Informe de Inmunologia

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INDICE

1. PRESENTACION………………………………………...PAG 2

2. INTRODUCCION…………………………………………PAG 3

3. OBJETIVO…………………………………………………PAG 4

4. MARCO TEORICO……………………………………….PAG 5

5. SECUENCIA DE LA PRACTICA………………………PAG 6

6. MATERIALES…………………………………………….PAG 7

7. CONTENIDO……………………………………………...PAG 8 – 29

8. ESTADISTICA…………………………………………….PAG 30

9. CONCLUSION……………………………………………PAG 31

10.LOGROS………………………………………………….PAG 32

11.RECOMENDACIONES…………………………………..PAG 33

12.BIBLIOGRAFIA……………………………………………PAG 34

Informe de la Práctica Profesional

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PRESENTACIÓN

En esta oportunidad presentare el siguiente informe que reúne fundamentos teóricos acerca de inmunología los cuales nos ayudan a realizar diferentes interpretaciones de las distintas pruebas y técnicas realizadas en este área las cuales las hicimos con las personas responsables del área


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INTRODUCCIÓN

Los seres superiores están defendiendo constantemente su integridad biológica frente a agresiones, esencialmente externas. De no ser así, morirían como consecuencia de tumores e infecciones de bacterias, virus, hongos, etc. Para que estos fenómenos de defensa se lleven a cabo, los organismos disponen de un conjunto de elementos especiales, conocido como sistema inmune. La capacidad de defensa se adquiere antes de nacer y se madura y consolida en los primeros años de la vida fuera del seno materno.

La inmunología es la ciencia que estudia los procesos moleculares y celulares implicados en la defensa de la integridad biológica del organismo a través de la identificación de las sustancias propias y detección de las sustancias extrañas y su destrucción. En cada organismo, los mecanismos de defensa son muy diversos y heterogéneos, aunque siempre existe una actuación integrada de todos ellos. Los mecanismos de defensa pueden ser de tipo inespecífico y específico. Los mecanismos inespecíficos están constituidos por las barreras naturales, tales como la piel, mucosas y otros que están protegiendo constantemente al individúo de contagios externos. Otros elementos naturales de actuación son la lisozima de la saliva, lágrimas y secreciones nasales que tienen capacidad de romper la unión de azúcares en las paredes bacterianas, lo que puede inducir su lisis. También entre estos mecanismos inespecíficos se encuentra la respuesta inmune inespecífica que están constituida fundamentalmente por los componentes de la respuesta inmune específica.


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OBJETIVO

Conocer la inmunología desde el punto de vista médico clínico, para determinar enfermedades del sistema inmunológico y realizar el respectivo diagnóstico.

Reconocer el sistema inmunitario, para entender el origen de ciertas patologías.

Conocer los conceptos de antígeno, epítope y hapteno. - Concepto de anticuerpos como moléculas bifuncionales (de reconocimiento y efectoras). - Receptores específicos en linfocitos B y T.

Conocer la estructura del sistema inmune, su función de vigilancia en el organismo humano.

Reconocer las Barreras mecánicas y bioquímicas de defensa, Inflamación y respuesta de fase aguda. Mecanismos celulares (macrófagos, neutrófilos, mastocitos y eosinófilos).


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MARCO TEÓRICO

INMUNOLOGÍA:

La palabra inmunología deriva del latín immuzlis, que significa "sin carga", entendiéndose por carga un impuesto, ley o enfermedad. Se dice que aquellos individuos que no sucumben ante la enfermedad cuando se infectan, se hallan inmunes, y este estado de resistencia específica a una enfermedad se denomina Inmunidad.

La Inmunología es la rama de las ciencias biológicas que se ocupa del estudio de las respuestas de defensa a estímulos exógenos o endógenos y a sus desviaciones patológicas. Otra definición es que la Inmunología es la ciencia que estudia todos los aspectos del sistema inmunitario normal y patológico, aunque la delimitación anatómica y funcional del sistema inmunitario es algo aún impreciso. Inmunología es una disciplina que trata del estudio, diagnóstico y tratamiento de pacientes con enfermedades causadas por alteraciones de los mecanismos inmunológicos y de las situaciones en las que las manipulaciones inmunológicas forman una parte importante del tratamiento y/o de la prevención.

En Inmunología se incluyen las enfermedades en las que los mecanismos inmunitarios no actúan adecuadamente, bien sea por razones genéticas o adquiridas (inmunodeficiencias, incluyendo el SIDA) o debido a la transformación neoplásica de células del sistema inmunitario (tumores linfoides) o donde la actuación de anticuerpos específicos y/o linfocitos sensibilizados, bien sea directamente o a través de varios sistemas efectores asociados, produce como resultado lesiones tisulares en el hospedador (hipersensibilidad inmediata y autoinmunidad). También se ocupa la Inmunología de las situaciones en las que las lesiones pueden ser el resultado de la acción del sistema inmunitario en la defensa contra microorganismos (infección e inmunidad) o durante el rechazo de aloinjertos (transplantes y transfusiones). Por último, también la inmunología clínica incluye el uso de la inmunoterapia.

El trabajo en esta especialidad hospitalaria incluye una tecnología propia y requiere de manera ineludible su práctica en laboratorios adecuadamente dotados, así como también la asistencia a los enfermos mediante consultas con los médicos que los tengan a su cargo.


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SECUENCIA DE LA PRÁCTICA

Limpieza de las mesas antes y después de los procedimientos.

Toma de muestra de 7 a 10 a.m.

Codificación de las muestras de inmunología y procesamiento.

Reporte de resultados.

Registro a los libros.

Lavado de material usado.

Tiempo de Practica:

Inicio: 1 abril del 2014

Final: 15 de mayo del 2014


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MATERIALES

Placas (PCR,FR,ASO,Aglutinaciones)

Equipos de lector Elisa

Reactivos (PSA,TSH,T4,T3,FT4,PSALibre,BhCG,Hidatidosis)

Agua destilada

Gradillas

Estufa de incubación

Refrigeradora

Centrifuga

Pipetas automáticas de 25-50-500 ul

Vasos de precipitación

Reloj

Cinta adhesiva

Papel toalla


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CONTENIDO

1. PROTEÍNA C REACTIVA (PCR-LATEX)2. FACTOR REMATOIDEO (FR-LATEX)3. ANTI-ESTREPTOLISINA (ASLO-LATEX)4. KIT ANTÍGENOS FEBRILES 5. TIROXINA (T3) 6. TIROXINA LIBRE (T4 LIBRE) 7. TIROXINA TOTAL (T4) 8. TIROTROPINA (TSH) 9. ANTÍGENO PROSTÁTICO ESPECÍFICO TOTAL (PSA TOTAL) 10.ANTÍGENO PROSTÁTICO ESPECÍFICO (PSA LIBRE) 11.HIDATIDOSIS ELISA IgG12.HORMONA GONADOTROPINA CORIÓNICA CUANTITATIVO (hCG)13.FRACCIÓN BETA CUALITATIVA (beta acu-color)


9Informe de la Práctica Profesional

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1. PROTEÍNA C REACTIVA (PCR-LATEX)

Fundamento:

El PCR-látex test es una prueba rápida de aglutinación en porta basada en la técnica de Singer, para la detección directa y la semi cuantificación de la proteína C reactiva en suero.

La determinación se efectúa ensayando una suspensión de látex recubierto con anticuerpos PCR, frente a los sueros problema.

La presencia de aglutinación es indicativa de un aumento del nivel del PCR por enzima del límite superior del intervalo de referencia de las muestras ensayadas.

Técnica:

Llevar los reactivos y el suero a temperatura ambiente.

Agitar el reactivo de látex antes de usarlo.

a. Prueba Cualitativa: Depositar una gota (50 ul) de suero problema en uno de los círculos de la

tarjeta visualizadora. En los círculos adicionales depositar una gota de control positivo y una

gota de control negativo. Añadir a cada circulo una gota de reactivo de PCR –látex. Efectuar la mezcla con ayuda de un palito desechable, extendiéndola de

forma que cubra por completo la superficie interior de cada anillo. Mover la tarjeta con agitador rotatorio (100 r.p.m.) durante 2 minutos. Observar de inmediato con ayuda de una luz adecuada, la aparición de

cualquier signo de aglutinación.

Lectura:

Reacción negativa: suspensión uniforme sin cambio visible alguno tal como se presenta en el control negativo.

Reacción positiva: aglutinación débil o intensa, fácilmente visible macroscópicamente

Significado Clínico:

La proteína se reactiva es una proteína de fase aguda presente normalmente en el suero, que aumenta significativamente en una gran diversidad de lesiones tisulares, infecciones bacterianas y víricas, inflamaciones así como en las neoplasias malignas. La PCR contribuye a la defensa inmunológica inespecífica de varias


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formas entre ellas, mediante la activación del complemento y la aceleración de la fagocitosis

2. FACTOR REMATOIDEO (FR-LATEX)

Fundamento:

El PR-látex test es una prueba rápida de aglutinación basada en una modificación de las técnicas de Singer. Para la detección directa y la semi cuantificación en porta de los factores reumatoideos (FR) presentes en el suero.

La determinación se efectúa ensayando en una suspensión de partículas de látex recubiertas con gama globulina humana frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación visible es indicativa de la presencia o ausencia de FR en las muestras ensayadas.

Técnica:

Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente.

a. Prueba cualitativa Depositar una gota (50 ul) de suero problema en uno de los círculos de la

tarjeta visualizadora. En los círculos adicionales depositar una gota de control positivo y una

gota de control negativo. Añadir a cada circulo una gota de reactivo de FR –látex. Efectuar la mezcla con ayuda de un palito desechable, extendiéndola de

forma que cubra por completo la superficie interior de cada anillo. Mover la tarjeta con agitador rotatorio (100 r.p.m.) durante 2 minutos.


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Observar de inmediato con ayuda de una luz adecuada, la aparición de cualquier signo de aglutinación.

Lectura:




Los factores reumatoideos son un grupo de anticuerpos mayormente de la clase IGM dirigidos contra determinantes de la porción Fc de la inmunoglobulina IgG del paciente. Aunque presentes en diversas enfermedades se han elevado principalmente en pacientes con artritis reumatoidea.


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3. ANTI-ESTREPTOLISINA (ASLO-LATEX)

Fundamento:

El ASLO-látex test es una prueba rápidamente de aglutinación en porta para la detección directa y la semi cuantificación de niveles clínicamente significativos de anticuerpos anti-estreptolisina o ASLO en suero.

La determinación se efectúa ensayando una suspensión de partículas de látex recubiertos con estreptolisina frente a los sueros problema. La presencia o ausencia de aglutinación visible es indicativa de la presencia o ausencia de ASLO en las muestras ensayadas a niveles significativos.

Técnica:


a. Prueba cualitativa Depositar una gota (50 ul) de suero problema en uno de los círculos de la

tarjeta visualizadora en un círculo adicionales depositar una gota de control positivo y una gota de control negativo.

Añadir a cada circulo una gota de antígeno de ASLO –látex. Efectuar la mezcla con ayuda de un palito desechable, extendiéndola de

forma que cubra por completo la superficie interior de cada anillo. Mover la tarjeta con agitador rotatorio (100 r.p.m.) durante 2 minutos. Observar de inmediato con ayuda de una luz adecuada, la aparición de

cualquier signo de aglutinación.

Lectura:




Como respuesta a la infección por estreptococos hemolíticos de los grupos A, C y G productores de estreptolisina o (ASLO) que pueden ser determinados en el laboratorio. La investigación inmunológica de estos anticuerpos específicos contra los productos metabólicos de los estreptococos proporciona una información valiosa para el diagnóstico de infecciones provocadas por estreptococos (fiebre reumática, glomérulo nefritis)


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4. KIT ANTÍGENOS FEBRILES

Fundamento:

El suero del paciente se pone en contacto con los antígenos específicos, en este caso se utiliza suspensiones de salmonellas o brucellas muertas.

Si la muestra contiene los anticuerpos correspondientes se producirán una aglutinación macroscópicamente.

Técnica:


a. Prueba cualitativa Colocar en una placa una gota de suero y agregarle una gota de suspensión

de antígeno (tífico O, H, paratífico A, B, Brucellas). Mezclar y agitar la placa en forma circular durante 5 minutos. Observar la presencia o ausencia de aglutinación utilizando la luz indirecta

sobre el fondo oscuro.

Lectura:

Positivo (aglutinación)

Negativo (homogeneidad)



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La salmonellas se consideran patógenos entéricos obligados y su aislamiento en un individuo implica la enfermedad o estado de portador.

La enfermedad puede presentar en tres formas distintas:

Gastroenteritis, septicemia o fiebre tifoidea.

En la brucelosis el periodo de incubación puede extenderse en algunos días desde algunos días hasta varios meses (generalmente 3 semanas).


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5. TIROXINA (T3)

Fundamento:

Inmuno ensayo competitivo de quimioluminiscencia (Tipo 5) Los reactivos esenciales requeridos para un inmuno ensayo enzimático de fase sólida incluyen anticuerpos inmovilizados, conjugado enzima antígeno y el antígeno nativo. Después de la mezcla del anticuerpo inmovilizado, el conjugado enzima antígeno y el suero que contiene el antígeno nativo, se obtiene una reacción de competencia entre el antígeno nativo y el conjugado enzima antígeno para un número limitado de sitios de unión insolubilizados.

Técnica:

Antes de seguir adelante con el ensayo, los reactivos, los sueros de referencias y controles deberán estar a temperatura ambiente (20-27ºC).

Formatee los pozos del micro placa para cada suero de referencia, control y muestra de pacientes que deba ensayarse en duplicado. Colocar las tiras no utilizadas de micro pozos nuevamente en la bolsa de aluminio, sellar y almacenarlo de 2 8ºC.

Pipetee 0.050 ml (50ul) del suero de referencia apropiado, control o muestras dentro del pocillo asignado.

Adicione 0.100ml (100ul) de Trazador de trabajo, solución de conjugado Enzima T3 a todos los pozos. (Ver sección de preparación de reactivos)

Agite suavemente la micro placa durante 20 30 segundos mezclar y cubrir. Incube durante 45 minutos a temperatura ambiente. Elimine el contenido del micro placa mediante decantación o aspiración. Si

se decanta, golpee la placa y séquela con papel absorbente. Adicione 350ul de buffer de lavado (ver Sección Preparación de Reactivos),

decante (golpear y secar) o aspire. Repetir 4 veces más (4) para obtener un total de 5 lavados. Se puede utilizar un lavador automático o manual de placas. Seguir las instrucciones del fabricante para asegurar el uso apropiado. Si se utiliza un frasco de lavado, llene cada pozo oprimiendo el recipiente (evitar la formación de burbujas de aire) dispensar las solución de lavado. Decante la solución de lavado y repita 4 veces más.

Adicionar 50ul de sustrato A y adicionar 50ul de sustrato B. Incubar por 15 minutos a temperatura ambiente. Añadir solución de stop 50ul a todos. Esperar 30 minutos para la lectura en 620 a 630nm.

Valores de Referencia:

VR: 0.76 – 3.43 ug/dl


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Los niveles por encima de lo normal pueden indicar:

Niveles altos de una proteína que transporta T3 en la sangre (puede ocurrir con el embarazo, el uso de píldoras anticonceptivas o estrógenos, enfermedad hepática, o como parte de una afección hereditaria)

Hipertiroidismo (por ejemplo, enfermedad de Graves) Tirotoxicosis por T3 (poco común) Cáncer tiroideo (poco común)

Los niveles por debajo de lo normal pueden deberse a:

Enfermedad prolongada Hipotiroidismo (por ejemplo, enfermedad de Hashimoto) Inanición

Otras afecciones por las cuales se puede realizar el examen:

Tiroiditis indolora (silenciosa) Parálisis periódica tirotóxica Bocio nodular tóxico

6. TIROXINA LIBRE (T4 LIBRE)

Fundamento:Los reactivos esenciales requeridos por una fase solida de enzima e inmuno ensayo incluye el anticuerpo inmovilizado, enzima-antígeno conjugado y antígeno nativo. Mezclando el anticuerpo inmovilizado, conjugación de enzima-antígeno y suero que contienen el antígeno nativo, una reacción de la competición resulta entre el antígeno nativo y la conjugación del enzima-antígeno para un limitado número de insolubles sitios obligatorios.Técnica:

Dispersar 50 ul de suero de referencia, controles en los pozos. Dispersar 100 ul de enzima T4 libre, mezclar el micro placa de 20-30

segundos y cubrir. Incubar a temperatura ambiente (18-30°C) por 60 minutos. Decantar y lavar con buffer de lavado por 3 veces. Eliminar el exceso de agua sobre el papel absorbente. Dispersar sustrato A 50 ul y sustrato B 50 ul. Incubar a temperatura ambiente por 15 minutos en oscuridad


http://www.clinicadam.com/salud/5/000317.html








http://www.clinicadam.com/servicios-medicos/endocrinologia

http://www.clinicadam.com/servicios-medicos/ginecologia-y-obstetricia

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Adicionar 50 ul de solución stop, mezclar. Leer en absorbancia a 450 nm.

Valores de Referencia:VR: 0.55 – 3.25 ng/dl

Significado Clínico:Los niveles de T4 superiores a lo normal junto con niveles bajos de hormona estimulante de la tiroides pueden deberse a afecciones que involucran una hiperactividad de la tiroides, como: Enfermedad de Hashimoto temprana Enfermedad de Graves Tumores de células germinativas Niveles altos de una proteína que transporta T4 en la sangre (puede ocurrir con

el embarazo, el uso de píldoras anticonceptivas o estrógenos, enfermedad hepática, o como parte de una afección hereditaria)

Hipertiroidismo inducido por yodo Tiroiditis subaguda o crónica Bocio multi nodular tóxico Enfermedad trofoblástica

Los niveles de T4 inferiores a lo normal pueden indicar:

Hipotiroidismo (incluyendo enfermedad de Hashimoto y algunos otros trastornos que involucran hipoactividad de la tiroides)

Enfermedad Desnutrición o ayuno Uso de ciertos medicamentos














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7. TIROXINA TOTAL (T4)Fundamento:Los reactivos esenciales requeridos por una fase solida de enzima e inmuno ensayo incluye el anticuerpo inmovilizado, enzima-antígeno conjugado y antígeno nativo. Mezclando el anticuerpo inmovilizado, conjugación de enzima-antígeno y suero que contienen el antígeno nativo, una reacción de la competición resulta entre el antígeno nativo y la conjugación del enzima-antígeno para un limitado número de insolubles sitios obligatorios.

Técnica:

Dispersar 50 ul de suero de referencia, controles en los pozos. Dispersar 100 ul de enzima T4, mezclar el micro placa de 20-30 segundos y

cubrir. Incubar a temperatura ambiente (18-30°C) por 60 minutos. Decantar y lavar con buffer de lavado por 3 veces. Eliminar el exceso de agua sobre el papel absorbente. Dispersar sustrato A 50 ul y sustrato B 50 ul. Incubar a temperatura ambiente por 15 minutos en oscuridad Adicionar 50 ul de solución stop, mezclar. Leer en absorbancia a 450 nm.

Valores de Referencia:VR: 5.76 – 16.8 ug/dl

Significado Clínico:Los niveles de T4 superiores a lo normal junto con niveles bajos de hormona estimulante de la tiroides pueden deberse a afecciones que involucran una hiperactividad de la tiroides, como: Enfermedad de Hashimoto temprana Enfermedad de Graves Tumores de células germinativas Niveles altos de una proteína que transporta T4 en la sangre (puede ocurrir con

el embarazo, el uso de píldoras anticonceptivas o estrógenos, enfermedad hepática, o como parte de una afección hereditaria)

Hipertiroidismo inducido por yodo Tiroiditis subaguda o crónica Bocio multi nodular tóxico Enfermedad trofoblástica











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Los niveles de T4 inferiores a lo normal pueden indicar:

Hipotiroidismo (incluyendo enfermedad de Hashimoto y algunos otros trastornos que involucran hipoactividad de la tiroides)

Enfermedad Desnutrición o ayuno

8. TIROTROPINA (TSH) Fundamento:Los reactivos esenciales sugeridos por un análisis inmunoenzimometrico incluyen alta afinidad y especificidad de anticuerpos, con diferentes y con reconocimiento distinto del epitome, en exceso, y antígeno nativo.En este procedimiento, la inmovilización toma lugar durante el análisis en la superficie del micro pozo a través de la interacción de streptavidin cubierto en el pozo y el exógeno agregado biotinilado monoclonal al anticuerpo de anti-TSH. Mezclando el anticuerpo monoclonal inmovilizado, conjugación del enzima-antígeno etiquetado y un suero que contiene el antígeno nativo y los anticuerpos sin competencia o steric hidrance, para formar un sándwich complejo soluble.Técnica:

Dispersar 50 ul de suero de referencia, controles en los pozos. Dispersar 100 ul de enzima TSH, mezclar el micro placa de 20-30 segundos y


Valores de Referencia:VR: 0.39 – 6.16 u lU/ml


Los niveles por encima de lo normal pueden indicar:

Hipotiroidismo congénito (cretinismo)

Exposición a ratones (trabajadores de laboratorios o veterinarios)

Hipotiroidismo primario

Resistencia a la hormona tiroidea

Hipotiroidismo dependiente de TSH






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Los niveles por debajo de lo normal pueden deberse a:

Hipertiroidismo

Deficiencia de TSH

Uso de algunos medicamentos, incluyendo agonistas de la dopamina,

glucocorticoides, análogos de somatostatina y bexarote.

9. ANTÍGENO PROSTÁTICO ESPECÍFICO TOTAL (PSA TOTAL) Fundamento:Los reactivos esenciales sugeridos por un análisis inmunoenzimometrico incluyen alta afinidad y especificidad de anticuerpos, con diferentes y con reconocimiento distinto del epitome, en exceso, y antígeno nativo.En este procedimiento, la inmovilización toma lugar durante el análisis en la superficie del micro pozo a través de la interacción de streptavidin cubierto en el pozo y el exógeno agregado biotinilado monoclonal al anticuerpo de PSA. Mezclando el anticuerpo monoclonal inmovilizado, conjugación del enzima-etiquetado y un suero que contiene el antígeno nativo, resultados de la reacción entre el antígeno nativo y los anticuerpos, sin competición u obstáculo esteárico, de formar un complejo soluble de sándwich se ilustra con una ecuación.Técnica:

Dispersar 25 ul de suero de referencia, controles en los pozos. Dispersar 100 ul de enzima PSA, mezclar el micro placa de 20-30 segundos y


Valores de Referencia:

EDAD RANGO NORMAL DE PSA40-49 0-2.5 ng/dl50-59 0-3.5 ng/dl60-69 0-4.5 ng/dl70-79 0-6.5 ng/dl


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Significado Clínico:La prueba para el PSA es una herramienta importante para detectar el cáncer de próstata, pero no es infalible. Otras afecciones pueden causar una elevación en el PSA, como:

Una próstata más grande. Infección de la próstata (prostatitis). Infección urinaria. Exámenes recientes en la vejiga (cistoscopía) o próstata (biopsia). Sonda vesical recientemente puesta en la vejiga para drenar orina.

10.ANTÍGENO PROSTÁTICO ESPECÍFICO LIBRE (PSA LIBRE) Fundamento:Es un aprueba de inmuno ensayo en fase sólida. Un anticuerpo monoclonal anti-PSA-libre cubierto en la superficie del micro pozo de un anticuerpo etiquetado de conejo anti-PSA-libre con peroxidasa de rábano es usado en su trazado.Las moléculas de PSA-libre presente en una solución estándar o suero “ensandwichados” entre los 2 anticuerpos. Siguiendo la formación de la cobertura del complejo antígeno-anticuerpo, la no unión del anticuerpo-enzima son removidos con el lavado. La actividad de la peroxidasa de rábano unida a los pozos en el ensayo por una reacción colorimétrica. La intensidad de color formado es proporcional a la concentración PSA-libre en la muestra.Técnica:

Dispersar 25 ul de suero de referencia, controles en los pozos. Dispersar 100 ul de enzima PSA, mezclar el micro placa de 20-30 segundos y

cubrir. Incubar a temperatura ambiente (18-30°C) por 60 minutos. Decantar y lavar con buffer de lavado por 3 veces. Eliminar el exceso de agua sobre el papel absorbente. Dispersar sustrato A 50 ul y sustrato B 50 ul. Incubar a temperatura ambiente por 15 minutos en oscuridad Adicionar 50 ul de solución stop, mezclar


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Valores Normales:

Leer en absorbancia a 450

nm. Años

PSA libre(ng/ml) PSA complejo

40-49 0,5 1,0

0,7 0,7 1,5

60-69 1,0 2,0

70-79 1,2 3,0

PSA libre + PSA a -1-antiquimotripsina = PSA totalPSA libre/PSA total, > 0,15

PSA complejo/PSA total, < 0,70PSA libre/PSA complejo, > 0,25

No tiene relación con la edad del paciente (o sea, el límite superior normal para todas las razones es constante para los

hombres de todas las edades).

Significado Clínico:Los pacientes con cáncer de próstata tienen menor porcentaje de PSA libre, mientras que los que sufren una hiperplasia de próstata tienen una mayor proporción de PSA libre. Es importante tener en cuenta que la eyaculación incrementa momentáneamente el nivel tanto de PSA libre como total, retornando a valores basales dentro de 24 horas.

11.HIDATIDOSIS ELISA IgG


http://es.wikipedia.org/wiki/Eyaculaci%C3%B3n

http://es.wikipedia.org/wiki/Pr%C3%B3stata

http://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A1ncer_de_pr%C3%B3stata

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Fundamento:El material unido de forma no especifica será eliminado por medio del lavado. Durante la incubacion con el conjugado, losanticuerpos anti-IgG humana marcados con peroxidasa, se uniran al complejo formado. Finalmente en la etapa de incubacion con el sustrato cromogenico, la peroxidasa unida al complejo producira unacoloracion, que permitira detectar las muestras reactivas al E. granulosus. La reaccion enzimatica será detenida por la adicion de ácido sulfúrico, midiendose enseguida la intensidad de color con un lector colorimétrico para placas de ELISA.Técnica:

Ajustar la estufa a 37 +-1°C Sacar todos los reactivos una hora antes a temperatura ambiente sin abrir

las placas Agitar todos los componentes Preparar solución wash para 10 lavados de 5 veces cada lavado de 300 ul

para cada pocillo

POCILLOS SOL. WASH H2O VOL. FINAL

5 0.75 ml 14.25 ml 15 ml

6 0.9 ml 17.1 ml 18 ml

10 1.5 ml 28.5 ml 30 ml

Sacar el número de pocillos necesarios para el procedimiento

Añadir 100ul de diluyente de muestra a todos los pocillos Añadir 5 ul control +, 5ul control -, 5u suero cut off, 5ul de muestra en sus

representativos pocillos Homogenizar en un agitador de placas durante 2 minutos Incubar durante 45 minutos a 37 +-1°C (cubrir con lamina adhesiva) Aspirar el contenido y lavar 5 veces con 300ul de solución wash para cada

pocillo Añadir 100ul de conjugado IgG a todos los pocillos


CT +

CT -

S. Cut Off 1

S. Cut Off 2

Mix 1

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Incubar durante 39 minutos a 37 +-1°C (cubrir con lamina adhesiva) Aspirar el contenido y lavar 5 veces con 300ul de solución wash para cada

pocillo Añadir 100ul de solución de sustrato a todos los pocillos Incubar en oscuridad 20 minutos a temperatura ambiente Añadir 50ul de solución de parada a todos los pocillos Leer a 450/620 nm una hora antes de cavar el ensayo

Valores Normales:

CONTROL D.O.Control positivo >0.9Control negativo <0.5Control cut off >0.55 y <1.5

Índice de Ac = (D.O. de la muestra/ media de D.O. de los sueros cut off) * 10INDICE INTERPRETACION<9 Negativo9-11 Dudoso>11 Positivo



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12.HORMONA GONADOTROPINA CORIONICA CUANTITATIVO (hCG)Fundamento:Los reactivos esenciales sugeridos por un análisis inmunoenzimometrico incluyen alta afinidad y especificidad de anticuerpos, con diferentes y con reconocimiento distinto del epitome, en exceso, y antígeno nativo.En este procedimiento, la inmovilización toma lugar durante el análisis en la superficie del micro pozo a través de la interacción de streptavidin cubierto en el pozo y el exógeno agregado biotinilado monoclonal al anticuerpo de anti-hCG. Mezclando el anticuerpo monoclonal inmovilizado, conjugación del enzima-etiquetado y un suero que contiene el antígeno nativo, resultados de la reacción entre el antígeno nativo y los anticuerpos, sin competición u obstáculo esteárico, de formar un complejo soluble de sándwich se ilustra con una ecuación.Técnica:

Dispersar 25 ul de suero de referencia, controles en los pozos. Dispersar 100 ul de enzima hCG, mezclar el micro placa de 20-30 segundos

y cubrir. Incubar a temperatura ambiente (18-30°C) por 60 minutos. Decantar y lavar con buffer de lavado por 3 veces. Eliminar el exceso de agua sobre el papel absorbente. Dispersar sustrato A 50 ul y sustrato B 50 ul. Incubar a temperatura ambiente por 15 minutos en oscuridad Adicionar 50 ul de solución stop, mezclar. Leer en absorbancia a 450 nm con filtro diferencial de 630.

Valores Normales:

1° semana 10-30 mlU/mL2° semana 30-100 mlU/mL3° semana 100-1000 mlU/mL4° semana 1000-10000 mlU/mL2° & 3° mes 30000-100000 mlU/mL2° trimestre 10000-30000 mlU/mL3° trimestre 5000-15000 mlU/mL


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13.FRACCION BETA CUALITATIVO (beta acu-color)

Fundamento:Inmuno ensayo cromatográfico con partículas de oro coloidal, esta prueba es cualitativa y detecta rápidamente la hormona gonodotropina corionica humana presente en suero y orina.Técnica:

Dispersar 50 ul de suero de referencia, controles en los pozos. Dispersar 50 ul de conjugado Incubar a temperatura ambiente (18-30°C) por 3 minutos. lavado por 5 veces con agua destilada. Eliminar el exceso de agua sobre el papel absorbente. Dispersar sustrato A 50 ul y sustrato B 50 ul. Incubar a temperatura ambiente por 5 minutos. Resultado positivo azul negativo incoloro o transparente.

Significado Clínico:En embarazos normales, la HCG puede detectarse en suero y orina desde 7 días después de la concepción duplicando su concentración cada 1.3 a 2 días. Para el momento en que falta el primer periodo menstrual, la concentración de HCG es aproximadamente 100 mUI/ml observándose niveles pico de 200000 mUI/ml o más para el final del primer trimestre del embarazo.


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Número de Exámenes Inmunológicos Realizados en el Hospital Regional Durante el del 1 de abril al 15 de mayo del 2014

25

75

125

175

225

TOTAL: 746


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CONCLUSIÓN

El procesamiento de las pruebas inmunológicas como PCR, ASO, FR, T3, T4, etc. Se realizan para el diagnóstico de las diferentes patologías o el tratamiento del paciente.

La función principal del área de inmunología es brindar apoyo al médico de diversas enfermedades.


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LOGROS

Interpretación clínica de las pruebas. Determinación de pruebas hormonales. Procesamiento de la hidatidosis. Manejo de equipo de hormonas.


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RECOMENDACIONES

Evitar trabajar con muestras hemolizadas. Tener en cuenta que el FR puede salir positivo en enfermedades crónicas

como en una endocarditis bacteriana, TBC y en enfermedades virales como rubiola, VIH, etc.

Antes de procesar sacar los reactivos una hora antes de la refrigeradora. Verificar la fecha de vencimiento de los reactivos.


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BIBLIOGRAFÍA

http://es.scribd.com/doc/70598035/LABORATORIO-DE-INMUNOLOGIA

http://www.uco.es/grupos/inmunologia-molecular/inmunologia/tema01/etexto01.htm

http://www.slideshare.net/jujosansan/inmunologa-12922529

http://www.monobind.com/immunoassays-fertility-prenatal-prl-accubind-elisa

http://www.wiener-lab.com






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Informe de Inmunologia