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1. Calcular el Km que se obtendrá en una reacción enzimática de los dobles inversos si la velocidad máxima es igual a 100 M/min. 2. Calcular Km y Vmax de una enzima sabiendo que la recta obtenida en una representación de Lineaweaver y Burk corta el eje de ordenadas en 5x10 3 (moles/min) -1 , y que la pendiente de dicha recta es 120 min/L. 3. Calcular Km y Vmax de una enzima sabiendo que la recta obtenida en una representación de Lineaweaver y Burk corta el eje de ordenadas en 4,3x10 2 (moles/min) -1 , y que la pendiente de dicha recta es 90 min/L. 4. Calcular Km de una enzima sabiendo que la recta obtenida en una representación de Lineaweaver y Burk corta el eje de ordenadas en 3x10 3 (moles/min) -1 , y que la pendiente de dicha recta es 150 min/L. 5. 25 µL de una preparación de Ribonucleasa A se lleva a ensayo a un volumen de reacción estándar de 1 mL y a temperatura y pH óptimos, pero con distintas concentraciones iniciales de sustrato obteniéndose las velocidades iniciales que se indican [S] x10 -3 (mM) 303 149 128 100 80 v (nmol/min) 120 98 92.6 83.3 74.6 Determine la Km y Vmax y exprese también la cantidad de enzima en UI/mL. 6. Las velocidades iniciales a varias concentraciones de sustrato para una reacción catalizada por una enzima hipotética son: [S] (moles/l) V (µmoles/min) 5x10 -2 0.25

Guia Cinetica Enzimatica

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Page 1: Guia Cinetica Enzimatica

1. Calcular el Km que se obtendrá en una reacción enzimática de los dobles inversos si la velocidad máxima es igual a 100 M/min.

2. Calcular Km y Vmax de una enzima sabiendo que la recta obtenida en una representación de Lineaweaver y Burk corta el eje de ordenadas en 5x103 (moles/min)-1, y que la pendiente de dicha recta es 120 min/L.

3. Calcular Km y Vmax de una enzima sabiendo que la recta obtenida en una representación de Lineaweaver y Burk corta el eje de ordenadas en 4,3x102 (moles/min)-1, y que la pendiente de dicha recta es 90 min/L.

4. Calcular Km de una enzima sabiendo que la recta obtenida en una representación de Lineaweaver y Burk corta el eje de ordenadas en 3x103 (moles/min)-1, y que la pendiente de dicha recta es 150 min/L.

5. 25 µL de una preparación de Ribonucleasa A se lleva a ensayo a un volumen de reacción estándar de 1 mL y a temperatura y pH óptimos, pero con distintas concentraciones iniciales de sustrato obteniéndose las velocidades iniciales que se indican

[S] x10-3 (mM) 303 149 128 100 80 v (nmol/min) 120 98 92.6 83.3 74.6

Determine la Km y Vmax y exprese también la cantidad de enzima en UI/mL.

6. Las velocidades iniciales a varias concentraciones de sustrato para una reacción catalizada por una enzima hipotética son:

[S] (moles/l) V (µmoles/min)5x10-2 0.255x10-3 0.255x10-4 0.255x10-5 0.20

5x10-6 0.0715x10-7 0.0096

a) ¿Cuál es la velocidad máxima para esta reacción? b) ¿Por qué la velocidad inicial permanece constante a una [S] mayor de 5x10-4 M c) ¿Cuál es la concentración de enzima libre para una [S] de 5x10-4 M? d) ¿Cuál es la Km de la enzima?

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7. Se estudió la actividad de la enzima ureasa, que cataliza la reacción:CO(NH2)2+H2O CO2+2NH2

En función de la concentración de urea, con los resultados siguientes:

Concentración de urea (mmoles dm-3) 30 60 100 150 250 400V inicial (mmoles urea consumidos min-1 mg enzima-1) 3,37 5,53 7,42 8,94 10,70 12,04

¿Cuáles son los valores de Km y Vmáx para esta reacción?

8. Se investigó el efecto de un inhibidor I sobre la velocidad de una reacción catalizada enzimáticamente sobre un solo sustrato, obteniéndose los siguientes resultados

Concentración de sustrato(mmol L -1)

Concentración del inhibidor (mmol L -1)0 0.5 1.0

Velocidad de reacción (mol L -1 min-1)

0.050.100.200.400.50

0.33 0.20 0.140.50 0.33 0.250.67 0.50 0.400.80 0.67 0.570.83 0.71 0.63

¿De qué manera actúa el inhibidor? B) Obténgase los valores para Vmáx, y Km.

9. A partir de los siguientes datos de una reacción enzimática, determinar de que manera está actuando el inhibidor. Determinar la Km y la velocidad máxima.

[S] mM µg producto/h µg producto/h(sin inhibidor) (6 mM inhibidor)

2 139 883 179 1214 213 149

10 313 25715 370 313