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EDAFOLOGÍA, Vol. 10 (3), pp. 21-31, 2003

INFLUENCIA DE LA CONTAMINACION DE SUELOS CON HIDRO-CARBUROS SOBRE SU CALIDAD BIOQUIMICA

M. QUEVEDO DIOSES, T. HERNÁNDEZ FERNÁNDEZ, C. GARCÍA IZQUIERDO

Departamento de Conservación de Suelos y Manejo de Residuos Orgánicos. Centro deEdafología y Biología Aplicada Segura, CEBAS-CSIC. Campus Espinardo 30100 Murcia-España. E-mail: [email protected]

Abstract. Two soils, with different amounts of organic matter were contaminated withtwo differents products derivated of the petroleum (fuel oil and mineral oil). We investigatedthe influence of these pollutants on the biochemical activity of the soil, measured through ofseveral enzymatic activies such as the oxidoreductases (dehydrogenase) and hydrolases(protease, β-glucosidase and fosfatase). The experiment was carried out in a period of 60days, and testing different doses (2,5%, 5% and 10% fuel oil) and (2,5% and 5% mineral oil).

In general, we found that the enzymatic activies studied were higher in the soils with highcontent of organic matter. The results, shows that these biochemical parameters that dependsof microbial populations, were very influenced by the content of organic matter. The negativeeffects of the hydrocarbons on the biochemical activity of the soils, was influenced by the typeof contaminant and by the doses. Fuel-oil influence more negatively on the dehydrogenaseactivity of the soil where was added than of mineral oil. The different physical structure of theboth hydrocarbons contaminants is without doubt responsible of this behaviour.

Key words: Contaminated soil, Hydrocarbon, Enzimatic activity, Organic matter

Resumen. Dos suelos con diferente contenido en materia orgánica fueron contaminadoscon dos productos derivados del petróleo (gasoil y aceite mineral). Nuestro objetivo fuedeterminar la influencia de estos compuestos contaminantes sobre la actividad bioquímica delos suelos, medida a través de diversas actividades enzimáticas tales como las oxidorreduc-tasas (deshidrogenasa) e hidrolasas (proteasa, ‚ β-glucosidasa y fosfatasa). El experimento sellevó a cabo en laboratorio, manteniendo los suelos contaminados en incubación durante unperiodo de 60 días, y ensayando diferentes dosis (2,5%, 5% y 10% gasoil) y (2,5% y 5%aceite mineral).

En general, diremos que las actividades enzimáticas estudiadas mantienen valoresmucho más elevados en los suelos con alto valor de materia orgánica. Este hecho demuestraque todos aquellos parámetros (como las actividades enzimáticas), en los que intervienenpoblaciones microbianas, son dependientes del contenido de materia orgánica del suelo.También podemos señalar que se observó en muchos casos, un efecto negativo de los hidro-carburos sobre la actividad bioquímica de los suelos. Dicho efecto se ve claramente influen-ciado tanto por el tipo de contaminante, como por la dosis y por el contenido en materia orgá-nica de los suelos. Como ejemplo diremos que cuando el suelo con bajo contenido de mate-

INTRODUCCIÓN

Un recurso natural que en los últimosaños se está viendo amenazado por procesosno deseables, es el suelo (Albaladejo yDiaz, 1990; Garcia et al., 2000). En condi-ciones naturales el suelo tiende a un estadode equilibrio, manteniendo una calidad ade-cuada; sin embargo, la entrada en el mismode xenobióticos puede alterar dicho equili-brio, evitando que el suelo realice entoncessus funciones de una manera adecuada(Ortiz Silla, 1990).

Cuando sobre un suelo se desarrollanfenómenos de contaminación, uno de losaspectos que se puede ver afectado en pri-mer lugar es la actividad microbiana delmismo, clave para mantener una adecuadacalidad en ese suelo. Este hecho es impor-tante si pensamos que dicha actividadmicrobiana será la encargada de intentardescontaminar ese suelo, puesto que algu-nos microorganismos pueden usar comosustrato al carbono contenido en el propiocontaminante orgánico. Quizás es de mayorinterés conocer las actividades de los micro-organismos que se desarrollan en el medio,que no cuales son estos microorganismos(Nannipieri et al., 1990). En este sentido, elestudio de actividades enzimáticas tiene unagran relevancia. Las enzimas son cataliza-dores biológicos de innumerables reaccio-nes del suelo. Las enzimas del suelo sonsimilares a las de otros sistemas y las reac-ciones que catalizan son dependientes demultitud de factores tales como pH, tempe-ratura, presencia o ausencia de inhibidores(contaminantes), etc. (Burns, 1978).

Químicamente, las enzimas son proteínascompuestas de aminoácidos unidos porenlaces peptídicos en cadenas llamadaspolipéptidos. La función de las enzimas,como catalizadores que son, es la de acele-rar una reacción (al disminuir la energía deactivación), hasta hacerla casi instantánea.

Diversas actividades enzimáticas se hanutilizado como bioindicadores de procesosde degradación y contaminación de suelos(Moreno et al., 2002), e incluso de su reha-bilitación cuando se produce (García et al.,1997). La monitorización de actividadesenzimáticas oxidorreductasas (deshidroge-nasa) e hidrolasas (proteasa, fosfatasa y‚β-glucosidasa) sobre suelos con diferentenivel de materia orgánica se ha consideradoútil, con objeto de conocer también la inci-dencia de dicha materia orgánica sobre elefecto de los xenobióticos empleados comocontaminantes. Cuando los suelos son con-taminados con derivados del petróleo, com-puestos aromáticos tales como benceno,tolueno, fenol y etilbenceno (comúnmentecomponentes del petróleo), podrían actuarcomo desinfectantes cuando están presentesen la fase líquida, fomentando quizás el cre-cimiento microbiano (Gibson, 1971), e inci-diendo entonces sobre algunas actividadesenzimáticas. Los diferentes aditivos quepueden estar presentes en los productos refi-nados de petróleo también parecen tenerefecto sobre la persistencia de esos produc-tos en los suelos (Frankenberger, 1982).Como se indicó anteriormente, el estudio dealgunas hidrolasas implicadas en los ciclosde elementos importantes en el suelo es fun-damental para conocer la actividad específi-

22 QUEVEDO DIOSES et al.

ria orgánica es contaminado con aceite mineral, aumenta el contenido de algunas de las enzi-mas hidrolasas. El gasoil incide más negativamente sobre la actividad deshidrogenasa de lossuelos donde se incorpora que el aceite mineral; la diferente estructura física de los hidrocar-buros que incorporan ambos contaminantes es sin duda responsable de este hecho.

Palabras Claves: Suelo contaminado, Hidrocarburos, Actividad enzimática, Materiaorgánica.

ca de los microorganismos y su adaptaciónfrente a condiciones concretas, como ennuestro caso puede ser la introducción en elsuelo de diferentes hidrocarburos.

Sabemos que en el caso de algunos con-taminantes como los hidrocarburos deriva-dos del petróleo, los microorganismos pre-sentes en el suelo poseen las enzimas nece-sarias para llevar a cabo la degradación dedichos hidrocarburos (Schroeder et al.,1999). Sin embargo, nosotros dentro delestudio que estamos llevando a cabo, no noshemos planteado determinar aquellas enzi-mas que permiten esa degradación (oxigena-sas, por ejemplo), sino que planteamos comoOBJETIVO principal, conocer la influenciaque tiene sobre algunos parámetros indicati-vos de la actividad bioquímica, y en sueloscon diferente contenido de materia orgánica,la entrada de dos derivados del petróleoindustriales (gasoil y aceite mineral).

MATERIAL Y MÉTODOS

MaterialSuelos. Los suelos empleados en nuestro

experimento han sido dos, procedentes del SEde España (Región de Murcia), y con diferen-te nivel de materia orgánica: i) Suelo conescaso valor de dicha materia orgánica, comocorresponde a suelo típico de zonas medite-rráneas españolas con clima semiárido, calizoy pobre en nutrientes, abandonado después dehaber sido explotado por agricultura intensi-va, y con una muy escasa cubierta vegetal; ii)Suelo con elevado contenido en materia orgá-nica, no sometido a acción antrópica en losúltimos 50 años, con una vegetación actual depino (Pinus halepensis Mill.). Las caracterís-ticas generales de ambos suelos puedenobservarse en la Tabla 1.

Contaminantes derivados del petróleo.Se escogieron, dos derivados del petróleo denaturaleza industrial, los cuales pueden lle-gar a los suelos a través de diversas vías

CALIDAD BIOQUIMICA EN SUELOS CON HIDROCARBUROS 23

Característica ParámetrosSuelo de bajonivel Materia

Orgánica

Suelo de altonivel Materia

Orgánica

Físico-Químicas

pHConduct. Eléct.(dS/m)Carbonato Cálcico %Materia orgánica %Nitrógeno (mg kg-1)Fósforo (mg kg-1)Textura

7,50,2955,460,803,003,13

Arcillosa

7,20,1448,656,010,17,2

Franca

Bioquímicas

Actividad Deshidrogenasa1

Actividad Proteasa2

Actividad β-glucosidasa3

Actividad Fosfatasa4

420,322958

1313,337486

TABLA 1: Características de los suelos incluidos en el experimento.

1 Unidades de µg INTF g-1

2 Unidades de µmol NH4+ g-1 h-1

3 Unidades de µmol p-nitrophenyl-β-D-glucopiranoside (p-NP) g-1 h-1

4 Unidades de µmol p-nitrophenyl phosphate (p-NP) g-1 h-1

(accidentalmente, pérdidas en las canaliza-ciones de los productos citados, etc…); ade-más de ello, dichos derivados se han escogi-do debido a su diferente contenido en lostipos de compuestos carbonados que loscomponen (el gasoil dispone de moléculascon átomos de carbono comprendidos entreC15-C25, mientras que el aceite mineral, loscontiene algo más pesados C25-C35, ademásde disponer de una mayor cantidad de algu-nos metales pesados).

Diseño experimentalLas muestras de suelos fueron extraídas

de la capa superficial (0-20 cm). El experi-mento de incubación a nivel microcosmos, serealizó de la siguiente manera: 250 g de cadatipo de suelo, homogenizado y tamizado conmalla de 2 mm, se introdujeron en contene-dores de plásticos de 300 g de capacidad. Seestablecieron un total de 6 tratamientos dife-rentes: Suelo Control, sin adición de conta-minante; 5 tratamientos contaminados artifi-cialmente con Gasoil y Aceite mineral. Lasdosis establecidas fueron para Gasoil 2,5%(como dosis baja, pero con capacidad parainfluir sobre el suelo); dosis media, 5,0%; ydosis elevada, 10%. Para el Aceite mineral seeligieron dos dosis: 2,5% y 5,0%. Las mues-tras se colocaron a temperatura ambiente,con luz solar y humedecidas al 60% de sucapacidad de retención hídrica; dicha hume-dad se mantuvo a lo largo del experimento.Los contenedores se cerraron con tapaderasconvenientemente agujereadas, necesariaspara permitir la aireación, así como paraimpedir la pérdida de humedad. Se estable-cieron tres repeticiones por tratamiento y 4períodos de incubación: 0 días (muestreo alas 3-4 horas de la adición del contaminante),10, 30 y 60 días respectivamente. Las mues-tras se mantuvieron a 4ºC hasta su análisis.

Métodos de AnálisisLa Actividad Deshidrogenasa se deter-

minó por el método de García et al. (1993);

a 1 g de suelo se le adicionan 0,2 ml de 2-p-iodofenil-3-p-nitrofenil-5-fenil (INT) comoaceptor de electrones, manteniéndose duran-te 20 horas a 22º C en oscuridad, para produ-cir la formación de iodonitrofenil formazano(INTF), midiendo a continuación dichocompuesto resultante en espectrofotómetro.La Actividad Proteasa, se realizó por elmétodo de Nannipieri et al. (1980) en el cualse hidroliza la N-·-benzoil-L-argininamida(BAA). La Actividad Fosfatasa se determinópor el método de Tabatabai (1994), median-te la adición a 0,5 g de suelo, de un sustratoartificial (p-nitrofenil-fosfato, PNF) y poste-rior evaluación colorimétrica del p-nitrofenilliberado que, en medio básico desarrolla uncolor amarillo. La Actividad ‚β-glucosidasa,se determinó analogamente al anterior utili-zando en su caso el sustrato p-nitrofenil-β-D-glucopiranósido (PNG).

Tratamiento estadísticoTodos los tratamientos se llevaron a

cabo por triplicado, para poder someter losdatos obtenidos a los correspondientes análi-sis estadísticos. Se realizó un análisis de lavarianza (ANOVA), con el fin de obtener laMDS (Menor diferencia significativa) paracada tratamiento a lo largo del tiempo deincubación, según el Test de Rango Múltiplede Fisher al 95% de nivel de confianza.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

De forma general, y para los dos suelosestudiados, las actividades enzimáticas deter-minadas en nuestro estudio fueron más eleva-das en aquel suelo con mayor contenido demateria orgánica (Tablas 2, 3, 4 y 5). Estehecho no es sorprendente si tenemos encuenta que es precisamente dicha materiaorgánica la que actúa en el suelo como fuen-te de biomasa microbiana, la cual es suscep-tible de mineralizarse y provocar la apariciónde sustratos capaces de activar la síntesisenzimática. El suelo abandonado, con escasa


cubierta vegetal, no tiene prácticamenteentradas de materia orgánica, por lo que lamineralización de aquella materia autóctonaserá muy escasa, generando así pocos sustra-tos, y suscitando por tanto una escasa activi-dad enzimática (Garcia et al., 2000). Por elcontrario, el suelo con elevada cantidad demateria orgánica dispone de una vegetación(suelos de bosques de Pinus halepensis L.),la cual se someterá a continuos procesos demineralización y humificación, originandosustratos capaces de activar la síntesis enzi-mática; además, los propios exudados radica-les pueden constituir sustratos para ello.

Actividad deshidrogenasaLa oxidación biológica de compuestos

orgánicos se realiza generalmente medianteprocesos de deshidrogenación, y se lleva acabo por enzimas denominadas deshidroge-nasas. La actividad deshidrogenasa de lossuelos viene determinada por diferentes sis-temas deshidrogenasas, los cuales se carac-terizan por presentar una alta especificidad

de sustratos. Estos sistemas son parte inte-gral de los microorganismos, por lo que lamedida de actividad deshidrogenasa ha sidousada para evaluar la actividad microbioló-gica general, aunque esto ha sido criticadopor diferentes autores. Así Benefield et al.,(1977) indicaron que la actividad deshidro-genasa no es un parámetro exacto paradeterminar el flujo de electrones con lavelocidad de liberación de O2 debido a queel aceptor de electrones usado en la determi-nación de esta actividad (los más frecuentesson el TTC o INT) es menos efectivo que elaceptor natural (oxígeno). De cualquiermodo, García et al. (1997) encontraron quela actividad deshidrogenasa es un buen índi-ce del status de la actividad microbiana enáreas semiáridas del mediterráneo.

La adición de contaminantes orgánicos(hidrocarburos) a nuestros suelos en estu-dio, influyó negativamente y de manerainmediata sobre la actividad deshidrogena-sa, y por tanto, sobre los procesos microbia-nos generales del suelo (Tabla 2).


SUELO CON ALTO NIVEL DE MATERIA ORGÁNICA

SUELO CON BAJO NIVEL DE MATERIA ORGÁNICA

0días

10días

30días

60días

*MDS0

días10

días30

días60

días*MDS

Control 131 131 194 124 27 42 43 72 58 11

2,5% Gasoil 100 156 152 76 19 25 44 49 35 12

5,0% Gasoil 126 143 114 92 26 12 53 49 41 10

10 % Gasoil 115 135 101 84 22 6 27 36 26 10

2,5% Aceite 75 107 136 148 7 22 29 48 38 8

5,0% Aceite 27 93 191 147 20 12 34 36 37 9

** MDS 24 19 23 26 9 9 10 9

* MDS= Menor diferencia significativa (p< 0,05) para cada tratamiento a lo largo del tiempo de incu-bación, según el Test de Rango Múltiple de Fisher al 95% de nivel de confianza.** MDS= Menor diferencia significativa (p<0,05) entre los diferentes tratamientos para cada tiempode muestreo, según el Test de Rango Múltiple de Fisher al 95% de nivel de confianza.

TABLA 2: Valores de la Actividad Deshidrogenasa (µg INTF g-1).

Cuando el suelo tiene un contenido ele-vado en materia orgánica, al inicio de incor-porar los hidrocarburos al suelo, es el aceitemineral el que incide más negativamenteque el gasoil sobre la actividad deshidroge-nasa del suelo. Este hecho puede debersetanto a los aditivos que dichos aceites mine-rales incorporan (metales pesados, porejemplo), como a los hidrocarburos máspesados que contienen, en comparación conel gasoil. Sin embargo, conforme aumentael tiempo de permanencia de dicho aceitemineral en el suelo, la actividad deshidroge-nasa aumenta, indicando que las poblacio-nes microbianas han conseguido sobrepo-nerse al tóxico. Podemos indicar que posi-blemente, los propios cadáveres de microor-ganismos que no sobrevivieron al tóxico ini-cialmente, pueden servir de alimento ener-gético posterior, y ello hace que la actividadmicrobiana general experimente un aumen-to, detectado en nuestro caso por la activi-dad deshidrogenasa.

El efecto de estos contaminantes, sobrela actividad deshidrogenasa del suelo conmenor contenido en materia orgánica, no esigual (Tabla 2). Inicialmente, al igual queantes, se observó un efecto inhibidor sobreesta actividad enzimática, pero ya a los 10días, dicha actividad comenzó a recuperar-se. Puede ocurrir, como ya indicamos, quelos cadáveres de los microorganismos muer-tos inicialmente actúen como incentivo parael posterior aumento de la actividad micro-biana; pero tampoco es descartable que laspoblaciones microbianas resistentes a lacontaminación puedan comenzar a degradarhidrocarburos y los acepten como sustrato,y ello eleve los contenidos de actividad des-hidrogenasa. Frankenberg (1982) establecióque la adición de inhibidores de oxidación acombustibles como los empleados por nos-otros impide la utilización microbiana dehidrocarburos como fuente de carbono yenergía; sin embargo, debemos señalar queen su estudio, actuaban con dosis de conta-

minante mucho más elevadas que las nues-tras, y ese puede ser el motivo del diferentecomportamiento.

Actividad Proteasa hidrolizante dela BAA

La proteasa interviene en las reaccionesde hidrólisis de proteínas y péptidos a amo-nio, por lo que está involucrada en el ciclodel nitrógeno. Las actividades de los dife-rentes tipos de proteasas presentes en elsuelo pueden ser determinadas de maneraselectiva según el substrato utilizado y lascondiciones de la técnica que se emplee ensu determinación (Ladd y Paul, 1973). Ennuestro caso, la determinación de la activi-dad proteasa realizada es la que hidroliza laN-α-benzoil-L-argininamida (BAA), la cualusa como sustratos péptidos sencillos, queson los fragmentos más cortos procedentesde la hidrólisis de las grandes cadenas deproteínas, la cual puede a su vez estar cata-lizada por otras proteasas. Es una de lasactividades enzimáticas más susceptibles adesaparecer del medio; de ahí nuestro inte-rés en conocer si una elevada concentraciónde hidrocarburos en el suelo influye sobre lasíntesis de la enzima.

En el suelo con elevado valor de mate-ria orgánica, la introducción de hidrocarbu-ros perjudica a la actividad proteasa, apre-ciándose dicho efecto negativo a lo largo detodo el experimento de incubación (Tabla3). La evolución de la enzima en ese tiempofue escasa, poniendo de manifiesto que laspoblaciones microbianas encargadas de susíntesis no se recuperan con el tiempo deresidencia del tóxico en el suelo. No seobservó en este tipo de suelo una incidenciamayor cuando el hidrocarburo aumenta sudosis, quizás porque las dosis mínimas sonsuficientes para alterar suficientemente elcomportamiento de las poblaciones micro-bianas capaces de sintetizar proteasa.

En el suelo de menor contenido enmateria orgánica, el comportamiento de la


enzima fue bastante similar, si bien en elmomento inicial, algunas dosis elevadasde hidrocarburos generaron un aumento dela mencionada actividad (Tabla 3). Esposible que algunos componentes dedichos hidrocarburos puedan actuar comosustrato para la enzima, haciendo aumen-tar su actividad.

Actividad β-GlucosidasaLa actividad β-glucosidasa es una

hidrolasa que interviene en el ciclo del car-bono y actúa en la hidrólisis de los enlacesβ-glucósidos de las grandes cadenas de car-bohidratos para dar glucosa. La hidrólisis deestos sustratos juega un papel muy impor-tante en la obtención de energía para losmicroorganismos del suelo (Eivazi yZakaria, 1993). Estos mismos investigado-res demostraron que esta enzima podía serinhibida por la presencia de metales pesa-dos, compuestos tóxicos, etc.

La tabla 4 mostró dinámicas diferentesen los dos tipos de suelos estudiados, en

función asimismo del tipo de hidrocarburoempleado.

Inicialmente (a los 0 días) en el suelocon elevado valor de materia orgánica, laintroducción de los hidrocarburos influyónegativamente en esta enzima solo cuandose incorpora aceite mineral, y en el caso delgasoil, cuanto la dosis es máxima (10%).Sin embargo, a los 10 días de permanenciade esos hidrocarburos en el suelo, la activi-dad‚ β-glucosidasa superó en casi todos lossuelos contaminados a los valores determi-nados en el suelo control; volvemos a seña-lar que los cadáveres de microorganismosaportados al suelo por la muerte inicial dealgunas poblaciones, puede colaborar endicho aumento. Con el transcurso del tiem-po de residencia de los hidrocarburos en elsuelo, vuelve a ponerse de manifiesto suefecto negativo sobre esta actividad enzimá-tica, en particular con la dosis elevada degasoil (10%).

En el suelo con bajo valor de materiaorgánica, el comportamiento de los dos



TABLA 3: Valores de la Actividad Proteasa (µmol NH4+ g-1 h-1 ).



0días

10días

30días

60días

*MDS0

días10

días30

días60

días*MDS

Control 3,33 4,63 4,33 4,83 0,37 0,32 0,28 0,25 0,25 0,03

2,5% Gasoil 2,97 3,17 3,43 3,07 0,59 0,25 0,13 0,18 0,16 0,05

5,0% Gasoil 3,00 4,20 3,27 3,17 0,46 0,32 0,15 0,19 0,16 0,04

10 % Gasoil 2,93 4,23 2,83 3,00 0,28 0,46 0,30 0,19 0,13 0,04

2,5% Aceite 3,03 3,33 2,77 2,53 0,55 0,32 0,30 0,30 0,28 0,06

5,0% Aceite 2,50 3,00 2,80 3,33 0,64 0,43 0,26 0,52 0,43 0,07

** MDS 0,50 0,48 0,43 0,46 0,07 0,04 0,05 0,03

hidrocarburos introducidos fue muy dife-rente (Tabla 4). El aceite mineral contribuyóa un aumento de actividad‚ β-glucosidasa;consideramos que posiblemente este pro-ducto ofrece la posibilidad de algún tipo desustrato capaz de activar dicha síntesis, enmayor medida que en el suelo con elevadovalor de materia orgánica. No olvidemosque cuanto menor es el contenido en mate-ria orgánica, menos fenómenos de adsor-ción del contaminante sobre dicha materiaorgánica se podrán dar, y por tanto, el con-taminante estará más biodisponible.

Actividad fosfatasaLa fosfatasa es una hidrolasa que activa

la transformación de fósforo orgánico eninorgánico, haciéndolo por tanto asimilablepara las plantas. De ahí la gran importanciade esta enzima en suelo. La presencia de laenzima fosfatasa en suelos tiene un origenmicrobiano, aunque en muchas ocasiones estemporal y se pierde con rapidez (Ros,

2000). La presencia de contaminantes en elsuelo pueden afectar negativamente a lamedida de la actividad fosfatasa, ya quepueden interferir con la reacción de comple-jación del sustrato, combinación con elgrupo activo de la enzima, o bien por reac-ción con el complejo enzima-sustrato (Jumay Tabatabai, 1978; Reddy et al., 1987).

En el suelo con elevado valor de mate-ria orgánica, inicialmente existió un efectonegativo sobre la actividad fosfatasa cuandoel gasoil se introdujó en el suelo (Tabla 5)siendo el efecto más acusado con la dosismás elevada de gasoil, pero cuando lo queintroducimos es aceite mineral, el valor dedicha actividad aumenta respecto al suelocontrol. Posiblemente en este producto exis-tan sustratos capaces de activar esta enzima.Sin embargo cuando aumentó el tiempo depermanencia del contaminante en el suelo,se observó un descenso de actividad lamicrobiana, indicativo de que el ciclo del Pse ve perjudicado.



TABLA 4: Valores de Actividad ‚ β-glucosidasa (µmol p-nitrophenyl-β-D-glucopiranósido(p-NP) g-1 h-1)



0días

10días

30días

60días

*MDS0

días10

días30

días60

días*MDS

Control 74 83 88 98 17 29 18 18 14 4

2,5% Gasoil 74 77 86 79 17 22 17 15 11 4

5,0% Gasoil 76 103 72 77 21 24 16 15 14 4

10 % Gasoil 55 100 64 69 13 23 16 16 19 4

2,5% Aceite 40 100 92 86 13 23 23 32 28 7

5,0% Aceite 40 101 77 92 16 45 43 30 38 11

** MDS 10 19 18 14 7 7 3 5

Si el suelo no dispone de elevado conte-nido en materia orgánica (Tabla 5), la activi-dad fosfatasa se ve inhibida en los sueloscon hidrocarburos, pero conforme aumentael tiempo de residencia de dichos hidrocar-buros, los suelos con aceite mineral aumen-ta ostensiblemente la mencionada actividadfosfatasa. Posiblemente, después de unperiodo de aclimatación, las poblacionesmicrobianas pueden aceptar como sustratosa los hidrocarburos adicionados, y ello favo-rece la síntesis de dicha enzima.

CONCLUSIONES

La contaminación de suelos con hidro-carburos, afecta negativamente a la activi-dad microbiana del suelo en general, y deforma específica a diversas actividadesenzimáticas implicadas en el ciclo biogeo-químico. El tipo de hidrocarburo que seintroduce en el suelo (gasoil y aceite mine-ral en nuestro caso) parece ser más inciden-te en los efectos sobre la actividad bioquí-

mica de los suelos que las diferentes dosisde hidrocarburos ensayadas. El gasoil incidemás negativamente que el aceite mineralsobre la actividad fosfatasa.

AGRADECIMIENTOS

Los autores, manifiestan su agradeci-miento a la Organización de la FundaciónSéneca por financiar la beca predoctoral a laSrta. Quevedo, para llevar acabo este trabajo.

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TABLA 5: Valores de la Actividad Fosfatasa (µmol p-nitrophenyl phosphate (p-NP) g-1 h-1)



0días

10días

30días

60días

*MDS0

días10

días30

días60

días*MDS

Control 86 74 120 125 11 59 49 44 47 12

2,5% Gasoil 71 47 73 80 15 29 36 39 36 8

5,0% Gasoil 75 43 65 76 8 9 31 42 32 9

10 % Gasoil 66 37 51 63 9 3 28 34 30 7

2,5% Aceite 91 59 106 73 15 19 43 141 148 17

5,0% Aceite 133 80 91 65 11 19 79 182 170 15

** MDS 13 6 12 12 8 10 13 13

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