Detección del Fenotipo RhDEL en individuos de La Región de La Araucanía

JOSELYN ROXANA MORAGA LANDEROSProfesor Guía T.M. Dr. José Caamaño L.

Temuco, Septiembre de 2014.

Facultad de Ciencias de la SaludEscuela de Tecnología Médica

IntroducciónSistema Rh

Segundo sistema en importancia clínica.

Se han descrito 45 antígenos, los más importantes son: D, C, c, E. e.

El antígeno D es extraordinariamente inmunogénico.

Importante en la práctica transfusional y en la enfermedad hemolítica del recién nacido.

Presente en el 85% de los caucásicos.

Karl Landsteiner(1868-1943)

Macaco Rhesus

RH D RH CESMP1

NH2

COOH

CitoplasmaNH2

COOH

Citoplasma

Membrana

Genes RH

Membrana

Antígeno D

Blood Transfusion 2007; 5: 50-57

Variaciones del RhD

GR con cantidades normales de antígeno D

GR con antígeno D extremadamente débil

GR con antígeno D débil

GR con antígeno D parcial

Fenotipo RhDELReportado por primera vez en 1980.

Expresión de antígeno D extremadamente bajo.

No es detectado por métodos serológicos de rutina.

Es detectado por Técnica de Adsorción-Elución.

Se ha observado una relación entre Fenotipo RhDEL y antígeno C del Fenotipo Rh.

Fenotipo RhDEL: posibles causas

Deleción parcial de exón 9

Mutaciones missense RHD 885T ; RHD IVS3+1A alleles

RHD 1227A or RHD 1227G>A (K409K)

2 variantes en el intron 7 (6984C<G y 9901(A)18>19)

Variante intron 9 (3425(T)15>14)

Frecuencia del Fenotipo RhDEL

¿CHILE?

Hipótesis

En la Región de La Araucanía existen individuos clasificados serológicamente como Rh negativo que presentan el Fenotipo RhDEL.

Objetivos

Objetivo General:

Determinar la frecuencia de la población de la Región de La Araucanía clasificada serológicamente como Rh negativo que presenta el Fenotipo RhDEL mediante la técnica de Adsorción-Elusión con Formamida.

Objetivos

Objetivos Específicos:

Estandarizar la técnica de Adsorción-Elusión con formamida para la detección de Fenotipo RhDEL.

Detectar el Fenotipo RhDEL con la técnica de adsorción – Elusión con Formamida en individuos de La Región de La Araucanía.

125 individuos

Clasificación Rh(D)Detección del antígeno D débil y o D parcial

Tipificación de Fenotipo Rh

Material y Método

Técnica de Adsorción-Elución

Técnica de Adsorción-Elución

Adsorción

Elución

Antisuero con anticuerpos Anti-D IgG 1 hora a 37°C

Formamida10 min T° ambiente

Lavado

Resultados

Antígenos Fenotipo Rh n Frecuencia %D C c E e0 0 + 0 + dce 113 83,70 + + 0 + dCce 5 3,70 0 + + + dcEe 17 12,60 + 0 0 + dCe 0 0

Total 135

El fenotipo más frecuentemente observado fue el dce con un 83,7%.

Resultados

Patrón de aglutinación obtenido en muestras analizadas mediante técnica de Adsorción-Elución.

ResultadosFenotipo RhDEL n Frecuencia (%)

Positiva 118 94,4Negativa 7 5,6

TOTAL 125 100

94,4%

5,6%

Frecuencia del Fenotipo RhDEL

RhDEL RhD -

Discusión La frecuencia de la variante RhDEL en individuos de la región de La Araucanía fue de 94,4%, la que

resulta ser bastante alta en comparación con los estudios realizados en otras poblaciones. Se habría esperado una mayor concordancia de frecuencia de esta variante con la población caucásica, pero sin embargo, resultó un mayor parecido a las frecuencias observadas en la población China Han.

A pesar de los resultados obtenidos similares con la población asiática, no se observó una relación entre la presencia del antígeno C y el fenotipo RhDEL, lo cual se repite en muestras analizadas con fenotipo RhDEL en estas poblaciones.

La detección inunohematológica de la variante DEL, mediante la técnica de Adsorción-Elución, resultó ser una técnica engorrosa de implementar, pero sí tiene la capacidad de diferenciar el Fenotipo RhDEL del Fenotipo Rh negativo.

Se sugiere utilizar la técnica de adsorción elución como una aproximación certera antes de someter las muestras a un análisis molecular, ya que a pesar de la información valiosa que podrían otorgar las técnicas de análisis molecular, sus costos de implementación son muy elevados comparados con el screaning de la técnica inmunohematológica.

Debido al gran porcentaje de variante DEL detectado en la Región de La Araucanía sería de gran utilidad establecer una técnica de detección de este fenotipo, ya que de esta forma se reduciría la demanda de sangre D negativa. Y la transición de individuos con la variante DEL que actualmente están clasificados como D negativo para el grupo de receptores de transfusiones que puede recibir con seguridad unidades de hematíes D positiva sería un paso significativo.

Conclusiones La frecuencia de la variante RhDEL en individuos de la región de

La Araucanía fue 94,8%. En contraste con la población asiática, la determinación del

antígeno C no es de utilidad en nuestra población ya que este fenotipo Rh no es frecuente.

Existe una importante proporción de individuos Rh(D) positivos que son clasificados como negativo por los test convencionales.

Es necesario contar con una adecuada clasificación de los donantes de sangre, que permita detectar a portadores del fenotipo RhDEL para evitar riesgos en la transfusión.

Se requiere ampliar el número de individuos para confirmar estos resultados.

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the Rhesus box. Blood: 2000; 95 (12).• Willy A. Flegel. Transfusion and Apheresis Science 44 (2011) 81–91• LIU H.-C., ENG H.-L., YANG Y.-F., WANG Y.-H., LIN K.-T., WU H.-L., LIN T.-

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