Upload
others
View
9
Download
1
Embed Size (px)
Citation preview
Introduction à l’anatomie-pathologique
Pr Benoît Terris
Service de Pathologie, Hôpital Cochin, Paris
L’Anatomie-Pathologique – L’Anatomie et Cytologie Pahologiques- Pathologie – L’Anapath ! …
• Discipline médicale
• Interface de la clinique et de la biologie
• Les missions sont multiples:
• Diagnostic sur des prélèvements cellulaires ou tissulaires (microscopie, IHC, biologie moléculaire…)
• Éléments pronostiques
• Guider les choix thérapeutiques
• Actions de dépistage
• Mémoire de la pathologie
• Participer aux études épidémiologiques
• ….
CH Colmar et Argenteuil
Introduction à l’anatomie pathologique
• L’anatomie pathologique est l’étude des cellules et des tissus pathologiques (« anormaux »)
• Fait intervenir le raisonnement médical basé sur l’interprétation de paramètres cliniques, biologiques et d’imagerie
• Pour la pratiquer : connaître l’anatomie, l’histologie « normale » et la clinique
Introduction à l’anatomie pathologique
Tissu Epithélial
• Glandulaire :• Poumon
• Estomac, grêle, colon, foie, pancréas, sein, prostate, endocol utérin …
• Malpighien :• Peau, ORL, œsophage, anus, exocol
utérin …
• Para-malpighien• Vessie, uretères
Tissu non Epithélial
• Tissu conjonctif
• Tissu squelettique
• Tissu musculaire
• Populations cellulaires sanguines
• Tissu nerveux
Introduction à l’anatomie pathologique
• L’organisation et le type des cellules constituant le tissu permet de prédire la fonction et de reconnaitre les lésions.
• Morphologie d’une cellule indicatrice de sa fonction :• Persistance de cette fonction dans un processus tumoral permet de typer ce dernier
Introduction à l’anatomie pathologiquePorter un diagnostic
• Domaine d’application:• Cancérologie +++
• Rôle diagnostique et pronostique
• Distinction entre T bénigne et maligne
• Pathologie:• Inflammatoire
• Infectieuse
• Métabolique
• Malformative
• Des greffes
• Basé sur des prélèvements :
• Biopsies (endoscopie, stéréotaxique, sous écho ou TDM…)
• Pièces d’exérèse chirurgicale :• examen standard
• Extemporané
• Cytologie
• Autopsie (évaluation qualité des soins)
• CR = valeur médico-légale
Introduction à l’anatomie pathologiquePorter un diagnostic
Morphologie Examens « complémentaires »
Macroscopie
Microscopie optique : - Cytologie
- Histologie (technique standard)
Colorations spécialesImmunohistochimieHybridation in situ
Biologie moléculaire (mutation, amplification, translocation …)
Microscopie électronique
Introduction à l’anatomie pathologiqueExamen extemporané
• Examen anatomopathologique réalisé pendant une intervention et dont le but est d’adapter le geste opératoire au diagnostic
• Trois critères :• rapidité: < 30 min• fiabilité : modification du geste opératoire• sécurité : ne pas compromettre le diagnostic définitif
• Le prélèvement doit être adressé immédiatement, à l’état frais, sans fixateur ni sérum physiologique.
• examen extemporané est :• effectué sur un tissu frais durci par congélation (-20 °C)• coupé avec un microtome à congélation (microtome
dans une enceinte réfrigérée) et coloration rapide de la coupe.
• Indications : • établir un diagnostic modifiant le geste opératoire• déterminer si le prélèvement est suffisant pour faire un
diagnostic• confirmer la qualité des limites d’exérèse
• C’est une réponse provisoire• Réponse définitive apportée du fragment examiné en
extemporané après fixation et technique standard
Introduction à l’anatomie pathologiqueExamen histopathologique standard-1-
• Comporte différentes étapes :• Enregistrement du prélèvement
• Macroscopie :• Identifier et décrire les zones pathologiques
• Macroscopie à l’état frais :• Prélèvements microbiologiques
• Examen extemporané
• Prélèvements cryopréservés :
• Conservation acides nucléiques, protéines …
• Fixation des biopsies et pièces opératoires :• Plonger dans 15 fois son volume de fixateur (formol
tamponné à 10%, Toxicité du formol)
• (Ne pas mettre dans eau, alcool, serum phy …)
• Empêcher la putréfaction et la lyse cellulaire et tissulaire
• Entre 12 et 36H
• Fixation des sites antigéniques
• Macroscopie après fixation :• Effectuer prélèvements ciblés sur zones
pathologiques (tumeur, autres )
• Limites de résection
• Ganglion du curage
• Tissu sain adjacent
Introduction à l’anatomie pathologiqueExamen histopathologique standard -2-
• Comporte différentes étapes :• Inclusion en paraffine
• Coupe du bloc inclus en paraffine
• Coloration :
• coloration à l'hématoxyline et à l'éosine (souvent désignée coloration HE)
• technique standard de coloration d'usage en pathologie
• Hématoxyline = colorant cationique (ou basique), qui a une affinité pour les éléments cellulaires chargés négativement (= anioniques ou acides) dits basophiles. Il colore notamment les noyaux en bleu/violet, en se fixant sur les acides nucléiques
• Eosine = colorant anionique (ou acide) a une affinité pour les éléments cellulaires chargés positivement (= cationiques ou basiques) dits éosinophiles. Il colore le cytoplasme en rose
• Examen microscopique• Rédaction du compte-rendu
• Archivage des lames, des blocs d’inclusion et du double du compte-rendu
Introduction à l’anatomie pathologiqueCytologie
• Techniquement plus simple:• Fixation instantanée• Pas d’inclusion en paraffine, mais dépôt sur lame :
• rapidité (dg en un jour)• Coloration• Examen • Faible coût (dépistage)• Peu invasif
• Inconvénients :• Pas d’architecture tissulaire• Peu de techniques complémentaires possibles• Pas une preuve absolue en cancérologie
• Applications :• Dépistage (frottis du col utérin) :
• coloration de Papanicolaou• Liquides organiques : extension de cancers (ascite,
plèvre, urines …)• Ponction diagnostique à l’aiguille fine des tumeurs solides :
• Sein• Echoendoscopie (pancréas)
Introduction à l’anatomie pathologiqueImmunohistochimie (IHC)
• Technique qui permet de visualiser, in situ, une protéine, en se basant sur une réaction Ag-Ac dans le but d’aider à établir un diagnostic anatomo-pathologique
• Mises en évidence d’antigènes, sur des coupes tissulaires, à l’aide d’Ac spécifiques, révélés par une technique d’immunoperoxydase indirecte
• IHC permet :• Identifier et classer une tumeur en déterminant sa nature :
• Carcinome, lymphome, mélanome, tumeurs endocrines …
• Identifier des facteurs pronostiques
• Marqueurs de prolifération
• Identifier des marqueurs prédictifs :
• Réponse à un traitement
• Récepteurs hormonaux et HER2 dans le cancer du sein
• Thérapies ciblées (chimio dans cancer du poumon)
• Signes d’infection virale (CMV, HSV…)
Introduction à l’anatomie pathologiqueHybridation in situ
• Mise en évidence de séquences d’ARN ou d’ADN sur coupes tissulaires, grâce à des sondes d’acides nucléiques complémentaires couplées à une enzyme (sondes froides) ou à un fluorochrome (sondes fluorescentes) :
• Amplifications, délétions, translocations de gènes
Introduction à l’anatomie pathologiqueBiologie moléculaire appliquée aux tissus
• Nouveaux tests non morphologiques : caractérisés par la mise en évidence d’altérations somatiques (acquises) de l’ADN au niveau des cellules tumorales
• Majorité de ces nouveaux tests sont effectués à partir d’acides nucléiques extraits à partir de blocs fixés en formol et inclus en paraffine en utilisant des techniques de PCR permettant :
• Identifier et classer une tumeur en mettant en évidence une anomalie moléculaire caractéristique
• sarcomes, tumeurs pédiatriques
• Identifier des marqueurs de réponse à un traitement
• EGFR dans le cancer du poumon (inhibiteurs de EGFR)
• K-ras dans le cancer du côlon et du poumon (inhibiteurs de EGFR)
• b-raf dans le cancer du côlon et les mélanomes
• Développement de la médecine personnalisée : introduction des thérapies ciblées (cancérologie)
• Identification de marqueurs biologiques ayant une valeur nosologique, pronostique ou prédictive fait désormais partie intégrante de l’activité du pathologiste
Introduction à l’anatomie pathologiqueConclusion
• Interprétation des lésions élémentaires macroscopiques et microscopiques, en intégrant les données des examens cliniques et d’imagerie
• Dans la grande majorité, les analyses basées sur des techniques standards en histologie (coloration HE) ou cytologie (Papanicolaou, MGG…) suffisent
• Des techniques ou examens complémentaires sont parfois nécessaires (pathologie tumorale ou infectieuse) :• Immunohistochimie
• Etudes de biologie moléculaire :
• Diagnostic + pronostic + théranostic