(Aus der ]~eichsanstalt ffir Mutter- und S~uglingsfiirsorge, Wien XVIII. Direktor: Hofrat Prof, Dr. s Moll.)

Experimentelle Untersuchungen fiber die Ausscheidung yon Kalk, Phosphor und Kohlens~iure naeh Yerabreiehung yon

gro•en Vigantoldosen.

Von Dr. Josei Warkany und Ing.-Chem. Dr. techn. Alfred Wasitzky.

(Eingegangen am 22. April )932.)

Zum biologischen Nachweis des bestrahlten Ergosterins wurde yon Warkany 1 eine Versuchsanordnung angegeben, die es ermSglicht, im Zeitraum yon 24 Stunden den qualitativen Nachweis ffir das Vor- handensein gr61~erer 5~engen yon Vitamin D zu erbringen. Auf Grund neuerer Untersuchungen yon Winda'us 2 sowie GySrgy und Popoviciu 3 schien es, daft diese Reaktion nur den toxischen, nicht aber auch den antirachitischen Faktor des bestrahlten Ergosterins erfaBt. Nachdem es aber gehmgen ist, das Vitamin D rein darzustellen 4, kommen Windaus und Liittringhaus ~ zu dem Schlussel dab die Giftwirkung der Bestrah- lungsprodukte tats~ehlich durch die Vit amine bedingt ist und eine wirkliche Hypervitaminose darstellt. Es ist demnach die genannte Ver. suehsanordnung geeignet, Vitamin D in kurzer Zeit biologisch naehzu- weisen und uns darfiber hinaus fiber die Wirkungsweise des bestrahlten Ergosterins AufschluB zu geben. Das Prinzip der Methode besteht darin, da6 Kaninchen, welche bei Grfinfutter im Harn keine Phosphate ausscheiden, nach peroraler Verabreichung von 20--100 mg bestrahltem Ergosterin eine Ausscheidung Yon groBen Phosphormengen zeigen. Wir haben diese Untersuchungen nunmehr auch auf die Ausscheidung yon Kalk und Gesamtkohlensi~ure ausgedehnt, und es sollen nun im folgenden die Versuchsergebnisse berichtet werden.

Kaninchen yon 1000--2500 g Gewicht ,wurden durch 1--2 Tage ausschliei31ich mit Grfinfutter (frischem Wiesengras oder Griinkohl) er- n~hrt, bis der Harn frei von anorganisehen Phosphaten .war; nun er- hielten die Tiere 0,2 ccm einer 10proz. 61igen L6sung yon bestrahltem Ergosterin. Vor sowie 24, 48 und 72 Stunden nach der Ergosterin- verabreiehung wurden im Harn die anorganischen Phosphate, der Kalk und die Gesamtkohlens~ure quanti tat iv bestimmt. Die Phosphor- bestimmung wurde nach Bell-Doisy-Brigg#, die Kalkbestimmung nach Kramer-Tisdal l 7 und die Bestimmung der K0hlens~ure gravimetrisch

12"

172 J. Warkany und A. Wasitzky: Experimentelle Untersuehungen

Fresenius Classen 8 v o r g e n o m m e n . Die dabei ge fundenen W e r t e s ind in den n~chfo lgendcn Tabel len zusammenges te l l t .

Versuchsdauer iu Tagen

! itarn. [ Anorgan. l~arn-2 [ /tarn-Ca

il ~~176 [ ~.go~- I �9 cic~ rag% menge ] mg~

I i . g ]

Tagcs- mengc in g

Kaninchen A: Gewicht 1000 g. . . . . . . , o o ,

29. bis 30. VI I 1931 . . . . . . . 100 I 0 ] 0 [ 243,5 0,2435 Am 30. VII. I931 erhalt d~s Tier 150 mg bestrnhltes Ergosterin per os

30. bis31. V1L1931 . . . . . . ]] 155 , 0 ': 0 , 192,3 / 0,2981 31. VII. bis 1. VIII . 1931 . . . . 50 ]_50,0 0,0250 I [ 1 1 0 ' 0 0,0550

1. VIII . bis 3. 'VIII. 1931 . . . 72 [ 66,5 0,0225 200,0 0,0770

Kaninchen B: Gewicht 1800 g. 29. bis 31. VIII . 1931 . . . . . . ][ 200 ] 0 [ 0 I 311 ,5 0,3115

Am 31; VIII . 1931 erhMt das Tier 20 mg bestrahltes Ergosterin per os 31. VIII . b i s l . IX. 1931 . . . . 160 I 32,1 0,0514 [ 193,5 0,3096

1. bis 2. IX. 1931 . . . . . . . 125 48,7 0,0609 275,5 0,3444

Kaninchen C: Gewicht 2000 g.

3. bis 4. XII . 193i . . . . . . 410 0 0 61,0 0,2501 4. bis 5. XII . 1931 . . . . . . 210 0 0 130,5 0,2741

Am 5. NIL 1931 erh~lt dgs Tier 20 mg bestrahlt~s Ergosterin per os 5. bis 6. XII . 1931 . . . . . . 270 [Spuren - - 1 9 5 , 0 0,2665 6. bis 7. XII . 193I . . . . . . 200 spuren 131,0 0,2620

Yersuchsdaucr in Tagen in, el - Anorgan. Harn-P

Tages- rag% menge

_ i n g

Harn-Ca ] Barn-C02

I Tages- [ Tages- rag% ] menge [ rag% me]age

l i n g [ t ng

Kaninchen 1 : Gewieht 1100 g. 9. bis 10. VII. 1931 . . . . ][ 140 ] 0 ] 0 ] 96,3 ]0,1349] 256,0 ]0,3544

Am 10. VII. 1931 erhMt das Ticr 20 mg bcstrahltes Ergost~rin per os 10. bis l l . VII. 1931 " " " i 135 [ 0 0 | 146,0 0,19251 218,0 0,2950 11. his 12. VII. 1931 110 40,3 [ 0,04441 123,7 0,13501 197,0 0,2060 12. bisJ3. VII. 1931 "l[ 60 [ 70,0 i0,04201u2,8 0,06771189,0 0,1134

Kaninehen 2: Gewieht 2300 g. 3. bis4. IX. 1931 . . . . i 145 0 0 1125,0,0,18131256,0'0,3720 4. bis 5. IX. 1931 . . . . 150 0 278,0 0,41701 576,0 0,8650 5. bis 7. IX. 1931 . . . . 330 0 0 160,0 0,2640[ 524,0 0,8675

Am 7. IX. 1931 erh~ilt das Tier 20 mg bestrahltes Ergosterin per os 7. h i s s . I x . 1931 . . . . . 130 IsPureor - - / 1 3 0 , 0 0,,69 525,0 0,6825 8. bis 9. 1X. 1931 1 90 [ 53,3 ( 0,0534~ 132,0 0,118~ 514,0 0,4626 9. bis 10. IX. 1931 90 ~ 55,0 /0,0505] 135,0 0,12151503,0 0,4527

10. bis 11. IX. 1931 . . . . . ~ 7o I 50,0 ]0,03501 160,0 0,11201516,0 0,3612

fiber die Ausseheidung yon Kalk, Phosphor und Kohlensiture. 173

Vcrsuchsdaucr in Tagen

Anorgan. Harn- Harn-P menge

in Tages/[ c q m

Harn-Ca Harn-CO,

Tages- Tages- rag% menge rag% menge rag% menge

in g in g in g

Kaninchen 3: Gewicht 2100 g.

27. bis 28. XL 1931 . . . . : [ [ 2 7 5 Souren [ - - 171,0 0,4700[ 509,4 1,4000 28, his 29. XL 1931 650 [Spuren [ 107,0 0,60701 573,5 3,7200

Am 29. XI. I931 erh~l~ d a s Tier 20 mg bestrahltes Ergosterin per os

29. bis 30. XI. 1931 . . . . . 400 0 0 [ 155,5 0,6220] 448,0 1,7920 30. XI. bis 1. XII . 1931 . " i 420 38,7 0,1625[ 70,0 0,294(~ 281,7 1,1830

1. bis 2. XII . 1931 . . . . 320 40,0 0,1280[ 47,5 0,1520[ 237,2 0,7590

Kaninehen 4: Gewieht 2450 g.

14. bis 15. XII . 1931 250 �9 0 0 160,0 0,40001 458,5 1,1450

Am 15. XII . 1931 erh~It das Tier 20 mg bestrahltes Ergosterin per os

16. bis I7. XII . 1931 .- . . 250 34,1 0,0853 72,0 0,180 219,2 0,5480 17. bis 18. XII . 1931 . . . 200 40,5 0,0810[ . . . . 18. bis 19. X1-L 1931 . . . 160 48,3 0,0773[ 107,0 0,1812[ 210,2 0,3363

Kaninchen 5: Gewicht 2270 g.

21. bis22. XII . 1931 . . . . [I 315 ] 0 . I 0 [105,010,32081103,0 10,3185

Am 22. XII . 1931 erh~It das Tier 20 mg bestrahltes Ergosterin per os

22. bis 23. XI I . 1931 . . . . 360 Sp,~rcn[ - - | 98,5 0,35661 100,2 0,3607 23. bis 24. XI I . 1931 1 240 37,5 0,090(~ 84,5 0,20281 107,9 0,2590 24. bis 25. X I L 1931 200 40,2 0,0804[ 108,0 0,2016 I 121,8 0,2436

Kaninehen 6: Gewicht 1900 g.

24. his 28 x H . 1931 . . . . II 1280 I 0 I 0 1137,5 10,440~ 346,2 t1,107s Am 28. XII . 1931 erhMff das Tier 20 mg bestrahltes Ergosterin per os

28. bis29. XII . 1 9 3 1 " " " i 280 0 0 41161,0 0,47601421,3 1,1796 29. bis 30. XII . 1931 240 28,9 0,069 154,5 0,37081 362,9 0,8710 30. bis 31. XII . 1931 215 33,7 0,0725] 16%0 0,3634[ 368,4 0,7921

Kaninchen 7: Gewicht 2370 g.

26. his 28. x I r 1931 . . . . II 410 I 0 p 0 J 142,0 10,29nl ~28,3 10,4680 Am 28. XIL 1931 erhi~It das Tier 20 mg bcstrahltes Ergosterin per es

28. bis29. XII . 1931 . . . . 210 Ispur~nl - - 1135,0 0,28351223,1 0,4685 29. his 30. X l L 1931 : 190 I 47,5 O,O9031120,5 0,229O 1206,0 0,3914 30. his 31. X I L 1931 170 I 58,6 0,O9961 125,5 0,213~ 230,7 O,3922

17 4 J. Warkany u. A. Wasitzky: Ausschcidung yon Kalk, Phosphor u. Kohlens~ure.

Aus den vorst~henden Tabellen ersieht man, dais wohl unter den gegebenen Versuehsbedingungen die Kalkausscheidung unter der Vigantolwirkung eine Verminderung, und zwar in einzelnen F~llen sogar eine sehr betr/iehtliehe Abnahme effi~hrt; dab aber auch unter physiologisehen Bedingungen die Kalkausscheidung innerhalb welter Grenzen schwankt. Brown, Bennet und Shohl 9 fanden bei normal ern/ihrten Rat ten naeh Tagesgaben yon 0,5--2 mg bestrahltem Er- gosterin relative ErhShung der Phosphor- und Kalkausscheidung. Auch beziiglich der Ausscheidung yon Kohlenss fist zu bemerken, dal3 in allen Versuchen eine Abnahme zu finden war, dab aber auf Grund dieser Zahlenwerte eine einheitliche Beziehung zwfischen Kalk-Phosphor und Kohle.ns~ureausseheidung nicht gefunden werden konnte. Es geht daraus hervor, daiS bei der yon uns gew~hlten Dosierung beim Pflanzen- fresser nur die )~:derung der Phosphatausscheidung fiir die Wirkung des bestrahlten Ergosterins kennzeiehnend fist.

Zusammenlassung" i

Die bereits angegebene Versuchsanordnung zum biologischen Nach- wefts yon bestrahltem Ergosterin wurde durch Untersuchung der Kalk- und Kohlens~ureausscheidung im Harn erweitert. Kaninchen, die mi~ Griinfutter ern~hrt, im H a m keine Phosphate ausseheiden, zeigen nach 24 48 Stunden naeh Verabreiehung yon 20--50 mg bestrahltem Er- gosterin reiehliche Phosphatausseheidung. Die Kalk- und Kohlensi~ure- ausseheidung zeigt dabei ein weniger regelm~i~iges Verhalten, in manchen F~llen fist sogar eine Verminderung nachweisbar, so dal] diese GrSl~en lficht so charakteristisch sind wie die Phosphorausscheidung.

Literaturverzeichnis. 1 Warkany, Kiln. Wschr. 9, Nr 46, 2152. - - ~ Windaus, Nachr. Ges. Wiss.

GSttingen, Math.-physik. K1. 1930. - - a GySrgy u. Popoviciu, Jb. Kinderheilk. 82, 132 (1931). - - a Angus u. Mitarbeiter, Prec. roy. Soc. 108, 340 (1931). - -

Windaus-Luttringhaus, Z. Physiol. Ch. 20~, 70 (1931). - - e In Pincuesen, Mikro- methodik. - - 7 Ebenda. - - 8 Treadwetl, Analytische Chemie 2. -~- ~ Brown-Bennet- Shohl, Ref. Z. Kinderheilk. 1930, 834.

Wien XVI I I , Glanzinggasse 37.