40
CFXシリーズ リアルタイムPCR 解析システム キャンペーン 期間:2015年6月15日(月)~12月25日(金) クロマトグラフィー 機器 担体ガイド 研究から製造スケールまで 世界をリードするバイオ・ラッドのクロマトグラフィー クロマトグラフィーシステム 4-5ページ クロマトグラフィー担体 (製造用及び研究用) 6-33ページ イオン交換担体 ミックスモード、ハイドロキシアパタイト 疎水クロマトグラフィー担体(HIC) ゲルろ過担体(サイズ排除) アフニティー担体、活性化担体 エンプティーカラム 34-36ページ プレパックカラム 37-40ページ Foresight シリーズ Bio-Scale Mini シリーズ CHT シリーズ ENrich シリーズ Chromatography Guide

CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

  • Upload
    others

  • View
    1

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システムキャンペーン 期間:2015年6月15日(月)~12月25日(金)

クロマトグラフィー 機器・担体ガイド研究から製造スケールまで

世界をリードするバイオ・ラッドのクロマトグラフィー

● クロマトグラフィーシステム 4-5ページ

● クロマトグラフィー担体(製造用及び研究用) 6-33ページ  イオン交換担体   ミックスモード、ハイドロキシアパタイト   疎水クロマトグラフィー担体(HIC)  ゲルろ過担体(サイズ排除)  アフニティー担体、活性化担体

● エンプティーカラム 34-36ページ

● プレパックカラム 37-40ページ  Foresight シリーズ  Bio-Scale Mini シリーズ  CHT シリーズ  ENrich シリーズ

Chromatography Guide

Page 2: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

2 Chromatography Guide

イオン交換担体 P.8

Resin Type

Net Charge of Molecule of Interest

Chargeof Resin

RunningConditions

Cation Exchanger

+ --+--

Anion Exchanger

Run at 0.5–1.5 pH units

below the pI of the molecule of interest

Run at 0.5–1.5 pH units

above the pI of the molecule of interest

ミックスモード、ハイドロキシアパタイト P.17

—Ca+))—Ca+))

—OH

—OH

—PO4=......

—PO4=......

—PO4=

—OH

+Ca—+Ca—

HO—

OH—

HO—

—COO–—COO–

—COO–))—COO–)) ((=O4P—

((=O4P—=O4P—

((+H2N—((+H2N—

+H2N—+H2N—

A B

疎水クロマトグラフィー担体 P.26A.

Bead

Ligand

Sample

B.

サイズ排除、ゲルろ過担体 P.28

アフニティー担体、活性化担体 P.30A B

C

Bead

Ligand

Sample

Eluant

NGC™ クロマトグラフィーシステム P.4

●目的に合わせた自由なシステム構成

●直感的で使いやすいソフトウェア

●ラボスケールからセミプロセスまで対応

低分子MW<3,000

核酸、タンパク質、ペプチド、MW>3,000

サイズ排除(ゲルろ過)

サイズ排除(ゲルろ過)

疎水

疎水イオン交換 ミックスモード アフィニティー

イオン交換

AG樹脂

精製したい分子

アミネックス

キレックス

バイオレックス

UNO Columns

バイオレックス70

ENrichカラム

Foresightカラム

Nuvia Profinity担体

アフィゲル担体

バイオビーズS-X バイオビーズSM

アフィプレップ担体

UNOsphere SUPrA

Foresightカラム

Nuvia IMAC

Macro-Prep

バイオゲルP Macro-Prep MethyIHIC Support

Macro-Prep t-ButyIHIC Support

バイオビーズSM-2

バイオビーズS-X

ENrichカラム

UNOsphere ハイドロキシアパタイト

Nuvia™ cPrime™ Media,

バイオゲルHT

バイオゲルHTP

フルオロアパタイト

Foresightカラム

MPC

クロマトグラフィー樹脂一覧 P.6

*本ガイドに掲載されていない製品は、WEB、総合カタログをご覧ください。

INDEX クロマトグラフィー 機器・担体ガイド 研究から製造スケールまで

クロマトグラフィー担体クロマトグラフィーシステム

Page 3: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

3クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

スピンカラム P.36

ポリプレップカラム、エコノパックカラム P.36

エコノカラム P.34最大直径5cm5~170cm

~1.2ml

~20ml

エンプティーカラム プレパックカラム

【低圧タイプ】

1mlと5mlサイズに加え ロボカラム、プレートもあり

1mlと5mlの2サイズシリンジ直結

Foresightシリーズ P.37

Bio-Scale™ Miniシリーズ P.38

【中高圧高分離能タイプ】

イオン交換ゲルろ過(サイズ排除)

CHTシリーズ P.39

ENrichシリーズ P.40

ハイドロキシアパタイト

Page 4: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィーシステム

4 Chromatography Guide

【Point to Plumb機能】タッチパネル上で、流路ラインをタッチすると、本体のLEDが点灯し、チューブの接続をアシスト。

マニュアルモードのデータ保存ポンプのスタートとともに、UVデータなどのデータが表示され、必要に応じて保存可能。フラクションコレクターの情報も一元的に保存

ログ表示各アクションステップも記録

アクティブフローパス流路を明るい緑色で表示。バルブの切り替えミスなどを防ぐ

小ウィンドウでの簡易操作ポンプのスタート停止、フラクションコレクターの分取開始、バルブの切り替えなど、簡易的な操作が実行可能

必要な情報だけ表示。色、スケールの変更も可能

次世代中高圧クロマトグラフィーシステムNGC中高圧クロマトグラフィーシステムは、「使いやすさ」と「高い拡張性」をコンセプトに開発されました。複数のシステム構成、アップグレードオプション、および共通のソフトウェアプラットフォームを備えており、分析および分取用クロマトグラフィーに適しています。

●タッチパネルを採用し操作性が向上●使いやすいソフトウェアで簡単にメソッド作成●LEDアシスト機能で、流路の確認ができ、接続ミスも軽減●他社カラムも接続可能。ソフトウェアにもカラム情報を設定済み●選べる2つのポンプシステム 10ml/minシステム、100ml/minシステム●豊富なモジュールを目的にあわせて設定  多波長検出器、カラムスイッチングバルブ、サンプルポンプ、インレットバルブ、バッファーブレンディングバルブなど

すべてのシステムには、PC、BioFracフラクションコレクターの他、フィッティングキット、カラムクランプ(1)、カートリッジホルダー(1)、チューブリテイナー(大2、小1)、サンプル/ウォッシュチューブホルダー(1)、チュービングが含まれます。

【Multi-D(2-D)、タンデムクロマト】インレットバルブや、カラムスイッチングバルブを組み込むことで、複数のカラムを使った複雑な精製や自動精製が可能。

【直感的な制御画面】各モジュールは、流路図をクリックして制御。タッチパネル上で、バルブの切り替えだけでなく、流速の変更、検出波長の変更等も可能。

NGC™クロマトグラフィーシステム  

Discover ProシリーズNGCシステムの最上位モデル。NGC Discoverシリーズにさらにアウトレットバルブとサンプルインレットバルブを追加し、Multi-D(2-D)・タンデムクロマトにも対応。

Page 5: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィーシステム

5クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

NGC Scoutシリーズスカウティングモデル。バッファー自動調製、pH調製が可能で、イオン交換体での精製用におすすめ。

【他社カラムも接続可能】メソッドテンプレートには、他社カラムの情報も設定されており、自作したカラムの情報も保存可能。流速、耐圧の設定も簡単。

NGC Discoverシリーズアドバンスドモデルバッファー自動調製、pH調製が可能な他、サンプルポンプ、カラムスイッチングバルブなどを標準で搭載し、あらゆる精製用途におすすめ。

Ordering Information[10ml/minシステム]

品名 Quest 10 Quest 10 Plus Scout 10 Scout 10

Plus Discover 10 Discover 10 Proカタログ番号 7880001J1 7880003J1 7880005J1 7880007J1 7880009J1 7880011J1価格 ¥5,200,000 ¥6,500,000 ¥5,800,000 ¥7,130,000 ¥9,310,000 ¥10,340,000ChromLabソフトウェア+ノートPC ● ● ● ● ● ●7884008 単波長(280nm or 255nm) ● ●7884009 多波長モジュール(4波長、190-800nm) ● ● ● ●7884010 NGC バッファーブレンディングバルブ ● ● ● ●7884011 NGC pHバルブモジュール ● ● ● ●7884012 NGC カラムスイッチングバルブ ● ●7884006 NGC インレットバルブ(×2) ● ●7884004 NGC サンプルポンプ F100モジュール ● ●7884006 NGC インレットバルブ(サンプル用) ●7884000 NGC 拡張ベイTier3 ● ●7884001 NGC 拡張ベイTier4 ●7884013 NGC アウトレットバルブ ●7410002JA BioFracフラクションコレクター ● ● ● ● ● ●モジュールは、自由に組み合わせ可能です。

[100ml/minシステム]品名 Quest 100 Quest 100 Plus Scout 100 Scout 100 Plus Discover 100 Discover 100 Proカタログ番号 7880002J1 7880004J1 7880006J1 7880008J1 7880010J1 7880012J1価格 ¥5,500,000 ¥6,800,000 ¥6,100,000 ¥7,430,000 ¥9,610,000 ¥10,640,000モジュールは10ml/minシステムと同様の構成です。

NGC Questシリーズベーシックモデル。ノートPC、フラクションコレクター、アクセサリーキット付き。各種モジュール、バルブの追加でアップグレードが可能。

Page 6: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体

6 Chromatography Guide

クロマトグラフィー担体セレクションガイド安定性**

担体パッキング 形態*

分析 スケール

パイロット スケール

プロセス スケール 用途 Page

陰イオン交換Nuvia™ Q B, F ++++ ++++ ++++ 強イオン交換担体。UNOsphere Qと同等の性質を持っているが、ビーズの

表面を改良することにより非常に高い結合容量を持つ;pH安定性1-14。 8

UNOsphere™ Q B, C, F ++++ ++++ ++++ 強陰イオン交換担体。生体分子の分離に使用し、高い生産性、結合性を持つ;pH安定性1-14。 13

Macro-Prep® High Q

B, C +++ ++++ +++ 強陰イオン交換担体。親水性マクロポーラス担体で、生体分子の分離に高結合量で使用。ビーズの特性によりウイルスなどの混入物の除去が可能;pH安定性 1-10。

15

Macro-Prep 25 Q B ++++ ++++ + 強陰イオン交換担体。Macro-Prep High Qと性質は同等だが、粒径が25μmで高分離能を実現;ビーズの特性によりウイルスなどの混入物の除去が可能;pH安定性1-10。

15

Macro-Prep DEAE

B, C +++ ++++ +++ 弱陰イオン交換担体。生体分子に使用し、高結合量での分離が可能;ビーズの特性によりウイルスなどの混入物の除去が可能;pH安定性1-10。 15

AG® 1 B, GC ++++ ++++ ++++ 強陰イオン交換担体。架橋度の違いにより使い分け、ペプチド、ヌクレオチド、無機イオンなどの分離を行う;自然落下または低圧で使用。 -

AG MP-1M B, GC ++++ ++ + 強陰イオン交換、AG1と同等のものをマクロポーラス化した担体。高分子(MW>1,000,000)に使用;自然落下または低圧で使用。 -

バイオレックス® 5 and AG 4-X4

B, GC ++++ ++ 弱陰イオン交換担体。糖から有機酸を除去するとき、無機酸の吸着などに用いられる;自然落下または低圧で使用。 -

UNO® Q MPC ++++ 強陰イオン交換担体。生体分子の分離に使用し、高流速での高分離能が特長;pH安定性2-12。 -

Aminex® HPLC ++++ 炭水化物、糖や小さな有機分子の分離を行うHPLCカラム;Industry-standardのパフォーマンスを提供。(US Pharmacopeia) -

陽イオン交換Nuvia™ HR-S B, C, F ++++ ++++ ++++ 強陽イオン交換担体。UNOsphere Sと同等の性質だが、粒子径が小さく高分

離能を実現。 8

Nuvia™ S B, C, F ++++ ++++ ++++ 強陽イオン交換担体。生体分子の分離に使用。UNOsphere Sへの同等の性質を持っているが、ビーズの表面を改良することにより非常に高い結合容量を持つ;pH安定性1-14。

8

UNOsphere S B, C, F ++++ ++++ ++++ 強陽イオン交換担体。生体分子の分離に最適;pH安定性1-14。 13

Macro-Prep 25 S B ++++ ++++ + 強陽イオン交換担体。Macro-Prep HighSと同等の性質だが粒径が25μmで高分離能を実現;ビーズの特性によりウイルスなどの混入物の除去が可能;pH安定性1-10。

15

Macro-Prep High S

B, C +++ ++++ +++ 強陽イオン交換担体。親水性マクロポーラス担体で、生体分子の分離に高結合量で使用;ビーズの特性によりウイルスなどの混入物の除去が可能;pH安定性1-10。

15

Macro-Prep CM B +++ ++++ +++ 弱陽イオン交換担体。高い能力生体分子分離;ビーズの特性によりウイルスなどの混入物の除去が可能;pH安定性1-10。 15

AG 50W B, GC ++++ ++ + 強陽イオン交換担体。架橋度の低い樹脂は、ペプチドやヌクレオチド分離に;架橋度の高い樹脂は、小さなペプチドや金属イオンの分離、陽イオンの除去に使用;自然落下または低圧で使用。

AG MP-50 B, GC ++++ ++ + 強陽イオン交換担体。AG50Wと同等の樹脂をマクロポーラス化したもので、高分子(MW >1,000,000)に使用;自然落下または低圧で使用。 -

バイオレックスMSZ 50

B ++++ ++ ++ 強陽イオン交換担体。AG50Wと同等の樹脂だが、粒径が均一で大きいため(650μm)、大スケール(カラムやバッチ)やプロセススケールのアプリケーションに使用。

バイオレックス 70

B ++++ ++ ++ 弱陽イオン交換担体。高分子(MW>1,000,000)の化合物に対し高い結合量を持つ;ペプチド、タンパク質、酵素や他の陽イオン分子との分離に使用。 -

キレックス® 100 B, GC ++++ ++++ ++++ 弱陽イオン交換担体。キレートにより金属を除去するので、PCRアプリケーションに適している;バッファーやイオン性試薬の精製のためにも使用可能;自然落下または低圧で使用。

UNO® S MPC ++++ 強陽イオン交換担体。生体分子の分離に使用し、高い生産性、結合性が特長;pH安定性2-12。 -

* B:ボトル、C:カートリッジ(1ml/5ml)、GC:自然落下法によるカラム、SC:スピンカラム、MPC:中圧カラム、F:Foresightカラム ** +:あまり適さない、 ++:やや適する、 +++:適する、 ++++:最も適する -:詳細は総合カタログを参照ください。

クロマトグラフィー担体

バイオ・ラッドはタンパク質精製のためのイオン交換、ハイドロキシアパタイト、フルオロアパタイト、ゲルろ過(サイズ排除)、疎水クロマトグラフィーの各担体を提供します。

Page 7: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体

7クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

安定性**

担体パッキング 形態*

分析 スケール

パイロット スケール

プロセス スケール 用途 Page

特殊用途イオン交換AG 11 A8 B ++++ ++ ++ イオン遅滞 陽イオンと陰イオンの交換基を持ち、弱く移動相のイオンに

作用する;水で溶出を行い非イオン物質分子の脱塩に使用可能;たとえば、タンパク質からのSDSの除去やミネラル酸の吸着。

AG 501-X8 B ++++ +++ +++ 混床樹脂、AG-1とAG50W-X8が等イオン交換容量で混合。水、尿素、ホルムアミド、アクリルアミドなどの脱イオンに使用。 -

バイオレックス MSZ 501

B ++++ ++ ++ 混床樹脂、バイオレックスMSZ 1とバイオレックスMSZ 50を等イオン交換容量で混合;水や非電解質の脱塩などに使用。大スケールでプロセスのアプリケーションに適している。

ゲルろ過(サイズ排除)バイオゲル P B, C, SC, GC ++++ ++++ ゲルろ過(サイズ排除);脱塩やバッファー交換に使用;粒径により、分子

量による分離。分子量100-100,000Da;pH安定性2-10。 28

バイオビーズ S-X B ++++ ++++ ++ 無極性溶媒の中の低分子量有機ポリマーや他の疎水性物質の分子量による分離。400-14,000Da。 29

アフィニティーUNOsphere SUPrA™ プロテインA

B, C, F ++++ ++++ ++++ 抗体精製;大量の細胞培養液からのFc部分の結合して精製を行う;プロセススケールでのモノクローナル抗体(mAb)精製に最適。 30

アフィゲル プロテインA

B, C, GC ++++ ++++ 腹水、血清や培養液からのIgG精製;低圧の担体。 31

アフィプレップ プロテインA

B, C ++++ ++++ ++ 腹水、血清や培養液からのIgG精製;圧力に安定性のある担体。 31

Nuvia IMAC B, C ++++ ++++ ++++ His-tagタンパク質精製。Ni+以外の金属アフィニティーにも使用可能。 32

IMAC Profinity B, C ++++ ++++ ++ His-tagタンパク質精製。 32

Epoxide Profinity B ++++ ++++ ++++ アフィニティカップリング担体;ヒドロキシル基(-OH)、アミノ基(-NH2)またはチオール基(-SH)のようなグループを持つ物質をリガンドとして結合させて使用;UNOsphereビーズがベースのため圧力にも安定。

33

アフィゲル10 B ++++ ++++ アフィニティカップリング;-NH2グループによるリガンドの固定。タンパク質(pl 6.5-11)のカップリングに使用;低圧の担体。 33

アフィゲル15 B ++++ ++++ アフィニティカップリング;-NH2グループによるリガンドの固定。タンパク質<pl 6.5のカップリング;低圧の担体。 33

アフィゲルHz B ++++ ++++ アフィニティカップリング;IgGのFc部位を固定。 33

アフィゲル102 B ++++ ++++ アフィニティカップリング;EDACを使用して-COOHグループによるリガンドの固定。 33

アフィゲルブルー B, C, SC ++++ ++++ アルブミン除去と酵素精製;Cibacron Blue F3GA色素を共有結合させたビーズ。 39

DEAEアフィゲル ブルー

B, C, GC ++++ ++++ IgG精製のためのアルブミンとプロテアーゼ除去;DEAEアガロースビーズにCibacron Blue F3GA色素を共有結合させた担体。 39

Profinity GST C ++++ ++++ ++ GST-tagタンパク質精製。 39

Profinity eXact™ B, C, SC ++++ ++++ ++ ワンステップのアフィニティータグ精製とon-column切断。 -

CMアフィゲルブルー B ++++ ++++ IgG精製のためのアルブミンとプロテアーゼ除去;CMアガロースビーズにCibacron Blue F3GA色素を共有結合させた担体。 -

アフィゲルヘパリン B ++++ ++++ 凝固因子、血漿タンパク質、ヌクレアーゼ、リパーゼとプロテアーゼを含む酵素の精製;いろいろな酵素や他のタンパク質が結合。 -

アフィプレップ ポリミキシン

B ++++ ++++ ++++ エンドトキシンの除去;圧力に安定性のある担体でNaOHによる除菌も可能。 -

アフィゲルboronate B ++++ ++ シスヒドロキシ基(シスジオール)を含む低分子量分子へ親和性を持つ;サイクリックAMPからのAMPの分離に最適。 -

ミックスモードハイドロキシアパタイト/フルオロアパタイトNuvia™ cPrime™ B, C, F ++++ ++++ ++++ リコンビナントタンパク質の精製。弱い疎水性と弱い陽イオン交換担体の特

長を持つ。 24

CHT™ Type I B, C, MPC, F ++++ ++++ ++++ タンパク質・抗体精製(Type IIより高い結合);ウイルス精製/除去;DNA精製/除去;Aggregationおよびエンドトキシン除去;Fab精製。 17

CHT Type II B, C, F ++++ ++++ ++++ 抗体精製;feedstreamからのアルブミンの除去;Fab精製。 17

MPC Type I B, F ++++ ++++ ++++ タンパク質・抗体精製;ウイルス精製/除去;DNA精製/除去;Aggregationおよびエンドトキシン除去;高いpH安定性。 17

CFT™ Type II B, C ++++ ++++ ++++ CHTと性質は類似しているが、より低いpH範囲(5.5)で安定性が高い;Fab精製に適している。 17

バイオゲルHT B ++++ +++ タンパク質、核酸や他の生体分子の精製;結晶質のヒドロキシアパタイトなのでCHTほど物理的に安定ではない。 23

バイオゲルHTP B ++++ +++ バイオゲルHTと同等だが乾燥粉末状の担体。 23

DNA grade バイオゲルHTP

B ++++

+++

Bio-Gel HTPと同等だがより小さい粒径;dsDNAの選択性が高いため;ss-とdsDNAの分離に適している。 23

疎水クロマトグラフィーMacro-Prep Methyl B ++++ ++++ ++ 相対的な疎水性に基づくタンパク質の分離;pH安定性1-10。 26

Macro-Prep t-Butyl B ++++ ++++ ++ 相対的な疎水性に基づくタンパク質の分離;pH安定性1-10。 26

バイオビーズSM-2  B +++ +++ +++ 水系溶媒から界面活性剤等の非極性物質を吸着。 27

* B:ボトル、C:カートリッジ(1ml/5ml)、GC:自然落下法によるカラム、SC:スピンカラム、MPC:中圧カラム、F:Foresightカラム ** +:あまり適さない、 ++:やや適する、 +++:適する、 ++++:最も適する -:詳細は総合カタログを参照ください。

Page 8: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶イオン交換クロマトグラフィー

8 Chromatography Guide

イオン交換クロマトグラフィーでは、分子をその電荷に基づいて分離します。負電荷または正電荷を帯びた官能基を担体マトリクスに共有結合させて、それぞれ陽イオン交換体または陰イオン交換体とします。荷電分子を反対電荷の交換体に添加すると、分子は吸着されて、交換体と同じ電荷の分子はカラム中に溶出されます。荷電分子の結合は可逆的です。吸着分子は一般に塩またはpH勾配により溶出されます。イオン交換体は、様々な粒径、イオン型、純度の範囲内で選択可能です。

イオン交換クロマトグラフィーは、生体分子の分離・精製、無機イオンの分離、試薬や水の脱イオン、塩への変換、金属イオン、エチジウムブロマイド、SDSの除去など、多くの用途で使用されます。

イオン交換クロマトグラフィーの場合、使用バッファーのpHと目的分子の等電点との関係、またそのpHにおける目的分子の安定性によって精製戦略が決まってきます。通常タンパク質の場合、目的タンパク質の等電点±0.5~1.5のpHでイオン交換体に結合させることが多く、等電点より低いpHではタンパク質は+に荷電するため陽イオン交換体を、等電点より高いpHでは-に荷電するため陰イオン交換体を用います。また、どのpHで分離を行うかは目的タンパク質の安定性を考慮して決められます。吸着したタンパク質の溶出には、どちらの交換体でも、NaClなどの中性塩の濃度を徐々に上げると、各タンパク質はイオン交換体への静電結合強弱の違いによって順番に(弱い結合~強い結合の順で)溶出してきます。また、pHの変化によっても溶出します。

対象分子のpIよりも0.5-1.5pH低い条件

目的の分子の電荷

樹脂の電荷

使用条件

陽イオン交換 陰イオン交換

対象分子のpIよりも0.5-1.5pH高い条件

目的分子の総電荷

等電点

陽イオン交換体に結合

陰イオン交換体に結合

2 4 6 8 10 12pH

バッファー

▶イオン交換クロマトグラフィー

Nuviaは、陽イオン交換体Nuvia Sであれば抗体の吸着量が110mg/ml以上、陰イオン交換体Nuvia QであればBSAの吸着量が170mg/ml以上という、超高吸着能の次世代型イオン交換担体です。さらに、優れた流速特性を示し、流速を上げても背圧が上がらず、かつ吸着量が落ちていかない設計となっています。また、非常にアルカリ耐性が高く、1M程度の高濃度アルカリで洗浄が可能、0.1M程度のアルカリで保存もできる製品です。

Nuviaは、モノクローナル抗体やその他タンパク質のようなバイオ医薬品製造プロセスのニーズにマッチするように開発されました。

製品は、ラボスケールでご利用いただけるカートリッジタイプの低圧用プレパックカラムから、プロセススケールでご利用いただけるバルク製品まで、各種取り揃えています。

抗体吸着量の他社製品比較 - Nuvia S -

左図のMedia 1 ‒ Media 6は、各担体メーカーから販売されている抗体の吸着量が最も高いイオン交換担体です。Nuvia Sは、それら高吸着イオン交換担体と比べても、1.5倍以上の吸着量です。

140

120

100

80

60

40

20

0

DB

C p

oly

clo

nal h

IgG

, 10

% B

T, m

g/m

l

Nuvia S media

Media1

Media2

Media3

Media4

Media5

Media6

Nuvia 超高吸着能イオン交換担体

Page 9: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体イオン交換クロマトグラフィー◀

9クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

仕様Nuvia S Nuvia Q

Type of ion exchanger Strong cation Strong anionFunctional group ‒SO3- ‒N(CH3)3+

Total ionic capacity 90‒150 μeq/ml 100-170 μeq/mlDynamic binding capacity* 300 cm/hr >110 mg/ml 300 cm/hr >170 mg/mlShipping counterion Na+ Cl-

Median particle size 85 ± 15 μm 85 ± 15 μmRecommended linear flow rate range 50‒600 cm/hr 50‒600 cm/hrChemical stability1.0 N NaOH (20℃) up to 1 week up to 1 week0.1 N NaOH (20℃)** up to 5 yr 0.01 N NaOH (20℃)** up to 5 yrGel bed compression ratio 1.15‒1.18 (settled bed 1.10‒1.15

volume/packed bed volume)pH stability** 2‒14 short term 2‒14 short term

4‒13 long term 4‒12 long termShipping solution 20% ethanol + 0.1 M NaCl 20% ethanol + 1 M NaClRegeneration 1‒2 M NaCl 1‒2 M NaClSanitation 0.5‒1.0 N NaOH 0.5‒1.0 N NaOHStorage conditions 20% ethanol or 0.1 N NaOH 20% ethanol or 0.01 N NaOH

* 10% breakthrough capacity determined with 4.5 mg/ml human IgG in 40 mM NaOAc + 30 mMNaCl, pH 5.0 for Nuvia S and 5 mg/ml BSA in 20 mM Tris-HCI pH 8.5 for Nuvia Q.**Data derived under accelerated conditions at 60℃.NOTE: Recommended elution flow rates are <150 cm/hr to minimize viscosity induced backpressure.

アプリケーション

プロテインA担体の代わりに、抗体のキャプチャーステップにNuvia Sを用いた場合左図は、CHO細胞培養からのモノクローナル抗体をキャプチャーステップとしてNuvia Sで精製したときのクロマトグラムです。2段階のステップワイズ溶出で、1段階目で不純物を洗浄後、2段階目で抗体を溶出しています。通常プロテインA担体の抗体吸着量は20-40mg/mlですが、Nuvia Sの抗体吸着量は100mg/ml以上です。また、抗体精製プロセスにおいてプロテインA担体が占めるコストの割合が非常に高いという問題がありますが、イオン交換担体Nuvia Sをキャプチャーステップに使用することで、かなりのコスト削減が期待できます。

プロテインA担体の後工程に、抗体の中間精製にNuvia Sを用いた場合

左図は、プロテインA担体からの抗体の溶出プールをNuvia Sで精製したときのクロマトグラムです。2段階のステップワイズ溶出で、1段階目で不純物を洗浄後、2段階目で抗体を溶出しています。図中左上にはSEC-HPLCの分析結果が載せられています。Nuvia Sの前に13.8%あった抗体凝集体(Aggregates)が、Nuvia Sで精製後に1%以下まで除去されています。

Buffer B wash fractions

Buffer C elutionpooled fractions,

11–15 M

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 111213141516 17 18

3.50

3.00

2.50

2.00

1.50

1.00

0.50

0.00

–0.50

30 60 90

Time, min

AU

Flow through

Buffer Bwash

Buffer Celution

1 N NaOH strip

350

300

250

200

150

100

50

0

–50

250

190

100

75

50

37

25201510

Co

nd

uctivity,

mS

/cm

2 3 4 5 6 7 8 9

0.01

0.008

0.006

0.004

0.002

0

12 13 14 15 16

AU

Time, min

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

11.00 12.00 13.00

Min.Tenth

–0.0025

0.0000

0.0025

0.0050

0.0075

0.0100

0.0125

AU

–0.0025

0.0000

0.0025

0.0050

0.0075

0.0100

0.0125

AU

LoadFractions 3-8

2.00

1.75

1.50

1.25

1.00

0.75

0.50

0.25

0.00

–0.25

0 10 20 30 40

Time, min

AU

SEC-HPLC Analysis

Buffer A equilibration

Buffer Dwash

Buffer E elution

1N NaOH strip

500

400

300

200

100

0

–100

mS

/cm

Page 10: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶イオン交換クロマトグラフィー

10 Chromatography Guide

Nuvia Media Nuvia HR-S Nuvia S Nuvia Q

Median ParticleSize(μm) 50 85 85

lonic Capacity(μeq/ml) 100-180 90-150 100-170

DBC(mg/ml)* > 70mg > 110mg > 170mg

Recommendedflow rate

50-200cm/hr

50-600cm/hr

50-600cm/hr

Application(s) Polish CapturePolish

CapturePolish

*BSA or hIgG at 300cm/hr

Nuviaマトリックス Nuvia担体の高い物質移動速度

プロテインA担体の後工程に、抗体の中間精製にフロースルーモードでNuvia Qを用いた場合

dsDNA Clearance

InvitrogenQuant-iT PicoGreen

Load(ng/mg)

Post Nuvia Q(ng/mg)

5.8 < 0.02*383.3 < 0.02*457.9 < 0.02*

* Not detectable

左図は、プロテインA担体からの抗体の溶出プールを、次にフロースルーモード(目的分子を素通りさせ、DNAやエンドトキシン等の不純物を吸着させて除去する方法)でNuvia Qを用いて精製したときのクロマトグラムです。このアプリケーションのメリットは、フロースルー精製のため、担体の使用量が少なくて(カラムが小さくて)すむことです。また、Nuvia QのDNAの吸着量は競合他社製品よりも3倍ほど高いので、さらにカラムサイズを小さくすることが可能です。上図にはdsDNAの除去結果が示されています。カラムにアプライしたDNAの量にかかわらず、検出限界以下までDNAが除去されています。

0.500

0.450

0.400

0.350

0.300

0.250

0.200

0.150

0.100

0.050

-0.000

-0.050

10.00 20.00 30.00 40.00

12.5

10.0

7.5

5.0

2.5

0.0

-2.5

2F

Frac#

3F 4F 5F 6F 7F 8F 9F 10F 11F 12F

OD280OD260pH

AU Min.Tenth

mAb in Flow-through impurities stripped by 1N NaOH

pH

Nuvia HR-Sは、粒子径を50μmとより小さく最適化することで、これまで分離が困難であった目的分子に類似したイオンチャージを持つ分子との分離が可能となり、中間精製用または最終精製用に適した新しいクロマトグラフィー担体です。この製品は、バイオ医薬品の製造プロセスにマッチするように優れた選択性と高い回収率を示します。また、ラボスケールからプロセススケールまでご利用いただける製品を取り揃えています。Nuvia HR-Sは、Nuvia S や Nuvia Q と同じファミリーに属し、タンパク質や核酸、ウイルス、プラスミドや他の生体分子の分離精製に適しています。他の Nuvia 製品と同様に、1M程度の高濃度アルカリで洗浄が可能、0.1M程度のアルカリで保存もできる製品です。

仕様Nuvia HR-S

Type of ion exchanger Strong cationFunctional group ‒SO3‒Total ionic capacity 100-180 μeq/mlDynamic binding capacity* >70mg/ml at 300 cm/hrShipping counterion Na+Median particle size 50±10μmRecommended linear flow rate range 50-200 cm/hrChemical stability -1.0 N NaOH (20℃) up to 5 weeks0.1 N HCl (20℃)** up to 5 yrs

Compression factor 1.25(settled bed volume/packed bed volume)

pH stability** 2‒14 short term4-13 long term

Shipping solution 20% ethanolRegeneration 1‒2 M NaClSanitization 0.5-1.0 N NaOHStorage conditions 20% ethanol or 0.1 N NaOH

* 10% breakthrough capacity determined with 5.0 mg/ml human IgG in 20mM NaOAc pH 5.0.** Date derived under accelerated conditions at 60℃.

Nuvia HR-S 高分離能イオン交換担体

Nuvia HR-S の粒子径は、プロセスケールのクロマトグラフィー担体としては小さい50μmで最適化されています。これまで流速や結合量といった生産性を重視するプロセススケールでは分離が困難であった場合にも、精製の有効な手段としてご使用いただけます。一方で、粒子径を小さくすることで背圧に負担がかかることが考えられますが、優れた流速特性を持つ担体マトリックスの特長により、流速を200cm/hrで運転しても背圧は1bar以下で操作することが可能です。プロセススケールでより精製度を向上させたい場合にお勧めの製品です。

Page 11: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体イオン交換クロマトグラフィー◀

11クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

高純度精製;Aggregatesの分離

高回収率 迅速な結合と少ないロス

高い回収率とシャープな溶出プロファイル

Nuvia HR-Sで分離したフラクションをゲルろ過(サイズ排除)クロマトグラフィーで確認した。

凝集体を含む抗体画分をNuvia HR-S(■)と他社Media(■)を使って精製し、Monomer(単量体)の回収率をプロットした。8.9%の凝集体を含む画分を精製した場合、溶出画分には、Monomer(単量体)が、80%以上回収できた(凝集体は0.3%以下だった)。

Page 12: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶イオン交換クロマトグラフィー

12 Chromatography Guide

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格1560311 Nuvia S, 25ml ¥13,0001560313 Nuvia S, 100ml ¥40,0001560315 Nuvia S, 500ml ※1560317 Nuvia S, 10L ※1560411 Nuvia Q, 25ml ¥13,0001560413 Nuvia Q, 100ml ¥40,0001560415 Nuvia Q, 500ml ※1560417 Nuvia Q, 10L ※1560511 Nuvia HR-S, 25ml ¥13,0001560513 Nuvia HR-S, 100ml ¥40,0001560515 Nuvia HR-S, 500ml ※1560517 Nuvia HR-S, 10L ※Foresightカラム ¥15,0007324721 Foresight Nuvia Q, 1ml ¥28,0007324741 Foresight Nuvia Q, 5ml ¥15,0007324720 Foresight Nuvia S, 1ml ¥28,0007324740 Foresight Nuvia S, 5ml ¥16,0007324723 Foresight Nuvia HR-S, 1ml ¥30,0007324743 Foresight Nuvia HR-S, 5mlBio-Scale Miniカートリッジ7324420 Bio-Scale Mini Nuvia Sカートリッジ, 1ml, 1本 ¥8,4007324421 Bio-Scale Mini Nuvia Sカートリッジ, 1ml, 5本 ¥25,0007324422 Bio-Scale Mini Nuvia Sカートリッジ, 5ml, 1本 ¥21,0007324423 Bio-Scale Mini Nuvia Sカートリッジ, 5ml, 5本 ¥68,000アダプターフィッティング7320112 Bio-Scale Mini カートリッジHPLC用アダプター(HPLCシステム、1/16"タイプ接続用)1セット ¥8,0007320113 Bio-Scale Mini カートリッジBioLogic用アダプター(BioLogic DuoFlowシステム、1/4-28タイプ接続用)1セット ¥8,000※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。ハイスループットスクリーニング用のプレパックカラム、プレート、ロボカラムについては、37ページをご参照ください。

Page 13: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体イオン交換クロマトグラフィー◀

13クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

UNOsphere 超高アルカリ耐性イオン交換担体

仕様UNOsphere Q UNOsphere S

Type of ion exchanger Strong anion Strong cationFunctional group ‒N+(CH3)3 ‒SO3‒Total ionic capacity 120 μeq/ml 260 μeq/mlDynamic binding capacity*150 cm/hr 180 mg/ml 60 mg/ml600 cm/hr 125 mg/ml 30 mg/ml

Shipping counterion Cl‒ Na+Median particle size 120 μm 80 μmRecommended linear flow rate range** 50‒1,200 cm/hr 50‒1,200 cm/hrChemical stability1.0 M NaOH (20℃) <2,000 hr <2,000 hr1.0 M HCl (20℃) <200 hr <200 hr

Volume changespH 4‒10 <5% <5%0.01‒1.0 M NaCl <5% <5%

Gel bed compression ratio*** 25% ± 3% 25% ± 3%pH stability 1‒14 1‒14

- -Autoclavability (121℃ , 30 min) Yes YesAntimicrobial agent 20% ethanol 20% ethanolRegeneration 70% ethanol or 1‒2 M NaCl 70% ethanol or 1‒2 M NaClStorage conditions 20% ethanol or 0.1 M NaOH 20% ethanol or 0.1 M NaOH

* 10% breakthrough capacity determined with 4.5 mg/ml human IgG (UNOsphere S) and 2.0 mg/ml BSA (UNOsphere Q) in a 1.1 x 20 cm column.** UNOsphere media packed to a 20 cm bed height and run at 1,200 cm/hr generate less than 2 bar backpressure.***A compression ratio is for axially compressed columns packed at a constant flow rate (100‒1,200 cm/hr) or constant pressure of 1‒2 bar. Gel bed will rebound to its original volume 15‒20 min after the pump stops. Columns with small ID may not rebound to original volume due to Wall effects.

UNOsphereは、これまでの常識を覆すほどの高いアルカリ耐性を示すイオン交換担体です。基本的な設計は最新のイオン交換担体Nuviaと同様で、優れた流速特性を示し、流速を上げても背圧が上がらず、かつ吸着量が落ちていかないポリマー構造となっています。1M NaOHで長時間洗浄が可能なため、クルードな状態のサンプルや、DNAやエンドトキシン等の不純物を多く含むサンプルを精製する場合に有効です。UNOsphereは、モノクローナル抗体やその他タンパク質のようなバイオ医薬品製造プロセスのニーズにマッチするように開発されました。製品は、ラボスケールでご利用いただけるカートリッジタイプの低圧用プレパックカラムから、プロセススケールでご利用いただけるバルク製品まで、各種取り揃えています。

BSA吸着量と流速の他社製品比較 - UNOsphere Q -Support Linear Velocity(cm/hr) Recovery(%) BSA Binding Capacity(g/L) Process Time(hr) Productivity(g/L/hr)UNOsphere Q 615 100.0 120.0 1.58 75.0Q Sepharose FF 300 99.0 23.0 1.19 19.0Fractogel EMD TMAE (M) 105 99.0 82.0 5.04 16.0

上表は、競合製品Q Sepharose FFとFractgel EMD TMAEとの比較データです。UNOsphereは高流速でも取り扱いが可能なため615cm/hrという非常に早い線流速でデータを取っていますが、それでもBSAの吸着量は120g/Lという高いレベルを示しています。プロセスの生産性を上げるためには、高流速でかつ高吸着を維持できる担体が求められています。

UNOsphere担体

Bio-Scale™ Mini UNOsphere™カートリッジ

強陰イオン交換担体をクロマトグラフィー工程の最初(キャプチャーステップ)に使用したときのDNAのクリアランスについて右表は、UNOsphere QカラムにDNAを吸着させて、各溶出液からのフラクション中に含まれるDNAの回収率をパーセントで示したものです。この結果は、通常強陰イオン交換担体に吸着したDNAは、一般的にタンパク質等が溶出してくるNaCl濃度(~0.5M NaCl)では全く溶出してきていないことを示しています。また、通常よくプロセス終了後の洗浄液として使用される高濃度のNaClでは、たとえ濃度を2Mまで上げたとしても、カラムに吸着したDNAは45%程度しか洗浄しきれていないことが分かります。この結果から、強陰イオン交換担体に吸着したDNA(およびネガティブチャージの強いエンドトキシンも同様)は、高濃度のアルカリ、もしくはNaClを含む高濃度のアルカリで、少なくとも数時間の接触時間で洗浄する必要があることが示されました。特に強陰イオン交換担体をクロマトグラフィーの最初のステップに使用する場合は、培養液等からの持ち込みのDNAやエンドトキシンが大量に含まれていますので、使用する担体の洗浄性、アルカリ耐性については十分に考慮する必要があります。

DNA回収率Process Step Percentage Yield(%)Flowthrough with wash 0Eluted fractions at 0.1 M NaCl 0Eluted fractions at 0.5 M NaCl 0Eluted fractions at 1.0 M NaCl 35.4Eluted fractions at 2.0 M NaCl 10.82.0 M NaCl with 1.0 M NaOH wash 37.81.0 M NaOH wash 7.80.02 M NaOH wash 0Cumulative 91.8

Page 14: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶イオン交換クロマトグラフィー

14 Chromatography Guide

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格1560101 UNOsphere Q, 25ml ¥9,0001560103 UNOsphere Q, 100ml ¥25,0001560105 UNOsphere Q, 500ml ※1560107 UNOsphere Q, 10L ※1560111 UNOsphere S, 25ml ¥9,0001560113 UNOsphere S, 100ml ¥25,0001560115 UNOsphere S, 500ml ※1560117 UNOsphere S, 10L ※Foresightカラム7324732 Foresight UNOsphere Q,1ml ¥14,0007324752 Foresight UNOsphere Q, 5ml ¥25,0007324730 Foresight UNOsphere S, 1ml ¥14,0007324750 Foresight UNOsphere S, 5ml ¥25,000Bio-Scale Miniカートリッジ7324102 Bio-Scale Mini UNOsphere Qカートリッジ, 5ml, 1本 ¥16,0007324104 Bio-Scale Mini UNOsphere Qカートリッジ, 5ml, 5本 ¥68,0007324100 Bio-Scale Mini UNOsphere Qカートリッジ, 1ml, 5本 ¥21,0007324112 Bio-Scale Mini UNOsphere Sカートリッジ, 5ml, 1本 ¥16,0007324114 Bio-Scale Mini UNOsphere Sカートリッジ, 5ml, 5本 ¥68,0007324110 Bio-Scale Mini UNOsphere Sカートリッジ, 1ml, 5本 ¥21,000アダプターフィッティング7320112 Bio-Scale Mini カートリッジHPLC用アダプター(HPLCシステム、1/16"タイプ接続用)1セット ¥8,0007320113 Bio-Scale Mini カートリッジBioLogic用アダプター(BioLogic DuoFlowシステム、1/4-28タイプ接続用)1セット ¥8,000

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。ハイスループットスクリーニング用のプレパックカラム、プレート、ロボカラムについては、37ページをご参照ください。

上図は、UNOsphere Qのアルカリ耐性を示すデータです。1M NaOHで10,000時間保存後でもBSAの吸着量は落ちず(左)、また4種類のスタンダードタンパク質の分離パターンは変わりません(右)。これらのデータから、UNOsphere Qは1M NaOHでも長時間洗浄が可能なことが分かります。そのため、カラムに吸着したDNAやエンドトキシン等の不純物を効率よく除去することができ、次回精製時におけるクロスコンタミのリスクを可能な限り低減することができます。

Storage time in 1 N NaOH, hr

Ret

entio

n tim

e, m

in

0 2,000 4,000 6,000 8,000 10,0000

2

4

6

8

10

X Soybean trypsin inhibitor ■ Conalbumin

● Ovalbumin ◆ Myoglobin

Storage time, hr

10%

Bre

akth

roug

h, m

g B

SA

/ml

0 2,000 4,000 6,000 8,000 10,000100

125

150

175

200

225

■ Lot 1 (0.1 N NaOH)

Lot 2 (1.0 N NaOH)◆

強陰イオン交換のアルカリ耐性データ

Page 15: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体イオン交換クロマトグラフィー◀

15クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

Macro-Prepは、硬質メタクリレートのベースマトリックスで、収縮や膨張がほとんどなく、低圧から中圧のクロマトグラフィーに適したイオン交換担体です。すべてのMacro-Prepイオン交換担体にはカルボキシル基が含まれており、pH条件、サンプルに応じて、担体は混合モードで作用します。この特性によりMacro-Prep担体は独自の選択性を持ち、回収率と純度が高まることがあります。また、粒子径が50μmとプロセス用のクロマトグラフィー担体としては比較的小さいため、高い分離能を示す場合があります。粒子径が25μmタイプは、より高い分離に適しています。Macro-Prepイオン交換担体ファミリーは、強陰イオン、弱陰イオン、強陽イオン、弱陽イオン、と様々なタイプがあり、目的分子の性質や精製戦略に応じて、それぞれお試しいただくことが可能です。製品は、ラボスケールでご利用いただけるカートリッジタイプの低圧用プレパックカラムから、プロセススケールでご利用いただけるバルク製品まで、各種取り揃えています。

粒子径分布の他社製品比較 ‒ Macro-Prep DEAE ‒下図は、競合製品群の一つであるTSK DEAE 650MとDEAE Sepharose FFとの比較データです。緑色のラインがMacro-Prep DEAEですが、他社製品と比べてピークがシャープで、より均一な粒子径であることが分かります。これは、パッキング間差が少なく安定した理論段数を得られることにつながってきます。製造において、操作間差を少なくすることは重要です。

Macro-Prep 担体

Bio-Scale™ Mini Macro-Prep® カートリッジ

1501005000

20

25

15

10

5

0

Macro-Prep DEAE supportTSK DEAE 650MDEAE Sepharose FF

Particle size, μm

Per

cent

age

Macro-Prep イオン交換担体

仕様Property High Q DEAE High S CM 25 Q 25 Sイオン交換タイプ 強陰イオン 弱陰イオン 強陽イオン 弱陽イオン 強陰イオン 強陽イオン官能基 ‒N+(CH3)3 ‒HN+(C2H5)2 ‒SO3‒ ‒COO‒ ‒N+(CH3)3 ‒SO3‒

交換容量 400±75μeq/ml 175±75μeq/ml 160±40μeq/ml 210±40μeq/ml 220±40μeq/ml 110±30μeq/ml結合容量 40mg BSA/ml 35mg BSA/ml 70mg IgG/ml 35mg hemoglobin/ml >30mg/ml BSA >40mg/ml BSAイオン型 Cl‒ Cl‒ Na+ Na+ Cl‒ Na+

粒径 50μm 50μm 50μm 50μm 25μm 25μmポアサイズ 1,000Å 1,000Å 1,000Å 1,000Å 725Å 725ÅRecommended linear flow rate range

50‒300cm/hr 50‒300cm/hr

Recommended maximum linear flow rate

3,000cm/hr 3,000cm/hr 3,000cm/hr 3,000cm/hr 3,000cm/hr 3,000cm/hr

化学耐性 1% SDS, 24hr

6 M guanidine-HCl, 24hr ● ● ● ● ● ●Volume changes pH 4‒10 <1% <1%

<3% <1% <1% <1%

0.1‒1.0 M NaCl <5% <5% <9% <4% <5% <5%オートクレーブ (121℃ , 80min) ● ● ● ●  ●* ●

pH安定性 1‒10 1‒10 1‒10 1‒10 1‒10 1‒10保存状態 20% ethanol 20% ethanol 20% ethanol 20% ethanol 20% ethanol 20% ethanol* OH‒ formはオートクレーブできません。

Page 16: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶イオン交換クロマトグラフィー

16 Chromatography Guide

「とりあえずDEAE」の法則   Macro-Prep DEAEとCHTセラミックハイドロキシアパタイトの2ステップでウマの血漿からIgGTを精製した例

DEAEは弱陰イオン交換担体に分類され、DNAやエンドトキシンといったネガティブチャージが強い不純物に対しても吸着がそれほど強くないために、昔から「とりあえずDEAE」ということで、一般的にクロマトグラフィーの最初のステップに使用されてきました。ここでは、とりあえずDEAEで精製したウマIgGγを分離能の高いCHTセラミックハイドロキシアパタイトでポーリッシングすることで98 ‒ 99%の純度まで精製できた例を紹介しています。DEAEは不純物の吸着が少い分、目的物質の吸着量も少いケースがあり、最近ではNuvia QやUNOsphere Qのような吸着量が高く、かつ不純物が強固に吸着してもしっかり洗浄ができるようなアルカリ耐性の高い強陰イオン交換担体を第一工程に使用するケースが増えてきています。強陰イオン交換担体、弱陰イオン交換担体共にそれぞれ特長がありますので、目的物質の性質や精製戦略に応じて、それぞれお試しください。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格 カタログ番号 品名 価格Macro-Prep High Q Macro-Prep CM1580040 Macro-Prep High Q, 25ml ¥8,000 1580070 Macro-Prep CM, 25ml ¥8,000 1560040 Macro-Prep High Q, 100ml ¥18,000 1560070 Macro-Prep CM, 100ml ¥24,000 1560041 Macro-Prep High Q, 500ml ¥60,000 1560071 Macro-Prep CM, 500ml ¥80,000 1560042 Macro-Prep High Q, 5L ※ 1560072 Macro-Prep CM, 5L ※ 1560043 Macro-Prep High Q, 10L ※ 1560073 Macro-Prep CM, 10L ※ Macro-Prep DEAE Macro-Prep 25 Q1580020 Macro-Prep DEAE, 25ml ¥8,000 1530021 Macro-Prep 25 Q, 50ml ¥30,000 1560020 Macro-Prep DEAE, 100ml ¥18,000 1530022 Macro-Prep 25 Q, 200ml ¥100,000 1560021 Macro-Prep DEAE, 500ml ¥60,000 1530023 Macro-Prep 25 Q, 1L ※ 1560022 Macro-Prep DEAE, 5L ※ 1530024 Macro-Prep 25 Q, 5L ※ 1560023 Macro-Prep DEAE, 10L ※ Macro-Prep 25 SMacro-Prep High S 1530031 Macro-Prep 25 S, 50ml ¥90,000 1580030 Macro-Prep High S, 25ml ¥8,000 1530032 Macro-Prep 25 S, 200ml ¥360,000 1560030 Macro-Prep High S, 100ml ¥18,000 1530033 Macro-Prep 25 S, 1L ※1560031 Macro-Prep High S, 500ml ¥60,000 1530034 Macro-Prep 25 S, 5L ※1560032 Macro-Prep High S, 5L ※ 1560033 Macro-Prep High S, 10L ※

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。

M マーカー1. ウマ血漿2. DEAE3. CHT

M 1 2 3 Fractions

Run time, min

A28

0

2

1.0

0.5

0.0

0 30 60 900.0

1.04 6 8 11 17 23 29 35 41 47 53 59 65

NaC

l con

cent

ratio

n, M

0%

100% B

262422201816141210864321

Fractions

Run time, min0 5 10 15

0.0

0.1

0.2

0.3

0.4

A28

0

Macro-Prep DEAE CHT セラミックハイドロキシアパタイト

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格Bio-Scale カートリッジ7324120 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Qカートリッジ 1ml、5本 ¥21,0007324122 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Qカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324124 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Qカートリッジ 5ml、5本 ¥68,0007324130 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Sカートリッジ 1ml、5本 ¥21,0007324132 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Sカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324134 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Sカートリッジ 5ml、5本 ¥68,0007324140 Bio-Scale Mini Macro-Prep DEAEカートリッジ 1ml、5本 ¥21,0007324142 Bio-Scale Mini Macro-Prep DEAEカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324144 Bio-Scale Mini Macro-Prep DEAEカートリッジ 5ml、5本 ¥68,000

Page 17: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体ミックスモード (CHT, CFT, MPC)◀

17クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

ミックスモードクロマトグラフィー担体は、2つ以上の異なるリガンドをもち、これまでとは異なった分離モードをあわせ持つ新規のクロマトグラフィー担体です。これまでの担体では分離が困難だった場合や、異なった条件で吸着・溶出を行う場合に使用できます。比較的中性領域でかつ高塩濃度の条件で吸着・溶出が行えるため、バイオ医薬品などの精製に適しています。

ハイドロキシアパタイト(Ca5(PO4)3OH)2とフルオロアパタイトCa10(PO4)6F2はリン酸カルシウムの一種で、そのユニークな選択性により、他のクロマトグラフィーや電気泳動では分離できないタンパク質類を分離することができます。ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィーとフルオロアパタイトクロマトグラフィーは、初期精製ステップから最終精製ステップ(ポーリッシング)まで、どのステップにも使用できます。ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィーには、CHTセラミックハイドロキシアパタイトとバイオゲルハイドロキシアパタイトがあります。セラミックハイドロキシアパタイトは、結晶性のハイドロキシアパタイトを高温で焼結し、製品強度を高めた製品です。CFTセラミックフルオロアパタイトはCHTセラミックハイドロキシアパタイトと同様なタンパク質選択性を示しますが、より低いpHでの精製が可能です。対象タンパク質を分離精製する際には、CFTセラミックフルオロアパタイトとCHTセラミックハイドロキシアパタイトのどちらが適するのかを同時に評価すると効果的です。MPC は CHT Type-I の次世代タイプで、基本的な仕様・パフォーマンスは CHT Type-I と同等ですが、厳しい条件下での精製に耐性を持ち、2倍以上の回数使用できます。

▶ミックスモード

CHTセラミックハイドロキシアパタイト・CFTセラミックフルオロアパタイト・MPCセラミックフルオロアパタイト

1従来品(針状結晶タイプ)との違い 2 粒径(10、20、40、80μm)と分離能との関係

構造 針状結晶タイプ(従来品) セラミックタイプ形状 針状 球形サイズ 数μm~百数十μm 各10、20、40、80μmに分級流速 約25-35cm/hr 10-1,500cm/hrシステム 低圧クロマト 低圧~高圧クロマト耐圧 数十psi 900-1500psi/60-100bar粒子破壊強度 0.3-0.4MPa 3MPa以上

粒径(μm) 10 20 40 80分離能 高い 普通流速 遅い 早い用途 分析/分取 分析/分取 分取 分取

針状結晶 セラミックタイプ

図1 針状タイプとセラミックタイプとの構造の違い ×370×370

A28

0

0Time(min)

10μmPressure: 23 bar

20μmPressure: 6 bar

40μmPressure: 2 bar

カラムサイズ :4×100mm緩衝液 :A:1mMリン酸緩衝液(pH6.8)緩衝液 :B:400mMリン酸緩衝液(pH6.8)線流速 :478cm/h

80μmPressure: 0.5 bar

4 8 12 0Time(min)

4 8 12 0Time(min)

4 8 12 0Time(min)

4 8 12

図2 分離パターンに及ぼす粒子サイズの影響

基礎(原理・特徴)

精製ターゲット●抗体、酵素●低分子抗体(F(ab')2など)●異性体●ウイルス粒子(活性維持) ●プラスミド●糖・配糖体●エンドトキシン●HCP(ホストセル由来のタンパク質)●リン酸化タンパク質●核酸(ヌクレオチド、ssDNAとdsDNAの分離等)●微量金属●その他、生理活性物質等

Ca+))Ca+))OH

OH

PO4=......

PO4=......

PO4=

OH

+Ca+Ca

HO

OH

HO

COO‒COO‒

COO‒))COO‒))((=O4P

((=O4P=O4P

((+H2N((+H2N

+H2N+H2N

A B

タンパク質のハイドロキシアパタイトへの結合A :塩基性タンパク質  ))(( :反発力  … :イオン結合B :酸性タンパク質   ▶ :配位結合本データはValidated BioSystemsのPete Gagnon氏より提供

CHTセラミック ハイドロキシアパタイト

Bio-Scale™ Miniカートリッジ

Page 18: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶ミックスモード (CHT, CFT, MPC)

18 Chromatography Guide

基本性能 CHT Type I CHT Type II CFT Type II MPC (CHTの2ndGen)官能基 Ca2+, (PO4)3- Ca2+, (PO4)3- Ca2+, (PO4)3-,F- Ca2+, (PO4)3-,F-

タンパク質吸着量 >25 mg lysozyme per gram CHT >12.5 mg lysozyme per gram CHT 14-21.5 mg lysozyme per gram CFT >25mg lysozyme per gram MCPIgG吸着量(500cm/hr) 10-50 mg/ml 5-25 mg/ml 33 mg/ml (300cm/hr) 25-50 mg IgG MPC (300cm/hr)粒子径 20, 40, and 80 µm (nominal) 20, 40, and 80 µm (nominal) 40 µm (nominal) 40 µmポアサイズ 600-800 Å 800-1,000 Å 600-800 Å 600-800 Å最大耐圧 60 bar (900 psi) 100 bar (1,500 psi) 100 bar (1,500 psi) 100bar (1,500psi)最大線流速 5,000 cm/hr 5,000 cm/hr 5,000 cm/hr 1,000 cm/hrpH安定性 6.5-14 6.5-14 5.0-14 6.5-14再生 in 0.4-1.0 M phosphate buffer in 0.4-1.0 M phosphate buffer in 0.4-1.0 M phosphate buffer 0.4-0.5 M phosphate buffer 殺菌 in 1-2 N NaOH in 1-2 N NaOH in 1-2 N NaOH in 1-2N NaOHオートクレーブ処理 20 min at 121℃ 20 min at 121℃ 20 min at 121℃ 20 min at 121℃主なアプリケーション 全てのタンパク・核酸精製 高分子・ウイルス精製 酸性領域での精製 全てのタンパク・核酸精製化学的安定性1 N NaOH >24 hr >24 hr >24 hr >24 hr8 M 尿素 >24 hr >24 hr >24 hr >24 hr8 M グアニジン塩酸 >24 hr >24 hr >24 hr >24 hrエタノールまたはメタノール >24 hr >24 hr >24 hr >24 hr100% アセトニトリル >24 hr >24 hr >24 hr >24 hrNote: A small amount of an appropriate counterion such as 0.1-10 mM NaPO4- should be added to all unbuffered solutions. ※CFTは40μmのみです。

3セラミックタイプのType-IとType-II及びCFTの違い

4 CHT Type-I, 40μm とMPC, 40μm の違い

SampleIgG Concentration,

mg/ml Protein A, ppm HCP, ppm DNA, ppm Dimer/Aggregate, %MAb-SProtein A Eluate 2.90 33 24 21 21.62CHT Pool 0.40 <0.6 <2 2.62 <0.03MPC Pool 0.46 <0.5 <2 2.83 <0.03MAb-GProtein A Eluate 4.41 17 <2 0.82 4.39CHT Pool 0.91 <0.3 <1 1.38 <0.03MPC Pool 0.77 <0.3 <1 1.43 <0.03

Quantified data from all assays. All pooled fractions and MAb starting material purified on MPC and CHT were analyzed for host cell protein (Cygnus Technologies HCP ELISA kit), for dsDNA (PicoGreen dsDNA quantitation kit, Molecular Probes, Inc.), for Protein A leachables (Cygnus Technologies Protein A ELISA kit), and for aggregate clearance by size exclusion chromatography (Bio-Sil SEC 250, Bio-Rad Laboratories, Inc).

CHT Type I-40 MPC Type I-40 ResultStability ++ +++ Improved

Binding Capacity +++ ++(+) Similar

Chromatography (separations, clearance) ++++ ++++ Similar

++++ indicates strongest(+) indicates slightly less than +

•Conclusion:- Binding capacity of MPC is slightly less for MAb.- Yield, purity, contaminant clearance are similar.- MPC lasts longer.

MPC は CHT Type-I の次世代タイプで、基本的な仕様・パフォーマンスは CHT Type-I と同等ですが、厳しい条件下での精製に耐性を持ち、2倍以上の回数使用できます。

Page 19: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体ミックスモード (CHT, CFT, MPC)◀

19クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

基礎(使用例) 誰でもできるCHTクロマトグラフィー精製方法どんなタンパク質/核酸でもマイルドな条件で簡単に精製できます。●ほとんどのターゲットタンパク質に対して、下記のような同一条件で精製できます。●サンプルのpHを、酸性、または塩基性側に調整する必要がありません(中性付近でOK)。●低濃度のNa・K塩がサンプル中に含まれていても、透析やバッファー交換をする必要はありません。

■標準的なクロマトグラフィー条件:

カラム : 分析用途 → Bio-Scale CHT-I Column(粒子径;10μm) または Bio-Scale Miniカートリッジ 条件 : 分取用途 → オープンカラム(粒子径;40μm又は80μm) または Bio-Scale Miniカートリッジ 担体 : CHT Type-I緩衝液 : pH6.5-7.5 リン酸緩衝液溶出条件 : 5mM-400mM リニアグラジェント流速 : 50-300cm/hrサンプル : リン酸濃度が0-5mM(可能であれば5mM)、pH6.5-7.5になるように調製

注意1:サンプル中にキレート剤が入っている 場合は、透析やバッファー交換を行う注意2:リン酸ナトリウムは水和物を使用する こと(無水は使用しない)

精製例:混合物からのIgGの精製

20100

0

50

100% B

t (min)

Retention Time (min)

OD

280

E28

0

ALBU

MIN

TRAN

SFER

RIN

FIBR

ONEC

TIN

I gG

カラムサイズ: 7.5 x 100mm緩衝液: A: 1 mM リン酸ナトリウム緩衝液 pH 6.8 B: 400 mM リン酸ナトリウム緩衝液 pH 6.8溶出方法: 0-100% B, 30 min グラジェント流速: 1 ml/min

タンパク質の溶出順(比較的、次のような順で溶出される)酸性タンパク→中性タンパク→塩基性タンパク※等電点が近いものは分子量小→中→大の順に溶出

さらに純度をあげたい

Bio-Radへお問い合わせ下さい

等電点の違いで分ける(イオン交換的効果)リン酸濃度勾配によるグラジェントグラジェント幅を狭くしてさらに勾配を緩くする分子量が同じであれば等電点の低いほうから溶出してきます

分子量の違いで分ける(ゲルろ過的効果)NaCl濃度勾配によるグラジェントリン酸濃度固定でNaCl濃度勾配(例;0->2M)等電点が同じであれば分子量の低いものから溶出してきます

核酸、エンドトキシンを除去する(疎水クロマト的効果)NaCl濃度勾配によるグラジェントリン酸濃度固定でNaCl濃度勾配(例;0->2M)タンパク質だけが溶出して、核酸、エンドトキシンは吸着したままになります。このとき、NaCl濃度が高いだけ強く吸着します

リン酸含有量の違いで分ける(金属アフィニティー的効果)リン酸濃度勾配によるグラジェントグラジェント幅を狭くしてさらに勾配を緩くするCaにアフィニティーがあるリン酸が多い分子ほどより遅れて溶出します

※一般的なタンパク質の溶出挙動  酸性タンパク質 リン酸濃度勾配によるリニアグラジェントでは、比較的早く溶出してくる。 但し、分子量の大きなものは比較的遅れて溶出してくる。  NaCl濃度による影響を受けにくいため、1M以上の高濃度でも溶出してこないことが多いが、 低濃度のリン酸を加えることで溶出してくる。 塩基性タンパク質 NaCl濃度の影響を受けやすく、1-2M NaClのリニアグラジェントで溶出してくる。そのため、 吸着/溶出時のNaCl濃度をコントロールする必要がある。

分離できない、または、問題が発生

カラムに吸着しない カラムから溶出してこない

サンプル中のリン酸濃度をさらに下げて(5mM以下)サンプルアプライ/溶出を行う

1Mまでグラジェントを行う(リン酸カリウムで緩衝液作成)

アルブミン、トランスフェリン、IgG、フィブロネクチン混合物からのIgG精製

TEL:03-6404-0331 [email protected]

Page 20: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶ミックスモード (CHT, CFT, MPC)

20 Chromatography Guide

  混合物からのIgGの精製

  CHO 細胞培養液からのIgGの精製(医薬品グレード)

1

2

  CHTのワンステップにおける夾雑物除去能3   IgG モノマーと Aggregates の分離挙動 (リン酸溶出 vs 塩化ナトリウム溶出)4

20100

0

50

100% B

t (min)

Retention Time (min)

担体: Type-II, 10mmカラムサイズ: 7.5 x 100mm緩衝液:左図: A: 1 mM リン酸ナトリウム緩衝液 pH 6.8右図: A: 22 mM リン酸ナトリウム緩衝液 pH 6.8 B: 400 mM リン酸ナトリウム緩衝液 pH 6.8溶出方法: 0-100% B, 30 min グラジェント流速: 1 ml/min

OD

280

E28

0

ALBU

MIN

TRAN

SFER

RIN

FIBR

ONEC

TIN

I gG

20100

0

50

100% B

t (min)

Retention Time (min)

{Pho

spha

te (m

M)}

E28

0

ALBU

MIN

TRAN

SFER

RIN

FIBR

ONEC

TIN

I gG

アルブミン、トランスフェリン、IgG、フィブロネクチン混合物からのIgG精製

※ 2-stepは、ProteinA → CHT 3-stepは、ProteinA → IEXQ → CHT

Phosphate vs Chlorideリン酸塩によるグラジェントパターン NaClによるグラジェントパターン

(with 低濃度リン酸バッファー)

酸性P 中性P 塩基性P 塩基性P 中性P (酸性P)

IgGモノマー IgGモノマー

AggregatesAggregates

Aggregates

※ リン酸塩によるグラジェントでもグラジェント幅を狭くしてさらに勾配を緩くすることで、十分にAggregatesを除去できる。

応用(使用例)

Page 21: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体ミックスモード (CHT, CFT, MPC)◀

21クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

  活性を維持したウイルス粒子の精製

  核酸の溶出挙動と除去・精製

  エンドトキシンの溶出挙動と除去

その他、次のようなアプリケーション情報もございますので、“life_ps_ [email protected](ライフサイエンス)”までお問い合わせください。

1 マウス腹水からのIgG・IgM のワンステップ精製 8 Life Time を伸ばす方法2 医薬品グレードのIgG・IgMの精製方法 9 微量金属を除去する方法3 混合モノクローナル抗体の分離 10 キレート入りサンプルを使用する場合の対応4 モノクローナル抗体 Fab, Fc, F(ab')2 の分離 11 リフォールディングをクロマトグラフィーで行う方法5 リン酸タンパク質の分離・精製 12 ProteinA の代わりに Capture Step でCHTを使用する方法6 酸性タンパク質の精製方法(吸着量を高くする方法等) 13 二量体、多量体、凝集体を除去する方法7 pH6.5 以下で使用する方法

5

6

7

非常に高い活性を維持した状態で高純度、大量精製が可能です。

ウイルス溶出前

ウイルス溶出後

エンドトキシンは核酸と同様の挙動を示します。従って、リン酸塩で溶出され、Na塩で非常に強くCHTに吸着します。除去能については、20ページ”3”表を参照。

NaPO4 gradient

■ SS DNA■ RNA■ DS DNA

NaCl gradient 2.0M NaCl 0.5M NaP

0.5M NaP

Na塩濃度が高いほど、核酸はCHTに強く吸着します(除去効率が高くなる)逆にタンパクは早く溶出してきます。エンドトキシン等のリン酸基を多く含む物質は同様の挙動を示します。

リン酸塩濃度が高くなれば、核酸は分子量の小さい順に溶出してきます。タンパク質も同様です。

Page 22: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶ミックスモード (CHT, CFT, MPC)

22 Chromatography Guide

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格CHTセラミックハイドロキシアパタイト, Type I1582000 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 20μm、10g ¥12,0001570020 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 20μm、100g ¥79,0001570021 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 20μm、1kg ※1570025 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 20μm、5kg ※1584000 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 40μm、10g ¥12,0001570040 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 40μm、100g ¥79,0001570041 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 40μm、1kg ※1570045 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 40μm、5kg ※1588000 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 80μm、10g ¥12,0001570080 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 80μm、100g ¥79,0001570081 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 80μm、1kg ※1570085 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType I 80μm、5kg ※CHTセラミックハイドロキシアパタイト, Type II1582200 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 20μm、10g ¥12,0001572000 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 20μm、100g ¥79,0001572100 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 20μm、1kg ※1572500 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 20μm、5kg ※1584200 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 40μm、10g ¥12,0001574000 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 40μm、100g ¥79,0001574100 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 40μm、1kg ※1574500 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 40μm、5kg ※1588200 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 80μm、10g ¥12,0001578000 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 80μm、100g ¥79,0001578100 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 80μm、1kg ※1578500 CHTセラミックハイドロキシアパタイトType II 80μm、5kg ※CFTセラミックフルオロアパタイト, Type II1585200 CFTセラミックフルオロアパタイト TypeⅡ, 40μm, 10g ¥20,0001575000 CFTセラミックフルオロアパタイト TypeⅡ, 40μm, 100g ¥116,0001575100 CFTセラミックフルオロアパタイト TypeⅡ, 40μm, 1kg ※1575500 CFTセラミックフルオロアパタイト TypeⅡ, 40μm, 5kg ※MPC セラミックハイドロキシフルオロアパタイト, Type I1580200 MPC セラミックハイドロキシフルオロアパタイト, 40μm, Type I, 10g ¥12,0001570200 MPC セラミックハイドロキシフルオロアパタイト, 40μm, Type I, 100g ¥79,0001570201 MPC セラミックハイドロキシフルオロアパタイト, 40μm, Type I, 1kg ※1570205 MPC セラミックハイドロキシフルオロアパタイト, 40μm, Type I, 5kg ※Bio-Scale Miniカートリッジ(低圧用)7324322 Bio-Scale Mini CHT Type Iカートリッジ, 5ml, 1本 ¥16,0007324324 Bio-Scale Mini CHT Type Iカートリッジ, 5ml, 5本 ¥64,0007324332 Bio-Scale Mini CHT Type II カートリッジ, 5ml, 1本 ¥16,0007324334 Bio-Scale Mini CHT Type II カートリッジ, 5ml, 5本 ¥64,0007324405 Bio-Scale Mini CFT Type IIカートリッジ, 5ml, 1本 ¥16,0007324406 Bio-Scale Mini CFT Type IIカートリッジ, 5ml, 5本 ¥64,000Bio-Scale Miniカートリッジキット7324408 Bio-Scale Mini mAb精製カートリッジキット ¥40,000

構成内容:UNOsphere SUPrA プロテインAカートリッジ(1×5ml)、UNOsphere Qカートリッジ(1×5ml)、CHT Type I カートリッジ(1×5ml)

Foresight7324735 Foresight CHT Type I, 40μm, 1ml ¥20,0007324755 Foresight CHT Type I, 40μm, 5ml ¥38,0007324736 Foresight CHT Type II, 40μm, 1ml ¥20,0007324756 Foresight CHT Type II, 40μm, 5ml ¥38,0007324737 Foresight MPC Type I, 40μm, 1ml ¥20,0007324757 Foresight MPC Type I, 40μm, 5ml ¥38,000

カタログ番号 品名 寸法 (mm) ベッド体積 (ml) 結合容量 (mg) 流速 (ml/min) 圧力 (psi/MPa)Bio-Scale CHT Type Iカラム(中・高圧用)7510021 Bio-Scale CHT2-Iカラム 7×52 2 20 0.5‒3.0 1,000 / 6.9 ¥110,0007510023 Bio-Scale CHT5-Iカラム 10×64 5 50 0.5‒5.0 750 / 5.2 ¥160,0007510025 Bio-Scale CHT10-Iカラム 12×88 10 100 0.5‒7.0 600 / 4.1 ¥210,0007510027 Bio-Scale CHT20-Iカラム 15×113 20 200 0.5‒10.0 500 / 3.4 ¥300,000

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。ハイスループットスクリーニング用のプレパックカラム、プレート、ロボカラムについては、37ページをご参照ください。

Page 23: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体ミックスモード (HT, HTP)◀

23クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

バイオゲルHTは、ハイドロキシアパタイトが0.02% NaN3を含む10mMリン酸ナトリウム溶液中に懸濁されています。特性は下記の仕様をご参照ください。

バイオゲルHTPは、バイオ・ラッドにて乾粉化プロセスを加えたTiseliusハイドロキシアパタイトです。この製品は冷蔵保存が不要で、粉末のため室温長期保存が可能です。膨潤後の性質はバイオゲルHT同様です。

DNAグレードバイオゲルHTPは、2本鎖DNAの選択性と結合量を高めるために細かい粒子に揃えた乾燥状ハイドロキシアパタイトです。この細かい粒子のため、バッチモードか短いカラムによる使用をお勧めします。

バイオゲルハイドロキシアパタイトは化学的また熱に安定です。水酸化ナトリウムによる除菌洗浄、さらにオートクレーブができます。

耐圧性は、15psi(0.1MPa)です。

仕様

流速a

cm/hr BSA結合b

(mg perdry gram)

ウシ甲状腺c

DNA結合(mg perdry gram) 膨潤容量

バイオゲルHTP <25 10 > 500 2-3ml/gDNAグレードバイオゲルHTP <5 10 > 800 2-3ml/gバイオゲルHT <35 10 > 500 ーa. Flow rate determined on a 1.5×10cm column with 40cm hydrostatic pressure.b. Batchwise uptake.c. The DNA capacities listed are lower than previously reported due to a change in testing methodology. This reporting change does not represent diminished hydroxyapatite product performance or changes to the manufacturing process. The new testing methodology results in a more accurate determination of DNA capacity.

参考文献1. Tiselius, A., Hjerten, S. and Levin, O., Arch. Biochem. Biophys., 65, 132(1956).2. Ganong, B. R., Biochemistry, 29, 6904-6910(1990).3. Nguyen, L. B., et al., J. Biol. Chem., 265, 4541-4546(1990).4. Schott, K., et al., J. Biol. Ch em., 265, 4204-4209(1990).5. Mahoney, C. W. Q., et al., J. Biol. Chem., 265, 5424-5428(1990).6. Yachelini, P., et al., J. Immunology, 145, 1382-1389,(1990).

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格1300150 バイオゲルHT、250ml ¥50,000 1300151 バイオゲルHT、500ml ¥90,000 1300420 バイオゲルHTP、100g ¥50,000 1300421 バイオゲルHTP、1kg ※ 1300425 バイオゲルHTP、5kg ※ 1300520 DNAグレードバイオゲルHTP、100g ¥60,000

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。

バイオゲルハイドロキシアパタイト

Page 24: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶ミックスモード(cPrime)

24 Chromatography Guide

Nuvia cPrime 疎水・陽イオン交換担体は、バイオ・ラッドのミックスモード精製担体の中に、新たに加えられた製品です。Nuvia cPrimeは、様々なバイオ医薬品のラージスケール精製アプリケーションにおいて、ユニークな選択性、高回収率、多様な特徴を持っています。特に、現行の検討で困難な精製状況下にある場合、最初のキャプチャーや最終のポーリッシングにおいて有効性を示します。

Large Design Space for Binding and ElutionNuvia cPrime は、塩濃度やpH (Fig.2) の幅広いレンジにおいて、多様にキャプチャーや高回収率が得られるようにデザインされています。これらの特徴から、サンプルは希釈無しでダイレクトにカラムにアプライできる可能性があります。マルチカラムプロセスに Nuvia cPrimeステップを取り込むことは、作業的にも簡単にできます。

Simple Method DevelopmentNuvia cPrimeのリガンドとインターラクションで関連付けられているレンジにおけるミックスモードの性質は、メソッド開発やプロセス至適化に対して直接的で直感的なアプローチを可能にします。代わりの方法として、簡単なDOE (Design of experiment) の実施は、担体のラージデザインスペース (Fig.2 and 3) によって提供されるローディングや洗浄、溶出条件をすばやく至適化するようにガイドしてくれます。

Fig.3. Recommended approach to method development.

Hydrophobic

Weak acid

O

ONH

OH

δ-

δ+

hydrogen bonding

H2N

Fig.1. Mixed-mode ligand for Nuvia cPrime media.

Fig.2. Large design space afforded by Nuvia cPrime media.

Lysozyme binding capacity, mg/ml Lysozyme recovery, %

Elu

tion [N

aC

l], m

M(

10, 1,

00

0)

Elutio

n [N

aCl],

mM(

10, 1

,000)

Recove

ry, %

Reco

very

, %

Elution pH(4, 8)

Elution pH(4, 8)

Binding [NaCl],

mM(

10, 4

00)

Bin

din

g [N

aC

l], m

M(

10, 4

00)

Bin

din

g c

ap

acity,

mg

/ml

Bin

din

g c

ap

acity,

mg

/ml

Binding pH(4, 8)

Binding pH(4, 8)

Nuvia cPrimeによるAggregatesの分離除去

Nuvia cPrime 担体

疎水・陽イオン交換担体

Nuvia cPrimeの特性特性 説明官能基 疎水性弱陽イオン交換ベースマトリックスの組成 マクロ多孔性高度架橋疎水性ポリマー粒子サイズ 70 ± 10 μm動的結合能* hlgG ≧40mq/ml動的結合能* ラクトフェリン≧60mgl/mlリガンド密度 55-75 μeq/ml推奨線流速範囲 50-600cm/hr圧力 vs. 流量パフォーマンス** 2 bar 以下, 600cm/hr の流量pH 安定性 2-14(短期間)

3-13(長期間)化学的安定性 1.0 N NaOH, 1.0 N HCI, 25% HOAc, 8 M

尿素, 6 M Gu-HCI, 6 M KSCN, 3 M NaCI, 1% Triton X-100, 2% SDS + 0.25 M NaCl, 20% EtOH, 70% EtOH, 30% IPA

輸送溶液 20%エタノール保存条件 20%エタノール有効期限*** 5年

* 10%ブレイクスルーhlgGのとき ** 20 × 20 cmパック(圧縮係数1.17)*** 促進条件下、20%エタノール中で室温保存

Page 25: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体ミックスモード(cPrime)◀

25クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格1563401 Nuvia cPrime Hydrophobic Cation Exchange Media, 25ml ¥18,500 1563402 Nuvia cPrime Hydrophobic Cation Exchange Media, 100ml ¥62,000 1563403 Nuvia cPrime Hydrophobic Cation Exchange Media, 500ml ※1563404 Nuvia cPrime Hydrophobic Cation Exchange Media, 1L ※1563405 Nuvia cPrime Hydrophobic Cation Exchange Media, 5L ※1563406 Nuvia cPrime Hydrophobic Cation Exchange Media, 10L ※7324722 Foresight Nuvia cPrime column, 1 ml ¥18,000 7324742 Foresight Nuvia cPrime column, 5 ml ¥36,000 7324705 Foresight Nuvia cPrime plates, 20 μl* ¥70,000 7324807 Foresight Nuvia cPrime RoboColumn Unit, 200 μl** ¥30,000 7324808 Foresight Nuvia cPrime RoboColumn Unit, 600 μl** ¥36,000 * Package size: 2 x 96-well plates.** Package size: 1 row of 8 columns.

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。ハイスループットスクリーニング用のプレパックカラム、プレート、ロボカラムについては、37ページをご参照ください。

他のクロマトグラフィー担体では精製が困難な分子の精製例:糖タンパク質

他のクロマトグラフィー担体では精製が困難な分子の精製例:IgM

Page 26: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶疎水クロマトグラフィー

26 Chromatography Guide

疎水クロマトグラフィー(HIC)は、分子の疎水性に依存して分離が行われます。試料分子(疎水基、親水基をもつ)を高いイオン強度(高塩濃度)でHICカラムに添加します。バッファーイオンは親水基に相互作用することによって溶液中の分子溶解性を低下させ、疎水結合を促進します。溶解性の低下により分子の表面疎水性が増加し、疎水性担体との吸着がおこります。この状態はタンパク質沈殿を利用する高塩濃度硫酸アンモニウムによる塩析操作に類似しています。カラムからの溶出は塩濃度を減少させるグラジェント法が行われます。イオン強度が減少すると分子の表面親水性が増加することになり、カラムからの溶出がおこります。溶出バッファーに有機溶媒、界面活性剤を添加することも可能です。

Macro-Prep HIC担体は、粒径50μmのメタクリレートベースのタンパク質、ポリペプチド、酵素、核酸精製用担体です。2種類の疎水基タイプがあります。

仕様Macro-Prep t-Butyl Macro-Prep Methyl

Functional groups COO- and t-butyl COO- and methylIonic capacity Approximately 120 μeq/ml Approximately 120 μeq/mlShipping counterion Cl- Cl-

Hydrophobicity Mild MildMedian particle size (μm) 50 50pH stability 1‒10 1‒10Autoclavability (121℃ , 30 min) Yes YesShipping solution 20% ethanol 20% ethanolWorking flow-rate range 100‒600 cm/hr 100‒600 cm/hrSanitization 5 CV of 6 M guanidine-HCl,

100 cm/hror5 CV of of 1% acetic acidin 0.12 M phosphoric acid,pH 1.5, 100 cm/hr

5 CV of 6 M guanidine-HCl,100 cm/hror5 CV of 1% acetic acidin 0.12 M phosphoric acid,pH 1.5, 100 cm/hr

Storage at 4‒40℃ 20% ethanolor1% acetic acid in 0.12 Mphosphoric acid, pH 1.5

20% ethanolor1% acetic acid in 0.12 Mphosphoric acid, pH 1.5

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格1580080 Macro-Prep Methyl HIC, 25ml ¥9,0001560080 Macro-Prep Methyl HIC, 100ml ¥20,0001560081 Macro-Prep Methyl HIC, 500ml ¥72,0001560082 Macro-Prep Methyl HIC, 5L ※1560083 Macro-Prep Methyl HIC, 10L ※1580090 Macro-Prep t-Butyl HIC, 25ml ¥9,0001560090 Macro-Prep t-Butyl HIC, 100ml ¥20,0001560091 Macro-Prep t-Butyl HIC, 500ml ¥80,0001560092 Macro-Prep t-Butyl HIC, 5L ※1560093 Macro-Prep t-Butyl HIC, 10L ※※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。

0 100 100

A 280

A 280

time (min) time (min)

1

2

3

41

23

4

Macro-Prepmethyl HIC

0

Macro-Prept-butyl HIC

Column: 1×10cm (4.5ml)Sample: 50 l (0.6mg total protein)Buffer: A: 0.1M Na2PO4, pH7.0 B: A + 1.85M (NH4)2SO4, pH7.0Gradient: 100% B for 10min 100-0 % B in 90minLinear flow rate: 38cm/h

Macro-Prep Methylとt-Butylによる分離

▶疎水クロマトグラフィー

A.

担体

リガンド

サンプル分子

B.

疎水クロマトグラフィーの分離機構A. 疎水性サンプル分子が高イオン強度(高塩濃度)溶液中で結合B. イオン強度が低下すると疎水性が減少するためサンプル分子の溶出がおこる

Macro-Prep Methyl / t-Butyl HIC担体

Page 27: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体疎水クロマトグラフィー◀

27クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

バイオビーズSM-2は無極性ポリスチレン吸着体で、水系溶媒から分子量2000以下の非極性物質や非イオン性界面活性剤を吸着させるのに用いられます。水系溶液はもとより、アルコール、石油エーテル、ジエチルエーテル、ヘキサンに対して膨張、収縮することはありません。また、250℃までの耐熱性があります。バイオテクノロジーグレードは、樹脂1gあたりの混入微生物が100コロニー以下です。バイオビーズのアプリケーションとして代表的なものは右記のとおりです。

● Triton X-100等の非イオン性界面活性剤の除去

● 血漿、尿中の薬物除去

● 食品中の色素とマイコトキシンの抽出

● 殺虫剤の除去

その他、以下の物質の濃縮や精製を行えます。

バイオビーズSMを用いた物質の濃縮または分離例Trace organics MorphinePAH compounds MethaqualoneHydrocarbons and PCBs SulfasAminocarb insecticides Free rhodamineCarbamate insecticides ProstaglandinsEthyl and methyl parathion SteroidsMetals Bile acidsCarboxylic acids HormonesPhenolic acids Purines nad pyrimidinesFlavonoids Acid dyesMycotoxins Naringin and limoninProline and hydroxyproline Detergents

仕様Chemical nature Polystyrene-divinyl-benzenePolarity NonpolarDipole moment 0.3 Debye

Average pore diameter (dry beads)

90 Å

Wet density (g/cc) 1.02

Capacity (Triton® X-100 detergent) g/g

0.07

以下のBulletinをご参照ください。1461 Bio-Beads SM Hydrophobic and Polar Interaction

Adsorbents Applications, Bibliography (Bio-Beadsを使用した論文一覧)

Ordering Informationカタログ番号 品名 メッシュサイズ 容量 価格1523920 バイオビーズSM-2 20-50 100g ¥42,0001528920 バイオビーズSM-2バイオテクノロジーグレード 20-50 25g ¥24,0001523922 バイオビーズSM-2 20-50 1kg ※1523923 バイオビーズSM-2 20-50 10kg ※

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。

タンパク質の吸着なしにTriton X-100 を除いた例1% Triton X-100 と 1% Bovine serum albumin を含む 2 ml サンプルを 0.6g Bio-Beads SM2 で処理(バッチ法)。120分の処理で0.01%まで界面活性剤を除去することができた。(参照:Holloway PH, Analytical Biochemistry 53 (1), 304, 1973)Triton is a trademark of Union Carbide Corporation.

1.2

1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

0.050 15 30 60

時間(min)

BSA not adsorbed

BSA

Triton X-100

Triton X-100 removed

濃度(% W/V)

90 120

バイオビーズSM-2

バイオビーズ担体(非イオン性界面活性剤等除去用)

Page 28: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶ゲルろ過(サイズ排除)

28 Chromatography Guide

ゲルろ過(サイズ排除)クロマトグラフィー製品ガイド

バイオゲルP担体は、高分離ゲルろ過用ポリアクリルアミドビーズで、アクリルアミドをN, N'-メチレン-ビス-アクリルアミドと共重合させることによって製造したものです。バイオゲルPは乾燥状態で販売しており、各種メッシュサイズ、分子量排除限界が揃っています。

バイオゲルPは、優れた分離能でおだやかにゲルろ過を行うため、安定性の低い物質にも最適です。

特長●微生物の繁殖はなく、デキストランやアガロースで見られる糖等の不純物溶出もありません。●高い親水性を有し、電荷を帯びていません。●pH5.5-6.5において、オートクレーブ処理が可能です。●室温ではpH2-10の範囲で操作することをお勧めします。pH2以下あるいは10以上ではアミド基の加水分解が起こる場合があります。●バイオゲルPは、希有機酸、8M尿素、カオトロピック試薬、界面活性剤等に使用できます。(ホルムアミドは100%でも使用可能)●アルコール(20%まで)は、排除特性を変えることがなく、核酸・ペプチド・タンニンの溶解に使用できます。

バイオゲルP-6DGは、6,000Daの排除限界をもち、脱塩に最適です。サンプルの高回収が最小限の希釈率で簡単に短時間に行えます。この担体は、高い流速および優れた分離能を持つため、ラボスケールからプロセススケールまで理想的な担体として使われています。

また、バイオゲルP-6DGをプレパックしたエコノパック10DGカラム、バイオゲルP-6gelをプレパックしたカートリッジも販売しています。

仕様

バイオゲルP Gel 膨潤時粒径(μm)

膨潤時ベット容量(ml/g of Dry Gel)

最適流速* (cm/hr)

タンパク質分画範囲(Da)

ds DNA 排除限界(bp)

他社同等品

バイオゲルP-2gel fine 45-90 3 5-10 100-1,800 Sephadex G-15バイオゲルP-4gel medium

fine 90-180 45-90

4 15-20 10-15 800-4,000

バイオゲルP-6gel mediumfine

90-180 45-90

6.5 15-20 10-15 1,000-6,000 5-6 Sephadex G-25

バイオゲルP-6DGgel 90-180 15-20 1,000-6,000バイオゲルP-10gel medium

fine 90-180 45-90

7.5 15-20 10-15 1,500-20,000

バイオゲルP-30gel mediumfine

90-180 45-90

9 7-13 6-11 2,500-40,000 20-22 Sephadex G-50

バイオゲルP-60gel mediumfine

90-180 45-90

11 4-6 3-5 3,000-60,000 55 Sephadex G-75

バイオゲルP-100gel mediumfine

90-180 45-90

12 4-63-5 5,000-100,000 Sephadex G-100

* Flow rates determined in a 1.5×70cm column, using a hydrostatic pressure head:bed of 1:1.Sephadex is a trademark of GE healthcare.

プレパックカラムまたは担体名

精密分離(分子量推定)

分子量=100~100,000 バイオゲルP

サンプル量=~3ml脱塩、バッファー交換

バイオビーズ SX-2

Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6 カートリッジ, エコノパック10DGカラム

サンプル量=3ml~ バイオゲルP-6DG

サンプル量=1.5ml~

分子量の大きさによる(ゲルろ過)

▶ゲルろ過(サイズ排除)

バイオゲルPポリアクリルアミド担体

Page 29: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体ゲルろ過(サイズ排除)◀

29クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格1504114 バイオゲルP-2 Fine, 100g ¥40,000 1504115 バイオゲルP-2 Fine, 500g ¥130,000 1504116 バイオゲルP-2 Fine, 10kg ※1504120 バイオゲルP-4 Medium, 100g ¥40,0001504124 バイオゲルP-4 Fine, 100g ¥40,0001504130 バイオゲルP-6 Medium, 100g ¥40,0001504134 バイオゲルP-6 Fine, 100g ¥40,0001504135 バイオゲルP-6 Fine, 10kg ※1500738 バイオゲルP-6DG 脱塩用, 100g ¥40,0001500739 バイオゲルP-6DG 脱塩用, 1kg ¥208,0001504140 バイオゲルP-10 Medium, 100g ¥40,0001504144 バイオゲルP-10 Fine, 100g ¥40,0001504150 バイオゲルP-30 Medium, 100g ¥40,0001504154 バイオゲルP-30 Fine, 100g ¥40,0001504155 バイオゲルP-30 Fine, 10kg ※1504160 バイオゲルP-60 Medium, 100g ¥46,0001504164 バイオゲルP-60 Fine, 100g ¥46,0001504170 バイオゲルP-100 Medium, 100g ¥46,0001504174 バイオゲルP-100 Fine, 100g ¥46,0001511901 ゲルろ過スタンダード 6本 ¥45,000エコノパック10DGカラム7322010 エコノパック10DGカラム, 30個(10ml) ¥43,0007317005 ポリカラムラック ¥52,0007318232 フィーメールルアープラグ, 25個 ¥9,000Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ7324502 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 5ml、1本 ¥11,0007324504 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 5ml、5本 ¥44,0007325304 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 10ml、5本 ¥33,0007325312 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 50ml、1本 ¥22,0007325314 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 50ml、5本 ¥88,000

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。

バイオビーズS-Xは、中性の多孔性スチレンジビニルベンゼン共重合体ビーズで、排除限界範囲は、400-14,000ダルトン、親油性ポリマーや有機溶媒可溶性物質のゲルパーミエーション分離に使用されます。特に低分子量の有機ポリマーや疎水性物質、たとえば殺虫剤、多環式芳香化合物、不飽和脂肪等の分画に利用されます。この排除限界は使用する溶出液によって影響を受けます。無極性溶媒を用いる場合にマトリクスは最大に膨潤し、表示の排除限界が得られます。このビーズは、ベンゼン、トルエン、キシレン、四塩化炭素、ジメチルホルムアミド、ケトン類、芳香族類、メチレンクロライド、

o-ジクロロベンゼン、テトラクロルエチレン、テトラヒドロフラン、トリクロルベンゼンに耐性があります。流速は架橋度によって決まります。

以下のような特性を持ちます。架橋度1%(X1):自然落下でのみ使用します。3%(X3):5ml/min, 300psi(21bar) 8%(X8)/12%(X12):500psi(35bar)までFor More InformationWeb: www.bio-rad.com/biobeads

Ordering Information

カタログ番号 品名 粒子径(μm) 分子量排除限界

ベンゼン中におけるベッド容量(ml/dry g) 容量 価格

1522150 バイオビーズS-X1 40-80 14,000 7.5 100g ¥48,0001522151 バイオビーズS-X1 40-80 14,000 7.5 1kg ¥370,0001522750 バイオビーズS-X3 40-80 2,000 4.75 100g ¥48,0001523350 バイオビーズS-X8 40-80 1,000 3.1 100g ¥48,0001523650 バイオビーズS-X12 40-80 400 2.5 100g ¥48,000

バイオビーズS-X

Page 30: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶アフィニティー(Protein A)

30 Chromatography Guide

モノクローナル抗体の3ステップ精製プラットフォーム

UNOsphere SUPrAは、親水性ポリマーのベースマトリックスにリコンビナントプロテインAをカップリングしたバイオ・ラッドのプロテインA担体です。マイルドなpHで抗体を溶出することができ、また抗体の回収率が高いのが特長です。より中性に近いpHで溶出することで、抗体の変性(凝集体形成)を極力抑えることができます。また、抗体は少ないバッファー容量で溶出してきますので、次工程への処理スピードが上がります。UNOsphere SUPrAは、抗体医薬や臨床診断薬用抗体等の精製プロセスのニーズにマッチするように開発されました。製品は、ラボスケールでご利用いただけるカートリッジタイプの低圧用プレパックカラムから、プロセススケールでご利用いただけるバルク製品まで、各種取り揃えています。

UNOsphereSUPrA

Capture Intermediate polish

UNOsphere Qor

Nuvia Q

CHTセラミックハイドロキシアパタイト

Final polish

IgG濃度と動的結合容量の関係(カラム高:5、10、20cm、流速:300cm/hr)

流速特性 (Bio-Rad InPlace column:20×20cm; 13% axial compression)

M : マーカーS : 細胞培養上清1 : UNOsphere SUPrA2 : UNOshere Q3 : CHTセラミックハイ ドロキシアパタイト

mAb2 M S 1 2 3

▶アフィニティー

Bio-Scale Mini UNOsphere SUPrA

プロテインAカートリッジ UNOsphere SUPrA プロテインA担体

ベッド高/流速と動的結合容量の関係

35

30

25

20

15

10

5

0 5 10 20

Media bed height, cm Dynamic binding capacity

(10% breakthrough), mg/ml

150 cm/hr

300 cm/hr

400 cm/hr

35

30

25

20

15

10

5

0

Dynamic binding capacity

(10% breakthrough), mg/ml

0.5 1 2 4lgG concentration, mg/ml

20 cm10 cm 5 cm

3.0

2.5

2.0

1.5

1.0

0.5

0.0

Pressure, bar

0 100 200 300 400 500 600 700Linear flow rate, cm/hr

Protein A, ng/mg Host Cell Proteins, ng/mg   DNA, ng/mg   Aggregate/Dimer Content, %Sample mAb1 mAb2 mAb1 mAb2 mAb1 mAb2 mAb1 mAb2*Cell culture supernatant 3.5 x 104 1.4 x 106 >5 x 103 >1.6 x 105 ND NDUNOsphere SUPrA fraction 3 ND 175 197 18.6 19 ND 42UNOsphere Q fraction 0.8 112 <3 86 3.5 1.9 ND 40CHT ceramic hydroxyapatite fraction <0.7 <0.4 <2 48 2.5 3 <0.03/<0.03 <0.1

‒, Not applicable. ND, Not determined. * Dimer content was not determined for mAb2.

mAb1 M 1 2 3

仕様

* 10% breakthrough capacity determined with 1.0mg/ml polyclonal human IgG in 1.1×10cm column. ** No significant change in chromatographic performance after storage for 24 hr at room temperature.

ベース担体 高クロスリンクポリマー粒径分布 53‒61μmリガンド 組換えプロテインAカップリング法 エポキシ動的結合容量* 30±3mg/ml at 150cm/hour

25±2mg/ml at 300cm/hour20±2mg/ml at 450cm/hour(Minimum spec: 20mg/ml at 300cm/hour)

安定性** 10mM塩酸6 Mグアニジン塩酸0.1 M arginine(pH 2.8)0.1 M citrate(pH 2.8)0.1 M glycine(pH 2.8)

pH範囲 3‒11Cleaning-in-place(CIP)溶液

6 Mグアニジン塩酸10mM塩酸0.1 M水酸化ナトリウム1 M酢酸/20%エタノール

推奨流速 100‒600cm/hr温度安定性 2‒40ºC形態 50%スラリーin 20%エタノール保存温度 2‒8ºC

UNOsphere SUPrA プロテインA担体

Page 31: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体アフィニティー(Protein A)◀

31クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

その他のプロテインA担体Staphylococcus aureusより抽出したプロテインAは、哺乳類のIgGのFc部分に特異的に結合します。アフィゲルプロテインAおよびアフィプレッププロテインAはIgGの高純度精製、他クラスの免疫グロブリン分析前処理としてのIgG除去、抗原精製のための免疫複合体の吸着等に使用できます。

特 長●IgGを高純度で精製します。●哺乳類のIgGに対して高い親和性を示します。● MAPSⅡバッファーシステムを使用することにより、マウスIgG1や他サブクラスのIgGに対して高い結合容量を示します。● MAPSⅡバッファーシステムにより、1mlのゲルあたり最大10mgのマウスIgGの精製が行えます。これは従来の方法の8-10倍の回収量です。

アフィプレッププロテインAアフィプレッププロテインAはメタクリレートポリマー樹脂にプロテインAを結合させた担体で、パイロットスケールやプロセススケールのアプリケーションに適しています。1,000psi(7MPa:70kg/cm2)の耐圧性があり、高流速で使用できます。

アフィゲルプロテインA MAPS IIキットアフィゲルプロテインA MAPSⅡキットには、アフィゲルプロテインAゲル5ml、エコノカラム、MAPSⅡバッファー(結合バッファー、溶出バッファー、再生バッファー)が含まれています。1キットで最大500mgのマウスIgGが得られます。

MAPSⅡバッファーは、抗体のプロテインAへの結合を高め、効率よく溶出する条件に設定されています。

アフィゲルプロテインAの他、アフィプレッププロテインA、プレパック製品においても、最高の条件で抗体精製を行うことができます。

MAPSⅡバッファーのみ、また、個別のバッファーのみもご利用いただけます。

Ordering Informationカタログ番号品名 価格 カタログ番号品名 価格UNOsphere SUPrA プロテインA Bio-Scale Miniカートリッジ1560250 UNOsphere SUPrA プロテインA, 5ml ¥35,000 7324200 Bio-Scale Mini UNOsphere SUPrA プロテインAカートリッジ, 1ml, 1本 ¥16,0001560218 UNOsphere SUPrA プロテインA, 25ml ¥128,000 7324201 Bio-Scale Mini UNOsphere SUPrA プロテインAカートリッジ, 1ml, 5本 ¥68,0001560219 UNOsphere SUPrA プロテインA, 100ml ¥435,000 7324202 Bio-Scale Mini UNOsphere SUPrA プロテインAカートリッジ, 5ml, 1本 ¥52,0001560220 UNOsphere SUPrA プロテインA, 500ml ※ Foresightカラム1560221 UNOsphere SUPrA プロテインA, 5 L ※ 7324729 Foresight UNOsphere SUPrA, 1ml , 1本 ¥27,0001560222 UNOsphere SUPrA プロテインA, 10 L ※ 7324749 Foresight UNOsphere SUPrA, 5ml , 1本 ¥70,000

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。ハイスループットスクリーニング用のプレパックカラム、プレート、ロボカラムについては、37ページをご参照ください。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格アフィプレッププロテインA担体1560006 アフィプレッププロテインA、5ml ¥60,000 1560005 アフィプレッププロテインA、25ml ¥250,0001536159 アフィゲルプロテインA MAPS IIキット ¥70,000

構成内容:アフィゲルプロテインA 5ml結合バッファー粉末1.5L用溶出バッファー粉末1.1L用再生バッファー400ml1×10cmガラスエコノカラム1

1536160 MAPS IIバッファー ¥40,000 構成内容:結合バッファー粉末1.5L用溶出バッファー粉末1.1L用再生バッファー400ml

1536161 MAPS II結合バッファー(粉末 5L用) ¥68,000 1536162 MAPS II溶出バッファー(粉末 5L用) ¥35,0001536166 MAPS II再生バッファー、1L、5本 ¥68,000 Bio-Scale Miniカートリッジ7324600 Bio-Scale Mini Affi-PrepプロテインAカートリッジ, 1ml, 5本 ¥68,0007324602 Bio-Scale Mini Affi-PrepプロテインAカートリッジ, 5ml, 1本 ¥56,000アダプター・フィッティング(エコノパックカラム用としても使用できます)7320111 Bio-Scale MiniカートリッジFPLC用アダプター、1セット ¥8,000

構成内容:Bio-Scale MiniカートリッジFPLC用アダプター7320112 Bio-Scale MiniカートリッジHPLC用アダプター ¥8,0007320113 Bio-Scale MiniカートリッジBioLogic用アダプター ¥8,000

大量購入をご希望の際はお問い合せください。

担体のIgG結合容量

抗体アフィゲル

Protein A(mg/ml)アフィプレップProtein A(mg/ml)

Mouse IgG1 6‒10 7‒9Mouse IgG2a 6‒10 7‒9Mouse IgG2b 6‒10 7‒9Mouse IgG3 6‒10 7‒9Mouse IgM* 6‒10 7‒9Human IgG 15 10‒12Sheep IgG 8‒10 7‒9Cow IgG 8‒10 7‒9Horse IgG 8‒10 7‒9Goat IgG 8‒10 7‒9Rabbit IgG 8‒10 7‒9Dog IgG 8‒10 7‒9Pig IgG 8‒10 7‒9* Approximately 50% of all mouse IgMs bind using the MAPS buffer system.

MAPSバッファーによるIgG回収率の改善

lgG19A3

lgG110F7

lgG1DCMB

lgG2aHOPC-1

lgG2bT4-1

100

80

60

40

20

% 回収率 □ MAPSバッファー法 ■ プロテインA従来法

Page 32: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体 ▶アフィニティー(Hisタグ)

32 Chromatography Guide

Nuvia IMAC担体は、極めて高い能力を持つ次世代のアフィニティークロマトグラフィー担体です。Nuvia IMAC担体は、広いpHおよび流量範囲で高い結合能を持ち、多くの用途に幅広い実験設計空間をもたらします。固定化金属アフィニティークロマトグラフィー(IMAC)は、ヒスチジンタグが固定化遷移金属に対して有するアフィニティーに依存する強力な精製法です。Nuvia IMAC担体は、Nuviaビーズに、二価または三価金属イオンに対するキレート配位子としてニトリロ酢酸(NTA)を結合しています。その化学構造のために、Ni2+で荷電すると組換えHisタグタンパク質と極めて選択的な結合が可能になります。また、その優れた物質移動特性により高い流量においても高い能力を発揮します。Nuvia IMAC担体は、非変性状態でも変性状態でも使用することができます。Nuvia IMAC担体には、25、100、500 mlボトルがあります。

Nuvia IMAC担体は、以下のような特徴を提供することにより、価値および柔軟性をもたらします。

● 40mg/ml以上(6×ヒスチジンタグタンパク40kD)のダイナミックバインディングキャパシティーを持ち、製造用途にも適しています。●優れた品質を持ち、再現性のある分離が可能です。●硬質で、高流速で使用できます。●pH2~14で安定しています。●様々なワークフローで生体分子を精製します。● アフィニティークロマトグラフィーにより、1段階で高純度精製が可能です。●迅速で、効率的な生体分子の分離を行います。●ベースマトリクスが頑健です。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格7800800 Nuvia IMAC, 25ml ¥55,0007800801 Nuvia IMAC, 100ml ¥129,0007800802 Nuvia IMAC, 500ml ¥550,0007800811 Bio-Scale Mini Nuvia IMACカートリッジ, 5ml ¥20,0007800812 Bio-Scale Mini Nuvia IMACカートリッジ, 5×5ml ¥75,000

大量購入をご希望の際はお問い合せください。

Nuvia™ IMAC担体

IMAC Profinity担体は、組換えポリヒスチジン(His)タグ付きタンパク質精製用のアフィニティー・クロマトグラフィー担体です。IMACは、固定化した遷移金属に対するHisタグの親和性に依存した強力な精製技術です。IMAC Profinity担体は、UNOsphereビーズがベースで、二価/三価金属イオンに対するキレート・リガンドとしてイミノ二酢酸(IDA)を含みます。その化学構造により、Ni2+や、Zn2+、Cu2+などの遷移金属で荷電した場合、組換えHisタグタンパク質を高度に選択的に結合します。IMAC Profinity担体は、高流速で高結合容量です。非変性または変性条件下で使用でき、液体クロマトグラフィー機器、自然落下カラム、スピンカラムを使用した精製に適しています。動的結合容量15mg/ml担体は非荷電、またはNi2+

のプレチャージ形状で入手可能です。非荷電型(金属イオンフリータイプ)は、ご希望の金属イオンで荷電できます。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格Niチャージ済み担体1560131 Ni-IMAC Profinity、10ml ¥15,0001560133 Ni-IMAC Profinity、25ml ¥30,0001560135 Ni-IMAC Profinity、100ml ¥95,0001560137 Ni-IMAC Profinity、500ml ※7324612 Bio-Scale Mini Ni-IMAC Profinityカートリッジ、5ml、1本 ¥16,0007324614 Bio-Scale Mini Ni-IMAC Profinityカートリッジ、5ml、5本 ¥68,0007324610 Bio-Scale Mini Ni-IMAC Profinityカートリッジ、1ml、5本 ¥22,000

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。

IMAC Profinity担体

IMAC Profinity担体

Page 33: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

クロマトグラフィー担体アフィニティー(活性化担体)◀

33クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

●迅速なカップリング●水系および非水系溶液中でカップリング可能●タンパク質のカップリングが4℃、4時間で完了●リガンド結合容量1~35mg/mlゲルアルキルアミノ基や芳香族アミノ基をもつリガンドはアフィゲル10/15と水系、非水系溶媒中で自発的に結合し、安定なアミド結合を形成します。活性エステルは一級アミノ基に対して高い特異性をもっているので副反応はほとんど無視できます。(SH基は結合します。)次のBulletinがご利用いただけます。1085 Affi-Gel 10 and 15 Activated Supports

アフィゲルHz活性化担体は、IgGのFc部分と特異的に結合します。そのため、抗原結合部位が最大限に利用される効率の良いアフィニティーゲルが得られます。通常の担体を用いた場合の100-300%の結合容量です。●リガンドと安定なヒドラジン結合●抗体の活性を失わないマイルドな酸化条件●抗原の結合容量がきわめて高い●pH安定性に優れる

アフィゲル102は、アミノ基末端を持つアガロースゲルで6原子の親水性スペーサーアームが付いています。●EDACをカルボジイミド試薬としてカップリングさせます。●カルボキシル基を持つリガンドとカップリングします。 ● タンパク質やペプチドなどの-NH2末端を利用したアフィニティーカラムの作製や、-NH2基を持たないリガンドの固定が行えます。

Ordering Informationカタログ番号品名 価格活性型アフィニティー担体1560200 Epoxide Profinity、5g ¥15,000 1560201 Epoxide Profinity、25g ¥60,000 1536099 アフィゲル10、25ml ¥37,000 1536046 アフィゲル10、25ml、4本 ¥94,000 1531000 アフィゲル10、1L ※ 1536051 アフィゲル15、25ml ¥37,000 1536052 アフィゲル15、25ml、4本 ¥94,000 1531500 アフィゲル15、1L ※ 1536098 アフィゲル10/15セット、4本(25ml×各2本) ¥98,000 1536047 アフィゲルHz、25ml ¥64,000 1536054 アフィゲルHzカップリングバッファー、

500ml ¥25,000

1536055 アフィゲルHzオキシダイザー、250mg ¥15,000 1532401 アフィゲル102, 50ml ¥60,000 1530990 EDAC, 5g ¥27,000

※マークの付いた製品の大量購入をご希望の際はお問い合せください(少量ボトル製品の価格を反映しません)。

ランダムなカップリングによって抗原結合部位あるいはその近辺がゲルに固定されるため、抗原の結合量が低くなる。IgGは第一級アミンを介してゲルに固定化される。

方向性のあるカップリングによって固定化されたIgGは、他の方法より高い抗原結合能を示す。IgGはFc部分を介してアフィゲルHzゲルに固定化される。

IgGのFc部分の糖鎖 ゲルスペーサーアームと官能基 免疫グロブリンG(IgG)

アフィゲル15アフィゲル10

1009080706050403020100

% Protein coupled

3 4 5 6 7 8 9 10 11pl

20

15

10

5

0

mg Protein coupled

ml gel

アフィゲル10/15のタンパク質カップリングCoupling conditions: Each protein solution(3ml 0.1M MOPS, pH7.5, containing 40mg protein)was combined with 2ml ofAffi-Gel gel. The gel slurry was mixed at 4 ℃ for 2hours, and then stripped with 7M urea containing 1M NaCl. The uncoupled protein was determined, using published E21%80 , by dilution of an aliquot of the urea effluent into 0.1N HCl and measurement of the absorbance at 280nm.

Epoxide Profinity

アフィゲル102

Epoxide ProfinityはUNOsphereビーズにエポキシ基が結合しており、アミノ基やチオール基、ヒドロキシル基を有する生体物質をリガンドとして結合させて使用します。UNOsphereの大きなポアサイズにより、プロテイン Aやカルモジュリン等の比較的大きなリガンドを結合させて使用することも可能です。粉末状になっておりますので、バッファー等で膨潤(1gあたり~約8ml容量になります)してからお使いください。

UNOsphereR-NH2, -SH, -OH UNOsphere

OH

NHR(-SR, -OR)

アフィゲル10/15

アフィゲルHz

Page 34: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

エンプティーカラム

34 Chromatography Guide

エコノカラム

カラムの上下は半透明で、簡単なルアーロックフィッティングによるチュービング

マニュアルサンプルアプリケーションに便利なカラムリザーバー付

ホウケイ酸ガラス使用

メールルアーロックフィッティングベッドサポート付(ポリエチレン製ポアサイズ30μm)Fineグレード担体に最適

エンドキャップ

エコノカラムは、低圧クロマトグラフィー用のガラス製カラムで、高品質かつ使い易い製品として定評をいただいております。

● 豊富な種類。(内径0.5~5cm、長さ:5~170cm) ● 多孔性ポリマーでできたベッドサポート。(30μm) ● フィッティングには半透明のポリプロピレン使用。 ● オートクレーブ可能。 ● 14.7psi(0.1MPa、1kg/cm2)までの耐圧性※。 ● 優れた耐酸・耐アルカリ性。 ● 2方ストップコック付。(オートクレーブ不可) ● エコノカラムエンドキャップ付。

エンプティーカラム

Ordering Information

カタログ番号内径(cm)

底面積(cm2)

長さ(cm)

最大容量(ml) 本数 価格

7370507 0.5 0.2 5 1 2 ¥8,5007370512 0.5 0.2 10 2 2 ¥9,0007370517 0.5 0.2 15 3 2 ¥10,0007370522 0.5 0.2 20 4 2 ¥12,0007370707 0.7 0.39 5 2 2 ¥9,5007370712 0.7 0.39 10 4 2 ¥10,0007370717 0.7 0.39 15 6 2 ¥11,0007370722 0.7 0.39 20 8 2 ¥12,0007370732 0.7 0.39 30 12 2 ¥14,5007370752 0.7 0.39 50 20 2 ¥19,0007371007 1.0 0.79 5 4 2 ¥10,0007371012 1.0 0.79 10 8 2 ¥11,0007371022 1.0 0.79 20 16 2 ¥13,5007371032 1.0 0.79 30 24 2 ¥16,0007371052 1.0 0.79 50 40 2 ¥21,0007371091 1.0 0.79 100 79 2 ¥32,0007371093 1.0 0.79 120 95 2 ¥36,0007371507 1.5 1.77 5 9 2 ¥12,0007371512 1.5 1.77 10 18 2 ¥13,0007371517 1.5 1.77 15 27 2 ¥14,5007371522 1.5 1.77 20 35 2 ¥16,0007371532 1.5 1.77 30 53 2 ¥19,0007371552 1.5 1.77 50 89 2 ¥25,0007371576 1.5 1.77 75 124 2 ¥32,0007371591 1.5 1.77 100 177 2 ¥38,0007371593 1.5 1.77 120 212 2 ¥42,0007371598 1.5 1.77 170 301 2 ¥51,000

カタログ番号内径(cm)

底面積(cm2)

長さ(cm)

最大容量(ml) 本数 価格

7372507 2.5 4.91 5 25 2 ¥15,0007372512 2.5 4.91 10 49 2 ¥16,0007372522 2.5 4.91 20 98 2 ¥20,0007372532 2.5 4.91 30 147 2 ¥23,0007372551 2.5 4.91 50 246 2 ¥30,0007372576 2.5 4.91 75 344 2 ¥40,0007372591 2.5 4.91 100 491 2 ¥47,0007372593 2.5 4.91 120 589 2 ¥52,0007375011 5.0 19.63 10 196 1 ¥22,0007375021 5.0 19.63 20 393 1 ¥26,5007375031 5.0 19.63 30 589 1 ¥32,0007375051 5.0 19.63 50 982 1 ¥41,5007375071 5.0 19.63 70 1374 1 ¥54,000

直径2.5cmまでのサイズは、お得な4本パックもあります。 ※ 内径5cmカラムには、フローアダプター(カタログ番号7380018)のご使用

をお勧めします。

Page 35: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

エンプティーカラム

35クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

エコノカラムフローアダプターは、エコノカラム、ジャケット付きエコノカラム、エコノパックカラムに使用できます。ワンタッチで装着でき、確実にフィットします。これによりデッドボリュームを最小限に抑え、より効果的にクロマトグラフィーを行えます。

サイズは1.0cmから5.0cmまで揃えています。5.0cm用は3ポジションカム付ではありません。

3ポジションカム(1.0、1.5、2.5cm用)(開放、位置セット、固定)

Delrin®ハウジングは、エコノカラムにフィットします

エチレンプロピレン製Oリング

ポリエチレン製ベッドサポート、30μm

シリコンチューブ(0.88mm ID)は交換可能

チューブ先端はフィメールルアーロック フィッティング付

 チューブ先端はフィメールルアーロック フィッティング付

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格エコノカラムリザーバー7379112 エコノカラムリザーバー 500ml ¥25,0007379113 エコノカラムリザーバー 1,000ml ¥30,000エコノカラムロート7310003 エコノカラムロート 250ml(5) ¥13,500

( )内の数字は数量、個数です。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格エコノカラムフローアダプター7380014 エコノカラムフローアダプター ID1.0cm用(1-7cm) ¥20,0007380015 エコノカラムフローアダプター ID1.0cm用(1-14cm) ¥22,0007380019 エコノパックフローアダプター ID1.5cm用(1-7cm) ¥21,0007380016 エコノカラムフローアダプター ID1.5cm用(1-14cm) ¥22,0007380017 エコノカラムフローアダプター ID2.5cm用(1-14cm) ¥24,0007380018 エコノカラムフローアダプター ID5.0cm用(1-14cm) ¥74,000

エコノカラムリザーバーは、内容量500mlと1,000mlの2種類をご用意しています。内径1.5cm以下のエコノカラムに使用可能です。キャップはメールルアーフィッティングになっています。本品はガラス製です。

エコノカラムロートは、カラムの充填・サンプルの添加・バッファーの注入に使用できます。内径2.5cmまでのエコノカラムやジャケット付エコノカラム、ポリプレップカラム、エコノパックカラムのいずれにも使用可能です。本品はポリプロピレン製です。

エコノカラムロート

エコノカラムリザーバー

メールルアーロック フィッティング付 キャップ

内容量500ml1,000ml

エコノカラムフローアダプター(内径5cm用)

エコノカラムフローアダプター

エコノカラムリザーバー、エコノカラムロート

Page 36: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

エンプティーカラム

36 Chromatography Guide

エンドキャップ

10mlリザーバー

スナップオフルアーフィッティング

9cm

3.9cm

2mlベッドボリューム

ベッドサポート(ポリエチレン製、30μm)

バイオスピンエンプティーカラムは、様々なクロマトグラフィー担体を充填可能なディスポーザブルポリプロピレン製スピンカラムです。バイオスピンカラムには1.2mlの担体が入り、標準的なスウィング式バケット遠心機に適合します。

マイクロバイオスピン/ミニバイオスピンカラムにはそれぞれ0.8ml、1.2mlの担体が入り、標準的なマイクロチューブに適合します。

3種のカラムすべてが標準的な回収チューブに適合し、スナップオフ・チップとポリエチレンフリットが付いており、オートクレーブ可能です。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/spincolumnsRequest or download bulletin: 2289

2.8cm

リザーバー

1.2ml ベッドボリューム

リバーシブルスナップオフルアーフィッティング

3.3cm

ミニバイオスピンカラム

5cm

3.7cm

エンドキャップ

1.1ml リザーバー

ベッドサポート(ポリエチレン製ポアサイズ 30μm)

スナップオフルアーフィッティング

1.2ml ベッドボリューム

バイオスピンカラム

2cm

エンドキャップ

リザーバー

スナップオフルアーフィッティング

3cm

マイクロバイオスピンカラム

ベッドサポート(ポリエチレン製ポアサイズ30μm)

0.8mlベッドボリューム

ポリプレップカラムは、ベッド容量2mlのポリプロピレン製ディスポーザブルカラムです。サンプルの前処理や放射性物質を使用する場合に便利です。10mlのリザーバー付きです。スタックキャップとメール・メールルアーを使用するとカラムの連結、チュービングが可能です。またオートクレーブ可能です。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/econopaccolumnsRequest or download bulletin: 2289

エコノパックカラムは、ベッド容量20mlのポリプロピレンディスポーザブルカラムです。ベッドサポートが別に1個含まれていますので、充填ゲル上端にセットしますと、ゲルの乾燥を防ぎます(ただし自然落下法の時)。またフローアダプター(7380019)をつなぐことも可能です。オートクレーブ可能です。

For More InformationWeb: www.bio-rad.com/econopaccolumnsRequest or download bulletin: 2289

エンドキャップ10mlリザーバー

目盛り付き

ベッドサポート(ポリエチレン製、30μm)

スナップオフルアーフィッティング

0‒20ml ベッドボリューム

14cm

1.5cm ID

11.5cm

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格7311550 ポリプレップエンプティーカラム 50本 ¥27,0007311550 B04 ポリプレップエンプティーカラム 50本×4 ¥92,0007311550 B10 ポリプレップエンプティーカラム 50本×10 ¥200,0007311553 ポリプレップエンプティーカラム 50本×20 ¥350,0007311555 ポリプレップカラムスタックキャップ 50個 ¥8,0007318230 メール・メールルアー 10個 ¥10,000

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格エコノパックカラム7321010 エコノパックカラム 50本 ¥28,0007321011 エコノパックカラム 500本 ¥210,000アクセサリー7317005 ポリカラムラック ¥52,0007328102 2方ポリカーボネイトストップコック 10個 ¥6,500

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格7326204 マイクロバイオスピンエンプティーカラム 100本 ¥15,0007326204B02 マイクロバイオスピンエンプティーカラム 100本×2 ¥24,0007326204B05 マイクロバイオスピンエンプティーカラム 100本×5 ¥50,0007326204B10 マイクロバイオスピンエンプティーカラム 100本×10 ¥90,0007326207 ミニバイオスピンエンプティーカラム 100本 ¥29,0007326008 バイオスピンエンプティーカラム 100本 ¥29,0007326008B02 バイオスピンエンプティーカラム 100本×2 ¥42,0007326008B05 バイオスピンエンプティーカラム 100本×5 ¥84,0007326008B10 バイオスピンエンプティーカラム 100本×10 ¥145,000

スタックキャップ、メール・メールルアー

ポリカラムラック

バイオスピン、マイクロバイオスピン、ミニバイオスピンカラム

ポリプレップカラム

エコノパックカラム

Page 37: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

プレパックカラム

37クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

Foresightプレートおよびカラムは、一連のバイオ・ラッドのプロセスクロマトグラフィー担体がプレパックされており、プロセスサイエンティストに、ハイスループット実験のニーズに対する利便性と信頼性を提供します。製品のロバストな設計により、ハイスループット担体のスクリーニングからスモールスケールの手法開発およびスケールアップの最適化までの精製開発サイクル全体を通じてプレパックフォーマットを研究者が使用できるようになります。

● プロセス開発時間を節約するようデザインされたプレパックready-to-use フォーマット。

● オペレーショナルウインドウのより優れた定義のため様々な実験条件を評価する能力。

● 最低限のサンプル必要量でハイスループット実験を実施できます。

● ラージスケールのバイオプロセス用にデザインされた様々なクロマトグラフィー担体モードが利用可能。

● ロボットによる液体処理ワークステーションに適合します。 ● カラムはNGCシステムの他多くのHPLC/FPLC機器に接続可能(1/16”, 10-32)。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格Foresight Plates*7324714 Foresight UNOsphere Q Filter Plate, 20μl ¥70,0007324710 Foresight UNOsphere S Filter Plate, 20μl ¥70,0007324703 Foresight Nuvia Q Filter Plate, 20μl ¥70,0007324701 Foresight Nuvia S Filter Plate, 20μl ¥70,0007324705 Foresight Nuvia cPrime Filter Plate, 20μl ¥70,0007324716 Foresight CHT Type I Filter Plate, 40μm 20μl ¥70,0007324718 Foresight CHT Type II Filter Plate, 40μm, 20μl ¥70,0007324707 Foresight Nuvia HR-S Filter Plate, 20μl ¥70,0007324781 Foresight UNOsphere SUPrA Filter Plate, 20μl ¥70,0007324785 Foresight MPC Type I Filter Plate, 40μm, 20μl ¥70,000

品名 200 μl 価格 600 μl 価格Foresight RoboColumn Units**,***Foresight UNOsphere Q RoboColumn Units 7324819 ¥25,000 7324820 ¥30,000Foresight UNOsphere S RoboColumn Units 7324813 ¥25,000 7324814 ¥30,000Foresight Nuvia Q RoboColumn Units 7324804 ¥27,000 7324805 ¥33,000Foresight Nuvia S RoboColumn Units 7324801 ¥27,000 7324802 ¥33,000Foresight Nuvia cPrime RoboColumn Units 7324807 ¥30,000 7324808 ¥36,000Foresight CHT Type I RoboColumn Units, 40μm 7324822 ¥32,000 7324823 ¥38,000Foresight CHT Type II RoboColumn Units, 40μm 7324825 ¥32,000 7324826 ¥38,000Foresight MPC Type I Robo Column Units, 40μm 7324828 ¥32,000 7324829 ¥38,000Foresight Nuvia HR-S Robo Column Units 7324831 ¥28,000 7324832 ¥35,000Foresight UNOsphere SUPrA Robo Column Units 7324834 ¥68,000 7324835 ¥84,000

品名 1ml 価格 5ml 価格Foresight ColumnsForesight UNOsphere Q 7324732 ¥14,000 7324752 ¥25,000Foresight UNOsphere S 7324730 ¥14,000 7324750 ¥25,000Foresight Nuvia Q 7324721 ¥15,000 7324741 ¥28,000Foresight Nuvia S 7324720 ¥15,000 7324740 ¥28,000Foresight Nuvia cPrime 7324722 ¥18,000 7324742 ¥36,000Foresight CHT Type I, 40μm 7324735 ¥20,000 7324755 ¥38,000Foresight CHT Type II, 40μm 7324736 ¥20,000 7324756 ¥38,000Foresight MPC Type I, 40μm 7324737 ¥20,000 7324757 ¥38,000Foresight Nuvia HR-S 7324723 ¥16,000 7324743 ¥30,000Foresight UNOsphere SUPrA 7324729 ¥27,000 7324749 ¥70,000

* Package size: 2 x 96-well plates. ** Package size: 1 row of 8 columns. *** Foresight RoboColumn Units are to be used with robotic liquid handling workstations. For more information on prepacked columns and plates, please visit www.bio-rad.com/foresight.

プレパックカラム

Foresight™ プレパックプレートとカラム

Page 38: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

プレパックカラム

38 Chromatography Guide

仕様サイズ 1ml and 5ml;ゲルろ過(脱塩)カートリッジ:10ml and 50ml流速(推奨) 担体に依存*最大操作圧 1, 5, and 10ml: 45psi(0.3MPa)

50ml: 40psiフィッティング Inlet(フィメールルアー)、Outlet(メールルアー)カラム材質 ポリプロピレンフリット材質 ポリエチレン(HDPE)寸法 1ml-40mm(L)×5.6mm(ID)

5ml-40mm(L)×12.6mm(ID)10ml-80mm(L)×12.6mm(ID)**50ml-80mm(L)×28.2mm(ID)**

* 推奨流速はマニュアル参照 ** ゲルろ過(脱塩)カートリッジのみ

Bio-Scale Miniカートリッジは2重壁のカートリッジで耐久性が高く、45psiまでの圧力に対応でき、簡単で確実なクロマトグラフィーのためのカートリッジです。タンパク質分離に使用されるほとんどの水系バッファーが使用可能です。

カートリッジにはバイオ・ラッドのクロマトグラフィー用担体がパックされており、イオン交換、アフィニティー、ゲルろ過、ハイドロキシアパタイトの各種クロマトグラフィーに対応します。また、カートリッジサイズは1mlと5mlで、精製カラムのスカウティングや単純精製に使用できます。ゲルろ過(脱塩)用のカートリッジは、10mlと50mlのサイズを用意しています。

Bio-Scale Miniカートリッジは、BioLogicシステム、NGCシステム、クロマトグラフィー、ぺリスタルティックポンプ、その他のクロマトグラフィーシステムで使用できます。カートリッジをルアーロックシリンジに結合して単純精製することもできます。また、フィッティングによりカートリッジをNGCシステムやÄKTAシステムなどのHPLCに接続することも可能です。

● どんなシステムにもルアーフィッティングで簡単に接続。 ● ポリプロピレン製なので化学的にも強い。 ● 多種類のクロマトグラフィー担体が利用可能。

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格イオン交換7324100 Bio-Scale Mini UNOsphere Qカートリッジ 1ml、5本 ¥21,0007324102 Bio-Scale Mini UNOsphere Qカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324104 Bio-Scale Mini UNOsphere Qカートリッジ 5ml、5本 ¥68,0007324110 Bio-Scale Mini UNOsphere Sカートリッジ 1ml、5本 ¥21,0007324112 Bio-Scale Mini UNOsphere Sカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324114 Bio-Scale Mini UNOsphere Sカートリッジ 5ml、5本 ¥68,0007324420 Bio-Scale Mini Nuvia Sカートリッジ 1ml、1本 ¥8,4007324421 Bio-Scale Mini Nuvia Sカートリッジ 1ml、5本 ¥25,0007324422 Bio-Scale Mini Nuvia Sカートリッジ 5ml、1本 ¥21,0007324423 Bio-Scale Mini Nuvia Sカートリッジ 5ml、5本 ¥68,0007324120 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Qカートリッジ 1ml、5本 ¥21,0007324122 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Qカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324124 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Qカートリッジ 5ml、5本 ¥68,0007324130 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Sカートリッジ 1ml、5本 ¥21,0007324132 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Sカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324134 Bio-Scale Mini Macro-Prep High Sカートリッジ 5ml、5本 ¥68,0007324140 Bio-Scale Mini Macro-Prep DEAEカートリッジ 1ml、5本 ¥21,0007324142 Bio-Scale Mini Macro-Prep DEAEカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324144 Bio-Scale Mini Macro-Prep DEAEカートリッジ 5ml、5本 ¥68,000

次ページへ続く

Bio-Scale™ Miniカートリッジ

Page 39: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

プレパックカラム

39クロマトグラフィー 機器・担体ガイド

Ordering Informationカタログ番号 品名 価格アフィニティー7324610 Bio-Scale Mini Ni-IMAC Profinityカートリッジ 1ml、5本 ¥22,0007324612 Bio-Scale Mini Ni-IMAC Profinityカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324614 Bio-Scale Mini Ni-IMAC Profinityカートリッジ 5ml、5本 ¥68,0007324620 Bio-Scale Mini GST Profinityカートリッジ 1ml、5本 ¥44,0007324622 Bio-Scale Mini GST Profinityカートリッジ 5ml、1本 ¥32,0007324624 Bio-Scale Mini GST Profinityカートリッジ 5ml、5本 ¥126,0007800811 Bio-Scale Mini Nuvia IMAC 5ml、1本 ¥20,0007800812 Bio-Scale Mini Nuvia IMAC 5ml、5本 ¥75,0007324200 Bio-Scale Mini SUPrA Protein Aカートリッジ 1ml、1本 ¥16,0007324201 Bio-Scale Mini SUPrA Protein Aカートリッジ 1ml、5本 ¥68,0007324202 Bio-Scale Mini SUPrA Protein Aカートリッジ 5ml、1本 ¥52,0007324600 Bio-Scale Mini Protein Aカートリッジ 1ml、5本 ¥68,0007324602 Bio-Scale Mini Protein Aカートリッジ 5ml、1本 ¥56,0007324632 Bio-Scale Mini DEAE Affi-Gel Blueカートリッジ 5ml、1本 ¥25,0007324634 Bio-Scale Mini DEAE Affi-Gel Blueカートリッジ 5ml、5本 ¥100,0007324642 Bio-Scale Mini Affi-Gel Blueカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324644 Bio-Scale Mini Affi-Gel Blueカートリッジ 5ml、5本 ¥68,000ハイドロキシアパタイト7324322 Bio-Scale Mini CHT Type Iカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324324 Bio-Scale Mini CHT Type Iカートリッジ 5ml、5本 ¥64,0007324332 Bio-Scale Mini CHT Type IIカートリッジ 5ml、1本 ¥16,0007324334 Bio-Scale Mini CHT Type IIカートリッジ 5ml、5本 ¥64,0007324405 Bio-Scale Mini CFT Type IIカートリッジ 5ml、1本 ¥16,000 7324406 Bio-Scale Mini CFT Type IIカートリッジ 5ml、5本 ¥64,000脱塩、バッファー交換7324502 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 5ml、1本 ¥11,0007324504 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 5ml、5本 ¥44,0007325304 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 10ml、5本 ¥33,0007325312 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 50ml、1本 ¥22,0007325314 Bio-Scale Mini Bio-Gel P-6カートリッジ 50ml、5本 ¥88,000

Bio-Scale CHT-Ⅰカラムには粒径10μmのCHTセラミックハイドロキシアパタイトTypeⅠがパックされており、タンパク質結合容量が大きく、酸性~塩基性タンパク質の分離に最適です。

● タンパク質、ペプチドあるいは核酸などを迅速、高再現性で、効率よく分離できます。 ● 球状でセラミック化されてますので、従来の結晶性のハイドロキシアパタイトに比べて、物理的・化学的強度が高くなっています。 ● 粒子サイズ10μmで粒子分布が狭いため、生理活性物質を高度に分離できます。 ● 4種のカラムサイズ(2, 5, 10, 20ml)を揃えておりますので、種々のサンプル量に対応可能です。 ● 粒子径の大きな大容量カラムへの、スケールアップも簡単に効率よく行うことができます。

Protein Aカラムから溶出した抗体を中和後、Bio-Scale CHT type I カラムで精製した 例。 単 量 体(Monomer)が二量体(Dimer)、凝集体(Aggregate)と分離された。

Ordering Information

カタログ番号 品名寸法(mm)

ベッド体積(ml)

結合容量(mg)

流速(ml/min)

圧力(psi/MPa) 価格

Bio-Scale CHT Type Iカラム(中・高圧用)7510021 Bio-Scale CHT2-Iカラム 7×52 2 20 0.5‒3.0 1,000 / 6.9 ¥110,0007510023 Bio-Scale CHT5-Iカラム 10×64 5 50 0.5‒5.0 750 / 5.2 ¥160,0007510025 Bio-Scale CHT10-Iカラム 12×88 10 100 0.5‒7.0 600 / 4.1 ¥210,0007510027 Bio-Scale CHT20-Iカラム 15×113 20 200 0.5‒10.0 500 / 3.4 ¥300,000

Bio-Scale™ CHT™ Type I カラム

Page 40: CFXシリーズ リアルタイムPCR解析システム 担体ガ …2 Chromatography Guide イオン交換担体 P.8 Resin Type Net Charge of Molecule of Interest Charge of Resin

プレパックカラム

40 Chromatography Guide

この性能で、この価格! 他社競合品とパフォーマンス、価格で比べてみてください。 ● 高い分離能 平均粒子径10μmの高耐圧ポリメタクリレート樹脂を採用 ゲルろ過、イオン交換で分離能が向上 ● 高結合容量、高流速タイプ イオン交換カラムは、100mg/ml以上の結合容量 ゲルろ過カラムは、短時間で分離可能 ● フレキシブル NGCシステムをはじめ、お使いのクロマトシステムにも接続 は簡単 フィッティングは、一般的な1/16’’, 10-32タイプ

Time, min

λ(280nm)(mAU)

Gel Filtration Standard Th Thyroglobulin 670 kDaGI γ-globulin 158 kDaOV Ovalbumin 44 kDaMY Myoglobin 17 kDa (↓)VB Vitamin B12 1 kDa

CA Carbonic anhydrase 29 kDaTI Trypsin inhibitor 20 kDa (↓)CY Cytochrome c 13 kDa (↓)

(左図上)Hisタグを使って粗精製したサンプルをENrichイオン交換カラム(緑)と他社高分離カラム(青)を用いて精製した例(左図下)。分離した各フラクションをTGX Stain Freeゲルを使ってSDS-PAGEした結果。他社製品では、単一のピーク(↓)として溶出された2つのバンドが、ENrichカラムを用いることで、分離(↓↓)できた例。

(中図)ゲルろ過スタンダード(カタログ番号1511901)を分離した例(赤;流速1 ml/min、サンプル50μl)。さらにスタンダードに低分子量タンパク質の脱炭酸酵素(CA: 29 kDa)、トリプシン阻害剤(TI: 20 kDa, ↓ )、チトクロームc(CY: 13 kDa, ↓ )を添加した分離例(緑、青)。ミオグロビン(MY: 17 kDa, ↓)とこれらのタンパク質が分離できた。

(右図)ゲルろ過スタンダードカタログ番号1511901)を分離した例。0.5ml/minから2.0ml/minまで流速を上げて分離した。高流速でも高い分解能で分離ができた。

ENrich Q 陰イオン交換カラム

ENrich SEC 70サイズ排除(ゲルろ過)カラム

ENrich Q カラム G社 Qタイプ高分離カラム

Volume, ml

λ(280nm)(mAU)

ENrich Q カラムG社 Qタイプ高分離カラム

バイオ・ラッド ラボラトリーズ 株式会社ライフサイエンス

取扱店www.bio-rad.com 本   社 〒140-0002 東京都品川区東品川 2-2-24 TEL:03-6361-7000大阪営業所 〒532-0025 大阪市淀川区新北野 1-14-11 TEL:06-6308-6568福岡営業所 〒812-0013 福岡市博多区博多駅東 2-5-28 TEL:092-475-4856                        * 学術的お問い合わせは TEL:03-6404-0331

*価格(税抜き)、仕様などは予告なく変更することがありますので、ご了承ください。*価格は 2015 年 9 月現在のもので、メーカー希望小売価格(税別)です。※本カタログに記載されている会社名、商品名は各社の商標または登録商標です。 C10733 1509A

Ordering Information

カタログ番号 品名 内径×長さ(mm)/体積最大流速(推奨)(ml / min)

結合容量(mg / ml)

限界圧MPa(psi) 価格

ENrich™ 高分解能イオン交換カラム7800001 ENrich Q 5×50 カラム 5×50 /1ml 2.0(1.0) BSA:130 3.45(500) ¥138,0007800021 ENrich S 5×50 カラム 5×50 /1ml 2.0(1.0) hlgG:120 3.45(500) ¥138,0007800003 ENrich Q 10×100 カラム 10×100 /8ml 2.0(1.0) BSA:130 3.45(500) ¥488,0007800023 ENrich S 10×100 カラム 10×100 /8ml 2.0(1.0) hlgG:120 3.45(500) ¥488,000

カタログ番号 品名 内径×長さ(mm)/体積最大流速(推奨)(ml / min)

分画範囲(Mr)

限界圧MPa(psi) 価格

ENrich™ 高分解能サイズ排除(ゲルろ過)カラム7801070 ENrich SEC 70 10×300 カラム 10×300 /24ml 1.5(0.5-1.0) 500-70,000 4.1(600) ¥198,0007801650 ENrich SEC 650 10×300 カラム 10×300 /24ml 2.0(0.75-1.25) 5,000-650,000 4.1(600) ¥198,000

A28

0

700

600

500

400

300

200

100

0

0 0.16 0.32 0.48 0.64 0.80 0.96 1.12 1.28

Column volume = 23.56 ml

Gel Filtration Standard Th Thyroglobulin 670 kDaGI γ-globulin 158 kDaOV Ovalbumin 44 kDaMY Myoglobin 17 kDaVB Vitamin B12 1 kDa

ENrich SEC 650サイズ排除(ゲルろ過)カラム

ENrich™ High Resolution Protein Purification Columns