LAPORAN KELOMPOK JOURNAL READING SISTEM NEUROPSIKIATRIMemory
Function and Total Pyramidal Neuron Number of Hippocampus in
Streptozotococin-induced Diabetic RatsSEMESTER 6
Tutor :dr. Yusri Hapsari, MKM, Sp.KJNama Anggota Kelompok
12:Ardy Oktaviandi2012730010Claudea Irene S2012730022Eza
Melinda2012730034 Ghaida Amani2012730055M. Imam
Mahdi2012730059Nublah Nur Amalina S2012730071Rifka
Raihana2012730084Sarah Khairina2012730096 Tommy
Prayoga2012730105Rahma Nadia Nursafira2011730084
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTERFAKULTAS KEDOKTERAN DAN
KESEHATANUNIVERSITAS MUHAMMADYAH JAKARTA2014
KATA PENGANTARAssalamualaikum, Wr. Wb.Puji syukur penulis
sampaikan kepada Allah SWT karena atas nikmat dan rahmat-Nya
penulis dapat menyelesaikan tugas laporan Journal Reading dengan
baik. Shalawat dan salam marilah senantiasa penulis sampaikan
kepada Nabi Muhammad SAW karena beliau telah membawa kita dari
zaman kebodohan hingga ke zaman yang penuh ilmu pengetahuan seperti
sekarang ini.Dalam tugas laporan Journal Reading kali ini penulis
membahas tentang Memory Function and Total Pyramidal Neuron Number
of Hippocampus in Streptozotococin-induced Diabetic Rats. Tugas ini
merupakan salah satu laporan pada Sistem Neuropsikiatri program
studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran dan Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Jakarta. Tugas laporan ini dibuat bukan
hanya untuk memenuhi syarat tugas saja melainkan untuk tambahan
bacaan teman-teman semuanya. Dalam proses pembuatan tugas laporan
ini tentunya penulis mendapat bimbingan, arahan, pengetahuan, dan
semangat, untuk itu penulis sampaikan terima kasih kepada: dr.
Yusri Hapsari, MKM, Sp.KJ selaku tutor Para dosen dan dokter yang
telah memberikan ilmu-ilmunya pada sistem Neuropsikiatri yang tidak
bisa disebutkan satu persatu Rekan-rekan mahasiswa yang telah
memberikan banyak masukan dalam pembuatan tugas laporan ini.Jurnal
ini dapat diakses di http://www.jns.dergisi.org/text.php3?id=792.
Penulis sadaribahwa laporanini masihjauh dari katasempurna. Kritik
dansaran yang membangun dari semua pihak sangat penulis harapkan
demi kesempurnaannya. Demikian yang dapat penulis sampaikan, In
Syaa Allah laporan ini dapat bermanfaat khususnya bagi penulis yang
sedang menempuh pendidikan dan dapat dijadikan pelajaran bagi
teman-teman semua.Waalaikumsalam Wr. Wb. Jakarta, 12 Maret 2015
Tim Penulis
Judul jurnal asli ini Memory Function and Total Pyramidal Neuron
Number of Hippocampus in Streptozotococin-induced Diabetic
Rats,yang ditulis oleh G. Niulefer YONGUC dari Departemen Anatomi,
Izmir University School of Medicine Izmir Turki, M. Bulent
OZDEMIR,Esat ADIGUZEL, Iigaz AKDOGAN dari Departemen Anatomi
Pamukkale University School of Medicine, Denizli, Turki, Vural
KKATAY dari Departemen Fisiologi Pamukkale University School of
Medicine, Denizli, Turki, Melike SAHINER dari Departemen Fisiologi
University School of Medicine, Istanbul, Turki, Raziye AKCILAR dari
Departemen Fisiologi Dumlupnar University School of Medicine,
Kutahya, Turki.Jurnal ini di terima pada tanggal 8 Mei
2014,kemudian di revisi pada 21 Juli 2014 dan disetujui untuk
diterbitkan pada 12 Agustus 2014.Jurnal ini kami peroleh di Journal
of Neurological Sciences [Turkish] 31:(3)#41;461-473,2014
http://www.jns.dergisi.org/text.php3?id=792Judul Jurnal yang telah
kami terjemahkan:Fungsi Memori dan Jumlah Total Neuron Piramidal
dari Hipocampus yang telah Diinduksi Streptozotocin pada Tikus
Diabetes Abstrak Studi mengenai defisit saraf dan gangguan kognitif
serta total jumlah neuron piramida hippocampus pada tikus diabetes
yang diinduksi dengan streptozotocin. Dibagi secara acak menjadi
tiga kelompok: Kontrol, Palsu dan diabetes. Diabetes diinduksikan
dengan injeksi intraperitoneal streptozotocin sebanyak 60 mg/kg dan
kadar glukosa darah pun diujikan pada semua tikus selama tiga dan
sepuluh hari setelah injeksi. Tikus-tikus dengan kadar glukosa
darah diatas 300 mg/dL dinyatakan diabetes.Studi ini menggunakan
dua metode yaitu metode Morris Water Maze yang diterapkan untuk
mengevaluasi gangguan kognitif dan metode Stereological yang
diterapkan untuk mengetahui total jumlah piramida neuron
hippocampus.Tikus diabetes yang diinduksi Streptozotocin memiliki
total jumlah neuron piramida secara signifikan lebih rendah dikedua
wilayah hippocampus yaitu CA1 dan CA3-2 dari pada control dan
kelompok palsu tikus normal. Selain itu, pembelajaran dangan
ganguan memori dalam tes Morris Water Maze didampingi dengan
berkurangnya jumlah neuron piramidal hippocampal pada tikus
diabetes.Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa tikus yang
mengalami diabetes mellitus dengan dipicu oleh induksi
streptozotocin mengalami penurunan jumlah neuron piramidal
hippocampus.PengantarHubungan antara DM dan gangguan kognitif
seperti yang kita ketahui dari study cross-sectional dan
longitudinal yang telah memberikan bukti pada populasi manusia.
Resiko Relatif (RR) penyakit Alzheimer, dimensia vaskuler dan
setiap dimensia pada penderita diabetes yang lebih tinggi
dibandingkan dengan pasien non diabetes. Beberapa factor berperan
terhadap gangguan kognitif disebabkan oleh DM, hipofungsi enzim
insulin, disfungsi mitokondrial dari neuron pyramidal hipocampal,
fasilitas induksi depresi jangka panjang di dalam hippocampus dan
defosit plastisitas sinaptik hippocampal. Selain itu, MRI yang
dilakukan pada pasien DM menunjukkan beberapa perubahan otak,
termasuk korteks dan sub-kortikal atrofi, serta lesi putih. Atrofi
kortikal dan lesi putih yang sangat mungkin menjadi hasil dari
kematian neuronal dan patologi vaskuler dipicu oleh DM. dalam hal
apapun telah dibuktikan dengan menggunakan hewan percobaan
DM.Streptozotocin (STZ) menyebabkan kerusakan sel B pankreas yang
menghasilkan hypo-insulinemia dan hiperglikemia. Intra
cerebroventrikular atau suntikan intrperitonial STZ menyebabkan
cedera neuronal dan gangguan kognitif pada tikus.Dalam penelitian
kami, kami secara bersamaan menunjukkan jumlah total neuron
pyramidal dari hippocampal dan tes Morris Water Maze pada tikus
yang diinduksi STZ . Data dari tes (MWM) dan investigasi serologic
menunjukkan bahwa STZ- induksi diabetes mengalami gangguan dalam
belajar di lokasi platform dan menunjukkan jumlah total neuron di
lapisan pyramida hippocampus.Bahan dan Metode BinatangTikus Wistar
berat 250-300gr yang ditempatkan 4-5 per kandang plastik (42 26 15
cm) dengan tempat tidur serbuk gergaji ,makanan dan air.Semua hewan
percobaan telah mendapat persetujuan kode etik dari Universitas
Pamukkale.
Design EksperimenTikus dibagi menjadi 3
kelompok,kontrol(n=6),palsu(n=6),diabetes(n=6).Kelompok diabetes
diinduksi dengan streptozotocin 60mg/kg yang dilarutkan 0,5ml garam
fisiologis dengan intra-peritoneal.Kelompok palsu diinjeksi dengan
garam fisiologis volume sama.Kelompok kontrol tidak diberikan
perlakuan.Kadar glukosa darah diukur pada semua tikus 3 dan 10 hari
setelah dilakukan perlakuan.Kadar glukosa diatas 300mg/dl
dinyatakan diabetes.Setelah dilakukan uji MWM,semua tikus
dikorbankan untuk prosedur stereologicUji Morris Water Maze Uji MWM
ini dilakukan pada semua jenis sample tikus setalah 43-49 hari
setelah diberi treatment. Metodenya yaitu dengan mengisi sebuah
tangki dengan air sampai ketinggian 45cm dan suhu air 22oC.
Kemudian tangki dibagi menjadi 4 bagian sesuai arah (utara, barat,
timur, selatan) dan diberi tanda pada luar tangki. Pada setiap
kuadran diletakan sebuah platform plastik transparan tepat
ditengah-tengah terendam 1,5 cm dari dasar hal ini dilakukan untuk
uji MWM.Tikus-tikus dibiarkan berenang selama 60 detik untuk
terbiasa pada air tangki pada hari pertama tanpa platform plastik
transparan untuk latihan dan percobaan 5 hari berikutnya. Setiap
tikus diberikan 4 percobaan berurutan per hari dengan jarak
percobaan 10 menit. Dan posisi setiap percobaan sistem variasi
dimulai pada hari ke-1 (utara, barat, timur, selatan) ; hari k-2 :
(barat, timur, selatan, utara), ; hari ke-3 (timur, selatan, utara,
barat) dll.Selama percobaan ini tikus dibiarkan berenang selama 15
detik maksimal 60 detik. Hal yang amati dari uji MWM ini adalah :
waktu berenang tikus sampai ke platform plastik transparan, jarak
renang tikus sampai ke platform plastik transparan, dan kecepatan
renang tikus samapi ke platform plastik transparan. Uji MWM ini
diamati dengan menggunakan kamera tracker dan dianalisi dengan
perangkat lunak Ethovision 3.1Percobaan ProbePlatform plastik
transparan diambil dari dalam tangki dan percobaan probe dilakukan
untuk menilai penurunan dari konsolidasi memori hal ini dipelajari
pada hari ke 6. Setiap sample diletakan pada posisi awal utara dan
percobaan berakhir setelah 60 detik. Saat waktu habis catat kuadran
target yang di rekam dan dianalisis.
Stereological Cell Counting (SCC)Setelah dilakukan test MWM pada
tikus percobaan tersebut, dilakukan percobaan yang kedua yaitu SCC
yang bertujuan untuk melihat ada atau tidak penurunan jumlah sel
neuron piramid hipocampus. Hewan percobaan yang telah diuji dengan
tes MWM selanjutnya akan diambil otaknya dengan cara craniotomy
lalu dibekukan di dalam ruangan cryostat. Setelah dibekukan otak
tersebut dipotong dengan potongan horizontal dengan ketebalan 150
m, lalu diberi pewarnaan Hematoxylin-Eosin.Potongan otak yang telah
diberi pewranaan Hematoxylin-Eosin selanutnya akan diamati dengan
microscope-camera-monitor complex (Olympus research microscope
CX31).Total jumlah sel neuron piramid hipocampus dapat diperkirakan
dengan rumus :TPNN = Q- x [1/ssf] x [1/asf] x [1/tsf]Setelah
dilakukan percobaan ini pada ketiga kelompok hewan percobaan
tersebut, didapatkan hasil bahwa terdapat penurunan jumlah sel
neuron piramid hipocampus pada kelompok tikus yang diabetes. Hasil
Berat Badan dan Tingkat GlukosaKelompok tikus diabetes
memperlihatkan gejala diabetes seperti poliuri dan polidipsi. Hal
tersebut dilihat berdasarkan frekuensi pembersihan kandang dan
jumlah botol air yang dikonsumsi per hari. Kadar glukosa darah pada
tikus diabetes pada hari ke 3 dan 10 setelah pemberian STZ berada
diatas 300 mg/dl. Tikus diabetes tidak bisa mendapatkan BB yang
ideal pada akhir percobaan, rata- rata BB tikus diabetes lebih
kurang dibanding tikus kelompok kontrol dan palsu. Data dari Tes
Morris Water MazePada grafik waktu memperlihatkan bahwa tikus
diabetes menghasilkan waktu lebih banyak dibanding tikus kelompok
lain selama 5 hari percobaan. Pada grafik jarak memperlihatkan
bahwa tikus diabetes lebih jauh berenang untuk menemukan platform
dibanding dengan kelompok tikus lain. Pada grafik kecepatan
terlihat tidak ada perbedaan yang signifikan pada ketiga kelompok
tikus tersebut. Pada percobaan satu hari tidak ada perbedaan yang
signifikan pada ketiga tikus. Jumlah Total Neuron Pyramidal pada
Region Ca1 dan Ca3-2 HipocampusJumlah total neuron pada kedua
region hippocampus mempunyai perbedaan yang signifikan dibandingkan
dengan grup yang lain. Uji pasca analisis menyatakan bahwa total
neuron pyramidal dikedua region hippocampus menurun pada kelompok
diabetes dibandingkan kelompok kontrol dan kelompok
palsu.DiskusiDalam penelitian ini, hasilnya menunjukkan bahwa STZ
yang diinduksi merusak hasil test MWM dan mengurangi jumlah total
neuron piramidal hipocampus pada tikus. Fungsi dari menggunakan
test MWM itu sendiri adalah untuk mengevaluasi perubahan jumlah
total neuron piramidal inhipocampus pada tikus. Menariknya dalam
eksperimental ini adalah STZ yang di induksi telah digunakan oleh
para ilmuan untuk memperlajari mekanisme, komplikasi, dan
patofisiologi dari diabetes militus sejak tahun 1960 karena
kemiripannya dengan diabetes pada manusia.Dosis tunggal STZ,
N-nitroso turunan dari glukosamin, memiliki efek kerusakan sel beta
pankreas pada hewan tersebut. Dan dalam penelitian ini juga
didapatkan tikus-tikus yang diinduksi oleh STZ memiliki kadar gula
darah yang tinggi dan berat badan yang lebih rendah bila
dibandingkan dengan tikus kontrol dan palsu. Uji MWM dilakukan
dengan menguji pelajaran berulang. Jika ada lesi pada daerah
hippocampus akan menyebabkan gangguan pembelajaran dan ingatan baik
di uji pada hewan maupun manusia. Teori ini juga sudah di ungkapkan
oleh Morris dan De Hoz. Sedangkan pada metode fractionator dan
stereological, menguji jumlah neuron pyramidal di hippocampus yang
penting untuk kecepatan dan kesuksesan uji MWM pada tikus.Data yang
di peroleh dari uji MWM menunjukan bahwa STZ di induksi tikus
diabetes memiliki kinerja lamban dari kelompok palsu dan control.
Hasil menunjukan bahwa diabetes memliki kelangsungan hidup saraf.
Penelitian ini mengungkapkan bahwa tikus diabetes yang di induksi
STZ memiliki jumlah neuron lebih rendah di daerah hipocampus
dibanding dengan kontrol. Hal ini di tafsirkan bahwa penurunan
hipocampal motor neuron dipacu oleh STZ terinduksi, menyebabkan
gangguan belajar dan fungsi memori.
