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Estudio preliminar de la transferencia deE. coli resistentes a antibióticos de
reproductoras a broilers
Dra. Ana I Jiménez BelenguerDepartamento de Biotecnología
Centro Avanzado de Microbiología de AlimentosUniversitat Politècnica de València
VI Curso de Sanidad AvícolaHERRAMIENTAS DE DIAGNÓSTICO Y PREVENCIÓN
4 y 5 junio 2015
Índice
o Origen
o Estado actual
o Uso de los antibióticos en animales
o Mecanismos de aparición
o Estudio de resistencias en Broilers
o Conclusiones
o ¿Qué acciones hay que plantear?
Origen de la resistencia a antibióticos
1944Llega la penicilina a EspañaLlega la penicilina a España
1950 Primeras cepas resistentes a antimicrobianos Primeras cepas resistentes a antimicrobianos
1970Vigilancia de las resistencias a antibióticos en humanos
Aparición de multirresistenciasVigilancia de las resistencias a antibióticos en humanos
Aparición de multirresistencias
1980 Inicio vigilancia de las resistencias en animalesInicio vigilancia de las resistencias en animales
1990 La resistencia antimicrobiana emerge como gran problema de salud
Búsqueda de nuevos antibióticosLa resistencia antimicrobiana emerge como gran problema de salud
Búsqueda de nuevos antibióticos
2000+La FAO, OIE y OMS recomiendan un uso responsable y vigilancia de su uso animalLa FAO, OIE y OMS recomiendan un uso responsable y vigilancia de su uso animal
Resistencias antimicrobianas
Cadena alimentaria
Uso en humanos
Estado actual de la resistencia a antibióticos en humanos
España se encuentra entre los países europeos de mayor consumo de antibióticos y, como consecuencia, de mayor porcentaje de cepas bacterianas resistentes.
GRAM POSITIVAS
o 1/3 de las cepas de Streptococcus pneumoniae, resistentes a penicilina y macrólidos
o Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM)
o Enterococcus spp. resistente a glucopéptidos
Estado actual de la resistencia a antibióticos en humanos
GRAM NEGATIVAS
o Resistencia extensa en Enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter baumannii
o Beta-lactamasas de espectro extendido (BLEEs)
o Klebsiella pneumoniae
o Cepas invasivas de E. coli en España productoras de BLEEs han crecido hasta 13,6% en 2012
o 1% Enterobacterias productoras de carbapenemasas
o Mortalidad del 40-60%
Resistencias antimicrobianas
Cadena alimentaria
Uso en humanos
CÓDIGO DE PRÁCTICAS PARA REDUCIR AL MÍNIMO Y CONTENER LA
RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS CAC/RCP 61-2005
Estado actual del uso de antibióticos para uso animal
148 mg⋅kg-1
Entre 2010 y 2030, el consumo mundial de antimicrobianos se incrementará en un 67%
Estado actual del uso de antibióticos para uso animal
Los datos de consumo de antibióticos del año 2012 nos sitúan en tercer lugar de la Unión Europea (UE)
Estado actual del uso de antibióticos para uso animal
El gasto en antibióticos está relacionado con los patrones de resistencias que encontraremos
Estado actual del uso de antibióticos para uso animal
¿Cambio de tendencia?
Alternativas al uso de antibióticos para uso animal
Antibióticos Vacunas
Alternativas al uso de antibióticos para uso animal
Antibióticos Probióticos
¿Cómo aparecen las resistencias?
Resistencias antimicrobianas
Selección natural de
cepas resistentes
Mutaciones cromosómicas
puntuales
Adquisición de nuevos
genes
Transformación
Transducción
Conjugación
TransposonesIntegrones
Genes pre-existentes
Eventos espontáneos
Selección de mutantes resistentes a múltiples antibióticos
¿Cómo se diseminan?
o El tracto digestivo constituye uno de los reservorios más importantes de microbiota bacteriana para los animales
o actúa como reservorios para genes de resistencia
o pueden ser transferidos hacia otras especies (potencial patogénico)
¿Cómo se diseminan?
o Estudios muestran la presencia de genes BLEEs idénticos en Escherichia coli de humanos y pollos
o un alto porcentaje de éstos, aislados de pollos, comparten el mismo genotipo que los humanos
¿En qué estamos trabajando?
o Desde 2007 estudio de resistencias a antibióticos en aguas y alimentoso Salmonella spp.
o En aguas: consumo, residualeso En alimentos o Ambientales: heces de pollos
o Listeria monocytogeneso RTE
o Escherichia colio Broilers
Estudio de E. coli en broilers
o Objetivo
o Estudiar el efecto de un antibiótico de uso veterinario en un ciclo de cría de broilers
o Determinar la susceptibilidad de E. coli, aislados de heces de broilers, a diferentes antibióticos
o Estudiar la evolución de las resistencias en E. coli a lo largo del ciclo de cría
control Sin tratamiento
Dosis normal (ND)
24 mg amoxicillina
/KgOral Bebedero
Dosis baja(LD)
16 mg amoxicillina
/KgOral Bebedero
Dosis muybaja (VLD)
8 mg amoxicillina
/Kg Oral Bebedero
3 administraciones3 administracionesbroilersbroilers
Estudio de E. coli en broilers
muestreosmuestreos
Meconios1 día
Muestras cloacalesMuestreo 2 y 3
Recogida de heces cecalesMuestreo final
Estudio de E. coli en broilers
Aislamiento E.coli
Ausencia de Salmonella
UNE-EN ISO 6579 2003 “Método de detección
horizontal de Salmonella”.
amikacina (AK: 30µg)
ampicilina(AMP: 10µg)
amoxicilina-clavulánico
(AMC: 20/10µg)
ceftriaxona(CRO: 30µg)
ciprofloxacino(CIP: 5µg)
cloranfenicol(C: 30µg),
gentamicina (CN: 10µg)
kanamicina(K: 30µg)
ácido nalidíxico(NAL: 30µg),
tetraciclina(TE: 30µg)
cefalotina(KF: 30µg)
estreptomicina (S: 10 µg).
Antibióticos empleados
La resistencia se evaluó de acuerdo a los estandares del CLSI
Mét
odo
difu
sión
disc
o-pl
aca
Mét
odo
difu
sión
disc
o-pl
aca
Estudio de E. coli en broilers
p=0.7899
R35%
I4%
S61%
R37%
I4%
S59%
Administración oral
Porcentaje de cepas resistentes, sensibles e intermedias a lo largo del estudio
Estudio de E. coli en broilers
Bebedero
No hay diferencias significativas
-1,2 -0,2 0,8 1,8 2,8-1,2
-0,2
0,8
1,8
2,8
R.I
R.R
R.SG.Aminoglucósidos
G.Beta lactámicosG.Fenólicos
G.Quinolonas
G.Tetraciclinas
Estudio de E. coli en broilers
Correlación de las resistencias en las cepas de E. coli aisladas de los meconios con los distintos grupos de antibióticos empleados
Estudio de E. coli en broilers
Porcentaje de resistencias en las cepas de E. coli aisladas de los meconios con respecto a los distintos grupos de antibióticos empleados
38,4%14,3%
46,4%
32,1%
5,4%
Susceptibilidad a beta lactámicos (R+I): 52,7%
Mayores porcentajes de resistencia en aquellos antibióticos más usados
2010 30% 28%40%
2012 40% 15%
Estudio de E. coli en broilers
Pollos de 1 día TODOS con resistencia o susceptibilidad reducida a AMC
Porcentaje de resistencias en las cepas de E. coli aisladas de los meconios en los distintos antibióticos empleados
14,3% de los E. coli resistente a CIP: Tratamiento de elección en clínica
Ninguna resistencia en cefalosporinas de 3ª generación (7,14% I)
Estudio de E. coli en broilers
o Evolución de los patrones de resistencia a antibióticos a lo largo del estudio
Aumenta en todos los casos en los que se administró AMC el número de patrones de resistencias y no sólo a beta lactámicos
Estudio de E. coli en broilers
El nivel de resistencia obtenido es considerado como un buen indicador de la selección natural por la presión antibiótica y por el problema de resistencias que se pueden esperar en patógenos. (Apata, 2009)
Martins et al, 2011 encontraron pollos de 1 día que estaban colonizadospor E. coli multirresistentes previamente a su instalación (AMP,KF, T, S, CN, EN)
Dierikx et al, 2013, encontraron en pollos GPS de 1-2 días una prevalenciadel 23% de genes ESBL/AmpC en E. coli.
Dierikx et al también en pollos PS de 1-2 días encontraron E. coli (2/679) muetras de meconio (0.31%) positivas para ESBL.
Una de las granjas de pollos GPS de la que provenía había sidotratada con amoxicilina
¿qué conclusiones hemos sacado?
o Las bacterias comensales gastro-intestinales constituyen un reservorio de genes de resistencia para bacterias patogénicas
o Las resistencias están presentes desde el inicio del estudio, los pollos ya son portadores de cepas resistentes transmitidas por los progenitores, sobre todo a ácido nalidíxico y ampicilina y a amoxicilina-clavulánico
o La forma de administración (oral o por bebedero) no influye en la cantidad de resistencias seleccionadas
o Patrones coinciden con consumo antibióticos
o La presión antibiótica es ambiental
¿Qué acciones se deben tomar?
El Plan contiene en total veinticuatro medidas y ochenta y cuatro acciones
Líneas comunes para la sanidad humana y veterinaria
Estudio preliminar de la transferencia deE. coli resistentes a antibióticos de
reproductoras a broilers
Dra. Ana I Jiménez BelenguerDepartamento de Biotecnología
Centro Avanzado de Microbiología de AlimentosUniversitat Politècnica de València
VI Curso de Sanidad AvícolaHERRAMIENTAS DE DIAGNÓSTICO Y PREVENCIÓN
4 y 5 junio 2015