Click here to load reader
Upload
alfiani-rachmawati
View
32
Download
3
Embed Size (px)
DESCRIPTION
cover lampiran abcdefghijklmnopqrstuvwxyz.
Citation preview
TEKNIK PEMBUATAN ANTIGEN Brucella abortusDAN KIT ELISA RABIES
LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGANDI LABORATORIUM ANTISERA DIAGNOSTIKA DAN BAHAN BIOLOGIS LAINNYA
PUSAT VETERINARIA FARMA SURABAYA
OLEHNADA PUTRI DJIHAD
NIM 408342413179
UNIVERSITAS NEGERI MALANGFAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
JURUSAN BIOLOGIOKTOBER 2011
TEKNIK PEMBUATAN ANTIGEN Brucella abortusDAN KIT ELISA RABIES
LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGANDI LABORATORIUM ANTISERA DIAGNOSTIKA DAN BAHAN BIOLOGIS LAINNYA
PUSAT VETERINARIA FARMA SURABAYA
Untuk memenuhi tugas matakuliahPraktik Kerja Lapangan (BIM 447)
Program Studi Biologi
OlehNada Putri DjihadNIM 408342413179
UNIVERSITAS NEGERI MALANGFAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
JURUSAN BIOLOGIOktober 2011
ii
Laporan Praktik Kerja Lapangan oleh Nada Putri Djihadini telah diperiksa dan disetujui
Surabaya, Desember 2011Pembimbing Lapangan,
drh. Nur SjolichahNIP 19641026199303 2 001
Malang, Desember 2011Pembimbing Kampus,
Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.ScNIP 19660921199103 2 001
Mengetahui, Mengesahkan,Ketua Jurusan Biologi Dekan FMIPA
Universitas Negeri Malang
Dr. Abdul Ghofur, M. Si Dr. H. Istamar Syamsuri, M.PdNIP 19540707198503 1 005 NIP 19490823 197903 1 001
iii
RINGKASAN
Penyakit hewan menular didefinisikan sebagai penyakit hewan yang membahayakan karena secara cepat dapat menjalar dari hewan pada hewan atau pada manusia dan disebabkan oleh virus, bakteri, cacing, protozoa dan parasit, salah satunya rabies. Pusvetma merupakan Unit Pelaksana Teknis (UPT) di lingkungan Direktorat Jenderal Peternakan yang ditugaskan memproduksi vaksin dan bahan biologis lain bagi pemerintah dalam usaha pengendalian penyakit hewan menular di Indonesia, antara lain vaksin, antigen, dan Kit ELISA. Pencegahan lebih dini yang dilakukan agar penyakit tidak menular adalah dengan melakukan diagnosis awal terhadap hewan ternak menggunakan antigen dan ELISA.
Antigen adalah substansi yang bila dimasukkan ke dalam tubuh suatu organisme dapat memunculkan respon imun. Antigen dapat berupa protein, polisakarida, endotoxin, dan lipid. Antigen dapat digunakan untuk uji diagnosis awal dalam uji aglutinasi cepat. Antigen yang diproduksi Pusvetma salah satunya adalah antigen Brucella abortus. Bahan biologis lainnya yang diproduksi untuk diagnosis adalah Kit ELISA. Metode Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) merupakan metode diagnosis yang sering digunakan pada saat ini, salah satu Kit ELISA yang diproduksi adalah Kit ELISA Rabies.
Tujuan kegiatan PKL antara lain mempelajari dan mengaplikasikan teori yang telah didapat dalam perkuliahan khususnya bioteknologi, mengetahui teknik pembuatan antigen Brucella abortus, serta mengetahui teknik pembuatan Kit ELISA Rabies di Laboratorium Antisera Diagnostika dan Bahan Biologis Lainnya. PKL yang telah dilakukan di Pusvetma sejak tanggal 20 Juni – 5 Agustus 2011 ini tidak terbatas pada produksi antigen Brucella abortus dan KIT ELISA Rabies, tetapi juga mempelajari pembuatan vaksin, kultur sel, pengenalan produk vaksin, pengujian vaksin, kuliah, dan praktik uji hemaglutinasi (HA). Hasil yang diperoleh dari PKL, yaitu wawasan dan pengetahuan baru mengenai teknik pembuatan antigen Brucella abortus dan Kit ELISA Rabies.
iv
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah
memberikan rahmat dan hidayah serta karunia-Nya, sehingga penulis dapat
menyelesaikan laporan kegiatan Praktik Kerja Lapangan (PKL) berjudul
“TEKNIK PEMBUATAN ANTIGEN Brucella abortus DAN KIT ELISA
RABIES” yang dilakukan di Laboratorium Antisera Diagnostika dan Bahan
Biologis Lainnya, Pusat Veterinaria Farma (Pusvetma) Surabaya.
Laporan ini disusun untuk memenuhi Sistem Kredit Semester (SKS)
matakuliah PKL dalam bidang ilmu Biologi. Terlaksananya PKL dan tersusunnya
laporan ini tidak lepas dari bantuan berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis
mengucapkan terima kasih kepada:
1. drh. Endhang Pujiastuti selaku Kepala Pusat Veterinaria Farma
(Pusvetma) Surabaya yang telah memberikan izin PKL
2. drh. Nur Sjolichah selaku Pembimbing Lapangan yang telah mendampingi
dan memberikan bimbingan yang intensif serta motivasi selama kegiatan
PKL, selaku Kepala Bidang Laboratorium Antisera Diagnostika dan
Bahan Biologis Lainnya yang telah memberikan izin pada penulis untuk
melaksanakan PKL di laboratorium tersebut
3. drh. Asri Wahjuni selaku Pembimbing Lapangan yang mendampingi dan
memberikan bimbingan yang intensif serta motivasi selama kegiatan PKL
berlangsung
4. Dra. Dwi Listyorini M.Si, D.Sc selaku Dosen Pembimbing Kampus yang
telah banyak memberikan bimbingan, saran, dan masukan kepada penulis
selama pelaksanaan PKL ini
5. seluruh staf dan karyawan Pusvetma yang turut membantu kelancaran
kegiatan PKL
6. rekan mahasiswa PKL: Anggraeni Widyaningsih, Lulut Dwi
Nurmamulyosari, Nia Ariani, dan Juliyatin Putri Utami atas kerjasama
yang kompak selama kegiatan PKL berlangsung
v
7. seluruh pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu yang telah
mendukung penulis, baik secara materi maupun non materi.
Penulis menyadari bahwa laporan PKL ini masih jauh dari kata sempurna,
baik dari segi isi, pengetikan, dan segi lainnya. Semoga tulisan ini dapat
bermanfaat bagi seluruh pihak yang terkait.
Malang, Oktober 2011
Penulis
vi
DAFTAR ISIHalaman
HALAMAN JUDUL…................................................................................... iiLEMBAR PENGESAHAN.........…………………………………………… iiiRINGKASAN.........………………………………………………………… ivKATA PENGANTAR….…………………………………………………... v-viDAFTAR ISI.................……………..……………………………………… viiDAFTAR TABEL...........…………………………………………………… viiiDAFTAR GAMBAR......…………………………………………………… ix
BAB I PENDAHULUANA. Latar Belakang................…………………………….……… 1-4B. Alasan Pemilihan Objek PKL………………………………. 5C. Tujuan PKL.......................................……………………….. 5
BAB II PELAKSAAN PRAKTIK KERJA LAPANGANA. Profil Tempat Pelaksanaan PKL…………………………… 6-14B. Waktu Pelaksanaan……………….…..…………………..… 14C. Deskripsi & Sekuensi Aktivitas selama Pelaksanaan PKL 14-16
BAB III HASIL DAN PEMBAHASANA. Hasil..............…………………………….…………….….... 17B. Pembahasan…...............…………………………..……... 17-29
BAB IV PENUTUPA. Kesimpulan…........…………………………………….….... 30B. Saran…....…………………………………………………. 30-31
DAFTAR RUJUKAN…….…………………………………….................. xLAMPIRAN
vii
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
2.1 Daftar Produk Pusvetma …………………………………………. 9
2.2 Deskripsi dan Sekuensi Aktivitas ………………………………… 14-16
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Struktur Organisasi Pusvetma …………………………………… 11
2.2 Struktur Organisasi Sub bidang Antisera Diagnostika dan BahanBiologis Lainnya ………………………………………………... 13
3.1 Reaksi Antigen-Antibodi ……………………………………….. 23
3.2 Proses Penanaman Bakteri ……………………………………… 25
3.3 Produk Antigen Brucella abortus ………………………………. 26
ix
DAFTAR RUJUKAN
Alton et. al. 1988. Techniques for the Brucellosis Laboratory. Paris: INRA
Chadwick, B. J., Desport, M., Brownlie, J., Wilcox, G. E., Dharma, D. M. N. 1998. Detection of Jembrana Disease Virus in Spleen, Lymph Nodes,Bone Marrow and Other Tissues by In situ Hybridization ofParaffin-embedded Sections, Journal of General Virology (1998), 79:101-106
Crowther, John R. 2009. The ELISA Guide Book Second Edition. Austria: Humana Press
Herbert, W. J. 1997. Veterenary Immunology. Oxford: Blackwell Scientific Pub
Imbang, Rahayu. (tanpa tahun). Reaksi Antigen-Antibodi (Online), ([email protected], http://imbang.staff.umm.ac.id/?p=345, diakses tanggal 17 Agustus 2011)
Natalia, Lily dan Priadi, Adin. (tanpa tahun). Penyakit Septicaemia Epizootica: Penelitian Penyakit dan Usaha Pengendaliannya pada Sapi dan Kerbau di Indonesia. Bogor: Balai Penelitian Veteriner
National Academy of Science. 1971. Methods for Examining Poultry Biologics and for Identifying and Quantifying Avian Pathogens. Washington D.C.: National Research Council
Office International des Epizooties. 2008. Manual of Standards For Diagnostic Test and Vaccines General Information & Multiple Species. OIE
Tim Pusvetma. 2011. Pusat Veterinaria Farma Surabaya, (Online), (http://www.ditjennak.go.id/b-pusvetma.asp, diakses tanggal 17 Agustus 2011).
x
Lampiran 1. Dokumentasi Kegiatan PKL
xi
Lampiran 2. Surat Tugas Dosen Pembimbing Kampus
xii
Lampiran 3. Surat Permohonan Ijin PKL Kepada Dekan
xiii
Lampiran 4. Surat Permohonan Ijin PKL Dari Dekan Ke Instansi
xiv
Lampiran 5. Surat Persetujuan Instansi
xv
Lampiran 6. Surat Penugasan PKL
xvi
Lampiran 7. Jadwal Kegiatan PKL
JADWAL KEGIATAN PKL
Nama instansi : Pusat Veterinaria Farma (Pusvetma)
Alamat : Jl. Jend. A. Yani No. 68-70 Surabaya
Nama mahasiswa : Nada Putri Djihad
NIM : 408342413179
NO. WAKTU POKOK KEGIATAN KETERANGAN
1.Senin,20 Juni 2011
Penjelasan tahap-tahap pembuatan vaksin
Mengikuti kegiatan kultur sel chicken kidney
2.Selasa,21 Juni 2011
Kunjungan ke Laboratorium Mamalia
3.Rabu,22 Juni 2011
Kunjungan ke Laboratorium Antigen
4.Kamis,23 Juni 2011
Penjelasan tahapan ELISA Jembrana
5.Jum’at,24 Juni 2011
Kerja bakti Jumat Kunjungan ke Laboratorium PMP
6.Senin,27 Juni 2011
Kunjungan ke Laboratorium unggas Praktik uji HA
7.Selasa,28 Juni 2011
Studi literatur
8.Rabu,29 Juni 2011
Hari libur nasional
9.Kamis,30 Juni 2011
Pengecatan gram bakteri
10.Jum’at,1 Juli 2011
Persiapan inokulasi kumanPembuatan medium & tutup botol kultur
11.Senin,4 Juli 2011
Persiapan inokulasi kuman Pembuatan medium & tutup botol kultur
12 Selasa, Pembuatan tutup botol kultur
xvii
5 Juli 2011 Sterilisasi botol kemasan antigen Inokulasi kuman
13.Rabu,6 Juli 2011
Sterilisasi botol kemasan antigen
14.Kamis,7 Juli 2011
Inokulasi kuman
15.Jum’at,8 Juli 2011
Inokulasi kuman
16.Senin,11 Juli 2011
Panen kuman
17.Selasa,12 Juli 2011
Bottling antigen
18.Rabu,13 Juli 2011
Bottling larutan kit ELISA
19.Kamis,14 Juli 2011
Packing kit ELISA Rabies
20.Jumat,15 Juli 2011
Pencucian botol kemasan kit ELISA
21.Senin,18 Juli 2011
Mengambil stok bahan untuk produksi Coating antigen pada mikroplat
ELISA
22.Selasa,19 Juli 2011
Blocking mikroplat dan pembuatan larutan untuk kit ELISA
23.Rabu,20 Juli 2011
Coating mikroplat kit ELISA Rabies Sentrifugasi antigen
24.Kamis,21 Juli 2011
Coating antigen Rabies kit ELISA
25.Jumat,22 Juli 2011
Sentrifugasi
26.Senin,25 Juli 2011
Studi literatur
27.Selasa,26 Juli 2011
Studi literatur
28.Rabu,27 Juli 2011
Studi literatur
29Kamis,28 Juli 2011
Sentrifugasi antigen
29.Jumat,29 Juli 2011
Sterilisasi alat dan inkubasi kuman
30.Senin,3 Agustus 2011
Sentrifugasi dan sterilisasi alat
31.Selasa,4 Agustus 2011
Sentrifugasi antigen
32.Rabu,5 Agustus 2011
Sentrifugasi antigen dan sterilisasi alat
Surabaya, 5 Agustus 2011
Mengetahui,Pembimbing Lapangan, Praktikan,
xviii
drh. Nur Sjolichah Nada Putri DjihadNIP 19641026199303 2 001 NIM 408342413179
Lampiran 8. Agenda Harian Kegiatan PKL
xix
Lampiran 9. Agenda Mingguan Kegiatan PKL
AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL
Minggu ke : I
Tanggal : 20-24 Juni 2011
Lama Pelaksanaan : 5 hari
URAIAN KEGIATAN :
Surabaya, 24 Juni 2011
Mengetahui,
xx
Pada minggu pertama ini, kegiatan yang dilakukan adalah pengenalan dengan seluruh laboratorium yang ada di Pusvetma. Seluruh laboratorium yang terdapat di Pusvetma, yakni Laboratorium PMPP, laboratorium produksi yang terdiri atas Laboratorium Mamalia, Laboratorium Unggas, Laboratorium Antisera Diagnostika dan Bahan Biologis Lainnya yang bertugas untuk produksi antigen, serta Laboratorium Pengujian Mutu Produksi.
Hari pertama kegiatan PKL diisi dengan penjelasan mengenai proses pembuatan vaksin di Pusvetma yang dilakukan di Laboratorium PMPP, serta pengamatan terhadap berbagai kultur sel di laboratorium Kultur Jaringan Hewan yang terdapat di sana. Esok harinya, kunjungan dilanjutkan ke Laboratorium Mamalia dengan dijelaskan mengenai proses produksi vaksin mamalia yang berlangsung di laboratorium tersebut sembari pengenalan berbagai alat produksi vaksin mamalia. Sayangnya, ketika itu di laboratorium tersebut sedang tidak berlangsung kegiatan produksi sehingga tidak dapat melihat langsung proses produksinya. Di Laboratorium Antigen, saya mengikuti proses pembuatan medium dan dijelaskan mengenai antigen beserta proses produksinya, sedangkan hari terakhir di Laboratorium PMP dijelaskan mengenai alur pengujian mutu setiap hasil produksi di Pusvetma.
Pembimbing Kampus Pembimbing Lapangan,
Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc drh. Nur SjolichahNIP 19660921199103 2 001 NIP 19641026199303 2 001
AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL
Minggu ke : II
Tanggal : 27 Juni - 1 Juli 2011
Lama Pelaksanaan : 5 hari
URAIAN KEGIATAN :
Surabaya, 1 Juli 2011
Mengetahui,Pembimbing Kampus Pembimbing Lapangan,
xxi
Hari pertama pengenalan dilanjutkan ke Laboratorium Unggas. Di Laboratorium Unggas dikenalkan dengan Uji Hemaglutinasi (HA) dan diminta untuk melakukan praktik langsung Uji HA. Hal ini merupakan hal yang baru yang belum pernah dilakukan sebelumnya. Uji ini berfungsi untuk mendiagnosa keberadaan antigen pada tubuh hewan.
Selanjutnya, saya menetap di Laboratoium Antigen. Untuk kegiatan awal, dijelaskan mengenai proses pembuatan medium serta persiapan untuk melakukan inokulasi dan pengembiakkan kuman keesokan harinya. Selain itu, pada tahap sebelum inokulasi kuman, dilakukan pengecatan gram bakteri untuk memastikan kemurnian bahan kuman yang akan diinokulasi, saya berkesempatan untuk praktik langsung melakukan pengecatan gram bakteri Brucella abortus.
Akhir minggu, pemanena kuman dilakukan dan saya pun berkesempatan ikut membantu dalam proses tersebut.
Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc drh. Nur SjolichahNIP 19660921199103 2 001 NIP 19641026199303 2 001
AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL
Minggu ke : III
Tanggal : 4-8 Juli 2011
Lama Pelaksanaan : 5 hari
URAIAN KEGIATAN :
Surabaya, 8 Juli 2011
Mengetahui,Pembimbing Kampus Pembimbing Lapangan,
xxii
Di awal minggu, kegiatan produksi dimulai kembali dengan tahap persiapan. Persiapan dilakukan dengan pembuatan tutup botol kultur, pembuatan saringan kuman, serta penyiapan bahan medium, yakni kentang. Selanjutnya, dilakukan pembuatan medium terlebih dahulu dan selagi panas dituangkan pada botol-botol kultur yang kemudian disimpan di ruang inkubasi.
Keesokan harinya, proses inokulasi bakteri Brucella abortus strain 19 ke media PA dengan menggunakan spet. Benar-benar kegiatan yang sangat membutuhkan kecermatan serta kehatia-hatian dank arena kegiatan ini dilakukan dalam skala produksi maka kegiatan ini harus dilakukan seefisien mungkin.
Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc drh. Nur SjolichahNIP 19660921199103 2 001 NIP 19641026199303 2 001
AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL
Minggu ke : IV
Tanggal : 11-15 Juli 2011
Lama Pelaksanaan : 5 hari
URAIAN KEGIATAN :
Surabaya, 15 Juli 2011
Mengetahui,Pembimbing Kampus Pembimbing Lapangan,
xxiii
Awal minggu kegiatan dilanjutkan dengan pemanenan bakteri dan bakteri hasil pemanenan diinkubasi, yang nantinya disimpan di dalam lemari pendingin dengan suhu minus. Keesokan harinya barulah dilakukan pengemasan dan ditempeli dengan etiket.
Selain produksi antigen, minggu ini kegiatan lain yang dilakukan adalah produksi kit ELISA Rabies, meliputi pencucian botol kemasan, bottling bahan kit ELISA, dan packing.
Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc drh. Nur SjolichahNIP 19660921199103 2 001 NIP 19641026199303 2 001
AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL
Minggu ke : V
Tanggal : 18-22 Juli 2011
Lama Pelaksanaan : 5 hari
URAIAN KEGIATAN :
Surabaya, 22 Juli 2011
Mengetahui,
xxiv
Minggu ini kegiatan diawali dengan pegambilan stok bahan di gudang penyimpanan bahan yang letaknya tidak jauh dari Laboratorium Antigen. Pengambilan stok ini dilakukan dalam jumlah besar sehingga diperlukan troli pengangkut untuk membawa ke dalam laboratorium. Bahan-bahan bersama troli pun diangkut menggunakan lift barang.
Kegiatan produksi kit ELISA dilanjutkan dengan produksi untuk tending berikutnya, yakni coating, blocking, washing, pembuatan PBS, dan stopper. Selain itu, kegiatan produksi antigen dilanjutkan ke tahap sentrifugasi.
Pembimbing Kampus Pembimbing Lapangan,
Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc drh. Nur SjolichahNIP 19660921199103 2 001 NIP 19641026199303 2 001
AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL
Minggu ke : VI
Tanggal : 25-29 Juli 2011
Lama Pelaksanaan : 5 hari
URAIAN KEGIATAN :
Surabaya, 29 Juli 2011
xxv
Pada awal minggu karena ada kegiatan pegawai di Pusvetma, maka tidak dilakukan produksi sehingga kami mengisi kegiatan dengan studi literatur di perpustakaan Pusvetma. Kegiatan produksi kembali berlangsung pada akhir minggu dengan melanjutkan tahap sentrifugasi antigen, serta persiapan untuk produksi kembali.
Mengetahui,Pembimbing Kampus Pembimbing Lapangan,
Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc drh. Nur SjolichahNIP 19660921199103 2 001 NIP 19641026199303 2 001
AGENDA MINGGUAN KEGIATAN PKL
Minggu ke : VII
Tanggal : 1-5 Agustus 2011
Lama Pelaksanaan : 5 hari
URAIAN KEGIATAN :
Surabaya, 5 Agustus 2011
xxvi
Minggu ini adalah minggu terakhir kegiatan PKL, kegiatan yang dilakukan adalah melanjutkan sentrifugasi antigen, serta sterilisasi untuk persiapan produksi selanjutnya.
Mengetahui,Pembimbing Kampus Pembimbing Lapangan,
Dra. Dwi Listyorini, M.Si, D.Sc drh. Nur SjolichahNIP 19660921199103 2 001 NIP 19641026199303 2 001
Lampiran 10. Daftar Hadir Kegiatan PKL
xxvii
Lampiran 11. Surat Keterangan Pernyataan Telah Melakukan PKL
xxviii
Lampiran 12. Lembar Evaluasi Kegiatan PKL
xxix
Lampiran 13. Rekaman Pelaksanaan PKL
xxx
Lampiran 14. Surat Ucapan Terima Kasih
xxxi
Lampiran 15. Surat Ucapan Terima Kasih Dari Fakultas
xxxii
Lampiran 16. Surat Tugas Monitoring Dosen Pembimbing Kampus
xxxiii
Lampiran 17. Nilai Akhir PKL Mahasiswa
xxxiv
xxxv