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Free Oxygen Radicals Monitor

Bedienungshandbuch FORMox II Version 1.2 12.02.2008

Fax: +49 (0) 61 74/2 32 03 • info@micromedical.de • www.micromedical.de

Version 1.2, 12.02.2008

BEDIENUNGSHANDBUCH

BEDIENUNGSHANDBUCH ....................................................................2 Allgemein……..…………………………..………………………………..3

Technische Beschreibung .......................................................................4 Mitgeliefertes Material ...........................................................................4 Zubehör....................................................................................................4 Installation und Garantie .......................................................................4 Wartung und Reinigung .........................................................................5 Vorsichts- und Warnhinweise ................................................................5 Tastatur....................................................................................................7 Menü.........................................................................................................7 Setup Menü..............................................................................................8 FORMox Untersuchungen .....................................................................8

Einleitung..............................................................................................8 Kapillarblutentnahme .......................................................................10 FORT (Free Oxygen Radicals Test).....................................................10 FORD (Free Oxygen Radicals Defence)...........................................13 Redox Balance und Behandlungsprofile ..........................................17

Lösung von technischen Problemen ....................................................19 DIE RICHTIG BLUTENTNAHME AM FINGER............................22

SYMBOLS/SYMBOLE ...........................................................................25

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Allgemein Das FORMox ist ein Fotometer zur Untersuchung von oxidativem Stress im Vollblut. Das Testverfahren für die Parameter FORT und FORD fällt in den Bereich der in vitro Diagnostik. Das System wurde für Arztpraxen, Labors, Apotheken, Gesundheitszentren sowie für Berufsgruppen, die sich mit Gesundheit und Wellness beschäftigen, entwickelt. Das FORMox System ermöglicht eine schnelle und vollständige Untersuchung des Oxidationsstresses im Vollblut. Das System verwendet nasschemische gebrauchsfertige Reagenzien (FORT- und FORD Testkits) sowie einen speziellen Fotometer. Das Gerät basiert auf der Absorption von monochromatischem Licht, welches die entstehende Farbintensität der auf 37oC erwärmten Probe misst. Die Intensität der Farbe korreliert mit der Konzentration der reaktiven Substanzen in der jeweiligen Probe, entsprechend der kalibrierten Standardprobe, die im Mikroprozessor gespeichert ist. Die Ergebnisse sollten nur von qualifizierten Fachleuten ausgewertet werden. Falls die gemessenen Werte außerhalb der Normalbereiche liegen, wird empfohlen, einen Facharzt zu Rate zu ziehen. Der Hersteller und/oder Vertreiber übernimmt keinerlei Verantwortung und/oder Haftung für Schäden, die im Zusammenhang mit den Messergebnissen, der Auswertung und/oder Behandlungen jeder Art und Natur, die auf der Grundlage der vom Gerät verarbeiteten Daten gewählt, empfohlen oder verschrieben wurden. FORMox wurde mit dem Ziel höchstmöglicher Anwenderzweckmäßigkeit entwickelt. Um den richtigen Betrieb des Gerätesystems zu gewährleisten und um Probleme oder ungenaue Ergebnisse zu vermeiden, empfehlen wir, das Bedienungshandbuch, die Packungsbeilagen und alle anderen gelieferten Informationen aufmerksam zu lesen. Der Hersteller behält sich das Recht vor, die im vorliegenden Handbuch enthaltenen Informationen ohne vorherige Mitteilung zu ändern. FORMox ist ein Produkt mit CE-Zertifikat (CE0344).

Das Produkt ist zertifiziert entsprechend den 98/79CE Richtlinien für In vitro-Diagnostik-Medizinprodukte.

0344

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Technische Beschreibung

Messprinzip Lambert-Beer-Gesetz Temperatur Küvetten 37 ± 0.2°C Lichtquelle LED, 505 nm Optischer Weg 1 cm Display LCD grafisch 128x64 dots Gewicht ca. 0.6 Kg Maβe 190 mm (b), 160 mm (l), 60 mm (h) Strom 12 VDC Energieabsorption max. 45 Watt Arbeitsbedingungen 15-30°C (Rh 90% max.) Lagertemperaturbereich 08-38°C (Rh 90% max.) Zertifizierung CE0344-Zeichen

Mitgeliefertes Material • 1 Fotometer FORMox • 1 Stromkabel • 1 Netzteil • 1 Handbuch • Sicherheitshinweise • 1 Reagenzständer aus Kunststoff für konische Microvetten • 1 Reagenzständer aus Kunststoff für quadratische Küvetten • 1 Pipette • 1 Kapillarhalter (crocodile clips)

Zubehör Auf Wunsch lieferbares Zubehör:

• Zentrifuge (AD-12051) • Kontrollset optisches System (AD-12032) • FORT Kontrollserum (AD-12028) • FORD Kontrollserum (AD-12035).

Installation und Garantie Vor dem Öffnen das Paket auf mögliche Beschädigungen prüfen. Nach dem Öffnen des Pakets den Inhalt auf Vollständigkeit (siehe Angaben im Lieferschein) prüfen.

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Achtung: Es wird empfohlen die Originalverpackung mindestens für die Dauer der Garantiezeit aufzubewahren, um im Garantiefall das Gerät in der Originalverpackung zurück schicken zu können. Zur Installation von FORMox ist kein Fachpersonal erforderlich. Der Benutzer muss lediglich das Stromkabel des Geräts an das Stromnetz anschließen und danach die Taste ON/OFF drücken. Das Display ist sehr einfach gehalten und führt den Anwender – Benutzer freundlich - Schritt für Schritt durch den Ablauf. Wartung und Reinigung Das Gerät sollte nicht bei direkten Lichteinstrahlungen, hohen oder niedrigen Temperaturen betrieben und vor Staub, Sand oder chemischen Substanzen geschützt werden. Es wird darauf hingewiesen, FORMox gemäß den in der Tabelle der technischen Beschreibung angegebenen Bedingungen aufzubewahren und zu benutzen. Das Gehäuse kann mit einem weichen Stoff- oder Papiertuch, das mit einer Lösung aus Wasser und/oder Alkohol befeuchtet wurde, gereinigt werden. Keine Lösung direkt ins Innere des Küvettenschachts oder auf das Display spritzen oder sprühen. Ein optischer Kontroll-Kit kann bei Bedarf bestellt werden. Vorsichts- und Warnhinweise Das FORMox ist ein Gerät zur in vitro Diagnostik. Ausschließlich das mitgelieferte Netzteil und Stromkabel verwenden. Keine spitzen Gegenstände oder Finger in den Küvettenschacht stecken. Die mit FORMox bestimmbaren Parameter (FORT und FORD) wurden Bediener freundlich entwickelt. In jedem Fall wird empfohlen, die für die Verwendung chemischer Produkte erforderlichen Vorsichtsmaßnahmen anzuwenden. Bei der Handhabung von Reagenzien und potenziell schädlichen Substanzen sind Einweghandschuhe zu benutzen. Die Reagenzgläser mit den biologischen Proben sind während und nach der Durchführung der Untersuchung sorgfältig zu verschließen. Die Entsorgung ist gemäß den geltenden Vorschriften vorzunehmen. Auf einer wasserfesten Fläche arbeiten und diese am Ende der Untersuchungen sorgfältig reinigen.

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Während der Durchführung der Untersuchungen nicht essen, trinken oder rauchen. Die Reagenzien niemals mit dem Mund pipettieren. Die aus der Verwendung von FORMox stammenden Abfallprodukte müssen gemäß den geltenden Vorschriften entsorgt werden, wobei sie in speziellen Behältern aufbewahrt werden sollten, um sowohl eine Umweltverschmutzung als auch das Risiko eines Kontakts mit Personen, Tieren oder anderen Arten von Abfällen zu vermeiden. Das Produkt entspricht den Vorgaben der Direktiven 73/23/EEC, 89/336/EEC, den Änderungen gemäß der 93/68/EEC und den CEI EN 61010-1 (Safety Requirements for electrical equipment for measurement, control and laboratory use) und CEI EN 61326-1 (04/98) + A1 (05/99) + A2 (01/02) (Electrical equipment for measurement, control and laboratory use – Electromagnetic Compatibility Requirements).

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Tastatur

HINWEIS Nach demAufwärmTemperatFORMox Zur WahTaste 3 un Wenn SieTasten 4 u Steht daseine Mess

2

Menü

Um einenRückwärtst

5

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3

1. ON/OFF 2. Auswahl 3. Beenden 4. Vorwärts im Programm 5. Zurück im Programm

Einschalten startet das Gerät automatisch ng des Küvettenschachts. Bei Erreichen von r für die gesamte Dauer des Betriebs konstanst nun bereit, Messungen jederzeit durchzuführedes Konfigurationsmenüs drücken Sie bitte g

d 5. sich im Konfigurationsmenü befinden, drücke

nd 5 gleichzeitig, um das optische System zu übeerät auf „stand-by“ drücken Sie bitte eine belieng durchzuführen.

1

FORT tesFORD tesRedox Bal

Test auszuwählen, drücken Sie die Vste. Bestätigen mit Taste 2.

7

die Phase der 37°C wird die t gehalten. Das n. leichzeitig die

n Sie bitte die rprüfen. bige Taste, um

Menu t t ance

Select

orwärts- oder

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Nachdem die Messung beendet ist, entnehmen Sie die Küvette aus dem Schacht. Das Programm springt dann automatisch in das Startmenü zurück. Setup Menü Zur Wahl des Konfigurationsmenüs muss der Küvettenschacht leer sein. Drücken Sie bitte gleichzeitig die Tasten 3 und 5.

Stored data Date and timFORT K facFORD K fac

Exit

12

3 4

1. Position 1 anklicken, um dieletzten 10 Ergebnisse werdeDatum, Uhrzeit und Art des T

2. Position 2 ermöglicht es, mUhrzeit einzustellen.

3. Position 3 ermöglicht es, mifür den FORT Test einzustell

4. Position 4 ermöglicht es, mifür den FORD Test einzustell

FORMox UntersuchungeEinleitung Die meisten pathologischen und dabeim Menschen werden durch oxiderster Linie werden diese VorgängRadikale – verursacht, die hauptsä(ROS = Reative Oxygen Species) reBei lebenden Organismen kann danegative Auswirkungen haben, wDNA/RNA, Proteinen und Lipidendes Zellmetabolismus produziert uultraviolettes Licht, Rauch, Ozo

Setup

e settings tor 10tor 10

Select

archivierten Daten anzuzeigen. Die n automatisch gespeichert und nach ests unterschieden. it Hilfe der Pfeiltasten Datum und

t Hilfe der Pfeiltasten den K-Faktor en. t Hilfe der Pfeiltasten den K-Faktor en.

n

s Alter fördernde Stoffwechselprozesse ative chemische Prozesse verursacht. In e durch hochreaktive Moleküle – freie chlich durch reaktive Sauerstoffspezies präsentiert werden. s Vorhandensein von freien Radikalen ie direkte oder indirekte Schäden bei . ROS werden kontinuierlich während nd können durch externe Quellen wie n, chemotherapeutische Agenten und

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Toxine entstehen. Unter physiologischen Bedingungen werden die ROS durch endogene Antioxidanzien und Freie Radikalfänger im Gleichgewicht gehalten. Überschüssige Mengen von Freien Radikalen können daher ernste Schäden verursachen und strukturelle und funktionelle Merkmale der Gewebe verändern. Die lebenden Organismen sind daher von Natur aus mit einem komplexen oxidationshemmenden Abwehrsystem ausgestattet, das in der Lage ist, die durch die Freien Radikale verursachten Schäden zu reduzieren und zu regulieren. Zusammenfassend kann gesagt werden, dass man unter Oxidationsstress im Allgemeinen das Phänomen des dynamischen Gleichgewichts zwischen Oxidanzien und Antioxidanzien versteht. Ein unwirksames Antioxidazionssystem oder eine pathologische Produktion Freier Radikale können daher ein gefährliches Ungleichgewicht mit nachfolgendem hohem Grad an Oxidationsstress verursachen. Die Möglichkeit den Oxidativen Status in biologischen Systemen durch eine einfache und schnelle Messmethode zu erfassen, ist daher von fundamentaler Bedeutung für die Präventionsmedizin, den Wellness-Bereich, Sport und die Gesundheitsfürsorge. Das gilt auch für die Überwachung von Lifestyle-Einflüssen, von antioxidativen Therapien, von Ernährungsempfehlungen und den Nebenwirkungen von Behandlungstherapien. Ein einzelner Freie Radikale Test zeigt nur eine Seite der Medaille. Um ein vollständiges Bild des Oxidativen Stresses zu bekommen, ist es ratsam auch die Antioxidative Kapazität zu messen. Das FORMox ist ein ideales System um den Oxidativen Stress festzustellen, da es sowohl den Schadensverursacher die Freie Radikale (FORT Test), als auch die Schadensverhinderer die Antioxidative Kapazität (FORD) bestimmt. Zusätzlich zeigt der Redox Status einen Therapievorschlag an.

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Kapillarblutentnahme Es ist zu empfehlen, die Untersuchungen bei einem ausgeruhten Patienten im Nüchternzustand oder mindestens 2 Stunden nach der letzten Mahlzeit vorzunehmen. Bei Wiederholungsmessungen im Laufe der Zeit, ist es ratsam, die Untersuchungen stets unter denselben Bedingungen vorzunehmen, um keine weiteren Variablen zu bekommen. Vor der Durchführung des Tests sollte sicher gestellt werden, dass das erforderliche Material bereit liegt: sterile Lanzetten (nur Produkte mit CE-Zeichen benutzen), Desinfektionsmittel (Alkohol ist vorzuziehen – kein Wasserstoffperoxid verwenden), Watte, Handschuhe, Mikrovetten, Küvetten, Kapillaren, Pipette und Spitzen, falls notwendig. Die Blutentnahme wie folgt vornehmen:

a) Den Finger sanft massieren, um den Blutzufluss zur Fingerspitze zu fördern, desinfizieren und den Alkohol vollständig verdunsten lassen.

b) Eine Stelle an der Seite eines Mittelfingers der rechten oder linken Hand aussuchen. Für einen guten Blutfluss sollten sich Hände und Finger warm anfühlen. Mit der Lanzette in die Fingerbeere stechen.

c) Den ersten Bluttropfen verwerfen, denn er könnte hohe Mengen an Zellmaterial enthalten.

d) An der Basis des Fingers leicht drücken, um das Austreten eines zweiten Bluttropfens zu fördern (nicht übermäßig drücken, um eine Hämolyse, d. h. das Reißen von Zellen zu vermeiden). Danach die gewünschte Menge der Probe aufnehmen, wobei die Bildung von Luftblasen zu vermeiden ist.

e) Eventuell überschüssiges Blut entfernen. f) Das Blut in das Testreagenz geben und sorgfältig verschließen. g) Durch wiederholte Umkehrung vorsichtig schwenken. h) Gemäß den weiteren Instruktionen für den Test fortfahren.

FORT (Free Oxygen Radicals Test) Prinzip FORT ist ein kolorimetrischer Test, der auf der Fähigkeit von Übergangsmetallen, z. B. Eisen beruht, die Bildung von Freien Radikalen aus Hydroperoxiden zu katalysieren (Reaktion 1–2), die dann von einem

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Aminoderivat, CrNH21 chemisch eingefangen werden. Dieses Amin reagiert vorzugsweise mit den Radikalarten und bildet eine farbige Radikalaktion, die bei 505 nm (Reaktion 3) messbar ist. Die Intensität der Farbe korreliert direkt mit der Menge der Radikalverbindungen und folglich mit dem Oxidationsniveau der analysierten Probe. Reaktionen 1. R-OOH + Fe2+ → RO• + OH- + Fe3+

2. R-OOH + Fe2+ → ROO• + H+ + Fe2+

3. RO• + ROO• + 2 CrNH2 → ROO- + RO- + [CrNH2+•]

Probe Vollblut. Reagenzien Cod. AD-12107: Aluminiumverpackung 1x30 R2 Eppendorfmikrovetten, Aluminiumverpackung 3x10 R1 Einwegküvetten mit quadratischer Basis, Kapillaren zu 20µl (approx. 32) oder Cod. AD-12133: Aluminiumverpackung 1x5 R2 Eppendorfmikrovetten, Aluminiumverpackung 1x5 R1 Einwegküvetten mit quadratischer Basis, Kapillaren zu 20µl (approx. 7). Vorbereitung der Reagenzien Die Reagenzien sind gebrauchsfertig. Es werden weder Pipetten noch andere Materialien zusätzlich benötigt. Aufbewahrung Die Reagenzien bei Raumtemperatur (15-30°C) im Dunkeln in der Aluminiumverpackung, die sorgfältig verschlossen sein muss, aufbewahren. Die Reagenzien sind bis zum Verfalldatum, das auf dem Packungsetikett angegeben ist, stabil. Kontrolllösung

1 Kehrer JP. The Haber-Weiss reaction and mechanisms of toxicity. Toxicology, 149: 43-50, 2000; Verde V et al. Use of N,N-dimethyl-p-phenylendiamine to evaluate the oxidative status of human plasma. Free Rad Res, 36 (8): 869-873, 2002.

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Ein Kontrollserum (FORT CONTROL, Code AD-12028) mit Referenzwerten ist auf Wunsch lieferbar. DURCHFÜHRUNG DES TESTS

1. Die Blutprobe mit der Kapillare (20 µl) aufnehmen. 2. Das überschüssige Blut an der Außenseite der Kapillare entfernen. 3. Die Kapillare in die Mikrovette des Reagenz FORT R2 geben. 4. Die Mikrovette bis zur vollständigen Entleerung der Kapillare

wiederholt vorsichtig schwenken. 5. Den Inhalt in die Küvette FORT R1 geben und einige Sekunden

schwenken. 6. Die Küvette eine Minute bei ca. 3500 rpm zentrifugieren. 7. Den FORT Test im Menü auswählen. Die aktivierte Küvette in den

Küvettenschacht von FORMox einsetzen. 8. Das Ergebnis ist nach 6 Minuten verfügbar.

Anmerkungen - Das Kapillarblut muss sofort nach der Entnahme analysiert werden. - Venöses Blut darf nur von Fachpersonal abgenommen werden. - Die Küvette in der Zentrifuge mit einem der beiden gerippten Seiten nach oben gewandt positionieren.

- Vor dem Einführen der Küvette in den Küvettenschacht sicher stellen, dass die Kapillare aufrecht in einer Ecke steht, damit sie nicht mit dem Durchgang des Lichtbündels interferiert.

- Falls die Küvette während der Messung aus dem Küvettenschacht genommen wird, wird eine Warnmeldung angezeigt. Wenn innerhalb von 5 Sekunden die Küvette wieder eingesetzt wird, wird die Messung weitergeführt, sonst wird die Messung abgebrochen.

ERGEBNISSE Die Messung des FORT Tests erfolgt gemäß einer linearen kinetischen Reaktion. 3 Minuten nach der Einführung der Küvette in den Küvettenschacht erfolgt eine erste Lesung und nach weiteren 3 Minuten die zweite Lesung. Das Ergebnis ist die Differenz zwischen den beiden Lesungen. Die gemessene kinetische Reaktion wird automatisch in konventionellen Einheiten (FORT units) angegeben sowie äquivalente Konzentrationen von H2O2.

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Eine FORT Einheit entspricht ca. 7,6 µmol/l (0,26 mg/l) H2O2. Bezugswerte Als normal gelten Werte bis zu 310 FORT Einheiten, die ca. 2,35 mmol/l H2O2

2 entsprechen. Auswertung der Ergebnisse des FORT Tests: Je höher der erhaltene Wert ist, desto höher ist das Niveau der gemessenen Hydroperoxide und das Risiko von Schäden, die mit dem Oxidationsstress verbunden sind. Im Falle von höheren Werten als den Bezugswerten ist zu empfehlen, medizinisches Fachpersonal zu Rate zu ziehen, das in der Lage ist, geeignete Änderungen von Lebensstil, Diät und/oder Gewohnheiten vorzuschlagen oder angemessene Ergänzungen und Therapien zu verschreiben oder falls notwendig weitere spezifische klinische Untersuchungen durchzuführen. Es ist zu empfehlen, stets auf den subjektiven Basiswert (z. B. den bei der ersten Visite bei „normalen“ Bedingungen, bei einer anscheinend gesunden Person ohne eine offensichtliche oder vermutete Erkrankung, ohne laufende pharmakologische Behandlung und/oder Einnahme von Nahrungsergänzungen usw.) Bezug zu nehmen, um in der Lage zu sein, bedeutsame Veränderungen unverzüglich festzustellen und eventuell sofort zu handeln und gründlichere Untersuchungen vorzunehmen. FORD (Free Oxygen Radicals Defence) Prinzip Der FORD Test beruht auf der Bildung eines farbigen Radikals, das sich in Präsenz von Substanzen mit oxidationshemmender Wirkung verringert3. In saurer Umgebung (pH = 5,2) reagiert ein geeignetes Oxidanz (FeCl3) mit einem farblosen Aminoderivat (Chromogen) und bildet die entsprechende

2 Dal Negro R W et al. Normal Values and Reproducibility of the Major Oxidative Stress obtained thanks to FORM System. GIMT, Italian Journal of Chest Diseases, 57 (3): 199-209, 2003. 3 Schlesier K et al. Assessment of antioxidant activity by using different in vitro methods. Free Rad Res, 36(2):177-187, 2002; Fogliano V et al. Method for measuring antioxidant activity and its application to monitoring the antioxidant capacity of wines. J Agric Food Chem, 47:1035-1040, 1999.

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Radikalkation (Chromogen•+): In dieser Form ist die aminische Substanz stabil und farbig; es ist daher möglich, fotometrische Messungen mit 505 nm vorzunehmen (Reaktion 1). Die oxidationshemmenden Verbindungen (AOH), die in der danach hinzu gefügten Probe vorhanden sind, verringern die aminische Radikalkation und bewirken ein Verschwinden der Farbe der Lösung proportional zu ihrer Menge (Reaktion 2). Reaktionen 1. Chromogen (farblos) + Fe2+ + H+ → Chromogen•+

(purpur)2. Chromogen•+

(purpur) + AOH → Chromogen+(farblos) + AO

Probe Vollblut. Reagenzien Cod. AD-12136: Aluminiumverpackung 1x30 S1 weiße Einweg-Mikrovetten, Aluminiumverpackung 1x30 S2 in Einweg-Mikrovetten mit dem blauen Etikett, Aluminiumverpackung 3x10 C1 in Einwegküvetten mit quadratischer Basis, 1 Glasbehälter mit S3, Kapillaren zu 50µl (approx. 32), Einwegpipettenspitzen. Cod. AD-12139: Aluminiumverpackung 10 S1 weiße Einweg-Mikrovetten, Aluminiumverpackung 10 S2 in Einweg-Mikrovetten mit dem blauen Etikett, Aluminiumverpackung 10 C1 in Einwegküvetten mit quadratischer Basis, 1 Glasbehälter mit S3, Kapillaren zu 50µl (approx. 12), Einwegpipettenspitzen. Vorbereitung der Reagenzien Die Reagenzien sind gebrauchsfertig. Aufbewahrung Die Reagenzien bei Raumtemperatur (15-30°C) im Dunkeln in der Aluminiumverpackung, die sorgfältig verschlossen sein muss, aufbewahren. Die Reagenzien sind bis zum Verfalldatum, das auf dem Packungsetikett angegeben ist, stabil. Kontrolllösung Ein Kontrollserum (FORD CONTROL, Code AD-12035) mit Referenzwerten ist auf Wunsch lieferbar.

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DURCHFÜHRUNG DES TESTS Die auszuführenden Instruktionen sind in 3 Phasen unterteilt: A. Erstes Lesen (Absorption des Chromogens)

1. Wähle den FORD Test im Menü aus. Den Inhalt der Mikrovette S2 mit dem blauen Etikett in die quadratische Küvette des Reagens FORD C1 geben und 50µl des Reagens S3 hinzufügen.

2. Einige Sekunden schwenken. 3. Die Küvette in den Küvettenschacht des FORMox geben. 4. Erste Lesung dauert 4 Minuten. 5. Die Küvette herausnehmen.

B. Vorbereitung der Blutprobe (während die erste Lesung läuft) 7. Die Blutprobe mit der Kapillare (50 µl) aufnehmen. 8. Die Probe in die Mikrovette S1 geben. 9. Einige Sekunden schwenken. 10. 1 Minute bei ca. 3500 rpm zentrifugieren.

Die transparente Flüssigkeit (Plasma) oberhalb der nach dem Zentrifugieren erhaltenen Ablagerung wird als Überstand bezeichnet und stellt die Probe dar, die zur Durchführung der Messung verwendet wird.

C. Zweites Lesen (Absorption der Probe) 11. 100µl Probenplasma aus S1 entnehmen. Da die mitgelieferte

Pipette ein Volumen von 50µl entnimmt, müssen 2 Pipettenentnahmen nacheinander vorgenommen werden.

12. Die Probe der in der vorhergehenden Phase A verwendeten Küvette C1 hinzufügen.

13. Einige Sekunden schwenken. 14. Die Küvette unverzüglich in den Küvettenschacht des FORMox

geben. 15. Nach 2 Minuten erfolgt das zweite Lesen und sofort danach ist

das Endergebnis verfügbar.

Anmerkungen - Es ist empfehlenswert den FORD Test nüchtern und in Ruhe

durchzuführen. - Bei der Verwendung der Pipette jedes Mal eine neue Spitze benutzen.

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- Stets mit dem entsprechenden Ausgleichsreagenz zentrifugieren. - Nach dem Zentrifugieren die Mikrovette mit der Probe vorsichtig handhaben und brüske Bewegungen und/oder Stöße vermeiden, die das Sediment wieder in Suspension bringen könnten.

- Da die Reaktion zwischen dem Chromogenradikal und den Antioxidanzien der Probe sofort erfolgt, ist es äußerst wichtig, die Küvette sofort nach Beifügung der Probe in den Küvettenschacht zu geben.

- Während der Entnahme der Probe mit der Pipette nicht die am Boden der Mikrovette abgesetzten roten Blutzellen berühren!

- Falls die Küvette während der Messung aus dem Küvettenschacht genommen wird, wird eine Warnmeldung angezeigt. Wenn innerhalb von 5 Sekunden die Küvette wieder eingesetzt wird, wird die Messung weitergeführt, sonst wird die Messung abgebrochen.

ERGEBNISSE Die Messungen des FORD Tests beruhen auf dem Verschwinden der Farbe, die mit der Präsenz des Aminoradikals verbunden ist. Ein erstes fotometrisches Lesen erfolgt 4 Minuten nach der Einführung der aktivierten Küvette in den Küvettenschacht, ein zweites Lesen 2 Minuten nach dem Hinzufügen der Probe. Das Ergebnis wird berechnet, nachdem die Differenz zwischen den beiden Lesungen bestimmt wurde. Die gemessene kinetische Reaktion wird automatisch in äquivalente Konzentrationen (mmol/l) von Trolox (6-Hydroxy-2, 5, 7, 8-Tetramethylchroman-2-Carboxylsäure, ein Derivat des Vitamins E, zellendurchlässig und mit bedeutenden oxidationshemmenden Eigenschaften4), umgewandelt. Referenzwerte: 1.07 – 1.53 mmol/l Trolox-Äquivalente5.

Da der Antioxidative Status abhängig ist von Herkunft, Diät und Umweltbedingungen kann es hier zu größeren Heterogenitäten in der Population im Zusammenhang mit Erkrankungen und Krankheitsdauer kommen. Daher ist es ratsam individuelle Referenzwerte festzulegen.

4 Miller NJ et al. A novel method for measuring antioxidant capacity and its application to monitoring the antioxidant status in premature neonates. Clin Sci, 84: 407-412, 1993. 5 FEBS Lett 384: 240-242, 1996; Clin Sci 84: 407-412, 1993.

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Redox Balance und Behandlungsprofile Einführung Die Einschätzung des oxidativen Stresses wird verbessert durch die simultane Bestimmung von Freie Radikalen und Antioxidativer Kapazität, welche die Redox Balance berücksichtigt. Die Redox Balance, welche aus dem FORT und FORD Test resultiert, zeigt einen Index zum Oxidativen Stress an. Basierend auf der Redox Balance wird eine Therapieempfehlung gegeben. Eine Anleitung (Guide) zu Profilcharakteristiken, Behandlungsprofile und Vorschläge können auf Anfrage geliefert werden. Wie bekommt man eine Redox Balance Auswertung

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Redox Balance

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Teste, FORT und FORD, hintereina Redox Balance zum automatischedex ist von 0 – 100 eingeteilt. Dngezeigt, wenn eine Berechnung une „Continue“ um das Behandlungsp sind mit den Buchstaben A – E hine „Exit“ um zum Startmenü zurückz

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17

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rt, wenn die beiden letzten durchgeführt werden. Einfluss auf das Resultat.

Version 1.2, 12.02.2008

• Die letzte Redox Balance wird solange gespeichert bis ein neuer Test

erfolgt. • Wenn die Redox Balance nicht kalkuliert werden kann, wird kein

Behandlungsprofil angezeigt.

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Version 1.2, 12.02.2008

Lösung von technischen Problemen Falls bei der Benutzung von FORMox Probleme technischer Natur (z. B. keine Aufwärmphase, blockierte oder nicht funktionierende Anzeige) auftreten sollten, ist wie folgt vorzugehen:

1. Das Gerät ausschalten (Stecker aus dem Stromanschluss ziehen) und wieder einschalten.

2. Falls notwendig, die Operation ein zweites Mal wiederholen, dabei einige Minuten warten, bevor das Gerät wieder eingeschaltet wird.

3. In keinem Fall jedoch versuchen, die Stromkreise im Innern des Geräts zu öffnen oder zu reparieren.

Die am häufigsten festgestellten Probleme sind in der Anlage I zusammengefasst. Wenn das festgestellte Problem andauert und/oder nicht in der angegebenen Liste vorhanden ist, wenden Sie sich bitte an Ihren Vertriebspartner.

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ANLAGE I: LEITFADEN ZUR LÖSUNG VON PROBLEMEN V.1.2, 12.02.2008

PROBLEME MÖGLICHE URSACHEN LÖSUNGEN Der durchzuführende Test wurde nicht ausgewählt.

Wähle den richtigen Test aus.

Die Küvette wurde nicht richtig in den Küvettenschacht gegeben.

Die Küvette so einsetzen, dass das Etikett mit dem Strichcode der Küvette dem Bediener zugewandt ist.

Die Küvette ist nicht korrekt im Küvettenschacht eingesetzt.

Die Küvette mit dem Barcode-Etikett dem Bediener zugewandt vollständig in den Küvettenschacht einführen (bis zum Anschlag).

Der Strichcode der Küvette ist beschädigt. Wiederhole den Test mit einer anderen Küvette.

Bei Einführung der Küvette in den Küvettenschacht beginnt der Test nicht automatisch.

Sehr helles Licht scheint direkt in den Küvettenschacht.

Das Gerät darf sich nicht in der Nähe von Licht durchfluteten Fenstern oder anderen, künstlichen Lichtquellen stehen, die direkt in den Küvettenschacht strahlen.

Es wurde ein falsches Desinfektionsmittel für den Finger benutzt.

Nur Alkohol oder ähnliche Mittel verwenden. Die Haut gut trocknen lassen, bevor die Probe entnommen wird. Desinfektionsmittel wie H2O2 (Wasserstoffperoxid) interferieren mit der Reaktionen und BEWIRKEN FALSCHE HOHE ERGEBNISSE.

Die Blutprobe wurde nicht korrekt entnommen. Den Finger nicht übermäßig drücken, Hämolysen vermeiden. Den ersten Bluttropfen entfernen. Das Kapillarblut muss sofort nach der Entnahme analysiert werden. Venöses Blut kann in Präsenz geeigneter Antikoagulanzien (Heparin) bei 2-8°C 3-4 Stunden aufbewahrt werden. Wenn der Parameter FORD durchgeführt wird, ist zu kontrollieren, dass der durch Zentrifugieren erhaltene Überstand transparent ist und korrekt mit der Pipette entnommen wurde.

Unerwartete Werte (auffällig hoch oder niedrig)

Das Volumen der Probe ist nicht korrekt. Die Bildung von Luftblasen während der Phase der Blutentnahme vermeiden (URSACHE FÜR NIEDRIGERE WERTE). Sicher stellen, dass die Kapillare oder die Pipettenspitze, mit denen die Entnahme durchgeführt wird, vollständig gefüllt wird (URSACHE FÜR NIEDRIGERE WERTE). Falls die Entnahme mit einer Pipette erfolgt, sicher stellen, dass die Spitze richtig eingesetzt ist. Alles überschüssige Blut, an der Außenfläche der Kapillare oder der Spitze, entfernen (URSACHE FÜR HÖHERE WERTE). Kapillare oder Spitze vollständig entleeren (URSACHE FÜR AUFFÄLLIG NIEDRIGE WERTE). Die Lösung im Inneren der Kapillare und des Reagenzglases müssen dieselbe Farbe haben, Zeichen einer homogenen

ANLAGE I – FORTSETZUNG V.1.2, 12.02.2008

Auflösung der Probe.

Vorhandensein von Eisen chelatisierenden Substanzen und/oder Antioxidanzien in der Probe

Substanzen wie EDTA, Deferroxamin, D-Penicillamin, Zitronensäure und ihre Salze, BHT, BHA, Ascorbinsäure (Vitamin C) etc. INTERFERIEREN MIT DER REAKTION einiger Parameter und führen zu unzuverlässigen Werten. Falls notwendig, nur Heparin als Antikoagulans verwenden.

Position der Kapillare in der Küvette Um eine Interferenz mit dem Durchgang des Lichtbündels zu vermeiden, muss die Kapillare, falls vorhanden, entlang einer der gerippten Seiten der Küvette positioniert werden, bevor sie in den Küvettenschacht gegeben wird. Falls notwendig, die Kapillare in eine Ecke schieben, indem man mit der Fingerspitze leicht auf die in Schräglage gehaltene Küvette klopft.

Der eingestellte K-Faktor ist falsch. Ein zu hoher oder zu niedriger K-Faktor wird zu zu hohen oder zu niedrigen Ergebnissen führen. Prüfe den K-Faktor im Display mit dem auf der Packung. Falls nötig wähle im Konfigurations-Menü „FORT K-Faktor oder FORD K-Faktor und ändere entsprechend.

Zustand der Küvette Eventuelle Schmutzränder oder Fingerabdrücke mit einem weichen, trockenen Tuch entfernen. Kontrollieren, dass die glatten Seiten der Küvette nicht durch Risse und/oder offensichtliche und tiefe Einschnitte beschädigt sind.

Verfahrensfehler Die Untersuchungen nach den Anweisungen vornehmen (siehe Packungsbeilage und/oder Anlage III + IV).

anormale Hämatokritwerte Hämatokritwerte außerhalb des Normalbereichs (36-48%) können zu unerwarteten Ergebnissen führen. Niedrige Hämatokritwerte führen zu erhöhten Ergebnissen, hohe Hämatokrit Werte führen zu niedrigen Ergebnissen.

falsche Temperatur im Küvettenschacht Überprüfen, ob die Erwärmungsphase korrekt erfolgte (wenn das Gerät seit langer Zeit ausgeschaltet ist, dauert diese Phase einige Minuten). Der Küvettenschacht muss ständig eine Temperatur von 37°C±0.2 haben, was bei übermäßig warmen oder kalten Arbeitsräumen unmöglich ist. Das Gerät nur unter den vorgegebenen Arbeitsbedingungen betreiben.

Zustand der Reagenzien Die Reagenzien unter den auf der Verpackung angegebenen Bedingungen aufbewahren. Die Verpackung wieder korrekt verschließen.

Redox Balance wird nicht angezeigt – N/A Meldung wird angezeigt.

Die erforderlichen Bedingungen wurden nicht eingehalten.

Versichern Sie sich, dass die zwei letzten Messungen unterschiedliche Parameter sind und dass das Datum das gleiche ist.

Version 1.2, 12.02.2008 ANLAGE II

DIE RICHTIG BLUTENTNAHME AM FINGER

Benötigte Materialien: Lanz ette, Desinfektionsmittel, Purzellin, Handschuhe, Testmaterial.

1. Leicht den Finger Massieren. 2. Finger mit Desinfektionsmittel desinfizieren. 3. Mit der Lanzette den

Fingerstich vornehmen.

4. Ersten Tropfen Blut mit

Purzellin wegwischen.

Leicht den Finger drücken Die Kapillare leicht schräg nach oben in den Bluttropfen halten und die benötigte Blutmenge entnehmen.

5. Überschüssiges Blut abwischen.

6. Die blutgefüllte Kapillare in

die quadratische Küvette geben.

Version 1.2, 12.02.2008 ANLAGE III

Kurzanleitung FORT TEST

Geben Sie die Kapillare in die Mikrovette R2 und schwenken diese hin und her.

Schütten Sie den Inhalt in die Küvette und schwenken diese hin und h

Zentrifugieren Sie 1 Minute.

Setzte die Küvette in den Küvettenschacht.

Das Ergebnis wird nach 6 Minuten angezeigt und gespeichert.

Wählen Sie FORT TEST im Startmenü.

COLLECT 20µl of BLOOD using the CAPILLARY tubeSammeln Sie 20 µl Blut mit der Kapillare.

ANLAGE IV Version 1.2, 12.02.2008

Kurzanleitung FORD TEST

Wählen Sie FORD TEST im Startmenü

Zentrifugieren Sie 1 Minute.

Sammeln Sie 20 µl Blut mit der Kapillare und geben diese in die Mikrovette S12 und schwenken diese hin und her. Setzen Sie die Küvette in den Küvettenschacht. Warten Sie 4

Minuten für die erste Lesung.

Schütten Sie den Inhalt von S2 BLAUE Mikrovette und 50µl von S3 in die quadratische Küvette, danach

schwenken.

Pipettieren Sie 100 µl der durchsichtigen zentrifugierten Lösung in die quadratische Küvette C1 und schwenken diese hin und her.

Setzten Sie die Küvette in den Küvettenschacht.

Das Ergebnis wird nach 2 Minuten angezeigt.

Version 1.2, 12.02.2008

SYMBOLS/SYMBOLE

In vitro diagnostic medical device Nur für Diagnostik in vitro

Batch Number Lotnummer

Expiry Date Verfalldatum

Single Use Only Nicht wieder verwenden.

CE Mark CE-Zeichen

0344

Manufacturer Hersteller

Attention – Read the manual carefully Achtung – Das Handbuch aufmerksam lesen.

Biological Risk Biologische Gefahr

Storage Temperature Lagertemperatur

Do not dispose the instrument with other household wastes at the end of its working life Das Gerät nicht mit den Haushaltsabfällen, sondern getrennt entsorgen. (Dir. 2002/96/CE – RAEE; Dir. 2002/95/CE – RoHS)