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MANUAL DE PARASITOLOGIA

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Versión: 1

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL DE LA

VEGA – PUESTO DE SALUD DE NOCAIMA Página 2 de 2

Elaborado Por :

Francia Contreras

Revisado Por : Molchizu Arango

Aprobado Por :

Hernando Duran Cargo: Lider Laboratorio clinico Cargo: Asesora Calidad- planeacion Cargo: Gerente

Fecha: 24/01/2019 Fecha: 21/01/2019 Fecha: 21/01/2019

ESE HOSPITAL DE LA VEGA


LABORATORIO CLINICO


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1. OBJETIVO:

Dar a conocer como se realizan los exámenes que se ejecutan en el área de parasitología en el laboratorio clínico de la ESE Hospital de la Vega

2. DEFINICIONES:

Dentro de los análisis que se realizan en el laboratorio encontramos las pruebas parasitológicas que como su nombre lo indica se usa para la búsqueda de parásitos; en el laboratorio clínico estas son las que nos permiten identificar parasitos causantes de gastroenteritis o EDAS en la población de la Vega, dentro de las cuales encontramos el coprológico y el coproscopico que a diferencia del coprológico incluye azucares reductores y sangre oculta en materia fecal


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3. MATERIALES Y EQUIPOS

-Solución salina.

-Lugol.

-Palillos.

-Laminas portaobjetos.

-Laminillas.

-Tiras para pH.

-Microscopio.

-Sangre oculta: BIOTECH

-Azúcares reductores: BENEDICT

4. ORIENTACIÓN:

4.1. COPROLOGICO

4.1.1. EXAMEN MACROSCOPICO

Es importante observar:

Consistencia de las heces y clasificarlas en:

� Líquidas. � Blandas. � Duras.

-Color.


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-Presencia de moco.

-Presencia de sangre.

-Presencia de parásitos adultos.

4.1.2. EXAMEN MICROSCOPICO

� En un portaobjetos se coloca separadamente una gota de solución salina (0.85%) y otra gota de Lugol.

� Con un palillo se toma una pequeña porción de materia fecal realizando una suspensión primero en la gota de solución salina y luego se repite este procedimiento en la gota de Lugol

� Se cubren con laminillas y se lee en 1Ox y luego en 40x. � Los parásitos móviles (trofozoitos) se observan en solución salina, el Lugol hace resaltar los

núcleos de los protozoos y da color café a los huevos y larvas. � Además de las formas parasitarias se deben observar otros como: � Leucocitos: se informa el número de leucocitos/campo de 40x. � Hematíes: se informa número de Hematíes/campo de 40x. � Flora bacteriana: se informa disminuida, normal o aumentada.

� También es importante reportar la presencia de: � Cristales de Charcot-Leyden. � Almidones. � Ácidos grasos. � Fibras musculares

Observaciones:


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� Si la muestra contiene sangre o moco se debe tomar de esta parte para realizar el montaje.

� La muestra una vez montada en solución salina y Lugol debe examinarse en el menor tiempo posible para tener mayor posibilidad de observar los trofozoitos con todas sus características de movilidad y morfología nuclear.

� Si esto no es posible se deben colocar en una cámara húmeda hasta el momento del análisis.

4.1.3. INFORME

� Si es positivo para parásitos se debe anotar:

-Forma de vida del parásito observado (quiste, trofozoito, larva, adulto).

-Género y especie al cual pertenece la forma parasitaria observada (No se realiza cuantificación).

� Si es negativo para parásitos se debe informar

No se observan parásitos intestinales en la muestra examinada.

La presencia o no de parásitos debe ir acompañada del reporte de Cristales de Charcot-Leyden, Almidones, Ácidos grasos, Fibras musculares si están presentes.

4.2. COPROSCOPICO


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Este examen se utiliza para la investigación de parásitos y/o otras causas de diarrea.

Incluye:

Examen directo para investigación de parásitos.

2.- pH y azucares reductores.

3.- Leucocitos.

4.- Hematíes.

5.- Levaduras.

6.- Sangre oculta a solicitud expresa del médico.

• Para la realización de éste examen se debe solicitar en el laboratorio una caja para la muestra de materia fecal o un frasco plástico en caso de muestras muy diarreicas.

• Cuando se requiera investigar parásitos en muestras no diarreicas se debe enviar materia fecal para procesar Coprológico corriente considerándose este examen no urgente.

4.2.1. EXAMEN DIRECTO PARA INVESTIGACIÓN DE PARASITOS

Se sigue la misma técnica de montaje realizada para el coprológico. En el examen microscópico se buscan formas de trofozoitos, quistes, huevos o larvas. El informe es igual que el utilizado para el Coprológico.

4.2.2. PH Y AZUCARES REDUCTORES


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PH

Muestra: Materia fecal a la cual se le realiza una dilución así:

Materia fecal (tamaño de una lenteja) Agua destilada 1 ml

Introducir una pequeña tira de papel indicador de pH en la dilución hecha anteriormente y leer según la carta de colores de la casa comercial.

Comentario:

En diarrea por bacterias invasivas, generalmente el pH observado es alcalino. En diarreas de origen tóxico el pH es neutro. En diarrea de tipo viral el pH es ácido.

AZUCARES REDUCTORES

• Método: Benedict-Cualitativo :

• Fundamento del Método: El método cualitativo con reactivo de Benedict, contiene

ión cúprico formando un complejo con citrato en solución alcalina caliente. La glucosa

y otras sustancias reductoras reducen el sulfato cúprico, de color azul a sulfato

cuproso formando hidróxido cuproso amarillo o de óxido cuproso rojo que es

insoluble. Que es un azúcar reductor Cualquier azúcar que forme un aldehído en

presencia de una solución alcalina es un azúcar reductor. Los tipos de azúcares

reductores son glucosa, fructosa, lactosa, maltosa, galactosa.,

• Utilidad clínica: Tiene importancia clínica para detectar deficiencia de enzimas

intestinales como la lactosa debido a una deficiencia congénita o daños inespecíficos


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a la mucosa. Los azúcares son rápidamente absorbidos por la porción superior del

intestino delgado. Sin embargo pueden permanecer en el intestino y causar diarreas,

ocasionadas por la presión osmótica de los azúcares no absorbidos en el intestino.

Esta prueba se realiza en pacientes que se sospecha son intolerantes a la lactosa.

La intolerancia a la lactosa se produce cuando el intestino delgado no produce

suficiente lactasa. Ventajas del método:

• Muestra: Materia fecal fresca

• Contraindicaciones: Muestras contaminadas con orina. Muestras recolectadas en

pañales o superficies absorbentes.

• estabilidad de la muestra:

Congelada Refrigerada Ambiente

(0°C) (2-8°C) (15-25°C)

Materia fecal Materia fecal Materia fecal

No almacenar Hasta 24 horas No almacenar

• Características de los reactivos suministrados: Reactivo de Benedict: Listo para

usar. Almacenar refrigerado de 15-25°C.

• Control positivo: dextrosa en polvo.


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• Estabilidad de los reactivos: El reactivo de Benedict es estable por más de 1 año

almacenado a la temperatura recomendada (Ver fecha de expiración en el respectivo

rótulo).

• Procedimiento

- Observaciones: Antes de iniciar cualquier procedimiento, por favor lea

cuidadosamente el inserto.

- TECNICA: En un tubo marcado problema pipetee: 5 ml de reactivo de Benedict,

agregue 3 gotas de materia fecal si la consistencia es líquida, en caso de ser

sólida tome una porción con un asa y mézclela completamente en el tubo marcado

problema. En otro tubo marcado control pipetee 5 ml de reactivo de benedict y

adicione una pequeña cantidad de control positivo en polvo, aprox 40 mgs (una

pizca con punta de cucharita). Calentar durante 1 minuto el mechero o en un

recipiente con agua hirviendo durante 3 minutos. Dejar enfriar.

- Examinar inmediatamente para saber si hay cambios de color o precipitados.

- Interpretación de los Resultados:


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Se informa desde cero hasta cuatro cruces con el siguiente criterio:

Color-Aspecto Resultado Concentración

(Presencia de Glucosa) aprox. de mmol/l

Azul transparente Negativo 0

Azul o enturbiamiento Huellas 14

Verde no precipitado Huellas 14

Verde precipitado Amarillo 1 + (+) 28

Desde Amarillo hasta Verde Oliva (oscuro) 2+ (++) 56

Castaño a Marrón 3+ (+++) 83

Naranja o Rojo Ladrillo 4 + (++++) 111 o más

Valores normales: Prueba de Benedict cualitativa = Negativa

4.2.3 LEUCOCITOS


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• Estas células en materia fecal, generalmente se encuentran asociadas a moco y se observan en diferentes enfermedades intestinales.

• Se cuenta el número de leucocitos observados por campo de 40X y se informa:

• Negativo: 0-5 leucocitos por campo.

• Positivo: Más de 5 leucocitos por campo (en por lo menos 5 campos)

• Si el resultado es positivo se realiza un extendido delgado de materia fecal y se colorea con Azul de metileno de Loeffler, se cuentan 100 células y se diferencian entre polimorfo nucleares y mononucleares.

Interpretación:

Los polimorfos nucleares predominan en:

• Shigelosis

• Colitis invasiva por E. coli

• Colitis ulcerativa.

Los mononucleares se encuentran con mayor frecuencia en fiebre tifoidea y E.

histolytica. Los leucocitos están ausentes en diarreas por virus, giardias y coccidias

4.2.4.. HEMATIES

Se informan por campo de 40X, se observan en hemorragias del colon, hemorroides y fisuras sangrantes.

4.2.5. LEVADURAS

Pueden observarse en condiciones normales, pero aumentan notoriamente cuando existe desequilibrio de la flora bacteriana, especialmente en la terapia con antibióticos.


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4.2.6. SANGRE OCULTA

Principio de la prueba:

La hemoglobina tiene una actividad semejante a las peroxidadas produciendo oxidación del ácido alfaguayacónico por medio del peróxido de hidrógeno, a una quinona de color azul.

Interferencias:

� Algunos medicamentos como aspirina, hierro, fenilbutazona, indometacina, pueden causar irritación de la mucosa gastrointestinal y por tanto sangrado intestinal en algunos pacientes.

Otras circunstancias como hemorroides, periodo menstrual o lavado dental pueden igualmente producir resultados falsos positivos.

� Algunos alimentos como rábanos y los nabos poseen actividad semejante a las peroxidasas por tanto deben suprimirse de la dieta antes de realizar la prueba.

� Si el paciente tiene uno o varios resultados positivos se debe repetir la prueba después de una dieta libre de carnes y rica en, consumiendo vegetales crudos o cocidos como lechugas, espinacas, mazorcas; frutas como manzanas, uvas, ciruelas pasas, maní, etc.

� Esta dieta no solo ayuda a reducir resultados falsos positivos sino también a descubrir lesiones que producen sangrado intermitente o esporádico.


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EXAMEN MACROSCOPICO

EXAMEN MICROSCOPICO

-Consistencia.

-Color.

-Presencia de moco.

-Presencia de sangre.

-Presencia de parásitos

Se evalúa:

Se realiza montaje

-Flora bacteriana. -Leucocitos. -Hematies. -Almidones. -Acidos grasos. -Cristales. -Fibras musculares. -Solución salina: Trofozoitos. -Lugol: Quistes, larvas y huevos.

Se observa:

SE REALIZA


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COPROSCOPICO

EXAMEN MACROSCOPICO

Y EXAMEN MICROSCOPICO

COMO SE REALIZA EN EL COPROLOGICO.

pH AZUCARES REDUCTORES

SANGRE OCULTA

Se realiza dilución:

1 mL solución salina + materia fecal (tamaño de una lenteja)

Se introduce una tira de papel de pH y se lee según la carta de colores.

Se realiza disolución:

3 mL DE REACTIVO DENEDICTa)

Agrera 1 gr mas o menos

Calentar hasta ebullicion

Color verde: Positivo. Color azul: Negativo.

Desenrosque el tapón del

tubo de muestras y retire el

aplicador

Aleatoriamente perfore el

espécimen fecal en por lo

menos cinco (5) puntos

diferentes.

Elimine el exceso de muestra del eje y

ranuras exteriores. Asegúrese de que

la muestra permanezca en el interior

de las ranuras. Esta cantidad es

suficiente para realizar la prueba.

Vuelva a colocar el tubo dentro

del contenedor de prueba y

apriete bien.Agite el tubo de

extracción enérgicamente.

Mantenga el tubo boca arriba, gire la

tapa. Vierta 2 gotas de la solución en

la almohadilla de muestras en el

dispositivo. No sobrecarge el

dispositivo con muestra.

Programe el cronómetro. Los

resultados pueden leerse en el

transcurso de 10 minutos. Los

resultados positivos son visibles en

un tiempo de 1 minuto.

NEGATIVO

POSITIVO


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BiBLIOGRAFIA

BOTERO D, RESTREPO M.: Parasitosis humana, 1992; 17:379.

KONEMAN, ALLEN: Diagnóstico microbiología, 1992; 15:718.

JAWETZ E: Microbiología Médica 1992; 31:359.

MURRAY P: Microbiología Médica 1992; 32:349.

VILLEGAS S: Manual de Parasitología 1989.

PÉREZ D: Manual de técnicas de la sección de parasitología.

HENRY BERNARD JOHN, “Diagnósticos y Tratamiento clínico por el laboratorio”. Masson-

Salvat Medicina, 9ª edición, Barcelona 1993 páginas 417-420

WINKELMAN J.W., CANNON Y HENRY R.J. “Química clínicaBases y Técnicas”. Editorial

JIMS, 2ª edición Barcelona (España) 1980 páginas 1307-1313.

NORBERT W. TIETZ, “Química Clínica Moderna”. Interamericana 1ra. Edición, México 1970

páginas 168-69.


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