カラム選択のてびき

YMCカラム一覧（HPLC、SFC） 10,11USP一覧 12

カラム選択の手引き（バイオクロマトグラフィー） 13分離モードによる比較 14〜16ペプチドおよびタンパク質の逆相分離例 17〜20

カラム選択の手引き（低分子有機化合物） 21アプリケーション1 　（脂溶性ビタミン、水溶性ビタミン） 22アプリケーション2 　（水溶性ビタミン、有機酸、アミノ酸） 23逆相カラム選択ガイド 24主要市販逆相カラムの分離選択性比較 24

9

10

YMC カラム一覧（HPLC, SFC）

製品名 USPCLASS No.

細孔径（nm）

粒子径（μm） C% シラノール

処理使用pHレンジ

掲載ページ

分析カラム 分取カラム

逆相系

ODS

YMC-TriartC18

L1

12 1.9, 3, 5 20

あり

1.0 〜 12.068 〜 71

166C18 ExRS 8 1.9, 3, 5 25 72, 73

Meteoric CoreC18 8 2.7 7

1.5 〜 10.0 84 〜 87 –C18 BIO 16 2.7 5

Pro シリーズ

Pro C18 12 2, 3, 5, 10 162.0 〜 8.0

94 〜 99

167Hydrosphere C18 12 2, 3, 5 12 94, 95, 100, 101

Pro C18 RS 8 3, 5 22 1.0 〜 10.0 102, 103

YMC-Pack

ODS-A

12 3, 5, 10, 15 17

2.0 〜 7.5

104, 105 16820 5, 10 12

30 3, 5, 10 7

ODS-AM 12 3, 5 17 106, 107 170

ODS-AQ12 3, 5, 10, 15 14

108, 109 16920 5, 10 10

ODS-AL 12 5 17 なし 110, 111 170

J'sphere

ODS-H80 8 4 22

あり

1.0 〜 9.0

112, 113 170ODS-M80 8 4 142.0 〜 7.5

ODS-L80 8 4 9

YMC-Pack PolymerC18 – – 6, 10 – – 2.0 〜 13.0 114, 115 –

ODS 以外

YMC-Triart

C8 L7 12 1.9, 3, 5 17あり

1.0 〜 12.0 74, 75

166Phenyl L11 12 1.9, 3, 5 17 1.0 〜 10.0 76, 77

PFP L43 12 1.9, 3, 5 15 なし 1.0 〜 8.0 78 〜 80

Meteoric Core C8 L7 8 2.7 5

あり

1.5 〜 9.0 84 〜 87 –

Pro シリーズPro C8 L7 12 3, 5 10

2.0 〜 7.5

120, 121 171Pro C4 L26 12 3, 5 7

YMC-Pack

C8 L7

12 3, 5, 10, 15 10

122, 123 17220 5, 10 7

30 5, 10 4

C4 L26

12 3, 5, 10 7

124, 125 17320 5, 10 5

30 5, 10, 15 3

TMS L13 12 3, 5, 10 4 126, 127 174

Ph L11 12 3, 5, 10 9 128, 129 174

CN L1012 3, 5, 10 7

130, 131 17530 5 3

PROTEIN-RP L26 20 5 4 – 1.5 〜 7.5 132, 133 175

YMCbasic L7 20 3, 5 7 あり 2.0 〜 7.5 134 –

YMC Carotenoid L62 – 3, 5 – – 2.0 〜 7.5 135 175

11

製品名 USPCLASS No.

細孔径（nm）

粒子径（μm） C% シラノール

処理使用pHレンジ

掲載ページ

分析カラム 分取カラム

順相系

YMC-Triart Diol-HILIC L20 12 1.9, 3, 5 12

–

2.0 〜 10.0 81, 82 –

YMC-Pack

SILL3

12 3, 5, 10, 15, 20

– 2.0 〜 7.5

140, 141 176SIL-06 6 5, 10

Diol-NP L206 5

144, 145 17712 5

CN L1012 3, 5, 10

142, 143 17530 5

Polyamine Ⅱ – 12 5 146, 147 177

NH2 L8 12 5 148 177

イオン交換

YMC-BioPro

QA

–

porous 5

– – 2.0 〜 12.0 42 〜 45 –

SP porous 5

QA-F non-porous 3, 5

SP-F non-porous 3, 5

サイズ排除

シリカ基材

YMC-Pack

Diol-60

L20L33L59

6 3, 5

– – 5.0 〜 7.5 54 〜 56 178Diol-120 12 3, 5

Diol-200 20 3, 5

Diol-300 30 3, 5

YMC-GPC –

5 10

– – – – 57, 58

ポリマー基材

10 10

50 10

100 10

MIX 10

キラル分離

CHIRAL ART

Amylose-SA L99 – 3, 5

– –

2.0 〜 9.0

26 〜 33 26 〜 33

Cellulose-SB–

– 3, 5

Cellulose-SC – 3, 5

Amylose-C L51 – 3, 5–

Cellulose-C L40 – 3, 5

YMC CHIRAL

NEA (R), (S)

–

30 5

– –

2.0 〜 6.5 34, 35 –

α-CD BR 12 5

3.5 〜 6.5 38, 39 –β-CD BR 12 5

γ-CD BR 12 5

分析用

脂肪酸

YMC-Pack FA&ラベル化試薬–

– –– – – 154 〜 157 –

YMC-Pack CA&ラベル化試薬 – –

ＳＦＣ

キラル分離

Alcyon SFC CSP

Amylose-SA

–

– 3, 5

– – –

184 〜 189 184 〜 189

Cellulose-SB – 3, 5

Cellulose-SC – 3, 5

Amylose-C – 3, 5

Cellulose-C – 3, 5

アキラル分離

Alcyon SFC

Triart C18

–

12 5 20 あり

–

Triart Diol 12 5 12 なし

Triart PFP 12 5 15 なし

CN 12 5–

あり

SIL 12 5 –

キラル分離用

カラム・充填剤

2

イオン交換

カラム・担体

3

ＳＥＣ用カラム

4

有機シリカハイ

ブリッドカラム

5

コアシェル

カラム

6

汎用分析用

カラム

ＯＤＳ

7

汎用分析用

カラム

逆相系

8

汎用分析用

カラム

順相系

9

ナノ・マイクロ

ＬＣ用カラム

10

脂肪酸分離用

カラム・充填剤

11

分取用カラム

12

ＳＦＣ用カラム

13

バルク充填剤

14

サンプル前処理・

アクセサリー

15

分取システム

16

フロー反応シス

テム・周辺機器

17

受託精製

18

取扱製品

19

インフォメーション

20

カラム選択の

てびき

1

12

USP一覧

USPCLASS

No.USP Description 官能基 YMC製品 掲載ページ

L1Octadecyl silane chemically bonded to porous or non-porous silica or ceramic micro-particles, 1.5 to 10 µm in diameter, or a monolithic rod.

C18

YMC-Triart C18 68〜71YMC-Triart C18 ExRS 72, 73Meteoric Core C18 84〜87Meteoric Core C18 BIO 84〜87YMC-UltraHT Pro C18 94, 95YMC-UltraHT Hydrosphere C18 94, 95YMC-Pack Pro C18 96〜99Hydrosphere C18 100, 101YMC-Pack Pro C18 RS 102, 103YMC-Pack ODS-A 104, 105YMC-Pack ODS-AM 106, 107YMC-Pack ODS-AQ 108, 109YMC-Pack ODS-AL 110, 111J'sphere ODS-H80

112, 113J'sphere ODS-M80J'sphere ODS-L80

L3 Porous silica particles, 1.5 to 10 µm in diameter, or a monolithic silica rod. SIL

YMC-Pack SIL140, 141

YMC-Pack SIL-06

L7Octylsilane chemically bonded to totally or superficially porous silica particles, 1.5 to 10 µm in diameter, or a monolithic silica rod.

C8

YMC-Triart C8 74, 75Meteoric Core C8 84〜87YMC-Pack Pro C8 120, 121YMC-Pack C8 122, 123YMCbasic 134

L8An essentially monomolecular layer of aminopropylsilane chemically bonded to totally porous silica gel support, 1.5 to 10 µm in diameter, or a monolithic silica rod.

NH2 YMC-Pack NH2 148

L10 Nitrile groups chemically bonded to porous silica particles, 1.5 to 10 µm in diameter, or a monolithic silica rod. CN YMC-Pack CN 130, 131

L11 Phenyl groups chemically bonded to porous silica particles, 1.5 to 10 µm in diameter, or a monolithic silica rod. Phenyl

YMC-Triart Phenyl 76, 77YMC-Pack Ph 128, 129

L13 Trimethylsilane chemically bonded to porous silica particles, 3 to 10 µm in diameter. C1 YMC-Pack TMS 126, 127

L20Dihydroxypropane groups chemically bonded to porous silica or hybrid particles, 1.5 to 10 µm in diameter, or a monolithic silica rod.

Diol

YMC-Triart Diol-HILIC 81, 82YMC-Pack Diol-NP 144, 145YMC-Pack Diol-60

54〜56YMC-Pack Diol-120YMC-Pack Diol-200YMC-Pack Diol-300

L26Butyl silane chemically bonded to totally porous or superficially porous silica rod.silica particles, 1.5 to 10 µm in diameter.

C4YMC-Pack Pro C4 120, 121YMC-Pack C4 124, 125YMC-Pack PROTEIN-RP 132, 133

L27 Porous silica particles, 30 to 50 µm in diameter. SIL YMC-Pack SIL-HG 194, 195

L33

Packing having the capacity to separate dextrans by molecular size over a range of 4,000 to 500,000 Da. It is spherical, silica-based, and processed to provide pH stability.

Diol

YMC-Pack Diol-60

54〜56YMC-Pack Diol-120YMC-Pack Diol-200YMC-Pack Diol-300

L40 Cellulose tris-3,5-dimethylphenylcarbamate coated porous silica particles, 3 to 20 µm in diameter.

セルロース誘導体（Cellulose tris-3,5-dimethylphenylcarbamate coated）

CHIRAL ART Cellulose-C 26〜33

L43 Pentafluorophenyl groups chemically bonded to silica particles by a propyl spacer, 1.5 to 10 µm in diameter. PFP YMC-Triart PFP 78〜80

L51 Amylose tris-3,5-dimethylphenylcarbamate-coated, porous, spherical, silica partilces, 3 to 10 µm in diameter.

アミロース誘導体（Amylose tris-3,5-dimethylphenylcarbamate coated）

CHIRAL ART Amylose-C 26〜33

L59

Packing for the size-exclusion separations of proteins (separation by molecular weight) over the range of 5 to 7,000 kDa. The packing is spherical 1.5 to 10 µm, silica or hybrid packing with a hydrophilic coating.

Diol

YMC-Pack Diol-60

54〜56YMC-Pack Diol-120YMC-Pack Diol-200YMC-Pack Diol-300

L62 C30 silane bonded phase on a fully porous spherical silica, 3 to 15 µm in diameter. C30 YMC Carotenoid 135

L99Amylose tris-(3,5-dimethylphenylcarbamate), immobilized on porous, spherical, silica partilces, 3 to 5 µm in diameter.

アミロース誘導体（Amylose tris-3,5-dimethylphenylcarbamate coated）

CHIRAL ART Amylose-SA 26〜33

カラム選択の

てびき

1

13

糖類の分析や分子量測定に

高極性化合物の分析に

サイズ排除

HILIC

糖類 YMC-Pack Diol

YMC-Pack Polyamine ⅡYMC-Triart Diol-HILIC

電荷の違いによる分離に

逆相では保持されにくい高極性化合物の分析に

イオン交換

HILIC

タンパク質ペプチド

YMC-BioPro

サイズ排除 YMC-Pack Diol

YMC-Triart Diol-HILIC

ODSカラムのファーストチョイス超高速分析を実現するコアシェルカラム

分子サイズによる分離に

高温条件との組み合わせにより分子量3万程度まで適応分子量3万程度まで適応するコアシェルカラム高分子量の化合物の分離に耐酸性に優れたタンパク質・ペプチド分析専用カラム

分子量 5,000以下

分子量 5,000以上

逆相 YMC-Triart C18Meteoric Core C18

YMC-Triart C18Meteoric Core C18 BIOWide-Pore ColumnsYMC-Pack PROTEIN-RP

　　　　　　　　　　　　

電荷の違いによる分離に

高極性化合物の分析に

イオン交換

HILIC

核酸 YMC-BioPro

サイズ排除 YMC-Pack Diol

YMC-Triart Diol-HILICYMC-Pack Polyamine Ⅱ

水 100%移動相で使用可能

分子サイズによる分離に

水100%移動相で使用可能

高分子量の化合物の分析に

核酸塩基ヌクレオシドヌクレオチド

核酸塩基ヌクレオシドヌクレオチド

オリゴヌクレオチド

オリゴヌクレオチド核酸

オリゴヌクレオチド核酸

逆相 YMC-Triart C18Hydrosphere C18

YMC-Triart C18Hydrosphere C18Wide-Pore Columns

　　　　　　　　　　　　

水100%移動相で使用可能

P.54～56

P.146,147P.81,82

P.42～45

P.81,82

P.68～71P.84～87

P.54～56

P.68～71P.84～87

P.17P.132,133

P.42～45

P.81,82P.146,147

P.42～45P.94,95,100,101

P.54～56

P.42～45P.94,95,100,101

P.17

P.42～45P.94,95,100,101

逆相YMC-Triart C18Hydrosphere C18

カラム選択の手引き（バイオクロマトグラフィー）

キラル分離用

カラム・充填剤

2

イオン交換

カラム・担体

3

ＳＥＣ用カラム

4

有機シリカハイ

ブリッドカラム

5

コアシェル

カラム

6

汎用分析用

カラム

ＯＤＳ

7

汎用分析用

カラム

逆相系

8

汎用分析用

カラム

順相系

9

ナノ・マイクロ

ＬＣ用カラム

10

脂肪酸分離用

カラム・充填剤

11

分取用カラム

12

ＳＦＣ用カラム

13

バルク充填剤

14

サンプル前処理・

アクセサリー

15

分取システム

16

フロー反応シス

テム・周辺機器

17

受託精製

18

取扱製品

19

インフォメーション

20

カラム選択の

てびき

1

14

分離モードによる比較

0 10 20 30 min

Transferrin

Albumin

N080313E

IgGmAU

10

0

YMC-BioPro QA 5 μm, 50×4.6 mmI.D.

0 10 20 30 40 50 60 min

N080616A

IgG

AlbuminTransferrin

mAU

150

100

0

50

YMC-Pack Diol-300 + Diol-200 5 μm,　300×8.0 mmI.D. ×2

Eluent ： A）20 mM Tris-HCl（pH 8.6） B）20 mM Tris-HCl（pH 8.6）containing 0.5 M NaCl 0-30%B（0-15 min）, 30-100%B（15-30 min）

Flow rate ：0.5 mL/minTemperature ：25℃Detection ：UV at 280 nmInjection ：20 μL（100 μL/mL）

Eluent ：0.1 M KH2PO4-K2HPO4（pH 7.0）containing 0.2 M NaClFlow rate ：0.5 mL/minTemperature ：ambient（25℃）Detection ：UV at 280 nmInjection ：20 μL（100 μL/mL）

ヒト血清をイオン交換モードおよびサイズ排除（SEC）モードで分離しています。イオン交換モードでは電荷の違いにより分離されるのに対して、サイズ排除モードでは分子量の違いにより分離されるので、両者分離パターンが異なっています。

タンパク質の分離例ヒト血清中のタンパク質　Human serum

イオン交換 サイズ排除

min2 4 6 8 10 12 14 160

NaN3

Mouse monoclonal IgG1(Anti-human IgG4)

mAU

0

1

2

3

4

5

P080220A

YMC-BioPro QA-F 5 μm, 30×4.6 mmI.D.

0 105 15 20 25 30 min

NaN3Mouse monoclonal IgG1(Anti-human IgG4)

0

10

20

30

40

mAU

P080530A

YMC-Pack Diol-200 5 μm, 300×4.6 mmI.D.

Eluent ： A）20 mM Tris-HCl（pH 8.1） B）20 mM Tris-HCl（pH 8.1）containing 0.5 M NaCl 10-25%B（0-18 min）

Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：25℃Detection ：UV at 220 nmInjection ：10 μL（0.1 mg/mL）

Eluent ：0.1 M KH2PO4-K2HPO4（pH 7.0）Flow rate ：0.17 mL/minTemperature ：ambient（25℃）Detection ：UV at 220 nmInjection ：10 μL（0.05 mg/mL）

抗ヒトモノクローナル抗体の分離例です。サイズ排除モードではほぼ単一ピークになっているのに対して、イオン交換モードではアイソフォームに由来すると考えられる複数のピークが認められます。

モノクローナル抗体　Mouse monoclonal IgG1 anti-human IgG4（Purified by DEAE chromatography, containing NaN3）

1. Rabbit IgG2. Mouse IgG Fc fragment

min

mAU

0 5 10 15 20

0

25

50

R080623D

1

2

YMC-Pack Diol-200 5 μm, 300×8.0 mmI.D.

30 40352520151050 min

R080619B

Mouse IgG Fc fragmentmAU

0

10

20

30

YMC-Pack C4（30 nm）5 μm, 150×4.6 mmI.D.

Eluent ：0.1 M KH2PO4-K2HPO4（pH 6.9）containing 0.2 M NaClFlow rate ：1.0 mL/minTemperature ：ambient（27℃）Detection ：UV at 220 nmInjection ：5 μL（0.5 mg/mL）

Eluent ： A）water/TFA（100/0.1） B）acetonitrile/TFA（100/0.1） 25-45%B（0-40 min）

Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：37℃Detection ：UV at 220 nmInjection ：5 μL（1.0 mg/mL）

サイズ排除カラムはIgG全分子とそのフラグメントのように分子量に差があるものの分離に有用です。一方、逆相カラムでは分子量が大きいIgG全分子の分離は困難ですが、Fcフラグメントのような分子量10万以下のフラグメントの分離には有効です。

IgG Fcフラグメント　Mouse IgG Fc fragment（Prepared from normal serum）

イオン交換 サイズ排除

サイズ排除 逆　相

カラム選択の

てびき

1

15

0 60 min2010 30 40 50

N080422B

*

0

10

20

mAU

YMC-BioPro QA 5 μm, 50×4.6 mmI.D.

Eluent ： A）20 mM Tris-HCl（pH 8.6） B）20 mM Tris-HCl（pH 8.6）containing 0.5 M NaCl 0-15%B（0-30 min）, 15-60%B（30-60 min）

Flow rate ：0.5 mL/minTemperature ：25℃Detection ：UV at 220 nmInjection ：20 μL

タンパク質の分離例BSAのペプチドマッピング　Tryptic digest of BSA

イオン交換

0 60 min2010 30 40 50

0

30

50

mAU

60

40

20

10

N080623L

105

102

103

104

MW

5

4

3

2

1

101*

YMC-Pack Diol-120 + Diol-60 5 μm, 500×8.0 mmI.D. ×2

BSA（MW 66,000）のトリプシン消化物を3種類の分離モードで分離しています。サイズ排除のクロマトグラムから、この試料中には、分子量が100前後から20,000程度のものまで幅広い分子量のフラグメントが存在していることが分かります。一方、イオン交換や逆相は、各成分の構造の違いによる分離能に優れ、非常に多くのピークが検出できています。

サイズ排除

Eluent ： 0.1 M KH2PO4-K2HPO4（pH 7.0） containing 0.2 M NaCl/acetonitrile（70/30）

Flow rate ：0.7 mL/minTemperature ：ambient（25℃）Detection ：UV at 220 nmInjection ：5 μL

0 60 min2010 30 40 50

0

20

30

mAU

10

40

N080318B

*

* undigested BSA

YMCbasic 5 μm, 150×2.0 mmI.D.逆　相

Eluent ： A）water/TFA（100/0.1） B）acetonitrile/TFA（100/0.1） 5-35%B（0-50 min）, 35-45%B（50-55 min）, 45%B（55-60 min）

Flow rate ：0.2 mL/minTemperature ：37℃Detection ：UV at 220 nmInjection ：1 μL

タンパク質・ペプチド 較正曲線1. Myoglobin (MW 17,000)2. Insulin (Bovine) (MW 5,700)3. Neurotensin (MW 1,672)4. Tetraglycine (MW 246)5. Glycine (MW 75)

20 min100G910607A

YMC-Pack ODS-A（12 nm）5 μm,150×4.6 mmI.D.

糖鎖の分離例ピリジルアミノ（PA）化糖　Pyridylamino（PA）-Sugar chains

逆　相

20 min100G910620A

YMC-Pack Polyamine Ⅱ 5 μm,150×4.6 mmI.D.

糖タンパク質などの糖鎖解析で多用されるピリジルアミノ（PA）化糖の逆相、HILIC両モードでの分離例を示しています。このようなモードが異なる分離法を組み合わせる二次元HPLCは糖鎖解析に有用です。

HILIC

Eluent ：methanol/20 mM NH4H2PO4（5/95）Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：37℃Detection ：FLS at Ex. 320 nm, Em. 400 nmInjection ：2 μL（3.3 pmol/mL）Sample ： PA-Sugar Chain Series,

manufactured by TAKARA BIO INC.

Eluent ：methanol/20 mM NH4H2PO4（80/20）Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：37℃Detection ：FLS at Ex. 320 nm, Em. 400 nmInjection ：3 μL（3.3 pmol/mL）Sample ： PA-Sugar Chain Series,

manufactured by TAKARA BIO INC.

キラル分離用

カラム・充填剤

2

イオン交換

カラム・担体

3

ＳＥＣ用カラム

4

有機シリカハイ

ブリッドカラム

5

コアシェル

カラム

6

汎用分析用

カラム

ＯＤＳ

7

汎用分析用

カラム

逆相系

8

汎用分析用

カラム

順相系

9

ナノ・マイクロ

ＬＣ用カラム

10

脂肪酸分離用

カラム・充填剤

11

分取用カラム

12

ＳＦＣ用カラム

13

バルク充填剤

14

サンプル前処理・

アクセサリー

15

分取システム

16

フロー反応シス

テム・周辺機器

17

受託精製

18

取扱製品

19

インフォメーション

20

カラム選択の

てびき

1

16

分離モードによる比較核酸の分離例

N080212G

0 2010 30 min

0

50

100

mAU

YMC-BioPro QA-F 5 μm, 100×4.6 mmI.D.

DNAフラグメント　1 kb DNA ladder（75-12,216 bp）

イオン交換

Eluent ： A）20 mM Tris-HCl（pH 8.1）containing 0.7 M NaCl B）20 mM Tris-HCl（pH 8.1）containing 1.0 M NaCl 0-100%B（0-30 min）

Flow rate ：0.5 mL/minTemperature ：25℃Detection ：UV at 260 nmInjection ：20 μL

DNAフラグメントの分離例です。高分離能を有するYMC-BioPro QA-Fの100 mm長カラムは、核酸の高分離分析に最適です。

YMC-BioPro QA-F 5 μm, 100×4.6 mmI.D.

0 10 20 25 min155

N080610F

Plasmid pBR322 Hae III digest (8-587 bp)

Plasmid pBR322 (4,361 bp)

10

20

30

40

mAU

0

プラスミドpBR322の制限酵素Hae Ⅲ分解物　Plasmid pBR322 restriction fragments

イオン交換

Eluent ： A）20 mM Tris-HCl（pH 8.1） B）20 mM Tris-HCl（pH 8.1）containing 1.0 M NaCl 70-85%B（0-20 min）, 85%B（20-25 min）

Flow rate ：0.5 mL/minTemperature ：35℃Detection ：UV at 260 nmInjection ：10 μL

YMC-Pack Diol-300 + Diol-200　5 μm, 500×8.0 mmI.D. ×2

P080617A

Plasmid pBR322 Hae III digest (8-587 bp)

Plasmid pBR322 (4,361 bp)

10

20

30

40

mAU

0

0 20 403010 50 min

サイズ排除

Eluent ：0.1 M KH2PO4-K2HPO4（pH 7.0）containing 0.2 M NaClFlow rate ：0.7 mL/minTemperature ：ambient（25℃）Detection ：UV at 260 nmInjection ：10 μL

プラスミドDNAの制限酵素断片で、8-587 bpのサイズのフラグメントをイオン交換モードおよびサイズ排除（SEC）モードで分離しています。個々のフラグメントの同定など高い分離能が必要な場合はイオン交換カラムが適しています。一方、分子量による分離にはサイズ排除カラムが有用です。

5’-pUGG AGU GUG ACA AUG GUG UUG-3’ (21 nt, MW 6890.1)5’-pUGG AGU GUG ACA AUG GUG UUG U-3’ (22 nt, MW 7196.3)

mAU

0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 min

0

10

20

0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 min

5

0

UV

MSMIC(m/z 1721.5, m/z 1798.1)

21 nt22 nt

21 nt22 nt

Courtesy of M.Yamada, SHIMADZU CORPORATION

YMC-Triart C18 3 μm, 150×2.0 mmI.D.5’-pUGG AGU GUG ACA AUG GUG UUG-3’ (21 nt, MW 6890.1)5’-pUGG AGU GUG ACA AUG GUG UUG U-3’ (22 nt, MW 7196.3)

mAU

0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 min

0

10

20

0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 min

5

0

UV

MSMIC(m/z 1721.5, m/z 1798.1)

21 nt22 nt

21 nt22 nt

Courtesy of M.Yamada, SHIMADZU CORPORATION

YMC-Triart C18 3 μm, 150×2.0 mmI.D.

オリゴヌクレオチド（miRNA）　Oligonucleotide（miRNA） Eluent ： A）10 mM DBAA*（pH 7.5） B）10 mM DBAA*（pH 7.5）/acetonitrile（50/50） 62-72%B（0-20 min）

Flow rate ：0.2 mL/minTemperature ：30℃Detection ：UV at 260 nm and ESI-negative modeInjection ：4 μL （5 nmol/mL）Instrument ： LC）Shimadzu Prominence

MS）Shimadzu LCMS2020* di-n-butylamine-acetic acid

オリゴヌクレオチドの逆相LC/MS分離例です。親水性化合物の分離にも適したTriart C18はオリゴヌクレオチドの分離にも適しており、鎖長1残基違いのオリゴヌクレオチドの分離も可能です。

逆　相

F120202A

カラム選択の

てびき

1

17

ペプチドおよびタンパク質の逆相分離例逆相カラム選択の目安タンパク質およびペプチドを分離する際、分離対象化合物の分子量を目安にカラムの選定を行います。右表に示すように、分子量が約5,000以下の小さいペプチドに関してはC18, 12 nmが、約5,000から20,000までのタンパク質およびペプチドに関してはC8, 20 nmが、約20,000以上のタンパク質に関してはC4, 30 nmがそれぞれ適したカラムになります。また、分子量のほかに化合物の疎水性の大きさ、官能基の種類などが分離に影響をおよぼすこともありますので、◎のカラムで目的の分離が得られない場合は表中の矢印を参考に最適化を行ってください。また、表中のC18、C8、C4のほかに選択性の異なるPROTEIN-RPおよびCNタイプなどもあります。核酸、オリゴヌクレオチドなどを分離する場合もタンパク質、ペプチドに準じて分子量に応じたカラムを選択します。

ペプチド（MW 574 - 3,465）の分離例

分子量5,000程度以下のペプチド分離には、低分子化合物に用いられるようなC18, 12 nmなどの汎用カラムが適しています。特に、塩基性ペプチドの場合には高度にエンドキャッピングされたTriart C18やProシリーズカラムが有効です。上図に示すように、他社ODSカラムのBrand E2は塩基性ペプチドである1、7のピークがテイリングしています。それに対しHydrosphere C18は良好な分離とピーク形状を示しています。

Eluent ： A）water/TFA（100/0.1） B）acetonitrile/TFA（100/0.1） 20-40%B（0-15 min）, 40%B（15-20 min）

Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：37℃Detection ：UV at 220 nm

1. BAM-12P (MW 1,425)2. [D-Ala2,Met5]-Enkephalinamide (MW 587)3. α-Endorphin (MW 1,746)4. Met-Enkephalin (MW 574)5. [D-Ala2,Met5]-Enkephalin (MW 588)6. γ-Endorphin (MW 1,899)7. β-Endorphin (MW 3,465)

Hydrosphere C18（12 nm）5 μm,150×4.6 mmI.D.Hydrosphere C18（12 nm）5 μm,150×4.6 mmI.D.

1

23

45

6

7

0 5 10 15 20 min

A000308B

優れたピーク形状

Brand E2（10 nm）5 μm,150×4.6 mmI.D.(親水性化合物分離用ODS)

Brand E2（10 nm）5 μm,150×4.6 mmI.D.(親水性化合物分離用ODS)

1

2 34

5 6

7

0 5 10 15 20 min

A000313D

ペプチドおよびタンパク質（MW 4,300 - 17,000）の分離例

分子量4,300から17,000のペプチドおよびタンパク質について、細孔径と官能基が各々異なるカラムによる分離の比較を示します。上図に示すように充填剤の細孔径および官能基のどちらかが最適化されていない場合でも、ピークのブロードニングや化合物同士または不純物ピークとの分離が悪くなるなどの現象が生じています。一方、上の「逆相カラム選択の目安」の表に示すように、目的の化合物の分子量に対して最適なカラム（C8, 20 nm）を用いることで、シャープなピーク形状と良好な分離が得られています。

Column ： YMC-Pack 5 μm 150×4.6 mmI.D.

Eluent ： A）water/TFA（100/0.1） B）acetonitrile/TFA（100/0.1） 25-60%B（0-20 min）

Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：37℃Detection ：UV at 220 nm

1. Cytochrome c (MW 12,400)2. Insulin (Bovine) (MW 5,700)3. Amyloid β-protein (MW 4,300)4. Lysozyme (MW 14,300)5. α-Lactalbumin (MW 14,100)6. Myoglobin (MW 17,000)

C8, 30 nm

C8, 12 nm

04073006.D

min0 5 10 15

04080204.D

1 2

56

4

3

12

3564

細孔径の違いによる影響

細孔径および官能基の違いによる分離への影響

C4, 20 nm

C18, 20 nm

min0 5 10 1504073002.D

04072910.D

12

35

64

1,2

3 5

64

官能基の違いによる影響

1

2

35

64

min0 5 10 15

04082002.D

C8, 20 nm

最適な細孔径と官能基の組み合わせ

試料の分子量

官能基

細孔径C18 C8 C4

12 nm ◎ ○ ○

20 nm ○ ◎ ○

30 nm ○ ○ ◎

5,000

20,000

100,000

キラル分離用

カラム・充填剤

2

イオン交換

カラム・担体

3

ＳＥＣ用カラム

4

有機シリカハイ

ブリッドカラム

5

コアシェル

カラム

6

汎用分析用

カラム

ＯＤＳ

7

汎用分析用

カラム

逆相系

8

汎用分析用

カラム

順相系

9

ナノ・マイクロ

ＬＣ用カラム

10

脂肪酸分離用

カラム・充填剤

11

分取用カラム

12

ＳＦＣ用カラム

13

バルク充填剤

14

サンプル前処理・

アクセサリー

15

分取システム

16

フロー反応シス

テム・周辺機器

17

受託精製

18

取扱製品

19

インフォメーション

20

カラム選択の

てびき

1

18

ペプチドおよびタンパク質の逆相分離例

タンパク質（MW 66,000 - 96,000）の分離例

C4, 30 nmのカラムを用いた高分子タンパク質の分離において、移動相に使用する有機溶媒の違いが分離パターンにおよぼす影響を示します。タンパク質やペプチドを分離する際の移動相は、TFAを含むアセトニトリルと水のグラジエント溶出を行うのが一般的です。しかし上図の1、2のピークのように、アセトニトリルと水の系では分離困難なものが、2-プロパノールなど種類の異なる有機溶媒を添加することで選択性が変わり分離可能となる場合もあります。

Column ： YMC-Pack C4（5 μm, 30 nm） 150×4.6 mmI.D.

Eluent ： 30-75%B（0-15 min）, 75%B（15-20 min）

Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：37℃Detection ：UV at 220 nm

1. BSA (MW 66,000)2. Conalbumin (MW 77,000)3. Lipoxidase (MW 96,000)

移動相の違いによる分離への影響（C4, 30 nm）

細孔径および官能基の違いによるタンパク質の分離への影響を示します。図に示すように、分離対象化合物の分子量66,000から96,000のような高分子タンパク質の分離においては、細孔径が小さくなるにつれピークがブロードになり分離が悪くなっています。また、充填剤の官能基についてC8、C18と側鎖が長くなり疎水性が大きくなるにつれて分離が悪くなっています。このように、試料の分子サイズに対して充填剤の細孔径や官能基が適切でない場合、ピーク形状の悪化が生じてしまいます。分子量20,000 〜 100,000程度のタンパク質の分離には、細孔径が大きく官能基の疎水性が小さいC4, 30 nmのカラムが適しています。

1. BSA (MW 66,000)2. Conalbumin (MW 77,000)3. Lipoxidase (MW 96,000)

細孔径および官能基の違いによる分離への影響

Column ：5 μm, 150×4.6 mmI.D.Eluent ： A）water/TFA（100/0.1）

B）acetonitrile/2-propanol/TFA（50/50/0.1） 30-75%B（0-15 min）, 75%B（15-20 min）

Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：37℃Detection ：UV at 220 nm

1

3

2

A） water/TFA（100/0.1）B） acetonitrile/TFA（100/0.1）

05011405.D

0 5 10 15 min

3

1

2

A） water/TFA（100/0.1）B） acetonitrile/2-propanol/TFA（50/50/0.1）

04093007.D

0 5 10 15 min

2-propanol添加

12

3

12 3

C4, 20 nm

C4, 12 nm

0 4 8 12 16 min

細孔径の違いによる影響

05011714.D

05011711.D

1

2

3

C4, 30 nm

04093007.D

12 16 min840

1 23

1 23

0 4 8 12 16 min

C8, 30 nm

C18, 30 nm

官能基の違いによる影響

05011708.D

05011802.D

カラム選択の

てびき

1

19

※ 「ペプチド・タンパク質の高温条件での高分離分析」「ペプチド・タンパク質の分離最適化のポイント」の資料をご用意しております。お問い合わせください。

PC (peak capacity) = 1 + (gradient time/peak width*)*peak width = 2W0.5h average

ペプチド・タンパク質の分離におけるカラム温度の効果

分子量（MW）が異なるペプチド・タンパク質の分離を0.1% TFAを含む移動相条件下にて、40℃と70℃で比較しています。分子量が大きいペプチド・タンパク質の分離には移動相への2-プロパノールの添加がピーク形状の改善に有効ですが、分子量が10,000以上の場合、40℃においてはブロードなピークとなっています（condition B 上図）。40℃と比較して70℃の高温条件では分離選択性の変化やピーク形状の改善により分離度が向上し、この効果は特に分子量が大きい場合に顕著です。一般的に大きい分子は小さい分子よりも拡散速度が遅いため、ピークがブロードになる傾向があります。高温条件では、移動相の粘度の低下と物質移動速度の上昇によりピーク形状が改善されます。ペプチド・タンパク質の分離において、カラム温度の変更は分離度の向上に有効です。

21.8-25.8 MPa(3,160-3,740 psi)

15.8-18.5 MPa(2,290-2,680 psi)

40˚C

70˚C

Condition A (MW 500-18,400) Condition B (MW 14,300-25,700)

mAU

12

3

min*0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0

0

10

20

30

40

50

60

F111226B

12

3

mAU

0

10

20

30

40

50

60

min*0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0

F111226A

1

2

3

min*0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5

mAU

0

10

20

30

40

50

60

F111228A

1

2

3 4

5

1 2

4, 3

5

F111228B

min*0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5

mAU

0

10

20

30

40

50

60

1 2

4, 3

5

Peak capacity = 230

Peak capacity = 279

Peak capacity = 67

Peak capacity = 107

37.0-37.5 MPa(5,370-5,440 psi)

27.4-28.4 MPa(3,970-4,120 psi)

Column ： YMC-Triart C18（1.9 µm, 12 nm）, 50×2.0 mmI.D.Eluent ：A）water/TFA（100/0.1） B） acetonitrile/TFA（100/0.1） - condition A B） acetonitrile/2-propanol/TFA（50/50/0.1） - condition BGradient ： 10-80%B（0-5 min） - condition A

30-60%B（0-5 min） - condition BFlow rate ：0.4 mL/minDetection ：UV at 220 nmInjection ： 1 µL（50 µg/mL） - condition A

1 µL（250 µg/mL） - condition BSystem ：Agilent 1200SL

Analytes MWPeak width 1/2 ½（min）

40℃ 70℃Condition A1. Oxytocin 1,007 0.017 0.014

2. Leu-Enkephalin 556 0.015 0.0153. β-Endorphin 3,465 0.0164. Insulin 5,733 0.0155. β-Lactoglobulin A 18,400 0.043 0.030Condition B1. Lysozyme 14,300 0.069 0.0442. α-Chymotrypsinogen 25,700 0.080 0.0493. β-Lactoglobulin A 18,400 0.080 0.048

キラル分離用

カラム・充填剤

2

イオン交換

カラム・担体

3

ＳＥＣ用カラム

4

有機シリカハイ

ブリッドカラム

5

コアシェル

カラム

6

汎用分析用

カラム

ＯＤＳ

7

汎用分析用

カラム

逆相系

8

汎用分析用

カラム

順相系

9

ナノ・マイクロ

ＬＣ用カラム

10

脂肪酸分離用

カラム・充填剤

11

分取用カラム

12

ＳＦＣ用カラム

13

バルク充填剤

14

サンプル前処理・

アクセサリー

15

分取システム

16

フロー反応シス

テム・周辺機器

17

受託精製

18

取扱製品

19

インフォメーション

20

カラム選択の

てびき

1

20

ペプチドおよびタンパク質の逆相分離例※ 「ペプチド・タンパク質の高温条件での高分

離分析」「ペプチド・タンパク質の分離最適化のポイント」の資料をご用意しております。お問い合わせください。高温条件およびUHPLC用1.9 µmカラムの連結による分離度の向上

ヘモグロビンのトリプシン消化物の分離においてカラム温度を70℃に上げることで、ピークキャパシティ （分離可能ピーク数）が23％向上しています。粒子径1.9 µm、長さ100 mmのTriart C18カラムを2本連結することで分離は劇的に向上しています。また、高温条件のため、総カラム長200 mmながら多くのUHPLC用システムの耐圧より十分に低圧力で分析可能です。このような手法は、ペプチドマッピングなど高分解能が要求される分離に有効です。

Column ：YMC-Triart C18（1.9 µm, 12 nm）Eluent ： A） water/TFA（100/0.1）

B） acetonitrile/TFA（100/0.08） 5-40%B（0-15 min）for a single column 5-40%B（0-30 min）for two coupled columns

Flow rate ：0.4 mL/minDetection ：UV at 220 nmInjection ： 10 µL for a single column

20 µL for two coupled columnsSample ：Tryptic digest of Bovine HemoglobinSystem ：Agilent 1290

40˚C

70˚C

Peak capacity = 365

15P110728A

1515 min0 2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

10

20

30

30P110707A

3030 min0 4 8 12 16 20 24 28

mAU

0

10

20

30

1.9 µm, 100 × 2.0 mmI.D. 15 min gradient27.6-28.6 MPa (4,000-4,150 psi)

Two coupled1.9 µm, 100 × 2.0 mmI.D. 30 min gradient58.1-61.6 MPa (8,430-8,930 psi)

P110705A

150 2 4 6 8 10 12 14

mAU

0

10

20

30

15 min

1.9 µm, 100 × 2.0 mmI.D. 15 min gradient46.5-48.5 MPa (6,740-7,030 psi)

Peak capacity = 450

Peak capacity = 630

min

min

9

19 20 21

9.4 9.8 10.2 10.6

25mAU

カラム2本連結

25mAU

21

カラム選択の手引き（低分子有機化合物）

逆相分析のファーストチョイスメソッドスクリーニングに有効な5種のカラム

順相カラムの標準シリカゲルとは異なる分離を示す順相カラム

逆相では保持されにくい高極性化合物の分析に

水100％移動相で使用可能（イオンペア試薬や緩衝液を用いて保持可能）

ファーストチョイスのODSノンエンドキャップのODS　構造の近い化合物同士の分離にODSとは異なる分離選択性

ビタミンCなどの分離に（HILIC モードとして）多成分一斉分析に有効

P.68～71P.60～80

P.140,141P.144,145

P.81,82

P.68～71

P.68～71P.110,111

P.135

P.146～148P.81,82

トコフェロールなどの分離に

水溶性ビタミン

脂溶性ビタミン

水溶性ビタミン

脂溶性ビタミン

逆相

順相

HILIC

逆相

HILIC

順相

医薬・農薬代謝物食品添加物天然物その他

ビタミン

YMC-Triart C18YMC-Triart（C18, C18 ExRS, C8, PFP, Phenyl）

YMC-Pack SIL, SIL-06YMC-Pack Diol-NP

逆相

順相

光学異性体 CHIRAL ARTYMC CHIRAL NEA

CHIRAL ARTYMC CHIRAL NEA

YMC-Triart Diol-HILIC

YMC-Triart C18

YMC-Triart C18YMC-Pack ODS-ALYMC Carotenoid （C30）

YMC-Pack Polyamine Ⅱ, NH2YMC-Triart Diol-HILIC

YMC-Pack SIL, SIL-06YMC-Pack Polyamine Ⅱ

水 100％移動相で使用可能

簡便なラベル化法による高感度分析が可能

順相カラムの標準

有機酸

ラベル化体

逆相

順相

有機酸脂肪酸

YMC-Triart C18

YMC-Pack FAYMC-Pack CA

YMC-Pack SIL, SIL-06

分子種分離に

ファーストチョイスのODS

クラス種分離に

P.140,141P.146,147

P.68～71

P.154～157

P.140,141

P.68～71

P.140,141P.144,145

ラベル化体

逆相

順相

リン脂質 YMC-Triart C18

YMC-Triart C18

YMC-Pack SIL, SIL-06 YMC-Pack Diol-NP

HILIC モードでアミノ酸20種の一斉分析も可能

水100％移動相で使用可能疎水性の高いアミノ酸に有効

逆相

HILICアミノ酸 YMC-Triart Diol-HILIC

YMC-Triart C18Hydrosphere C18

フリーアミノ酸

フリーアミノ酸

高官能基密度型で平面認識能に優れたODSカロテノイドの分離に有効Triart C18とは異なる分離　構造異性体の分離にも有効極性化合物、異性体の分離に有効構造異性体の分離にも有効

順相カラムの標準構造異性体の分離にも有効

P.68～71

P.81,82

P.68～71P.94,95,100,101

P.72,73P.135

P.74,75P.78～80P.26～33

P.140,141Ｐ.26～33

光学異性体の分離に

光学異性体の分離に

P.26～33Ｐ.34,35

P.26～33Ｐ.34,35

逆相

順相

構造異性体

YMC-Triart C18 ExRSYMC Carotenoid （C30）YMC-Triart C8YMC-Triart PFPCHIRAL ART

YMC-Pack SIL, SIL-06CHIRAL ART

キラル分離用

カラム・充填剤

2

イオン交換

カラム・担体

3

ＳＥＣ用カラム

4

有機シリカハイ

ブリッドカラム

5

コアシェル

カラム

6

汎用分析用

カラム

ＯＤＳ

7

汎用分析用

カラム

逆相系

8

汎用分析用

カラム

順相系

9

ナノ・マイクロ

ＬＣ用カラム

10

脂肪酸分離用

カラム・充填剤

11

分取用カラム

12

ＳＦＣ用カラム

13

バルク充填剤

14

サンプル前処理・

アクセサリー

15

分取システム

16

フロー反応シス

テム・周辺機器

17

受託精製

18

取扱製品

19

インフォメーション

20

カラム選択の

てびき

1

22

アプリケーション1（脂溶性ビタミン、水溶性ビタミン）

逆相 水溶性ビタミン

1. Thiamine HCl (Vitamin B1)2. Pyridoxine HCl (Vitamin B6)3. Nicotinamide4. Cyanocobalamin (Vitamin B12)5. L-Ascorbic acid 2-glucoside6. L-Ascorbic acid (Vitamin C)7. Erythorbic acid 8. Riboflavin (Vitamin B2)9. Nicotinic acid

1

7

6

4

5

3

2

min5 10 15 20 25

mAU

0

5

10

15

20

9

8

0

Column ： YMC-Triart C18 （5 μm, 12 nm） 250×4.6 mmI.D.

Eluent ： phosphate buffer※/acetonitrile （90/10） ※Dissolve 1.4 g KH2PO4 in 800 mL water → add 26 mL 10% TBA･OH → adjust pH 5.2 by 20% H3PO4 → add water to make 1000 mL

Flow rate ：0.8 mL/minTemperature ：40℃Detection ：UV at 260 nmInjection ：10 μL （5 μg/mL）

イオンペア試薬を用いて、水比率の高い移動相で分離

順相 ビタミンE（トコフェロール）

1.

2.

3.

4.

1

2

3

4

0 5 10 15 min

α-Tocopherol

O

HO

H3C

CH3

CH3 CH3

CH3 CH3 CH3

CH3

O

HOCH3

CH3 CH3

CH3 CH3 CH3

CH3

β-Tocopherol

O

HO

CH3 CH3

CH3 CH3 CH3

CH3H3C

γ-Tocopherol

O

HO

CH3 CH3

CH3 CH3 CH3

CH3

δ-Tocopherol

Column ： YMC-Pack SIL（5 μm, 12 nm） 250×4.6 mmI.D.

Eluent ：n-hexane/2-propanol/acetic acid（1000/6/5）Flow rate ：1.4 mL/minTemperature：35℃Detection ：FLS at Ex 298 nm, Em 325 nmInjection ：20 μL（5〜20 μg/mL）

トコフェロール同族体の分離

逆相 ビタミンD

min

Cholecalciferol (Vitamin D3)

Ergocalciferol (Vitamin D2)

1.

2.

0 10 20 30

mAU

0

5

10

15

1 2

Column ： YMC-Pack ODS-AL（5 μm, 12 nm） 150×4.6 mmI.D.

Eluent ：acetonitrile/water（95/5）Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：40℃Detection ：UV at 265 nmInjection ：10 μL（0.01 mg/mL）

構造の近い化合物同士の分離

（P040819C）

（R100315D）

（S970702A）

HILIC 水溶性ビタミン

20 min*

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

mAU

0

50

100

150 1 2

3

4

5

6

87

9

10

11

NN

N

N

O

O

N

NH2

O

N

OH

OHOH

ClH

NNH

N

OH

OH

O

O

OH

N

OH

NH

NH

O

O

OH

O

O O

OHOH

OHOH

H

1.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

11.

CN

Co+

N

N

N

NN

O

P

N

O

O-

O O

NH

O

O

O

O

OH

O

O

O

NH2

NH2

NH2

NH2

NH2

NH2

OH

O O

OH

OH

OHH

O

OOH

OH

OH

OH

Caffein

Nicotinamide

Pyridoxinehydrochloride

Riboflavin

Orotic acid

Erythorbic acid（D-Isoascorbic acid）

N

OH

O

Nicotinic acid

O O

OHOH

OHOH

H

L-Ascorbic acid

2-O-α-D-Glucopyranosyl-L-ascorbic acid（Ascorbic acid 2-glucoside）

Thiamine hydrochloride

Cyanocobalamin

N

N N+

SOH

NH2

Cl-

HCl

Column ： YMC-Triart Diol-HILIC （5 μm, 12 nm） 150×3.0 mmI.D.

Eluent ： A） acetonitrile/water （90/10） containing 10 mM HCOOH-HCOONH4（pH 3.6）* B） acetonitrile/water （50/50） containing 10 mM HCOOH-HCOONH4（pH 3.6）* 0-75%B（0-20 min）Flow rate ：0.425 mL/minTemperature ：40℃Detection ：UV at 254 nmInjection ：4 μL （50 μg/mL）

HILICモードで分離

（F121012A）

* pH value of 200 mM buffer solution

カラム選択の

てびき

1

23

アプリケーション2（水溶性ビタミン、有機酸、アミノ酸）

HILIC ビタミンC（アスコルビン酸）

min

1

2 3

0 10 20

1. Nicotinic acid2. Erythorbic acid3. L-Ascorbic acid

Column ： YMC-Pack Polyamine Ⅱ 250×4.6 mmI.D.

Eluent ：acetonitrile/50 mM NH4H2PO4（70/30）Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：30℃Detection ：UV at 250 nmInjection ：10 μL （0.05 〜 0.1 mg/mL）

HILICモードで分離

（A970603A）

逆相 有機酸

1. Oxalic acid

2. Tartaric acid

3. Glycolic acid

4. Formic acid

5. L-Malic acid

6. Malonic acid

7. Lactic acid

8. Acetic acid

9. Maleic acid

10. Citric acid

11. Succinic acid

12. Fumaric acid

13. Acrylic acid

14. Propionic acid

mAU

50

40

30

20

10

0

10 8 6 420 min

2,3

1

4

5

7

8 9 10

11

6

12

14

13

Column ： YMC-Triart C18 （3 μm, 12 nm） 150×3.0 mmI.D.

Eluent ：20 mM phosphoric acidFlow rate ：0.425 mL/minTemperature ：37℃Detection ：UV at 220 nmInjection ：2 μL （0.005 〜 1.5 mg/mL）

水100％移動相で分離

（U111212Q）

（F130618A）

逆相 アミノ酸

0 2 4 6 min

0

50

100

150

mAU

2

31

Standard solution*1

(1.10 mg/mL L-Valine, 0.92 mg/mL L-Isoleucine, 1.84 mg/mL L-Leucine)

System suitabilityrequirement

Result

Resolution (2, 3) 1.5 2.68

1 0.02%

2 0.02% Relative standard deviation of

the retention time (each of the peaks)

1.0%

3 0.02%

L-Isoleucine L-LeucineL-Valine

CH3

COOH

NH2H

CH3 CH3 COOH

NH2HCH3

CH3 COOH

CH3

NH2H

H

1. 2. 3.

Column ： YMC-Triart C18 （3 µm, 12 nm） 150×4.6 mmI.D.

Eluent ： phosphate buffer（pH 2.8）*2/acetonitrile（97/3） *2 Dissolve 31.2 g of NaH2PO4･2H2O in 1000 mL of water and adjust pH 2.8 with H3PO4

Flow rate ： 0.9 mL/min（adjust the flow rate so that the retention time of L-Valine is about 2.5 min）Temperature ：40℃Detection ：UV at 210 nmInjection ：20 µL

（The Japanese Pharmacopoeia 17th; Identification）

水比率の高い移動相で、疎水性のアミノ酸を分離（JP条件）

*1 Standard solution was prepared from L-Valine, L-Isoleucine and L-Leucine supplied as a reagent for laboratory use.

HILIC アミノ酸

0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0 12.0 14.0 16.0 18.0 min

Alanine (Ala)

Tryptophan (Trp)

Leucine (Leu)

Phenylalanine (Phe)

Isoleucine (Ile)

Methionine (Met)

Tyrosine (Tyr)

Valine (Val)

Cysteine HCl (Cys)

Proline (Pro)

Threonine (Thr)

γ-Aminobutyric acid (GABA)

Serine (Ser)

Glycine (Gly)

Asparagine (Asn)

Glutamine (Gln)

Citrulline (Cit)

Glutamic acid (Glu)

Histidine (His)

Aspartic acid (Asp)

Arginine HCl (Arg)

Lysine (Lys)

Ornithine HCl (Orn)

*

*Chloride ion contained in the sample solution**Sodium ion contained in the sample solution

*

**

*

*

0

pA

100

200

300

400

500

Column ： YMC-Triart Diol-HILIC（5 μm, 12 nm） 150×4.6 mmI.D.

Eluent ：A）100 mM HCOOH-HCOONH4（pH 3.6） B）acetonitrile 83-80%B（0-12 min）, 80-68%B（12-20 min）Flow rate ：1.0 mL/minTemperature ：40℃Detection ：Corona® CAD®（Charged Aerosol Detector）Injection ：10 μL（0.1 mg/mL）

HILICモードでアミノ酸の一斉分析も可能

Corona and CAD are trademarks of Thermo Fisher Scientific.

（F130618A） （U120210A）

キラル分離用

カラム・充填剤

2

イオン交換

カラム・担体

3

ＳＥＣ用カラム

4

有機シリカハイ

ブリッドカラム

5

コアシェル

カラム

6

汎用分析用

カラム

ＯＤＳ

7

汎用分析用

カラム

逆相系

8

汎用分析用

カラム

順相系

9

ナノ・マイクロ

ＬＣ用カラム

10

脂肪酸分離用

カラム・充填剤

11

分取用カラム

12

ＳＦＣ用カラム

13

バルク充填剤

14

サンプル前処理・

アクセサリー

15

分取システム

16

フロー反応シス

テム・周辺機器

17

受託精製

18

取扱製品

19

インフォメーション

20

カラム選択の

てびき

1

24

逆相カラム選択ガイド

主要市販逆相カラムの分離選択性比較

Triart C18

移動相温度

構造差が小さい （異性体）

Triart C18 ExRSTriart C8YMC-Pack ODS-ALYMC Carotenoidキラル分離用カラム

Triart Phenyl

芳香族化合物（π電子ドナー）シス-トランス異性体極性化合物含ハロゲン

Triart PFP

芳香族化合物（π電子アクセプター）共役系化合物

特徴的な構造/官能基がある ×

他のC18カラムでは分析が難しい以下の化合物にも対応可能!! • 保持が小さい • ピーク形状が悪い • 移動相pHに制約あり etc.

1st choice! 2nd choice!

幅広い極性の化合物に 1種で対応可能!!

分離改善

変更 保持改善

Triart C8

Triart PFP

HILICモード（Triart Diol-HILIC）

保持が大きすぎる（ピーク同士が離れすぎている）

保持が小さい（高極性化合物）

塩基性化合物

L-column ODS

L-column2 ODS

Mightysil RP-18Inertsil ODS-3

CAPCELL PAK C18 AQ

CAPCELL PAK C18 MGII

CAPCELL PAK C18 MGIII

Develosil ODS-MG

Develosil C30-UG

Develosil ODS-SR

TSKgel ODS-80Ts

TSKgel ODS-100S

Luna C18(2)

Gemini C18

Gemini-NX C18

XTerra MS C18

Symmetry C18

Atlantis dC18

Pro C18

Hydrosphere C18

Sunfire C18

Atlantis T3ZORBAX SB-C18

ZORBAX Extend-C18

Cadenza CD-C18

Unison UK-C18

CAPCELL PAK C18 MG

XBridge C18

Hypersil GOLD

Eternity-C18

Triart C18

Inertsil ODS-4

Pro C8

Pro C4

Triart C8

InertSustain C18

CAPCELL PAK C18 ACR

0.030

0.050

0.070

0.090

0.110

0.130

0.150

0.170

1.00 3.00 5.00 7.00 9.00 11.00 13.00 15.00 17.00

Triart C18 ExRS

Pro C18 RS

MeteoricCore C8

Eluent: methanol/water (80/20) [Amylbenzene]methanol/water (30/70) [Caffeine, Benzene]

(S150318A)

Meteoric Core C18

疎水性 [k’�(Amylbenzene)] 　

水素結合性 [α

(Caffeine/Benzene)]

標準的ODSカラム疎水性 ：中 水素結合性 ：中

高親水性タイプ疎水性 ：小 水素結合性 ：大

高疎水性タイプ疎水性 ：大 水素結合性 ：小

カラム選択の

てびき

1