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Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 25/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
6. Prácticas/Ejercicios /Problemas/Actividades
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las biomoléculas y el agua en los procesos bioquímicos Número: 1
Práctica: Identifica biomoléculas y bioelementos en una muestra orgánica Número: 1
Propósito de la práctica: Identificará la presencia de biomoléculas y bioelementos en una muestra orgánica para conocer su comportamiento en los procesos bioquímicos.
Escenario: Laboratorio. Duración 3 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
3 vasos de precipitado
3 matraces o probetas de vidrio
3 placas petri
3 embudos con papel de filtro
3 Gradillas
12 tubos de ensayo
3 pinzas para calentar tubos
3 mecheros
1 balanza analítica
Estufa a temperatura de 1050C
Ácido acético
Ácido nítrico
Solución molibdato amónico al 1%
Solución de nitrato de plata al 1%.
Solución de oxalato amonio al 1%
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para realizar la práctica.
Procedimiento:
Reconocimiento de sales minerales Preparación de la muestra
Obtiene el suero de leche para determinar la presencia de sales
Coloca en un vaso de precipitado unos 250 ml. de leche.
Añade unas gotas de ácido acético y espera unos minutos.
Filtra con papel al producirse el "cuajado", para obtener el suero.
Recoge el filtrado en un matraz o probeta.
Realiza las reacciones de reconocimiento
Prepara una gradilla con tres tubos de ensayo.
Coloca 3ml de suero de leche en cada tubo de ensayo.
Numera los tubos del 1, 2 y 3.
Añade 1ml de solución de nitrato de plata al tubo de ensayo número 1.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 26/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
250 ml de leche fresca
20g de pechuga de pollo fresco
20g de filete de pescado fresco
Añade al tubo de ensayo número 2, 2ml de solución de molibdato amónico al 1%, tratado con ácido nítrico concentrado en cantidad suficiente para que el ácido molíbdico que se forma sé redisuelva. Calienta este tubo a baño María.
Añade al tubo de ensayo número 3 unas 10 gotas de solución de oxalato amónico al 1%.
Notas para la interpretación de resultados obtenidos en cada una de las reacciones de los tubos de ensayo.
La reacción en el tubo de ensayo número 1 nos sirve para identificar los cloruros. La explicación es la siguiente: los cloruros en contacto con una solución de nitrato de plata forman cloruro de plata, que da lugar a un precipitado blanco de aspecto lechoso.
La reacción en el tubo de ensayo número 2 nos va a permitir identificar la presencia de fosfatos. La explicación es la siguiente: los fosfatos en presencia de molibdato amónico, forman un precipitado amarillo de fosfomolibdato amónico.
La reacción en el tubo de ensayo número 3 nos sirve para identificar el calcio. Esto es debido a que el calcio, al reaccionar con el oxalato amónico forma un precipitado blanco cristalino de oxalato amónico.
Podemos ver el resultado en los tres tubos de ensayo.
Determinación del contenido de agua Nota: El contenido de agua se obtendrá por diferencia, entre el peso de la muestra hidratada y el peso de la muestra seca, al haber perdido el agua por evaporación. Procedimiento:
Pesa una muestra pequeña de materia orgánica (10g) en una placa petri previamente tarada.
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Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Coloca la muestra a deshidratar en una estufa a temperatura de 105°C por 2 horas.
Controla el peso hasta que se mantenga constante.
Relaciona la diferencia de peso con respecto al peso inicial (peso húmedo) expresarlo en porcentaje y explicar los resultados
Reconocimiento de C, H, O y N Nota: Toda materia orgánica presenta los elementos C, H, O y N en su composición, los cuales se ponen de manifiesto al calentar materia orgánica hasta combustión completa. El agua (H y O) se presenta al principio como gotas de agua evaporadas de la muestra, el nitrógeno (N) como vapores blanquecinos con olor característico y el carbono (C), como residuo. Procedimiento:
En un tubo de ensayo limpio y seco colocar 5g de pollo o pescado finamente picado.
Llevar al calor (mechero)
A medida que se va calentando, observar la formación de gotas pequeñas de agua (H y O), en las paredes del tubo. El desprendimiento de vapores blanquecinos con olor a cuerno quemado indican el nitrógeno (N), y el residuo quemado en el fondo del tubo, la presencia de carbono (C).
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica,
fundamento teórico, diagramas, observaciones y conclusiones.
Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de guantes de seguridad
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio
ambiente.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 28/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las biomoléculas y el agua en los procesos bioquímicos Número: 1
Práctica: Determina el color en una muestra de agua. Número: 2
Propósito de la práctica: Determinará el color de una muestra de agua mediante una escala calorimétrica por comparación visual para cuantificar materia orgánica y presencia de sales.
Escenario: Laboratorio. Duración 2 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
Probeta de 100 ml
Tubos Nessler de 50 o 100 ml
Vaso de precipitado 500 ml
Gradilla para tubos Nessler
Pipeta volumétrica 10 ml
Matraz volumétrico 1000 ml
Hexacloroplatinato de Potasio
Cloruro de cobalto
HCL Concentrado
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para realizar la práctica.
Procedimiento
Pesa 1.245g Hexacloroplatinato de Potasio K2 PtCl6
Agrega 1g de cloruro de cobalto CoCl2 6 H2 O y disolver en 200 ml de agua destilada
Agrega 100 ml de HCl concentrado.
Afora a 1000 ml con agua destilada ( esta solución preparada contiene 500ppm de Pt
equivalente a 500 unidades de color)
Realiza los cálculos correspondientes:
Cálculos: ppm de la dilución = Vsst * 500 / VT
Donde:
Vsst = ml de solución estándar
VT = volumen Total
Ppm de la solución estándar = 500 u
A partir de esta solución se efectúan diluciones para lograr una amplia gama de
soluciones de concentraciones conocidas.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 29/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Tabla 1.
Tubo No. ml sol std ml agua ppm
1 1 99 5
2 2 98 10
3 3 97 15
4 4 96 20
5 5 95 25
6 6 94 30
7 7 93 35
8 8 92 40
Coloca cada dilución utilizando tubos Nessler del mismo volumen
Agita la muestra y coloca un volumen igual a los de la escala de un tubo Nessler
Compara el tubo de la muestra con la escala de diluciones observando correctamente,
encontrando así la concentración correspondiente
Reporta en ppm de color según la escala platino-cobalto.
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica,
fundamento teórico, diagramas, observaciones y conclusiones.
Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de guantes de seguridad
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio ambiente.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 30/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las biomoléculas y el agua en los procesos bioquímicos Número: 1
Práctica: Determina la acidez en una muestra de agua. Número: 3
Propósito de la práctica: Determinará la acidez en una muestra de agua por medio de técnicas analíticas de titulación para conocer sus propiedades de corrosión.
Escenario: Laboratorio. Duración 2 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
Agua destilada exenta de CO2 y PH no menor de 6.0
Pipeta volumétrica de 10 ml
Pipeta graduada de 10 ml
Vaso de precipitado de 200 ml
Bureta de 250 ml
Pinzas para bureta
Agitador
Matraz erlermeyer de 250 ml
Solución valorada de NaOH 0.02N
Solución indicadora de fenolftaleina
Solución de anaranjado de metilo
Solución de tiosulfato de sodio 0.1N
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para realizar la práctica.
Procedimiento:
Agita perfectamente la muestra de agua a analizar.
Toma alícuotas de 50 o 100 ml o bien de 25 y diluir a 50
(Si la muestra ha sido tratada con cloro agregar una gota de tiosulfato de sodio)
Agrega 2 o 3 gotas del indicador anaranjado de metilo, si la muestra toma el color canela
característico del indicador a Ph ácido, neutralizar con solución de NaOH titulada, hasta vire
de color amarillo.
Cálculos: ppm de acidez como CaCO3 = VOH X NOH X 50 X 1000
V muestra
El resultado se reporta como acidez parcial, acidez libre o acidez al anaranjado de metilo en
términos de ppm de CaCO3
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica,
fundamento teórico, diagramas, observaciones y conclusiones.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 31/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio
ambiente.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 32/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las características estructurales y funcionales de los aminoácidos, proteínas y enzimas en los procesos bioquímicos.
Número: 2
Práctica: Identifica los aminoácidos por cromatografía en papel. Número: 4
Propósito de la práctica: Identificará los aminoácidos de una muestra biológica por medio de cromatografía en papel para su cuantificación química.
Escenario: Laboratorio. Duración 4 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
Cámara cromatográfica
Capilares
Papel filtro (14 cm de ancho)
Peseta
Placas de porcelana
Guantes de plástico
Tijeras
Regla
Estufa
leucina, glicina, lisina y prolina (1mg/ml) (patrones)
solución n-butanol / ácido acético/ H2O en relación 3:1:1 (fase móvil).
Ninhidrina 0,2 % en etanol.
Muestras problema
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para realizar la práctica.
Procedimiento:
Coloca con anticipación la fase móvil en la cámara cromatográfica y tápala, de modo que se
sature con los vapores de esta fase. (Figura 1).
Toma el papel de un borde (superior) ocupando guantes de goma para evitar contaminarlo con
aminoácidos o proteínas que se encuentren en las manos.
Corta el papel filtro como un rectángulo de 30 cm de alto y 14 cm de ancho. Marca con lápiz de
grafito una línea a lo ancho del papel a 1,5 cm del borde inferior. Marca puntos en esta línea
separados por una distancia de 1,5 a 2,0 cm entre sí.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 33/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Coloca con un capilar fino, diferente para cada muestra, las soluciones de los aminoácidos
patrones y las muestras problemas sobre la línea marcada. Identifica siempre con lápiz grafito
cada aplicación.
Engancha la tira de papel filtro en la parte superior de la cámara cromatográfica que se encuentra
saturada con los vapores de la fase móvil. Deja el borde inferior del papel sumergido 1,0 cm en
la fase móvil.
Deja que la fase móvil ascienda unos 15 cm aproximadamente, no permita que el líquido
sobrepase el borde superior y saque el papel de la cámara.
Deja secar a temperatura ambiente.
Revela la cromatografía rociando el papel con ninhidrina y seca el cromatograma en una estufa de
80 a 90ºC.
Nota: Los aminoácidos aparecen como manchas púrpuras y amarillas.
Marca el centro de las manchas de los aminoácidos, mida el avance de cada muestra del frente
del solvente a la altura de cada muestra.
Calcula la razón de migración de los solutos con respecto a la fase móvil (Rf)
Nota: Se calcula la razón de migración del soluto con respecto a la fase móvil (Rf ) que se
compara con la de los patrones.
tan
tan
móvilfaselaporrecorridaciadis
solutoelporrecorridaciadisR f
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica, fundamento teórico,
diagramas, observaciones y conclusiones.
Uso obligatorio de guantes de seguridad Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio ambiente.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 34/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las características estructurales y funcionales de los aminoácidos, proteínas y enzimas en los procesos bioquímicos.
Número: 2
Práctica: Identifica las proteínas en una muestra biológica Número: 5
Propósito de la práctica: Identificará la presencia de proteínas en una muestra biológica por medio de pruebas bioquímicas para su cuantificación química.
Escenario: Laboratorio. Duración 3 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
Tubos de ensayo
Gradilla
Mechero
Vasos de precipitados
Pipetas
Solución de HCl concentrado
Alcohol etílico
Solución de SO4Cu al 1%
NaOH al 20%
Clara de huevo o leche
Solución de albúmina al1-2%
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para realizar la práctica.
Procedimiento:
Coagulación de las proteínas
Coloca en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un
poco de agua para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche.
Calienta uno de los tubos al baño María, añadir a otro 2-3ml de HCl concentrado y al tercero 2 o
3ml de alcohol etílico.
Observa los resultados.
Nota: Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales
que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC
o al ser tratadas con soluciones, salinas, ácidos, alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es
un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar
sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria y terciaria.
Reacciones coloreadas especificas(BIURET)
Coloca en un tubo de ensayo 3ml de solución de albúmina al 1-2%.
Añade 4-5 gotas de solución de SO4Cu al 1%.
Añade 3ml de solución de NaOH al 20%.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 35/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Agita para que se mezcle bien.
Observa los resultados.
Nota: Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a
la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos. El reactivo del
Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los
enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de
la concentración de proteínas.
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica, fundamento teórico,
diagramas, observaciones y conclusiones.
Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de guantes de seguridad
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio ambiente.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 36/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las características estructurales y funcionales de los aminoácidos, proteínas y enzimas en los procesos bioquímicos.
Número: 2
Práctica: Cuantifica las proteínas por método espectrofotométrico.
Número: 6
Propósito de la práctica: Cuantificará las proteínas mediante técnicas espectroscópicas con el reactivo de Biuret para calcular la concentración de proteínas presentes en una muestra biológica.
Escenario: Laboratorio. Duración 3 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
Espectrofotómetro (visible)
Celdas para espectrofotómetro
Baño termostatizado
Termómetro.
Tubos de ensayo
Gradillas
Pipetas graduadas de 5 ml
Pipetas graduadas de 1 ml
Piseta.
Vaso precipitado de 250 ml
Vaso precipitado de 100 ml
Reactivo de Biuret:
Solución estándar de ovoalbúmina al 5% en NaCl 9%.
Reactivo de cobre alcalino (RCA).
Reactivo Folin (RF)
Ovoalbúmina
Albúmina de suero de bovino (BSA).
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para realizar la práctica.
Procedimiento
De acuerdo a la tabla 1.1
Prepara una batería de tubos enumerados.
Agrega el volumen indicado de la solución de ovoalbúmina estándar o muestra problema con una
pipeta graduada de 1 ml.
Agrega el volumen indicado de agua con una pipeta graduada de 1 ml.
Agrega 4,0 ml del reactivo de Biuret con una pipeta graduada de 5 ml.
Tabla 1.1
TUBO
Ovoalbúmina
(mL)
H2O
(mL)
R. BIURET Abs Conc.
5% MP (mL) %
1 B 0,0 --- 1,0 4,0
2 S 1,0 --- 0,0 4,0
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 37/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
3 S 0,8 --- 0,2 4,0
4 S 0,6 --- 0,4 4,0
5 S 0,4 --- 0,6 4,0
6 S 0,2 --- 0,8 4,0
7 MP --- 1,0 MP1 0,0 4,0
8 MP --- 1,0 MP2 0,0 4,0
9 MP --- 1,0 MP3 0,0 4,0
Agita y espere 20 minutos a temperatura ambiente para la formación del complejo coloreado.
Mide la absorbancia de los tubos en un espectrofotómetro a 540 nm, previa calibración del equipo
con el blanco.
Calcula la concentración de la ovoalbúmina en los tubos (2S – 6S)
Completa la tabla con los valores de absorbancia y concentración
Construye una gráfica absorbancia Vs. concentración
Calcula las concentraciones de las muestras problemas en las celdas mediante la ecuación
sf
i
SMP
mpf
i
mpS
vv
CAvv
cA
Donde:
AS Absorbancia Del estándar
CMP Concentración de la muestra problema
Vi Volumen inicial de la solución estándar
Vf Volumen final de la solución
AMP Absorbancia de la muestra problema
CS Concentración del estándar
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 38/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica, fundamento teórico,
diagramas, observaciones y conclusiones.
Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de guantes de seguridad
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio ambiente.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 39/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las características estructurales y funcionales de los aminoácidos, proteínas y enzimas en los procesos bioquímicos.
Número: 2
Práctica: Identifica enzimas en una muestra biológica Número: 7
Propósito de la práctica: Identificará la presencia de las enzimas en muestras biológicas por medio de ensayos enzimáticos para su cuantificación en determinados productos.
Escenario: Laboratorio. Duración 3 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
Tubos de ensayo
Gradilla
Pipeta volumétrica
Plancha de calentamiento
Termómetro
Solución de peroxido de hidrógeno
Solución de almidón al 2%
Tejidos vegetas ( papa, zanahoria, lechuga) o animales ( carne, pescado, etc)
Lugol
Muestra de saliva
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para realizar de la práctica, cada equipo recibirá una solución problema previamente
preparada por el instructor.
Procedimiento
Precipita la solución problema.
Acción digestiva de la amilasa salivar.
– Prepara una solución patrón 2 ml. de una disolución de almidón al 2 % y unas gotas de disolución
de yodo (lugol). en un tubo, observar el resultado.
– Calienta suavemente el tubo hasta que la mezcla pierda el color.
– Enfría el tubo bajo el agua del grifo y esperar unos minutos, anotar lo sucedido.
– Coloca en un segundo tubo 2 ml. de la disolución de almidón y una cierta cantidad de saliva,
mezclar bien la saliva con la disolución y calentar muy suavemente durante unos segundos.
– Añade unas gotas de lugol.
– Anota los resultados y dar una explicación a lo ocurrido
Reconocimiento de la enzima catalasa en tejidos.
– Pone en varios tubos de ensayo previamente numerados distintos tejidos (más o menos el mismo
peso de cada tejido).
– Añade 5 ml. de agua oxigenada a cada tubo y anotar lo que sucede.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 40/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
– Explica lo ocurrido y ordenar los tejidos según su actividad.
– Repite el proceso anterior, pero hierve antes los tejidos durante diez minutos. Explicar los
resultados obtenidos.
Actividad catalítica de la catalasa.
– Coloca en un tubo de ensayo un trozo de hígado (o 1 ml. de extracto de hígado) y 10 ml. de agua
oxigenada.
– Cierra el tubo con un tapón, que se deja algo flojo para el escape de los gases producidos en la
reacción, en cuyo centro exista un orificio por el cual se pueda introducir un termómetro. Así,
hemos hecho un calorímetro.
– Anota la temperatura ambiente, que se toma como temperatura inicial de la reacción, y después
se va anotando las variaciones de temperatura que se producen en el interior del calorímetro cada
treinta segundos durante un período de cinco minutos.
– Elabora la gráfica de la reacción y explicar los resultados.
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica, fundamento teórico,
diagramas, observaciones y conclusiones.
Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de guantes de seguridad
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio ambiente.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 41/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las características estructurales y funcionales de los aminoácidos, proteínas y enzimas en los procesos bioquímicos.
Número: 3
Práctica: Identifica carbohidratos en una muestra biológica Número: 8
Propósito de la práctica: Identificará los carbohidratos presentes en una muestra biológica mediante reacciones de reactivos indicadores para la clasificación de sus propiedades reductoras.
Escenario: Laboratorio. Duración 3 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
Tubos de ensayo
Gradilla
Pinzas
Mechero
Pipetas
Solución de Lugol
Solución de Fehling A y B
Solución alcalina (sosa, potasa, bicarbonato, etc.)
HCl diluido
Soluciones al 5% de glucosa, maltosa, lactosa, fructosa, sacarosa y almidón
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para la realización de la práctica.
Procedimiento
Estudio de azúcares reductores
Agrega en los tubos de ensayo 3ml de la solución de glucosa, maltosa, lactosa fructosa o
sacarosa (según indique el profesor).
Añade 1ml de solución de Fehling A (contiene CuSO4) y 1ml de Fehling B (lleva NaOH para
alcalinizar el medio y permitir la reacción)
Calienta los tubos a la llama del mechero hasta que hiervan. (La reacción será positiva si la
muestra se vuelve de color rojo y será negativa si queda azul o cambia a un tono azul-verdoso).
Observa y anota los resultados de los diferentes grupos de prácticas con las distintas muestras
de glúcidos.
Hidrólisis de la sacarosa
Toma 3ml de solución de sacarosa y añadir 10 gotas de HCl diluido.
Calienta a la llama del mechero durante unos 5 minutos y deja enfriar.
Neutraliza añadiendo 3ml de solución alcalina.
Realiza la prueba de Fehling como se indica en el experimento 1.
Observa y anota los resultados.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 42/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Investigación de Polisacáridos (Almidón).
Coloca en un tubo de ensayo 3ml de la solución de almidón.
Añade 3 gotas de la solución de lugol.
Observa y anota los resultados.
Calienta suavemente, sin que llegue a hervir, hasta que pierda el color.
Enfría el tubo de ensayo al grifo y observar cómo, a los 2-3 minutos, reaparece el color azul.
Observa y anota los resultados.
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica, fundamento teórico,
diagramas, observaciones y conclusiones.
Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de guantes de seguridad
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio ambiente.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 43/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las características estructurales y funcionales de los carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos en los procesos bioquímicos.
Número: 3
Práctica: Identifica lípidos en una muestra biológica. Número: 9
Propósito de la práctica: Identificará los lípidos presentes en una muestra biológica mediante la reacción con reactivo de Sudam para conocer sus propiedades bioquímicas.
Escenario: Laboratorio. Duración 3 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
Tubos de ensayo
Gradilla
Varillas de vidrio
Mechero
Vasos de precipitados
Pipetas
Solución de NaOH al 20%
Solución de Sudán III
Tinta china roja
Eter, cloroformo o acetona
Aceite de oliva
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para la realización de la práctica.
Procedimiento:
Saponificación
Coloca en un tubo de ensayo 2ml de aceite y 2ml de NaOH al 20%
Agita enérgicamente y coloca el tubo al baño María de 20 a 30 minutos, (pasado este tiempo,
se pueden observar en el tubo 3 fases: una inferior clara que contiene la solución de sosa
sobrante junto con la glicerina formada, otra intermedia semisólida que es el jabón formado y
una superior lipídica de aceite inalterado.
Registra los datos obtenidos.
Tinción
Dispone en una gradilla 2 tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de aceite.
Añade a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán III, y al otro tubo añadir 4-
5 gotas de tinta roja.
Agita ambos tubos y dejar reposar.
Observa los resultados: en el tubo con Sudán III todo el aceite tiene que aparecer teñido,
mientras que en el tubo con tinta, ésta se irá al fondo y el aceite no estará teñido.
Registra los datos obtenidos.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 44/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Solubilidad
Pone 2ml de aceite en dos tubos de ensayo.
Añade a uno de ellos 2ml de agua y al otro 2ml de éter u otro disolvente orgánico,
Agita fuertemente ambos tubos y dejar reposar.
Observa los resultados: Se verá cómo el aceite se ha disuelto en el éter y, en cambio no lo
hace en el agua y el aceite subirá debido a su menor densidad.
Registra los datos obtenidos
Prueba de emulsión
Pone 2 ml. de aceite en un tubo,
Añade 10 ml. de agua,
Agita fuertemente, esperar unos minutos y anotar lo sucedido.
Añade después 1 ml. de una solución concentrada de jabón líquido, volver a agitar, esperar
unos minutos y anotar lo sucedido
Registra los datos obtenidos.
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica, fundamento teórico,
diagramas, observaciones y conclusiones.
Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de guantes de seguridad
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio ambiente.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 45/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Unidad de Aprendizaje: Análisis de las características estructurales y funcionales de los carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos en los procesos bioquímicos.
Número: 3
Práctica: Realiza la extracción de ADN en una muestra biológica. Número: 10
Propósito de la práctica: Extraerá el ADN de una muestra biológica por medio de disolución y separación para identificar su presencia en materiales de acuerdo a sus propiedades.
Escenario: Laboratorio. Duración 4 horas
Materiales, Herramientas, Instrumental, Maquinaria y Equipo
Desempeños
Muestra vegetal
Agua (destilada o mineral)
Sal de mesa
Bicarbonato sódico
Detergente líquido o champú
Alcohol isoamílico a 0ºC
Batidora
Nevera
Colador o centrífuga
Vaso
Tubo de ensayo
Varilla fina
Aplica las medidas de seguridad e higiene en el desarrollo de la práctica.
Prepara el equipo y los materiales en las mesas de trabajo.
Forma equipos para la realización de la práctica.
Procedimiento
Prepara el tampón con los siguientes ingredientes y mantiene en la nevera o en un baño de hielo
triturado.
120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.
1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.
5g de bicarbonato sódico.
5ml de detergente líquido o champú.
Elige la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetales que pueda haber en la cocina
(cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos.
Tritura la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10
segundos. Así se romperán muchas células y otras quedarán expuestas a la acción del detergente.
Mezcla en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampón frío y agitar
vigorosamente durante al menos 2 minutos.
Modelo Académico de Calidad para la Competitividad ANBI-01 46/80
Guía Pedagógica y de Evaluación del Módulo:
Análisis bioquímicos
Separa después los restos vegetales más grandes del caldo molecular haciéndolo pasar por un colador
lo más fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y después pipetear el
sobrenadante.
Retira 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamílico
enfriado a 0ºC. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo
éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre el tampón. Se introduce la punta de una varilla
estrecha hasta justo debajo de la separación entre el alcohol y el tampón.
Remueve la varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de
mayor tamaño de ADN. Pasado un minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el
ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.
Nota: El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que, entremezclado con él,
hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se realiza añadiendo enzimas que fragmentan
las moléculas de ARN e impiden que se unan al ADN.
Elabora un reporte de la práctica que incluya: datos de presentación de la práctica, fundamento teórico,
diagramas, observaciones y conclusiones.
Precaución, sustancia tóxica
Uso obligatorio de guantes de seguridad
Uso obligatorio de protección ocular
Separa los residuos recuperables y dispone de los desechos biológicos
contaminados y materiales utilizados peligrosos para el medio ambiente.