5
!"" #$%% & " ’ The 6 th National Biotechnology Congress of Iran 13-15 Aug, 2009, Milad Tower Conference Hall, Tehran-Iran ! " #$ %& ( ) *+ ,-,- ’ ( ) ./ ’ 0 ) ’ * ’&+ 1 ( )* + ,) -. / 01 / 2 / 34 5 6 )* - ,) 6 7/ 89 : / ; < "- )* ( / + ,) -. 6 )* - ,) 6 7/ 89 : / ; => < [email protected] 2 3 %) / ? 7 @ " 5A4 6 B C D 5 6 4 5A4 "- 5E F/E) / GE*< 9& % H I %J 7 K9 5A4 6 "7 < E !"L M- / B "+ E B C M-E " 5 BN 6 " 5 +"L 7 B4" " O 5 !"L / @ P P /B / " @ P = @ Q( @ 7L & <4L - " 54R BN / ? / / 5A4 6 A47 ! S 7 T PCR U 7 !"V< +7WL IV P1/P7 / R16F2n/R16R2 B4B C 6 4 5 EXY ,E1 5E @ E4Z " [/B1 6 +"L ,B / B1" / B 5< " 5 " 5P- \ I>+ ] C ^ 5 7 !"EL G*< 6 5 4"4 2 B +2 B 47 54 B1" &54" - 7/ / B 39 & EY 7/ / 5EN 5] / 5N 5 O 7L " /2 5N 5] / 5N 5 " !_ I>+ ] C <4 = )* K 6 4 E M-E " @ +"L ,B / - S " &a F 3 J b #% ] @ B1" B4B4 C 47 54 B1" + /2 G*< c + 5 I8R4 B1" S @ + / " 5^ P 4L /2 7 G1d 3)<4 FBP @W 9 7 7 2E K / / F7a ,B] _ < Y B4"84 "Y C <4 "< 5 )* 5 K 5EP- I/) @ E <R e 4L /2 7 / B M- " !"V< B C 7 " " 5 _ ES G / / -8E BE1" "E E_ < /2E + 5^ 4L 7 B84 G*< !"L 5A4 6 !"V< "BA I 6 " C 4 %5 ) 6 . ’ 7 ’ 1 1 8 1 9.8 :) ’! +;* ’ <)/ PDF Compressor Pro

Identification of alfalfa (Medicago sativa cv. yazdi) clones resistant or tolerant to alfalfa witches’broom in Yazd province

Embed Size (px)

DESCRIPTION

Identification of alfalfa (Medicago sativa cv. yazdi) clones resistant ortolerant to alfalfa witches’broom in Yazd province

Citation preview

Page 1: Identification of alfalfa (Medicago sativa cv. yazdi) clones resistant or tolerant to alfalfa witches’broom in Yazd province

������������� �������������������������������

�� ���!��"�"���#$%%��� ����������&"����'���

The 6th National Biotechnology Congress of Iran��13-15 Aug, 2009, Milad Tower Conference Hall, Tehran-Iran

������������ ��������� ����������������������� ��������� �����������

�!��� �������

"�� �#$�%� &�������'��(�)���*+����,-�,-�'�����'��(�)��.�/�'�0���)����'�* ��'&�+��1� �

����(�)*���+�,�)��-.���� ��/�0�1��/������2��/�3� 4�56)*��-��,�)67�/��89�:�����/��;�<������"-��

)*���(��/��+�,�)��-.�������6)*��-��,�)67�/��89�:�����/��;�=��>���<����

[email protected]��

2�3%)��

/���?��������7�������� ���@ �������"�5A4�6��������B�����C���������D���5����6� 4�����5A4��"-����5E��F/�E)��/�GE�*<��

�������9��&��� �����%����H������I%J����7�����K9������5A4�6����"7�����<����������E����!"��L��M��-��/�B���"�+��E�B��C���M��-E���"

���5���B�N6����"�5�+"��L���7������B4"���"�O�5�������������!"��L�/�@�����P��������P��/B���/���"�@������P�=���������@��Q(���@

��������7L�&���������<4L�����-��"��������54�R���B�N�/����?���/�/�5A4�6�����A47�����!�S���7���TPCRU�7��!"�V<�����

����+7�WL�IV��P1/P7���/�R16F2n/R16R2���������B4B���C6� 4�������5�����������EXY�,��E1�5E��@��������� �E4��Z���"�

��[/B16������+"��L�,B��/�B1�"�/�B��5<������������"����5������������"����5P�-��\���I>�+����]��C�^�����5����7��������!"�E�L�

��G�*<�6�����5���4"��4��2��B�+�2��B����������47�54����B1�"�&54�"���-���7/�/�B�������3�9�&����������EY��7/�/�5EN�5]��/�5N�5�O�

�����������7L��"��/2��5N�5]��/�5N�5��������"����!�_����I>�+����]���C���<4�=���������`��)*������K6� 4����������E��M��-E���"�@���

�����+"��L�,B��/���-�����S��"�&a��������F��3����Jb#%���]���@���B1�"���B4B4����C��47�54����B1�"�+��/2�����G�*<�������c�

���+�5��I8R4�B1�"����S�@�������������+�/�"������������5^��������P�� 4L��/2��7��G1�d�������3�)<4��FBP�@W������9�7�����7���2E��K

���/�/�F7a�,�B]���_�<����Y����B4"�84���"��Y����C���<4�"��<��5����`�)*�������5����K���5EP�-��I�/�)�����@�������E�<R��

��e����������� 4L��/2��7��/����B��M��-�����"���!"�V<��B�C���7��"���"�5���_���ES�G�����/�/�-8E�BE1�"��"�E�������E_�<����/2E��

+����5^��������� 4L�7��B��84�G�*<��!"��L�5A4��6�!"�V<��"BA��I��6"��C��

��

� �4�%5 ����) �6�������. �'����7�' ���1���1�81���'�9��.8�:)��'! ���+; �*��'<�)/��

��

PDF Compressor Pro

Page 2: Identification of alfalfa (Medicago sativa cv. yazdi) clones resistant or tolerant to alfalfa witches’broom in Yazd province

������������� �������������������������������

�� ���!��"�"���#$%%��� ����������&"����'���

The 6th National Biotechnology Congress of Iran��13-15 Aug, 2009, Milad Tower Conference Hall, Tehran-Iran

��)��6��

���P�F�4����5A4��L.�Medicago sativa5>��P�5� ������56�I����a�f*����������B]�7����M�7�/�I�6�"����F�"�

I��5<>�+����]�C6��G�������-��5>��P�B����"�5A4������g�������h�����I��3���"������ ��/�,�>L�,��RY�/�������5���

�3�f*���5A4�$i�B1�"���;�Bd��"/%b#�����"�+�"�/L����������I��!BT#�CU��5����7������� �@ �����"�5A4�6����

/���?����B����6�5�����/����3���"�����#j�c�L�7������T��5��"���M���#��U�k��-+R���"�l.�/���K9����7���

��5A4�6���4"����I��!B�"�+�!B����T#��/�#$�CU�P�@������7�"�B;��B���G�����"��5]��6!�������/�O��G*��7��

5]�9&��m�;�4������54����Bd�7���84������ &5]���+��� -��"�+� &�B�/�N�/��6+B�H�� &� +������ &G+�,��6_������

B��"�7� &B�Y� !�Ya��� /���+B��n���/�+�!�����B���T�#��/�#$U.���G��P����89��"���A47�\���I;?�G)<���

����/�"��7��9����K�4������2��/�4�3�)<4��G��]�IRT�#$� CU�� �"�/�������?���7��5A4��o�<(��K9���6����k��-+�/�

����>�I����S�<���I��!B��I��p��L�T##&#i&j&J&c&�&$��CU�G]�4��������"���A47����?�Orosius albicinctus D. �

I�� !B�� 5<Y���T�$� /�j� CU"����<���/���� "-?���)�� �"� 5A4���� ��� 5R��IP��K9���� �� ���<4�/����,��RY���-

���<�"��"�T�##�U5���9���R���"�5�����,��RY�,B���p���"���<��K9����7�������M��-�����!"7�@(��5A4���B4���C

+"��L� �p�� �"���� 5������� 5A4�6+� M�V���������->�� &!��� "�B;���&,���;�4��->���� /�n��� "�B;���6�Y��7/����O��

!��RY����!B������"���Th�CU��6��5A��;��k/���������������/����?���/�)��@]��/�I��!B�4�5<Y����5A4���

4�>�;��-�"�_4���/�I��!B���7L��"����5P�-��,�����,/�V�������"��+"��L�,B��/���-��F�]�����!B��!B�����5A4�

�I�T��/�%�CU��7��qB���)*����K��������6� 4����5��G�*<��/�F/�)������/����?��4����<���"�5A�"���"-C��

��

=������ ����46��

9�"7�����K9����7��B��5A4�6�������!"��L�M��-��"-����<��������5���B�N�M��-���"�/�B�"�+�6+"��L����-���5��5��

7��������� "��� "�O5��������P� !"��L� /� @�����P� �/B�� /� ��"� @��P�=��� ��� @���Q(��� @����T���� FBP���G

&� +�8�+�9����B��G6���F�B4��B���&� +�8�+�������F�B4��B���&G+�GY�"�G����7�������F�B4��B���&G+�GY�"��

/�������&G+�GY�"���4�G����F�<�_4������)P�/�G����67�"�B;��B���&G+�G���"�/��7��54�����m�;�4��/�5]�9�

�����5Y���Bd�7���U��7L�&������<4L�7��!"�V<�� ��� �-�"���B�N���54�R���/����?��5A4�TJU����7L�/PCR"���� ��C

��C��6G!"��L� /� @��� 5A4��� 7�� !B�� '��(<��� 7�� !"�V<�� ���� IV����+� 7�WL��P1/P7� /�R16F2n/R16R2��

T#iUB4B��Q(��� C��� 5���� 7����� �"�@����� 5P�-��\6+������B��� C5��]���+����6��������5��� �"� 5]��

��"��"�m�9���#%�����c<4��5��"�����"��+��5�1�>�������"�5�������5��]�l.�/���"�5�$c<4���"���"��<�����o�

XY��[/B1�� �4��Z���"�6��5������7���+"��L���-�R��,��RY�,B��/��7����"��"�����"��Y���6B��5<���C� 4��"��I

+"��L�B1�"���,B��/�����/���6� 4���6�)��"����5P�-���"�!B��5<���I>�+����]�5R��C5����7����G�*<���T�!"��L

@r�P�B]�>�U6����5�4�B4"��4��2��B�+�2��-��47�54����B1�"�&54�"���-���7/�/�B�����3�9�&���7/�/�5N�5]��/�5N�5�

�YO��������/2��5N�5]��/�5N�5����7L��"�!B��B�����"����!�_��I>�+����]��C��

��

���>�����?6��

(������5����Q�!"��L��P�=������M��-���"���Q(���@������7L�&������<4L�7��!"�V<������-�"�����54�R���B�N��

/���?���I]��5��5A4�cb#�7��!"�V<��/���-���"�PCR �����"�����C"�C��C����7L��"��56�5A4���7�������54��4��PCR��

L�IV��7��!"�V<�����@�)<R����+�7�W�P1/P7�/�R16F2n/R16R2���/�����7L��"�PCR���5�d���/"���T����3/��5�d��

��+7�W��IV�P1/P7�+7�WL�IV�����F/"�5�d���/� R16R2 �bR16F2n�U��"�!"��L�54��4�����P�5��B4"�"����4�I8e����6�/

PDF Compressor Pro

Page 3: Identification of alfalfa (Medicago sativa cv. yazdi) clones resistant or tolerant to alfalfa witches’broom in Yazd province

������������� �������������������������������

�� ���!��"�"���#$%%��� ����������&"����'���

The 6th National Biotechnology Congress of Iran��13-15 Aug, 2009, Milad Tower Conference Hall, Tehran-Iran

B4B��5<>�+��D4�C7�"�B;��"��/�5��5�������"��5�����5P�-���"�G�*<��!"��L�6�P�B]�>�5�+"��L�@�R���"�/�B4"�������

���"�����7��(���������k/����� � 4L�Q�<4L�7�� !"�V<��/� �-�"�����54�R���B�N�/����?�����5A4����<d� &"�84����

���<R��/�k/��7��6�����A47����!��S��������"�7��������5����7���/�!"��L�������5��� 4L�G�*��/�I�/�)�������

"���!"�V<�� CS�k/���"��C��C�L� C4���+�-������+7�WL�7��!"�V<�P1/P7���5����IR4��<4��Q(������!"��L�6�/�B�

(���+"��L�Q���"�PCR"����/B)����5�d���/"��C+"��L����5���B�N�M��-���"��P�a������k�<R+�@W���B1�"�Bd�7���

+"��L�,B�� /�"�B;�&� B�� !B����� 5����6�P� B]�>� 5�+"��L� @�B4"���� Cs;���� 7����P� ��� 5������@W��P��<��B4���@

+"��L�"� ���� ��B4���"�/��������F�_����"���tL�G+�G�����/����P��2��B�+"��L�@�� ��B4���"�����7�����"�Y�7��

B4"�"�7/���C��+�B�N�,�]/�����"�5�����6+"��L�,B�����@�������/�V<���"���B4B��!B6�d�5�6���"�,/�V��7��6������u�

���5��,/�)��/�G�*���D4�7��5A4�������5P�-���"��B�����C���5����7��G1�d��/2��B4"���M�4�/"�G�*<��O���/2��!/�+�

/�N�6+�5������/2���_�"�!/�+�/�!B�@���!��C4��"���<�����/2��G�*<�������+��"����F��S���tL�G+����/�B��!B������

�)�� �"� � 4L�54�"� ��-���7/�� ���5R����5A4�I��"�"� ���,/�V��@���� C�)����3�9�5R���7/� &5N�5]��3�9� &5N�5�

�YO����Y��7/�/�5N�5�O+��"�"����4�5N�5]������5^���P�G�*<���/2��7��G1�d����3�)<4��FBP�@W������7��

�9�/�/�F7a�,�B]�7���2��K���_�<���Y��4���"��Y������7��/�B�<R"���)���"��_�47�54����B1�"����5R�����/2��5A4�

+�����@�������$bj$47�54����B1�"�7��B1�"����Y��4���"��Y���@����B�<RTJbhJ����B1�"��+���/2�����5������/2����!�

�/��@���b#�����/�N��/2���6!B�U������������/2��7��!"�V<����B���5�����"�5��G�*<����S�B1�"�G���/��B��-8��

/���_�<�;Z���-���"�I�6�����o1����M���4�5�"����C��F��3������S��"Jb�#%�B1�"��6� 4���3�)<4��@�����5��5<>�

�M��-��]���@��� � &�[/B1�� �4��Z�"� !"��L�5A4���B4B4���6���"�5��5P�-��,/�)���B�<R��6�5��I8R4�I��F7a�5

��e� ��/��������� 4L�2��5B��M��-����1�f(��B�����M��-����2��B"���F�B]���C��

��

��

@����6� �

# 7�/��6�5��4����L��C#$%J�C7�/��6�"� ��,��7/�,�P�9��/����L�G6�!��"�C��

� ��;�������Rd�!"�7�G����=�&�CM�C#$%J�C�/6���F�]�������R��+�5A4������/��E��5��?��������E���"�5EA4����5EP�-��\�C��k��-E+

� 4��)*��!�/�S����)�)*���(���+�,�)��-.�������6)*��-��,�)67�/��89�:�����/��;����<���"-�C�c5*V1�C��

$ ��;�������Rd�!"�7�G����=�&�CM�C#$%%�C�����1�fY�����,��������������/��/�����/����?����� 4�<���"�5A4���E���/�"-

�����<RN����/���<R�C� 4�k��-+��)*��!�/�S����)�)*���(����+�,�E)��E�-.��������E6)*��-���,�E)�E67�/����:��E���/�

89�;����<���"-�CJj5*V1����C

� ;����7�G�Rd�!"����=�&CMC�&?�C<�"��F�/����C]�E�����C#$%��C;���E���S��6�+BE���/��E��?�����M��-E���"�5EA4�

������<��5A4��"-�C���/��,a�)��51�Y���������������+��������5E>��P���E�������"��E�����C�"�ES���l�E67�/������89�:��E���/���E;��

��� ��!�_�4�"�C�v�$#�C

c ;������Rd�!"�7�G����=�&CMC�=�&�C��C4�>����/�?�C<�"�����C#$%c�C��S6�>��H�������������+"�E�L�B1�"�/�,B��&��

/���?������M��-���"�5A4�������<��5A4������<RN����/���<R�C���BV��,a�)��51�Y���6+�!�_���-.�������E��"�ES������l

67�/��89�:�����/��;���� ��!�_�4�"��C�vj��C

h� ;������Rd�!"�7�G����=�&�C�=�&M�CF�C��/��6����w�/��C�8A4��C#$%$�C�p�E����/��E���?����1�fEY��E��������Ex�,���/�

P��7����5A4��"-�C��"-4�S�,a�)��51�Y���6+�!�_���-S�!����������C�4�"��!B67�/���8��!�_�4�"��-�C�v#�jC�

PDF Compressor Pro

Page 4: Identification of alfalfa (Medicago sativa cv. yazdi) clones resistant or tolerant to alfalfa witches’broom in Yazd province

������������� �������������������������������

�� ���!��"�"���#$%%��� ����������&"����'���

The 6th National Biotechnology Congress of Iran��13-15 Aug, 2009, Milad Tower Conference Hall, Tehran-Iran

J ;�����Rd�!"�7�G����=&�C���F�&MC*��1����/�?C��!��S�"-C#$%��C ���E<4L�5��"�E������54�RE���BE�N��(�E��/���Q

���/�����/����?��������<���"�5A4��"-�C51�Y�����,a�)������E�������E���������������E�������E �������E�������E�����

/"�>�!�_�4�"�B ���C�,�*V1%h %%C

% *��1�F&�C��/?�����!��S�"-�C#$JJ�C������/�6���F�]����������+�BE�N�/�5A4��E��"�!���������GE��)���"��E_����E���/��E�����C

���"-����6+�!�_���-.��������7��L������!B67�/���6'��C�5*V1jJ��C

j *��1��F&�C?�������q�/�!��S�"-�C���������yR4�@C#$J�C��������������5E���"/�3�)<4����4�E�-�����/��E��GE��P���������"�5EA4�

��m���������C��5�A������� +������B���$#���!������� #�,�*V1�#h #C�

#i *��1��F�&�C?�C����=�/�!��S"-�CM�C�4�IA ����C#$Jj�C�/�7��!"�V<�6A47������!��S��(����"�7��������Q�E�����

N>�B�����S�<���"�"����������C��5�A������� +������B���$$���!������$ ��,�*V1�$c% $cjC

## *��1�C�F&FC��6����/�?�C���!��S�"-�C#$Jj�C���M�]/�����/����?����� 4�<���"�5A4������������ E����/��� VE1��&�"-�C

��"�� N�,a�)��51�Y���6+�!�_���-.�������<;�1�!�_�4�"�������� V1��CB���5*V1�F/"��j#�C��

���

12- Graham, J. H., Fresheiser, F. I., Stuteville, D. L. and Erwins, D. C. 1984. Compendium of alfalfa �

diseases. American Phytopathology Society , St. Paul. MN. 165p. 13- Lee, I-M, Davis, R. E. and Gundersen-Rindal, E. D. 2000. Phytoplasma: Phytopathogenic mollicutes. Ann. Rev. Microbiol. 54: 221-255. 14- Menzies, J. D. 1946. Witches' broom of afalfa in North America. Phytopathology 39: 762-774C �

Identification of alfalfa (Medicago sativa cv. yazdi) clones resistant or tolerant to alfalfa witches’broom in Yazd province

S. A. Esmailzadeh-Hosseini, S. A. Tabatabaei, M. Salehi and R. Firooz

Plant Protection Research and Plant Breeding Research Depts., Yazd Agricultural and Natural Resources Research Center, Yazd, Iran and Plant Protection Research Dept. Fars Agricultural and Natural Resources Research Center, Zarghan, Iran. �

[email protected]

Abstract Witches’broom is one of the most important alfalfa diseases in Iran. To identify alfalfa (Medicago sativa cv. yazdi) clones resistant or tolerant to witches’ broom disease, during 2005-2008 a survey was conducted in the major alfalfa growing regions of Yazd province. Based on characteristic disease symptoms, ELISA test using polyclonal antiserum and direct and nested polymerase chain reaction (PCR) using P1/P7 and R16F2n/R16R2 primer pairs, healthy plants were identified from symptomatic and asymptomatic infected plants. Clones of healthy plant were cultured in row planting in a severely infected alfalfa field in Rezwanshahr (Sadugh, Yazd province) and infection percent and diseases severity were evaluated. Under laboratory conditions thousand kernel weight, germination percent, radicle length, plumule length, radicle dry weight and plumule dry weight of tolerant plants were examine in Petri dish. Based on the results of this study 18.7% of plants in perennial alfalfa stand had field resistance. Seeds of tolerant plants had low germination percent and plant vigorous compared to those of healthy plants. Considering to the results, in affected areas using healthy alfalfa plants for seed and forage production is recommended. Furthermore,

PDF Compressor Pro

Page 5: Identification of alfalfa (Medicago sativa cv. yazdi) clones resistant or tolerant to alfalfa witches’broom in Yazd province

������������� �������������������������������

�� ���!��"�"���#$%%��� ����������&"����'���

The 6th National Biotechnology Congress of Iran��13-15 Aug, 2009, Milad Tower Conference Hall, Tehran-Iran

because of the low germination percent and low plant vigorous, using seeds of tolerant plants is not recommended .�

Key words: Alfalfa witches’ broom, ELISA, PCR, infection percent and disease severity, Rezwanshahr (Sadugh, Yazd province)

PDF Compressor Pro