Upload
nguyentram
View
217
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Experimentáln navozenáanafylaktická reakce u pokusného
zví ete
Imunitní systém
• Schopnost rozpoznatcizí ástice odvlastních a reagovatproti nim
• Základní funkce– Obranyschopnost
(odpov organismu naohrožení)
– Homeostáza (odstra ování starých apoškozených bun kudržení strukturální afunk ní integrity)
• Orgány imunitníhosystému- centrální (kostní d ,brzlík)- periferní (lymfatickéuzliny, slezina, mimouzlinoválymfatická tká )
Bu ky imunitního systému
Složky imunitního systému
• B-lymfocyty– tvorba protilátek (Ig)- 5 t íd (IgG, IgA, IgE, IgM, IgD)
• T-lymfocyty– p ímá likvidace bun k napadených mikroorganismy– regulace funkce ostatních bun k
• Fagocyty– specializované bu ky schopné pohlcovat a ni it cizí ástice
- polymorfonukleáry (neutrofilní granulocyty)- monocyty
• Komplement– kaskáda bílkovin vedoucí k rozpadu bu ky– p ivolání dalších bun k– ozna ení patogen pro fagocytózu– aktivace a degranulace mastocyt
Reakce imunitního systému
• Fyziologické- obranná reakce = zán t(soubor reakcí tkání napatogenní podn t s cílemodstranit p inu, poškozenétkán a obnovení p vodníhostavu) Akutní zán t
• Patologické– autoagresivní reakce
- chronický zán t- alergie, autoimunitní reakce- odhojení transplantované tkán
Poruchy imunitního systému
• Imunodeficity- neschopnost fyziologické imunitní reakce- snížená obranyschopnost
- primární (deficit n které ze složek imunitního systému)- sekundární (infekce HIV, chronické infekce, ozá ení, chemoterapie,nádory,..)
• Reakce p ecitliv losti (hypersenzitivita)- alergie- chronické zán ty- autoimunitní nemoci
Základní pojmy k hypersenzitivnímreakcím
• Hypersenzitivita – nadm rná,nep im enáaktivace imunitního systému
• Alergie – neadekvátn zvýšená reakce na ur itýantigen (alergen) z prost edí
• Anafylaxe (Anafylaktický šok) – generalizovaná,život ohrožující reakce se sou asným postižením víceorgánových systém .
• Atopie – vrozená dispozice k rozvojihypersenzitivní reakce I.typu
Klasifikace hypersenzitivních reakcí(dle Gella a Coombse)
• Typ I – asná/okamžitá reakce, zprost edkovanáprotilátkami typu IgE
• Typ II – cytotoxická reakce, primárnzprost edkovaná IgG nebo IgM a komplementem
• Typ III – zprost edkovaná imunokomplexy(IgG/IgM)
• Typ IV – pozdní, bu kami zprost edkovaná
• Typ V – zprost edkovaná antireceptorovými protilátkami
Hypersenzitivita II. typu
• Cytotoxická, zprost edkovaná protilátkami typu IgGnebo IgM proti antigen m na povrchu bun némembrány destrukce bu ky
1. Komplementem zprost edkovaná destrukce bun k cytolýza,fagocytóza
2. Imunoglobuliny zprost edkovaná (ADCC)
- Antigen – p irozená sou ást b.membrány (cizorodá bu ka) x cizorodábílkovina na povrchu b.membrány (virový protein)
- endogenní antigeny i exogenní chemické látky (léky)- reakce po aplikaci n kterých lék (p . hemolytická anemie,
trombocytopenie, granulocytopenie)
Hypersenzitivita III.typu
• tvorba imunokomplex (Ag-Ig) –IgG n. IgM proti rozpustnýmantigen m
• cirkulace v ob hu• p irozená fagocytóza (makrofágy)• nedostate ná fce imunitního
systému – perzistence v cévníchst nách a tkáních – aktivacekomplementu – lokální zán tliváreakce
• glomerulonefritida, vaskulitida• Generalizovaná forma – akutní
sérová nemoc
Hypersenzitivní reakce IV.typu
• Pozdní, zprost edkovaná antigen-specifickými T-bu kami
1. Fáze senzibilizace- penetrace antigenu (haptenu) pokožkou p íjem a zpracováníantigenu APC (Langerhansovy bu ky) migrace lymfatickými cévami doregionálních uzlin aktivace T- bun k produkce pam ových T-bun k
transport do k že
2. Efektorová fáze (opakovaná expozice antigenu)- zachycení antigenu APC p edložení antigenu senzibilizovanýmpam ovým bu kám (T-bu ky) sekrece cytokin z T-bun k (IFN- ,IL-17) aktivace a migrace monocyt do poškozené tkán – p em nav makrofágy lokální tká ová reakce
Charakteristické projevy
• kontaktní dermatitida– kosmetické p ípravky, léky, kov (nikl, chrom)
• Koch v fenomén– reakce na tuberkulinový test – po s.c. aplikaci –
u senzibilizované osoby projevy lokální reakce(z ervenání)
• farmá ská plíce– pneumonitida – inhalace org.látek– námahová dušnost, kašel, hore ka,..
Hypersenzitivita typu I
- Imunopatologická reakce I.typu zprost edkovanáIgE
• Alergie – lokalizovanáreakce (slizni ní kontakt salergenem)- atopická rýma- bronchiální astma- potravinové alergie- atopická dermatitida
• Anafylaxe – závažná,systémová, potenciáln životohrožující reakce(parenterální p ístupalergenu)
Patogeneze alergických reakcí
iny anafylaktické reakce
• IgE depend.mechanismy- Hmyzí jed- Potraviny, potravní aditiva- Léky- Sezónní alergeny - pyl,
prach,..- Latex- Biologické materiály
• Idiopatická anafylaxe
• Anafylaktoidní reakce- Fyzikální faktory (cvi ení,
chlad, teplo, UV,..)- Léky (opiáty)- Etanol
Klinické projevy
• Závisí na:• Stupni senzibilizace pacienta• Míst vstupu alergenu do
organismu• Typu alergenu a jeho potenci
Klinické projevy
• Celkové - úzkost, neklid, slabost,parestézie, sucho, abnormální chu vústech
• K že, sliznice – sv ní, zarudnutí,kop ivka, otok okolo o í, jazyka, rt ,..
• GIT – nausea, zvracení, pr jem,ovité bolesti b icha
• Respira ní trakt – otok horních cestdých., bolest na hrudi, dušnost,bronchospasmus, kašel, hypoxemie,centrální cyanóza
• KVS – hypotenze, tachykardie, arytmie,ob hové selhání, bledost, kardiogenní šok,otok plic, zástava srdce
• UGT – inkontinence mo i• CNS – poruchy zrakového vnímání, bolest
hlavy, poruchy v domí
Terapie
• Symptomatická- antihistaminika- kortikosteroidy – orální, lokální- blokátory cyklooxygenázové dráhy- bronchodilatanty - inhala
• Celková- epinefrin (adrenalin) (i.v.)
• Prevence– vylou ení alergenu z prost edí- desenzibilizace, specifická imunoterapie- aplikace epinefrinu (self-injected)
Praktikum
Cíl praktika
Opakovaná aplikace antigenu (ko ské sérum) s.c. po 3 dnech
Za 3 týdny od za átku senzibilizace
Odb r krve v.auricularis (2ml + heparin) na hematologickévyšet ení
Aplikace 3 ml ko ského séra i.v.
1. Odb r krve z v.auricularis, p íp. intrakardiáln (2ml + heparin) nahematologické vyšet ení.
2. Zhotovení nát ru periferní krve.3. Stanovení po tu krevních element (leukocyty, trombocyty,
eozinofily).
Úkoly a provedení
• Sledování pr hu anafylaktické reakce (videozáznam)
• Srovnání po tu krevních element (p ed a po prob hléreakci)
• P íprava a zhodnocení nát ru periferní krve (ze vzorked a po anafylaxi)
Stanovení po tu krevních element
I. Hematologickéautomaty
II. Mikroskopicky(po ítací kom rky)
• Leukocyty• Trombocyty• Eozinofilní granulocyty
Zp sob po ítání krevních element
Leukocyty
Pot eby:• Krev• Türk v roztok• Sklen ná bani ka se zátkou• Mikropipety• Bürkerova kom rka s krycím
sklí kem• Mikroskop
Postup:• Do bani ky p eneseme 475 l
Türkova roztoku, p idáme 25l krve.
• Uzav eme zátkou, šet npromícháme a necháme 2-3min.stát.
• Naplníme Bürkerovu kom rku.• Po ítáme 50 tverc a
násobíme100x
L= 50…..x 100(po et Leu/1 l)
Trombocyty
Pot eby:• Krev• Prokain• Bani ka se zátkou• Mikropipety• Bürkerova kom rka• mikroskop
Postup:• Do bani ky s prokainem p idáme
25 l krve, ekáme 20 min. nahemolýzu Ery.
• Prot epeme, naplníme Bürkerovukom rku.
• Po ítáme ve 20 obdélnících.T= 20…..x 1000 (po et Trb/ 1
l)
lov k …. 150-300 tis./ lKrálík …..cca 130 tis.-1 mil./ l
Eozinofily
Pot eby:• Krev• Dunger v roztok• Mikropipety• Bani ka se zátkou• Bürkerova kom rka• mikroskop
Postup:• Do bani ky s 475 l Dungerova
roztoku p idáme 25 l krve, 15min. ekáme na obarveníeozinofil .
• Promícháme a naplnímeBürkerovu kom rku.
• Po ítáme na celé ploše kom rky.Eo= 20 x 11,1 (po et x 103/ 1 l)
íprava krevního nát ru
Granulocyty
• Eosinofilní- Dvojlalo natá jádra- Specifická granula (barví se
eosinem)- obsahují enzymy,cytotoxické proteinycytokiny
- Vyšší množství ve sliznici st ev,plic a v k ži
Granulocyty
• Basofilní- Lalo naté jádro, p ekryté
granuly- Specifická granula – obsahují
histamin, heparin a další látky
Granulocyty
• Neutrofilní- Jádro -2-5 lalok -spojena
filamenty- Cytoplazma – sv tlá, specifická i
nespecifická granula- Azurofilní granula- Schopnost fagocytózy
Funk ní vývoj neutrofilních granulocyt
Agranulocyty
• Lymfocyty- B – lymfocyty (15%)- T – lymfocyty (80%)- Nulové bu ky (5%)- jádro – kulaté/oválné- Cytoplazma – tenký proužek
Agranulocyty
• Monocyty- Oválné nebo podkovovité jádro- Cytoplazma – modrošedá –
granula- Nezralá forma makrofág
(tkán )
Diferenciální rozpo et leukocyt
• Stanovení procentuálníhozastoupení jednotlivýchdruh bílých krvinek
• Po et jednotlivých druh seur uje nejmén na 100 Leu
• Ur uje se v nát ru obarvenémLeuko difem 200
• Roložení Leu v nát ru jenerovnom rné
prohlížet nát r meandrovit
– V tší Leu – na okrajích(mono, Eo)
– Menší – ve st edu (lymfo)
Procentuální zastoupení jednotlivýchdruh bílých krvinek
Diferenciální rozpo et u laboratorníhokrálíka
• Po et leukocyt …cca 6-12 tis.mm-3
- Neutrofilní granulocyty 8-50%
- Eosinofilní granulocyty 1-3%
- Bazofilní granulocyty 1-8%
- Lymfocyty 20-90%
- Monocyty 1-4%
Záv r
• Záznam výsledk vyšet ení periferní krve do tabulky• Srovnání hodnot p ed a po anafylaxi
kuji za pozornost