Upload
phungque
View
216
Download
1
Embed Size (px)
Citation preview
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
PENGARUH EKSTRAK DAUN KATUK (Sauropus androgynus) SEBAGAI
HEPATOPROTEKTOR TERHADAP KADAR SGPT TIKUS PUTIH
(Rattus norvegicus) YANG DIPAPAR PARASETAMOL
SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan
Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran
LANNY MARGARETHA BARUTU
G0008120
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
Surakarta
2011
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
ABSTRAK
Lanny Margaretha Barutu, G0008120, 2011. Pengaruh Ekstrak Daun Katuk (Sauropus androgynus) sebagai Hepatoprotektor terhadap Kadar SGPT Tikus Putih (Rattus norvegicus) yang dipapar Parasetamol. Fakultas Kedokteran Universitas sebelas Maret, Surakarta.
Latar Belakang: Penelitian tentang herbal mulai dikembangkan untuk pengobatan, salah satunya adalah untuk perlindungan hepar yang merupakan organ yang rentan mengalami kerusakan. Tanaman herbal daun katuk memiliki kandungan antioksidan yang tinggi dan dapat digunakan sebagai pelindung hepar.
Tujuan Penelitian: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) sebagai hepatoprotektor terhadap penurunan SGPT tikus putih yang dipapar parasetamol.
Metode Penelitian: Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorik dengan the posttest-only group design. Dua puluh delapan tikus jantan galur Wistar dengan umur ± 2 bulan dibagi menjadi 4 kelompok. Kelompok pertama sebagai kelompok kontrol, kelompok P1 diberi paparan parasetamol, sedangkan kelompok P2 dan P3 diberi paparan parasetamol serta ekstrak daun katuk dengan dosis 12,15 mg/150 gr BB dan 24,30 mg/150 gr BB. Perlakuan diberikan selama 13 hari berturut-turut. Pada hari ke-14, darah tikus diambil dan diukur kadar SGPT dengan metode International Federation Clinical Chemistry (IFCC) . Pengamatan dilakukan dengan membandingkan hasil kadar SGPT pada tiap kelompok. Hasil penelitian dianalisis dengan uji ANOVA yang dilanjutkan dengan Post Hoc Test dengan bantuan program SPSS for Windows versi 19.
Hasil Penelitian: Dengan uji ANOVA terdapat perbedaan kadar SGPT yang signifikan dengan nilai p = 0,034 (p < 0,05) pada keempat kelompok sampel, namun berdasar hasil uji Post Hoc Test Dunnett T3 tidak ada beda signifikan antarkelompok perlakuan.
Simpulan Penelitian: Pemberian ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) dapat mencegah peningkatan kadar SGPT tikus putih (Rattus norvegicus) namun tidak signifikan secara statistik. Tidak dapat disimpulkan terdapat perbedaan ekstrak daun katuk antara dosis 12,15 mg/150 gr BB dengan dosis 24,30 mg/150 gr BB.
Kata Kunci: Daun Katuk (Sauropus androgynus), SGPT, Tikus Putih (Rattus
norvegicus)
iv
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
DAFTAR ISI
PRAKATA ........................................................................................................................ vi
DAFTAR ISI ..................................................................................................................... vii
DAFTAR TABEL ............................................................................................................. ix
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................................ x
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................................... xi
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................................. 1
A. Latar Belakang Masalah ................................................................................. 1
B. Perumusan Masalah ........................................................................................ 3
C. Tujuan Penelitian ............................................................................................ 4
D. Manfaat Penelitian .......................................................................................... 4
BAB II LANDASAN TEORI ........................................................................................... 5
A. Tinjuan Pustaka ............................................................................................... 5
1. Daun Katuk (Sauropus androgynus) ........................................................ 5
2. Hepar ......................................................................................................... 7
3. Parasetamol ............................................................................................... 9
4. Mekanisme Kerusakan Hepar Akibat Paparan Parasetamol ..................... 10
5. Stres Oksidatif ........................................................................................... 11
6. Antioksidan ............................................................................................... 14
7. Daun Katuk sebagai Antioksidan ............................................................. 16
B. Kerangka Berpikir ........................................................................................... 20
vii
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
C. Hipotesis ......................................................................................................... 21
BAB III METODE PENELITIAN ................................................................................... 22
A. Jenis penelitian ................................................................................................ 22
B. Lokasi dan Waktu Penelitian .......................................................................... 22
C. Subjek Penelitian ............................................................................................ 22
D. Teknik Sampling ............................................................................................. 23
E. Desain Penelitian ............................................................................................ 23
F. Identifikasi Variabel Penelitian ...................................................................... 24
G. Definisi Operasional Variabel Penelitian ....................................................... 25
H. Alat dan Bahan Penelitian ............................................................................... 25
I. Cara Kerja ....................................................................................................... 26
J. Teknik Analisis Data ...................................................................................... 29
BAB IV HASIL PENELITIAN ........................................................................................ 31
A. Hasil Penelitian .............................................................................................. 31
B. Analisis Data .................................................................................................. 32
BAB V PEMBAHASAN .................................................................................................. 34
BAB VI SIMPULAN DAN SARAN ............................................................................... 39
A. Simpulan ......................................................................................................... 39
B. Saran ............................................................................................................... 39
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................................... 40
LAMPIRAN
viii
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
1
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah
Hepar merupakan organ terbesar pada tubuh yang berfungsi sebagai
tempat pembentukan empedu, pembentukan faktor koagulasi, dan pusat
metabolisme karbohidrat, protein, lemak, hormon, dan zat kimia (Guyton and
Hall, 2007). Sebagai pusat metabolisme di tubuh, hepar rentan sekali untuk
terpapar zat kimia yang bersifat toksik sehingga menimbulkan kerusakan
hepar. Kerusakan hepar sulit untuk disembuhkan dan dikembalikan fungsinya
seperti semula. Zat kimia dapat berupa senyawa-senyawa obat yang luas
digunakan di masyarakat. Salah satu contoh obat yang dapat menimbulkan
kerusakan hepar adalah parasetamol (Mehta, 2010).
Parasetamol (asetaminofen) telah digunakan sejak tahun 1893 sebagai
obat dengan efek antipiretik dan analgesik. Ketika diminum dalam dosis terapi,
parasetamol telah terbukti aman, namun apabila dikonsumsi dengan dosis
tunggal dan berlebih dapat menimbulkan efek yang membahayakan (Wilmana
dan Gunawan, 2007).
Efek samping dari parasetamol yang berlebihan berasal dari hasil
metabolitnya. Sebagian besar parasetamol dikonversi melalui metabolisme
konjugasi dengan sulfat dan glukoronat, dan sebagian kecil lainnya teroksidasi
melalui sistem enzim sitokrom P 450. Sitokrom P 450 3 A 4 dan sitokrom P
450 2 E 1 mengkonversi sekitar 5 % dari parasetamol menjadi metabolit
perantara yang sangat reaktif, N-asetil-p-benzoquinoneimine (NAPQI). N-
1
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
2
asetil-p-benzoquinoneimine memiliki waktu paruh yang pendek kemudian akan
dikonjugasi oleh glutation dan diskskresikan (Farrel, 2010). Ketika parasetamol
diminum overdosis, jalur sulfat dan glukoronat menjadi jenuh sehingga jalur
detoksifikasi parasetamol lebih banyak dilakukan oleh sitokrom P 450,
akibatnya NAPQI menjadi sangat banyak dan pasokan glutation untuk sel
hepar berkurang. Ketika terjadi pengurangan 70 % glutation, NAPQI yang
masih dalam bentuk racun dalam hepar dapat bereaksi dengan molekul
membran sel, mengakibatkan kerusakan dan kematian sel hepar dan akhirnya
menyebabkan nekrosis hepar akut (Farrel, 2010).
Indikator adanya kerusakan hepar adalah terjadinya peningkatan
enzim-enzim hepar seperti alanin transaminase atau Serum Glutamat Piruvat
Transaminase (SGPT) dan aspartat transaminase atau Serum Glutamat
Oksaloasetat Transaminase (SGOT) (Panjaitan et al., 2007). Serum glutamat
piruvat transaminae dianggap lebih spesifik daripada SGOT karena SGPT
paling banyak ditemukan di dalam hepar, sedangkan SGOT terdapat juga di
jantung, otot rangka, otak dan ginjal. Peningkatan kadar enzim ini terjadi bila
ada pelepasan enzim secara intraseluler ke dalam darah yang disebabkan
nekrosis sel-sel hepar atau adanya kerusakan hepar secara akut (Widyatmoko,
2009).
Untuk mencegah terjadinya efek buruk dari radikal bebas, maka tubuh
memerlukan antioksidan yang merupakan senyawa kimia dengan sifat
reduktor. Penggunaan antioksidan alami sudah mulai marak akhir-akhir ini
seiring dengan semakin besarnya pemahaman masyarakat tentang peranannya
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
3
dalam menghambat penyakit degeneratif seperti penyakit jantung,
arteriosklerosis, kanker, serta penuaan (Gunawan, 2010).
Daun katuk (Sauropus androgynus) sudah banyak dikenal orang
Indonesia dan banyak digunakan sebagai sayuran. Tanaman ini juga banyak
digunakan untuk melancarkan air susu ibu, obat borok, bisul, deman, dan darah
kotor. Daun katuk mengandung berbagai jenis vitamin dan mineral.
Kandungan vitamin C daun katuk lebih tinggi daripada jeruk. Kandungan
vitamin A, kalsium, dan flavonoid juga tinggi (Anonim, 2009).
Penelitian yang dilakukan oleh Sa’roni (2004) menyebutkan bahwa
tablet ekstrak daun katuk dengan dosis 900 mg/hari sudah efektif untuk
meningkatkan produksi ASI. Namun, sejauh ini manfaat pemberian ekstrak
daun katuk sebagai hepatoprotektor belum diketahui.
Berdasarkan latar belakang di atas, maka penulis ingin melakukan
penelitian untuk mengetahui manfaat lain pemberian ekstrak daun katuk
(Sauropus androgynus) yaitu sebagai hepatoprotektor yang dinilai berdasarkan
kadar SGPT tikus putih yang dipapar parasetamol dengan analisis
menggunakan metode International Federation Clinical Chemistry (IFCC).
B. Perumusan Masalah
Apakah pemberian ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) dapat
digunakan sebagai hepatoprotektor untuk mencegah kenaikan kadar SGPT
tikus putih yang dipapar parasetamol?
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
4
C. Tujuan Penelitian
Untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun katuk (Sauropus
androgynus) sebagai hepatoprotektor terhadap penurunan SGPT tikus putih
yang dipapar parasetamol.
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat teoritis
Penelitian ini diharapkan dapat dipakai sebagai bahan informasi
dan bahan kajian mengenai pengaruh ekstrak daun katuk sebagai
hepatoprotektor.
2. Manfaat Aplikatif
Penelitian ini diharapkan dapat dipakai sebagai bahan acuan untuk
penelitian lebih lanjut, misalnya penelitian dengan subjek manusia.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
5
BAB II
LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Pustaka
1. Daun Katuk (Sauropus androgynus)
a. Klasifikasi
Kingdom : Plantae
Super Divisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Sub kelas : Rosidae
Ordo : Euphorbiales
Famili : Euphorbiaceae
Genus : Sauropus
Spesies : Sauropus androgynus (L.) Merr.
(Plantamor, 2011)
b. Deskripsi Tumbuhan
Gambar 1. Daun Katuk (Sehat alam,, 2009).
5
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
6
Tanaman herbal daun katuk merupakan tanaman perdu yang
tingginya bisa mencapai 3,5 meter. Tanaman daun katuk banyak
terdapat di Asia Tenggara. Tanaman ini tumbuh baik di dataran rendah
hingga 1.300 dpl. Daun katuk termasuk dalam suku menir-meniran
(Phyllanthaceae) dan sekerabat dengan menteng bumi dan ceremai
(Herbal, 2010).
Tanaman katuk tumbuh menahun (parennial), berbentuk semak
perdu dengan ketinggian antara 2,5 - 5 meter, dan merumpun. Susunan
morfologi tanaman katuk terdiri atas akar, batang, daun, bunga, buah,
dan biji. Buahnya berbentuk kecil dan berwarna putih. Daun katuk
kecil, dengan warna hijau gelap, panjangnya 5 - 6 cm. Bunga tanaman
daun katuk berwarna merah gelap atau kuning dengan bercak merah
gelap (Herbal, 2010).
Sistem perakaran tanaman katuk menyebar ke segala arah dan
dapat mencapai kedalaman antara 30 - 50 cm. Batang tanaman tumbuh
tegak dan berkayu. Pada stadium muda, batang tanaman berwarna hijau
dan setelah tua berubah menjadi kelabu keputih-putihan (Herbal, 2010).
c. Kandungan Kimia
Daun katuk mengandung energi (59 kkal/100 gr), protein (4,8
gr/100 gr), lemak (1 gr/100 gr), karbohidrat (11 gr/100 gr), dan air (17
gr/100 gr). Vitamin A yang didapat dari 100 gr daun Katuk adalah
10.370 SI, vitamin C ( 239 mg/100 gr), dan vitamin B1 (0,1 mg/100 gr).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
7
Kadar serat per 100 gram daun katuk 1,5 gram. Komposisi mineral pada
daun katuk juga tinggi, yaitu dominan kalsium (204 mg/100 gr), fosfor
(83 mg/100 gr), dan besi (2,7 mg/100 gr). Daun katuk mengandung
banyak flavonoid (831,70 mg/100 gr) (Herbal, 2010). Berdasarkan
penelitian yang dilakukan Zuhra (2008) didapatkan bahwa golongan
flavonoid utama yang terdapat dalam daun katuk adalah golongan
flavonol OH-3 tersulih atau golongan flavon.
2. Hepar
Hepar merupakan organ terbesar dalam tubuh yang beratnya rata-
rata 1,5 kg (Junqueira, 2007). Hepar menempati sebagian besar kuadran
kanan atas abdomen (hypochondriaca dextra) dan sebagian epigastrica.
Hepar memiliki dua lobus utama, lobus dextra dan sinistra (Price dan
Wilson, 2006).
Hepar mempunyai banyak faal metabolik. Hepar berfungsi dalam
metabolisme karbohidrat, lemak, dan protein, serta memiliki fungsi dalam
pembentukan empedu. Hepar juga mempunyai fungsi pertahanan tubuh,
baik dalam detoksifikasi maupun dalam fungsi imunitas (Price dan Wilson,
2006).
Sel hepar sering sekali mengalami kerusakan. Kerusakan hepar
akibat infeksi, obat, ataupun virus dapat menyebabkan kerusakan menetap
pada sel hepar yang berakibat pada peradangan (hepatitis) ataupun
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
8
kematian sel (nekrosis). Salah satu penyebab kerusakan hepar adalah
senyawa radikal bebas (Sood, 2009).
Enzim-enzim yang terdapat di dalam sel hepar akan terlepas ke
dalam sirkulasi sistemik jika mengalami kerusakan. Kerusakan hepar
ditandai dengan adanya peningkatan kadar Serum Glutamate Oksaloasetat
Transaminase (SGOT), Serum Glutamate Piruvat Transaminase (SGPT),
alkali fosfatase (ALP), bilirubin total, dan protein total dalam serum
(Panjaitan et al., 2007).
Pengujian kadar SGPT dan SGOT sebagai indikasi kerusakan hepar
sampai saat ini dianggap paling praktis. Serum glutamate piruvat
transaminase terdapat di sitoplasma sel hepar (20 %) dan mitokondria sel
hepar (80 %), sedangkan SGPT hanya terdapat di sitoplasma (Giannini et
al., 2005). Pemeriksaan SGPT merupakan indikator yang spesifik terhadap
tes fungsi hepar sebab SGPT lebih dominan di hepar sedangkan SGOT
banyak terdapat pada jaringan terutama jantung, otot rangka, ginjal, dan
otak (Price dan Wilson, 2006).
Beberapa senyawa telah dibuktikan melalui penelitian ilmiah dapat
menjaga fungsi hepar, baik sebagai hepatoprotektor ataupun sebagai obat
ketika kerusakan hepar telah terjadi. Contoh senyawa tersebut adalah
karotenoid, vitamin A, vitamin C, dan vitamin E, senyawa polifenol,
flavonoid, dan kondroitin sulfat (Ha et al., 2003).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
9
3. Parasetamol
Parasetamol telah banyak digunakan dalam masyarakat sebagai obat
analgesik dan antipiretik.
a. Farmakodinamik
Efek analgesik parasetamol serupa dengan salisilat yaitu
menghilangkan atau mengurangi nyeri ringan sampai sedang.
Parasetamol menurunkan suhu tubuh dengan mekanisme yang diduga
juga berdasarkan efek sentral sepert salisilat (Wilmana dan Gunawan,
2007).
Efek antiinflamasinya sangat lemah, oleh karena itu parasetamol
tidak digunakan sebagai antireumatik. Efek iritasi, erosi, dan
perdarahan lambung tidak terlihat, demikian juga gangguan pernafasan
dan keseimbangan asam basa (Wilmana dan Gunawan, 2007).
b. Farmakokinetik
Parasetamol diabsorpsi cepat dan sempurna melalui saluran cerna.
Konsentrasi tertinggi dalam plasma dicapai dalam waktu ½ jam dan
masa paruh plasma antara 1 - 3 jam. Obat ini tersebar ke seluruh cairan
tubuh. Dalam plasma, 25 % parasetamol terikat protein plasma.
Parasetamol dimetabolisme oleh enzim mikrosom hepar. Sebagian
parasetamol (80 %) dikonjugasi dengan asam glukoronat dan sebagian
kecil lainnya dengan asam sulfat. Obat ini diekskresi melalui ginjal,
sebagian kecil sebagai parasetamol (3 %) dan sebagian besar dalam
bentuk terkonjugasi (Wilmana dan Gunawan, 2007).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
10
c. Indikasi
Khasiatnya analgetik dan antipiretik, tetapi tidak antiradang. Efek
analgetisnya diperkuat oleh kodein dan kafein (Tjay dan Raharja,
2002). Obat ini berguna untuk nyeri ringan sampai sedang seperti sakit
kepala, mialgia, nyeri persalinan, dan keadaan lain di mana aspirin
efektif sebagai analgesik. Parasetamol tidak efektif untuk mengatasi
inflamasi seperti artritis reumatoid, meskipun dapat dipakai sebagai
obat tambahan analgesik dalam terapi anti inflamasi (Katzung, 2002).
d. Efek Samping
Efek samping yang sering terjadi antara lain reaksi hipersensitivitas
dan kelainan darah (Tjay dan Raharja, 2002). Efek merugikan paling
serius akibat overdosis parasetamol akut berupa nekrosis hepar yang
fatal (Hardman et al., 2008). Hepatotoksisitas dapat terjadi pada
pemberian dosis tunggal 10 - 15 gram (200 - 250 mg/ kg BB)
parasetamol (Wilmana dan Gunawan, 2007).
4. Mekanisme Kerusakan sel hepar Akibat Paparan Parasetamol
Toksisitas dapat terjadi apabila terdapat overdosis akut dan
penggunaan dosis tunggal maksimal. Hepatotoksisitas tidak terjadi sebagai
akibat langsung dari parasetamol, tetapi melalui metabolitnya, yaitu N-
acetyl-p-benzoquinoneimine (NAPQI). N-acetyl-p-benzoquinoneimine
didetoksifikasi oleh glutation (GSH) yang kemudian membentuk konjugasi
parasetamol-GSH (Sood, 2009). Ketika terjadi dosis toksis parasetamol,
glutation hepar total menurun hingga 90 %, akibatnya metabolit parasetamol
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
11
tersebut berikatan kovalen dengan protein selular. Ikatan kovalen antara
metabolit parasetamol dan protein menyebabkan sel kehilangan fungsi atau
aktivitasnya bahkan terjadi kematian sel dan lisis. Target organel sel
utamanya adalah mitokondria yang berperan dalam produksi energi serta
kontrol ion selular, sehingga terjadi transisi permeabilitas mitokondria.
Akibatnya adalah penurunan adenosine triphosphate (ATP), peningkatan
Ca2+ yang bersifat oksidan, aktivasi protease dan endonuklease, serta
kerusakan rantai DNA (James et al., 2003).
5. Stres Oksidatif
Oksigen merupakan substansi esensial karena perannya yang begitu
besar bagi metabolisme sel untuk menghasilkan energi bagi kehidupan sel
(Gitawati, 1995).
Oksigen juga memiliki potensi toksik, karena selain mendorong
terjadinya reduksi oksigen yang bertahap untuk membentuk ATP dalam
rantai transpor elektron, juga menyebabkan terbentuknya radikal oksigen
dan senyawa oksigen reaktif [Reactive Oxygen Species (ROS)] yang mampu
menyebabkan cedera sel. Contoh senyawa oksigen reaktif antara lain adalah
radikal superoksida, radikal hidroksil, hidrogen peroksida, dan radikal
peroksida. Proses-proses yang secara alami menghasilkan senyawa oksigen
reaktif adalah rantai respirasi mitokondria, reaksi oksidase, maupun pada
peristiwa fagositosis oleh granulosit sistem imun (Videla, 2009).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
12
Stres oksidatif adalah ketidakseimbangan antara produksi oksigen
reaktif dengan kemampuan sistem biologik tubuh untuk mendetoksifikasi
senyawa reaktif atau memperbaiki kerusakan sel (Otero et al., 2009).
Keadaan ini menyebabkan kelebihan radikal bebas yang akan bereaksi
dengan lemak, protein, dan asam nukleat seluler, sehingga terjadi kerusakan
lokal dan disfungsi organ tertentu. Jika stres oksidatif ini berlangsung lama,
akan menyebabkan kerusakan sel atau jaringan (Gitawati, 1995).
Stres oksidatif disebabkan oleh radikal bebas yang berlebihan. Radikal
bebas yang merupakan spesies kimiawi dengan satu elektron tak
berpasangan di orbital terluar menyebabkan radikal bebas sangat tidak stabil
dan mudah bereaksi dengan zat kimia organik maupun anorganik. Sifat ini
menimbulkan perubahan kimiawi dan dapat merusak berbagai komponen
sel. Tiga reaksi yang paling relevan dengan jejas sel yang diperantarai
radikal bebas yaitu peroksidasi lipid membran, fragmentasi DNA, dan
ikatan silang protein (Robbins et al. 2007).
Membran sel hampir seluruhnya terdiri dari protein dan lipid. Struktur
dasarnya ialah sebuah lapisan lipid bilayer dan di antara lapisan lipid bilayer
tersebut terdapat molekul besar protein globular. Sedangkan struktur dasar
dari lapisan lipid bilayer sendiri terdiri atas molekul-molekul fosfolipid
(Guyton dan Hall, 2007). Komponen terpenting membran sel adalah
fosfolipid, glikolipid, dan kolesterol. Dua komponen pertama mengandung
asam lemak tak jenuh yang sangat rawan terhadap serangan-serangan
radikal terutama radikal hidroksil dan menimbulkan reaksi rantai yang
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
13
dikenal dengan nama peroksidasi lipid dan menyebabkan kerusakan
membran sel sehingga membahayakan kehidupan sel (Suryohudoyo, 2000).
Perubahan permeabilitas membran yang disebabkan peroksida lipid
mengakibatkan pengaturan ion, nutrisi sel, dan volume intra-ekstrasel
menjadi terganggu dan pada akhirnya proses metabolisme sel secara
keseluruhan menjadi terganggu (Robbins et al., 2007).
Perusakan DNA oleh radikal bebas juga dapat terjadi karena reaksi
dengan radikal hidroksil (OHˉ) yang terbentuk di dalam inti sel. Stres
oksidatif dapat memicu pelepasan ion logam di dalam sel, yang akan
berikatan dengan DNA. Ion logam tersebut dapat mengkatalis terbentuknya
OH- dari H2O2 melalui reaksi donor elektron dari ion logam kepada H2O2.
Hidroksil yang terbentuk kemudian akan segera bereaksi dengan molekul
terdekat, yang tidak lain adalah DNA itu sendiri, menyebabkan terjadinya
kerusakan DNA (Halliwell dan Gutteridge, 2001).
Bila kerusakan tidak terlalu parah, maka masih bisa diperbaiki oleh
sistem perbaikan DNA (DNA repair system). Namun apabila kerusakan
terlalu parah, misalnya DNA terputus-putus di berbagai tempat, maka
kerusakan tersebut tak dapat diperbaiki dan replikasi sel akan terganggu.
DNA yang tidak dapat diperbaiki ini sering justru menimbulkan mutasi
karena dalam memperbaiki DNA cenderung membuat kesalahan
(Suryohudoyo, 2000).
Radikal bebas juga akan mencetuskan ikatan silang protein yang
diperantarai sulfhidril, menyebabkan peningkatan kecepatan degradasi atau
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
14
hilangnya aktivitas enzimatik. Reaksi radikal bebas juga bisa secara
langsung menyebabkan fragmentasi polipeptida (Robbins et al.,2007).
Radikal bebas memang tidak stabil, dan umumnya rusak secara
spontan. Sel juga membentuk beberapa sistem enzimatik dan non enzimatik
untuk menonaktifkan radikal bebas yaitu melalui kerja superoksida
dismutase (SOD), glutation (GSH) peroksidase, katalase, dan antioksidan
(Robbins et al., 2007).
Superoksida dismutase terdapat dalam sitosol dan mitokondria.
Enzim ini dapat mengkonversi 2 molekul superoksida menjadi hidrogen
peroksida dan oksigen. Dismutasi anion superoksida menjadi hidrogen
peroksida dan oksigen ini sering disebut sebagai pertahanan pertama
terhadap stres oksidatif karena superoksida merupakan inisiator kuat
berbagai reaksi berantai. Glutation (GSH) peroksidase akan melindungi sel
supaya tidak mengalami jejas dengan mengatalisis perusakan radikal bebas
[2OH- + 2GSH → 2H2O + GSSG (glutation homodimer)]. Katalase terdapat
dalam peroksisom dan akan mendegradasi hidrogen peroksida (2H2O2→ O2
+ 2H2O). Antioksidan endogen atau eksogen (misal: vitamin E, A, C, serta
β-karoten) juga dapat menghambat pembentukan radikal bebas atau
mengikat radikal bebas ketika selesai dibentuk (Robbins et al.,2007).
6. Antioksidan
Terdapat dua bentuk reaksi kimia, oksidasi dan reduksi. Oksidasi
adalah pelepasan elektron sedangkan pada reduksi terjadi penambahan
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
15
jumlah elektron. Oksidasi dan reduksi selalu berpasangan, ketika salah satu
atom atau molekul teroksidasi maka yang lain akan tereduksi. Molekul yang
sangat reaktif seperti radikal bebas, dapat mengoksidasi molekul yang stabil
dan merubahnya menjadi bagian yang tidak stabil (McDermott, 2000).
Cara kerja senyawa antioksidan adalah bereaksi dengan radikal bebas
reaktif membentuk radikal bebas tak reaktif yang relatif stabil. Antioksidan
menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang
dimiliki radikal bebas, dan menghambat terjadinya reaksi berantai dari
pembentukan radikal bebas (McDermott, 2000).
Tubuh manusia menghasilkan senyawa antioksidan, tetapi jumlahnya
sering kali tidak cukup untuk menetralkan radikal bebas yang masuk ke
dalam. Glutation adalah salah satu antioksidan alami yang dibentuk oleh
tubuh. Glutation memiliki peran penting dalam fungsi biologis, termasuk
transport membran, detoksifikasi, dan perlindungan sel dari radikal bebas
(Adams, 2009).
Berdasarkan cara kerjanya dapat digolongkan menjadi tiga kelompok
yaitu: antioksidan primer, sekunder, dan tersier. Antioksidan primer ialah
golongan antioksidan yang berfungsi untuk mencegah pembentukan radikal
bebas baru dan mengubah radikal bebas yang ada menjadi molekul yang
berkurang dampak negatifnya sebelum radikal bebas ini sempat bereaksi,
misalnya enzim SOD dan selenium. Antioksidan sekunder ialah golongan
antioksidan yang berfungsi menangkap senyawa serta mencegah terjadinya
reaksi berantai, misalnya vitamin E, vitamin C, beta karoten, asam sitrat,
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
16
bilirubin, dan albumin. Antioksidan tersier adalah golongan antioksidan
yang berfungsi memperbaiki kerusakan sel-sel dan jaringan tubuh yang
disebabkan radikal bebas (Nurwati, 2007).
Secara alami beberapa jenis tumbuhan merupakan sumber
antioksidan, hal ini dapat ditemukan pada beberapa jenis sayuran, buah-
buahan segar, beberapa jenis tumbuhan, dan rempah-rempah. Jenis
antioksidan yang dapat ditemukan pada tumbuhan antara lain adalah asam
lemak omega-3, beta karoten, alfa tokoferol, asam askorbat, dan glutation
(Simopoulos, 2004).
7. Daun Katuk sebagai Antioksidan
Pada penelitian ini digunakan parasetamol sebagai induktor
kerusakan hati. Partasetamol adalah obat analgetik dan antipiretik yang
sering digunakan dan tidak berbahaya bila dosisnya tidak berlebihan, namun
dapat menyebabkan hepatotoksisitas apabila dikonsumsi dalam dosis
berlebihan (Farrell, 2010).
Hepatotoksisitas berhubungan dengan produksi metabolit yang
sangat reaktif yaitu NAPQI. Peningkatan produksi NAPQI akan
menyebabkan akumulasi NAPQI intraseluler (Dephour et al., 1999). N-
asetil-p-benzoquinoneimine kemudian bereaksi dengan glutation
membentuk konjugat 3 – gluthatione - Syl yang diekskresi lewat urin dan
empedu. Jumlah NAPQI yang berlebihan menyebabkan glutation dalam
hepar habis dan NAPQI bereaksi dengan makromolekul dalam sel hepar
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
17
misalnya protein dan lipid membran sel sehingga menyebabkan kerusakan
hepar (Song Chow Lin et al., 1995). Sel hepar yang rusak melepaskan
faktor-faktor yang menarik dan mengaktivasi makrofag hepar menyebabkan
nekrosis sel (Dehpour et al., 1999). Sel hepar yang rusak akan melepaskan
enzim-enzim yang menandai kerusakan tersebut di antaranya SGPT dan
SGOT (Amirudin, 2007). Serum glutamate piruvat transaminase ditemukan
dalam jumlah sedikit pada otot jantung, ginjal, serta otot rangka, sehingga
lebih efektif untuk mendiagnosis destruksi hepatoselular dibanding dengan
SGOT dan akan meningkat lebih khas daripada SGOT dalam kasus nekrosis
hari (Kee, 2007).
Kandungan daun katuk yang dapat digunakan sebagai antioksidan
adalah flavonoid, vitamin C, dan vitamin A. Flavonoid termasuk metabolit
sekunder tumbuhan yang merupakan golongan terbesar senyawa fenol alam.
Flavonoid merupakan antioksidan yang memberikan perlindungan terhadap
agen oksidatif dan radikal bebas. Sebagai antioksidan, flavonoid akan
menangkap radikal bebas dengan melepaskan atom hidrogen dari gugus
hidroksilnya. Pemberian atom hidrogen ini menyebabkan radikal bebas
menjadi stabil dan berhenti melakukan gerakan radikal, sehingga tidak
merusak lipida, protein dan DNA (Nurwati, 2007). Flavonoid juga akan
melindungi sel melalui mekanisme yang lain, yaitu dengan meningkatkan
kadar glutation (WHFoods, 2011).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
18
Gambar 2. Struktur Flavonoid (C28H34O15)
Vitamin C dalam daun katuk mampu berperan sebagai antioksidan
pemecah rantai yang hidrofilik. Vitamin C juga merupakan prooksidan yaitu
zat yang selain berfungsi sebagai antioksidan juga sebagai oksidan yang
kurang reaktif. Asam askorbatnya sendiri setelah teroksidasi akan menjadi
radikal dehidroaskorbat dan kemudian akan menjadi asam askorbat kembali
setelah mendapat ion hidrogen dari NADH atau pembawa hidrogen lainnya.
Vitamin C sangat efektif sebagai antioksidan pada konsentrasi tinggi.
Pemberian dosis tinggi vitamin C akan mengurangi lipid peroksida sebab
vitamin C akan mereduksi ion ferro menjadi ion ferri, sedangkan rasio ion
ferro/ion ferri berpengaruh pada proses terjadinya lipid peroksidasi
(Nurwati, 2007).
Gambar 3. Struktur Vitamin C (C6H8O6)
Vitamin A berfungsi untuk penjagaan integritas sel epitelial membran
mukosa gastrointestinal, kornea, pernapasan, saluran genitourinaria, dan
juga integritas kulit. Kandungan vitamin A yang tinggi dalam daun katuk ini
dapat mempertahankan integritas seluler dan mengurangi kerusakan sel
(Kee, 2007).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
19
Ekstrak dauk katuk juga mengandung kalsium yang terkenal karena
perannya dalam mempertahankan kekuatan dan kepadatan tulang. Namun,
kalsium juga banyak berperan dalam banyak aktivitas fisiologis yang tidak
berhubungan dengan tulang, misalnya penganturan aktivitas enzim, fungsi
membran sel, konduksi saraf, dan kontraksi otot (WHFoods, 2011).
Berdasarkan mekanisme perlindungan sel yang dijelaskan di atas,
maka kerusakan sel lebih lanjut dapat dicegah dan dihalangi. Flavonoid
sebagai antioksidan akan meningkatkan total antioxidant untuk
berkonjugasi dengan NAPQI dan tidak terjadi ikatan antara NAPQI dengan
makromolekul hepatosit (Fraschini, 2002). Ketika kerusakan sel terhambat
maka kadar SPGT sebagai indikator kerusakan sel-sel hepar akan normal
dan lebih rendah dibanding kadar SGPT hepar yang telah terganggu oleh
NAPQI.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
20
B. Kerangka Pemikiran
Memperkuat integritas sel
Parasetamol dosis berlebih
Ikatan kovalen dgn makromolekul
hepar
Ekstrak Daun Katuk
Meningkatkan NAPQI
(elektrofilik)
Deplesi glutathione
Bioaktivasi sitokrom P450
Kerusakan makromolekul
Lipid peroxide
Radical Oxygen Species (ROS)
Stres oksidatif
Kerusakan sel hepar SGPT
Peningkatan Total Antioxidant Status
(TAS)
Kerusakan sel hati hepar
Faktor-faktor lain yang dapat menyebabkan kerusakan sel hati: - Obat-obatan - Infeksi mikroorganisme - Virus
Tikus Putih
Diberi paparan
Flavonoid
Meningkatkan glutation
Vitamin C Vitamin A
Kalsium
Donor elektron
Keterangan:
: memacu
: menghambat
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
21
C. Hipotesis
Pemberian ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) dapat digunakan
sebagai hepatoprotektor untuk mencegah kenaikan kadar SGPT tikus putih
yang dipapar parasetamol.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
22
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorik.
B. Lokasi Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran
Universitas Sebelas Maret Surakarta.
C. Subjek Penelitian
Subjek penelitian adalah tikus putih (Rattus norvegicus) galur Wistar
dengan jenis kelamin jantan, umur 6-8 minggu, berat badan kurang lebih
150 gram, dan sehat.
Sampel akan di bagi dalam empat kelompok. Jumlah sampel dihitung
dengan rumus Federer:
(k-1) (n-1) > 15
(4-1) (n-1) > 15
3 ( n-1) > 15
3n > 15+3
n > 6
Keterangan :
k : Jumlah kelompok
n : Jumlah sampel dalam tiap kelompok (Purawisastra, 2001)
22
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
23
Peneliti menggunakan 7 ( n > 6) ekor tikus putih untuk tiap kelompok,
sehingga jumlah sampel dalam penelitian ini adalah 28 ekor tikus putih
(Rattus norvegicus).
D. Teknik Sampling
Pengambilan sampel hewan uji dilakukan dengan non probability
incidental sampling, sedangkan pembagian subjek ke dalam kelompok
menggunakan randomisasi.
E. Desain Penelitian
Rancangan penelitian ini adalah the posttest only control group design
(Taufiqqurohman, 2003).
KK : (-) O0
KP1: (X 1) O1
KP2: (X 2) O2
KP3 :(X 3) O3
Keterangan :
KK : (-) = Kelompok kontrol tanpa diberi ekstrak daun katuk maupun
parasetamol.
KP1: (X1) = Kelompok perlakuan I yang diberi parasetamol tanpa
diberi ekstrak daun katuk.
KP2:(X2) = Kelompok perlakuan II yang diberi parasetamol dan diberi
ekstrak daun katuk dosis I (12,15 mg/150 gr BB tikus)
Sampel Tikus
Putih 28 ekor
Bandingkan dengan uji
statistik
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
24
KP3 : (X 3) = Kelompok perlakuan III yang diberi parasetamol dan
diberi ekstrak daun katuk dosis II (24,30 mg/150 gr BB
tikus)
O0 = Kadar SGPT tikus kelompok kontrol.
O1 = Kadar SGPT tikus KP1.
O2 = Kadar SGPT tikus KP2.
O3 = Kadar SGPT tikus KP3
Pengamatan kadar SGPT dilakukan pada hari ke-14
F. Identifikasi Variabel Penelitian
1. Variabel Bebas: ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus)
2. Variabel Terikat: kadar SGPT tikus putih
3. Variabel luar :
a. dapat dikendalikan :
1) makanan dan minuman
2) jenis kelamin
3) usia
4) berat badan
b. tidak dapat dikendalikan :
1) sistem imun hewan uji
2) kondisi psikologis hewan uji/stres
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
25
G. Definisi Operasional Variabel Penelitian
1. Ekstrak daun katuk
Ekstrak daun katuk yang dipakai dalam penelitian ini diperoleh dari
LPPT UGM. Pembuatan ekstrak menggunakan metode perkolasi dengan
cairan penyari ethanol 70 %. Ekstrak daun katuk ini diberikan peroral
sekali dalam sehari menggunakan sonde lambung. Dalam penelitian ini
digunakan dua dosis ekstrak daun katuk, yakni 12,15 mg/ 150 gr BB
tikus dan 24,30 mg/ 150 gr BB tikus dalam 1 hari. Ekstrak daun katuk ini
diberikan selama 13 hari.
Skala variabel ekstrak daun katuk merupakan skala ordinal.
2. Kadar SGPT
Kadar Serum Glutamate Piruvat Transaminase (SGPT) ditentukan
dengan menggunakan alat Model 902 Automatic Analyzer Hitachi.
Pengambilan darah tikus dilakukan dengan menggunakan mikrokapiler
melalui sinus orbitalis.
Skala variable kadar SGPT merupakan skala rasio.
H. Alat dan Bahan Penelitian
1. Alat
a. Kandang tikus putih beserta kelengkapan pemberian makan. Ukuran:
35 cm x 25 cm x 12 cm
b. Timbangan tikus (DAEMA)
c. Tabung mikrokapiler untuk mengambil sampel darah. Panjang tabung
75 mm dan diameter 1,5 mm
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
26
d. Sonde lambung ukuran 3 ml dengan ketelitian 0,1 ml
2. Bahan
a. Ekstrak daun katuk
b. Parasetamol
c. Makanan pelet (AD II)
d. Aquades
I. Cara Kerja
1. Langkah I: Persiapan Hewan Uji
Penelitian dilakukan menggunakan tikus putih (Rattus norvegicus)
jantan sebagai hewan uji. Tikus jantan dapat memberikan hasil
penelitian yang lebih stabil karena tidak dipengaruhi oleh adanya siklus
mentruasi dan kehamilan (hormonal) seperti pada tikus betina. Tikus
jantan juga memiliki kecepatan metabolisme yang lebih cepat dan
kondisi biologis yang lebih stabil.
Sampel tikus putih dibagi menjadi 4 kelompok masing-masing 7
ekor secara acak (random sederhana). Sampel dilakukan adaptasi di
Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret
selama 7 hari dengan diberi makan pelet dan minum air.
2. Langkah II: Pemberian Ekstrak Daun Katuk
Pada penelitian yang pernah dilakukan dengan menggunakan daun
katuk, disebutkan bahwa konsumsi ekstrak daun katuk yang dipakai
adalah 900 mg (Sa’roni, 2004). Maka dapat disimpulkan bahwa dosis
yang dibutuhkan tikus putih dengan angka konversi 0,018 terhadap
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
27
manusia dengan berat manusia 70 Kg adalah 0,018 x 900 mg = 16,2
mg/200 gr BB tikus putih. Ekstrak daun katuk yang didapat dari LPPT
UGM adalah sebanyak 54,24 gr dan dilarutkan dalam pelarut CMC
(Carboxy methyl Cellulose) 0,5 %, maka agar didapatkan 12,15 mg/mL
dan 24,30 mg/mL, ekstrak daun katuk dilarutkan dengan penambahan
CMC 0,5 %.
Pengenceran:
Dosis I : 12,150 mg/mL (untuk tikus BB 150 gram)
2,340 gram ekstrak daun katuk ditambah CMC 0,5 %
diaduk sampai homogen sampai volume 200 mL.
Dosis II : 24,3 (untuk tikus BB 150 gram)
4,860 gram ekstrak daun katuk ditambah CMC 0,5 %
diaduk sampai homogen sampai volumen 200 mL.
Tikus putih yang akan diberi perlakuan dipuasakan dahulu
selama 5 jam untuk mengosongkan lambungnya
3. Langkah III: Pemberian parasetamol
Parasetamol adalah obat yang dapat mengakibatkan
hepatotoksisitas. Dosis toksis parasetamol pada manusia adalah 10 - 15
gram (Wilmana, 2007). Dosis toksik yang akan dipakai adalah 15 gr,
maka dosis parasetamol untuk tikus putih berdasarkan tabel konversi
manusia dengan berat badan 70 kg dan faktor konversi tikus putih 0,018
adalah 0,018 x 15 gr = 0,27 gr/200 gr BB tikus putih (Azizi, 2009).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
28
Suspensi parasetamol dibuat dengan cara melarutkan parasetamol ke
dalam CMC 0,5 %.
Ǵ逛ꅐޘ150 Ǵ逛ꅐޘǴ逛ꅐ200ޘ0,27 实0,202ޘǴ逛ꅐ Jika pada pemberian parasetamol dilarutkan dengan CMC 0,5 %
dan suspensi parasetamol yang dibutuhkan sebanyak 50 ml, maka
parasetamol yang dibutuhkan sebanyak:
50ꅐ癸 ꅐ癸Ǵ逛ꅐ1ޘ0,202 实10,125ޘǴ逛ꅐ Jadi untuk mendapatkan dosis 0,202 gr/150 gr BB tikus putih,
10,125 gram parasetamol dilarutkan dengan 50 ml CMC 0,5 %.
4. Langkah IV: Perlakuan Hewan Uji
Hewan uji yang telah dibagi dalam empat kelompok diberi
perlakuan berbeda dengan langkah sebagai berikut:
a. Kelompok kontrol (KK), terdiri dari 7 ekor tikus putih yang diberi
diet standar, yaitu pelet dan air selama 13 hari.
b. Kelompok perlakuan I (KP1), terdiri dari 7 ekor tikus putih yang
diberi diet standar, yaitu pelet dan air selama 13 hari. Pada hari ke 11
– 13, diberikan 1 ml suspensi parasetamol per oral dengan dosis
0,202 gr/150 gr BB per hari.
c. Kelompok perlakuan II (KP2), terdiri dari 7 ekor tikus putih yang
diberi diet standar, yaitu pelet dan air serta 1 ml larutan ekstrak daun
katuk per oral dengan dosis 12,15 mg/150 g BB selama 13 hari. Pada
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
29
hari ke 11 – 13, diberikan 1 ml suspensi parasetamol per oral dengan
dosis 0,202 gr/150 gr BB per hari satu jam setelah pemberian ekstrak
daun katuk.
d. Kelompok perlakuan III (KP3), terdiri dari 7 ekor tikus putih yang
diberi diet standar, yaitu pelet dan air serta 2 ml larutan ekstrak daun
katuk per oral dengan dosis 24,30 mg/150 gr BB selama 13 hari.
Pada hari ke 11 – 13, diberikan 1 ml suspensi parasetamol per oral
dengan dosis 0,202 gr/150 gr BB satu jam setelah pemberian ekstrak
daun katuk.
5. Langkah V: Pengukuran hasil
Pada hari ke-14 setelah perlakuan dengan ekstrak daun katuk
semua tikus diambil darahnya menggunakan tabung mikrokapiler
sebanyak 2 ml.
Pemeriksaaan SGPT menggunakan metode IFCC (International
Federation Clinical Chemistry) dengan alat Model 902 Automatic
Analyzer Hitachi di Laboratorium Klinik Budi Sehat Surakarta.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
30
Skema Rancangan Penelitian
J. Teknik Analisis Data Statistik
Data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan Uji Oneway
Analysis of Variant (ANOVA). Jika terdapat perbedaan yang bermakna
maka dilanjutkan dengan Post Hoc Test. Derajat kemaknaan yang
digunakan adalah α = 0,05 (Riwidikdo, 2007).
Sampel 28 ekor tikus putih
Adaptasi sampel 7 hari
P e r l a k u a n h a r i k e 1 – 1 3
Kelompok Kontrol
Kelompok Perlakuan 1
Kelompok Perlakuan 2
Kelompok Perlakuan 3
Dipuasakan ± 5 jam
1 ml CMC 0,5 % 1 ml larutan ekstrak daun katuk dosis
12,15 mg/150 gr BB
1 ml larutan ekstrak daun katuk dosis
24,30 mg/150 gr BB
P e r l a k u a n h a r i 1 1 - 1 3
Parasetamol dosis toksik 0,202 gr/ 150 gr BB tikus putih dalam suspense 1 ml setelah 1 jam pemberian ekstrak
Pada hari ke-14 dilakukan analisis kadar SGPT Tikus putih
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
31
BAB IV
HASIL PENELITIAN
A. Hasil Penelitian
Penelitian ini menggunakan 28 ekor tikus putih (Rattus norvegicus), galur
Wistar, jenis kelamin jantan, usia 6 - 8 minggu, berat badan ±150 gram, dan
sehat. Tikus-tikus tersebut dibagi secara acak menjadi 4 kelompok yaitu
kelompok I yang menjadi kelompok kontrol, kelompok II yang diberi
parasetamol, kelompok III yang diberi parasetamol dan ekstrak daun katuk
dosis 12,15 mg/150 gr BB, dan kelompok IV yang diberi parasetamol dan
ekstrak daun katuk dosis 24,30 mg/2150 gr BB.
Sebelum dilakukan pemberian perlakuan, keempat kelompok tikus
diadaptasikan selama 1 minggu dan diukur berat badannya. Rerata berat badan
tikus adalah 150 gram. Pada hari ke-14 keempat kelompok tikus diambil
sampel darah dan diperiksa kadar SGPT dengan metode International
Federation Clinical Chemistry (IFCC).
Tabel 1. Kadar SGPT Tikus Putih Setelah Pemberian Perlakuan
Kelompok N Rerata Kadar SGPT ± SB ( IU/L)
Kelompok I 7 97,77 ± 16,74
Kelompok II 7 279,41 ± 188,94
Kelompok III 7 223,87 ± 145,86
Kelompok IV 7 129,53 ± 24,93
31
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
32
Sumber: Data primer 2011
Gambar 4. Diagram Batang Perbedaan Rerata kadar SGPT Tikus Setelah Pemberian Perlakuan pada Kelompok I, Kelompok II, Kelompok III, dan Kelompok IV.
Rerata kadar SGPT tikus putih pada gambar 4 menunjukkan hasil
pemeriksaan SGPT setelah perlakuan. Kadar SGPT tertinggi terlihat pada
kelompok II, sedangkan kadar SGPT terendah yaitu kelompok I. Hasil rerata
kadar SGPT di atas kemudian dianalisis secara statistik untuk mengetahui
apakah perbedaan tersebut signifikan.
B. Analisis Data
Analisis data hasil penelitian ini dilakukan dengan menggunakan bantuan
program SPSS for Windows versi 19.0. Uji normalitas terhadap data primer
hasil penelitian dilakukan untuk mengetahui sebaran data penelitian. Oleh
karena jumlah data sampel pada penelitian ini kurang dari 50 data sampel,
peneliti melakukan uji normalitas menggunakan uji Shapiro-Wilk. Dari hasil
uji normalitas data Shaphiro-Wilk didapatkan bahwa sebaran data memiliki
distribusi yang tidak normal (Lampiran 8).
0
50
100
150
200
250
300
Kelompok I Kelompok II Kelompok III Kelompok IV
Kadar SGPT
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
33
Hasil uji homogenitas varians data penelitian dengan menggunakan
Levene test menunjukkan nilai p = 0,001 (p < 0,05), sehingga dapat
diasumsikan bahwa data kadar SGPT tikus putih tidak homogen.
Berdasarkan hasil uji ANOVA yang dilakukan terhadap seluruh
kelompok sampel dalam lampiran 10, diperoleh nilai probabilitas adalah 0,034
(p < 0,05). Ho ditolak dan H1 diterima sehingga terdapat perbedaan rerata
kadar SGPT yang bermakna secara statistik setelah pemberian perlakuan di
antara keempat kelompok.
Untuk mengetahui lebih jelas letak perbedaan yang bermakna di antara
kelompok sampel, maka peneliti melanjutkan analisis data menggunakan Post
Hoc Test. Dari analisis Post Hoc Test didapatkan hasil sebagai berikut:
Tabel 2. Hasil Post Hoc Test (Dunnett T3) Kadar SGPT Tikus Putih
Kelompok
Pembanding
Kelompok yang
Dibandingkan
Nilai P Keterangan
Kelompok 1 Kelompok 2 .191 Tidak Signifikan
Kelompok 1 Kelompok 3 .261 Tidak Signifikan
Kelompok 1 Kelompok 4 .093 Tidak Signifikan
Kelompok 2 Kelompok 3 .987 Tidak Signifikan
Kelompok 2 Kelompok 4 .327 Tidak Signifikan
Kelompok 3 Kelompok 4 .507 Tidak Signifikan
Sumber: Data primer 2011
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
34
BAB V
PEMBAHASAN
Penelitian pengaruh ekstrak daun katuk (Sauropus androgynous) sebagai
hepatoprotektor terhadap kadar SGPT tikus putih (Rattus norvegicus) yang
dipapar parasetamol menggunakan 4 kelompok tikus masing-masing 7 ekor tikus
yang diberi perlakuan berbeda. Untuk menilai apakah terdapat perbedaan yang
signifikan antara kadar SGPT pada antarkelompok, maka kadar SGPT keempat
kelompok dianalisis secara statistik dengan uji normalitas dan uji homogenitas
lalu dilanjutkan dengan uji ANOVA.
Kelompok perlakuan I yang mendapat paparan suspensi parasetamol
selama 13 hari memiliki kadar SGPT paling tinggi yaitu 279,41 IU/L. Tingginya
kadar SGPT pada kelompok ini terjadi karena kerusakan sel hepar yang
disebabkan oleh paparan parasetamol dosis toksis. Parasetamol memiliki hasil
metabolisme yang merupakan radikal bebas bagi tubuh yaitu N-asetyl-p-
benzoquinoneimine (NAPQI) (Farrel, 2010). Ketika terjadi dosis toksis
parasetamol, glutation hepar sangat menurun sehingga NAPQI berikatan kovalen
dengan protein selular dan menyebabkan sel kehilangan fungsi atau aktivitasnya
bahkan lisis.
Target organel sel utama adalah mitokondria sehingga produksi energi
serta kontrol ion selular terganggu (James et al., 2003). Adanya kerusakan sel-sel
hepar karena proses di atas akan menyebabkan enzim SGPT yang terdapat dalam
sel hepar terlepas ke dalam sirkulasi sistemik yang tampak dengan meningkatnya
kadar SGPT darah (Panjaitan et al., 2007).
34
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
35
Kelompok perlakuan II yaitu kelompok yang diberi ekstrak daun katuk
dosis 12,15 mg/150 gr BB dan parasetamol memiliki rerata kadar SGPT 223,87
IU/L. Kelompok ini pada awalnya diperkirakan akan menunjukkan kadar SGPT
yang jauh lebih rendah daripada kelompok perlakuan I. Hasilnya, walaupun kadar
SGPT kelompok ini lebih rendah dari kelompok perlakuan I namun tidak
menunjukkan penurunan kadar SGPT yang bermakna secara statistik. Hal ini
dimungkinkan karena pemberian ekstrak daun katuk dosis I masih kurang adekuat
sebagai hepatoprotektor.
Kelompok perlakuan III yaitu kelompok yang diberi ekstrak daun katuk
dosis II dan suspensi parasetamol memiliki rerata kadar SGPT 129,53 IU/L. Pada
kelompok ini tampak efek NAPQI sebagai agen hepatotoksik dicegah dengan
pemberian ekstrak daun katuk yang mengandung flavonoid, vitamin C, vitamin A,
dan kalsium yang telah banyak diteliti sebagai antioksidan kuat. Antioksidan
mampu mengubah oksidan menjadi molekul yang tidak berbahaya. Antioksidan
juga mampu mencegah pembentukan radikal bebas dan memperbaiki kerusakan
yang ditimbulkannya (Nurwati, 2007).
Hasil uji ANOVA menunjukkan nilai p = 0,034 (p < 0,05), Ho ditolak
sehingga terdapat perbedaan rerata kadar SGPT yang signifikan secara statistik di
antara keempat kelompok hewan coba. Data kemudian diolah dengan
menggunakan Post Hoc Test dan tidak didapatkan perbedaan rerata kadar SGPT
yang signifikan antara masing-masing kelompok.
Berdasarkan hasil analisis statistik di atas, tidak didapatkan perbedaan
yang bermakna antara kelompok I dengan kelompok II, antara kelompok I dengan
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
36
kelompok III, antara kelompok I dengan kelompok IV, antara kelompok II dengan
III, antara kelompok II dengan IV, dan antara kelompok III dengan IV, sehingga
pada penelitian ini tidak dapat disimpulkan bahwa pemberian ektrak daun katuk
dapat mencegah kenaikan kadar SGPT tikus putih. Sebenarnya terdapat
penurunan rerata kadar SGPT pada kelompok ekstrak daun katuk dosis 12,15
mg/150 gr BB tikus dan dosis 24,30 mg/150 gr BB jika dibandingkan dengan
kelompok parasetamol namun hasil tersebut tidak signifikan secara statistik.
Bila diinjau dari aktivitas ekstrak daun katuk, efek proteksi yang
ditimbulkan oleh ekstrak daun katuk ini karena kandungan zat antioksidan yang
dikandungnya, terutama flavonoid. Flavonoid merupakan antioksidan yang
memberikan perlindungan dari agen oksidatif dan radikal bebas dengan cara
melepas atom hidrogen dari gugus hidroksilnya dan menangkap radikal bebas
(Nurwati, 2007). Flavonoid juga melindungi sel dengan cara meningkatkan
glutation (WHFoods, 2011). Dengan sifat flavonoid yang demikian, maka
flavonoid akan mencegah ikatan antara NAPQI dengan protein selular hepar dan
kerusakan hepar lebih lanjut tidak terjadi. Menurut penelitian Eti Yerizel (1998),
terdapat efek hepatoprotektor yang nyata dari senyawa flavonoid.
Ekstrak daun katuk juga memiliki kandungan vitamin C (Herbal, 2010).
Vitamin C akan mengurangi lipid peroksidasi akibat stres oksidatif yang
berpotensi menimbulkan kerusakan lebih lanjut (Nurwati, 2007). Ekstrak daun
katuk juga mengandung vitamin A dan kalsium yang dapat memperkuat integritas
sel (WHFoods).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
37
Adanya berbagai kandungan zat antioksidan dalam ekstrak daun katuk di
atas dapat melindungi serta meningkatkan kemampuan tubuh dalam mencegah
kerusakan dan kematian sel akibat stres oksidatif yang ditimbulkan dari paparan
radikal bebas NAPQI hasil metabolit parasetamol sehingga kerusakan sel hepar
dapat ditekan. Hal ini dibuktikan dengan kadar SGPT pada kelompok perlakuan
yang mendapat ekstrak daun katuk lebih rendah dari kelompok yang hanya
mendapat paparan parasetamol. Walaupun rerata kadar SGPT kelompok yang
mendapat ekstrak daun katuk lebih rendah daripada kelompok yang hanya
mendapat parasetamol, hasil perhitungan statistik menunjukkan nilai probabilitas
yang tidak signifikan.
Berdasarkan teori, seharusnya kelompok tikus putih yang mendapat
ekstrak daun katuk dosis 12,15 mg/150 gr BB tikus dan 24,30 mg/ 150 gr BB
tikus mampu menunjukkan efek mencegah kenaikan kadar SGPT yang signifikan
bila dibandingkan dengan kelompok tikus putih yang hanya mendapatkan
parasetamol. Hal ini diduga karena zat-zat bioaktif yang terkandung dalam larutan
ekstrak daun katuk yang dipakai dalam penelitian ini mengalami kerusakan akibat
fase penyimpanan yang kurang tepat. Pembuatan larutan ekstrak daun katuk yang
diencerkan dari sediaan ekstrak daun katuk kental oleh peneliti dibuat untuk
dipakai dalam perlakuan selama 7 hari, sehingga dimungkinkan fase penyimpanan
ini merusak kandungan antioksidan dan zat-zat bioaktif lainnya, karena
antioksidan akan berfungsi dengan baik bila diberikan dalam bentuk siap pakai
atau langsung dari proses pembuatan larutannya (Filippone,2010). Tikus putih
yang digunakan dalam penelitian ini juga sangat dimungkinkan mengalami stres
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
38
yang cukup tinggi. Hal ini bisa disebabkan karena kondisi ruangan yang kurang
ideal bagi tikus untuk hidup. Ventilasi ruangan yang kurang baik dapat
menyebabkan tikus menjadi stres. Penyondean suspensi parasetamol dan ekstrak
daun katuk selama 13 hari yang diberikan secara oral juga turut berperan dalam
menyebabkan tikus menjadi stres. Stres akan menyebabkan ujung-ujung saraf
mengirimkan sinyal ke hipofisis sebagai alarm, selanjutnya mengirimkan
sinyalnya ke kelenjar anak ginjal untuk melepaskan hormon kortisol. Kortisol
mempunyai efek menghambat sistem imun sehingga tubuh semakin rentan
terhadap penyakit (Corwin, 1996).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
39
BAB VI
SIMPULAN DAN SARAN
A. SIMPULAN
1. Pemberian ekstrak daun katuk (Sauropus androgynus) tidak signifikan
untuk mencegah kenaikan kadar SGPT tikus putih (Rattus norvegicus)
yang dipapar parasetamol.
2. Tidak ada perbedaan pengaruh pemberian ekstrak daun katuk
(Sauropus androgynus) yang signifikan antara dosis 12,15 mg/150
gram BB/hari dengan dosis 24,30 mg/150 gram BB/hari.
B. SARAN
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai efek hepatoprotektor
ekstrak daun katuk dengan variasi dosis dan waktu pemberian ektrak
yang berbeda.
2. Diharapkan dapat dilakukan penelitian tentang pengaruh ekstrak daun
katuk dan paparan parasetamol terhadap parameter kerusakan hepar
lainnya, seperti bilirubin total, alkali fosfatase (ALP), dan albumin
total dalam serum.
3. Perlu diperhatikan mengenai fase penyimpanan ekstrak daun katuk
yang benar.
4. Kadar zat antioksidan dalam ekstrak daun katuk dapat diketahui
dengan metode spektofotometri
5. Perlu disediakan tempat perlakuan penelitian yang kondusif.
39