capt un miros de ncins",neplcut; prin oxidarea lactozei produc acidul lactobionic cu gust amar:
genul Bacillus cu speciaB. cereus se poate nmuli n lapte, poate produce o
coagulare neacid i un gust amar. Cnd se gsete n cantitate mare,
produce starea de toxiinfecie alimentar. Bacterii din genul Proteus cu
speciileP. vulgaris, P. mirabillispot produce degradarea cazeinei;
7/30/2019 carte micro
20/121
19
- bacterii le buti ri ce, care sunt bacterii ale genului Clostridium, cu
speciile: CI. butyricum, CI. sporogenes, CI. tyrobutiricum, CI. perfringens;
pot da balonarea trzie a brnzeturilor;
- bacteri i le peptonizante, care pot produce degradri ale proteinelor
cu formare de peptone i peptide amare i dau coagulare neacid
(enzimatic). Fac parte din genurile: Microbacterium, Enterococcus;
(streptococi fecali)
- drojdii, care apar ocazional i fac parte din genul Torulopsis,
Kluyveromyces, Yarowia; activitatea lor n lapte este redus, deoarecebacteriile se nmulesc mai rapid;
- mucegaiurile, care apar ocazional din aer; pot fi contaminani ai
utilajelor, ai spaiilor de depozitare din ntreprinderi i pot produce
mucegirea brnzeturilor. Frecvent, apare specia Geotrichum candidum.
Dac, dup mulgere, laptele este pstrat fr tratament termic, din
punct de vedere microbiologic se constat o anumit succesiune a fazelor
determinat de factorii intrinseci i de natura i concentraiamicroorganismelor prezente:
2.1.4.Fazele de dezvoltare a microbiotei laptelui
n faza bacteriostaticse constat o stagnare a creterii numrului de
celule, ca urmare a prezenei substanelor antimicrobiene. Poate dura 1-6 h
la 20C sau 24 - 48 h la 1...4C.
n faza mi crobiotei heterogene, microorganismele prezente n laptencep s se nmuleasc i, n funcie de temperatur, se pot dezvolta
bacterii psihrofile din genurile:Pseudomonas, Alcaligenes, Flavobacterium,
prin pstrarea n condiii de refrigerare; bacteriile mezofile, aparinnd
genului Lactococcus, sau bacteriile termofile ale genului Lactobacillus se
dezvolt la temperaturi >40C.
7/30/2019 carte micro
21/121
20
Faza dedezvoltare a bacteri i lor lactice. Lactococii se dezvolt pn
cnd pH-ul scade de la 6,5 la 4,5, dup care activitatea lor este inhibat;lactobacilii se dezvolt pn la pH = 3,5 (pot produce maximum 350 T).
Streptococii au i activitate peptidazici produc peptide ce servesc drept
surs de azot pentru lactobacili.
Urmeaz faza de dezvoltare a drojdiilor i mucegaiurilor care
consum acidul lactic, sursele de azot i are loc o cretere a pH-ului pn la
valori de 6-7, ceea ce face posibil dezvoltarea n continuare a bacteri il or de
putrefaciecare mai pot degrada substanele proteice ale laptelui.ntre toate aceste microorganisme se stabilesc relaii de comensalism,
ce pot fi dirijate tehnologic, pentru obinerea diferitelor produse din lapte.
2.2 MICROBIOTA LAPTELUI PASTEURIZAT.
Laptele pasteurizat mai conine o microbiot alctuit din
microorganisme termorezistente n care predomin enterococii (numr
admis prin standard: 3-105/cm3 la sticle; 5 -105/cm3 la bidoane), i bacteriile
coliforme (3 coli/cm3 la sticle; 300 coli/ cm3 la bidoane).
Din microbiota laptelui pasteurizat au fost izolate bacterii din genul
Micrococcus (M. luteus), Micobacterium lacticum, bacterii ale genului
Alcaligenes.
Laptele pasteurizat nu conine microorganisme patogene deoarece,
prin pasteurizare, sunt inactivate toate bacteriile patogene transmisibile prin
lapte. n laptele pasteurizat pot fi active unele enzime termostabile de natur
microbian ce pot produce defecte de gust la pstrare (tabelul 1).
2.3.MICROBIOLOGIA LAPTELUI PRAF.
Laptele praf are o umiditate de 3-3,5%, care nu permite nmulirea
microorganismelor. Laptele praf este un produs higroscopic nct, dac,
7/30/2019 carte micro
22/121
21
dup deschiderea ambalajului, umiditatea crete la >11% se produce
mucegire i sunt catalizate procese ce duc la rncezirea i modificareagustului. Din punct de vedere microbiologic se admit pn la 2000 de
microorganisme per cm3 lapte reconstituit 1/10, iarEscherichia coli s fie
absent.
Tabelul. 1
Valori ale lui Dpentru enzime tormostabile din lapte
Bacterii
Enzime
termostabile
Valori ale
lui D
Timp de nclzire
pentru pierderea a 90%Psoudomonas Lipaze D74 54 minute
Proteaze D74 160 minuteProteaze D130 8,8 minuteProteaze D140 l,5 minute
Alcaligenes Lipaze D74 16 minute
2.4. DEFECTELE DE NATUR MICROBIAN ALELAPTELUI I ALE LAPTELUI PASTEURIZAT
n timpul pstrrii laptelui sau laptelui pasteurizat apar anumite
defecte datorate activitii microorganismelor care au ajuns n lapte i nu au
fost inactivate prin pasteurizare. Dintre defecte amintim:
- acidifierea i coagularea; are loc o acidificare prin acumulare de
acid lactic, proteinele din lapte pot s precipite i are loc coagularea acid a
laptelui i separarea de zer. Cnd are loc acest proces, laptele este dirijat sprefabricarea brnzeturilor;
- proteoliza i lipoliza, care au loc prin meninerea laptelui la
temperaturi sczute i sunt produse de bacterii coliforme, bacterii ale genului
Pseudomonas i de ctre bacterii lipolitice din genul Bacillus i genul
Acinetobacter,
7/30/2019 carte micro
23/121
22
-colorarea, care apare la laptele crud n timpul verii n urma
dezvoltrii unor microorganisme productoare de pigmeni astfel:Chromobacterium cianogenum iPseudomonas syncyaneaproduc pigmeni
albatri; Brevibacterium prodigiosus i Brevibacterium erytropeus dau
pigmeni roii;
- gustul amar, care poate fi ntlnit n laptele proaspt, atunci cnd
ncrctura microbian este foarte mare nainte de pasteurizare, i este dat
de bacterii peptonizante din genul Microbacterium, genul Enterobacter,
genul Enterococcus. Aceste microorganisme produc peptide amare prinhidroliza proteinelor laptelui. Gustul amar poate proveni i n urma
activitii de oxidare a lactozei la acid lactobionic sub aciunea bacteriilor
din genulPseudomonas;
- gustul de caramel, care poate fi dat prin dezvoltarea n lapte a lui
Lactococcus lactis var. maltigenes;
- defectele de consisten, care se datoreaz coagulrii cazeinei sub
aciunea bacteriilor lactice. Poate avea loc i mrirea vscozitii lapteluidatorit dezvoltrii unor microorganisme ce produc substane de natur
poliglucidic (Alcaligenes viscolactis, genul Micrococcus, genul
Enterobacter).
2.5. MICROBIOLOGIA PRODUSELE LACTATE ACIDE
Tehnologiile de preparare a acestor produse au la baz utilizarea de
culturi de bacterii lactice selecionate ce se folosesc sub form de
monoculturi sau culturi mixte, cu proprieti biotehnologice corespunztoare
pentru obinerea unor produse de calitate superioar. Culturile pure de
bacterii lactice se obin n laboratoarele de cercetri specializate n care se
menine puritatea culturilor, se fac studii de selecionare i conservare a
proprietilor optime pentru utilizarea industrial.
7/30/2019 carte micro
24/121
23
Modul de livrare a culturilor. Culturile pure de bacterii lactice se
pot livra sub diverse forme.
Culturile lichide. n acest caz se face pasteurizarea laptelui,
inocularea cu cultura pur, se aplic un regim de termostatare optim i,
dup ce are loc coagularea laptelui, etap ce coincide cu numrul maxim de
celute rezultate prin nmulire n lapte, se face repartizarea n flacoane de
100 ml, n condiii aseptice. Aceste culturi trebuie folosite repede, deoarece,
dac aciditatea crete, are loc inactivarea parial a bacteriilor lactice.
Culturile de lactococii mezofili, dup inoculare, se menin la 20C, timp de12-24 h, cele pentru lactobacili la 42C, 4-6 h. n timpul verii, pentru a
preveni creterea aciditii, se adaug carbonat de calciu, astfel nct acesta
neutralizeaz o parte din acid i se formeaz lactatul de calciu i dioxid de
carbon, ceea ce face ca, la deschiderea sticlei, s se observe o uoar
spumare.
Culturile uscate. Se obin din culturi lichide, prin uscare la
temperaturi sub 70C. Prin uscare are loc o reducere a numrului de celulevii, iar viabilitatea streptococilor este de aproximativ 40%.
Concentratele bacteriene. Se obin din culturi lichide, prin
centrifugarea mediului la 15 000 rot/min, cnd se elimin zerul i are loc o
concentrare a celulelor la valori de 5-109/g . Pot fi livrate ca atare sau se pot
congela i livra sub form de concentrat bacterian.
Culturi le l iofi li zate.Dup pasteurizarea laptelui, se face inocularea i
termostatarea, iar cultura se repartizeaz n fiole de sticl, astfel nct, prin
liofilizare, s rmn o cantitate de 1- 5 g. n prima etap are loc o
congelare lent cu viteza de 1C/min, pn la -17C, se continu congelarea
rapid pn la -50...-70C, apoi are ioc uscarea n vacuum. Flacoanele sunt
nchise ermetic i se obine o pulbere n care bacteriile sunt adsorbite pe
substana uscat a laptelui, iar procentul de viabilitate a celulelor este 10-
60%. Culturile liofilizate pot fi uor transportate i utilizate n producie.
7/30/2019 carte micro
25/121
24
Pentru obinerea produselor lactate acide, n prima etap se realizeaz,
n laboratorul uzinal, activarea culturilor pure n scopul obinerii cantitiide inocul necesar pentru declanarea fermentaiei lactice (fig. 1.). Inoculul
de producie sau maiaua trebuie preparat() n cantiti suficiente, nct prin
inocularea laptelui pasteurizat s existe un numr de celule de bacterii lactice
care s depeasc de cel puin 1000 de ori numrul microorganismelor
existente n microbiota rezidual a laptelui.
Pentru activarea culturii pure de bacterii lactice, n fabric se execut
2-4 pasaje sau inoculri succesive, inoculri care se fac la intervale n carese asigur timpul necesar i temperatura optim pentru creterea i
activitatea celulelor inoculate (fig. 2).
Pasajul de la volume mici la volume mari, n vederea obinerii
inoculului de producie, se realizeaz dup ce a avut loc coagularea laptelui,
etap n care concentraia de celule este maxim i corespunde cu sfritul
fazei exponeniale de cretere bacterian.
ntre etape se face controlul calitii culturii i se determin aciditatea,iar prin examen microscopic se determin puritatea i concentraia de celule
prin metoda Breed.
n tabelul 2 se dau condiiile necesare pentru reactivarea culturilor
liofilizate prin pasaje repetate (2-3 pasaje) pe lapte pasteurizat. n funcie de
natura culturii pure difer cantitatea necesar de inocul, condiiile de
termostatare i aciditatea n grade Thrner, la care se recomand repicarea.
7/30/2019 carte micro
26/121
25
Etape
I
Cultur selecionat
II B B
b c
III Cultur producie B B b c
Fig. 1. Etape n obinerea culturilor de producie.
Tabelul 2Condiii pentru reactivarea culturilor de bacterii lactice
(nainte de obinerea culturilor intermediare i a culturii de producie)
Culturi de bacteriiCantitat
ea de
Temperatur
C
Timp,
ore
Aciditate,
T
Lactococcus lactis 1-2 20...3 17-20 90-95Lactococcus cremoris 1-2 25...30 18-24 86-92Streptococcus salivariusthermophillus
1-2 37...40 6-10 90-100
Lb. delbrueckii bul aricus 1-2 40...42 5-8 110-130Lb. acidophillus 2-3 37...40 7-10 120-180Cultur pentru iaurt 1-2 43...45 2-2,3 90-95
Culturi pentru smntni unt 1-2 22...24 16-18 90-95
Fig .2. Schema clasic de inoculare cu bacterii lactice
7/30/2019 carte micro
27/121
26
O particularitate deosebit fa de celelalte produse lactate o prezint
chefirul n care, pentru preparare, se folosete un amestec de streptobacteriimezofile asociate cu drojdii din genul Torulopsis, microorganisme care
sunt fixate pe aglomeratele de cazein coagulat sub forma granulelor de
chefir". ntre aceste culturi apar relaii de simbioz, deoarece bacteriile
lactice beneficiaz de vitaminele din grupa B produse de drojdii, iar
drojdiile au activitate fermentativ optim la valori acide de pH.
2.5.1.Defecte de natur microbian.
n cazul produselor lactate acide pstrate mai mult timp sau ca urmare
a procesului tehnologic defectuos, acestea pot suferi diferite tipuri de
alterri microbiene:
- brnza proaspt de vaci poate suferi defectul de acrire, cnd se ps-
treaz la temperaturi ridicate, gustul amar atunci cnd predomin bacterii
sporulate (acumulare a peptonelor i peptidelor amare), sau mucegire cu
Geotrichum candidum;
-smntna poate suferi defectul de mucegire cu Geotrichum. n
condiiile n care n grsime rmn bacterii lipolitice se produce, la pstrare,
rncezirea hidrolitic cu eliberarea de acizi grai care, prin oxidare,
genereaz aldehide, cetone.
n smntn trebuie s fie absente bacteriile patogene i se admit 20
bacterii coliforme g-1 smntn.
2.6. MICROBIOLOGIA UNTULUI
La fabricarea untului se poate folosi smntn dulce i, mai frecvent,
smntn fermentat. n acest scop, smntna dulce este pasteurizat i,
7/30/2019 carte micro
28/121
27
dup rcire, este inoculat cu culturi mixte de bacterii lactice aromatizante,
productoare de diacetil i acetil metil carbinol.Dintre acestea fac parte: Lactococcus lactis ssp. cremoris,
Lactococcus lactis biovar. diacetylactis, Lactococcus lactis biovar.
acetoinicus, Leuconostoc citrovorum i paracitrovorum. Aceste bacterii pot
produce substane de arom din acidul piruvic format prin fermentaia
lactozei sau din acidul citric prezent n lapte. Dup fermentare, smntna
maturat cu aproximativ 55 Thorner sufer operaia de batere cu separarea,
n zar, a unui numr mare de microorganisme. Urmeaz splarea masei deunt cu ap pur din punct de vedere microbiologic, malaxarea i caluparea.
Prin malaxare are loc dispersarea fin a apei. n micropicturile cu
diametrul mai mare de 5 m pot fi prezente celule microbiene.
Numrul de microorganisme n untul proaspt este de aproximativ 109
g-1. n absena oxigenului i a nutrienilor are loc, treptat, o reducere a
numrului de lactococi nct, dup o lun de pstrare, n microbiota untului
predomin micrococi i drojdii, microorganisme ce pot proveni din apa desplare sau de pe suprafaa utilajelor.
La pstrarea untului, n funcie de natura microorganismelor de
contaminare i de numrul lor, se pot produce urmtoarele defecte:
- dezvoltarea microorganismelor care produc lipaze exogene ce
determin hidroliza lipidelor din unt, cu formare de acizi grai i care
iniiaz rncezirea hidrolitic. Lipazele microbiene sunt eliberate i prin
autoliza celulelor microbiene, iar activitatea lor nu este oprit la temperaturi
de refrigerare. Dintre bacteriile productoare de lipaze fac parte:
Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas putrefaciens, Pseudomonas
mephita, specii din genul Flavobacterium i dingenul Alcitligenes;
- mucegirea untului, care poate fi produs superficial de ctre
mucegaiuri productoare de lipaze din genurile Aspergillus, Penicillium;
mucegirea intern poate fi produs de ctre Cladosporium herbarum,
7/30/2019 carte micro
29/121
28
mucegai microaerofil ce se dezvolt n micropicturi de lichid din masa de
unt, formnd puncte negre inestetice.Pentru aprecierea calitii untului, standardul prevede absena
bacteriilor coliforme pe gram produs i admite, n funcie de calitatea
untului, ntre 1000 i 2000 celule de drojdii i mucegaiuri/g.
2.7. MICROBIOLOGIA BRNZETURILOR
Pentru obinerea brnzeturilor se poate folosi lapte crud, lapte n carebacteriile lactice trebuie s reprezinte peste 50% din totalul microbiotei, cu
restricii privind prezena bacteriilor butirice (absente la 1 cm3), a bacteriilor
coliforme, a bacteriilor de putrefacie din genulPseudomonas. Pentru evitarea
unor defecte i a riscului de transmitere a unor bacterii patogene de la
animale bolnave, se folosete frecvent laptele pasteurizat. Dup rcire se face
inocularea laptelui cu monoculturi sau culturi mixte specifice, iar etapele
tehnologice urmresc s asigure, n mod dirijat, activitatea util a culturilor
starter.
Din culturile microbiene utilizate la fabricarea brnzeturilor fac parte
urmtoarele microorganisme:
- bacterii lactice, dintre care lactococi (streptococi lactici) cu speciile:
Lactococcus lactis, Lactococcus cremoris, Lactococcus lactis diacetilactis
i Streptococcus salivarius varietatea thermophillus. Dintre lactobacili se
folosesc speciile Lactobacillus casei, Lactobacillus helveticum,
Lactobacillus plantarum i Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus,
Leuconostoc cremoris.
n lapte are loc nmulirea bacteriilor lactice favorizat de prezena
lactozei, a surselor asimilabile de azot (aminoacizi i peptide), a
potenialului de oxido-reducere. Cantitatea existent n lapte a compuilor
cu azot este limitat i se consum dup 2-3 generaii. De aceea, pentru
7/30/2019 carte micro
30/121
29
obinerea unor concentraii maxime de celule, se recomand cultivarea mixt
a lactocociior productori de peptidaze i a lactobacililor productori deproteaze exogene. La fabricarea brnzeturilor, dup fermentarea lactozei,
bacteriile lactice imobilizate n masa de coagul pot, dup autoliz, s fie o
surs de enzime cu rol n maturarea brnzeturilor;
- bacteri i propionice. Aceste bacterii se folosesc n culturi pure la
fabricarea brnzeturilor cu past tare i desen, deoarece fermenteaz lactoza
i lactaii cu formarea de acid propionic, C02 care se degaj lent i formeaz
alveole caracteristice. Mresc valoarea brnzeturilor, prin producerea devitamina B12,bacterii aparinnd speciei Propionibacterium freudenreichi
var. shermani;
-bacterii alcalinizante, numite i bacterii ale roului", care sunt
active la pH = 6,5-8,5, produc un pigment rou i se dezvolt sub forma
unor colonii pigmentate la suprafaa brnzeturilor cu past moale (Brie,
Camembert). Dintre bacterii se folosesc speciile Brevibacterium linens i
Arthrobacter globiformis;- mucegaiuri selecionate ale genului Penicill iumcu speciile :
- Penicillium camemberti, folosit la fabricarea brnzeturilor de
tip Brie, Camembert, cunoscut i cu denumirea de P.candidum sau P.
caseicolum. Este un mucegai alb, caracterizat prin acidotoleran i se
dezvolti la valori de pH = 4,5. Are activitate proteolitici se dezvolt la
suprafaa brnzeturilor cu past moale, folosind ca surs de carbon acidul
lactic, i formeaz un fetru alb, caracteristic. Cultura de mucegai se
introduce n lapte nainte de coagulare, sub form de suspensie de spori
(103-105 sporicm-3) sau se procedeaz la pulverizarea superficial a
formelor de brnz. Prin activitatea enzimatic a culturii are loc o maturare
avansat a brnzeturilor de acest tip, caracterizate prin gust picant;
- Penicillium roquefortii, folosit la fabricarea brnzeturilor tari
(brnz roquefort, brnz cu past albastr) n care se dezvolt intern sub
7/30/2019 carte micro
31/121
30
form de miceliu. n scopul obinerii sporilor pentru inocul, cultivarea se
face pe buci de pine de secar, timp de 4-7 zile, pn cnd se producesporularea. Uscarea se face la temperaturi care s nu inactiveze sporii, apoi
are loc mcinarea cu obinerea unei pulberi bogate n spori, folosit n
cantitate de 50 mg/100 dm3 lapte. P.roquefortii este un mucegai
acidotolerant i se dezvolt pe medii cu 5% acid lactic. Este microaerofil i
se dezvolt n atmosfer cu 20 - 40% C02. Brnzeturile de tip roquefortau
un grad ridicat de maturare i o arom specific, ca urmare a produilor
rezultai prin activitatea enzimatic (proteolitic i lipolitic) a culturii.Pentru a favoriza dezvoltarea interna culturii se neap masa de brnz
cu ace lungi n diferite direcii i, ca urmare a ptrunderii oxigenului, are
loc dezvoltarea miceliului i formarea sporilor colorai caracteristic (verde-
albastru).
2.7.1.Alterri microbiene ale brnzeturilor.
n condiii de nerespectare a procesului tehnologic i a condiiilor
igienico-sanitare la prelucrarea laptelui, n urma activitii
microorganismelor de contaminare pot avea loc alterri ale brnzeturilor cu
modificarea calitilor senzoriale i pierderea valorii alimentare. Dintre
defectele ocazionale ntlnite la conservarea brnzeturilor, mai frecvente
sunt urmtoarele:
- balonarea timpur iea brnzeturilor, care apare dup 1-2 zile de la
formare i este datorat prezenei n numr mare a bacteriilor coliforme:
Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Enterococcus faecalis, Hafnia sp.
.a. Aceste bacterii se pot nmuli concomitent cu bacteriile lactice i
produc fermentaia lactozei cu formare de acid lactic, acid acetic, C02i H2.
Ca urmarea a degajrii intense de gaze, n condiiile n care coaja nu este
penetrabil, apare balonarea calupului de brnz, iar n seciune pasta este
7/30/2019 carte micro
32/121
31
buretoas, cu alveole mici, neuniforme. Deoarece aceste bacterii au
activitate cazeolitic, pot produce o hidroliz avansat a proteinelor idetermin apariia unui gust i a unui miros de leie", atipice. Prezena n
concentraie ridicat a celulelor de Escherichia coli, facultativ patogen,
productor de enterotoxine poate conduce prin consumul brnzei alterate la
starea de toxiinfecie;
- balonarea trzie, care poate aprea dup 20 - 60 de zile, n timpul
maturrii brnzeturilor i este datorat bacteriilor butirice cu activitate
zaharolitic, cu speciile: Clostridium butyricum i Clostridiumtyrobutyricum. Aceste bacterii pot proveni din sol, ap, furaje, cheag .a.,
rezist la pasteurizarea laptelui i rmn n stare de endospori pn cnd pH-
ul crete la valori mai mari de 6, prin neutralizarea acidului lactic de
ferrnentaie. n condiii anaerobe i de pH optim, are lor, germinarea,
formarea celulelor vegetative care produc fermentaia butiric a lactatului
de calciu. n urma activitii !or, prin formare de gaze (C02i H2), are loc
balonarea, deformarea, cu rupturi inestetice neordonate n pasti sesizareagustului iute, slciu, prin acumularea acidului butiric. Pentru prevenirea
acestui defect, n afara factorilor tehnologici se pot folosi i metodele
biologice. Se recomand folosirea la fabricarea brnzeturilor a culturii de
Lactobacillus plantarum sau a tulpinilor deLactococcus lactisproductor de
nisin, cu efect antagonic fa de bacteriile butirice;
- cancerul coji i, care apare prin degradarea protidelor de ctre bacterii
anaerobe: Clostridium sporogenes, Bacillus putrificus, cu apariia sub coaj
a unor zone n care s-a produs putrefacia;
-gustulamar, care este datorat activitii unor bacterii proteolitice ce
aparin genului Micrococcus, genului Mammococcus, sau activitii
drojdiei Torulopsis amara care favorizeaz formarea peptidelor amare;
-ptarea brnzetur i lor, datorat bacteriilor din genulPseudomonas;
n condiii de pstrare a brnzei n mediu umed, ca rezultat al proteolizei se
7/30/2019 carte micro
33/121
32
formeaz tirozina care, prin oxidare, formeaz melanine de culoare cenuiu-
brun;
- mucegi rea brnzetur il or, care este un defect frecvent ce duce la
deprecierea unor cantiti mari de produse i se caracterizeaz prin apariia de
pete colorate specific, miros caracteristic, degradarea cojii i a zonelor
adiacente, risc de formare a micotoxinelori de difuzie a lor n past. Dintre
mucegaiurile izolate din microbiota brnzeturilor alterate fac parte:
- Geotrichum candidum cu activitate proteazic i lipazic, lipsit de
potenial toxicogen;- Geotrichum auranticum i Monascus purpureus, Aspergillus sp.,
Penici-llium sp., care produc pete diferit colorate (portocaliu, rou, brun,
verzui).
Concomitent cu mucegaiurile, pe suprafaa brnzeturilor se pot
dezvolta drojdii care dau modificri de culoare i care aparin genurilor:
Rhodotorula, Candida, Yarowia, Debaryomyces.
2.8.PROCESE MICROBIOLOGICE LA PRELUCRAREA I
CONSERVAREA CRNII
Carnea este un aliment valoros din punct de vedere nutritiv, datorit
prezenei surselor de carbon i de energie (glicogen, acid lactic rezultat prin
glicoliz), surselor de azot (proteine asimilabile), srurilor minerale,
vitaminelor, unui coninut de ap liber de 67 (carnea de vit) - 71% (carnea
pui), nct asigur condiii favorabile pentru creterea microorganismelor, n
special a bacteriilor de putrefacie.
Dup sacrificarea animalului, carnea poate s sufere procese aseptice
datorate enzimelor din esutul muscular, care pot s produc prin maturare
7/30/2019 carte micro
34/121
33
mbuntirea valorii crnii, sau procese microbiologice, care pot s duc la
alterarea crnii i la risc n consum (fig. 3).
2.8.1.Surse de contaminare microbian a crnii.
Animalul viu i sntos conine n muchi un numr foarte redus de
microorganisme (absente sau o celul la 100 g). Dac animalul este obosit
nainte de sacrificare sau este bolnav, microorganismele, care sunt
vehiculate prin circuitul sanguin, nu mai sunt distruse de ctre fagocite i se
pot concentra i localiza n anumite organe: rinichi, ficat, splin. Cndanimalul este bolnav, microorganismele patogene rspndite n organism pot
fi transmise dup sacrificare prin intermediul crnii contaminate.
Fig.3. Transformri ale crnii la pstrare
Dintre microorganismele patogene, care se pot transmite pe cale
digestiv prin consum de carne contaminat, fac parte:
- Mycobacterium tuberculosis (tip bovis), agent al tuberculozei, care
este inactivat prin tratamentul termic al crnii la 80...85C, timp de 10
7/30/2019 carte micro
35/121
34
minute. Astfel, animalele bolnave sunt sacrificate separat i carnea este
pasteurizat la 85C timp de 30 minute;- Bacillus anthracis, agent al anthraxului, care se poate transmite prin
carne de ovine;
- alte specii, care pot aparine genurilor: Francisella, Leptospira,
Brucella, Coxiella .a. care produc infecia pe cale cutanat.
Contaminarea crnii se poate produce i n momentul sacrificrii; prin
contactul cuitului cu plaga jugular pot fi antrenate microoganisme de pe
suprafaa pielii i prului, care sunt transmise n organismul n starea deagonie, prin circulaia sngelui. Dac, dup sacrificare, nu se face rapid
rcirea i eviscerarea, ca urmare a creterii permeabilitii pereilor celulari
i ca urmare a stresului suferit de animal, la sacrificare se poate produce un
transfer al microorganismelor din viscere i are loc contaminarea cu
microorganisme de origine intestinal, entero-bacterii, din care sunt
facultativ patogene/patogene: Salmonella typhi, Klebsiella, Listeha
monocitogenes, Yersinia enterocolitica, Proteus, Escherichia coli.Contaminarea intern a esutului muscular, care se produce post-
mortem, este redus. n funcie de condiiile mediului ambiant i de
pstrarea condiiilor igienice la procesarea crnii (jupuire, eviscerare,
despicare, toaletare), are loc contaminarea extern. Dac n urma
contaminrii interne n carne poate exista 1 celul la 10 g sau 1 celul la
100 g, prin contaminare extern numrul de celule poate ajunge la 102 - 103
cm-2 suprafa carne/carcas.
n cazul bovinelor, contaminarea extern se poate produce la jupuire,
atunci cnd, accidental, prul care are o ncrctur microbian de 107 108
g-1 vine n contact cu carnea, din surse umane, prin mini murdare i mai
ales cnd eviscerarea este defectuoas.
n cazul porcinelor, contaminarea microbian poate avea loc mai intens
dac oprirea se face pe orizontal, prin imersare n bazine cu ap la
7/30/2019 carte micro
36/121
35
64...65C. Prin repetarea opririi, apa se ncarc cu microorganisme i exist
pericolul ca pulmonii s se ncarce cu un numr mare de microorganisme,mrind riscul de contaminare, la prelucrare.
Din punct de vedere microbiologic, prin contaminarea extern pot
ajunge pe carne bacterii din genurile: Pseudomonas, Flavobacterium,
Alcaligenes, Acineto-bacter, Bacillus, Clostridium, Micrococcus .a.,
bacterii de putrefacie, care se pot dezvolta pe carne n condiii de
refrigerare.
2.8.2.Factorii care condiioneaz dezvoltarea microorganismelor
n carne.
Transformrile pe care le pot produce microorganismele contaminante ale
crnii sunt dependente de factori intrinseci (compoziie, aw, pH, rH) i
extrinseci (temperatura de pstrare acrnii).
Accesul microorganismelor, situate la suprafaa crnii, la nutrieni este
dificil, ca urmare a izolrii acestora de ctre pereii celulelor din esut.Carnea n carcas este mai greu alterabil dect carnea tocat, tocmai
datorit acestor bariere naturale.
Carnea are un awde 0,98 - 0,99 optim pentru dezvoltarea tuturor micro-
organismelor, inclusiv a bacteriilor care necesit cele mai ridicate valori.
Prin zvntarea crnii n carcase, aceste valori optime se reduc i sunt create
condiii favorizante pentru microorganisme xerofile (mucegaiuri).
n esutul viu i, imediat dup sacrificare, valoarea potenialului deoxido-reducere este n domeniul pozitiv, deci este favorizat dezvoltarea
microbiotei aerobe. Dup 4-6 ore de la sacrificare, deoarece oxigenul nu mai
este furnizat prin circulaia sngelui, potenialul redox devine negativ (-50
mV) i este posibil dezvoltarea bacteriilor anaerobe de putrefacie.
7/30/2019 carte micro
37/121
36
Valoarea pH-ului crnii joac un rol important n demararea
proceselor de alterare a crnii. Carnea are un pH = 6,5 - 7, favorabildezvoltrii bacteriilor de putrefacie. Dup sacrificare, la animalul sntos,
se instaleaz rigiditatea, deoarece n urma procesului de glicoliz catalizat
de enzime ale esutului se formeaz acid lactic, iar din acizii adenilici se
elibereaz grupri fosfat. Prin acest proces se formeaz complexe rigide
asociate cu o scdere a pH-ului la 5,5 - 5,7, cu efect inhibitor asupra
nmulirii bacteriilor. Faza de rigiditate, care poate dura cteva ore, este
continuat cu o maturare biochimic datorat activitii enzimelorproteolitice tisulare, cu formare de proteine mai solubile, uor asimilabile
i, ca rezultat al reaciilor de dezaminare, crete pH-ul la valori de 6 - 6,5,
favorabile bacteriilor de putrefacie.
Dintre factorii extrinseci, temperatura are un rol major la conservarea
calitii crnii. Prin rcirea crnii, imediat dup sacrificare i pstrarea n
condiii de refrigerare, este ncetinit att nmulirea microorganismelor ct
i producerea de toxine bacteriene. Astfel, dac pstrarea se face la +10C,producerea de toxine de ctre specii ale genului Clostridium este oprit, iar,
la pstrarea la temperaturi sub +3C, producerea de toxine este inhibat
pentru toate bacteriile toxicogene. Pentru pstrarea crnii i oprirea nmulirii
bacteriilor de putrefacie se recomand temperatura de 0C (n condiii de
vacuum), iar la temperatura de -18C este oprit total nmulirea
microorganismelor n carne. Se consider cListeria monocytogenes, agent
al listeriozei, poate suferi modificri neletale sau subletale n carnea de vit
tocat, congelat la -18C.
Alterri le microbiene ale crnii sunt dependente de natura i de
concentraia de microorganisme, de tipul de carne, de umezeala relativ din
depozit i de temperatura de pstrare. Astfel, alterarea crnii este specific
i, n funcie de factorii enumerai, aceasta poate fi provocat de 1-4 specii,
7/30/2019 carte micro
38/121
37
dei pe carne exist o microbiot mult mai complex. Se pot ntlni
urmtoarele tipuri de alterri:
-alterarea superficial prin pstrarea crnii la temperaturi de
0...10C, care se produce lent, deoarece temperaturile sczute scad viteza de
metabolism a microorganismelor iar modul de alterare este dependent de
umezeala relativ a aerului din depozit. Dac acesta este mai mare de 80-
90% i suprafaa crnii este umed, este favorizat nmulirea bacteriilor
psihrofile i psihrotrofe ale genuluiPseudomonas.
n carnea alterat, la creterea numrului de bacterii la valori deaproximativ 107.cm-2 este sesizat mirosul de putrefacie iar la creterea peste
108-cm-2, acesta este asociat cu formarea de mucus. Mucusul rezult n urma
juxtapunerii sau coalescenei ntre coloniile de bacterii i a modificrii
structurii proteinelor din zona superficial. Dintre bacteriile productoare de
mucus fac parte cele ce aparin genului Pseudomonas, bacterii Gram-
negative, aerobe, cu activitate lipolitic i proteolitic, cu speciile Ps.
fluorescens, Ps. ambigua, Ps. fragi, Ps. putida, i genuri; Aeromonas,Micrococcus.
La pstrarea crnii n depozit cu umezeal relativ a aerului mai mic
de 75%, cnd suprafaa crnii este zvntat, alterarea poate fi produs de
ctre drojdii i mucegaiuri;
- mucegirea, care apare vizibil dup 1-2 sptmni de pstrare,
atunci cnd aw-ul este suficient de sczut pentru a nu permite creterea
bacterian. Dac n prima faz de dezvoltare mucegaiurile se pot ndeprta
prin splare, o dat cu sporularea se constat o ptrundere a hifelor n carne,
pe distane de 1-2 cm, i prin splare rmn pete inestetice, avnd loc
deprecierea crnii. Dintre mucegaiurile care se pot dezvolta pe carne n
condiii de refrigerare fac parte: Cladosporium herbarum, Sporotrichum
carnis (care se poate dezvolta pe carne la temperatura minim de cretere de
-5,7C), Thamnidium elegans, specii ale genului Penicillium. Mucegirea
7/30/2019 carte micro
39/121
38
este uneori asociat cu creterea drojdiilor psihrotrofe din genurile: Candida
(produce lipaze ce catalizeaz rncezirea),Rhodotorula, Debaryomyces;- alterarea superf iciali de profunzime, care poate avea loc prin
meninerea crnii la temperaturi de 10...25C (casnic, pe reeaua de livrare
etc). Aceast alterare are loc i atunci cnd rcirea se face lent dup
sacrificare i pstrarea se face la temperatura mediului ambiant. Poate s fie
evideniat dup 2-3 zile de la sacrificare i este datorat dezvoltrii
bacteriilor aerobe de putrefacie psichrotrofe i mezofile aparinnd genurilor:
Pseudomonas, Lactobacillus (Lb. viridiscens, Lb. fermeni), Brochothrix
thermosphacta, formatoare de mucus.
Pe lng alterarea de suprafa, n etapa final se poate produce o
alterare de profunzime, mai frecvent n partea posterioar a carcaselor, unde
rcirea are loc lent i este produs de bacterii ale genului Bacillus i
Clostridium (Clostridium per-fringens). Carnea alterat prezint o culoare
cenuiu-verzui, ca urmare a formrii de ctre microorganisme a apei
oxigenate care reacioneaz cu pigmenii crnii, formnd choleglobina, sauprin eliberarea de H2S prin putrefacie, care transform oxihemoglobina n
sulfomioglobin (thiomethemoglobin) de culoare verzuie.
n cazul n care concentraia de bacterii ale genului Bacillus cu
speciile:Bacillus megatherium, Bacillus subtilis-mesentericus este mai mare
de 103 g-1, n urma formrii de acid propionic prin fermentaie ca i prin
eliberarea de acizi grai prin hidroliza grsimilor din esutul adipos, carnea
capt un miros acru, de ncins";
- alterarea profund, care poate avea loc n carne cu contaminare
intern, la temperaturi de 20...45C. Aceast alterare se produce cnd nu se
face rcirea dup sacrificare i climatizarea spaiilor de depozitare a crnii
este necorespunztoare. Alterarea poate s fie sesizat dup 4-8 ore, mai
ales dac eviscerarea nu este fcut imediat dup moartea animalului i este
datorat bacteriilor anaerobe ale genului Clostridium. n prima etap sunt
7/30/2019 carte micro
40/121
39
active clostridii glucidolitice care pot folosi n nutriie glicogenul cu specia
predominant Clostridium perfringens; n aceast faz nu este sesizatmirosul neplcut dar, datorit formrii prin fermentaie a gazelor C02i H2,
muchiul devine buretos. n etapa a ll-a, activitatea predominant aparine
bacteriilor anaerobe de putrefacie: Clostridium sporogenes, Clostridium
perfringens .a care formeaz, prin degradarea protidelor din carne, amine
toxice i ali produi finali care dau un miros dezagreabil, specific.
2.8.3.Particulariti ale microbiotei crnii de pasre.Carnea de pasre are valoare nutritiv ridicati umiditi de pn la
70%, nct este un produs uor alterabil. Carnea psrilor vii poate suferi o
contaminare intern, n special cu bacterii ale genurilor:
Salmonella,Corynebacterium, Flavobacterium i Moraxella. n timp ce
contaminarea intern este ocazional i limitat, contaminarea extern este
frecvent i are loc n cursul diferitelor operaii tehnologice. Astfel, la
oprire i deplumare se poate produce o contaminare masiv cumicroorganisme(provenite din sol, ap, materii de dejecie), aflate pe
suprafaa penelor. Eviscerarea n abatorul de psri se face prin vacuumare
i dac au loc, accidental, rupturi ale intestinelor, se produce contaminarea
cu bacterii din microbiota intestinal, respectiv enterococi i enterobacterii:
Escherichia, Salmonella, Campylobacter .a. O reducere a numrului de
microorganisme are loc la cltirea carcaselor cu ap potabil sau cu ap
clorinat.
Alterarea crnii de pui se face mai rapid dect cea a crnii de viti
este datorat bacteriilor din genurile Pseudomonas, Acinetobacter,
Moraxella. n carnea de pasre ambalat prin vacuumare se poate produce
acrirea crnii datorat activitii bacteriilor facultativ anaerobe din genurile
Lactobacillus i Brohothrix. n cazul n care prin activitatea bacteriilor de
7/30/2019 carte micro
41/121
40
putrefacie au rezultat amine toxice, consumul crnii este riscant, deoarece
aminele sunt termostabile i rezist la tratamente termice lejere.
2.8.4.Particulariti ale microbiotei crnii de pete.
Petele viu prezint o microbiot similar n componen cu cea a apei
n care triete. Microorganismele sunt reinute, prin procesul de filtrare al
apei, pe suprafaa branhiilor sau sunt adsorbite de mucus. Mucusul natural
situat la suprafaa petelui are nsuiri bactericide n raport cu unele specii,
dar acestea se pierd dup ce petele este recoltat.Alterarea petelui se produce rapid, datorit migrrii
microorganismelor din intestine ca urmare a permeabilizrii post-mortem a
acestora, motiv pentru care este obligatorie eviscerarea rapid a petelui. n
timp ce petii de ap dulce au n cantitate mare bacterii de putrefacie ale
genului Alcaligenes, la petii din ape srate predomin genul
Flavobacterium. Din microbiota intestinal prin migrare n carne se pot
ntlni specii ale genurilor: Pseudomonas, Clostridium, Bacillus,Escherichia, Vibrio, Campylobacter.
Alterarea petelui la pstrare n condiii de refrigerare se produce mai
lent i este dat de bacterii ale genulrilorPseudomonas, Achromobacter,
Flavobacterium .a. i mai rapid la temperatura camerei,cnd se produce
putrefacia dat de bacterii din genurile: Proteus, Escherichia. Petele
pstrat neeviscerat sufer alterarea asociat cu umflarea, datorat formrii
de gaze: C02, H
2, H
2S, de ctre bacterii din genul Clostridium. Prin consum
de pete alterat se pot produce intoxicaii grave, ca urmare a prezenei de
toxine produse de bacterii toxicogene sau a aminelor biogene toxice.
Alterarea sesizabil a crnii de pete are loc la creterea numrului
total de bacterii peste 105g-1, iar dac numrul depete valoarea de 106
celule-g-1, petele nu se admite n consum.
7/30/2019 carte micro
42/121
41
2.8.5.Microorganisme transmisibile prin carne i factori de
risc.
Prin consum de carne contaminat, exist riscul de transmitere a
urmtoarelor grupe de microorganisme:
- microorganisme patogene provenite prin contaminare intern n
timpul vieii i vehiculate prin carne, microorganisme care produc stri de
infecie dup ingerare i invingerea forelor de aprare a organismului, dnd
boli ca, de exemplu: bruceloza, rujetul, tuberculoza, leptospiroza .a.;
- microorganisme patogene i facultativ patogene ce provin dincontaminare extern prin contact direct la manipularea crnii, din diferite
surse: sol, ap, insecte, surs uman. Din acest grup fac parte specii ale
genurilor: Salmonella, Staphylococcus, Listeria, Clostridium, Escherichia
.a.
2.8.6. Microbiologia preparatelor din carne
Preparatele din carne se obin ntr-o gam larg de sortimente ce difer
prin compoziia chimic, coninutul de ap liber i din punct de vederemicrobiologic. Microbiota materiilor prime i auxiliare sufer modificri
importante n etapele tehnologiei de preparare. La fabricarea preparatelor
din carne se folosete carne tocat, care poate prezenta o contaminare
bacterian (104106-g~1). O carne tocat cu peste 107 g-1 celule bacterii nu
este admis la fabricare.
Dintre materiile auxiliare, o surs important de microorganisme o
prezint sarea (102
-106
g-1
) care aduce n compoziie bacterii sporulate, bacteriitolerante la sare, inclusiv drojdii halotolerante. Cu ct sarea este mai purificat
i se elimin componentele anorganice ale solului, numrul microorganisme
este mai restrns. Condimentele, dei se adaug n proporii mici, au o
ncrctur microbiologic foarte mare, mai ales n cazul plantelor aromatice
care se ncarc cu microorganisme n timpul creterii. Piperul, ienibaharul pot
7/30/2019 carte micro
43/121
42
conine 105106 celule g-1. Din microbiota condimentelor au fost izolate
bacterii sporulate i mucegaiuri ce produc micotoxine; de aceea, existorientarea de a fi sterilizate pe cale chimic nainte de folosire (etilen oxid).
Utilizarea extractelor condimentare, a diferitelor uleiuri care conin
substane aromatizante, este avantajoas, deoarece pot fi dozate cu o mai
mare precizie i sunt lipsite de microorganisme. n acest caz, anumite
componente naturale pot avea un efect microbiostatic sau microbicid asupra
microorganismelor.
Membranele folosite pentru marea majoritate a preparatelor din carne,atunci cnd sunt naturale (conservate prin srare), au o ncrctur
microbian ridicat, deoarece au venit n contact cu microbiota intestinului
(bacterii coliforme i alte bacterii de putrefacie). Din punct de vedere
microbiologic, membranele artificiale au o ncrctur foarte redusi, deci,
nu contribuie la ncrcarea produsului cu microorganisme de alterare.
La obinerea preparatelor din carne, o prim etap const n
omogenizarea ingredientelor, care asigur o dispersie a microorganismelorn past. Dup umplere, n funcie de sortiment, se pot aplica diferite procese
ca: afumarea la cald cnd temperatura n past ajunge la 50...52C, iar la
afumare ca rezultat al evaporrii apei precum i al prezenei substanelor din
fum, unele cu efect micro-biostatic, poate avea loc o reducere a numrului
de microorganisme, n special n zona exterioar a batoanelor; fierberea
(pasteurizarea), cnd temperatura n centrul batonului este de 68...72C,
temperatur care inactiveaz eventualii patogeni nesporulai ce s-ar putea
transmite prin carne, reducnd, de asemenea, i o parte din microbiota
bacterian nesporulat.
n funcie de condiiile de pstrare, de calitatea microbiologic a
materiei prime i auxiliare i de procesul tehnologic, n timpul pstrrii n
condiii ce favorizeaz formarea de ap liber, sau dac n depozit umezeala
7/30/2019 carte micro
44/121
43
relativ a aerului este > 80-85%, se pot produce diferite alterri datorate
activitii microorganismelor care rmn active n produsul finit.
2.8.7.Defecte i alterri microbiene.
Se pot ntlni tipurile de defecte i de alterri prezentate n
continuare.
Formarea de mucusla suprafaa batoanelor, datorat dezvoltrii
bacteriilor sau drojdiilor, este favorizat de umiditatea ridicat sau de
apariia apei de condens. Se poate forma frecvent la suprafa sau submembran; formarea este datorat bacteriilor aerobe i facultativ anaerobe
din genurile/speciile: Pseudomonas, Aeromonas, Lactobacillus viridiscens,
Microbacterium thermosphactum. n anumite condiii, formarea de mucus i
apariia petelor albe pot fi datorate dezvoltrii de drojdii halotolerante cu
speciaDebaryomyces hansenii.
Mucegirea este un defect de suprafa i poate fi datorat
mucegaiurilor ce se pot dezvolta n domeniul de refrigerare i care pot provenidin contaminare extern (aer, mini, utilaje). Dintre mucegaiurile ce dau pete
inestetice i colorate fac parte genurile: Penicillum, Cladosporium,
Sporothchum, Thamnidium, Aspergilllus.
Colorareacu apariia de pete albastre, rar ntlnit, este determinat de
unele bacterii din genul Chromobacterium cianogenum ce pot proveni din sare
sau aer.
Acrireai nverzirea pastei
este un defect ntlnit la prospturi
(parizer, polonez) i se datoreaz dezvoltrii bacteriilor lactice
heterofermentative, care se pot nmuli n anumite condiii, dnd acrirea ca
rezultat al formrii de acid lactic. Deoarece aceste bacterii produc ap
oxigenat, n absena catalazei inactivate prin pasteurizare, aceasta poate
produce oxidarea pigmenilor roii ai crnii cu formare de porfirine de
culoare verde.
7/30/2019 carte micro
45/121
44
nverzirea poate fi: superficial, sub form de inel situat la o anumit
distan de suprafa, sau n zona central a umpluturii, n funcie deviabilitatea bacteriilor heterolactice, activitatea lor fermentativi activitatea
catalazic.
Acest defect se caracterizeazi prin modificarea gustului i este dat
de bacterii lactice din genulLeuconostoc i Lactobacillus cu speciile: Lb.
viridiscens, Lb. plantarum, Lb. leichmani; apare frecvent la preparatele din
carne cu adaos de ficat, splin.
Umflareaapare la prospturi i este un defect rar ntlnit atunci cndn past sunt prezente bacterii ale speciei Clostridium perfringens. n cazul
n care concentraia n celule este mare, are loc o fermentaie cu producere
de gaze (C02 i H2), care determin umflarea, pasta este buretoas i, prin
consum, exist riscul de toxiinfecie alimentar.
2.8.8.Culturi starter utilizate n industria preparatelor din
carne.
n tehnologia preparatelor din carne se pot folosi microorganisme cu
rol util, sub form de culturi starter", care se pot aduga n past nainte de
umplere sau sunt folosite la maturarea salamurilor uscate. Culturile starter
sunt reprezentate de: culturi de bacterii lactice selecionate din genurile:
Pediococcus (P. cerevisiae, P. acidilactici), Micrococcus (M. varians),
Lactobacillus sp. Culturile se adaug ntr-un mediu nesteril; de aceea,
cantitatea culturii de producie adugate trebuie astfel calculat, nct
numrul de celule introduse n pasta de carne s fie de cel puin 1000 de ori
mai mare dect cel existent n microbiota crnii. Aceste culturi produc o
fermentaie lactic, determinnd astfel o scdere a pH-ului care inhib
activitatea bacteriilor de putrefacie, iar acidul lactic format contribuie la
obinerea gustului plcut. Unele culturi prezint avantajul c produc nitrat
7/30/2019 carte micro
46/121
45
reductaz (cele care conin micrococi), care catalizeaz formarea nitriilor ce
se combin cu pigmenii din carne, forrnnd nitrozo-hemoglobina caremenine o culoare roie plcut i au activitate lipolitic i proteolitic
limitat, deci contribuie la acumularea de componente de gust i arom.
Dintre culturile fungice folosite drept culturi starter, cele mai
importante sunt cele din genulPenicillum (Penicillium nalgiovensis) folosite
la obinerea salamurilor crude, care influeneaz pozitiv uscarea naturali
maturarea. Aceste microorganisme se dezvolt ca un fetru de culoare alb la
suprafaa batoanelori, prin intermediul hifelor penetrante, asigur o difuziea umiditii i o uscare uniform, iar prin intermediul enzimelor (lipaze,
proteaze) contribuie la formarea compuilor de gust i de arom specifici
acestor produse. Culturile de P.nalgiovensis au nlocuit culturile de P.
expansum Link folosite mult timp datorit vivacitii lor; nlocuirea a fost
determinat de faptul c, n mediu de cultur optim pentru biosinteza de
micotoxine, P. expansum poate produce patulina (clavacina), cu efect
cancerigen, fr ca aceasta s fi fost detectat n salamuri maturate.Dintre procesele microbiologice utile ntlnite n industria
preparatelor din carne, cel mai important este maturarea bradtului. Bradtul
se menine la maturat 12 - 24 h, n acest timp fiind avantajat activitatea
microorganismelor prezente i anume a micrococilor, care produc nitrat
reductaz i contribuie la formarea i meninerea culorii roii naturale a
pastei de carne i a bacteriilor lactice homo- i heterofermentative, care pot
produce cantiti foarte reduse de acid lactic i substane de arom.
7/30/2019 carte micro
47/121
46
2.9. MICROBIOLOGIA OULOR
Oul este un aliment foarte valoros folosit n alimentaie i n industrie,
pentru obinerea prafului de ou, a produselor de patiserie, a pastelor
finoase, a maionezelor, a shortening-urilor, a sosurilor.
Structura anatomic a oului i asigur protecia, astfel nct
conservarea calitii este asigurat un timp limitat n funcie de temperatura
i durata pstrrii.
Coaja oului asigur protecia mecanic , iar la oul proaspt aceasta
are un strat de mucin cu efect antimicrobian, ceea ce face ca dezvoltarea
microorganismelor s fie limitat; efectul se reduce dup 1-2 sptmni sau
dup ndeprtarea prin splare a stratului de mucin. Coaja prezint
numeroi pori a cror dimensiune este mai mare dect a celulelor
microbiene, nct, n anumite condiii, celulele pot penetra coaja. n medie,
pe 1 cm2 de coaj se gsesc 110 pori cu diametrul mai mare dect diametrul
celulei bacteriene.
Membrana internbogat n keratin este permeabil pentru vaporii
de api pentru unele bacterii i impermeabil pentru sporii de mucegaiuri.
Albuulnu este un mediu optim, datorit pH-ului de 9,3 i a prezenei
unor substane ce influeneaz negativ activitatea microbian. Astfel, este
prezent lizozimul, substan cu efect bactericid, avidina, substan care
blocheaz vitaminele din grupa B ce au rol de factor de cretere pentru
bacterii, conalbumina, protein care complexeaz fierul, element important
pentru nutriia lor mineral.Glbenuulreprezint un mediu excelent pentru nmulirea microor-
ganismelor, are un pH = 6,9, este bogat n substane nutritive i nu conine
substane cu efect ihibitor. Experienele efectuate prin inocularea n
glbenu a bacteriilor din genul Salmonella au stabilit c acestea se
nmulesc foarte bine i pot ajunge la valori de 108/g glbenu.
7/30/2019 carte micro
48/121
47
n timpul pstrrii are loc o difuzie a apei din albu n glbenu, se
produce o omogenizare i coninutul oului devine un mediu foarte bunpentru nmulirea bacteriilor care au ptruns n interior.
Contaminarea microbian a oulor poate fi de 2 tipuri, care sunt
prezentate n continuare.
Contaminarea in terneste ocazionali poate fi dat, n special, de
microorganisme patogene i facultativ patogene ce ptrund n ou n perioada
de formare (la psri bolnave), sau de apa contaminat care ptrunde n
oviduct, contaminare ntlnit n special la gte i rae. Dintremicroorganismele de contaminare intern amintim:
- genul Salmonella cu speciile: Salmonella enteridis, Salmonella
galinarium,bacterii nesporulate, Gram-negative, facultativ patogene care se
pot nmuli n glbenu, deoarece pot aciona asupra glucozei cu formare de
acizi i gaze. Nu fermenteaz lactoza i zaharoza, se prezint sub form de
bastonae scurte, mobile; pot s foloseasc n nutriie aminoacizi i pot
produce hidrogen sulfurat. Acestea pot s provin fie de la psri care ausuferit mbolnvirea, fie din contaminare extern (dejecia altor psri).
Bacteriile din genul Salmonella care se rspndesc prin ou pot produce
endotoxine; de aceea, prin ingerarea preparatelor din ou insuficient tratate
termic, acestea ajung pe cale digestiv n organism, sub aciunea sucului
gastric are loc liza pereilor celulari i eliberarea de toxine, producndu-se
starea de toxiinfecie alimentar caracterizat prin diaree, dureri de cap i
chiar moarte. n timp ce oule de gin au o contaminare redus (0-7%),
oule de ra pot fi contaminate n proporie de 1-26 %; de aceea, la
prelucrare i comercializare se impun condiii de fierbere de minimum 10
minute, pentru a avea certitudinea distrugerii salmonelelor i a inactivrii
toxinelor (posibil la 62...64C n cteva minute);
- genul Proteus, cu specia Proteus mirabilis; n concentraii mari
produc boli infecioase i toxiinfecii alimentare (gastroenterite). Bacteriile se
7/30/2019 carte micro
49/121
48
nmulesc n ou i produc hidrogen sulfurat prin degradarea proteinelor. Prin
inocularea de bacterii (10 3 g-1) n praf de ou, dup 2 luni de pstrareacestea nu au mai fost detectate n 10 grame produs;
- genul Clostridium, cu specia Clostridium perfringens,
care poate proveni din contaminare extern. n prezena fosfolipidelor din
glbenu pot produce toxine (6 tipuri de enterotoxine). Prin dezvoltarea
acestor bacterii n cremele preparate cu ou contaminate, se produce
eliberarea de toxine i mbolnvirea dac aceste toxine nu sunt distruse prin
tratament termic;- genulMycobactehum tuberculosis (tip aviar); se produce
o contaminare a oulor provenite de la psri bolnave.
Contaminarea externare loc prin intermediul apei poluate, a
aerului din cuibarul contaminat cu dejeciile psrilor. Dup expulzare, oul
are o temperatur de 35...37C, iar dac n cuibar este rece, prin contracia
coninutului, aerul este aspirat i ptrund microorganisme din stratul de aer
nconjurtor.
2.9.1.Alterri microbiene