Upload
others
View
6
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
7
72
Co nhi~u Iy do d€ giai thfch tQi sao
endosulfan va fenvalerate gay ra nguy cC1 caD
cho thac an. Tru'(k he't, Iu'Qng thu6c tru sau
du'Qc sll dl,lng thu'cmg caD hC1n khuye'n cao.
Tha hai, san phjm tQO ra thu'<'1ng du'Qc thu
hOQch tru'oc th<'1i hQn ca ch Iy du'Qc khuye'n
cao. Trong cUQC khao sat I~n nay, m§.u du'Qc
Ia'y khi nho dang du'Qc thu hOQch, nhu'ng du'
Iu'Qng endosulfan ra't caD (100% m§.u du'C1ng
tfnh, 6% trong s6 do co du' Iu'Qng caD hC1n
MRL). Tha ba, eac phu'C1ng thac canh tac
khong tu'C1ng thfch voi phu'C1ng phap quan Iy
dich hQi t8ng hqp (iPM). Them vao do,
khoang cach vung d~m la khong duo
SlI dl,lng mo hlnh PIRAMS, chung ta nh~n
tha'y la khi Iu'Qng sll dl,lng giam xu6ng mac
du'Qc khuye'n CaD (khoang mQt nlla), nguy cC1
cho thl,lc phjm giam xu6ng mac trung blnh.
Chi s6 PI RAMS cOng giam khi th<'1i gian cach
Iy du'Qc keo dai ra hay phu'C1ng thac canh tac
tr<'1 nen tu'C1ng thfch voi IPM. Tom IQi, eac
chie'n Iu'Qc quan Iy theo d~ nghi (Bang 14)
da giup giam nguy w. Tu'C1ng tI,i, nguy w gay
ra b<'1i methidathion va methamidophos trong
nu'oc co th~ du'Qc giam xu6ng b~ng each ap
dlJng cac chie'n Iu'qc quan Iy t6t (Bang 15).
Ighien en dien hinh Ii' Hoc MOn
8.1 BiOi thien v4 Hoc MOn Vung tr6ng rau Hoc Mon n~m 0 vung ngo;;ti
o thanh pho H6 Chi Minh, khoang 28 km v~
phia Tay B~c cua trung tam Tp. Trong th~p
nien vua qua Tp. H6 Chi Minh dii co qua
trlnh do thi hoa m;;tnh me, va do do vung
tr6ng rau trO nen ngay cang g~n han vai khu
dan clf. Vung tr6ng rau Hoc Mon 0 day cung
cap khoang 20 - 30% IlfQng rau qua tieu thl,l
t;;ti Tp. H6 Chi Minh.
8.2 MO t8 mng nghlln cun Khu vl,J'c nghien cuu dlfQC chon la mot ph~n
cua vung tr6ng rau Hoc Mon. Khu vl,J'c rong
17.4 ha bao quanh boi khu dan clf va cac
vung tr6ng rau (Hlnh 8-1). Du li~u v~ khi
tlfQng va da't cua vung nghien cuu nay dlfQC
trlnh bay trong bang 37 va 38.
8.2.1 TUOi bi sunu Vi~c tlfai chi thl,J'c Sl,J' dn thiet trong mua
mlfa con mua n~ng thl khong quan trong
I~m. Cac nong dan 0 day tlfai theo cach tlfai
Hinh 8-t Bin dil khu VIle Hoc MOn
rai, nhlfng ra't kho xac dinh dlfQC chinh xac
IlfQng tlfai b6 sung.
8.2.2 So dvnu hoa chit o vung Hoc Mon nong dan sa dl,lng 12 lo;;ti
thuoc tru sau (cypermethrin, fenobucarb,
methidathion, cartap, fenvalerate, methomyl,
permethrin, diazinon, rotenon, carbaryl,
endosulfan va fipronil), 3 lo;;ti thuoc tru na'm
(metalaxyl, benomyl, difenconazol) va 2 lo;;ti
thuoc tru co (glyphosate, paraquate) (Bang 39). 73
8
74
Bing 31. Oil •• ,u khi blflg InIng blnh i HoC IOn (19981
Thinl Nhlt.dt [oC) DO fm bflJlll dOl [%) Slrllll ninll thlllnl lUfIIl mUI [mm) T. M8I. Min.
1 27.4 33.1 24.2
2 27.7 33.6 24.4
3 28.5 33.9 25.4
4 29.1 34.5 26.5
5 28.7 34.4 25.5
6 27.5 31.2 25.1
7 27.7 32.2 24.8
8 27.9 32.8 25.5
9 27.5 33.3 25.2
10 26.7 31.5 24.8
11 27.4 32.9 24.5
12 27 34.7 20.1
Ngu6n : Trung tam Khi tLi<;1ng mi€n Nam
Bing 38. Dnh chit dit trong ving IIfnu rau Hoc IOn
ThOnld GIIlIIrI
71
71
72
75
79
80
80
80
74
86
77
76
cfu true Mt' Bat set cat co mun
Cacbon huu ca trung blnh b 2%
Ham IllQng set trung blnh b 27 %
Ham IllQng cat trung blnh 52 %
Ham IllQng thit trung blnh 21 %
Ty trQng kh6i (gcm-') 1.4
Bo a'm tllang dO'i 40 %
a E>a:t dLi<;1c phan IO<li dl,ja tren ban phan IO<li cua USDA (Klute vii Page, 1986);
bPhan tich biing cac phLi<1ng phap trong Dane(2002)
193 6
192 27
187 86
196 187
182 478
170 269
168 317
139 343
181 158
104 426
165 182
137 123
1.3 Nhe. dlO. vi. d'va danh gla nilro
Vung tr6ng rau Hoc Mon rat g§n vai khu dan
cll. Vung d~m giUa khu Wc canh tac va khu
dan cll rat nho. San pha'm tU vung nay chie'm
ph§n dang k€, khoang mQt ph§n ba thi
trlldng rau tieu thl,l t;;ti Tp. H6 Chi Minh. Do
do, thl/c hi~n danh gia rui ro (j khu vl/c nay
la rat dn thie't M bao dam chat IllQng thl/c
pha'm khi tOi tay nglldi tieu thl,l.
Ml,lc tieu cua vi~c danh gia rui ro (j day la
nang cao mac dQquan tam, xac dinh hQP
ph§n nao c6 rui ro cao nhat, so sanh rui ro
tllang d6i cua cac h6a chat khac nhau dllqc
sU' dl,lng tren khu vl/c va d~ xuat chie'n IllQC
quan 19.
Bang 39. Danb sacb cac thUDC tru slu cbinb su dl.lng uon vung ngbion cuu Heachit ThuOcnhem luqng thuilc aJ II/hal Thai gian cach Iv (ngavl (dll ngh!l % so dIJng
Cypermethrin Pyrethroid 0.3-1.5 7 61.B2
Fenobucarb Carbamate 0.6-1.5 7 50.61
Methidathion Uin huu ca 0.3-1 .5 7 30.91
Fenvalerate Pyrethroid 0.3-1.5 14 23.64
Endosulfan Clo huu ca 0.1-0.6 14 12.6
Bang 40. 011 doan pbln hD thUDC UU slu trOng tung bliP pban i'r mO binb wng u6ng rau (don VI: ppmJ
Ihi Oit Raucii
Endosulfan 4.S3E-06 1.9SE-02 1.42E-01
Cypermethrin 1.02E-09 1.4SE-02 9.S2 E-02
Fenobucarb S.27E-OS S.62E-02 6.34E-02
Fenvalerate 3.0SE-12 9.04E-03 3.97E-02
Meth idath ion 2.14E-12 4.9BE-03 9.92E-03
Vung tr6ng d i ngQt {j H6c Mon
HUlc Thovsinh
S.40E-06 S.70E-OS
6.74E-11 3.22E-OS
1.90E-04 7.S4E-OS
3.97E-OB 1.46E-06
2.38E-04 3.71 E-OS
Nh6m thljc hii\'n dlj an CARD cua
TnJang Dai hQc Nong Ulm
C,nling
2.4BE-04
1.64E-OS
2.0SE-03
4.17E-OS
8.30E-04
8
75
8
76
Bi. 41.10. _1l1li10 CIia IIIIU". evelHlene [a-elDlosuhll, j3-eldasuhn, elDlDsuhl suIfIbt) ilia lII,e III viI.utll raB DIi IIEUSAJ
I.Phin IDIinl nlJnl Glalrllnnl 'O·ICh %mjfl Tfllslr .,IPP.II binll (pplll Chlln dUlIg linll mjfl
Da't (3/2002 & 7/2003) 0-61 8 22.1 43 51
NLlde (3/2002 & 7/2003) 0-13.5 1.5 4.3 68 50
Rau cai (tU d6ng) (3/2002 & 7/2003) 0-62 13 14.1 34 38
Rau cai (tU eh(i) (10/2002) 0-100 18 16.8 35 40
* Them vao m§u nLlde m~t, 8 m§u nLlae ng~m dLl(ie Ia'y d€ phan tfch. Ta't ca eae m§u di!u eho k€t qua am tinh
18nl42. DU _I cUI flnlblcarb vi cnermllhrll*
lelcllil •• pbin DunlnlJnl •• (ppItJ
Fenobuearb 8a't 7.6-13.8
NLlde 6-16
Raucai 0-230
Cypermethrin 8a't 9.5-21
NLlde 9-26
Raucai 0-560
*) M§u dLlQe Ia'y vao nam 2001 va phan tfch b~ng GC
BA lie dlnb .te Ill. nil re U1 Ite _flD 11181 oh..-ID
T~t ca da li~u yeu du cho mo hlnh Fugacity
duqc dua vao bang tfnh Excel, vi~c tfnh toan
duqc thl/c hi~n cho tling h6a ch~t (Mackay,
2001). K~t qua duqc tl/ dong tfnh, cho th~y
n6ng do va ty I~ h6a cha't duqc sa dl,lng trong
tling hqp ph~n (Bang 40).
GiiVl %_1 Tfnlsfi"mjfl InIII bilh (pplll dUllllinh
10 100 5
10 100 5
31 30 30
14 100 5
16 100 5
43 37 30
E>~ thu duqe da li~u ph<1i nhi~m cho du luqng
endosulfan, cac m~u duqc I~y tli d6ng ruong
theo quy trlnh I~y m~u chu~n va dem phan
tfch ba.ng ELlSA (Bang 41) va ki~m chGng Ii).i
ba.ng sa.c ky khr (AOAC, 2000). Tam m~u
nuck ng~m va nuck m~H d@u cho k~t qua am
tfnh (khong duqc dua vao bang 41 ).
Bing 43. Dj 110" hoa hge eua thl6"e 1nl si .. si d,lDg tren .'ng 8 H6lchit CDern.lllrin Endoslllfln Fenalentl FanebuclI'II Mltbllllllllon
KLPT 416.3" 406.9' 419.9' 207.3 ' 302.3 '
DO tan 0.004' l' <0.01' 420' 200'
H 0.0253313 a 1.48 ' 1.40 X 10-7 , na 1.66 X 10-9 '
logKow 6.6' 4.76' 5.01 ' 2.79' 2.2'
tl/25 8 C SOb 75' 11 c lOT
tl/2V 1 c Sb 14 c 8 c 4.4 c
tl/2W 0.21 c 3Sb 21 c 21 c 18 '
BCFe 6.5 4.9 5.1 3.1 2.6
BCFf 191091.44 2740.99 4911.81 29.59 7.61
'Tomlin, 1997; bHornsby vii nnk., 1996; 'EXTOXNET
'BCF=0.607+0.893IogK... (Chiou vii nnk, 1997); 'BCF=0.048K"w (Mackay,1982)
Bing 44. Dj 110".Oe dnh eua 1II .. 6"e lit sll sll d,ng IItn .'ng I.IIlII ltelilh ClPlllllllhril' EndIaIflI' FImII ......
_IIDI' ............. blllbbJ.m .n .11 IIn Mal I'n Mal .n III •• .11
DQng v~t c6 vu LD50 dip tfnh 138 4150 70 77 451 na 20 50 25 80
LD50 qua da 2460 4920 360 2250 1000 5000 130 na 200 1546
LC50 ha ha'p 2.5 na 0.0126 0.0345 101 na 0.2 na 3.6 na
Chim LD50 c.fp tfnh 2000 10000 220 810 1600 9932 10 29.5 23.6 28
Bo sat LD50 c.fp tfnh na na na na na na na na na na
Ech nhai LC50 c.fp tfnh na na 2 12 na na na na na na
Ca LC50 (96h) 0.00069 0.0024 0.3 5085 0.0036 na 40 47.7 0.002 0.01
Giap xac EC50 (48h) 0.00015 na 7 7000 na na 0.27 na na na
Thuy sinh LC50 (96h) na na 0.56 na na na 178 na na na
no LC50 na 0.006 0.02 0.004 0.001
ADI (mg/kg) 0.05
77
8
78
Du IU(1ng eua fenobuearb va eypermethrin
trang cai dU(1e ghi nh~n tU euoe nghien eau
khae (Bui Caeh Tuyen va nnk., 2002; Phung
V6 Glm H6ng, 2002) va dU(1e si'! dl,mg d€
danh gia rui ro (Bang 42) .
IA.2 DU .. tu vi d,c dli'm dOc doh Du li~u h6a hoc va doe tinh eua thu6e tru
sau si'! dl,mg tren d6ng dU(1e trlnh bay 0 Bang
43 va 44.
8.5 Baob aia riii ro 1.5.1 ThUO. s6 nil ro Cia tri thuang 56 rui ro thu dU(1e tU 5 IO<;li
thu6e tru sau ehinh dU(1e trlnh bay trang
hlnh 8-2. Dl/a vao n6ng do dl/ doan, tat ca
Hlnh 8-2. NIUV e'lli d,oh eUllhulre nu sau dill vlO 11* 111 IIIUanl sir nil ro CUI sin phim
0.14 • Predicted values
0.12 • Measured values ::J' 0:: 0.10 :lE U 0.08 w e:. 0.06
a 0.04 J:
0.02
0.00
Chemical
eae thu6e tru sau tru fenobuearb dU(1e tlm thay
vai rui ra khong dang k€. Nguy ca lien quan den
fenobuearb e6 th€ giam b~ng each giam mac si'!
dl,mg. Cia tri HQ dl/a vao du li~u thl/e te th~m
. chi con thap han.
1.5.2 Baoh gia nli ro theo lac suit Nhu da trlnh bay trang ph~n 4, trong giai h<;ln
eua eae thong tin e6 s5n, nghien eau nay cO'
giing ap dl,mg huang danh gia rui ra theo xac
suat eho endosulfan (si'! dl,mg phan tich tU CC).
Du li~u eua du Il1(1ng endosulfan trang nl1ae, nho
va doe tinh dl1(1e ve l<;li theo phan b6 log-normal
(Hlnh 8-3).
C6 th€ quan sat thay tU hlnh 8 - 2 la n6ng do eua
dl1ll1(1ng endosulfan trong nuae e6 th€ anh hU0ng
khoang 14% loai, vai gia thiet r~ng du li~u doe
tinh baD quat het cae loai trong moi trl1bng.
Hlnh 8-3. Tnnh ba, dii II.u phlll nhlrm vi dOe linh 11180 duiml phln blr .*e suft toln linh
~ 100 100
~ 80 80 Go :::I CT 60 60 f ... Go 40 40 .~ ..
20 ., • 20 '3 E 0 0 :::I
0 0.0001 0.001 om 0.1 10 100 1000
Concentration (mg t:1)
• Distribution of environmental concent ration
• Distribution of species sensit ivity
Hinh 8-4. Banb gla nil ro slnh lballUang dM trend'ng
4.0 • Water terrestrial
3.5 • Water aquatic
3.0 • Vegetation
e • Soil 0 2.5 Air u
I '" 0:: 2.0 0:: 0 I.S u w
1.0
0.5 ~,
~ m 0.0
'measured data
8.5.3 Rol ro si oh thall luong dm (EcoRR] Chi so EcoRR dllQc tinh cho nam lo<).i thuoc tru sau trong nam hQp phan va dllQc trlnh bay trong hlnh 8 - 4.
Cypermethrin, end05ulfan va fenobucarb cho tha"y rui ro tha"p, trong khi fenvalerate va methidathion c6 rui ro khong dang ki:~. Endosulfan, h6a cha"t bi h<).n che su dl,lng cho rau
c6 la cho tha"y nguy co t6ng c(>ng cao.
E)oi vai phan lan h6a cha"t, nguy ca caD nha"t dllQc xac dinh trong da"t do cac h6a cha"t nay kha b~n trong da"t. Nguy ca cung caD trong rau cai nhiem endosulfan, cypermethrin va fenobucarb. E)(> b~n cua h6a cha"t trong hQp phan nha"t dinh la yeu to quan trQng nha"t trong danh gia chi so EcoRR. H6a cha"t c6 chi so EcoRR caD trong hQp phan nai chung c6 chu ky ban huy dai hon.
Xac sua"t phai nhiem tha"p nha"t trong hQp phan khong khL Do d6, phan lan thuoc tru sau c6 nguy ca khong dang k~ vai khong khL E)i~u nay c6 th~ dllQc giai thfch la nong dan Vi~t Nam khong su dl,lng may bay M phun thuoc ma phun b~ng tay. Cach phun nay gay ra nhi~u rui ro cho suc khoe nong dan nhllng it nguy ca cho moi trllang.
C6 th~ nh~n tha"y chi so EcoRR khong phai la gia tri rui ro tuy~t doi . Cac chi so nay chi la phep do tllong doi cua rui ro moi trllang, c6 th~ dllQc dung d~ so sanh rui ro giua cac h6a cha"t dung tren d6ng .
Bing 45. Rol ro theo PIRAMS dGl vGi nng tr6ng rau Hoc MGn
Hoachf. Rlil ro clia cac thAnh phtn khac nhau
NOngdAn NUI)cmt· lanlOa NuO'cng'm Thllcphfm C ypermeth ri n Trung blnh Trung blnh Trung blnh Trung blnh Trung blnh
Endosulfan Trung blnh Trung blnh Trung blnh Trung blnh Trung blnh
Fenobucarb Trung blnh Trung blnh Trung blnh Trung blnh Trung blnh
Fenvalerate Trung blnh Trung blnh Trung blnh Trung blnh Trung blnh
Meth idath ion Trung blnh Trung blnh Trung blnh Trung blnh Th a"p
8
79
8
80
1.6 Qui. I nil r. Mo hlnh PIRAMS du'QC sa dl,mg M xac djnh
rui ro cua tUng IQai h6a cha't ij tUng thanh
phan khac nhau. DO' Ii~u du'a vao thu du'Qc tU
cac cuoc di~u tra va tU phan tfch thl!C te'. Xe'p
h~ng rui ro theo PIRAMS du'qc trlnh bay trong
bang 45.
Sa dl,mg mo hlnh PIRAMS, c6 th~ nh~n tha'y la
khi giam Iu'qng sa dl,mg hi~n t~i, tang di~n tfch
vung d~m v.v thl xe'p h~ng rui ro cua nong
dan giam tU trung blnh xu6ng tha'p. ChI s6
PIRAMS cOng giam khi tang thCii gian cach Iy
hay tang sI! tu'dng hqp cua bi~n phap canh tac
vdi IPM. T6m I~i, cac chie'n lu'Qc quan Iy rui ro
da trlnh bay ij phan tren (Bang 14, 15, 16 va
17) hoan toan c6 th~ giup giam rui ro.
1.7 l'llu,. Ke't hqp vdi danh gia rui ro bang mo hlnh
EcoRR, danh gia xac sua't va thu'dng s6 rui ro,
mo hlnh PIRAMS chI ra nhO'ng bi~n phap canh
tac hi~n t~i gay ra rui ro dang k~ cho san
phii'm, sac khoe con ngu'Cii va moi tru'Cing.
Rui ro do endosulfan gay ra d~c bi~t khong
th~ cha'p nh~n. M~c du nghien cau tru'dc
day tU chq thanh ph6 cho tha'y khong c6
m~u nao c6 chaa du' Iu'Qng cao hdn MRL,
nghien cau gan day d~t ra m6i quan tam v~
san phii'm bj nhi~m. NhO'ng san phii'm nay
du'Qc Ia'y tU luc thu ho~ch c6 chaa nang do
cao endosulfan va cac san phii'm chuy~n h6a
cua n6.
Vi~c danh gia rui ro nay cho tha'y sI! quan
tr.k thu'Cing xuyen du' Iu'Qng endosulfan va
cac cac d~n xua't cua n6 tru'dc khi du'a san
phii'm ra thj tru'Cingla ra't dn thie't. D~ c6
mot sI! ki~m soat cha't Iu'Qng t6t, vi~c sang
IQc mot Iu'qng Idn m~u la di~u dn thie't.
Di~u nay c6 th~ d~t du'Qc bang cach sa dl,mg
cac test ELlSA va sau d6 ke't qua c6 th~ ki~m
chang I~i bang cac phu'dng phap s~c ky long
ho~c khf.
Mlt st phUIID phap nhanh phat hien dU luonD thute • • •
bio ve thue vit • • •
81
82
Con nguoi da bie't v€ hoa hoc mi~n dich tU I~u
nhung ti€m nang ang dvng r(mg rai cua n6 M danh gia mac do 0 nhi~m moi truong mai
duqc bie't de'n g~n d~y. Co sa cua phuong
phap hoa mi~n dich la dl,l'a vao cac khang thg
d~c hi~u. Ra't nhi€u khang th€ d~c hi~u da
dUQc san xua't M phvc vv vi~c danh gia mac
do 0 nhi~m moi truong va sac khoe con nguoi,
kigm tra duluQng thu6c bao v~ thl,l'c v~t va cac
san ph~m chuygn h6a cua n6, vi sinh v~t trong
thl,l'c ph~m, kim IO<;l.i n~ng, doc to' na'm m6c
v.v ...
C6 thg n6i phuong phap h6a mi~n dich la mot
phuong phap mai lien h~ khang khit vai
chuyen nganh hoa ph~n tich. E>6i vai thu6c
bao v~ thl,l'c v~t, phuong phap nay khong
nhung ph~n tich dUQc ra't nhi€u IO<;l.i thu6c ma
con ph~n tich dUQc nhung d~n xua't cua
chung.
Nhung d~c digm d6 da t<;l.O cho ph~n tich hoa
mi~n dich tra thanh cong cv quy gia dg danh
gia moi truong va ph~n tich thl,l'c ph~m v.v ...
M~c d~u v~y, mai de'n thang 6/1992 t<;l.i hOi
nghi aLas Vegas (My) the' giai mai th~t sl,l' chu
y de'n vi~c Slt dvng phuong phap nay M ph~n tich thl,l'c ph~m, h6a cha't nong nghi~p, san
ph~m h6a hoc va d€ c~p de'n mot s6va'n d€
nh~m khuye'n khich ap dvng rong rai phuong
phap h6a mi~n dich nhu sau:
• Thong tin d~y du giua nha san xua't cac bo
kit M ch~n doan va nguoi slt dVng.
• Phat trign tieu chu~n va quy dinh huang
d~n M cac ben lien quan thua nh~n ke't
qua (mot sO' hQP d6ng kinh te' v~n chua
cong nh~n ke't qua khi Slt dvng phuong
phap ph~n tich nhanh)
• Chuong trlnh dao t<;l.O cho nguoi di€u hanh
va slt dVng v.v ...
Thu6c bao v~ thl,l'c v~t la che' ph~m c6 ngu6n
g6c tU hoa cha't, thl,l'c v~t, dong v~t, vi sinh
v~t ... dung dg phong tru sinh v~t g~y h<;l.i cho
cay tr6ng, dLiQC sli' dvng ngay cang rong rai a nLidc ta (d~c bi~t la CClc IO<;li thu6c co ngu6n
g6c tU hoa ch~t). M~t tfch cljc cua vi~c dung
hoa ch~t ban v~ thljc v~t da dLiQC d€ c~p
nhi€u, nhLing m6i nguy h<;li, rui ro khi l<;lm
dvng thu6c lam anh hLiang d€n moi trLii'Jng
sinh thai, sGc khoe con ngLii'Ji thr cho de'n nay
v~n chLia co bi~n phap d€ phong huu hi~u.
EJ€ ki€m nghi~m, ph~n tfch dLi ILiQng thu6c
ban v~ thljc v~t va doc to' n~m m6c
(mycotoxin) co nhi€u phLiong phap nhLi:
phLiong phap truy€n th6ng (phLiong phap
chu~n) trong phong thi nghi~m, doi hoi d~u tLi
trang thie't bi d~t ti€n kho v~n hanh (dn can
bo ph~n tfch hoa hQc chuyen nghi~p, an t~m
yeu ngh€, g~n bo vdi phong thi nghi~m),
khong th€ tra li'Ji ke't qua ngay M kip xu~t
hang ho~c canh ban cho ngLii'Ji tieu dung.
Thljc te' chi mot sO' phong thi nghi~m a nLidc ta
mdi co th€ ph~n tfch dLiQC dLi ILiQng thu6c ban
v~ thljc v~t va doc to' n~m m6c.
PhLiong phap nhanh nhLi da noi a tren da dLiQc
nhanh chong phM tri€n nhiim b6 sung (bd
sung chtJ kMng thtJ IOiili tru) cho phLiong phap
chu~n , nhiim sang IQc m~u d€ ki€m tra ph~n
tich m~u kip thi'Ji vdi sO' ILiQng Idn.
Thu6c tru s~u dLiQc chia lam 4 nhom chinh:
Nh6m g6c phospho hU'u eel: dung kha ph6
bie'n, doc tinh can nhLing ph~n huy nhanh nhLi
diazinon, DVP, malathion, chlorpyrifos,
fenitrothion, phosalone ...
Nh6m g6c carbamate: dung ph6 bie'n, doc tfnh
ca~, ph~n huy nhanh nhLi methomyl, cartap,
BPMC, ...
Nh6m g6c do huu ca: doc tinh can va r~t b€n
trong moi trLii'Jng tV nhien, trong co th€ dong
thljc v~t va tfch luy I~u trong mo ma. EJ<;li di~n
cua nhom nay dLiQC d€ c~p nhi€u nhLi DDT,
dieldrin, endosulfan, ...
NhOm cue tang hqp: doc tfnh th~p dO'i vdi
dong v~t co vu. DLidi tac dong cua anh sang va
cac enzyme trong c~y, cac ch~t trong nhom
nay dLiQc chuy€n hoa thanh hQP ch~t trung
gian it doc hon. EJ<;li di~n cua chung g6m
cypermethrin, fenvalerate, delthamethrin ...
Ngoai phLiong phap chu~n va ELlSA ngLii'Ji ta
con dung phLiong phap RBPR (Rapid Biological
test for Pesticide Residue) dlja vao Slj Gc che'
enzyme acetylcholinesterase dLiQC gidi thi~u a AOAC nam 1980. Thljc ch~t bo kit GT cua
Thai Lan ma mot sO' don vi dang ap dvng hi~n
nay d€u dlja tren nguyen t~c Gc che' enzyme
noi tren. TrLidc d~y Ph~n vi~n Cong ngh~ sau
thu hO<;lch chung tOi da cai tie'n phLiong phap
RBPR cua EJai Loan thli' nghi~m co ke't qua
dang tin c~y khi ki€m tra dLi ILiQng thu6c tru
s~u photpho huu co va carbamate a Tp. HCM
va cac tinh phfa Nam. Tuy nhien phLiong phap
nay chi ki€m tra dLiQc nhom photpho va
carbamate. Do do dn phM tri€n cac bo kit thli'
d€ ki€m tra dLi ILiQng thu6c tru s~u nhom clo
huu co, nhom cuc va mycotoxin ma trLidc m~t
9
83
9
84
la aflatoxin va ochratoxin. Ti€c r~ng tai li~u
d~ c~p Mn phuang phap ki€m tra nhanh
nhom cuc con h.;m ch€, chung toi chua co
dip khao nghi~m nen trong t~p sach nay chi
gioi thi~u mQt 56 t<;lP chi trong ph~n tai Ii~u
tham khao.
Phuong phap phiin tich nhanh vel M th6ng dam bao cha't luqng d Vi~t Nam
M~c d~u dulu~n xa hQi cOng nhu cac nha
san xujt da chu y Mn thl,l'C ph~m an toan,
rau s<;lch ... nhung thl,l'c t€ cac VI,! ngQ dQc v~n
luon xay ra VI ta chua co h~ th6ng dam baD
chjt IUQng (QAS). Thl,l'c t€ Nha nuoc khong
th€ quan Iy chjt IUQng va an toan thl,l'c ph~m
n€u khong ap dl,mg mQt h~ th6ng ki€m soat.
hoan chinh, tU ngudi san xujt Mn ngudi tieu
dung. Thanh vien tham gia h~ th6ng nay
nhi~u khi co quy~n IQi nhjt thdi va suy nghi
khac nhau nhung VI IQi fch lau dai, hQ phai
th6ng nhjt voi nhau trong h~ th6ng d€ dam
baD chjt IUQng Mn tay ngudi tieu dung. NgQ
dQc thu6c baD v~ thl,l'c v~t da va se ti€p tl,lC
xay ra la di~u duqc baD truoc, nhung kho
khik phl,lc n€u ngudi nong dan khong co 56
theo doi 10<;li thu6c, li~u dung, thdi gian thu
hO<;lch duoi sl,l' giam sat cua can bQ baD v~
thl,l'c v~t dia phuang.
Thong thudng co ba rao cha:n trong h~ th6ng
dam baD chjt luqng:
• Rao cha:n tha nhjt: ngudi thu mua san
ph~m dung phuang phap nhanh k€t hqp
56 sach theo doi ngudi tr6ng M mua va
quy€t dinh gia theo chjt luqng.
• Rao cha:n tha 2: Sieu thi va ca 5<'1 che'
bi€n dung phuang phap nhanh ho~c
phuang phap chu~n
• Rao cha:n tha 3: Ki€m tra thanh ph~m
truoc khi xujt xu<'1ng
Phuang phap ki€m tra nhanh <'1 hi~n trudng,
ki€m tra chu~n <'1 phong thf nghi~m la cong
Cl,l hrtu hi~u M dam baD thl,l'c hi~n h~ th6ng
noi tren.
Gii1thieu Phu'<1ng phap xet nghi~m thu6c tru sau dlja
tr~n mi~n dich hQc du'<;1c gioi thi~u d~u ti~n
vao nhClng nam 60 cua the' ky 20. Nguy~n 19
cua chung dlja vao phan ung giCla khang
nguy~n va khang thg- mQt phan ung c6 tfnh
d~c hi~u cao ma trong d6 khang nguy~n la
chg't dn phan tfch. Tuy nhi~n vi~c ap dl,lng
cac phu'<1ng phap mi~n dich hQc nay moi chi
du'Qc ph6 bie'n rQng vao nhClng nam g~n day.
Hai nguy~n nhan thuc d~y vi~c ung dl,lng rQng
rai phu'<1ng phap tr~n la vi~c san xug't du'Qc
khang thg d<1n dong va vi~c phM trign du'Qc
phu'<1ng phap ELlSA (ELlSA la vie't tilt cua
Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). Trong
ELlSA, ngu'di ta sU' dl,lng mQt enzyme (gQi la
enzyme danh dg'u) giup dinh Iu'Qng phan ung
mi~n dich mQt cach d~ dang. Enzyme nay se
t90 ra phuc chg't c6 mau, b~n va khong dQc,
nhd d6 c6 thg thvc hi~n phep do b~ng quang
ke'. May m6c phu'<1ng ti~n dung cho ELlSA
khong qua diit ti~n. Ngoai ra phu'<1ng phap
nay th~m chi con c6 thg thljc hi~n ngay t9i
hi~n tru'dng nhd thao tac d<1n gian va trang bi
gQn nh~.
Trong qua trlnh thljc hi~n cac nghi~n cuu
dign hlnh danh gia rui ro t9i cac vung tr6ng
rau Van NQi (ng09i thanh Ha NQi) va H6c
Mon (ng09i thanh Tp. H6 Chi Minh), cGng
nhu' vung tr6ng nho Ninh Thu~n (mi~n Trung),
phu'<1ng phap ELlSA dii du'Qc ung dl,lng cho
vi~c phan tkh thu6c tru sau endosulfan trong
m~u dg't, nu'ac va rau. Nhd c6 thg phan tkh
hang tram m~u trong mQt khoang thdi gian
tu'<1ng d6i ngiin va khong qua t6n kern, ELlSA
dii giup cho vi~c sang IQc m~u du'Qc nhanh
ch6ng lam giam nh~ du'Qc chi phi phan tkh
do chi nhClng m~u c6 ke't qua du'<1ng tfnh moi
phai phan tkh 19i b~ng siic k9.
85
10
86
10.1 Ph_I pbip lUll e,nb nnb dOni chi pblln ftCh eie thole InI'sIIo
Co rat nhi~u phu'dng thGc ELl5A cho cac Gng
dl,mg khac nhau nnhllng dO'i voi nhGng chat co
phan tu nho nhu' thu6'c tru sau, ngu'i'Ji ta ap
dl,mg d9ng ELl5A C9nh tranh. Trong do co th~
chia lam 2 ki~u nhu' sau:
(1) C9nh tranh tn,tc tie'p: cO' dinh khang th~
(Hlnh 10-1 a) va
(2) C9nh tranh gian tie'p: cO' dinh d)ng hqp
khang nguyen (Hlnh 10-1 b).
Trong ki~u (1), khang th~ khang thuO'c tru sau
du'qc phu len nhGng gie'ng nhl,la nho. Mot
hapten mo phong thuO'c tru sau du'qc gan voi
mot enzyme (enzyme danh dau) t90 nen cong
hqp enzyme co kha nang lien ke't voi khang
1.10.1. Sl'd. _n It ElISI ceM nnh
Co chilt PhGc chilt c6
10- 1 a)
() Khang nguyen c6 danh ~ do'u <> <t? Cha't d.n phan tich
Khang th~ bj c6 d,nh
10-1 a) C<;Inh tranh tn,tc tie"p: c6 dinh khang th€
th~. Khi cho dich chie't m~u va cong hqp
enzyme vao trong cac gie'ng, thuO'c tru sau
trong dich chie't va cong hqp enzyme se cling
C9nh tranh M lien ke't voi khang th~. 5au khi
rua troi nhGng chat phan Gng con du', cd chat
tu'dng Gng voi enzyme se du'qc cho vao, du'oi sl,l
xuc tac cua enzyme cac phan Gng t90 mau hay
ph at hu}tnh quang se xuat hi~n trong gie'ng.
Ne'u thuO'c tru sau cang nhi~u thl cong hqp
enzyme do kern tfnh C9nh tranh hdn se bi
khang th~ giG 19i cang it, mau se hi~n len ye'u
va ngu'qc 19i. 50 sanh m~t do quang cua m~u
va cac gie'ng chu~n, ta se dinh Iu'qng du'qc mGc
do nhi~m thuO'c tru sau trong m~u.
Trong ki~u (2) cong hop giGa khang nguyen va
protein se du'Oc cO' dinh tren b~ mij.t ran. ThuO'c
~ Ca chilt Phac cho't c60 KhAng th~ 2 c6 dAnh mau • --:p" dau q 9, o ,M""","., <t? KhAng th~ 1
<j> Khang nguy~n b; c6 d;nh
10 - 1 b)
10-1 b) C<;Inh tranh gian tie"p: c6 dinh ct/ng hqp khang nguyen
tru sau va m(it hlqng khang th€ c6 dinh dLlQc
cho vao. Thu6c tru sau la m(it khang nguyen
tl/ do se c<;lnh tranh vdi khang nguyen c6
dinh d€ barn vao khang th€. LLlqng khang
nguyen tl/ do' (thu6c tru sau) cang nhi~u thi
ILlqng khang th€ bi khang nguyen c6 dinh gii1
l<;Ii cang ft. 5au khi nJa troi cac ch3't con dLl,
dung m(it khang th€ tha 2 co danh d3'u b~ng
enzyme d€ phat hien ILlqng khang th€ ban
d§.u bi gii1I<;1i. Tu d6 ta c6 th€ dinh ILlqng
dLlQc thu6c tru sau trong mau.
10.2 U'U Vi nhlfC dl •• ail cae lISt EUII Vu di@'m
50 vdi cac phLldng phap phan tfch thong thLl(jng
trong phong thf nghiem thi cac phLldng phap
dl/a tren mi€;n dich c6 r3't nhi~u liU di€m. Cac
phLldng phap nay nhanh, Cd d(ing, sa dl.mg ddn
gian, tLldng d6i re ti~n va co d(i nh<;ly cao.
Cac phLldng phap dl/a tren mi€;n dich khong
gidi h<;ln cho phan tfch m(it 10<;li ch~t Cl) th€ ma
co th€ phat tri€n cho r~t nhi~u 10<;li ch3't. Tuy
theo yeu du ma ngLl(ji ta phat tri€n phLldng
phap nay cho m(it ch~t chuyen biet hay 1
nh6m c;h~t. f)6i vdi cac mau nLldc, phLldng
phap nay d~c biet hi1u fch vi ddn gian va d(i
nh<;ly r~t cao.
T3't ca cac hoa ch~t dn cho thf nghiem
thLl(jng nhO gon, thu~n tien chuyen cha di xa.
Cac thf nghiem khi tie'n hanh cGng khong doi
hoi khong gian r(ing Idn. Tru phi dn doc b~ng
may photometer thi phLldng phap nay khong
c§.n dung cac may m6c khac do d6 c6 th€
thl/c hien t<;li hien trLl(jng cha khong dn phai
trong phong thf nghi~m.
M(it ngl1(ji mdi c6 th€ hoc thl/c hanh phl1dng
phap nay trong vong 1 ngay ho~c ft hdn, va
viec phan tfch 30 - 50 mau m(it ngay la hoan
toan c6 th€. Cong viec chu~n bi va lam s<;lch
mau thl1(jng ddn gian va doi khi khong b~t
bu(ic. Chi phf cho 1 mau thl1(jng th3'p va se re
ne'u phan tfch cung luc m(it 111qng mau Idn.
Bang 48. Chi phi diu tu bIn diu chI mOl phong Ibl nghlOm ElISA
sn ,en d"nl c" Sl Bla B'n [ISO)
1 May doc ELl5A 1 5.000 -10.000
2 Pipette 1 kenh 1 200
3 Pipette nhi~u kenh 1 500
4 M(it s6 dl.mg Cl) ddn gian khac (d§.u tip, chai 10, mang nhl/a ... ) 100
10
87
10
88
Nhuqc diim
Tuy co nhi~u u'u di€m nhLlng phLldng phap
phan tfch dl!a tren mi~n dich cling co nhClng
di€m hi,l.n che'. NgVdi su dl,lng dn hi€u ro
nhClng di~u nay d€ Il!a chQn phLldng phap phu
hQP nh3't v6i yeu du c6ng vi~c cua mlnh.
ThLldng cac hoa ch3't dung trong phLldng phap
nay dn bao quan Ii,l.nh, co mQt s6 kha nhi,l.y
cam v6i anh sang, do do vi~c bao quan dn
chu y M tranh lam m3't hOi,l.t tfnh.
£>Q chfnh xac cua cac phvdng phap dl,ta tren
mi~n dich kh6ng cao nen chI thfch hQP cho
cac phan tfch sang IQc ma kh6ng thfch hQP
cho phan tfch dinh ILlQng. MQt s6 trLldng hQP
phLldng phap test nay chI co th€ nh~n di~n
dLlQc mQt nhom g6m nhi~u ch3't co c3'u ti,l..o
g~n gi6ng nhau ma kh6ng th€ xac dinh dLlQc
tUng ch3't n6ng dQ CI,I th€.
1U Pllltb'lfl .... EUSlcIII "'cllt .. .
£>a s6 cac phLldng phap ELlSA d6i v6i thu6c
tru sau d~u la ELlSA ci,l.nh tranh trl!c tie'p trong
do khang th€ dLIQc c6 dinh tren b~ m~t
ch3't ri1n.
Cac thanh ph~n chfnh cho mQt bQ kit ELlSA
ci,l.nh tranh trl!c tie'p thLldng bao g6m:
Khang th€ d~c hi~u
CQng hQP enzyme
Cd ch3't ti,l.O mau
San xu3't ra khang th€ d~c hi~u va cQng hQP
enzyme la nhClng bLl6c quan trQng nh3't trong
vi~c phM tri€n bQ kit. £>€ dLla vao ang dl,lng
thl!C te' cac ye'u t6 anh hLlang d~u phai dLlQc
khao sat. Cac danh gia v~ tfnh d~c hi~u, dQ
nhi,l.y, dQ chfnh xac, tfnh b~n cua cac thu6c
thu, khoang xac dinh d6i v6i tUng IOi,l.i m~u d~u
phai tie'n hanh th~n trQng trLl6c khi dLla phLldng
phap ap dl,lng vao thl!C te'.
SillIIIft .... IIIf Khang th€ la nhClng protein dLlQc ti,l.o thanh d€
khang Ii,l..i nhClng ch3't Ii,l. xu3't hi~n trong Cd th€
(khang nguyen). Chung thuQc nhom
immunoglobulin va co trQng ILlQng phan tu dao
dQng trong khoang 150.000 de'n 95.000.
Khang th€ dLlc;lc mieu ta bai c3'u truc hlnh chCl
Y, ph~n du6i cua c3'u truc chCl Y dLlQc gQi la
ph~n Fc co tfnh d~ ke't tinh (Crystalizable
Fragment) va lien quan de'n sl,l' di~u chinh mi~n
dich. Ph~n 2 canh tay cua cha Y dLlQc gQi la
Fab (Antigent Binding Fragment) va dam nhi~m
vi~c gi1n ke't khang nguyen.
Khang th€ dung trong cac ky thu~t phan tfch
thLldng la mQt trong hai IOi,l.i chfnh do la
khang th€ da dong va ddn dong. Khang th€
da dong la khang th€ thu dLlQc tU huye't thanh
cua cac dQng v~t thf nghi~m (tha, cuu, de
ho~c ngl,l'a) sau khi gay mi~n dich. £>6i v6i
khang th€ ddn dong ngLldi ta thu dLIQc chung
tU te' bao san xu3't khang th€ M bao la lach)
l3'y dLIQc tU dQng v~t dll gay mi~n dich. Cac
Hlnb 10-2. Clu trUe cia .. il. IIIf Ih6m 11.
Chu6i
Fob .cF. V, la vung thay d6i cua chu6i nh~ con VH la cua
chu6i n;(\ng, Cl la vung h!ing dinh chu6i nh~ con Cl'"
CH" CHI la cua chu6i n~ ng . ScFv Khang th€ tai t6 hQP,
chi chua vung thay d6i.
te baD la lach nay dLlc;1c ket hc;1p vai te baD
myeloma de t<;lO thanh dang te baD lai c6
kha nang sinh ra khang the. Nhung te bilO
nay dLlc;1c nuoi eay, Ion len, phan chia va san
sinh ra nguan khang the on dinh va lien tl,lC
trong moi trLlang nuoi eay te bao.
Trong vang mLlai nam tra l<;Ii day nha nhung
bLlac tien bo vLlc;1t b~c cua cong nghe gen,
ngLlai ta da t<;lO ra khang the a the he thu 3
do la khang the tai to hc;1P. Ve co ban, khang
the tai to hc;1P chi la dO<;ln protein chua vung
lien ket vai khang nguyen. 86 la ph~n Fab
hay Fv va khong c6 ph~n Fc cua mOl khang
the nguyen v~n . Cong nghe khang the tai to
hc;1P cho phep ngLlai ta chon it/a thay doi tfnh
chat khang the va dung vi sinh v~t nhLl vi
trung, nam men, te baD con trung v.v .. . de
san xuat ra chung.
Thuoc tru sau la nhung phan tLt nho khong
co kha nang kich thich dong v~t sinh ra
khang the. Do d6 dn phai gan chung ho~c
t<;lO mot hapten mo phong eau truc cua
chung de gan dang boa tri len mot protein
mang t<;lO thanh mot cong hc;1P. Cong hc;1p
nay khi tie m vao dong v~t mai co kha nang
gay mien dich va t<;lO ra khang the. Chon it/a
de tong hc;1P dLlc;1c mot hapten phu hc;1P la
bLlac quyet dinh de t<;lO ra khang the
mong muon.
Ai it/c tLlong doi va tinh d~c hieu cua giua
khang the vai khang nguyen la yeu to quan
trong nhat trong viec it/a chon mot khang the
nhat dinh dung cho ky thu~t ELlSA. Tinh d~c
hieu the hien a kha nang nh~n biet dLlc;1c
mot m~u co hay khong c6 khang nguyen va
kha nang phan biet mot khang nguyen nhat
dinh hay mot nhom khang nguyen. Kha nang
tLlong tac vai 1 nh6m khang nguyen cua
khang the goi la phan ung cheo. Phan ung
cheo xay ra khi khang the lien ket dLlc;1c vai
mot hay nhieu diem quyet dinh khang
nguyen tren cac khang nguyen khac nhau.
,,0 COni bp 811ZJ1118
Cong hc;1P enzyme dLlc;1C t<;lO bai mot hapten
mo phong thuoc tru sau dn phan tich gan
dang h6a tri len mot enzyme gOi la enzyme
10
89
10
90
"danh Mu". Hapten dung cho c(jng hqp
khong bilt bu(jc nhLing thudng la khac v{Ji
hapten dung cho gay mi~n dichd€ t~o ra b(j
kit co d(j nh~y cao.
Enzyme dung danh d~u dn phai b~n, co
tfnh d~c hi~u va ho~t tfnh cao d6ng thdi phai
re ti~n va co kha nang xuc tac cac phan Gng
t~o ra phGc ch~t co th~ dinh luqng d~ dang.
Vi~c t~o cac c(jng hqp vdi cac enzyme nay
dn phai d~ dang va tUdng d6i b~n vung.
Hi~n nay co 4 enzyme duqc dung ph6 bie'n
cho ml,lc dfch nay la: horseradish peroxidase,
alkaline phosphatase, urease va beta
galactosidase. D~ nh~n bie't slj co m~t cua
cac enzyme nay, dung cac cd ch~t tUdng Gng
d~ t~o cac san ph~m d~ nh~n bie't. San
ph~m cu6i cung cua phan Gng thudng la :
hqp ch~t co mau (do r~t d~ dang b~ng quang
ke), hqp ch~t phat huynh quang (do b~ng
huynh quang ke', diit ti~n nhLing d(j nh~y
cao) va hqp ch~t quang hoa (luminometric).
Dil sat de Ifllf lob hlinl-Tblit ...
... -Hang lo~t ye'u t6 ch~t n~n co th~ anh huong
de'n ke't qua ELlSA vf dl,l nhu: cac lo~i dung
moi, n6ng d(j dung moi, d(j pH, nhi~t d(j,
n6ng d(j cac lo~i ion va d~c bi~t la ch~t n~n
cua m~u. Cac ch~t duqc chie't trong m~u co
th~ la nhung ch~t Gc che' enzyme, nhung
ch~t bie'n d6i du truc khang th~ ho~c cung
co th~ anh huong ca hai. Nhu v~y d€ ap
dl,lng m(jt b(j kit vao vi~c phan tfch m~u r~t
nhi~u thf nghi~m phai duqc tie'n hanh d~
khao sat cac ye'u t6 anh huong. Thong
thudng ELlSA chiu anh huong cua ch~t n~n ft
hdn cac phudng phap siic ky nen khong dn
phai lam s~ch m~u tru{Jc khi do b~ng ELlSA.
M~u nu{Jc noi chung co th~ phan tfch trljc
tie'p khong dn co d~c. Cac m~u thlJ'C ph~m
ho~c m~u Mt co th~ trfch b~ng dung moi tan
trong nu{Jc, dem pha loang r6i phan tfch
b~ng ELlSA. Tuy nhien co m(jt s6 m~u chGa
nhung ch~t co anh huong r~t l{Jn de'n ke't
qua thl dn co nhung bu{Jc lam s~ch tru{Jc
khi phan tfch. Vf dl,l nhu m~u tra co chGa
nhi~u tanin la ch~t Gc che' enzyme do do
dung dich m~u dn qua c(jt h~p phl,l d~ lo~i
b{Jt tanin m{Ji co th~ dung phan tfch b~ng
ELISA duqc.
D~ xac dinh khoang dinh luqng cua b(j kit
ELlSA, cac thf nghi~m do d(j thu h6i dn
phai duqc tie'n hanh. Tren cac m~u, ch~t
dn phan tfch se duqc gay nhi~m nhan t~o 0
n6ng d(j cho bie't. Do d(j thu h6i cua cac
m~u nay sau khi tie'n hanh ELlSA se cho ra
khoang dinh luqng cua b(j kit. Ngoai ra b(j
kit phai duqc danh gia b~ng cach so sanh
v{Ji m(jt phudng phap chu~n da duqc cong
nh~n. vr dl,l tie'n hanh song song ELlSA va
siic ky tren m(jt m~u d~ so sanh mGc d(j
tudng quan cua tac ke't qua thu duqc.
Sau khi mQi thf nghi~m dn thie't da duqc
tilfn hanh, bQ kit ELlSA se dL1<;1c danh gia d€
thilft klf cho viec phan tfch dinh tfnh hay
dinh 1L1<;1ng va mQt quy trlnh chu§'n se dL1(1C
dL1a ra d€ c6 th€ ang dl,mg bQ kit ELlSA tren
thl,l'c tlf.
10A V. d" v.thve 111111 DIIII dell thule Ire lIu llill ELlII
Trong dl,l' an, thu6c tru sau endosulfan trong cac
mau di~u tra da dL1<;1c dinh 1L1<;1ng bang ELlSA.
Quy trlnh thl,l'c hanh dL1di day la se minh hQa
cho phL1ang phap ELlSA c<:1nh tranh tn,lC tilfp
phan tfch thu6c tru sau.
Cac thanh phjn bi) kit ELlSA cho
endosulfan g6m
1. Gilfng mini phu khang th€ khang
endosulfan
2. CQng h<;1p enzyme horseradish
peroxidase cho endosulfan d~m d~c 1 0 I~n
3. E>em pha cQng h<;1p
4. Chu§'n endosulfan 10ppm pha trong
methanol
5. Ca chilt A: TMB (3,3',5,5'
tetramethylbenzidine) n5ng dQ 1 % trong
DMF (dimethylformamide)
6. Ca chilt B (hydroperoxideldem acetate
pH 5.0)
7. Dich ham: 10% H2SO.
8. Dich nla d~m d~c 1 00 I~n: Tween20 5%
Chu~n bi dl,mg cl} va hoa ch~t
D"ng Cl!
Can E>€ can mau
Photometer May dQC ELlSA
Pipette
May lac
May xay
Pipette 1 kenh: 50-200 I
Pipette 8 ho~c 12 kenh: 50-200 I
Pipette tip
Dung d€ chilft mau
Dung d€ xay mau
Dl,!ng Cl,! thuy tinh g5m blnh Erlen, 6ng nghiem,
6ng dong, ph~u IQc, c6c
Blnh tia nhl,l'a
May lac vortex
E>5ng h5 bilm giay
Khan giily
But danh dilu
HOti chit
Methanol (AR grade): d€ chilft mau
NL1dc cilt
Chu~n bi cac thu6c thu
Pha ct/ng hqp: Pha loang 1/10 cQng h<;1p enzyme
trong dem pha cQng h<;1p. Lac d~u hein h<;1p mQt
cach nhl;) nhang, tranh t<:10 bQt.
Sau khi pha, cQng h<;1p enzyme bao quan dL1<;1c 6
thang t<:1i 4°C.
Pha dich rua: Pha loang Tween 20 trong nL1dc
cii't d€ d~t n5ng dQ 0.05%.
10
91