书书书

观察性和无菌培养技术实验

实验一　显微镜下的生命世界

实验二　培养基制备和灭菌技术

实验三　细菌的简单染色和革兰

氏染色

实验四　常见食物营养成分的

鉴定

实验五　草履虫的形态结构与生

命活动

实验六　果蝇的形态、生活史和

饲养技术

显微镜下的生命世界

实验目的

◇了解普通光学显微镜的构造和各部分的性能，学习并掌握其正确的使用及维护

方法。

◇了解真核细胞的各种形态及其形态与机能的关系，理解细胞是生命体结构与生

命活动的基本单位。

◇了解真核细胞与原核细胞、动物细胞与植物细胞结构的异同点。

◇在显微镜下观察水中的各种微小生物，认识常见的细菌和真菌，进一步认识生

命的多样性。

◇学习临时装片方法、某些细胞器的活体染色方法和细菌的一般染色方法。

◇了解生物绘图的意义和方法，初步学习生物绘图技术。

一、实验原理

生命的存在具有多层次性。从宏观角度来看，在个体水平上，千姿百态的动、植物

强烈地表现出的生命多样性，使整个大自然显得生机盎然、绚丽多彩。然而，随着显微

镜的发明和显微技术的发展，人们的观察进入生命的微观世界后，不仅看到了肉眼所

不能见到的形形色色的单细胞生物和低等多细胞生物，而且越来越深刻地认识到所有

宏观生物都是多细胞生物，细胞是除病毒以外所有生命体结构与生命活动的基本单

位，同时其自身又是多层次的复杂结构体系。

生物细胞可分为原核细胞和真核细胞两大类。原核细胞由细胞膜、细胞质和核物

质等部分组成，不具有典型的细胞核结构及多种细胞器，如细菌细胞。真核细胞由原

核细胞进化而来，其内部结构与机能更复杂和多层次化。在结构上，真核细胞突出表

现为以膜系统的分化为基础，形成了有膜包围的典型细胞核和结构与功能更专一的多

种细胞器，如线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、叶绿体及液泡等。并且，构成真核生

３

第一模块

物的真核细胞种类繁多，形态各异，其形态的多样性又与其机能密切相联。

在显微镜下观察生命世界，使人们进一步认识到生命的多样性、层次性和整体性，

进一步认识到细胞的结构，以及其形态结构与机能的密切联系。

细胞内的结构在自然状态下近于无色，一般要经过染色后方可在普通光学显微镜

下显示得较清楚，这样便能形成足够的反差以区分细胞组分。不同的细胞组分对各种

染料的亲和力不同。两者间亲和力强，染色就深，否则，染色就浅或无染色。一般生物

染料不能穿透细胞膜，只有用化学试剂或热固定细胞，破坏细胞膜结构后，染料才能进

入细胞内部发挥其染色作用。有些染色剂对细胞无毒或毒性很小，并能进入活细胞内

染色，显示活细胞的某些结构，称活体染色。活体染色分体内活染和离体活组织染色

两种，体内活染是使染料进入生物体内进行染色，离体活组织染色是对离体但仍保持

生活状态的活细胞进行染色。

二、实验材料

人口腔黏膜细胞、新鲜菠菜叶、洋葱鳞茎、颤藻和池塘水，酿酒酵母菌悬液、枯草芽

孢杆菌斜面、金黄色葡萄球菌斜面、放线菌培养物、根霉培养物和平菇斜面，生霉的面

包、馒头或橘皮。

各种动植物组织器官切片标本，细菌三型制片标本，青霉素制片标本及酵母菌制

片标本。

三、实验器材与试剂

（一）器材

普通光学显微镜，放大镜，解剖器械，接种环，消毒牙签，载玻片，盖玻片，吸水纸，

擦镜纸和酒精灯。

（二）试剂

醋酸洋红染液、０．１ｍｏｌ·Ｌ－１稀碘液、０．１％碱性湖蓝ＢＢ、中性红·詹纳斯绿染液、

乳酸石炭酸棉蓝染色液、石炭酸复红染色液、０．１％美蓝染色液、５０％乙醇、香柏油、二

甲苯和０．８５％生理盐水。

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显微镜下的生命世界

四、实验操作

Ⅰ．光学显微镜的使用

（一）光学显微镜的构造

显微镜的种类繁多，结构也很复杂。但是无论哪一种显微镜，按其结构特点均可

分为机械装置和光学系统两大部分（图１１）。

图１１　显微镜的外形

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第一模块

!．机械装置

显微镜的机械装置是由精密而牢固的零件组成，主要包括镜座、镜臂、载物台、镜

筒、物镜转换器和调焦装置等。

（１）镜座　显微镜的基座，用以支持整个镜体的平稳。

（２）镜臂　其作用是支持镜筒、载物台、聚光器和调焦装置等。

（３）载物台　镜臂基部的一个方形或圆形的平台，可放置玻片标本。台中央有一

个通光孔。台上有的装有标本片夹，有的装有带有标尺的标本移动器，游标尺可用来

测量标本的大小和标记被检部分。

（４）镜筒　显微镜上部圆形中空的长筒。上端放置目镜，下端连接物镜转换器。

其作用是保护成像的光路与亮度。

（５）物镜转换器　固着在镜筒的下端，可以左右自由转动，有３～４个螺旋圆孔，为

安装物镜的部位。旋转转换器，即可把所需倍数的物镜固定在使用的位置上，使物镜

与目镜的光线合轴。

（６）调焦装置　为了得到清晰的物像必须调节物镜与标本之间的距离，使其与物

镜的工作距离相等，这种操作称为调焦。在镜臂两侧有大小调焦螺旋各一对，旋转时

可使镜筒上升或下降。大的一对是粗调焦螺旋，调动镜筒的升降距离大，旋转一周可

使镜筒移动２ｃｍ左右；小的一对是细调焦螺旋，调动镜筒距离小，旋转一周可使镜筒移

动约０．１～０．２ｍｍ。

（７）聚光器调节螺旋　在镜柱的左侧或右侧，旋转它时可使聚光器上下移动，借以

调节光线，但简单的显微镜没有这种装置。

（８）倾斜关节　为连接镜柱与镜臂的关节，可使镜体在一定范围内后倾便于观察，

但复杂的显微镜没有这种装置。

"．光学系统

显微镜的光学系统主要包括物镜、目镜和照明装置。

（１）接目镜　装于镜筒上端，放大倍数通常有５×，１０×，１６×等几种，一般常用１０×。

（２）接物镜　装于镜筒下端的物镜转换器上，通常有１０×，４０×，１００×（油浸物镜）

等几种。物镜和目镜配合所取的乘积如表１１所示。

（３）聚光器　位于载物台下面，由集光镜（一组透镜）和虹彩光圈组成。可以聚集

由反光镜反射来的光线，通过调节高低而得到强度不同的光线。光圈位于聚光器中

央，由许多铜片组成，有一操纵柄，可用铜片分开或聚合而使光圈放大或缩小，以便控

制透入的光线。根据光线的强弱，适当调节光圈，可以增加物像清晰度。

６

显微镜下的生命世界

表１１　物镜和目镜配合所取的乘积为放大倍数

目

镜

放大倍数

物 镜５× １０× １６×

１０× ５０× １００× １６０×

４０× ２００× ４００× ６４０×

　　　　　注：“×”代表倍数。

（４）照明装置　主要为反光镜（或内置光源）。反光镜为聚光镜下面的一双面镜，

镜分平凹两面，可以任意方向转动，其功能是将光源射来的光线，反射到聚光器，再射

出镜筒。平面反射平行光线，宜于强光下使用；凹面反射集中成束的光线，宜于弱光下

使用。

（二）光学显微镜的使用方法

!．安装

根据实验需要装配适当的物镜和目镜，调节聚光器的光栏，使数值孔径等于物镜

的数值孔径。

"．低倍镜的使用

总的原则是“先低倍，后高倍；先接近，后渐离”。“先低倍，后高倍”指观察任何标

本都必须先用低倍镜，因低倍镜的视野大，容易发现目标和确定观察部位。先用低倍

镜找到清晰物像后，用手移动转换器，直接换高倍镜即可。“先接近，后渐离”指将所观

察的标本放置在载物台上，转动粗调螺旋使低倍镜镜头与玻片标本的间距很小，边观

察边用粗调螺旋慢慢升起镜筒（或下降载物台），直至物像出现后再用细调螺旋调节至

物像清晰为止。具体步骤如下：

（１）检查　右手握镜臂，从镜箱内取出显微镜，左手托镜座，轻轻放在实验桌上。

先检查一下显微镜各部件有无损坏，如发现有损坏或性能不良，立即报告教师请求

处理。

（２）准备　将显微镜放于前方略偏左侧，必要时使镜筒倾斜（有的显微镜本身已经

倾斜）以便观察。转动粗调节螺旋，将镜筒略升高使物镜与载物台距离略拉开。再旋

转物镜转换器，将低倍镜对准载物台中央的通光孔（可听到“咔哒”声）。

（３）对光　打开光圈，上升聚光器，双眼同时睁开，以左眼向目镜内观察，同时调节

反光镜的方向，直到视野内光线明亮均匀为止。由于反光镜的平面镜易把其他景物映

７

第一模块

入视野，因此一般用凹面镜对光；用内置光源时，使用光亮调节器调光。

（４）放标本片　标本片的盖片朝上，将标本片放到载物台前方，然后推到物镜下

面，用压片夹压住，如有标本移动器，可用上面的弹簧夹夹住标本片，然后把要观察的

部分移到通光孔的正中央。

（５）调节焦距　总的原则是“先接近，后渐离”。先接近即从显微镜侧面注视物镜

镜头，同时旋转粗调节钮，使镜筒缓慢下降（或使载物台缓慢上升）至低倍镜头与玻片

间距离５ｍｍ左右。后渐离即再用左眼从目镜里观察视野，左手慢慢转动粗调节螺旋，

使镜筒缓缓上升（或使载物台缓慢下降），使低倍镜头与玻片间的距离逐渐增大至视野

中出现物像为止。如物像不太清晰，可转动细调节螺旋，使物像更加清晰。

（６）计算倍数　由所用的目镜放大倍数与物镜放大倍数相乘，就能算出物像与原

物的放大倍数。例如：５×的目镜和１０×的物镜所放大的物像，是原物的５×１０倍，即

５０倍。如果物像不在视野中央，就得一边观察，一边用手移动玻片。选择一个适当的

部分移至视野的中央。镜中所成的像是倒像，玻片移动方向应与物像移动方向相反。

如果按上述操作步骤仍看不到物像时，可能由以下原因造成：

第一，转动调节螺旋太快，超过焦点。应按上述步骤重新调节焦距。

第二，物镜没有对正，应对正后再观察。

第三，标本没有放到视野内，应移动标本片寻找观察对象。

第四，光线太强，尤其是在观察比较透明的标本片或没有染色的标本时，易出现这

种现象，应将光线调暗一些后，再观察。

#．高倍镜的用法

（１）依照上述操作步骤，先用低倍镜找到清晰物像。

（２）将需要观察的部分移到视野的中央。

（３）眼睛从侧面注视物镜，用手移动转换器，换高倍镜。

（４）眼睛向目镜内观察，同时微微上下转动细调节螺旋，直至视野内看到清晰的物

像为止。

如按上述操作仍看不到物像时，可能由下列原因造成：

第一，观察的部分不在视野内，应在低倍镜下寻找到后，移到视野中央，再换高倍

镜观察。

第二，标本片放反了，应把标本片放正（盖玻片向上）后，再按上述步骤操作。

第三，焦距没调好，应仔细调节焦距。

有的显微镜高倍镜与低倍镜不配套，从低倍镜转换高倍镜时，往往转不过来或撞

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显微镜下的生命世界

坏标本，如遇到这种情况，可把镜筒略升高（或下降载物台），直接用高倍镜调焦。方法

是：从侧面注视物镜，调节粗调节螺旋，使高倍镜头下降至与标本片最短距离，再观察

目镜视野，慢慢调节细调节螺旋，使镜头缓缓上升，直至物像清晰为止。

如需要更换标本片时，应该先把镜筒升高（或使载物台下降），然后把标本片移到

载物台前方，再取下。

$．油镜的使用方法

（１）先用低倍物镜观察标本的概况。

（２）更换高倍物镜，把所要观察的部分移在视野中央。

（３）把镜筒上升约１．５ｃｍ，再把油镜转到工作位置。

（４）在盖玻片上所要观察的位置滴一小滴香柏油，细心拧动粗调螺旋，使镜筒慢慢

下降（或载物台慢慢上升）。这时要从侧面仔细观察物镜前端与标本之间的距离，先使

物镜前端与油滴接触，然后再慢慢下降镜筒（或慢慢上升载物台），直至物镜前端接近

而没有碰到盖玻片为止。这步操作要特别小心，防止油镜压碎标本或损坏油镜（油镜

的工作距离约０．２ｍｍ）。

（５）眼睛从目镜中观察，拧动细调螺旋，使镜筒慢慢上升（或载物台慢慢下降）至能

看清标本。这步操作要特别注意不要把细调螺旋的方向拧错，以防压碎标本。

（６）观察完毕后，提升镜筒（或下降载物台）约１ｃｍ，把油镜转离光轴，及时做好清

洁工作。先用干的擦镜纸擦１～２次，把大部分油去掉，再用二甲苯滴湿的擦镜纸擦两

次，最后再用擦镜纸擦一次。擦拭时要顺镜头的直径方向，不要沿镜头的圆周擦。擦

拭要细心，动作要轻，不可用力擦，如果聚光器上有油滴也要同样清洁。载玻片上的油

可用“拉纸法”擦净，即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴上，在纸上滴一些二甲苯，趁湿

把纸往外拉，这样连续操作３～４次，即可清除油渍。

（７）把聚光器下降约１ｃｍ，把物镜转离光轴，使镜筒下端正好对在两个物镜之间。

下降镜筒或载物台至原来位置，把载物台上的标本移动器移到适当位置，把反光镜转

到垂直方向（或关闭内置光源开关）。

Ⅱ．细胞的形态结构

（一）真核细胞形态的观察（示范）

显微镜下观察各种动植物组织器官切片标本，了解不同组织细胞的形态特征以及

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第一模块

与其功能的关系（图１２）。

图１２　形状不同的细胞

（引自吴敏，２００１）

!．人血涂片

观察成熟的红细胞、各类白细胞形态。观察人的成熟红细胞的形态特征，该特征

与其携带Ｏ２和ＣＯ２的机能有何联系？

"．平滑肌切片

观察动物平滑肌细胞形态结构特征，该特征与其收缩机能有何联系？

#．小肠横切片

观察小肠壁内表面单层柱状上皮细胞形态结构特征，该特征与其吸收机能有何

联系？

$．兔脊髓横切片

观察脊髓灰质前角运动神经元，试述神经元胞突适应接受刺激和传导神经冲动的

形态特征。

%．小白菜下表皮平铺片

观察表皮细胞的形态及表皮上两个肾形保卫细胞围成的气孔。思考叶表皮气孔

与蒸腾作用、气体出入机能的关系。

０１

显微镜下的生命世界

（二）动物细胞的结构

!．口腔黏膜细胞涂片标本的制备与观察

（１）人口腔黏膜细胞涂片标本的制备　吸取醋酸洋红（或碘液），滴一滴于干净载

玻片中央，将消毒牙签粗的一端伸入口腔，在口腔颊内壁上轻轻刮取黏膜上皮细胞，将

刮下的白色粘性物质放入载玻片上的染液内，分散均匀。染色１０～３０分钟后，盖上盖

玻片，即用镊子夹取盖玻片的一侧，将另一侧边缘先接触载玻片上的染液，然后将整块

盖玻片慢慢盖上，注意两玻片之间不要有气泡。若盖玻片周围的染液过多，可用吸水

纸吸去盖玻片边缘多余的染液。

（２）观察　将以上制备的标本片置于显微镜载物台上，有盖玻片的一面向上。用

标本移动器的卡片卡紧，并转动标本移动器的螺旋，移动标本片，使待观察的材料处于

物镜正下方。在低倍镜下，可见人口腔黏膜上皮细胞呈扁圆形或扁平多边形。再寻找

较分散、轮廓清晰的单个细胞，移至视野中央转高倍镜观察。高倍镜下，可见细胞外仅

有一大致可辨的细胞界限，即细胞膜。扁圆形细胞核呈鲜红色（如用碘液染则为深黄

色），位于细胞中央或近中央，细胞质为浅红色（或浅黄色）。

"．人口腔黏膜细胞线粒体活体标本的制备和观察

取３～４滴中性红·詹纳斯绿染液于一干净载玻片中央。用消毒牙签刮取口腔颊

黏膜细胞，用力稍重点，以获得生活力较旺盛的细胞。将刮取物置于载玻片上的染液

中，混匀，盖上盖玻片，２～３分钟后置显微镜下观察。

先用低倍镜然后用高倍镜观察。在高倍镜下，可见颊黏膜细胞的细胞质中，散布

一些被染成亮绿色的短杆状和圆形颗粒，此为线粒体。

（三）植物细胞的结构

!．洋葱鳞片表皮细胞临时装片标本的制备与观察

（１）临时装片的制备　取一干净载玻片，滴一滴碘液在玻片中央。用尖头镊子从

洋葱肉质鳞片内表面撕下一小块膜质表皮，平铺在载玻片的碘液滴上，用解剖针将其

轻轻压入液滴中，使之展开，盖上盖玻片（操作同上）。用吸水纸吸去盖玻片周围多余

的碘液。

（２）观察　将制备好的装片标本置于显微镜下观察。先用低倍镜观察，可见许多

长柱状细胞排列整齐，彼此相联。选择其中一个较典型的细胞移至视野中央，再转换

高倍镜观察。

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第一模块

在高倍镜下可见细胞最外面为一层棕黄色较厚的结构，即细胞壁。细胞壁以内是

着色较浅、近于透明的细胞质。细胞质内有一个或几个、或大或小的透明液泡，在细胞

中央或靠近细胞壁，有一个椭圆形细胞核。调节细调螺旋，可见核内有１～２个染成棕

黄色、折光较强的核仁。细胞质外围有一薄层细胞质膜，但在光镜下不易分辨。

"．菠菜叶肉细胞叶绿体的观察

取一新鲜菠菜叶片，用镊子撕去一小块下表皮，用小刀轻轻刮取表皮以内的叶肉

细胞，置于载玻片的水滴中，分散均匀，盖上盖玻片，制成菠菜叶肉细胞临时装片标本。

将所制标本装片置于显微镜下，先用低倍镜再转用高倍镜观察，注意叶肉细胞内叶绿

体的形态和数目。

（四）原核细胞的结构

!．制备临时装片

取新鲜颤藻，用解剖针挑少许丝状体，置于载玻片上的水滴中，使藻丝分散后，用

吸水纸将水吸去。再加一滴０．１％的碱性湖蓝ＢＢ溶液，染色１～２分钟，盖上盖玻片。

"．观察

将所制装片置低倍镜下观察，可见颤藻的藻丝由单列细胞组成，细胞呈短圆柱状

或盘状，藻丝顶端细胞呈帽状。选择其中较清晰的细胞，转高倍镜观察。可清楚地看

到细胞内呈深蓝色的中央体，在细胞壁以内，中央体四周未着色的是周质。

Ⅲ．一滴池塘水中的微小生物

生命科学是实验科学，同时也是发现科学。我们知道水是无色、无味、透明的液

体。但有的水体，特别是富营养化的水体往往呈现蓝绿色、红色等颜色，而且发出很臭

的气味，这样的水体含有害物质，不能饮用。这是什么原因造成的呢？天然情况下，江

河湖泊中大型水体生物物种丰富。鱼类为什么不断长大呢？通过本次实验，我们将有

所理解，有所收获。

一滴池塘水中含有众多的微小生命，它们大多因个体微小而无法用肉眼识别，必

须借助显微镜才能观察清楚。镜下可见，水中微小生物种类繁多有单细胞植物和动

物，也有低等多细胞生物。它们是水生生物的重要组分，也是池塘生态系统食物链的

重要一环。

２１

显微镜下的生命世界

（一）制备临时装片

用浮游网到池塘采集水生生物样品，分装成两瓶，一瓶按１００ｍＬ样品加入１．５ｍＬ

鲁哥氏液的比例进行固定（鲁哥氏液：６ｇ碘化钾溶于２０ｍＬ水中，溶解后加入４ｇ碘，充

分摇动待碘完全溶解后再加８０ｍＬ水，溶液即配制完成）。另一瓶不固定，采样后立即

观察（一般不能过夜，因为时间越长，藻类植物就越少，浮游动物种类也就越少，但优势

种明显，而且个体也越大）。

用滴管吸取池塘水水样一滴于载玻片中央，慢慢盖上盖玻片，制成临时装片，置于

显微镜下观察。

学生观察两种方法获得的水样，结果有何不同。

（二）池塘水中的藻类植物

!．兰藻门

（１）颤藻属（犗狊犮犻犾犾犪狋狅狉犻犪）　植物体为不分支单列细胞的丝状体，每个细胞圆筒形

丝状体外有一极薄不易看到的胶鞘。注意丝状体是否有前后伸缩和左右摆动的现象。

在丝状体上常出现死细胞，死细胞呈双凹形，将丝状体分为几段，每一段为一藻殖段

（连锁体），藻殖段可长成新丝状体（图１３）。

（２）螺旋藻属（犛狆犻狉狌犾犻狀犪）　单细胞或多细胞组成丝体、无鞘、圆柱形，呈疏松或紧

密而有规则的螺旋状弯曲。细胞或藻丝顶部常不尖细，横壁常不明显，不收缢或收缢，

顶细胞圆形，外壁不增厚（图１４）。

图１３　颤藻

图１４　螺旋藻

３１

第一模块

（３）念珠藻属（犖狅狊狋狅犮）　念珠藻为球状或片状的胶质群体，呈蓝绿色或蓝黑色。

图１５　念珠藻属

显微镜下观察：看到在胶质内埋有许多由圆形

细胞连成的弯曲藻类。在藻丝上除营养细胞

外，尚有异形胞。异形胞的内部物质较均匀透

明、易识别，两个异形胞之间的藻丝，称为藻殖

段（图１５）。

（４）鱼腥藻属（犃狀犪犫犪犲狀犪）　植物体为单一

丝状、不定形胶质块或柔软膜状。藻丝等宽或

末端尖细，直线或不规则的螺旋状弯曲状。细

胞呈球形或桶形。孢子一个或几个成串，紧靠

异形胞或位于异形胞之间（图１６，１７）。

　　　图１６　鱼腥藻属　　　　　　　　　　　　　图１７　鱼腥藻

"．绿藻门

（１）小球藻属　为淡水中最常见的单细胞藻类。在低倍视野中，它们像绿色的小

点单独或群聚成团。换高倍镜观察，小球藻为圆形或准椭圆形，细胞内有一个杯形载

色体。

（２）衣藻属　也是常见单细胞藻类。先低倍镜后高倍镜观察，可见细胞呈卵形、椭

圆形或圆形，细胞壁较厚，胞内也存在载色体。与小球藻最大的不同是其体前端有两

根鞭毛，能游动。

（３）空球藻属　群体球形或卵形，由１６、３２或６４（常为３２）个细胞组成，群体细胞

彼此分离，排列在群体胶被的周边，群体胶被表面平滑或具胶质小刺，个体胶被彼此融

合。细胞球形、壁薄，前端向群体外侧，中央有２条等长的鞭毛，基部有２个伸缩泡。

４１

显微镜下的生命世界

色素体杯状，仅有一个种，其色素体为长线状，有１个或数个蛋白核。眼点位于细胞前

端（图１８）。

图１８　空球藻

（４）盘星藻属　植物体为盘状或星状，浮游，由２～１２８个细胞排列成为一层细胞

厚的定形群体，群体完整无孔或有穿孔，边缘细胞常有１、２或４个突起，有时突起上有

长的胶质毛丛，群体内部细胞多角形，无突起。细胞壁平滑无花纹，或有颗粒、细网纹。

幼小细胞的色素体周生、圆盘状，随细胞成长而扩散；成熟细胞具１，２，４或８个细胞核

（图１９，１１０）。

　　　　　　　　图１９　单突盘星藻　　 　　　　　　图１１０　双突盘星藻

（５）水绵属　取水绵少许，放置于玻片水滴中，盖上盖玻片，置于显微镜下观察。

植物体是由长筒形细胞连成的不分支的丝状体，每个细胞内有一条或数条呈带状

的色素体，呈螺旋形绕于原生质体外围，上有一列淀粉核。细胞核由原生质联络丝将

其与周围的原生质连着，细胞中有一大液泡（图１１１）。

取水绵接合生殖制片，观察水绵接合生殖情况。（示范）

５１

第一模块

图１１１　水绵属的生活史

６１

显微镜下的生命世界

#．硅藻门

在显微镜的低倍视野中还可以看到一类形状比较特殊的单细胞藻类———硅藻（图

１１２）。它们的形状多样，有圆形、新月形或弓形等，但细胞壁是由两个瓣片套合而成

的，转高倍镜观察，可见瓣面上有花纹。硅藻在海水尤其是淡水中分布普遍，是鱼类和

很多其他水生动物的食物，硅藻死亡后，其细胞壁形成的硅藻土有多种工业用途。

图１１２　池塘水中的部分硅藻

（三）池塘水中的微小动物

!．绿眼虫

眼虫是单细胞生物　在低倍镜下观察，可看到许多绿色游动的小虫子，这就是眼

虫（图１１３（ｆ），图１１４（ａ））。找到一个游动缓慢的眼虫，移至高倍镜下观察可见，眼虫

的前端钝圆，后端尖削，虫体前端有一个红色的眼点，细胞内有许多绿色的椭圆形小体

———叶绿体，因此身体呈绿色，并因这两个特征被称为绿眼虫。将光线调得暗些，可看

７１

第一模块

见虫体的前端有一根鞭毛在不停地摆动，正是这根摆动的鞭毛带动身体运动。

"．喇叭虫

在低倍镜下移动装片，寻找单细胞动物喇叭虫（图１１３（ｃ），１１４（ｂ））。其虫体可

伸缩，伸展时，体呈喇叭形；体表有成行的纤毛，口围有一圈口缘小膜带，顺时针旋至口

旁。多数种类的大核呈念珠状或长棒状；小核多个、极小。

图１１３　池塘水中的部分微小生物

（引自吴敏，２００１）

#．钟虫

在低倍镜下继续寻找钟虫（图１１３（ｄ），１１４（ｃ））。钟虫形体似倒置的钟，钟口边

缘有纤毛，纤毛不停地快速摆动，虫体其他部分无纤毛。反口端有一柄，钟虫凭借柄附

于水草或其他物体上，轻触载玻片，可见柄能伸缩。钟虫是单细胞动物。

$．大草履虫

在低倍镜视野中，继续寻找较眼虫稍大的单细胞动物———大草履虫（图１１３（ｇ），

１１４（ｊ））。草履虫一般运动迅速，为了限制草履虫的游动以便观察，制作装片时，将少

许棉花撕松，铺在载玻片上，滴一滴池塘水，盖好盖玻片。如果草履虫运动仍很迅速，

可将吸水纸放在盖玻片的一侧吸去部分水（注意不要吸干）再进行观察。

在低倍镜下可见虫体酷似倒置的草鞋底。将光线调暗一些，可看到虫体满覆纤

毛，不时地摆动。

８１

显微镜下的生命世界

%．轮虫

轮虫是体型极小的多细胞动物。在低倍镜下观察，虫体前端呈轮盘状，沿轮盘边

缘丛生着纤毛，纤毛不停地摆动，使虫体运动。身体中部即躯干部膨大，其内是内脏。

躯干部向后渐削细，为足部。调节标本移动器，将轮虫的足部移至视野中央，其足末端

有细细的趾附着于玻片或其他物体上（图１１３（ｈ），１１４（ｄ））。

&．常见的其他部分微小动物

如水蚤（图１１４（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）），球虫（图１１４（ｈ）、（ｉ））。

图１１４　池水中的部分微小动物

９１

第一模块

Ⅳ．常见的细菌和真菌

细菌属原核生物，一般直径在１μｍ（１０－６ｍ）左右，需借助显微镜来观察，细菌形态

千差万别，但基本形态可分为球状、杆状和螺旋状三种（图１１５（ａ））。丝状原核生物放

线菌由分支发达的菌丝组成，根据菌丝的形态和功能又可分为营养菌丝（基内菌丝、基

质菌丝）、气生菌丝和孢子丝三种（图１１５（ｂ））。

霉菌、酵母菌以及蘑菇等均是真菌，属真核生物。霉菌菌体由菌丝构成，菌丝呈管

状，直径约２～１０μｍ，在固体培养基上，部分菌丝伸入培养基内吸收养料，称为营养菌

丝；另一部分则向空中生长，称为气生菌丝；有的气生菌丝发育到一定阶段，分化为繁

殖菌丝（图１１５（ｃ））。酵母菌是一类单细胞的真核微生物，一般呈卵圆形、圆形、圆柱

形或柠檬形（图１１５（ｄ）），大小约（１～５）μｍ×（５～３０）μｍ，最长可达１００μｍ。蘑菇是

大型真菌（图１１５（ｅ））。

（一）细菌类

!．观察细菌三型制片标本

先在低倍镜下找到待观察的样品区域，并用标本移动器将其移至视野中央。然

后，将低倍镜移开，在待观察的样品区域滴一滴香柏油，再用油镜观察。注意识别球

状、杆状和螺旋状三种细菌形态，观察在细菌细胞中是否有明显的细胞核。观察完毕，

清洁油镜头。

"．活菌形态观察（示范）

取两块载玻片各滴一滴生理盐水，用牙签分别挑取少量枯草芽孢杆菌和金黄色葡

萄球菌培养物，涂匀，盖上盖玻片，用相差显微镜观察。

#．采用印片法观察放线菌形态

（１）取样　用解剖刀将平板上的菌连同培养基切下一小块，菌面朝上放在一载玻

片上。

（２）印迹　取另一洁净载玻片置酒精灯火焰上微热后，盖在菌上，轻轻按压，使培

养物（气丝、孢子丝或孢子）粘附（“印”）在该载玻片的中央。

（３）固定　取下已印迹的载玻片，有印迹的一面朝上，通过微火２～３次固定，此时

用手摸载玻片反面，以不烫手为宜。

（４）染色　将印迹载玻片置水平位置，滴加石炭酸复红染液覆盖印迹，染色约１

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