EFEK SENYAWA ASAM 2-(4-(KLOROMETIL)BENZOILOKSI)

BENZOAT TERHADAP AKTIVITAS DAN INDEKS ORGAN TIKUS

WISTAR JANTAN SEBAGAI PELENGKAP UJI TOKSISITAS

SUBKRONIS

NI PUTU EKA SETIAWATI

2443012228

PROGRAM STUDI S1

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS KATOLIK WIDYA MANDALA SURABAYA

2015

i

ABSTRAK

EFEK SENYAWA ASAM 2-(4-(KLOROMETIL)

BENZOILOKSI)BENZOAT TERHADAP AKTIVITAS DAN INDEKS

ORGAN TIKUS WISTAR JANTAN SEBAGAI PELENGKAP UJI

TOKSISITAS SUBKRONIS

Ni Putu Eka Setiawati

2443012228

Salah satu turunan asam salisilat yang berfungsi sebagai analgesik

adalah asam asetilsalisilat. Penggunaan asetosal dalam jangka waktu yang

panjang dapat menimbulkan nyeri epigastrium yang berat, mual, dan

bahkan dapat menimbulkan pendarahan lambung. Penelitian ini dilakukan

untuk mengetahui penggunaan jangka panjang dari senyawa asam 2-(4-

(klorometil)benzoiloksi)benzoat maka dilakukan percobaan uji toksisitas

subkronis, berdasarkan Organization for Economic Cooperation and

Development (OECD 407). Parameter yang diamati meliputi uji aktivitas,

indeks organ dan makroskopis organ lambung pada tikus wistar jantan.

Kelompok percobaan dibagi lima kelompok yaitu kelompok kontrol positif

dan satelitnya (asam asetilsalisilat 9 mg/20 gBB), kelompok kontrol negatif

(PGA 3%), kelompok uji senyawa asam 2-(4-

(klorometil)benzoiloksi)benzoat dan satelitnya (9; 18; 27 mg/200 gBB)

yang diberikan secara oral untuk jangka waktu 28 hari. Kelompok satelit

dibiarkan selama 14 hari setelah perlakuan untuk melihat apakah terjadi

perbaikan organ setelah obat dihentikan. Analisis statistik menggunakan

SPSS 17 dengan metode one way anova dan uji Tukey, dan didapatkan hasil

ada perbedaan bermakna pada organ hati antara satelit asam asetilsalisilat

dengan satelit senyawa asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat pada

dosis 9mg/200 gBB. Uji aktivitas menunjukkan terjadi penurunan aktivitas

motorik dan senyawa asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat dan asam

asetilsalisilat memberikan gejala toksisitas berupa penipisan lambung dan

terjadi tukak.

Kata kunci : asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat, toksisitas

subkronis, tikus wistar jantan (Rattus novergicus), indeks organ, asam

asetilsalisilat.

ii

ABSTRACT

EFFECT OF 2-(4-(CHLOROMETHYL)BENZOYLOXY)

BENZOIC ACID ON THE ACTIVITIES AND INDEX ORGAN OF

MALE WISTAR RATS AS A SUPPLEMENT OF SUBCHRONIC

TOXICITY TEST

Ni Putu Eka Setiawati

2443012228

One of the salicylic acid derivative that functions as an analgesic is

acetylsalicylic acid. The use of acetylsalicylic acid in the long term can

cause severe epigastric pain, nausea, vomiting, dizziness, sweating and even

can cause stomach bleeding. However, further research is conducted to

determine the long-term use of the 2-(4-(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic

acid is then performed experiments subchronic toxicity tests, based

Organization for Economic Cooperation and Development (OECD 407).

The parameters observed activity test, index organ and macroscopic gastric

organs in male Wistar rats. Experimental group divided by five groups:

positive control and its satellites (acetylsalicylic acid 9 mg / 20 gBW),

negative control group (PGA 3%), the test group of 2-(4-

(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid and its satellites (9; 18; 27 mg / 200

gBW) administered orally for a period of 28 days. Satellite groups were left

for 14 days after treatment to watched if there was a repair organ after the

drug was stopped. Statistical analysis using SPSS 17 with methods one way

ANOVA and Tukey test, and showed significant differences in the liver

between satellites with the satellite acetylsalicylic and 2-(4-

(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid at a dose of 9mg / 200 gBW.

Activity test showed decreased motor activity and the 2-(4-

(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid and give acetylsalicylic acid

toxicity symptoms such as thinning of the stomach and the mucose was

thined.

Keywords: 2-(4-(chloromethyl)benzoyloxy)benzoic acid, subchronic

toxicity, male wistar rats (Rattus novergicus), index organ, acetylsalicylic

acid.

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa yang

telah memberikan rahmat dan karuniaNya, sehingga skripsi dengan judul

Efek Senyawa Asam 2-(4-(Klorometil)Benzoiloksi)Benzoat Terhadap

Aktivitas dan Indeks Organ Tikus Wistar Jantan sebagai Pelengkap Uji

Toksisitas Subkronis dapat terselesaikan. Penyusunan skripsi ini

dimaksudkan untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar Sarjana

Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya.

Menyadari bahwa tanpa bantuan dan dukungan dari berbagai pihak

skripsi ini tidak dapat terselesaikan dengan baik, maka rasa terima kasih

yang sebesar-besarnya disampaikan kepada:

1. Drs. Kuncoro Foe, G.Dip.Sc.,Ph.D sebagai Rektor Universitas

Katolik Widya Mandala Surabaya.

2. Martha Ervina, S.Si., M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi

Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya.

3. Wahyu Dewi Tamayanti, M.Sc., Apt selaku Pembimbing I dan

Prof. Dr. Bambang Soekardjo, Apt.,SU selaku Pembimbing II

atas kesabaran untuk meluangkan waktu dalam memberikan

bimbingan, petunjuk, nasehat dan saran-saran yang membangun

untuk terselesaikannya skripsi ini.

4. Angelica Kresnamurti, S.Si., M.Farm., Apt., dan Catherina

Caroline, S.Si., M.Si., Apt., sebagai Tim Penguji skripsi yang

telah memberikan saran dan masukan berharga guna

penyempurnaan skripsi ini.

5. Idajani Hadinoto, S.Si., M.Si., Apt., dalam membimbing,

mengarahkan dan memberi nasehat serta motivasinya.

iv

6. Dosen-dosen dan staf pengajar yang tidak dapat disebutkan satu

per satu, atas ilmu pengetahuan, keahlian dan pengalaman yang

telah dibagi.

7. Kepala Laboratorium Kimia Organik Prof. Dr. J.S. Ami

Soewandi, Kepala Laboratorium Biomedik Angelica

Kresnamurti, S.Si., M.Farm., Apt., dan Kepala Laboratorium

Kimia Analisis Dra. Emi Sukarti, M.Si., Apt.

8. Laboran-laboran: Pak Heri, Mas Rendy, Pak Samsul, Pak Anang,

Mbak Mega, Mbak Tyas, Mbak Retno, Bu Nina dan Mas Tri

yang telah banyak membantu kelancaran proses penelitian, serta

doa dan dukungannya.

9. Drh. Rahmat Priyadi atas sumbangsihnya dalam analisis dan

penyediaan hewan coba.

10. Laboratorium IPA Terpadu Universitas Negeri Surabaya yang

telah banyak membantu dalam pemakaian alat Spektrofotometri

Inframerah.

11. Ayah dan Bundaku tercinta (I Wayan Subrata dan Sri Hartini),

adikku tersayang (Anggara Putra) yang selalu memberikan kasih

sayang, dukungan, motivasi serta doa.

12. Sahabat senasib seperjuanganku: Maria, Martha, Wahyu, Ninik,

Mamel, Chaterina, Casey, Cherly terima kasih banyak atas

pengorbanan waktu, tenaga dan materi yang tidak bisa

diperhitungkan satu per-satu demi skripsi ini.

13. Sahabat-sahabatku tersayang: Gek in, lisna, Susan, Liana, Frisna,

Zain, Priska, Devian, Fadal, Adri, Natan, yang telah banyak

memberikan dukungan dan motivasi dalam penelitian ini dan

terima kasih banyak atas hari-hari yang indah yang kita lewati

bersama selama kuliah.

v

14. Teman-teman angkatan 2012: Enda, Ketrin, Septin, Liana,

Frisna, Devian, Priska, Zain dan teman-teman lainnya yang tidak

bisa disebutkan satu per-satu. Sukses buat kalian semua.

15. Adik-adik angkatan 2013: Isna, Putri elva, Kartika terima kasih

atas dukungan dan doanya.

16. Kakak-kakak angkatan: Kak Dikna, kak Sintia, kak Catur, kak

Hana terima kasih atas dukungan dan doanya.

Skripsi ini jauh dari sempurna dengan keterbatasan pengalaman,

pengetahuan maupun pustaka yang ditinjau, penulis menyadari kekurangan

dalam penulisan naskah skripsi ini. Oleh karenanya diharapkan saran dan

kritik dari semua pihak agar naskah ini dapat lebih sempurna. Akhir kata,

semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi masyarakat luas pada umumnya

dan bagi dunia kefarmasian pada khususnya.

Surabaya, Desember 2015

Penulis

vi

DAFTAR ISI

Halaman

ABSTRAK………………………………………………………..... i

ABSTRACT……………………………………………………….. ii

KATA PENGANTAR……………………………………………... iii

DAFTAR ISI……………………………………………………..... vi

DAFTAR GAMBAR……………………………………………… ix

DAFTAR TABEL ………………………………………………… x

DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………. xi

BAB I. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Penelitian........................................... 1

1.2 Rumusan Masalah....................................................... 5

1.3 Tujuan Penelitian………………………………..….. 5

1.4 Hipotesis Penelitian……………………………….... 5

1.5 Manfaat Penelitian ..................................................... 6

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tinjauan tentang Asam Asetilsalisilat ...................... 7

2.2 Asam 2-(4-(Klorometil)Benzoiloksi)Benzoat............ 8

2.3 Tinjauan tentang Toksisitas Subkronis…................ 10

2.4 Tinjauan tentang Hewan Uji..................................... 12

2.5 Skrining Farmakologi............................................... 15

2.6 Uji Kemurnian Hasil Sintesis................................... 17

2.6.1. Kromatografi Lapis Tipis.............................. 17

2.6.2. Uji Titik Leleh............................................... 18

2.7 Tinjauan tentang Organ Lambung............................ 19

2.7.1 Anatomi Lambung........................................ 19

vii

2.7.2 Makroskopis Lambung................................. 20

2.7.3 Fisiologi Lambung....................................... 21

2.7.4 Patologi Lambung........................................ 21

2.8 Tinjauan tentang Indeks Organ Tikus...................... 22

2.9 Analisa Statistik…………………………................. 22

BAB III. METODE PENELITIAN

3.1 Bahan, Alat dan Hewan Coba Penelitian..................... 24

3.1.1. Bahan penelitian……………………………… 24

3.1.2. Alat penelitian………………………………... 24

3.1.3. Hewan coba…………………………………... 24

3.2 Pelaksanaan Penelitian................………………...… 25

3.2.1. Uji Kemurnian............................................... 25

3.2.2. Prosedur Uji Toksisitas Subkronis ………..... 27

3.2.3. Uji Toksisitas Subkronis Senyawa Asam 2-(4-

(Klorometil)Benzoiloksi)Benzoat................. 29

3.2.4. Pelaksanaan Uji Aktivitas............................. 31

3.2.5. Tinjauan tentang Indeks Organ.................... 31

3.3 Variabel Penelitian.....................………………….. 32

3.4 Analisa Statistik..................................................... 32

3.5 Hipotesis Statistik…………………........................ 33

3.5.1. Hipotesis Nol (H0)...................................... 33

3.5.2. Hipotesis Alternatif (HA) .......................... 33

3.6 Skema Rancangan Penelitian.................................. 34

3.6.1. Skema Sintesis Senyawa Asam 2-(4-

(klorometil)benzoiloksi)benzoat............... 34

3.6.2. Skema Uji Kemurnian Senyawa................ 35

3.6.3. Skema Uji Toksisitas Subkronis................. 36

viii

BAB IV. ANALISIS DATA DAN INTERPRETASI PENEMUAN

4.1 Hasil Pemeriksaan Organoleptis................................. 37

4.2 Hasil Uji Kemurnian…………………........................ 37

4.2.1. KLT (Kromatografi Lapis Tipis)…………..… 37

4.2.2. Titik leleh……………...................................... 40

4.2.3. Uji Senyawa dengan IR.................................... 41

4.3. Uji Toksisitas Subkronis ………………………........ 42

4.3.1. Pengamatan berat badan……………………. 43

4.3.2. Makroskopis organ lambung ………...………. 48

4.3.3. Indeks Organ..................................................... 55

4.3.4. Uji aktivitas………...……………………....... 60

BAB V. SIMPULAN DAN SARAN

5.1. Simpulan……………………………………..……... 66

5.2. Saran…………….……….......................................... 66

DAFTAR PUSTAKA……………………………………………… 68

LAMPIRAN…………………..…………………………………… 75

ix

DAFTAR GAMBAR

2.1. Struktur Asetosal……………………………………. 7

2.2. Struktur Asam 2-(4-(klorometil)benzoiloksi)benzoat 9

2.3. Organ Jantung dan Paru-paru Tikus …………........... 13

2.4. Organ Tikus ………………………………………... 14

2.5. Anatomi Lambung ………………………………… 19

2.6. Keadaan Lambung Mencit …………………............ 20

3.1. Skema Sintesis Senyawa Asam 2-(4-

klorometil)benzoiloksi)benzoate..................................... 34

3.2. Skema Uji kemurnian senyawa................................ 35

3.3. Skema Uji toksisitas subkronis................................ 36

4.1. KLT senyawa asam 2-(4-

klorometil)benzoiloksi)benzoat........................................ 39

4.2. Spektrum Inframerah (IR) dari asam 2-(4-

(klorometil)benzoiloksi)benzoat....................................... 41

4.3. Grafik hubungan antara waktu pengamatan (T)

vs berat badan (g) tikus jantan......................................... 46

4.4. Lambung yang menggelembung pada tikus kelompok asam 2-

(4-klorometil)benzoiloksi)benzoat.,........................ 49

4.5. Gambaran makroskopis mukosa lambung tikus............. 50

x

DAFTAR TABEL

2.1. Skoring Keparahan Tukak...................................... 21

3.1. Formula suspensi senyawa uji dan pembanding..... 28

3.5 Tabel Berat Badan Tikus....................................... 29

4.1. Hasil Pemeriksaan Organoleptis Asam 2-(4-(klorometil)

benzoiloksi) benzoat..................................................... 37

4.2. Hasil KLT senyawa asam 2-(4-

(klorometil)benzoiloksi)benzoat................................... 38

4.3. Hasil Uji Titik Leleh Asam 2-(4-(klorometil-

benzoiloksi)benzoat.................................................... 40

4.4. KarakteristikSpektrumInframerahAsam 2-(4-

(klorometil)benzoiloksi)benzoate................................ 42

4.5. Data penimbangan berat badan tikus kelompok kontrol dan

perlakuan............. ...................................................... 44

4.6. Data penimbangan berat badan tikus kelompok

satelit......................................................................... 45

4.7. Hasil Perhitungan Indeks

Tukak........................................................................ 52

4.8. Rata – Rata Hasil Indeks Organ Kelompok Kontrol dan

Kelompok Perlakuan.................................................. 56

xi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

A. Hasil Penimbangan Berat Badan Tikus........................ 75

B. Hasil Statistik Berat Badan …..................................... 79

C. Makroskopik Organ Lambung ……………………… 88

D. Data Perhitungan Indeks Tukak................................. 90

E. Hasil Penimbangan Bobot Organ................................ 92

F. Hasil Statistik Indeks Organ......................................... 100

G. Makroskopik Organ...................................................... 115

H. Data Pengamatan Skrining Farmakologi.................... 118

I. Sertifikat Tikus.......................................................... 133