Embed Size (px)
Citation preview
ANALISA UJI SEROLOGI DIPSTIK BERDASARKAN LAMA DEMAM PADA PENDERITA
SUSPEK DEMAM TIFOID
JUSNI EKASARI PELU N121 09 502
PROGRAM KONSENTRASI TEKNOLOGI LABORATORIUM KESEHATAN
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR 2013
ANALISA UJI SEROLOGI DIPSTIK BERDASARKAN LAMA DEMAM PADA PENDERITA
SUSPEK DEMAM TIFOID
SKRIPSI
Untuk melengkapi tugas-tugas dan memenuhi syarat-syarat untuk mencapai gelar sarjana
JUSNI EKASARI PELU
N121 09 502
PROGRAM KONSENTRASI TEKNOLOGI LABORATORIUM KESEHATAN
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR 2013
PERSETUJUAN
ANALISA UJI SEROLOGI DIPSTIK BERDASARKAN LAMA DEMAM PADA PENDERITA
SUSPEK DEMAM TIFOID
Oleh
JUSNI EKASARI PELU
N121 09 502
Disetujui Oleh :
Pembimbing Utama,
Prof. Dr. H. M. Natsir Djide, MS., Apt. NIP. 19500817 197903 1 003
Pembimbing Pertama,
Prof. dr. Moch. Hatta,Sp,MK.,Ph.D. NIP. 19570416 198503 1 001
Pembimbing Kedua,
Dra. Christiana Lethe, M.Si., Apt NIP. 19481002 198203 2 001
Pada tanggal, 31 Juli 2013
PENGESAHAN
ANALISA UJI SEROLOGI DIPSTIK BERDASARKAN LAMA DEMAM PADA PENDERITA
SUSPEK DEMAM TIFOID
Oleh
JUSNI EKASARI PELU N12109502
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin
Pada Tanggal 31 Juli 2013
Panitia Penguji Skripsi :
1. Ketua : Usmar, S.Si., M.Si.,Apt …………..
2. Sekretaris : Yusnita Rifai,S.Si.,M.Pharm.,Ph.D.,Apt …………
3. Anggota : Sumarheni,S.Si.,MSc.,Apt …………..
4. Anggota (Ex.Off) : Prof. Dr. H. M. Natsir Djide, MS., Apt …………..
5. Anggota (Ex.Off) : Prof. dr. Moch. Hatta, Sp,MK.,Ph.D …………..
6. Anggota (Ex.Off) : Dra. Christiana Lethe,M.Si.,Apt …………..
Mengetahui : Dekan Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin
Prof. Dr. Elly Wahyudin, DEA., Apt NIP. 19560114 198601 2 001
PERNYATAAN
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini adalah karya
saya sendiri, tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk
memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang
pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah
ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu
dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Apabila di kemudian hari terbukti bahwa pernyataan saya ini tidak
benar, maka skripsi dan gelar yang diperoleh, batal demi hukum.
Makassar, 31 Juli 2013
Penyusun,
Jusni Ekasari Pelu
v
UCAPAN TERIMA KASIH
Alhamdulillah, teriring puji syukur atas ke hadirat Allah SWT, Tuhan
Semesta Alam, Sang Penguasa Alam dan Sumber Ilmu yang
memberikan limpahan rahmat dan petunjuk-Nya, sehingga penulis dapat
menyelesaikan skripsi ini.
Penulisan skripsi ini dimaksudkan untuk memenuhi salah satu
persyaratan dalam menyelesaikan pendidikan strata satu (S1) Teknologi
Laboratorium Kesehatan di Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin
Makassar.
Sungguh banyak kendala yang penulis hadapi dalam rangka
penyusunan skripsi ini, namun berkat dukungan dan bantuan berbagai
pihak, akhirnya penulis dapat melewati kendala-kendala tersebut Oleh
karena itu pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih yang
tak terhingga kepada: Prof. Dr. H. M. Natsir Djide, MS, Apt. Prof. dr. Moch.
Hatta, Sp.MK, Ph.D dan Dra. Christiana Lethe,M.Si.,Apt sebagai
pembimbing dan atas bimbingan serta arahannya dalam membantu
menyelesaikan penelitian dan penyusunan tugas akhir ini.
Terima kasih juga penulis haturkan kepada Dekan Fakultas
Farmasi, Ketua Program Konsentrasi Teknologi Laboratorium Kesehatan
(TLK), dosen-dosen Fakultas Farmasi beserta seluruh staf atas segala
fasilitas yang diberikan selama penulis menempuh studi hingga
menyelesaikan penelitian ini.
vi
Terima kasih pada Direktur RSUD, Syekh Yusuf Kab. Gowa dan
Kepala Instalasi Laboratorium RSUD. Syekh Yusuf Kab. Gowa beserta
seluruh staf dan analisnya, dan Kepala Laboratorium Imunologi dan
Biologi Molekular Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin beserta
seluruh staf yang telah banyak membantu selama penelitian berlangsung,
Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada semua teman
seperjuangan di Program Teknologi Laboratorium Kesehatan Fakultas
Farmasi Universitas Hasanuddin Makassar Farida, Sumardi, Bahtiar
Makmun, Tessa Grace Orno, Yanti Pesurnay, serta semua pihak yang
tidak bisa penulis sebutkan satu persatu yang telah memberikan bantuan
dan doa untuk keberhasilan penulis, semoga Allah SWT memberi imbalan
yang sesuai.
Kepada kedua orang tuaku ( Jusuf Pelu dan Djaniba Ollong) yang
telah membesarkanku, saudara-saudaraku (Rafsanjani Pelu dan Rafly
Pelu) dan kepada sahabat terbaikku Fitri llyas yang telah banyak
membantu baik moril maupun materil, penulis mengucapkan terima kasih
yang tulus dan setinggi-tingginya. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat
bagi kita semua dan kiranya Allah SWT senantiasa memberkati dan
melindungi setiap langkah dan pengabdian kita, Amin.
Makassar, 31 Juli 2013
Jusni Ekasari Pelu
vii
ABSTRAK
Telah dilakukan penelitian mengenai analisis uji serologi dipstick berdasarkan lama demam pada penderita suspek demam tifoid. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui bagaimana analisis uji serologi dipstick berdasarkan lama demam tifoid pada minggu I dan II. Jenis penelitian adalah cross sectional study. Subjek penelitian adalah penderita yang telah menjalani pemeriksaan fisik dan dinyatakan sebagai suspek demam tifoid. Penelitian ini menggunakan 30 sampel yang diuji dengan menggunakan metode uji serologi dipstick. Pada hasil Test Chi-Square diatas menunjukkan bahwa nilai Pearson Chi-Square 1,738 dengan nilai P 0,629 dimana lebih besar dari nilai α 0,05 sehingga dapat disimpulkan bahwa tidak ada hubungan yang bermakna antara lama demam dengan hasil pemeriksaan tifoid secara uji dipstick.
viii
ABSTRACT
The research has done on the analysis of serological tests based from the duration of fever in patients with suspected typhoid fever. This study aims to determine how the analysis is based on the old dipstick serologic test typhoid fever in the first and second week. This type of research is a crosssectional study. Subjects were patients who had under gone a physical examination and expressed as suspected typhoid fever. This study used 30 samples tested using serological dipstick test method. In the Chi-Square Test results indicate that the Pearson Chi-Square value of 1.738 with a P value of 0.629 which is greater than α value of 0.05 so that it can be concluded that there is no significant correlation between the duration of typhoid fever with the results of the dipstick test.
ix
DAFTAR ISI
HHaallaammaann PPEERRNNYYAATTAAAANN .............................................................................................................................................................. vv
UUCCAAPPAANN TTEERRIIMMAA KKAASSIIHH................…………………………………………………………................................ vvii
AABBSSTTRRAAKK ………………………………..........……………………………………………………………….................................. vviiiiii
AABBSSTTRRAACCTT............................................................................................................................................................................ iixx
DDAAFFTTAARR IISSII.......................................................................................................................................................................... xx
DDAAFFTTAARR TTAABBEELL............................................................................................................................................................ xxiiiiii
DDAAFFTTAARR GGAAMMBBAARR.................................................................................................................................................... xxiivv
DDAAFFTTAARR LLAAMMPPIIRRAANN ............................................................................................................................................ xxvv
DDAAFFTTAARR AARRTTII LLAAMMBBAANNGG DDAANN SSIINNGGKKAATTAANN ................................................................ xxvvii
BBAABB II PPEENNDDAAHHUULLUUAANN ………………………….................................................................................... 11
BBAABB IIII TTIINNJJAAUUAANN PPUUSSTTAAKKAA........……………………………………………………............................ 44
IIII..11 TTiinnjjaauuaann UUmmuumm DDeemmaamm TTiiffooiidd......................………………...................... 44
IIII..11..11 SSeejjaarraahh.................................................................................................................................... 44
IIII..11..22 PPaattooggeenneessiiss……………………... …………………. 4
IIII..11..33 EEppiiddeemmoollooggii...................................................................................................................... 6
IIII..11..44 GGeejjaallaa KKlliinniiss...................................................................................................................... 77
IIII..11..55 DDiiaaggnnoossiiss.................................................................................................................................. 88
IIII..22 TTiinnjjaauuaann UUmmuumm SSaallmmoonneellllaa ttyypphhii................................................................ 99
IIII..22..11 KKllaassiiffiikkaassii .................................................................................................................................. 99
IIII..22..22 SSiiffaatt--SSiiffaatt.................................................................................................................................... 1100
x
IIII..22..33 MMoorrffoollooggii SSaallmmoonneellllaa ttyypphhii ............................................................................ 1111
IIII..22..44 SSttrruukkttuurr AAnnttiiggeenn SSaallmmoonneellllaa TTyypphhii ...................................................... 1111
IIII..33 TTeess SSeerroollooggii.................................................................................................................................... 1144
IIII..44 DDeemmaamm TTiiffooiidd.............................................................................................................................. 1166
IIII..44..11 DDiiaaggnnoossiiss DDeemmaamm TTiiffooiidd .................................................................................... 1177
BBAABB IIIIII PPEELLAAKKSSAANNAAAANN PPEENNEELLIITTIIAANN ……....……………….............................................. 2200
IIIIII..11 JJeenniiss PPeenneelliittiiaann ………………………………………………………….................................. 2200
IIIIII..22 TTeemmppaatt ddaann WWaakkttuu PPeenneelliittiiaann ………………………………........................ 2200
IIIIII..33 PPooppuullaassii DDaann SSaammppeell PPeenneelliittiiaann……………………………………...... 2200
IIIIII..44 KKrriitteerriiaa SSaammppeell…………………………………………………………………………………… 2211
IIIIII..44..11 KKrriitteerriiaa IInnkklluussii ............ …………………………………….............................................. 2211
IIIIII..44..22 KKrriitteerriiaa EEkksslluussii................................................................................................................ 2211
IIIIII..55 IIzziinn SSuubbjjeekk PPeenneelliittiiaann........................................................................................................ 2211
IIIIII..66 DDeeffeenniissii OOppeerraassiioonnaall …………………………………………………………………….... 2211
IIIIII..77 AAllaatt DDaann BBaahhaann PPeenneelliittiiaann......…………………………………….......................... 2222
IIIIII..88 PPrroosseedduurr PPeenneelliittiiaann..............……………………………………………….......................... 2222
IIIIII..88..11 PPeennggaammbbiillaann DDaarraahh.................................................................................................. 2222
IIIIII..88..22 PPeerrllaakkuuaann TTeerrhhaaddaapp SSaammppeell...................................................................... 2233
IIIIII..99 PPeemmeerriikkssaaaann LLaabboorraattoorriiuumm.................................................................................. 2233
IIIIII..99..11 TTeess PPrriinnssiipp............................................................................................................................ 2233
IIIIII..99..22 CCaarraa KKeerrjjaa.............................................................................................................................. 2233
IIIIII..99..33 IInntteerrpprreettaassii HHaassiill.............................................................................................................. 2244
IIIIII..1100 AAnnaalliissiiss DDaattaa.......................................................................................................................... 2244
xi
BBAABB IIVV HHAASSIILL DDAANN PPEEMMBBAAHHAASSAANN ..........................……....………………...................... 2255
IIVV..11 HHaassiill PPeenneelliittiiaann............................................................................................................ 2255
IIVV..22 PPeemmbbaahhaassaann........................................................................................................................ 2288
BBAABB VV KKEESSIIMMPPUULLAANN DDAANN SSAARRAANN ……………….. …………………….................................. 3311
VV..11 KKeessiimmppuullaann ………………………………………………………………………………………….... 3311
VV..22 SSaarraann ………………………………………………………………………………………………………….. 3311
DDAAFFTTAARR PPUUSSTTAAKKAA .................................................................................................................................................. 3322
LLAAMMPPIIRRAANN .............................................................................................................................................................................. 3355
xii
DAFTAR TABEL
Tabel halaman
1. Distribusi Sampel Berdasarkan Jenis Kelamin ......................... 25
2. Distribusi Hasil Uji Berdasarkan Jenis Kelamin ........................ 25
3. Distribusi Sampel Berdasarkan Umur ....................................... 26
4. Distribusi sampel berdasarkan Lama ........................................ 26
5. Distribusi Hasil Uji Serologi (Dipstick) dengan Lama Demam ... 27
6. Hasil Test Chi-Square ............................................................... 27
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar halaman
1. Penularan Salmonella typhi pada manusia................................ 7
2. Struktur Bakteri ......................................................................... 11
3. Respon Antibodi terhadap infeksi S.typhi .................................. 16
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran halaman
1. Skema Kerja Penelitian……………………………………… 35
2. Skema Kerja Pemeriksaan Serologi Dri-dot……....……… 36
3. Hasil Pemeriksaan Uji Pemeriksaan Uji Dipstik…………… 37
4. Foto Hasil Pemeriksaan Dipstik …………………………….. 38
xv
1
DAFTAR LAMBANG DAN SINGKATAN
Lambang/singkatan Arti
Ab Antibodi
Ag Antigen
DNA Deoxribonuleic Acid
Dot EIA Dot Enzim Immunoassay
DT Demam Tifoid
EDTA Ethylene DiamineTetra Acetic Acid
ELISA Enzym Linked Immunosorbent Assay
HSP Heat Shock Protein
ICT Imunochromatografi
Ig Imunoglobulin
LPS Lipopolisakarida
mRNA Massenger Ribonucleic Acid
nPCR nested PCR
OMP Outer Membrane Protein
PCR Polimerase Chain Reaction
RNA Ribonucleic Acid
S. paratyphi Salmonella paratyphi
S. typhi Salmonella typhi
Typhoid F Typhoid Fever
xvi
1
BAB I
PENDAHULUAN
Demam Tifoid adalah Penyakit menular yang akut dan disebabkan
oleh bakteri Salmonella typhi, masa inkubasi pada umumnya 10 sampai
14 hari, gejala dini mencakup demam, perut gembung, sukar buang air
besar, pusing, lesu, tak bersemangat, tidak ada nafsu makan, mual dan
muntah. Diare biasanya terjadi selama infeksi minggu kedua dan mungkin
terdapat darah dalam tinja (1).
Diagnosis demam tifoid sukar ditegakkan hanya atas dasar
beberapa gejala klinis, sebab gambaran klinis penyakit ini sangat
bervariasi dan umumnya tidak khas untuk demam tifoid. Atas dasar ini,
peranan laboratorium dalam membantu menegakkan diagnosis demam
tifoid sangat penting (2).
Cara yang terbaik untuk memastikan adanya infeksi dengan
Salmonella typhi, yaitu bila bakteri dapat diisolasi dari spesimen klinis
yang berasal dari penderita yang dicurigai menderita demam tifoid, namun
hal ini tak selalu dapat dicapai karena banyaknya faktor kesalahan yang
dapat mempengaruhi isolasi bakteri tersebut. Oleh karena itu,
pemeriksaan serologi untuk demam tifoid memegang peranan penting (2).
Berbagai metode diagnostik baru untuk pengganti uji Widal dan
kultur darah sebagai metode konvensional masih kontroversial dan
memerlukan penelitian lebih lanjut. Beberapa metode diagnostik yang
cepat, mudah dilakukan dan terjangkau harganya untuk negara
2
berkembang dengan sensitivitas dan spesifisitas yang cukup baik, seperti
uji TUBEX, Typhidot-M dan dipstik telah dirintis penggunaannya di
Indonesia (3).
Uji serologis dengan pemeriksaan dipstik dikembangkan di Belanda
dimana dapat mendeteksi antibodi IgM spesifik terhadap antigen LPS S.
typhi dengan menggunakan membran nitroselulosa yang mengandung
antigen S. typhi sebagai pita pendeteksi dan antibodi IgM anti-human
immobilized sebagai reagen kontrol. Pemeriksaan ini menggunakan
komponen yang sudah distabilkan, tidak memerlukan alat yang spesifik
dan dapat digunakan di tempat yang tidak mempunyai fasilitas
laboratorium yang lengkap (3).
Penelitian oleh Gasem dkk (2002) mendapatkan sensitivitas uji ini
sebesar 69.8% bila dibandingkan dengan kultur sumsum tulang dan
86.5% bila dibandingkan dengan kultur darah dengan spesifisitas sebesar
88.9% dan nilai prediksi positif sebesar 94.6%. Penelitian lain oleh Ismail
dkk (2002) terhadap 30 penderita demam tifoid mendapatkan sensitivitas
uji ini sebesar 90% dan spesifisitas sebesar 96%. Penelitian oleh Hatta
dkk (2002) mendapatkan rerata sensitivitas sebesar 65.3% yang makin
meningkat pada pemeriksaan serial yang menunjukkan adanya
serokonversi pada penderita demam tifoid (4).
Uji dipstik terbukti mudah dilakukan, hasilnya cepat dan dapat
diandalkan dan mungkin lebih besar manfaatnya pada penderita yang
menunjukkan gambaran klinis tifoid dengan hasil kultur negatif atau di
3
tempat dimana penggunaan antibiotika tinggi dan tidak tersedia perangkat
pemeriksaan kultur secara luas (5).
Berdasarkan latar belakang tersebut, maka akan dilakukan
penelitian dengan rumusan masalah bagaimana hasil analisa uji serologi
dipstick pada penderita demam pada minggu I dan II.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui bagaimana analisa uji
serologi dipstick berdasarkan lama demam tifoid pada minggu I dan II.
Manfaat penelitian ini yaitu untuk menambah informasi ilmiah
tentang analisa uji serologi dipstick berdasarkan lama demam tifoid dan
dapat menjadi pegangan dokter yang menangani penderita demam tifoid
dalam memilih tes yang diperlukan sesuai kebutuhan.
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
II.1. Tinjauan Umum Demam Tifoid
II.1.1 Sejarah
Typhoid berasal dari bahasa Yunani yang berarti smoke, karena
terjadinya penguapan panas tubuh serta gangguan keadaan disebabkan
demam yang tinggi. Bretoneau (1813) melaporkan pertama kali tentang
gambaran klinis dan kelainan anatomis dari demam tifoid, sedangkan
Cornwalls Hewett (1826) melaporkan perubahan patologisnya Piere Louis
(1829) memberikan nama typhos yang berasal dari bahasa Yunani
dengan arti asap/kabut, karena umumnya penderita sering disertai
gangguan kesadaran dari yang ringan sampai berat. A. Pfeifer berhasil
pertama kali menemukan bakteri Salmonella dari feses penderita,
kemudian dalam urine oleh Hueppe dan dalam darah oleh R.d Neuhauss.
Pada waktu yang bersamaan Widal (1896) berhasil memperkenalkan
diagnosis serologis demam tifoid (5).
II.1.2 Patogenesis
Demam tifoid merupakan penyakit infeksi akut yang disebabkan
oleh Salmonella typhi. Penyakit demam tifoid ditularkan melalui makanan
atau minuman yang terkontaminasi oleh kuman Salmonella typhi, yang
dikenal sebagai penularan fecal-oral (6).
Bakteri Salmonella typhi masuk tubuh manusia melalui mulut
dengan makanan dan air yang tercemar kedalam saluran pencernaan
5
seorang penderita, maka bakteri tersebut akan berkembang biak dan bila
penderita tersebut tidak mempunyai kekebalan terhadap bakteri tersebut,
maka bakteri tersebut akan menempel pada dinding usus penderita dan
menembus epitel usus melalui sel epitel usus menuju ke lamina propia. Di
tempat ini Salmonella typhi akan difagotosis oleh sel fagosit, terutama
makrofag.
Di dalam makrofag, karena terlindungi oleh kapsul Vi, Salmonella
typhi dapat bertahan hidup, bahkan dapat berkembang biak. Selanjutnya
bakteri tersebut akan di bawa ke plek Peyeri, terutama yang berada di
ileum terminalis dan melalui saluran getah bening dibawah kelenjar limfe
mesentrium. Dalam tahap berikutnya Salmonella typhi akan masuk ke
aliran darah dan selanjutnya menyebar ke jaringan Retikuloendotelial di
seluruh tubuh terutama di hati dan limpa. Di dalam organ tersebut
Salmonella typhi keluar dari sel fagosit dan berkembang biak di luar sel
dalam jaringan organ dan menimbulkan keradangan. Proses ini akan
berlangsung selama 7-10 hari (2).
Endotoksin Salmonella typhi berperan pada patogenesis demam
tifoid karena membantu terjadinya proses inflamasi lokal pada jaringan
tempat Salmonella typhi berkembang biak. Tapi kemudian berdasarkan
penelitian eksperimental disimpulkan bahwa endotoksemia bukan
merupakan penyebab utama demam dan gejala-gelala toksemia pada
demam tifoid Demam pada tifoid disebabkan karena Salmonella typhi dan
6
endotoksinnya merangsang sintesis dan penglepasan zat pirogen oleh
leukosit pada jaringan yang meradang (8).
II.1.3 Epidemiologi
Demam tifoid endemik di Indonesia, penyakit ini termasuk penyakit
menular yang tercantum dalam Undang-undang Nomor 6 tahun 1962
tentang wabah. Walaupun demam tifoid tercantum dalam Undang-
Undang wabah dan wajib dilaporkan, namun data yang lengkap belum
ada, sehingga gambaran epidemiologisnya belum diketahui secara pasti.
Di Indonesia demam tifoid jarang dijumpai secara epidemik, tetapi lebih
sering bersifat sporadis terpencar-pencar di suatu daerah, dan jarang
menimbulkan lebih dari satu kasus pada orang-orang serumah.
Sumber penularan biasanya tidak dapat ditemukan. Ada dua
sumber penularan S. typhi : pasien dengan demam tifoid dan yang lebih
sering adalah carrier. Orang-orang tersebut mengekskresi 109 sampai 1011
kuman per gram tinja. Di daerah endemik transmisi terjadi melalui air yang
tercemar. Makanan yang tercemar oleh tinja carrier merupakan sumber
penularan yang paling sering di daerah nonendemik. Carrier adalah orang
yang sembuh dari demam tifoid dan masih terus mengekskresi Salmonella
typhi dalam tinja dan air kemih selama lebih dari satu tahun. Disfungsi
kandung empedu merupakan predisposisi untuk terjadinya carrier. Kuman-
kuman Salmonella typhi berada di dalam batu empedu atau dalam dinding
kandung empedu yang mengandung jaringan ikat, akibat radang
menahun (9,10,11).
7
Gambar 1. Penularan Salmonella typhi pada manusia (34)
II.1.4 Gejala Klinis
Masa inkubasi demam tifoid berkisar antara 7-14 hari dan gejalanya
muncul bertahap. Paling sering berupa gejala demam yang tidak spesifik,
seperti sakit kepala, lesu, nyeri otot atau nafsu makan menurun. Awalnya
demam cenderung mereda, tetapi secara bertahap meningkat setelah
minggu pertama sampai mencapai suhu lebih dari 40oC. Gejala lain yang
timbul meliputi mual, muntah, menggigil, batuk, lemah dan radang
tenggorokan (12).
Manifestasi klinis demam tifoid pada anak seringkali tidak khas dan
sangat bervariasi yang sesuai dengan patogenesis demam tifoid.
Spektrum klinis demam tifoid tidak khas dan sangat lebar, dari
asimtomatik atau yang ringan berupa panas disertai diare yang mudah
disembuhkan sampai dengan bentuk klinis yang berat baik berupa gejala
sistemik panas tinggi, gejala septik yang lain, ensefalopati atau timbul
komplikasi gastrointestinal berupa perforasi usus atau perdarahan. Hal ini
8
mempersulit penegakan diagnosis berdasarkan gambaran klinisnya
saja (13).
II.1.5 Diagnosis
Salmonella typhi dapat diisolasi dari darah pada kurang lebih 90%
penderita selama 2 minggu pertama penyakit tersebut dan dari sekitar
50% pada akhir minggu ke 3. Bakteri tersebut dapat di isolasi dari tinja
pada setiap manapun penyakit ini, tetapi masa sakit dari minggu ke 3
sampai ke 5 memberikan hasil terbaik untuk diagnosis mikrobiologis,
walaupun di sertai dengan pengobatan. 2 atau 3 bulan setelah jatuh sakit
sebanyak 5 sampai 10% penderita masih terus mengeksresikan basilus
salmonella typhi. Mereka yang masih mengeksresikan basilus tersebut
setelah itu dianggap sebagai penular kronis demam tifoid.(1)
Pemeriksaan laboratorium untuk membantu menegakkan diagnosis
demam tifoid dibagi dalam empat kelompok, yaitu : pemeriksaan darah
tepi, pemeriksaan bakteriologis dengan isolasi dan biakan kuman, uji
serologis, dan pemeriksaan kuman secara molekuler (14).
Diagnosis pasti demam tifoid dapat ditegakkan bila ditemukan
bakteri Salmonella typhi dalam biakan dari darah, urine, feses, sumsum
tulang atau cairan duodenum. Berkaitan dengan patogenesis penyakit,
maka bakteri akan lebih mudah ditemukan dalam darah dan sumsum
tulang pada awal penyakit, sedangkan pada stadium berikutnya di dalam
urine dan feses. Hasil biakan yang positif memastikan demam tifoid akan
tetapi hasil negatif tidak menyingkirkan demam tifoid, karena hasilnya
9
tergantung pada beberapa faktor. Faktor-faktor yang mempengaruhi hasil
biakan meliputi jumlah darah yang diambil, perbandingan volume darah
dari media empedu, dan waktu pengambilan darah (13,14).
II.2. Tinjauan Umum Salmonella typhi
II.2.1 Klasifikasi
Skema klasifikasi di dasarkan pada reaksi biokimia atau serologis.
Teknologi molekuler memungkinkan klasifikasi pada tingkat gen hibridisasi
DNA yang telah membuktikan bahwa bakteri Salmonella sangat terkait
secara genetik sebagai satu spesies dengan 6 subkelompok, kebanyakan
isolate yang menyebabkan penyakit pada manusia atau binatang
termasuk subkelompok I. Klasifikasi Salmonella terdiri dari (16) :
Kingdom : Procaryotae
Filum : Proteobacteria
Classis : Gammaproteobacteria
Ordo : Enterobacteriales
Familia : Enterobacteriaceae
Genus : Salmonella
Spesies : Salmonella typhi
10
II.2.2 Sifat-Sifat
Group Salmonella adalah bakteri-bakteri yang habitatnya (tempat
hidupnya) terutama di dalam usus manusia atau binatang. Terdapat juga
dalam lumpur/air selokan dan air sungai. Oleh karena itu basil-basil
Salmonella dapat diasingkan dari berbagai sumber spesimen (manusia
dan non-manusia) (15).
Kebanyakan strain Salmonella memfermentasi glukosa, manosa,
dan manitol untuk menghasilkan asam dan gas, tidak pada laktosa atau
sukrosa. Salmonella typhi tidak menghasilkan gas. Organisme Salmonella
tumbuh secara aerobik dan mampu tumbuh secara anaerobik fakultatif,
dan resisten terhadap banyak agen fisik tetapi dapat mati dengan
pemanasan sampai 1300F (540C) selama 1 jam atau 1400F (600C) selama
15 menit. Pertumbuhannya sangat baik pada medium di bawah kondisi
aerob dengan kisaran temperatur 100C-410C (optimal 370C) dan pHnya
berkisar 6 – 8. Salmonella tetap dapat hidup pada suhu sekeliling atau
suhu yang rendah selama beberapa hari dan dapat bertahan hidup
selama berminggu-minggu dalam sampah, bahan makanan kering dan
bahan kotoran. Dalam air bisa bertahan selama 4 minggu. Salmonella
typhi memiliki kerentanan terhadap sebagian besar bahan-bahan fisika
dan kimia, terutama oleh klorin serta beberapa penggunaan desinfektan,
tetapi sebagian Salmonella resisten terhadap zat-zat kimia tertentu,
misalnya brillian green dan sodium tetrathionat (16).
11
II.2.3 Morfologi Salmonell typhi
Salmonella adalah genus yang termasuk famili Enterobacteriacea
yang terdiri dari tiga spesies utama yaitu Salmonella typhi, Salmonella
choleraesuis, dan Salmonella enteritidis. Dua spesies masing-masing
mempunyai satu serotip, tetapi Salmonella enteritidis berisi lebih dari 1800
serotip yang berbeda. S.typhi berbentuk batang, tidak berspora, bersifat
gram negatif dengan ukuran 1-3,5 X 0,5-0,8 mikron. Mempunyai flagella
peritrikh (16)
Gambar 2. Struktur bakteri (Sumber: Bacteria. http ://www.biologycorner.com /AP-biology/pathology/bacteria.html/
II.2.4 Struktur Antigen Salmonella typhi
Salmonella merupakan bakteri berbentuk batang gram negatif
yang umumnya bergerak dengan flagellin dan bersifat aerobik. Salmonella
memiliki sedikitnya 5 macam antigen.
1. Antigen O (Antigen somatik), yang terletak pada lapisan luar dari
tubuh bakteri . Bagian ini mempunyai struktur kimia lipopolisakarida
atau disebut juga endotoksin. Antigen ini tahan terhadap panas dan
12
alkohol tetapi tidak tahan terhadap formaldehid. Lipopolisakarida dari
antigen O terdiri dari 3 regio sebagai berikut :
a. Regio I, mengandung antigen O spesifik atau antigen dinding sel
dan merupakan polimer dari unit oligosakarida yang berulang-ulang.
Antigen O ini berguna untuk pengelompokan serologis.
b. Regio II, terikat pada antigen O dan terdiri dari core polysaccharide
serta merupakan sifat yang konstan dalam suatu genus
Enterobacteriaceae tetapi berbeda antara genera.
c. Regio III, mengandung lipid A yang terikat pada core polysaccharide
yang merupakan bagian yang toksik dari molekul. Lipid A ini
menempelkan lipopolisakarida pada membran permukaan sel (outer
membrane).
2. Antigen H (Antigen Flagela), yang terletak pada flagela, fimbriae atau
pili dari bakteri. Antigen ini mempunyai struktur kimia suatu protein dan
tahan terhadap formaldehid tetapi tidak tahan terhadap panas dan
alkohol.
3. Antigen Vi, yang terletak pada kapsel (envelope) dari bakteri yang
dapat melindungi bakteri terhadap fagositosis. Ketiga macam antigen
tersebut di atas, di dalam tubuh penderita akan menimbulkan pula
pembentukan 3 macam antibodi yang lazim disebut aglutinin.
4. Outer Membrane Protein (OMP)
Antigen OMP S. typhi merupakan bagian dinding sel yang terletak di
luar membran sitoplasma dan lapisan peptidoglikan yang membatasi
13
sel terhadap lingkungan sekitarnya. OMP berfungsi sebagai barier fisik
yang mengendalikan masuknya zat dan cairan ke dalam membran
sitoplasma. Di samping itu OMP berfungsi sebagai reseptor untuk
bakteriofag dan bakteriosin.
OMP dibagi menjadi 2 bagian ;
a. Porin rnerupakan komponen utama dari OMP terdiri dari protein
Omp C, Omp D, dan Omp E. Porin merupakan saluran hidrofilik
yang berfungsi untuk difusi solut dengan berat molekul lebih kecil
dari 6000. Porin mempunyai sifat resisten terhadap proteolisis dan
denaturasi pada suhu di bawah 85-100ºC .
b. Protein non porin terdiri dari protein Omp A, protein A, dan
lipoprotein, mempunyai sifat sensitif terhadap protease. Fungsi dari
protein nonporin masih belum diketahui dengan jelas.
5. Heat Shock Protein (HSP)
Heat Shock protein atau stress protein adalah protein yang
diproduksi oleh jasad renik dalam lingkungan yang terus berubah,
terutama yang menimbulkan stress pada jasad renik tersebut dalam
usahanya untuk dapat mempertahankan hidupnya. Di samping potensi
biologisnya, HSP mempunyai data imunogenik yang cukup besar
sehingga dapat membangkitkan respons imun, baik seluler maupun
humoral, baik protektif maupun nonprotektif. Atas dasar ini, maka HSP
dapat dipakai baik untuk keperluan diagnostik (sebagai antigen dari
imunoassay) maupun untuk keperluan preventif (untuk vaksin)(4).
14
II.3 Tes Serologi
Tes serologi untuk menunjang diagnosis demam tifoid meliputi dua
kelompok, yaitu pelacakan terhadap antibodi (Ig) spesifik dan antigen
(Ag) spesifik terhadap Salmonella typhi di dalam darah atau cairan
tubuh (19).
Tes Widal yang telah digunakan sejak tahun 1896, sampai saat ini
masih merupakan tes serologi yang paling banyak digunakan di klinik,
meskipun banyak kelemahannya. Dasar tes ini adalah reaksi aglutinasi
antara Ag Salmonella typhi dengan Ig yang terdapat pada serum
penderita. Ada dua cara tes Widal, yaitu cara tabung dan cara slide.
Sekarang lebih banyak digunakan tes Widal cara slide. Interpretasi tes
Widal untuk menunjang diagnosis harus dilakukan dengan cermat
karena banyak faktor yang dapat mempengaruhinya, antara lain faktor
penderita meliputi: stadium penyakit, terapi antimikroba, teknik
laboratorium, riwayat imunisasi, keadaan umum, penyakit tertentu yang
menghambat pembentukan Ig, imunosupresif dan kortikosteroid, infeksi
subklinis, sedangkan faktor teknis meliputi reaksi silang, konsentrasi
suspensi Ag dan strain Salmonella yang dipakai untuk suspensi Ag.
Berdasarkan kemungkinan-kemungkinan tersebut di atas maka
walaupun secara bakteriologik dinyatakan positif Salmonella typhi, tes
Widal dapat memberikan hasil negatif, sehingga tes Widal negatif belum
dapat menyingkirkan diagnosis demam tifoid. Berdasarkan penelitian
Dasril Daud tahun 1995 yang dilakukan di Ujung Pandang nilai
15
diagnostik titer O adalah > 1/ 320 untuk cara tabung dan > 1/160 untuk
cara slide (20).
Tes serologi lain untuk mendeteksi adanya antibodi terhadap
antigen Salmonella typhi adalah Enzym Linked immunosorbent Assay
(ELISA). Tes ELISA dapat digunakan untuk memeriksa adanya lgM dan
IgG anti Salmonella typhi lipopolysaccharide antibody, kadar keduanya
meninggi pada penderita demam tifoid. Antibodi yang dilacak dengan uji
ELISA ini tergantung dari jenis antigen yang dipakai. Untuk
meningkatkan kepraktisan uji ELISA, digunakan teknik Dot-EIA yang
memanfaatkan kertas nitroselulose sebagai fase padat yang memiliki
kapasitas yang tinggi terhadap protein yang dilapiskan, sekali antigen
atau antibodi dilekatkan pada kertas nitroselulose dan diblokade dengan
blocking buffer, ikatan tersebut dapat disimpan dalam keadaan stabil
selama beberapa bulan pada 40C atau selama beberapa tahun pada -
700C (21).
Tes serologi yang banyak dikembangkan adalah tes Typhoid
Dipstick, tes ini 85,7 % sensitif pada penderita demam tifoid dengan
demam > 6 hari dan dengan tes ini antibodi (IgM) sudah dapat terdeteksi
baik untuk infeksi primer maupun infeksi sekunder, sehingga dapat
digunakan untuk deteksi dini. Tes Typhoid Dipstick ini sangat mudah
dilakukan, tidak memerlukan alat, dan penyimpanan yang khusus (7).
16
The image part w ith relationship ID rId10 was not found in the file.
Gambar 3. Respon antibodi terhadap infeksi S.typhi (26)
Untuk melakukan uji laboratorium diagnostic kultur pada Salmonella
typhi langkah-langkah yang dilakukan pertama yaitu pengambilan
spesimen dapat berupa darah, aspirat sum-sum tulang, spesimen tinja,
atau urin. Tahapan selanjutnya adalah penumbuhan Salmonella dari
spesimen-spesimen dari pasien dalam medium pengaya untuk
meningkatkan jumlah Salmonella dan menghambat pertumbuhan jenis
entrobactetriaceae selain Salmonella. Setelah itu, kultur ditumbuhkan
pada medium differensial dan selektif untuk pengisolasian Salmonella.
Selanjutnya, koloni-koloni hasil pertumbuhan pada medium dapat
diidentifikasi melalui tes biokomia dan aglutinasi (22).
II.4 Demam Tifoid
Surveilanse Departemen Kesehatan RI, frekuensi kejadian demam
tifoid di Indonesia pada tahun 1990 sebesar 9,2 dan pada tahun 1994
terjadi peningkatan frekuensi menjadi 15,4 per 10.000 penduduk. Dari
survey berbagai rumah sakit di Indonesia dari tahun 1981 sampai dengan
1986 memperlihatkan peningkatan jumlah penderita sekitar 35,8%.
Insiden demam tifoid bervariasi di tiap daerah.(1).
17
Studi terakhir dari Asia tenggara mendapatkan bahwa insiden
tetinggi terjadi pada anak dibawah usia 2-5 tahun. Kasus yang berujung
pada kematian tidak lebih dari 1%, meskipun demikian, angka ini
bervariasi di seluruh dunia. Di Pakistan dan Vietnam, dari pasien yang
dirawat di rumah sakit, angkanya kurang dari 2%, sementara di beberapa
area di Papua nugini dan Indonesia, angkanya mencapai 30-50%. Hal ini
sebagian besar disebabkan karena tertundanya pemberian antibiotika
yang tepat.(6)
II.4.1 Diagnosis Demam Tifoid
Tidak adanya gejala-gejala atau tanda yang spesifik untuk demam
tifoid, membuat diagnosis klinik demam tifoid menjadi cukup sulit. Di
daerah endemis, demam lebih dari 1 minggu yang tidak diketahui
penyebabnya harus dipertimbangkan sebagai demam tifoid sampai
terbukti penyebabnya. Diagnosis pasti demam tifoid adalah dengan isolasi
atau kultur S.typhi dari darah, sum-sum tulang, atau lesi anatomis yang
spesifik. Adanya gejala klinis yang karakteristik demam tifoid atau deteksi
respon antibody yang spesifik hanya menunjukkan dugaan demam tifoid
tetapi tidak definitif atau pasti.
Beberapa pemeriksaan yang dapat dilakukan untuk diagnosis
demam tifoid yaitu :
1. Metode Kultur Mikrobiologi
Metode ini dapat mendeteksi Salmonella typhi melalui kultur bakteri
dari spesimen darah, tinja, urin, sumsum tulang atau lesi anatomis
18
tertentu. Kultur darah ini merupakan metode utama untuk diagnosis
demam tifoid (26).
2. Metode Serologis
Metode serologis digunakan untuk mengetahui secara kualitatif
maupun kuantitatif respon tubuh terhadap agen infektif atau dapat pula
digunakan untuk membedakan bakteri yang memiliki hubungan
kekerabatan yang erat. Metode serologis memerlukan waktu yang lebih
singkat dibandingkan dengan kultur mikrobiologis. Metode serologis untuk
diagnosis demam tifoid antara lain adalah tes ELISA, dipstick, tes Widal,
tes Tubex®, tes typhidot, dan tes aglutinasi latex. Demam tifoid
menginduksi respon imun humoral baik sistemik maupun lokal tetapi
respon imun ini tidak dapat memproteksi dengan lengkap terhadap
kekambuhan dan reinfeksi (6,17,27).
3. Teknik Molekuler
Seperti halnya kultur darah, target dari teknik-teknik molekuler
adalah patogen itu sendiri sehingga bermanfaat untuk deteksi awal
penyakit. Teknik hibridisasi menggunakan probe DNA adalah teknik
biologi molekuler pertama yang digunakan untuk diagnosis demam tifoid.
Teknik ini memiliki spesifisitas yang tinggi namun kurang sensitif. Teknik
ini tidak dapat mendeteksi S.typhi bila jumlah bakteri kurang dari
500 bakteri/ml. kemudian berkembang teknik Polymerase Chain Reaction
(PCR) dengan spesifisitas dan sensitivitas yang lebih baik
(1-5 bakteri/ml). PCR untuk identifikasi S.typhi ini tersedia dibeberapa
