Mtodo de Estudio para el Diagnostico BacteriolgicoProf. Edgar A. Mejas Tirado

La muestras es el comienzo... Toda la informacin diagnostica del laboratorio depende de conocer que muestras clnicas se escogen y con que cuidado son tomadas y transportadas Cynthia A. Needham

Paciente Enfermo

Clnico interpreta e instaura terapiaIdenticacin del agente, informe nal, envo al clnico

Medico establece diagnostico presuntivo

El ciclo clnico

Toma de muestra, recipiente bien rotulado

Evaluacin de cultivos y pruebas especiales

Traslado e ingreso al laboratorio

Informe presuntivo y cultivo en medios especiales

Examen directo de la muestra al microscopio

Criterios para recurrir al laboratorio1. Enfermedad aguda. 2. Proceso febril. 3. Muerte sbita. 4. Cuadros gastrointestinales o diarreicos. 5. Reacciones inflamatorias con formacin de abscesos y/o exudados. 6. Cualquier otra que el veterinario requiera de acuerdo a su experiencia clnica.

ClnicoObtener la muestra adecuada de acuerdo al caso evaluado

LaboratorioProporcionar al clnico sobre la presencia o ausencia de microorganismos que pueden estar involucrados en el cuadro patogeno

Que se espera del clnico con los resultados? Establecer un diagnstico Indicar la prognosis y posibles complicaciones de la enfermedad Identificar el origen de la infeccin y riesgo de transmisin a humanos u otros animales Identificar producto especfico necesario para inmunizacin que ayude a prevenir la infeccin en otros animales Formular programas especficos de tratamientos

Los ResultadosVan a depender de: Calidad de la muestra Tiempo y cuidado durante la recoleccin Habilidad de la tcnica y experiencia del personal de laboratorio

Recordar Ninguna prueba permitir la identicacin y caracterizacin de todos los patgenos potenciales La informacin clnica es importante

Consideraciones para toma de muestras

Anlisis RequeridoMuestra o espcimen

Tincin

Antibiograma

Cultivo Etctera

Serologa

Muestra o Espcimen Elemento ms importante Su seleccin depende de: Anamnesis Evaluacin clnica Diagnostico Presuntivo

Condiciones de las MuestrasDebe ser identificada (acompaada) con una Historia clnica. La muestra debe ser Representativa del proceso infeccioso. Debe ser Oportuna. Suficiente. Debe evitarse en lo posible su contaminacin por la flora normal. Recolectar las muestras en condiciones de Asepsia y Esterilidad. Transportada y procesada prontamente.

Materiales para RecoleccinASPIRACION DE MUESTRAS LQUIDAS.HISOPADOS. BIOPSIAS DE TEJIDO. ANIMALES ENTEROS U RGANOS.

Materiales Usados

Forma Apropiada

Manejo del animalUso de medidas de contencin: Aguaitacaina Tranquilizante Anestesia local o general Limpieza previa de detritus dezona

la

Pelos,

tierra, costras, etc.

tejido

necrotico,

Evitar riesgos sanitariosDescarte loe materiales perforantes y/o cortantes (agujas, laminas, bistures, tubos quebrados o conteniendo uidos): En cajas especiales o de paredes rgidas, bien identicadas.

Evitar riesgos sanitariosMateriales contaminados y/o potencialmente infectantes (jeringas, gorros, algodones, gasa): En bolsas adecuadamente identicadas

Transporte de la MuestraHisopados Para Cultivo de Bacterias Aerbicas y Facultativas: Medios de transporte: Cary y Blair, Stuart, Amies, o Culturette Swab . No requiere refrigeracin. Hisopados Para Cultivos de Bacterias Anaerbicas: Mantener condiciones anaerbicas, pH, y temperatura ( incluyen muchas bacterias entricas): Medio de Cary y Blair, sistemas especiales para anaerbios como tubos de Port-A-Cult, Tubos de Scott, Sistemas BD de Vacutainer. No deben ser refrigerados. Aspirados: Transportados en jeringa, tubos estriles o medios de cultivo especiales. Leche, exudados bronquiales, nasofaringeos, orina, no deben refrigerarse (relativo). Las Muestras De Tejido, en frascos de vidrio estril o medios de transporte para anaerobios.

Embalaje de la Muestra Establecer un adecuado sistema de envasado y proteccin de la muestra El recipiente debe ser identicado de forma clara y legible Colocarlo en bolsa hermtica y sellada para evitar derrame

Embalaje de la Muestra Si el traslado es lejos, se recomienda colocar en un envase mas resistente Si se va a enviar mas de una muestra, se debe proteger cada una Muestras variadas (bacteriologa, serologa, histopatologa) deben ser envueltas individualmente, bien selladas

Embalaje de la Muestra Si es necesario, se colocan en cavas, bien sujetas para evitar agua (hielo) movimientos por el bruscos y protegidos del generada sistema de refrigeracin

Requerimiento de Historia Nombre del propietario, direccin y telfono Nombre del medico veterinario, direccin, telfono Identicacin del animal: Nombre, edad, especie, raza, sexo Tratamiento, si viene al caso Diagnostico presuntivo o sospecha clnica Tipo de anlisis requerido:Tinciones de muestras, biopsias de tejidos, aislamiento e identificacin en cultivos, deteccin de antgeno, presencia de toxina microbiana, deteccin de genes especficos del patgeno, etc.

Tipos de Muestras

Aspirado o PuncinVejiga (orina). Lquidos: Pleural Sinovial Pericardico Cefalorraquideo Peritonial Sangre Lesiones cerradas (abscesos encapsulados)

Consideraciones para una PuncinRasurar el sitio. Lavar con agua y jabn. Desinfectar con solucin de iodo jabonosa por 1 min. Limpiar con alcohol al 70 %. Permitir el secado espontneo. Utilizar jeringa y aguja estril

Secreciones Respiratorias Hisopados intranasales Lavados traqueales Lavado endotraqueal Lavado Broncoalveolar Broncoscopa Aspiracin pulmonar por aguja fina

Hisopados Usar hisopos de rayn o alginato de Ca, no usar algodn Evitar contaminar con ora normal. Limpiar rea a muestrar. Muestrar la zona afectada. Colocar el hisopo en medio de transporte

Hisopados Canal auditivo externo Piel, para algunos casos, en otros no Abscesos abiertos o supuraciones Secreciones vaginales o uterinas Heces (algunos casos)

Biopsias Se recomienda cuando es difcil obtener liquido. Debe manejarse con asepsia quirrgica. Se evalan adicionalmente las alteraciones en lo tejidos lo cual puede ayudar en diagnostico.

Tejidos Condiciones: Enviar muestras inmediatamente En necropsias: Enviar hasta 35 cm3 de seccin de rgano

o tejido Separar cada muestra en recipientes estriles o bolsa

plsticas Recolectar los rganos con lesiones patolgicas Conservacin: refrigeracin Biopsias: Se manejan como proceso quirurgicos

LABORATORIO

Medico Veterinario

Realizar pruebas bacteriolgicassimples

Interpretar los resultados Los procedimientos complejos sedejan al bacterilogo clnico

Comunicacion Clnico-Laboratorio

Considerar el numero de agentes quecausan enfermedades

Tecnicas de laboratorio varan de

acuerdo al sndrome clnico y el tipo de agente

La informacin clnica es importante

Comunicacion Clnico-Laboratorio

Clinico: Establece un diagnostico

presuntivo (agente que se sospecha) sin esperar resultados pertinentes

Solicitar las pruebas que considere Casos extremos: Informespreliminares

Criterios para NO Recibir una Muestra No hay historia clnica y descripcin de lesiones observadas. Transportadas inadecuado. Conservadas en formol neutro al 10 %. Colocadas en envases inadecuados, no estriles o contaminados, muestras derramadas, varios rganos junto a secciones de intestino, envases mal sellados o rotos. Insucientes. Inapropiada. Mal estado de conservacin. Sembrada en medios lquidos para aislamiento primario y se reciben con sobrecrecimiento bacteriano.

Pruebas de LaboratorioEspcimenDeteccin del microorganismo

Ac

C e n t r o s

e s p e c i a l i z a d o s

Deteccin del genoma

Aislamiento o deteccin de sus productos Componentes estructurales o extracelulares

Hibridacin Amplicacin

T o d o s

Serologa

Inmunologa

Pruebas de LaboratorioMuestra o espcimen

Bacteriologa convencional

Bacteriologia no convencional Identicacin: Pruebas bioqumicas, serologicas, etc.

Cultivo medios crecimiento

Molecular

Inmunologica

AislamientoPruebas de susceptibilidad a agentes antimicrobianos

Genero y especie, tratamiento

Flujograma de Laboratorio

Esquema de Aislamiento e Identicacin1.- Recoleccin de la muestraMuestra de:______________________ Tcnica de recoleccin: Hisopado Aspirado Biopsia Necropsia Fecha:__________________________ Datos Clnicos____________________ Transporte al laboratorio:___________

Esquema de Aislamiento e Identicacin2.Examen macroscpico y microscpico de la muestra

Caractersticas Macroscpicas: Caractersticas MicroscpicasColoracin de GramGram +:____Morfologa: cocos bacilos cocobacilos pleomrficos espirilos Agrupacin: sencillo parejas cadenas racimos otros

Gram -:___Morfologa: cocos bacilos cocobacilos pleomrficos espirilos Agrupacin: sencillo parejas cadenas racimos otros

Esquema de Aislamiento e Identicacin3.- Aislamiento Primario

Agar Sangre BovinaTemperatura: 25C 37C 42C

Atmsfera: Aerobiosis Microaeroflia Anaerobiosis

Crecimiento: Caract. Colonias: Hemolisis: Pigmentos: Olor:

Agar Manitol Sal37C 24-48 h Crecimiento: Caract. colonias: Utilizacin de manitol Pigmentos: Otros

Agar MacConkey

37C 24-48 h

Crecimiento: Caract. colonias: Utilizacin de lactosa: Pigmentos: Otros:

Sistema API

Causas de un Cultivo Negativo No haba infeccin. Muestra no representativa, insuciente e inoportuna. Agente causal no es cultivable por medios ordinarios de que dispone el laboratorio. Los agentes microbianos no eran viables. Presencia de sustancias antimicrobianas en la muestra. Retraso excesivo en la siembra de la muestra. Mala seleccin de los medios de cultivo por falta de informacin. Condiciones de incubacin inadecuadas. Error humano.

GRACIAS