Komponovka 4 2004sphu.org/wp-content/uploads/2017/08/farmacom_4_2004.pdf1 ÔÀ—ÌÀ˚˛Ì 4-2004 ˙ì‡æò ˜î âŁäàííÿ ˜îïîâíåííÿ 2 äî ˜åðæàâíî¿ ÔàðìàŒîïå¿

1

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-2004

Зміст

До видання Доповнення 2 до Державної Фармакопеї України

Гризодуб О.І., Георгієвський Г.В., Тихоненко Т.М., Георгієвський В.П.Проблеми введення монографій на лікарську рослинну сировинуу Державну Фармакопею України ...................................................................................................................... 3

Товмасян Є.К., Котов А.Г., Гризодуб О.І., Георгієвський В.П.До питання про введення у Державну Фармакопею Українизагальних статей на лікарську рослинну сировину та препарати ................................................................. 17

Котов А.Г., Котова Е.Е., Тихоненко Т.М., Товмасян Е.К.,Хованська Н.П., Воловик В.Г., Георгієвський В.П.Питання введення у Державну Фармакопею України монографії «Плоди глоду» ................................... 27

Котова Е.Е., Котов А.Г., Хованська Н.П.Стандартизація плодів глоду та лікарських препаратів на їх основіза показником «Кількісне визначення» ............................................................................................................. 35

Фітохімічні дослідження

Литвиненко В.І., Бубєнчікова В.М., Дроздова І.Л.Вивчення складу флавоноїдів і полісахаридів трави Malva pusilla Smith. .................................................... 43

Янченко П.С., Ковальова А.М., Георгієвський Г.В., Комісаренко А.М.Виділення та вивчення флавоноїдів деяких рослин родин Бобовіта Селерові та їх ліпазотропна активність ......................................................................................................... 46

Кошовий О. М., Комісаренко А. М.Амінокислотний та мінеральний склад екстрактів із листя евкаліпту ......................................................... 57

Демешко О.В., Ковальов С.В., Комісаренко С.М.Вивчення амінокислотного складу листя Robinia pseudoacacia L. ................................................................ 61

Аналіз

Левітін Є.Я., Кунцевіч С.П., Александров О.В.,Онопрієнко Т.О., Цихановська І.В., Ведернікова І.О.Фiзико-хiмiчнi дослiдження часток магнетиту — компонента магнiтних лiкарських форм .................. 64

Синтез та вивчення фармакологічної дії

Сидорова І.В., Нестерова Н.О., Белєнічев І.Ф., Коваленко С.І.Вплив похідних 4-гідразинохіназоліну на окисну модифікацію білкав умовах ініціювання вільнорадикального окиснення in vitro ......................................................................... 68

Фармакологічні дослідження

Дикий І.Л., Манський О.А., Філімонова Н.І., Домарьов А.П.Потенціюючий вплив радіаційоного опромінювання на бактерицидну активність антибіотиків ......... 74

Яковлєва Л.В., Ель Ділаті Камаль ТуфікВивчення ефективності гелю анальбену в умовахекспериментального ад’ювантного артриту у щурів ....................................................................................... 77

Герасимова О.О., Яковлєва Л.В., Шаповал О.М.Порівняльний аналіз антиексудативної дії нового препарату анальбенута нестероїдних протизапальних засобів різних поколінь ............................................................................. 81

Міжнародні конференції, семінари, виставки

Успіхи хімії природних фенольних сполук ....................................................................................................... 85

Історія вітчизняної фармації

До 100-річчя від дня народження Колєснікова Дмитра Григоровича........................................................... 95

• Заст. головного редактора Спиридонов В.М. (д.фарм.н, професор)• Рецензенти: к.фарм.н. Деркач А.І., д.фарм.н., професор Діхтярьов С.І., Жемерова К.І.,

к.фарм.н. Котов А.Г., д.х.н., професор Литвиненко В.І., д.б.н., професор Маслова Н.Ф.,к.х.н. Рибаченко А.І., к.мед.н. Чайка Л.О.

• Випуск підготували: Саматов Р.С., Тихоненко Т.М., Тихоненко Н.І.• Рекомендований до друку Вченою радою ДП «Державний науковий центр лікарських засобів»,

протокол № 9 від 20.12.2004 р.• Підписаний до друку 23.12.2004 р. Тираж 500 прим.

2

4-2004 ÔÀÐÌÀÊÎÌ

Содержание

К изданию Дополнения 2 к Государственной Фармакопее Украины

Гризодуб А.И., Георгиевский Г.В., Тихоненко Т.М., Георгиевский В.П.Проблемы введения монографий на лекарственное растительное сырьев Государственную Фармакопею Украины ....................................................................................................... 3

Товмасян Е.К., Котов А.Г., Гризодуб А.И., Георгиевский В.П.К вопросу о введении в Государственную Фармакопею Украиныобщих статей на лекарственное растительное сырье и средства ................................................................. 17

Котов А.Г., Котова Э.Э., Тихоненко Т.М., Товмасян Э.К.,Хованская Н.П., Воловик В.Г., Георгиевский В.П.Вопросы введения в Государственную Фармакопею Украинымонографии «Плоды боярышника» .................................................................................................................... 27

Котова Э.Э., Котов А.Г., Хованская Н.П.Стандартизация плодов боярышника и лекарственных препаратовна их основе по показателю «Количественное определение» ...................................................................... 35

Фитохимические исследования

Литвиненко В.И., Бубенчикова В.Н., Дроздова И.Л.Изучение состава флавоноидов и полисахаридовтравы мальвы низкой (Malva pusilla Smith.) ...................................................................................................... 42

Янченко П.С., Ковалёва А.М., Георгиевский Г.В., Комиссаренко А.Н.Выделение и изучение флавоноидов некоторых растенийсемейств Бобовые и Сельдерейные и их липазотропная активность .......................................................... 46

Кошевой О. Н., Комиссаренко А. Н.Аминокислотный и минеральный состав экстрактов из листьев эвкалипта .............................................. 57

Демешко О.В., Ковалев С.В., Комиссаренко С.Н.Изучение аминокислотного состава листьев Robinia pseudoacacia L. ......................................................... 61

Анализ

Левитин Е.Я., Кунцевич С.П., Александров А.В.,Оноприенко Т.А., Цихановская И.В., Ведерникова И.А.Физико-химические исследования частиц магнетита — компонентамагнитных лекарственных форм ........................................................................................................................ 64

Синтез и изучение фармакологического действия

Сидорова И.В., Нестерова Н.А., Беленичев И.Ф., Коваленко С.И.Влияние производных 4-гидразинохиназолина на окислительную модификациюбелка в условиях инициирования свободнорадикального окисления in vitro ............................................. 68

Фармакологические исследования

Дикий И.Л., Манский А.А., Филимонова Н.И., Домарев А.П.Потенцирующее влияние радиационного облученияна бактерицидную активность антибиотиков .................................................................................................. 74

Яковлева Л.В., Эль Дилати Камаль ТуфикИзучение эффективности геля анальбенапри экспериментальном адъювантном артрите у крыс .................................................................................. 77

Герасимова О.А., Яковлева Л.В., Шаповал О.Н.Сравнительный анализ антиэкссудативного действия нового препаратаанальбена и нестероидных противовоспалительных средств различных поколений .............................. 81

Международные конгрессы, семинары, выставки

Успехи химии природных фенольных соединений ......................................................................................... 85

История отечественной фармации

К 100-летию со дня рождения Колесникова Дмитрия Григорьевича ........................................................... 95

3


С 1 октября 2001 года в Украине введена вдействие Государственная Фармакопея Укра-ины (ГФУ) [1], которая устанавливает основ-ные требования к качеству субстанций и го-товых лекарственных средств. В настоящеевремя уже издано Дополнение 1 к ГФУ [2].Однако ни в основном томе ГФУ, ни в Допол-нении 1 нет монографий на лекарственноерастительное сырье (ЛРС), хотя в Европейс-кой Фармакопее 4-го издания (ЕФ) [3] пред-ставлены (Табл. 1- 3) 101 монография на раз-личные виды растительного сырья, 8 моно-графий на продукты растительного проис-хождения и 39 монографий на растительныемасла. (Кроме того, в ЕФ приведены моногра-фии на продукты животного происхождения(например, жиры), проблемы введения кото-рых в ГФУ аналогичны проблемам введенияв ГФУ монографий на ЛРС). Отсутствие вГФУ монографий на ЛРС вызвано специфи-кой ситуации, сложившейся в Украине.

1. Уровень АНД на ЛРС, действующей внастоящее время в Украине

К медицинскому применению в Украинев настоящее время разрешено более двухсот

видов лекарственного растительного сырья(ЛРС). Качество 88 из них регламентируетсятребованиями монографий ГосударственнойФармакопеи СССР ХІ издания (ГФ ХІ) [4].Для остальных видов сырья продолжают дей-ствовать ГОСТ, фармакопейные статьи, ана-литическая нормативная документация(АНД) и др., которые опираются на общиестатьи ГФ ХІ и используют для контроля ка-чества ЛРС подход монографий ГФ ХІ.

Подавляющая часть перечисленных ана-литических нормативных документов разра-ботана для ЛРС, произрастающего на терри-тории стран СНГ.

ГФ ХІ введена в действие в 1990 году ибыла для своего времени фармакопеей доста-точно высокого уровня. Учитывая материаль-ную базу фармацевтических предприятийтого времени, в ГФ ХІ вообще отсутствуютметодики высокоэффективной жидкостнойхроматографии (ВЭЖХ) и имеется толькоодна (побеги багульника болотного) методи-ка газовой хроматографии (ГХ). Методиктонкослойной хроматографии (ТСХ) всего 7(кора калины, цветки боярышника, листьякрапивы, плоды боярышника, трава хвоща

ÓÄÊ 615.11: 615.32

Ãðèçîäóá À.È., Ãåîðãèåâñêèé Ã.Â., Òèõîíåíêî Ò.Ì., Ãåîðãèåâñêèé Â.Ï.Ãîñóäàðñòâåííîå ïðåäïðèÿòèå «Íàó÷íî-ýêñïåðòíûé ôàðìàêîïåéíûé öåíòð»

Ïðîáëåìû ââåäåíèÿ ìîíîãðàôèé íà ëåêàðñòâåííîå ðàñòèòåëüíîå ñûðüå âÃîñóäàðñòâåííóþ Ôàðìàêîïåþ Óêðàèíû

Показана необходимость введения в Государственную Фармакопею Украины (ГФУ) монографий на лекарственноерастительное сырье (ЛРС). На основе анализа возможности гармонизации требований Европейской Фармакопеи(ЕФ) с отечественными требованиями на ЛРС к всестороннему обсуждению предложена концепция представлениямонографий на ЛРС в ГФУ.

²ç 2001 ðîêó Óêðà¿íà ìàº ñâîþ Äåðæàâíó Ôàðìàêîïåþ. Ó 2004 ðîö³ âèäàíå Äîïîâíåííÿ 1 äîÄåðæàâíî¿ Ôàðìàêîïå¿ Óêðà¿íè 1-ãî âèäàííÿ ( ÄÔÓ 1.1). Â ÄÔÓ 1 ³ â ÄÔÓ 1.1 ïðåäñòàâëåíî ëèøåäåÿê³ çàãàëüí³ ñòàòò³ ³ çîâñ³ì íå ïðåäñòàâëåíî ìîíîãðàô³¿ íà ë³êàðñüêó ðîñëèííó ñèðîâèíó.

Æóðíàë «Ôàðìàêîì» ðîçïî÷èíàº ïóáë³êàö³þ ñòàòåé ùîäî ââåäåííÿ ó Äåðæàâíó ÔàðìàêîïåþÓêðà¿íè çàãàëüíèõ ñòàòåé ³ ìîíîãðàô³é íà ë³êàðñüêó ðîñëèííó ñèðîâèíó.

Çàïðîøóºìî íàóêîâö³â, ñïåö³àë³ñò³â, ïðåäñòàâíèê³â ôàðìàöåâòè÷íî¿ ãàëóç³, øèðîêó ôàðìàöåâ-òè÷íó ãðîìàäñüê³ñòü äî ó÷àñò³ â îáãîâîðåíí³ âñ³õ ïðåäñòàâëåíèõ ìàòåð³àë³â. Ñïîä³âàºìîñÿ, ùîâ³äêðèòèé ³ çàö³êàâëåíèé ä³àëîã ñïðèÿòèìå ðîçâèòêîâ³ òà âäîñêîíàëåííþ Äåðæàâíî¿ Ôàðìàêîïå¿Óêðà¿íè.

Çàóâàæåííÿ òà ïðîïîçèö³¿ ìîæíà íàïðàâëÿòè íà àäðåñó ÄÏ «Íàóêîâî-åêñïåðòíèé ôàðìàêîïåé-íèé öåíòð» (â³ää³ë ÄÔÓ) àáî æóðíàëó «Ôàðìàêîì». Çàïðîøóºìî óñ³õ çàö³êàâëåíèõ îñ³á äî â³äêðè-òîãî îáãîâîðåííÿ íà ÔÎÐÓÌ² ñàéòà æóðíàëó «Ôàðìàêîì» Farmacomua.narod.ru.

Äî âèäàííÿ Äîïîâíåííÿ 2 äî Äåðæàâíî¿ Ôàðìàêîïå¿ Óêðà¿íè

4


¹

àíãë³éñüêàíàçâà

ìîíîãðàô³¿ªÔ

ëàòèíñüêàíàçâà ìîíî-ãðàô³¿ ªÔ

ëàòèíñüêà íàçâà ËÐÑ(ó âñòóïí³é ÷àñòèí³)

ìîíîãðàô³¿ ªÔ

ðîñ³éñüêàíàçâà ËÐÑ

óêðà¿íñüêà

íàçâà ËÐÑ

÷àñòèíàðîñëè-íè, ùîâèêî-ðèñòî-

âóºòüñÿ

ÃÔ ÕI

(ñòîð³íêà)

íàÿâí³ñòüâ ªÔ õðî-ìàòîãðà-ô³÷íèõ òàñïåêòðî-ìåòð. ìå-

òîäèê

1 AgrimonyArgimoniae

herbaAgrimonia eupatoria L.

ðåïåøîê îáûêíî-

âåííûé;

ðåïåéíè÷åê ëåêàðñòâåííûé

ïàðèëî çâè-

÷àéíåòðàâà ÒØÕ

2 AlchemillaAlchemillaeherba

Alchemilla vulgaris L.sensu latiore

ìàíæåòêà ïðèâîðîòåíü òðàâà ÒÑÕ

3 Angelica root Angelicae radix

Angelica archangelica L.

(Archangelica officinalisHaffm.)

äóäíèê ëåêàðñò-

âåííûéäóäíèê

êîðåíå-

âèùà òàêîðåí³

ÒØÕ

4 Aniseed Anisi fructus Pimpinella anisum L.àíèñ îáûêíîâåí-íûé

àí³ñ çâè÷àé-íèé

ïëîäè ÃÔ XI, ñ. 281 ÒØÕ

5 Arnica flower Arnicae flos Arnica montana L. àðíèêà ãîðíàÿàðí³êà

ã³ðñüêàêâ³òêè

ÒØÕ,

ÂÅÐÕ

6 Ash leaf Fraxini foliumFraxinus excelsior L. àáîFraxinus oxyphylla

M.Bieb.

ÿñåíü îáûêíî-âåííûé

ÿñåí çâè÷àé-íèé

ëèñòÿÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

7 Bearberry leafUvae ursifolium

Arctostaphylos uva-ursi(L.) Spreng.

òîëîêíÿíêàîáûêíîâåííàÿ

ìó÷íèöÿçâè÷àéíà

ëèñòÿ ÃÔ XI, ñ. 275ÒØÕ,ÂÅÐÕ

8Belladonnaleaf

Belladonnaefolium

Atropa belladonna L. êðàñàâêàáåëàäîííàçâè÷àéíà

ëèñòÿ ÃÔ XI, ñ. 251 ÒØÕ

9Bilberry fruit,dried

Myrtilli fructussiccus

Vaccinium myrtillus L. ÷åðíèêà ÷îðíèöÿ

ïëîäè

âèñó-øåí³

ÃÔ XI, c. 291ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

10Bilberry fruit,fresh

Myrtilli fructusrecens

Vaccinium myrtillus L. ÷åðíèêà ÷îðíèöÿïëîäèñâ³æ³

ÒØÕ,ÑÔ-ìåòîä

11 Birch leaf Betulae foliumBetula pendula Roth òà/àáîBetula pubescens Ehrh.

áåðåçà áåðåçà ëèñòÿÃÔ XI, c. 298(áðóíüêè)


12Bitter-orange

flower

Aurantii amari

flos

Citrus aurantium L. ssp.

aurantium (C. aurantiumL. ssp. amara Engl.)

ïîìåðàíåö ãîðü-

êèé

ïîìåðàíåöü

ã³ðêèéêâ³òêè

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

13Black

horehound

Ballotae nigrae

herbaBallota nigra L.

áåëîêóäðåííèê

÷åðíûé

ì'ÿòî÷íèê

÷îðíèéòðàâà

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

14 Bogbean leaf

Menyanthidis

trifoliataefolium

Menyanthes trifoliata L.âàõòà òðåõëèñò-

íàÿ

áîá³âíèê

òðèëèñòèéëèñòÿ ÃÔ XI, c. 262 ÒØÕ

15 Boldo leaf Boldi folium Peumus boldus Molina áîëäî áîëäî ëèñòÿÒØÕ,

ÂÅÐÕ

16Butcher'sbroom

Rusci rhizoma Ruscus aculeatus L.èãëèöà øèïîâà-òàÿ

ðóñêóñ øè-ïóâàòèé

êîðåíå-âèùà

ÒØÕ,ÂÅÐÕ

17Calendulaflower

Calendulae flos Calendula officinalis L.íîãîòêè àïòå÷-íûå

íàã³äêèë³êàðñüê³

êâ³òêè ÃÔ XI, c. 237ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

18 Capsicum Capsici fructus

Capsicum annuum L. var

minimum (Miller) Heiseròà small-fruited varieties

Capsicus frutescens L.

êðàñíûé ïåðåöîäíîëåòíèé

ïåðåöü

ñòðó÷êîâèéîäíîð³÷íèé

ïëîäèÒØÕ,ÂÅÐÕ

19 Caraway fruit Carvi fructus Carum carvi L.òìèí îáûêíîâåí-íûé

êìèí çâè÷àé-íèé

ïëîäè ÃÔ XI, c. 282 ÒØÕ

20 Cascara

Rhamni

purshianaecortex

Rhamnus purshianus

D.C.(Frangula purshiana(D.C.) A.Gray ex J.C.

Cooper)

æîñòåð Ïóðåíàæîñò³ð ïóðå-íà

êîðà

ÃÔ XI, c. 293

(îïèñàí³ïëîäè æîñòå-

ðó ïðîíîñíî-

ãîRhamnus

cathertica L.)


Таблица 1Лікарська рослинна сировина, описана в Європейській Фармакопеї

Ä

5


¹








íàçâà ËÐÑ


âóºòüñÿ

ÃÔ ÕI

(ñòîð³íêà)


òîäèê

21 Centaury Centaurii herba

Centaurium erythraea

Rafn. (C.minus Moench,

C.umbellatum Gilib.,Erythraea centaurium (L.)

Pers.)

çîëîòîòûñÿ÷íèê

îáûêíîâåííûé

çîëîòîòèñÿ÷-

íèê çâè÷àé-íèé

òðàâà ÃÔ XI, c. 311 ÒØÕ

22 CentellaCentellaeasiaticae herba

Centella asiatica (L.)Urban

öåíòåëëà àçèàò-ñêàÿ

öåíòàëààç³àòñüêà

òðàâàÒØÕ,ÂÅÐÕ

23Chamomileflower, roman

Chamomillaeromanae flos

Chamaemelum nobile (L.)All. (Anthemis nobilis L.)

ðîìàøêà ðèìñêàÿðîìàøêàðèìñüêà

êâ³òêè ÒØÕ

24Cinchonabark

Cinchonaecortex

Cinchona pubescens Vahl

(Cinchona succirubraPavon), C.calisaya

(Weddell), C.ledgeriana(Moens ex Trimen)

õèííîå äåðåâî õ³ííå äåðåâî êîðàÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

25 CinnamonCinnamomi

cortex

Cinnamomum zeylanicum

Nees.êîðè÷íîå äåðåâî

êîðè÷íå

äåðåâîêîðà ÒØÕ

26 Clove Caryophylli flos

Syzygium aromaticum (L.)Merill et L.M. Perry

(Eugenia caryophyllus (C.Spreng.) Bull. et Harr.)

ãâîçäèêà ãâîçäèêà êâ³òêè ÒØÕ

27 Cola Colae semen

Cola nitida (Vent.) Schott

et Endl. (C. vera K.Shcum.) òà ¿¿ var., ùî

â³äîì³ ÿê Cola acuminata

(P. Beauv.) Schott et Endl.(Sterculia acuminata (P.

Beauv.)

êîëà áëåñòÿùàÿ

è åå ðàçíîâèä-íîñòü, èçâåñòíàÿ

êàê êîëà çàîñò-ðåííàÿ

êîëà áëèñêó-

÷à òà ¿¿ð³çíîâèä,

â³äîìèé ÿê

êîëà çàãîñ-òðåíà

íàñ³ííÿÒØÕ,ÂÅÐÕ

28 CorianderCoriandrifructus

Coriandrum sativum L.êîðèàíäð ïîñåâ-íîé

êîð³àíäðïîñ³âíèé

ïëîäè ÒØÕ

29Couch grassrhizome

Graminisrhizoma

Agropyron repens (L.)

Beauv. (Elymus repens (L.)Gould)

ïûðåé ïîëçó÷èéïèð³é ïîâçó-÷èé


30Devil's clawroot

Harpagophytiradix

Harpagophytumprocumbens D.C. òà/àáî H.

zeyheri Decne

ëþòèê ïîëåâîé æîâòåöü êîðåí³ÒØÕ,ÂÅÐÕ

31 Digitalis leafDigitalispurpureae

folium

Digitalis purpurea L.íàïåðñòÿíêàïóðïóðíàÿ

íàïåðñòÿíêàïóðïóðîâà

ëèñòÿ

ÃÔ XI, c. 253

(îïèñàí³

íàïåðñòÿíêàïóðïóðîâà òà

íàïåðñòÿíêà

âåëèêîöâ³òà(íàïåðñòÿíêà

êðóïíîöâåò-

êîâàÿ -Digitalis

grandifloraMill.))


32 Dog roseRosae pseudo-

fructus

Rosa canina L.,

R. ðendulina L. òà ³í.øèïîâíèê øèïøèíà ïëîäè

ÃÔ XI, c. 294

(îïèñàíî 12âèä³â)

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

33 Elder flower Sambuci flos Sambucus nigra L. áóçèíà ÷åðíàÿ áóçèíà ÷îðíà êâ³òêè ÃÔ XI, c. 246ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

34Eleutheroco-

ccus

Eleutherococci

radix

Eleutherococcus senticosus

(Rupr. et Maxim.) Maxim.

ýëåóòåðîêîêê

êîëþ÷èé

åëåóòåðîêîê

êîëþ÷èéêîðåí³ ÒØÕ

35Equisetum

stemEquiseti herba Equisetum arvense L. õâîù ïîëåâîé

õâîù ïîëüî-

âèéòðàâà ÃÔ XI, c. 318

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

Таблица 1 (продолжение)

Ä

6


¹








íàçâà ËÐÑ


âóºòüñÿ

ÃÔ ÕI

(ñòîð³íêà)


òîäèê

36Eucalyptus

leaf

Eucalypti

foliumEucalyptus globulus Labill.

ýâêàëèïò øàðè-

êîâûé

åâêàë³ïò

êóëÿñòèéëèñòÿ

ÃÔ XI, c. 257

(îïèñàíèé

åâêàë³ïòïðóòîâèä-

íèé - ýâêà-

ëèïò ïðóòüå-âèäíûé - Eu-

calyptus vimi-nalis Labill.)

ÒØÕ

37 Fennel, bitterFoeniculi amari

fructus

Foeniculum vulgare Miller

sp. vulgare var. vulgare

ôåíõåëü îáûêíî-

âåííûé

ôåíõåëü

çâè÷àéíèé

ïëîäè

ã³ðê³ÒØÕ, ÃÕ

38 Fennel, sweetFoeniculi dulcisfructus

Foeniculum vulgare Millersp. vulgare var. dulce

(Miller) Thellung.

ôåíõåëü îáûêíî-âåííûé

ôåíõåëüçâè÷àéíèé

ïëîäèñîëîäê³

ÃÔ XI, c. 289 ÒØÕ, ÃÕ

39 Fenugreek

Trigonellae

foenugraecisemen

Trigonella foenum-

graecum L.

ïàæèòíèê "ãðå÷å-

ñêîå ñåíî"ãóíüáà ñ³ííà ÒØÕ

40 FeverfewTanaceti

parthenii herba

Tanacetum parthenium (L.)

Schultz Bip.

ïèæìà äåâè÷üÿ

(ïèðåòðóì äåâè-÷èé)

ïèæìî ä³âî÷å

(ïèðåòðóìä³âî÷èé)

òðàâà

ÃÔ XI, c. 289

(ïèæìî çâè-

÷àéíå - Tana-ceti vulga-

ris L.)

ÒØÕ,

ÂÅÐÕ

41 Frangula barkFrangulaecortex

Rhamnus frangula L.(Frangula alnus Miller)

êðóøèíà ëîìêàÿ,êðóøèíà îëüõî-

âèäíàÿ

êðóøèíàëàìêà

êîðà ÃÔ XI, c. 230ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

42 Gentian root Gentianae radix Gentiana lutea L. ãîðå÷àâêà æåëòàÿòèðëè÷ æîâ-

òèéêîðåí³ ÒØÕ

43 GingerZingiberisrhizoma

Zingiber officinale Roscoeèìáèðü ëåêàðñò-âåííûé

³ìáèðë³êàðñüêèé


ÒØÕ

44 Ginkgo leaf Ginkgo folium Ginkgo biloba L.ãèíêãî äâóëîïà-ñòíûé

ã³íêãî äâî-ëîïàòåâå

ëèñòÿÒØÕ,ÂÅÐÕ

45 Ginseng Ginseng radix Panax ginseng C.A. Meyer æåíüøåíü æåíüøåíü êîðåí³ ÃÔ XI, c. 349ÒØÕ,ÂÅÐÕ

46 GoldenrodSolidaginis

herba

Solidago gigantea Ait àáî

S. canadensis L.

çîëîòàðíèê êà-

íàäñêèé

çîëîòóøíèê

êàíàäñüêèéòðàâà

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

47Greatercelandine

Chelidonii herba Chelidonium majus L.÷èñòîòåë áîëü-øîé

÷èñòîò³ëâåëèêèé

òðàâà ÃÔ XI, c. 309ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

48 GuarCyamopsidisseminis pulvis

Cyamopsis tetragonolobus(L.) Taub.

öèàìîïñèñ ÷åòû-ðåõëîïàñòíûé

ö³àìîïñèñ

÷îòèðèëîïà-òåâèé

íàñ³ííÿ ÒØÕ

49Hamamelisleaf

Hamamelidisfolium

Hamamelis virginiana L.ãàìàìåëèñ âèð-ãèíñêèé

ãàìàìåë³ñâåðã³íñüêèé

ëèñòÿÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

50Hawthornberries

Crataegi fructus

Crataegus monogyna Jacq.

(Lindm.), àáî Crataeguslaevigata (Poir.) D.C.

(ñèíîí³ì: Crataegus

oxyacantha L.), àáî ¿õã³áðèäè, àáî ñóì³ø öèõ

íåñïðàâæí³õ ïëîä³â.

áîÿðûøíèê îä-

íîïåñòè÷íûé èëèáîÿðûøíèê

ñãëàæåííûé

(ñèíîíèì: áîÿ-ðûøíèê êîëþ-

÷èé)

ãë³ä îäíîìà-

òî÷êîâèé àáîãë³ä çãëàæå-

íèé (ñèíî-

í³ì: ãë³ä êî-ëþ÷èé)

ïëîäè

ÃÔ XI, c. 283

(12 âèä³â, óòîìó ÷èñë³ é

îïèñàí³ âªÔ)



Ä

7


¹








íàçâà ËÐÑ


âóºòüñÿ

ÃÔ ÕI

(ñòîð³íêà)


òîäèê

51Hawthorn leaf

and flower

Crataegi folium

cum flore

Crataegus monogyna Jacq.

(Lindm.), C. laevigata

(Poiret) D.C. (C.oxyacanthoides Thuill.),

àáî ¿õ ã³áðèäè, àáî äóæå

ð³äêî, ³íø³ ºâðîïåéñüê³âèäè Crataegus,âêëþ-

÷àþ÷è Ñ.pentagyna

Waldst. et. Kit. ex Willd.,C.nigra Waldst.et Kit.,

C.azarolus L.

áîÿðûøíèê îä-

íîïåñòè÷íûé,

èëè áîÿðûøíèêñãëàæåííûé (áîÿ-

ðûøíèê êîëþ-

÷èé), èëè èõ ãèá-ðèäû, èëè, î÷åíü

ðåäêî, äðóãèå

åâðîïåéñêèå âè-äû áîÿðûøíèêà,

âêëþ÷àÿ áîÿðûø-

íèê ïÿòèïåñòè÷-íûé, áîÿðûøíèê

÷åðíûé, áîÿðûø-íèê àçàðåëëÿ

ãë³ä îäíîìà-

òî÷êîâèé, àáî

ãë³ä çãëàä-æåíèé (ãë³ä

êîëþ÷èé),

àáî ¿õ ã³áðè-äè, àáî, äóæå

ð³äêî, ³íø³

ºâðîïåéñüê³âèäè ãëîäó,

âêëþ÷àþ÷è

ãë³ä ï'ÿòè-ñòîâï÷èêî-

âèé, ãë³ä ÷îð-

íèé, ãë³ä àçà-ðåëëÿ

ëèñòÿ òà

êâ³òêè

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

52 Hop strobile Lupuli flosHumuluslupulus L.

õìåëü îáûêíî-âåííûé

õì³ëü çâè-÷àéíèé

ñóïë³ä-äÿ

ÒØÕ

53Ipecacuanharoot

Ipecacuanhaeradix

Cephaelis ipecacuanha

(Brot.) A.Rich., â³äîìà ÿêMatto Grosso ipecacuanha,

àáî Cephaelis acuminata

Karsten, â³äîìà ÿê CostaRica ipecacuanha, àáî

ñóì³ø äâîõ âèä³â

ðâîòíûé êîðåíüáëþâîòíèéêîð³íü

êîðåí³ ÒØÕ

54Ispaghulahusk

Plantaginisovatae seminis

tegumentum

Plantago ovata Forssk.(P.ispaghula Roxb.)

ïîäîðîæíèêîâàëüíûé

ïîäîðîæíèêîâàëüíèé

íàñ³ííº-âå ëóø-

ïèííÿ

ÃÔ XI, c. 264(ïîäîðîæíèê

âåëèêèé -

ïîäîðîæíèêáîëüøîé -

Plantago ma-jor L. (ëèñòÿ))

ÒØÕ

55Ispaghula

seed

Plantaginis

ovatae semen

Plantago ovata Forssk. (P.

ispaghula Roxb.)

ïîäîðîæíèê

îâàëüíûé


îâàëüíèéíàñ³ííÿ

ÃÔ XI, c. 264

(ïîäîðîæíèê

âåëèêèé -ïîäîðîæíèê

áîëüøîé -

Plantago ma-jor L. (ëèñòÿ))

ÒØÕ

56 Java teaOrthosiphonisfolium

Ortosiphon stamineusBenth. (O.aristatus Miq.;

O. spicatus Bak.)

îðòîñèôîí òû÷è-íî÷íûé (ïî÷å÷-

íûé ÷àé)

îðòîñèôîíòè÷èíêîâèé

(íèðêîâèé÷àé)

ëèñòÿ ÃÔ XI, c. 267ÒØÕ,ÂÅÐÕ

57 JuniperJuniperi pseudo-

fructusJuniperus communis L.

ìîææåâåëüíèê


ÿëîâåöü çâè-

÷àéíèé

ïëîäè

íåñïðàâ-æí³

ÃÔ XI, c. 290 ÒØÕ

58 KnotgrassPolygoni

avicularis herbaPolygonum aviculare L.s.I.

ãîðåö ïòè÷èé

(ñïîðûø)

ñïîðèø çâè-

÷àéíèéòðàâà ÃÔ XI, c. 330

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

59Lavender

flowerLavandulae flos

Lavandula angustifolia

P.Mill. (L. officinalisChaix)

ëàâàíäà óçêîëè-

ñòíàÿ

ëàâàíäà

âóçüêîëèñòàêâ³òêè ÒØÕ, ÃÕ

60 Lime flower Tiliae flos

Tilia cordata Miller, Tilia

platyphyllos Scop., Tilia ×vulgaris Heyne àáî ¿õ

ñóì³ø

ëèïà ñåðäöåâèä-

íàÿ, ëèïà øèðî-

êîëèñòíàÿ èëè èõñìåñü

ëèïà ñåðöå-

âèäíà, ëèïà

øèðîêîëèñòàîáî ¿õ ñóì³ø

êâ³òêè ÃÔ XI, c. 249 ÒØÕ

61 Liquorice root Liquiritiae radix Glycyrrhiza glabra L. ñîëîäêà ãîëàÿ ñîäîäêà ãîëà êîðåí³ÒØÕ,ÂÅÐÕ

62 Loosestrife Lythri herba Lythrum salicaria L.äåðáåííèê èâî-ëèñòûé

ïëàêóí âåð-áîëèñòèé

òðàâà ÒØÕ


Ä

8


¹








íàçâà ËÐÑ


âóºòüñÿ

ÃÔ ÕI

(ñòîð³íêà)


òîäèê

63 Lovage root Levistici radix Levisticum officinale Koch.ëþáèñòîê ëåêàð-

ñòâåííûé

ëþáèñòîê

ë³êàðñüêèéêîðåí³ ÒØÕ

64Mallowflower

Malvaesylvestris flos

Malva sylvestris L.ïðîñâèðíèê ëåñ-íîé

êàëà÷èêèë³ñîâ³ (ìàëü-

âà ë³ñîâà)

êâ³òêè ÒØÕ

65Marshmallowleaf

Althaeae folium Althaea officinalis L.àëòåé ëåêàðñò-âåííûé

àëòåÿë³êàðñüêà

ëèñòÿ ÒØÕ

66Marshmallowroot

Althaeae radix Althaea officinalis L.àëòåé ëåêàðñò-âåííûé

àëòåÿë³êàðñüêà

êîðåí³

ÃÔ XI, c. 343(êð³ì îïèñà-

íîãî âèäó,

ùå àëòåÿ àð-

ìÿíñüêà - àë-

òåé àðìÿíñ-

êèé - Althaeaarmeniaca

Ten.)

67Matricariaflower

Matricariae flosMatricaria recutita L.(Chamomilla recutita (L.)

Rauschert)

ðîìàøêà ëåêàð-ñòâåííàÿ

ðîìàøêàë³êàðñüêà

êâ³òêè ÃÔ XI, c. 239 ÒØÕ

68 MeadowsweetFilipendulaeulmariae herba

Filipendula ulmaria (L.)Maxim.= (Spiraea ulma-

ria L.)

ëàáàçíèê èâîëè-ñòûé = òàâîëãà

âÿçîëèñòíàÿ

ãàäþ÷íèêâ'ÿçîëèñòèé

òðàâà ÒØÕ

69 Melissa leaf Melissae folium Melissa officinalis L.ìåëèññà ëåêàðñò-

âåííàÿ

ìåë³ñà

ë³êàðñüêàëèñòÿ

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

70 MotherwortLeonuricardiacae herba

Leonurus cardiaca L.ïóñòûðíèê îáûê-íîâåííûé

ñîáà÷à êðî-ïèâà çâè÷àé-

íà

òðàâà

ÃÔ XI, c. 327(êð³ì îïèñà-

íîãî âèäó,

ùå ñîáà÷àêðîïèâà

ï'ÿòèëîïà-

òåâà - ïóñ-òûðíèê ïÿ-

òèëîïàñò-

íûé - Leonu-

rus quinque-

lobatus Gilib.)


71Mulleinflower

Verbasci flos

Verbascum thapsus L., V.densiflorum Bertol. (V.

thapsiforme Schrad), V.phlomoides L.

êîðîâÿê îáûêíî-âåííûé; êîðîâÿê

ñêèïåòðîâèäíûé,

êîðîâÿê âûñîêèé,êîðîâÿê ëåêàðñò-

âåííûé

äèâèíà âåä-ìåæà, âåä-

ìåæå âóõî;

äèâèíàñê³ïåòðîâè-

äíà, äèâèíà

ãóñòîêâ³òêî-âà; äèâèíà

çàë³çíÿêîâèäíà, äèâèíà

ë³êàðñüêà

êâ³òêè ÒØÕ

72 Oak bark Quercus cortexQuercus robur L., Q.petraea (Matt.) Liebl, Q.

pubescens Willd.

äóá îáûêíîâåíí-íûé (÷åðåø÷à-

òûé), äóá ñêàëü-

íûé, äóá îïó-øåííûé

äóá çâè÷àé-íèé, äóá

ñêåëüíèé,

äóá îïóøå-íèé

êîðàÃÔ XI, c. 233(îïèñàí³ äâà

ïåðø³ âèäè)

73 Oregano Origani herba

Origanum onites L. àáî

Origanum vulgare L.subsp. hirtum (Link) Ietsw.

äóøèöà êðèòñêàÿ

èëè äóøèöàîáûêíîâåííàÿ

ìàòåðèíêà

êðèòñüêà,ìàòåðèíêà

çâè÷àéíà

òðàâà

ÃÔ XI, c. 328

(îïèñàíàò³ëüêè ìàòå-

ðèíêà çâè-÷àéíà)

ÒØÕ,ÃÕ


Ä

9


¹








íàçâà ËÐÑ


âóºòüñÿ

ÃÔ ÕI

(ñòîð³íêà)


òîäèê

74Passion

flower

Passiflorae

herbaPassiflora incarnata L.

ïàññèôëîðà ìÿñî-

êðàñíàÿ

ïàñèôëîðà

ì'ÿñî-÷åðâî-íà

êâ³òêèÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

75Peppermint

leaf

Menthae

piperitae foliumMentha × piperita L. ìÿòà ïåðå÷íàÿ ì'ÿòà ïåðöåâà ëèñòÿ ÃÔ XI, c. 261 ÒØÕ

76 Primula root Primulae radixPrimula veris L. àáîPrimula elatior (L.) Hill.

ïåðâîöâåò âåñåí-íèé, ïåðâîöâåò

âûñîêèé

ïåðâîöâ³òâåñíÿíèé,

ïåðâîöâ³òâèñîêèé

êîðåí³ ÒØÕ

77Restharrowroot

Ononidis radix Ononis spinosa L.ñòàëüíèê ïîëåâîé(ïàøåííûé)

âîâ÷óãïîëüîâèé

êîðåí³ ÃÔ XI, c. 350 ÒØÕ

78 Rhatany root Ratanhiae radixKrameria triandra Ruiz

and Pavonðàòàíèÿ ðàòàí³ÿ êîðåí³ ÒØÕ

79 Rhubarb Rhei radix

Rheum palmatum L. àáîRheum officinale Baillon,

àáî ã³áðèäè öèõ äâîõâèä³â, àáî ¿õ ñóì³ø

ðåâåíü äëàíåâèä-íûé ðåâåíü òàí-

ãóòñêèé

ðåâ³íü ïàëü-÷àñòèé,

ðåâ³íü òàí-ãóòñüêèé

êîðåí³ ÃÔ XI, c. 352ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

80Ribwortplantain

Plantaginis

lanceolataefolium

Plantago lanceolata L.s.I.ïîäîðîæíèêëàíöåòîëèñòíûé


ëàíöåòîëè-ñòèé

ëèñòÿ

ÃÔ XI, c. 264

(ïîäîðîæíèêâåëèêèé -


áîëüøîé -Plantago ma-

jor L.)


81 RoselleHibiscisabdariffae flos

Hibiscus sabdariffa L. ãèáèñêóñ (áàìèÿ)

ã³á³ñê,ã³á³ñêóñ

(ìàëüâà ÷åð-

âîíà)

êâ³òêèÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

82 Rosemary leafRosmarini

foliumRosmarinus officinalis L.

ðîçìàðèí ëåêàð-

ñòâåííûé

ðîçìàðèí

ë³êàðñüêèéëèñòÿ

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

83Sage leaf(Salviaofficinalis)

Salviaeofficinalisfolium

Salvia officinalis L.øàëôåé ëåêàðñò-âåííûé

øàâë³ÿë³êàðñüêà

ëèñòÿ ÃÔ XI, c. 268 ÒØÕ

84Sage leaf,

three-lobel

Salviae trilobae

folium

Salvia fructicosa Mill. (S.

triloba L. fil).

øàëôåé òðåõëî-

ïàñòíûé

øàâë³ÿ òðè-

ëîïàòåâàëèñòÿ

ÃÔ XI, c. 268

(îïèñàíà

ò³ëüêèøàâë³ÿ

ë³êàðñüêà)

ÒØÕ

85Saw palmetto

fruit

Sabalisserrulatae

fructus

Serenoa repens (Bartram)Small. (Sabal serrulata

(Michaux) Nichols)

ïàëüìà ñåðåíîàïàëüìà ñåðå-

íîàïëîäè ÒØÕ, ÃÕ

86 Senega root Polygalae radix Polygala senega L. èñòîä ñåíåãàêèòÿòêèñåíåãà

êîðåí³ ÒØÕ

87 Senna leaf Sennae folium

Cassia senna L. (C.acutifolia Delile), â³äîìà

ÿê Alexandrian àáî Khar-

toum senna, aáî Cassia an-gustifolia Vahl., â³äîìà ÿê

Tinnevelly senna, àáî ñó-ì³ø öèõ äâîõ âèä³â.

êàññèÿ îñòðîëè-ñòíàÿ, êàññèÿ

óçêîëèñòíàÿ

êàñ³ÿ ãîñòðî-ëèñòà, êàñ³ÿ

âóçüêîëèñòà

ëèñòÿ

ÃÔ XI, c. 269(îïèñàíà

ò³ëüêè êàñ³ÿãîñòðîëèñòà)


88Senna pods,

Alexandrian

Sennae fructus

acutifoliae

Cassia senna L.

(C. acutifolia Delile)

êàññèÿ îñòðîëè-

ñòíàÿ

êàñ³ÿ ãîñòðî-

ëèñòà

ïëîäè

(ñòðó÷-

êè)

ÃÔ XI, c. 269

(êàñ³ÿ ãîñ-

òðîëèñòà -

ëèñòÿ)

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

89Senna pods,Tinnevelly

Sennae fructusangustifoliae

Cassia angustifolia Vahl.êàññèÿ óçêîëèñò-íàÿ

êàñ³ÿ âóçüêî-ëèñòà

ïëîäè

(ñòðó÷-êè)

ÃÔ XI, c. 269

(êàñ³ÿ ãîñ-òðîëèñòà -ëèñòÿ)



Ä

10


¹








íàçâà ËÐÑ


âóºòüñÿ

ÃÔ ÕI

(ñòîð³íêà)


òîäèê

90St. John's

wortHyperici herba Hypericum perforatum L.

çâåðîáîé ïðîäû-

ðÿâëåííûé

çâ³ðîá³é

çâè÷àéíèéòðàâà

ÃÔ XI, c. 323

(êð³ì äàíîãî

âèäó ùå çâ³-ðîá³é ïëÿ-

ìèñòèé (çâ³-

ðîá³é ÷îòè-ðèãðàííèé) -

çâåðîáîé

ïÿòíèñòûé(çâåðîáîé

÷åòûðåõãðàí-

íûé) -Hype-ricum macula-

tum Crantz

(H. Quadran-gulum L.)

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

91 Star aniseAnisi stellatifructus

Illicium verum Hooker fil.

àíèñ çâåçä÷àòûé,

áàäüÿí îáûêíî-âåíííûé

ç³ð÷àñòèéàí³ñ

ïëîäè ÒØÕ

92Stramoniumleaf

Stramoniifolium

Datura stramonium L.äóðìàí îáûêíî-âåííûé

äóðìàí çâè-÷àéíèé

ëèñòÿ ÃÔ XI, c. 272 ÒØÕ

93 Thyme Thymi herba

Thymus vulgaris L.,

Thymus zygis L. àáî ñóì³øöèõ äâîõ âèä³â

òèìüÿí îáûêíî-

âåííûé èëèòèìüÿí öèãèñ

(ëåñíîé)

÷åáðåöü

çâè÷àéíèéàáî ÷åáðåöü

öèã³ñ(ë³ñîâèé)

òðàâà

ÃÔ XI, c. 339

(îïèñàíèé÷åáðåöü

çâè÷àéíèé)

ÒØÕ, ÃÕ

94 TormentilTormentillae

rhizoma

Potentilla erecta (L.)

Raeusch. (P. tormentillaStokes).

ëàï÷àòêà ïðÿìî-

ñòîÿ÷àÿ

ïåðñòà÷ ïðÿ-

ìîñòîÿ÷èé(êàëãàí)

êîðåíå-

âèùàÒØÕ

95Turmeric,

Javanese

Curcumae

xanthorrhizaerhizoma

Curcuma xanthorrhiza

Roxb. (C. xanthorrhiza D.Dietrich)

òóðìåðèê (êóð-

êóìà) ÿâàíñêèé

òóðìåð³ê

(êóðêóìà)ÿâàíñüêèé

êîðåíå-

âèùà

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

96 Valerian root Valerianae radix Valeriana officinalis L. s.I.âàëåðèàíà ëåêàð-

ñòâåííàÿ

âàëåð³àíà

ë³êàðñüêà

êîðåíå-

âèùà òà

êîðåí³

ÃÔ XI, c. 369ÒØÕ,

ÂÅÐÕ

97

Wild pansy

(Floweringaerial parts)

Violae herbacum floris

Viola arvensis Murrayòà/àáî Viola tricolor L.

ôèàëêà ïîëåâàÿ

è/èëè ôèàëêàòðåõöâåòíàÿ

ô³àëêà

ïîëüîâàòà/àáî ô³àëêà

òðèêîë³ðíà

òðàâà ÃÔ XI, c. 340ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä

98 Wild thyme Serpylli herba Thymus serpyllum L.s.I.òèìüÿí ïîëçó÷èé(÷àáðåö)

÷åáðåöüïîâçó÷èé

òðàâà ÃÔ XI, c. 338 ÒØÕ

99 Willow bark Salicis cortexSalix purpurea L., S. daph-noides Vill, S. fragilis L.

èâà ïóðïóðíàÿ,èâà ëîìêàÿ

âåðáà ïóðïó-ðîâà, âåðáà

ëàìêà

êîðàÒØÕ,ÂÅÐÕ

100 Wormwood Absinthii herba Artemisia absinthium L. ïîëûíü ãîðüêàÿ ïîëèí ã³ðêèé òðàâà ÃÔ XI, c. 303 ÒØÕ

101 Yarrow Millefolii herba Achillea millefolium L.òûñÿ÷åëèñòíèê


äåðåâ³é çâè-

÷àéíèéòðàâà ÃÔ XI, c. 325

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä


полевого, корни аралии маньчжурской, кор-невище и корни родиолы розовой), бумаж-ной хроматографии – 2 (листья вахты трех-листной, трава череды). Для количественно-го определения применяется только одна ме-тодика ГХ (побеги багульника болотного) иодна методика ТСХ (цветки боярышника -хроматоспектрофотометрия). В остальныхслучаях преобладает спектрофотометрия или

определение эфирного масла, а для сердеч-ных гликозидов - биологические методы.

Отсутствие хроматографических испыта-ний в ГФ ХІ компенсируется описаниемвнешних признаков и микроскопией, кото-рые представлены в ней обычно гораздо бо-лее обширно и в редакции, отличной от ЕФ.

В ЕФ (Табл. 1-3) для каждого вида ЛРС обя-зательно используются хроматографические

11


¹àíãë³éñüêàíàçâà ìîíî-ãðàô³¿ ªÔ




ðîñ³éñüêà íàçâàïðåïàðàòó

óêðà¿íñüêà íàçâà

ïðåïàðàòó

ïðå-ïà-ðàò

ÃÔÕI

íàÿâí³ñòü âªÔ õðîìàòî-ãðàô³÷íèõ òàñïåêòðîìåòð.

ìåòîäèê

1Almond oil,refined

Amygdalae

oleumraffinatum

³ç íàñ³ííÿ Prunus dulcis

(Miller) D.A. Webb var.dulcis àáî Prunus dulcis

(Miller) D.A. Webb var.amara (D.C.) Buchheim

ìèíäàëüíîå ìàñëîðàôèíèðîâàííîå

ìèãäàëüíà îë³ÿðàô³íîâàíà

îë³ÿ ÑÔ-ìåòîä; ÃÕ

2Almond oil,

virgin

Amygdalae

oleum virginale

³ç íàñ³ííÿ Prunus dulcis

(Miller) D.A. Webb var.

dulcis àáî Prunus dulcis(Miller) D.A. Webb var.

amara (D.C.) Buchheim

ìèíäàëüíîå ìàñëî

íåðàôèíèðîâàííîå

ìèãäàëüíà îë³ÿ

íåðàô³íîâàíàîë³ÿ ÑÔ-ìåòîä; ÃÕ

3 Anise oilAnisiaetheroleum

³ç ïëîä³â Pimpinella ani-sum L. àáî Illicium verum

Hook. fil.

àíèñîâîå ìàñëî àí³ñîâà îë³ÿ îë³ÿ ÒØÕ; ÃÕ

4Arachis oil,

hydrogenated

Arachidis oleum

hydrogenatum

³ç íàñ³ííÿ Arachis

hypogaea L.

àðÀõèñîâîå ìàñëî

ãèäðîãåíèçèðîâàí-íîå

àðàõ³ñîâà îë³ÿ

ã³äðîãåí³çîâàíàîë³ÿ

ÒØÕ, ÃÕ,

àòîìíî-àáñîðá.ñïåêòðîìåòð³ÿ

5Arachis oil,

refined

Arachidis oleum

raffinatum

³ç íàñ³ííÿ Arachis hypo-

gaea L.

àðàõèñîâîå ìàñëî

ðàôèíèðîâàííîå

àðàõ³ñîâà îë³ÿ

ðàô³íîâàíàîë³ÿ ÒØÕ, ÃÕ

6Bitter-fennelfruit oil

Foeniculi amarifructus

aetheroleum

³ç ïëîä³â Foeniculum vulgareMiller, ssp. vulgare var.

vulgare

ôåíõåëÿ ãîðüêîãîïëîäîâ ýôèðíîå

ìàñëî

ôåíõåëþã³ðêîãî ïëîä³â

åô³ðíà îë³ÿ

îë³ÿ ÒØÕ, ÃÕ

7Bitter-orange-

flower oil

Aurantii amari

florisaetheroleum

³ç êâ³òîê Citrus aurantium L.

subsp. aurantium (C.

aurantium L. subsp. amaraEngl.)

ïîìåðàíöà, àïåëü-

ñèíà ãîðüêîãîýôèðíîå ìàñëî

ïîìåðàíöþ

åô³ðíà îë³ÿîë³ÿ ÒØÕ, ÃÕ

8 Cassia oil

Cinnamomi

cassiaeaetheroleum

³ç ëèñòÿ òà ìîëîäèõ ïàãîí³â

Cinnamomum cassia Blume(C. àromaticum Nees)

êîðèöû ýôèðíîåìàñëî

êîðèö³ åô³ðíàîë³ÿ


9Castor oil,hydrogenated

Ricini oleumhydrogenatum

êàñòîðîâîå ìàñëî

ãèäðîãåíèçèðîâàí-íîå

ðèöèíîâà îë³ÿã³äðîãåí³çîâàíà

îë³ÿ

ÒØÕ, ÃÕ,

àòîìíî-àáñîðá.ñïåêòðîìåòð³ÿ

10Castor oil,virgin

Ricini oleumvirginale

³ç íàñ³ííÿ Ricinus com-munis L.

êàñòîðîâîå ìàñëî ðèöèíîâà îë³ÿ îë³ÿ ÑÔ-ìåòîä; ÃÕ

11Cinnamon bark

oil, Ceylon

Cinnamomi

zeylanicii

corticis

aetheroleum

³ç êîðè ïàãîí³â

Cinnamomum zeylanicumNees ( C.Verum J.S. Presl.)

êîðè÷íîãî äåðåâà

êîðû ýôèðíîå ìàñ-ëî

êîðè÷íîãî

äåðåâà êîðèåô³ðíà îë³ÿ


12Cinnamon leafoil, Ceylon

Cinnamomizeylanici folii

aetheroleum

³ç ëèñòÿ Cinnamomum verumJ.S. Presl.

êîðè÷íîãî äåðåâàëèñòüåâ ýôèðíîå

ìàñëî

êîðè÷íîãîäåðåâà ëèñòÿ

åô³ðíà îë³ÿ


13 Citronella oilCitronellaeaetheroleum

³ç íàäçåìíèõ ÷àñòèíCymbopogon winterianus

Jowitt.

öèòðîíåëëû (ïîìå-ðàíöåâîé òðàâû,

ëèìîííîãî ñîðãî)ýôèðíîå ìàñëî

öèòðîíåëè(ïîìåðàíöåâî¿

òðàâè, ëèìîí-

íîãî ñîðãî)åô³ðíà îë³ÿ


14 Clary sage oilSalviae sclareaeaetheroleum

Salvia sclarea L.øàëôåÿ ìóñêàòíîãîýôèðíîå ìàñëî

øàâë³¿ ìóñêàò-íî¿ åô³ðíà îë³ÿ


15 Clove oil

Caryophylli

florisaetheroleum

³ç áóòîí³â Syzygium aroma-

ticum (L.) Merill òà L.M. Pe-rry (Eugenia caryophyllus C.

Spring. Bull. et Harr.)

ãâîçäè÷íîå ýôèð-íîå ìàñëî

ãâîçäèêîâà îë³ÿ îë³ÿ ÒØÕ, ÃÕ

16Coconut oil,refined

Cocois oleumraffinatum

Cocos nucifera L.êîêîñîâîå ìàñëî,ðàôèíèðîâàííîå

êîêîñîâà îë³ÿ,ðàô³íîâàíà

îë³ÿ ÃÕ

17Cottonseed oil,hydrogenated

Gossypii oleumhydrogenatum

³ç íàñ³ííÿ Gossypiumhirsutum L. àáî ³íøèõ âèä³â

Gossypium

õëîïêîâîå ìàñëîãèäðîãåíèçèðîâàí-

íîå

áàâîâíÿíà îë³ÿ îë³ÿÃÕ, àòîìíî-àáñîðá. ñïåêòð.

Таблица 2Рослинні олії, описані в Європейській Фармакопеї

Ä

12








ïðåïàðàòó

ïðå-ïà-ðàò

ÃÔÕI


ìåòîäèê

18 Eucalyptus oilEucalypti

aetheroleum

Eucalyptus globulus Labill.,

Eucalyptus fruticetorum F.

von Mueller (Eucalyptus

polybractea R.T. Baker,Eucalyptus smithii R.T.Baker

ýâêàëèïòîâîå

ýôèðíîå ìàñëî

åâêàë³ïòîâà

åô³ðíà îë³ÿîë³ÿ ÒØÕ, ÃÕ

19 Juniper oilJuniperi

aetheroleum

³ç øèøêîÿã³ä Juniperus

communis L.

ìîææåâåëîâîå

ýôèðíîå ìàñëî

ÿë³âöåâà åô³ðíà

îë³ÿîë³ÿ ÒØÕ, ÃÕ

20 Lavender oilLavandulaeaetheroleum

Lavandula angustifoliaMiller (Lavandula officinalis

Chaix)

ëàâàíäîâîå ýôèð-íîå ìàñëî

ëàâàíäîâàåô³ðíà îë³ÿ


21 Lemon oilLimonis

aetheroleum

³ç øê³ðêè Citrus limon (L.)

Burman fil.ëèìîííîå ìàñëî

ëèìîííà

åô³ðíà îë³ÿîë³ÿ

ÒØÕ,

ÑÔ-ìåòîä, ÃÕ

22Linseed oil,virgin

Lini oleumvirginale

³ç íàñ³ííÿ Linumusitatissimum L.

ëüíÿíîå ìàñëî ëëÿíà îë³ÿ îë³ÿ ÒØÕ, ÃÕ

23Maize oil,refined

Maydis oleumraffinatum

³ç íàñ³ííÿ Zea mays L.êóêóðóçíîå ìàñëîðàôèíèðîâàííîå

êóêóðóäçÿíà

îë³ÿðàô³íîâàíà


24 Matricaria oilMatricariaeaetheroleum

Matricaria recutita L.

(Chamomilla recutita L.Rauschert)

ðîìàøêîâîå ýôèð-íîå ìàñëî

ðîìàøêîâàåô³ðíà îë³ÿ


25Mint oil, partlydementholised

Menthaearvensis

aetheroleum

partim mentholiprivum

³ç êâ³òó÷èõ íàäçåìíèõ ÷àñ-òèí Mentha canadensis L.

(syn. M. arvensis L. var.

glabrata (Benth) Fern., M.arvensis var. piperascens

Maliny. Ex Holmes

ìÿòíîå ìàñëî, ÷àñ-òè÷íî äåìåíòîëè-

çîâàííîå

ì'ÿòíà îë³ÿ,÷àñòêîâî äå-

ìåíòàë³çîâàíà


26 Nutmeg oilMyristicaefragrantis

aetheroleum

³ç ÿäåð Myristica fragransHoutt

ìóñêàòíîå ýôèðíîåìàñëî

ìóñêàòíàåô³ðíà îë³ÿ


27Olive oil,refined

Olivae oleumraffinatum

³ç ïëîä³â Olea europaea L.îëèâêîâîå ìàñëîðàôèíèðîâàííîå

îëèâêîâà îë³ÿðàô³íîâàíà

îë³ÿÒØÕ,ÑÔ-ìåòîä, ÃÕ

28 Olive oil, virginOlivae oleumvirginale

³ç ïëîä³â Olea europaea L. îëèâêîâîå ìàñëî îëèâêîâà îë³ÿ îë³ÿÒØÕ,ÑÔ-ìåòîä, ÃÕ

29 Peppermint oil

Menthae

piperitaeaetheroleum

³ç êâ³òó÷èõ ðîñëèí Mentha ×piperita L.

ìÿòû ïåðå÷íîéýôèðíîå ìàñëî

ì'ÿòè ïåðöåâî¿åô³ðíà îë³ÿ


30Rapeseed oil,refined

Rapae oleumraffinatum

³ç íàñ³ííÿ Brassica napus L.òà Brassica campestris L.

ðàïñîâîå ìàñëîðàôèíèðîâàííîå

ðàïñîâà îë³ÿðàô³íîâàíà


31 Rosemary oilRosmariniaetheroleum

³ç êâ³òó÷èõ íàäçåìíèõ ÷àñ-òèí Rosmarinus officinalis L.

ðîçìàðèíîâîå ìàñ-ëî

ðîçìàðèíîâàîë³ÿ


32Sesame oil,

refined

Sesami oleum

raffinatum

³ç íàñ³ííÿ Sesamum indi-

cum L.

êóíæóòîâîå ìàñëî


êóíæóòîâà îë³ÿ

ðàô³íîâàíàîë³ÿ ÒØÕ, ÂÅÐÕ

33Soya-bean oil,hydrogenated

Soiae oleumhydrogenatum

³ç íàñ³ííÿ Glycine soja Sieb.òà Zucc. òà Glycine max (L.)

Merr. (G. hispida (Moench)Maxim.

ñîåâîå ìàñëî, ãèä-ðîãåíèçèðîâàííîå

ñîºâà îë³ÿ,ã³äðîãåí³çîâàíà

îë³ÿÃÕ, àòîìíî-àáñîðá. ñïåêòð.

34Soya-bean oil,refined

Soiae oleumraffinatum

³ç íàñ³ííÿ Glycine soja Sieb.

òà Zucc. òà Glycine max (L.)Merr. (G. hispida (Moench)

Maxim.

ñîåâîå ìàñëî ðàôè-íèðîâàííîå

ñîºâà îë³ÿðàô³íîâàíà

îë³ÿ ÃÕ

35Sunflower oil,refined

Helianthi annuioleum

raffinatum

³ç íàñ³ííÿ Helianthus an-nuus C.

ïîäñîëíå÷íîå ìàñ-ëî ðàôèíèðîâàííîå

ñîíÿøíèêîâàîë³ÿ

ðàô³íîâàíà



Ä

13








ïðåïàðàòó

ïðå-ïà-ðàò

ÃÔÕI


ìåòîäèê

36 Tea tree oilMelaleucaeaetheroleum

³ç ïàãîí³â Melaleuca

alternifolia (Maiden andBetch) Cheel, M. linariifolia

Smith, M. dissitiflora F.

Mueller òà/àáî ³íø³ âèäèMelaleuca

÷àéíîãî äåðåâàýôèðíîå ìàñëî

÷àéíîãî äåðåâàåô³ðíà îë³ÿ


37 Thyme oilThymiaetheroleum

³ç êâ³òó÷èõ íàäçåìíèõ ÷àñ-

òèí Thymus vulgaris L. àáîT. zygis Loefl. ex L. àáî

ñóì³ø³ îáîõ âèä³â

÷àáðåöà ýôèðíîåìàñëî

÷åáðåöþåô³ðíà îë³ÿ


38Wheat-germ oil,refined

Tritici aestivioleum

raffinatum

³ç çàðîäê³â çåðåí Triticumaestivum L.

ïøåíèöû çàðîäû-øåé çåðåí ìàñëî


ïøåíèö³ çà-ðîäê³â çåðåí

îë³ÿðàô³íîâàíà


39Wheat-germ oil,virgin

Tritici aestivioleum virginale

³ç çàðîäê³â çåðåí Triticumaestivum L.

ïøåíèöû çàðîäû-øåé çåðåí ìàñëî

ïøåíèö³ çà-

ðîäê³â çåðåíîë³ÿ



¹

àíãë³éñü-êà íàçâà

ìîíî-ãðàô³¿ ªÔ





óêðà¿íñüêàíàçâà ËÐÑ

íàçâàðå÷îâèíè

ÃÔÕI

íàÿâí³ñòü âªÔ õðîìàòî-ãðàô³÷íèõ òàñïåêòðîìåòð.ìåòîäèê

1 Acacia Acaciae gummi Acacia senegal L. àêàöèÿ àêàö³ÿ

2Aloes,barbados

Aloebarbadensis

Aloe barbadensis Miller àëîý áàðáàäîññêîå àëîå áàðáàäîñüêå ñ³êÒØÕ,ÑÔ-ìåòîä

3 Aloes, cape Aloe capensis Aloe ferox Miller àëîý ôåðîêñ àëîå ôåðîêñ ñ³ê ÑÔ-ìåòîä; ÃÕ

4Carnaubawax

Cera carnaubaCopernicia ceriferaMart.

êàðíàóáñêèé âîñêêàðíàóáñüêèéâ³ñê

â³ñê ÒØÕ

5Guar gala-ctomannan

Guar galacto-mannanum

³ç íàñ³ííÿ Cyamopsistetragonolobus (L.)

Taub.

öèàìîïñèñ ÷åòû-ðåõëîïàñòíûé

ö³àìîïñèñ ÷îòè-ðèëîïàòåâèé

ÒØÕ

6 Myrrh MyrrhaCommiphora molmolEngler òà/àáî ³íø³ âèäè

Commiphora

êîììèôîðà ìîëü-ìîëü

êîì³ôîðà ìîëü-ìîëü

ìèððà ÒØÕ

7 Opium, raw Opium crudum Papaver somniferum L. ìàê ñíîòâîðíûé ìàê ñíîä³éíèé îï³óì ÒØÕ, ÂÅÐÕ

8 Tragacanth Tragacantha

Astragalus gummifer La-

bill. òà äåÿê³ ³íø³ âèäèAstragalus ³ç Çàõ³äíî¿

Àç³¿

àñòðàãàë êàìåäå-íîñíûé

àñòðàãàë êà-ìåä³íîñíèé

òðàãàêàíò ÒØÕ

Таблица 3Продукти рослинного походження, описані в Європейській Фармакопеї

методы: ТСХ, ВЭЖХ, ГХ. Поскольку для оте-чественного ЛРС результаты исследований спомощью этих методов отсутствуют, невоз-можно с определенностью сказать, соответ-ствует ли отечественное ЛРС требованияммонографий ЕФ или нет. Причиной этого яв-ляется сокращение производства фитохими-ческих препаратов в 1990-е годы, котороепривело к сокращению аналитических иссле-дований по фитохимии. Имеющиеся ограни-ченные аналитические исследования [5] сви-детельствуют о том, что отечественное ЛРСможет не соответствовать требованиям ЕФ

по содержанию активных компонентов.Причин такого несоответствия несколько:1. ЕФ описывает, в значительной степени,

требования к ЛРС, которое специально выра-щивается в стандартизованных условиях.Подобный подход к использованию ЛРС ха-рактерен и для других стран [6]. Для Украи-ны же характерно широкое использованиетакже и дикорастущего сырья [7].

2. Предпочтительное применение в стра-нах ЕС специально выращиваемого ЛРС при-водит к селекции растений по требованияммонографий ЕФ. В Украине же селекция по

14


количественному содержанию конкретныхвеществ проводилась лишь для достаточно ог-раниченного количества ЛРС. Разработчикимонографий ГФ ХІ и АНД опирались на обоб-щенные результаты, полученные при сборедикорастущего и культивируемого ЛРС напротяжении нескольких лет.

3. Природные условия Украины отличают-ся от природных условий ряда стран ЕС, и этовлияет на качество ЛРС.

Отметим, что требования ГФ ХІ к отече-ственному ЛРС на стадии разработки ГФ ХІсчитались достаточными, т.к. готовые лекар-ственные средства (ГЛС) из него (настойки,экстракты, комбинированные препараты ит.д.) прошли клинические исследования и по-казали необходимую эффективность.

2. Причины отсутствия в ГФУ монографийна лекарственное растительное сырье

Поскольку Украина является наблюдате-лем в ЕФ и взяла курс на интеграцию в Евро-пейский Союз (ЕС), ГФУ гармонизована сЕФ. В соответствии с концепцией построенияГФУ [8], монография на ЛРС должна вклю-чать в себя европейскую часть, являющуюсяпереводом соответствующей монографииЕФ, и национальную часть, которая не про-тиворечит европейской, но дополняет и уточ-няет ее. Введение требований ГФ ХІ в наци-ональную часть монографий ГФУ на ЛРСприведет к противоречию этих требований севропейской частью, и поэтому, в большин-стве случаев, недопустимо. Простое копиро-вание требований ГФ ХІ в ГФУ бессмыслен-но – лучше прямо пользоваться ГФ ХІ. Раз-работка же национальных монографий наЛРС, отвечающих современным требовани-ям (прежде всего, по контролю хроматогра-фического профиля и количественному со-держанию биологически активных ве-ществ) – дорогостоящая и длительная проце-дура, требующая систематических исследо-ваний большого количества серий ЛРС, охва-тывающих разные годы, регионы и времясбора. Кроме того, разработанные таким об-разом «самобытные» монографии изолируютУкраину от ЕС и противоречат ее курсу на ев-ропейскую интеграцию. Механическое жевведение требований монографий ЕФ в ГФУсразу делает почти все отечественное ЛРСнефармакопейным. ГФУ становится при этомбесполезной.

Отечественными предприятиями ранееиспользовалось преимущественно отече-ственное ЛРС. Поэтому монографии ЕФ на

ЛРС не были востребованы в Украине и небыли введены ни в ГФУ, ни в Дополнение 1 кГФУ.

3. Актуальность введения в ГФУмонографий на ЛРС

За последние годы произошли очень серь-езные изменения. Падение производства ра-стительных препаратов в 1990-е годы приве-ло к сокращению культивирования и сбораЛРС. Затем, когда наметился устойчивыйрост спроса и производства лекарственныхрастительных препаратов, предприятиям-из-готовителям растительных ГЛС пришлосьстолкнуться с проблемой мелких поставщи-ков ЛРС, которые часто предлагали ЛРС не-стандартное и неадекватного качества. Этопривело к тому, что этим предприятиям ока-залось нередко выгоднее завозить ЛРС из-зарубежа (напомним, что к импортному ЛРСотносится и ЛРС из стран СНГ). Кроме того,воспроизводство некоторых препаратов-ге-нериков потребовало импорта в УкраинуЛРС, которое в ней не произрастает (напри-мер, раувольфия, гингко билоба и др.). На всеэто накладывается и растущая заинтересо-ванность отечественных предприятий в каче-стве выпускаемой продукции, а значит и вкачестве исходного ЛРС.

В этой ситуации требования монографийЕФ на ЛРС оказались востребованными, и не-которые предприятия их уже давно применя-ют, поскольку уровень статей ГФ ХІ и другихотечественных АНД их уже не удовлетворя-ет. Таким образом, созрели условия для вве-дения требований ЕФ на ЛРС в ГФУ.

Однако все перечисленные в п. 2 факторыпродолжают действовать. Как же ввести мо-нографии ЕФ на ЛРС в ГФУ?

4. Предлагаемая концепция введениямонографий на ЛРС в ГФУ

Учитывая вышесказанное, можно предло-жить следующую концепцию введения моно-графий на ЛРС в ГФУ.

1. Монографии ГФУ на ЛРС на первом эта-пе должны представлять собой перевод соот-ветствующих монографий ЕФ (в том случае,если они имеются). По мере накопления экс-периментального материала о применении ихк отечественному ЛРС будет вводиться необ-ходимая национальная часть.

2. Все ГЛС, которые регистрируются пос-ле ввода в действие соответствующих моно-графий ГФУ на ЛРС (обычно это через 6 ме-сяцев после публикации), должны использо-

15


вать ЛРС, соответствующее этим монографи-ям.

3. ГЛС, зарегистрированные до ввода вдействие соответствующих монографий ГФУна ЛРС, могут по-прежнему контролироватькачество исходного ЛРС по ГФ ХІ или другимдействующим АНД. Сроки перевода их натребования монографий ГФУ определяютсярегистрирующими органами. По желаниюпроизводителей, они могут раньше перейтина требования монографий ГФУ.

4. Все ЛРС, которое импортируются в Ук-раину (в том числе, и из стран СНГ), должноотвечать требованиям соответствующих мо-нографий ГФУ.

Пункт 1 констатирует тот факт, что мыпока не располагаем достаточным сравни-тельным (с ЕФ) материалом для введения обо-снованной национальной части на ЛРС. Ка-залось бы, можно ввести в национальнуючасть описание внешних признаков и микро-скопию из ГФ ХІ, но эти разделы не всегда со-ответствуют ЕФ. А ведь, как говорилосьвыше, часть ЛРС импортируется из-за рубе-жа. Зачем же вводить дополнительные требо-вания (без какой-либо четко выраженнойцели), если требования ЕФ являются доста-точными? Подобные же соображения мож-но высказать и против введения в нацио-нальную часть раздела ГФ ХІ «Числовые по-казатели» (эти показатели часто не соответ-ствуют ЕФ или отсутствуют в ЕФ), не говоряуже о разделе «Упаковка» (который в такомподробном виде не соответствует целям Фар-макопеи). Разделы «Срок годности» и «Фар-макологическое действие» не являются пред-метом монографий ГФУ.

В этой связи интересным представляетсяопыт Чешской Фармакопеи (ЧФ). Моногра-фии ЧФ на ЛРС являются, как правило, пере-водом соответствующих монографий ЕФ.Если монография на определенный вид ЛРСв ЕФ отсутствует, в ЧФ, при необходимости,вводится национальная статья. Однако, привведении в ЕФ соответствующей моногра-фии, она вводится в ЧФ взамен националь-ной. Примером этому может служить моно-графия на листья и цветки боярышника. ВЧФ,97 [9]присутствует национальная статьяна этот вид ЛРС (в ЕФ,97 подобная моногра-фия отсутствует). С введением в ЕФ 4-го изд.[10]монографии на листья и цветки боярыш-ника данная монография была введена в ЧФвзамен национальной [11].

Возникает вопрос о возможности введе-ния в национальную часть методик и положе-

ний, альтернативных или дополнительных ев-ропейской части. Для того чтобы такие мето-дики или положения были введены в ГФУ, не-обходимо провести обширный сравнитель-ный анализ по ЕФ и альтернативным методи-кам. Возникает вопрос об источниках финан-сирования этих работ. В некоторых случаяхтакие систематические исследования прово-дятся в рамках научных программ отрасле-вых научно-исследовательских институтов ивысших учебных заведений. Однако данныеработы слишком малочисленны (по сравне-нию с номенклатурой ЛРС), поскольку требу-ют больших материальных затрат. Поэтомуфинансировать данные исследования при-дется, как это и принято в мировой практи-ке, заинтересованным предприятиям. Еслитаких заинтересованных предприятий нет,значит нет и необходимости в альтернатив-ных или дополнительных методиках и поло-жениях.

Пункт 2 преследует главную цель – оста-новить разработку ГЛС, использующих ЛРС,не отвечающее требованиям ГФУ. Это каса-ется и воспроизводства уже имеющихся ГЛС.В противном случае по-прежнему будут появ-ляться ГЛС, использующие ЛРС, не отвечаю-щее требованиям ЕФ. Данный пункт создаеттакже некоторый стимул для культивирова-ния ЛРС, отвечающего европейским нормам.

Пункт 3 дает возможность производитьуже зарегистрированные ГЛС на основе ста-рых требований к ЛРС, т.е. не мешает рабо-тать производителям фитопрепаратов. Срокиих перевода на требования ГФУ будут опре-деляться регистрирующими органами в соот-ветствии с налаживанием в Украине произ-водства сырья, соответствующего европейс-ким требованиям, а также со спецификойконкретного ГЛС.

Пункт 4 затрудняет импорт в УкраинуЛРС, не соответствующего европейским тре-бованиям, защищая этим как отечественно-го производителя, так и потребителя.

5. Проблемы составления монографий ГФУна ЛРС

Для удобства анализа выделим следующиегруппы ЛРС:

1. Растения, описанные и в ЕФ, и в ГФ ХI.Их всего более 30 видов.2. Растения, описанные и в ЕФ, и в ГФ ХI,

но для которых описаны различные морфо-логические части.

Например, для березы в ЕФ — листья, вГФ ХI — почки и др.

16


3. Растения, описанные и в ЕФ, и в ГФ ХI,но для которых описаны различные виды.Например, в ЕФ описан эвкалипт шариковый(Eucalyptus globulus Labill.), в ГФ ХI — эвка-липт прутьевидный (Eucalyptus viminalis La-bill.).

4. Растения, описанные в ЕФ и не описан-ные в ГФ ХI. Их более 50 видов.

5. Растения, описанные в ГФ ХI и не опи-санные в ЕФ. Их около 40 видов.

Растения, условно отнесенные ко 2, 3 и 4группам, очевидно, без каких-либо трудно-стей могут быть описаны в ГФУ в соответ-ствии с требованиями ЕФ. Это прежде всегокасается растений мировой флоры, использу-емых фармацевтическими производителямиУкраины в качестве сырья (растения 4 груп-пы). В этом случае монографии ГФУ могутбыть использованы для входного контролякачества.

Для ЛРС, не описанного в ЕФ (5 группа),могут быть составлены национальные моно-графии. Однако при этом необходимо учиты-вать накопленный мировой опыт анализаданного лекарственного растительного сы-рья. Это, прежде всего, требования ведущихФармакопей (Немецкой, Французской и др.),Всемирной Организации Здравоохранения,изложенные в монографиях на лекарствен-ные растения, Руководящих указаний ЕС [8]и др. документов. В том случае, если разрабо-танная монография не отвечают этим требо-ваниям, а являются просто копией соответ-ствующей монографии ГФ ХІ или АНД тако-го же уровня, нет необходимости во введенииее в ГФУ. Безусловно, разработка таких мо-нографий требует соответствующего финан-сирования разработчиков (обычно это отрас-левые научно-исследовательские институтыи высшие учебные заведения) со стороны за-интересованных предприятий.

При составлении монографий ГФУ на ле-карственные растения определенные трудно-сти возникнут с названиями растений на ук-раинском языке. При составлении таблицыиспользованы названия, приведенные в изве-стных источниках [9, 10, 11], однако этот воп-рос нуждается в дальнейшей проработке иобсуждении.

Как видно из Табл. 1, латинское названиемонографии в ЕФ отличается от такового вГФ ХI. В этом случае название растения намедицинской латыни следует, по-видимому,привести в национальной части статьи.

Таким образом, проблема представлениялекарственного растительного сырья в Госу-

дарственной Фармакопее Украины выдвига-ет перед разработчиками целый ряд задач,важнейшая из которых – исходя из практи-ческой направленности монографий ГФУ,найти необходимое соотношение между ев-ропейскими и национальными требованиямик качеству лекарственного растительного сы-рья.

Фармакопейный центр приглашает всех за-интересованных лиц принять участие в об-суждении данной проблемы.

Выводы

Проведен анализ возможности гармониза-ции отечественных требований на лекар-ственное растительное сырье с требования-ми Европейской Фармакопеи. Предложенадля обсуждения концепция введения требо-ваний монографий Европейской Фармако-пеи в Государственную Фармакопею Украи-ны.

ЛИТЕРАТУРА1. Державна Фармакопея України / Державне підприєм-ство «Науково-експертний фармакопейний центр». –1-е вид. –Харків: РІРЕГ, 2001. – 531 с.2. Державна Фармакопея України / Державне підприєм-ство «Науково-експертний фармакопейний центр». –1-е вид. – Доповнення 1. - Харків: РІРЕГ, 2004. – 520 с.3. European Pharmacopoeia. 4th Edition, 4.7. - 2003. - CD-ROM version.4. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общиеметоды анализа. Лекарственное растительное сырье /МЗ СССР. – 11-е изд., доп. – М.: Медицина, 1989. –400 с.5. Сур С.В. Архипова Н.Н., Макаренко А.Г., Лесик И.П.Хромато-масс-спектрометрическое изучение состава иобоснование критериев для стандартизации касторово-го масла // Фізіологічно активні речовини. - 2001.- № 2. -С. 30-32.6. Wenyuan Gao, Wei Jia, Hongquan Duan, Luqi Huang,Xiaohe Xiao, Peigen Xiao, Kee-Yoeup Peak. Good Agri-culture Practice (GAP) and Sustainable Resource Utilizationof Chinese Materia Medica // Plant Biotechnology. –2002. – Vol. 4 (3). – P. 103-107.7. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е.Биологически активные вещества лекарственных рас-тений. – Новосибирск: Наука, 1990. – 333 с.8. Гризодуб О.І. Основні принципи, покладені в основуДержавної Фармакопеї України. Питання введення вдію та правовий статус Державної Фармакопеї Украї-ни // Фармаком. – 2002. - № 1. - C. 2-6.9. Èeský Lekopis 1997. - 2 dil. – Praga: Grada Publishing,spol. s. r. o., 1997 – S. 1491-1492.10. European Pharmacopeia, 4 th ed. – Strasbourg, 2002. –2416 p.11. Èeský Lekopis 1997. - Dopl. 2000. – Praga: GradaPublishing, spol. s. r. o., 2000 – S. 5854-5857.12. WHO monographs on selected medicinal plants. –Geneva: World Heals Organization, 1999. – Volume 1. –299 p.13. WHO monographs on selected medicinal plants. –Geneva: World Heals Organization, 2002. – Volume 2. –357 p.

17

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-200414. Надлежащая производственная практика лекар-ственных средств. Активные фармацевтические ингре-диенты. Готовые лекарственные средства. руководствапо качеству. Рекомендации PIC/S / Под ред. Н.А. Ляпу-нова, В.А. Загория, В.П. Георгиевского, Е.П. Безуг-лой. – К.: Морион, 2001. – 472 с.15. Лікарські рослини: Енциклопедичний довідник /Відп. ред. А.М. Гродзінський. – К.: Голов. ред. УРЕ,1990. – 544 с.16. Смик Г.К. Корисні та рідкісні рослини України:Словник-довідник народних назв. – К.: УРЕ, 1991. –416 с.17. Ковальов В.М., Павлій О.І., Ісакова Т.І. Фармакогно-зія / За ред. В.М. Ковальова. – Харків: Прапор, 2000. –703 с.

РезюмеГризодуб О.І., Георгієвський Г.В.,Тихоненко Т.М., Георгієвський В.П.

Проблеми введення монографій на лікарську

рослинну сировину у Державну Фармакопею

України

Показано необхідність введення у Державну Фар-макопею України (ДФУ) монографій на лікарську рос-линну сировину (ЛРС). На підставі аналізу можливостігармонізації вимог Європейської Фармакопеї (ЄФ) звітчизняними вимогами на ЛРС для всебічного обгово-рення запропонована концепція представлення моно-графій на ЛРС у ДФУ.

SummaryGrisodub A.I., Georgiyevsky G.V.,Tikhonenko T.M., Georgiyevsky V.P.

Matters of introduction of monographs on herbal drags

in the State Pharmacopoeia of Ukraine

The necessity of introduction of monographs on herbaldrugs in State Pharmacopoeia of Ukraine was shown. On abasis of analysis of possibility for harmonization of theEuropean Pharmacopoeia requirements on herbal drugswith the national ones, the conception of presentation of

the monographs on herbal drugs in SPU for overalldiscussion was proposed.

Гризодуб Александр Иванович. Гризодуб Александр Иванович. Гризодуб Александр Иванович. Гризодуб Александр Иванович. Гризодуб Александр Иванович. Окончил хи-мический факультет Харьковского государствен-ного университета (1971). Зав. лабораторией хро-матографии ГП ГНЦЛС. Зам. директора ГП «На-учно-экспертный фармакопейный центр» по на-учной работе (1992). Д.х.н. (1990). Профессор(1996). Действительный член Нью-Йоркской Ака-демии Наук (1994). Член Международной ассоци-ации официальных аналитических химиков(1997).

Георгиевский Геннадий ВикторовичГеоргиевский Геннадий ВикторовичГеоргиевский Геннадий ВикторовичГеоргиевский Геннадий ВикторовичГеоргиевский Геннадий Викторович (р.1969).Окончил Харьковский фармацевтический инсти-тут (1992). К.фарм.н. (1995). Ст. науч. сотр. отделаГосударственной Фармакопеи Украины ГП «На-учно-экспертный фармакопейный центр». Рук.группы «Монографии на лекарственные субстан-ции» отдела ГФУ. Зав. лабораторией физико-хи-мических процессов ГП ГНЦЛС (2001).

Тихоненко Татьяна Михайловна. Тихоненко Татьяна Михайловна. Тихоненко Татьяна Михайловна. Тихоненко Татьяна Михайловна. Тихоненко Татьяна Михайловна. ОкончилаХарьковский государственный университет (1989)и Национальную фармацевтическую академиюУкраины. Работает в ГП НЭФЦ (с 1997). Науч.сотр. группы «Монографии на лекарственныесубстанции» отдела ГФУ ГП НЭФЦ. Ответствен-ный редактор журнала «Фармаком».

Георгиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор Петрович. Окончилфармацевтическое отделение 1-го Московскогомединститута (1959). Работает в ГП ГНЦЛС (с1958). Д.фарм.н. (1980). Чл.-корр. НАН Украины.Директор ГП ГНЦЛС. Директор ГП НЭФЦ. Засл.деятель науки и техники Украины. Рук. работ посозданию Государственной Фармакопеи Украи-ны.

ÓÄÊ 615.11:615.322

Òîâìàñÿí Å.Ê., Êîòîâ À.Ã., Ãðèçîäóá À.È., Ãåîðãèåâñêèé Â.Ï.Ãîñóäàðñòâåííîå ïðåäïðèÿòèå «Íàó÷íî-ýêñïåðòíûé ôàðìàêîïåéíûé öåíòð»Ãîñóäàðñòâåííîå ïðåäïðèÿòèå «Ãîñóäàðñòâåííûé íàó÷íûé öåíòð ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ»

Ê âîïðîñó î ââåäåíèè â Ãîñóäàðñòâåííóþ Ôàðìàêîïåþ Óêðàèíû îáùèõñòàòåé íà ëåêàðñòâåííîå ðàñòèòåëüíîå ñûðüå è ñðåäñòâà

Проведен анализ представления лекарственного растительного сырья в ведущих Фармакопеях и документах ВОЗ.Представлены проекты общих статей ГФУ на «Лекарственное растительное сырье», «Лекарственные растительныесредства», «Растительные чаи».

Растения используются в медицинскихцелях в течение многих столетий. Несмотряна значительный прогресс современной орга-нической химии, обеспечивающий производ-ство высококачественных синтетическихбиологически активных веществ (БАВ), кото-рые используются в фармации, популярностьрастительных препаратов во всем мире нетолько не падает, но и неуклонно возрастает.

Подобная тенденция обусловлена более мяг-ким действием фитопрепаратов, меньшимпривыканием и практическим отсутствиемпобочных эффектов.

Несмотря на многовековые традиции фи-тохимии-фармакогнозии, проблемы стандар-тизации, контроля качества растительныхлекарственных средств и сырья остаются ак-туальными повсеместно. Это связано с тем,

18


что на состав БАВ в растениях влияют такиефакторы окружающей среды, как температу-ра воздуха, осадки, освещенность мест про-израстания, химический состав грунта, меха-нические повреждения и болезни растений,паразиты и др. Разнообразные виды одногорода растения, которые аналогичны по мор-фологическим признакам, имеют значитель-ные отличия в химическом составе. СоставБАВ может изменяться в процессе вегетации,заготовки, при сушке и хранении сырья, за-висит от способа получения полупродук-та/субстанции [1, 2].

В настоящее время сырьевая база лекар-ственного растительного сырья в Украинеформируется на основе:— заготовок сырья от дикорастущих лекар-

ственных растений;— заготовок от культивируемых лекарствен-

ных растений;— импорта лекарственного растительного

сырья.

Номенклатура заготавливаемых дикорас-тущих растений составляет около 155 видов,причем ряд морфологических типов сырья,таких как цветки и плоды боярышника, цвет-ки липы, корни одуванчика и солодки, плодычерники, можжевельника, жостера слаби-тельного и др. заготавливаются почти исклю-чительно от дикорастущих растений. В про-мышленную культуру взяты около 55 видовлекарственных растений. К импортируемымвидам относится прежде всего сырье тропи-ческих лекарственных растений или видов,не произрастающих на территории Украины(лимонник, женьшень и др.). Следует такжеотметить, что некоторые виды лекарственно-го растительного сырья являются предметомэкспорта [2, 3]. Спрос на некоторое лекар-ственное сырье на внешнем рынке не осла-бевает, а следовательно, наша страна вполнеможет претендовать на некие позиции в этойобласти.

В настоящее время отечественное лекар-ственное растительное сырье в Украине кон-тролируется по ГФ ХI, а входной контрольимпортного сырья проводят по специфика-циям фирм и монографиям ведущих Фарма-копей, в том числе и Европейской Фармако-пеи (ЕФ), если они есть [4-12]. Создание еди-ной государственной законодательной базыпо контролю качества как лекарственногорастительного сырья, так и готовых лекар-ственных средств на основе растительногосырья сегодня, безусловно, является актуаль-ной задачей ГФУ [18, 19].

Исходя из концепции гармонизации наци-ональной законодательной базы по контролюкачества лекарственных средств с Европей-ской Фармакопеей, в качестве базового доку-мента при разработке статей ГФУ использу-ются соответствующие статьи ЕФ. В ЕФ [6],в разделе «Общие монографии» представле-но три общих статьи: «Лекарственные расти-тельные средства», «Лекарственное расти-тельное сырье» и «Лекарственные раститель-ные чаи».

Целью данной работы является анализ со-стояния данного вопроса в ведущих Фарма-копеях и других документах, а также обсуж-дение проектов общих статей, разработан-ных для введения в Дополнение 2 к ГФУ 1-гоизд. (ГФУ 1.2).

В указанных трех статьях ЕФ очень обоб-щенно приведены определение растительно-го сырья, лекарственных средств на его осно-ве, требования к их производству, проведе-нию испытаний по идентификации, чистотеи количественному определению.

Полностью в редакции ЕФ эти статьи при-ведены в Британской, Итальянской и Чешс-

кой Фармакопеях [7, 8, 9].В Американской Фармакопее [10] подоб-

ные общие статьи, характеризующие расти-тельные препараты и сырье, отсутствуют, од-нако в разделе «Общие статьи» (GeneralChapters) присутствует статья «Лекарствен-ные растительные средства» («Vegetabledrugs»), где приводятся метод отбора проб иряд методов фармакогнозии (посторонниепримеси, общая зола и др.). В списке моно-графий имеются статьи на конкретное лекар-ственное сырье и препараты.

В Японской Фармакопее [11] в разделе«Общие замечания» приведена статья «Об-щие правила для лекарственного сырья»(“General rules for crude Drugs”), куда вклю-чен перечень сырья растительного, животно-го происхождения, полученных из него выде-лений, экстрактов, клеточных включений иминералов, которые описаны в монографияхФармакопеи. Далее перечислены виды сырья(цельное, нарезанное или измельченное),обычные условия сушки (при температуре60 оС), требования к чистоте (отсутствие по-сторонних примесей), условия хранения иобеззараживания. Здесь же указано, что мо-нография Фармакопеи на растительное сы-рье обычно характеризует наиболее типич-ного представителя данного вида сырья, априведенные свойства, значения и пределымогут быть использованы в качестве справоч-

19


ных, кроме микроскопических характерис-тик.

Во Французской Фармакопее Х изданияимеется общая статья «Лекарственное расти-тельное сырье», которая по своей редакцииотличается от ЕФ, однако и здесь весьмакратко приводится понятие растительногосырья и общие требования по контролю егокачества. Дана также информация о структу-ре монографии на конкретное лекарственноерастительное сырье [12].

Особое внимание вопросам стандартиза-ции лекарственного растительного сырьяуделяет ВОЗ [12-15]. Изданы отдельные кни-ги по методам контроля качества лекарствен-ного сырья и препаратов [12], 2 тома моногра-фий на отдельные лекарственные растения,где приведены подробные описания 58 рас-тений, и др. [14, 15]. Следует особо подчерк-нуть, что данные документы предварены ука-занием о рекомендательном характере при-веденных монографий и методов, о нераз-рывной связи их с Международной Фармако-пеей. Они не предполагают заменить собойсоответствующие статьи фармакопей илилюбых национальных законодательных доку-ментов.

Как известно, производство лекарствен-ных средств в странах ЕС проводится в соот-ветствии с требованиями надлежащей произ-водственной практики (GMP, НПП). Как пра-вило, большинство общих статей ЕФ основа-но на соответствующих Директивах ЕС и не-разрывно связано с требованиями НПП. Так,приложение «Руководства по надлежащейпроизводственной практике лекарственныхсредств» включает раздел «Производство ле-карственных средств из растительного сы-рья», где приведены основные принципыконтроля исходного сырья, требования к не-обходимой документации [16]. Требования ккачеству лекарственных средств раститель-ного происхождения и их различия с лекар-ственными препаратами, содержащими ак-тивные субстанции с установленной хими-ческой структурой, изложены в Директиве75/318/ЕЕС с поправками [17].

Как указывалось выше, по сей день как вУкраине, так и в других странах бывшегоСССР контроль качества лекарственного ра-стительного сырья и фитопрепаратов на егооснове проводят по ГФ ХI [4, 5] и ГОСТ. ВГФ ХI в разделе «Методы анализа лекар-ственного растительного сырья» приводятсятипы сырья и методы фармакогнозии [4]. Ввыпуск 2 включены 88 статей на конкретные

виды сырья [5]. Лекарственное растительноесырье в ГФ ХI классифицировано по морфо-логическим группам: листья, травы, цветки,плоды, корни, корневища, луковицы, клубни,клубнелуковицы. Для каждой группы даноопределение, обычные сроки сбора, особен-ности внешнего вида, микроскопические, ги-стохимические характеристики и числовыепоказатели. Пробоподготовка и техника про-ведения микроскопических испытаний, атакже дополнительная информация по каж-дой группе сырья приводится в статьях «Тех-ника микроскопического и микрохимическо-го исследования лекарственного раститель-ного сырья», «Люминесцентная микроско-пия». К общим статьям, описывающим ужелекарственный растительный препарат, мож-но отнести статьи «Сборы», «Эфирные мас-ла», в которых приводится описание, некото-рые аспекты производства и перечень пока-зателей, контролируемых для сборов и эфир-ных масел. Безусловно, к общим статьям напрепараты из лекарственного растительногосырья следует отнести также статьи «Экст-ракты» и «Настойки» [5]. Данные статьи ужеподробно обсуждены и включены в ГФУ [18-20].

Проект статьи «Лекарственное раститель-

ное сырье» представляет собой адаптирован-ный перевод соответствующей статьи ЕФ исостоит из разделов «Описание», «Производ-ство», «Идентификация», «Испытания на чи-стоту», «Количественное определение» и«Хранение».

В разделе «Производство» указаны путиполучения сырья - культивирование или сбордикорастущих растений. Гарантией качестваявляются условия культивирования, сбора,сортировки, сушки, измельчения и хранения.Указывается на необходимость проверки ле-карственного сырья на наличие загрязняю-щих агентов, в случае проведения деконтами-нации - отсутствие остаточных вредных ве-ществ. Контроль этих общих требований про-водят методами, приведенными в соответ-ствующих статьях раздела «2.8. Методы фар-макогнозии» (некоторые статьи данного раз-дела уже представлены в Дополнении 1 кГФУ 1(ГФУ 1.1) [19], а остальные планируют-ся к включению в Дополнение 2). В рамкахФармакопеи не обсуждаются условия куль-тивирования, сбора, сортировки и сушки.

В разделе «Идентификация» указана не-обходимость подтверждения подлинностисырья по внешним признакам (макроскопия)и, как правило, микроскопическими иссле-

20


дованиями. В монографиях ЕФ на конкрет-ное растительное сырье в разделе «Иденти-фикация» в большинстве случаев в качествепервого теста характеризуются внешниепризнаки конкретных исследуемых частейрастения, в основном цельного или, если этонарезанное сырье (например, кора) – наре-занного. В качестве второго испытания при-водят микроскопические характеристикисредне измельченного порошка растения.

В проекте общей статьи помимо этих ис-следований указывается применимость лю-бых других объективных методов определе-ния подлинности. ЕФ в этом смысле отдаетпредпочтение методу тонкослойной хромато-графии.

В разделе «Испытания на чистоту» приво-дится перечень основных показателей каче-ства. К ним относятся испытания на посто-ронние примеси (2.8.2), по общей золе(2.4.16), золе, нерастворимой в кислоте хло-ристоводородной (2.8.1), специфические ис-пытания на активные действующие веще-ства, характерные для данного конкретногосырья, требования по экстрагируемым веще-ствам, показателю набухания (2.8.4), показа-телю горечи (2.8.15), потере в массе при высу-шивании (2.2.32), определению воды (2.2.13),остаточным количествам пестицидов (2.8.13),тяжелым металлам, микробиологической чи-стоте, содержанию афлотоксинов и содер-жанию радионуклидов.

В разделе «Количественное определение»указывается: «Если нет других указаний, про-водят количественное определение лекар-ственного растительного сырья подходящимметодом». Данная общая фраза наиболее оп-равдана и приемлема, так как не всегда воз-можно провести количественное определе-ние активного действующего вещества ле-карственного сырья. А если возможно, и тестпозволяет гарантировать качество сырья,применимы как спектрофотометрические,хроматографические (ТСХ, ГХ и ВЭЖХ), таки титримитрические методы.

Как указано в разделе «Общие замеча-ния» ГФУ [18], «Информация и рекоменда-ции, приводимые в разделе «Хранение», неявляются исчерпывающими фармакопейны-ми требованиями, и компетентные уполномо-ченные органы могут указывать конкретныеусловия хранения, обязательные для испол-нения. Описанные в Фармакопее продуктыследует хранить таким образом, чтобы пре-дотвратить их загрязнение и, по возможнос-

ти, разложение». В данном разделе статьиприведено только указание: «В защищенномот света месте». В принципе, условия хране-ния лекарственного растительного сырьявесьма подробно описаны в соответствую-щих требованиях GMP [16]. Использованиетребований ныне действующих ГОСТ иГФ XI в ГФУ, на наш взгляд, нецелесообраз-но, так как в ряде моментов они устарели инеактуальны. На наш взгляд, за рамками об-суждения в Фармакопее следует оставитьтакже вопросы, связанные с упаковкой, мар-кировкой и транспортированием лекарствен-ного растительного сырья, приведенные вГФ ХI [5].

Таким образом, обсуждаемый проекточень обобщенно охватывает практическивсе узловые моменты стандартизации и кон-троля качества лекарственного растительно-го сырья. Однако, если некоторые требова-ния статьи подкреплены соответствующимиметодами анализа раздела «2.8. Методы фар-макогнозии» и предполагаемыми нацио-нальными статьями в рамках данного разде-ла, то иные оставлены на регулирование на-циональными и межнациональными доку-ментами.

Возникает вопрос, следует ли рассматри-ваемый проект статьи дополнять националь-ной частью, где приводить:

1. классификацию растительного сырья1. классификацию растительного сырья1. классификацию растительного сырья1. классификацию растительного сырья1. классификацию растительного сырьяпо морфологическим группампо морфологическим группампо морфологическим группампо морфологическим группампо морфологическим группам: листья, травы,цветки, плоды, семена, кора, корни, корневи-ща, луковицы, клубни, клубнелуковицы, атакже указывать их макроскопические имакроскопические имакроскопические имакроскопические имакроскопические имикроскопические характеристики, число-микроскопические характеристики, число-микроскопические характеристики, число-микроскопические характеристики, число-микроскопические характеристики, число-вые показатели.вые показатели.вые показатели.вые показатели.вые показатели. Безусловно, эту информа-цию можно получить из множества пособийпо фитохимии. Если данная информация не-актуальна для описанного в Фармакопеях ле-карственного сырья, она может быть полез-на при разработке новых статей на ранее неописанное в Фармакопеях или прочих доку-ментах сырье. Кроме того, имеются некиерасхождения в подходах к описанию внешне-го вида и микроскопических характеристиксырья в ГФ ХI и ЕФ (например, степень из-мельчения при микроскопическом анализе).Эти расхождения, на наш взгляд, целесооб-разно рассматривать уже на стадии разработ-ки каждой конкретной монографии.

Классификацию по морфологическимгруппам в национальную часть проекта ста-тьи мы предлагаем пока не включать. В слу-чае необходимости, можно вернуться к рас-смотрению вопроса о включении в нацио-

21


нальную часть макроскопических и микро-скопических характеристик, числовых пока-зателей после пересмотра информации, при-веденной в ГФ ХI, в свете современных ис-следований.

2. рекомендации по предельно допусти-2. рекомендации по предельно допусти-2. рекомендации по предельно допусти-2. рекомендации по предельно допусти-2. рекомендации по предельно допусти-мому содержанию тяжелых металловмому содержанию тяжелых металловмому содержанию тяжелых металловмому содержанию тяжелых металловмому содержанию тяжелых металлов. В ЕФметоды определения тяжелых металлов в ра-стительном сырье приводятся (2.4.27), одна-ко рекомендаций по пределам их допустимо-го содержания нет. Их нет и в большинствемонографий ЕФ, в ГФ ХI, в АНД. На стадииконтроля лекарственных растительныхсредств уже указываются пределы содержа-ния (например, они приведены в ГФУ в наци-ональной части статьи «Экстракты»). В доку-ментах ВОЗ рекомендованы следующие нор-мы: свинец — не более 10 мг/кг, кадмий —0.3 мг/кг растительного сырья. Вероятно, встранах ЕС для культивируемых растений эторегулируется правилами надлежащей сельс-кохозяйственной практики (GAP) либо соот-ветствующими директивами, либо докумен-тами уполномоченных органов.

В отечественной практике пределы содер-жания токсичных элементов (в том числе итяжелых металлов) для продовольственногосырья и пищевых продуктов установлены науровне не более: свинец — 10 мг/кг (МУ№ 01-19/47-11), кадмий — 1.0 мг/кг (МУ№ 01-19/47-11), мышьяк — 0.1 мг/кг(ГОСТ 26930-86), ртуть — 0.1 мг/кг(ГОСТ 26927-86), медь — 100 мг/кг (МУ№ 01-19/47-11).

На наш взгляд, контроль содержания тя-желых металлов необходимо ввести для рас-тительного сырья, предназначенного для фа-совки в потребительскую упаковку и приме-нения для приготовления лекарственныхформ. В этой связи в национальную частьпроекта можно ввести испытание «Тяжелыеметаллы» с формулировкой, часто применя-емой в монографиях на химические субстан-ции: «Не более 0.01 % (100 ppm), если лекар-ственное растительное сырье предназначенодля приготовления сборов или чаев», и при-вести пробоподготовку для проведения испы-тания методом А, описанным в «2.4.8. Тяже-лые металлы» [18]. Тем самым, при отсут-ствии оборудования для проведения данногоиспытания методом атомно-абсорционнойхроматографии («2.4.27. Тяжелые металлы врастительном сырье и жирных маслах»), мыдадим отечественным производителям аль-тернативную возможность проведения испы-тания на тяжелые металлы.

3. рекомендации по пределам содержа-3. рекомендации по пределам содержа-3. рекомендации по пределам содержа-3. рекомендации по пределам содержа-3. рекомендации по пределам содержа-ния радионуклидовния радионуклидовния радионуклидовния радионуклидовния радионуклидов. Радиоактивное загряз-нение сырья природного происхождения мо-жет происходить как природными радионук-лидами, иррадиацией, использованной длястерилизации и микробиологической декон-таминации, так и быть следствием техноген-ных катастроф. При определении радиоак-тивных примесей, таких как стронций-90,йод-131, цезий-134 и 137, плутоний- 239 в до-кументах ВОЗ ссылаются на общепринятыеметодики МАГАТЭ. В Украине после авариина Чернобыльской АЭС радиоактивный кон-троль сырья стал еще более значимым и не-пременно проводится в СЭС по методике эк-спрессного радиометрического определенияпо гамма-излучению, документу ДР-97 «Допу-стимі рівні вмісту радіонуклідів в продуктаххарчування та питній воді» (МВИ 4/36,МИ 12-05-99 и МІ 12-08-99). Установленныепределы содержания стронция-90 составля-ют не более 200 Бк/кг, цезия-137 — не более600 Бк/кг.

Предлагаем в национальную часть проек-та статьи включить данное испытание в такойредакции: «Лекарственное растительное сы-рье должно выдерживать требования, уста-новленные компетентным уполномоченныморганом по содержанию радионуклидов дляпродуктов питания и питьевой воды».

Возможно, имеет смысл обсудить целесо-образность создания единого сборника нор-мативных актов, документов или методичес-ких указаний по вопросам условий сбора,сушки, правил культивирования, хранениясырья, материалам упаковки, маркировке итранспортировании лекарственного расти-тельного сырья.

Статья ЕФ «Лекарственные растительные

средства» состоит только из раздела «Опре-деление», где указывается, что данные препа-раты «получают из лекарственного расти-тельного сырья посредством экстракции, ди-стилляции, отжима, фракционирования, очи-стки, концентрирования или ферментации. Крастительным препаратам относятся истол-ченное или измельченное в порошок расти-тельное сырье, настойки, экстракты, эфир-ные масла, отжатые соки и обработанныесоки растений». Далее приводится упомина-ние только одной лекарственной формы - ле-карственных растительных чаев.

Уже в самом определении ЕФ, на нашвзгляд, имеется противоречие с существую-щим в настоящее время в Украине представ-лением о растительных лекарственных сред-

22


ствах: к растительным препаратам, помимоистолченного или измельченного в порошокрастительного сырья, относятся целые илинарезанные листья, цветы, корни, плоды, се-мена и др. лекарственное растительное сы-рье, расфасованное, упакованное, сопровож-даемое соответствующей инструкцией к при-менению.

«Класифікатор лікарських форм», утверж-денный Приказом МЗ Украины № 235 от26.06.2002 года [21], приводит перечень ле-карственных форм растительного сырья иописывает брикеты, сборы, чаи в разделе 2.5«Лекарственное растительное сырье», а на-стойки, экстракты, бальзамы, соки, слизи –в разделе 2.3 «Жидкие лекарственные фор-мы».

Если лекарственные формы «Экстракты»,«Растительные жирные масла» и «Лекар-ственные растительные чаи» в ЕФ описыва-ются в соответствующих общих статьях раз-дела «Общие монографии», прочие лекар-ственные формы (сборы, брикеты, слизи) неупоминаются вообще.

Сборы и брикеты как лекарственныесредства применяются, конечно же, послеопределенной обработки, и в ряде случаевони аналогичны растительным чаям и приме-няются перорально. В этих случаях возмож-но их характеризовать как чаи. Однако онитакже применяются для приготовления ра-створов для наружного, ректального, ваги-нального и др. применения.

Слизи - безазотистые вещества полисаха-ридной природы, образующиеся путем ос-лизнения клеточных стенок. Благодаря спо-собности образовывать коллоидные раство-ры и обволакивающие студни, их использу-ют как обволакивающие и смягчающие сред-ства при заболеваниях верхних дыхательныхпутей, органов пищеварения, ожогах. Сырь-ем для промышленного получения слизей яв-ляются, например, семена подорожникабольшого, льна, клубни ятрышника, корниалтея, просвирника и др. Слизи предназначе-ны для перорального и наружного примене-ния.

К растительным лекарственным сред-ствам относят и соки в натуральном виде илиобработанные (например, сок подорожника,алоэ, черноплодной рябины). В ЕФ они так-же не описаны, а лишь упомянуты в перечнерастительных препаратов.

Исходя из вышеприведенных соображе-ний, мы хотим обсудить возможность введе-

ния национальной статьи взамен общей ста-тьи ЕФ «Лекарственные растительные сред-

ства», где будет дополнено определение ле-карственных растительных средств, будутперечислены способы их получения, приве-дено краткое описание лекарственных форм,не описанных в ЕФ и ГФУ (в частности, сбо-ров и брикетов). Вопрос включения в статьюопределения слизей и соков, на наш взгляд,кажется неактуальным, так как в качествелекарственных средств они в настоящее вре-мя практически не выпускаются и являютсялишь компонентами ряда препаратов.

Мы приводим как европейскую статью (вкачестве информации), так и редакцию про-екта национальной статьи, которая не проти-воречит европейской, а более полно описы-вает эту категорию препаратов.

Проект общей статьи «Лекарственные ра-

стительные чаи» состоит из разделов «Опре-деление», «Идентификация» «Испытания начистоту», «Хранение». В разделе «Определе-ние» указаны два вида поставки чая — «inbulk» и в пакетах, что по [21] соответствуетклассификации - дозированные и недозиро-ванные чаи.

В разделе «Испытания на чистоту» дляфиточаев в пакетах приведено испытание«Однородность массы». Следует отметить,что в статье ЕФ «Лекарственные раститель-ные средства» упоминаются растворимыечаи, которые в статье «Лекарственные расти-тельные чаи» не обсуждаются.

На наш взгляд, европейскую статью мож-но дополнить информацией о растворимыхчаях, которые также присутствуют на фарм-рынке Украине (например, фиточай успоко-ительный растворимый «Тривалумен», про-изводства ЗАО «НПЦ Борщаговский ХФЗ» идр). Поскольку растворимые чаи состоят изпорошка или гранул одного или несколькихрастительных лекарственных средств, онидолжны выдерживать требования к порош-кам и гранулам. Соответственно, в нацио-нальной части можно привести перечень ре-комендуемых испытаний и показателей: раз-мер гранул, измельченность порошка, массасодержимого контейнера, время растворе-ния, рН, потеря в массе при высушивании,микробиологическая чистота и др. Чаи, со-держащие известные терапевтически актив-ные компоненты, стандартизируют по этимкомпонентам. В состав чаев могут быть вве-дены эфирные масла, соли. Безусловно, вэтих случаях следует контролировать конк-

23


ретные показатели, характеризующие каче-ство и количество таких компонентов.

Таким образом, в Фармакопею можно аб-солютно безболезненно, не вступая в проти-воречие, с одной стороны, с концепцией гар-монизации ГФУ с ЕФ, с другой стороны, синтересами отечественных производителейсырья и препаратов, вводить общие статьи налекарственное растительное сырье и препа-раты, тем самым обобщенно представив уз-ловые моменты стандартизации столь слож-ного материала в рамках ГФУ.

Приглашаем всех заинтересованных спе-циалистов к обсуждению проектов статей иподнятых дискуссионных вопросов.

ЛИТЕРАТУРА1. Сур С.В., Гриценко Э. Н. Проблемы и перспективыразработки и внедрения современных лекарственныхсредств растительного происхождения // Фарматека. -2001. - №9/10. – С. 10-14.2. Солодовниченко Н.М., Журавльов М.С., Кова-льов В.М. Лікарська рослинна сировина та фитопрепа-рати: Навч. посібник. - Харків: Вид-во НФаУ, 2003. - 408 с.3. Растения для нас: Справочник / Под ред. Г.П. Яков-лева. - Санкт-Петербург: Учебная книга, 1996. - 652 с.4. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 1. Общиеметоды анализа / МЗ СССР. - 11-е изд., доп. – М.: Ме-дицина, 1987. – 336 с.5. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 2. Общиеметоды анализа. Лекарственное растительное сырье /МЗ СССР. - 11-е изд., доп. – М.: Медицина, 1989. - 400 с.6. European Pharmacopeia, 4 th ed. – Strasbourg, 2002. –2416 p.7. British Phatmacopoeia. – V. 1. – London, HMSO,2001 – 1389 p.8. Pharmacopea ufficiale della Republica Italiano, XI ed. –Roma, 2002. – 1230 p.9. Èeský Lekopis, 2002. – 1 dil. – Praha: Grada Publishinga.s., 2002. – 1133 s.10. United States Pharmacopeia, 24 ed. - Rockville, 2000. –2569 p.11. The Japanese Pharmacopeia, XIV ed. – 2001. - 1090 p.12. Pharmacopйe Française, X ed.- Paris, 1989.13. Quality control methods for medicinal plant materials. -Geneva: WHO, 1998.14. WHO monographs on selected vtdicinal plants. –Geneva: World Heals Organization, 1999. – Volume 1. –299 p.15. WHO monographs on selected vtdicinal plants. - Ge-neva: World Heals Organization, 2002. - Volume 2. - 357 p.16. Надлежащая производственная практика лекар-ственных средств / Под. ред. Н.А. Ляпунова, В.А. Заго-рия, В.П. Георгиевского, Е.П. Безуглой. - К.: МОРИОН,1999.- 896 с.17. Надлежащая производственная практика лекар-ственных средств. Активные фармацевтические ингре-диенты. Готовые лекарственные средства. Руководствапо качеству. Рекомендации PIC/S / Под. ред. Н.А. Ля-пунова, В.А. Загория, В.П. Георгиевского, Е.П. Безуг-лой. - К.: МОРИОН, 2001. - 472 с.18. Державна Фармакопея України / Державне під-приємство «Науково-експертний фармакопейнийцентр». - 1-е вид. – Харків: РІРЕГ, 2001. - 556 с.

19. Державна Фармакопея України / Державне під-приємство «Науково-експертний фармакопейнийцентр». - 1-е вид. – Харьків: РІРЕГ, 2001. - Доповнен-ня 1. - 2004. - 494 с.20. Товмасян Е.К., Котов А.Г., Гризодуб А.И., Георгиев-ский В.П. К вопросу о стандартизации экстрактов и на-стоек в Государственной Фармакопее Украины // Фар-маком. - 2003. - № 4. - С. 13-16.21. Класифікатор лікарських форм // ЕженедельникАптека. - № 31 (352). - 2002. - С. 71-74.

РезюмеТовмасян Є.К., Котов А.Г.,Гризодуб О.І., Георгієвський В.П.

До питання про введення у Державну Фармакопею

України загальних статей на лікарську рослинну

сировину та препарати

Проведено аналіз подання лікарської рослинної си-ровини у провідних Фармакопеях і документах ВООЗ.Представлено проекти загальних статей ДФУ «Лікарсь-ка рослинна сировина», «Лікарські рослинні засоби»,«Рослинні чаї».

SummaryTovmasyan E.K., Kotov A.G.,Grisodub A.I., Georgiyevsky V.P.

To the matter of introduction in the State

Pharmacopoeia of Ukraine of general monographs on

the herbal drugs and herbal drug preparations

An analysis of herbal drug introduction in leading Pha-rmacopoeias and WHO documents was conducted. Draftsof SPU general monographs on «Herbal drug preparation»,«Herbal drugs», «Herbal teas» were presented.

Товмасян Ерануи Карапетовна. Товмасян Ерануи Карапетовна. Товмасян Ерануи Карапетовна. Товмасян Ерануи Карапетовна. Товмасян Ерануи Карапетовна. ОкончилаЕреванский государственный университет (1984).К.б.н. Руководитель направления «Общие статьина дозированные лекарственные средства и фар-мако-технологические испытания» отдела ГФУ ГПНЭФЦ.

Котов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей Георгиевич (р. 1960). ОкончилХарьковский фармацевтический институт (1982).Ст. науч. сотр. сектора природных гетероцикли-ческих соединений ГП ГНЦЛС (2001). К.фарм.н.(1996). Ст. науч.сотр. (2004).

Гризодуб Александр Иванович. Гризодуб Александр Иванович. Гризодуб Александр Иванович. Гризодуб Александр Иванович. Гризодуб Александр Иванович. Окончил хи-мический факультет Харьковского государствен-ного университета (1971). Зав. лабораторией хро-матографии ГП ГНЦЛС. Зам. директора ГП «На-учно-экспертный фармакопейный центр» по на-учной работе (1992). Д.х.н. (1990). Профессор(1996). Действительный член Нью-Йоркской Ака-демии Наук (1994). Член Международной ассоци-ации официальных аналитических химиков(1997).

Георгиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор Петрович. Окончилфармацевтическое отделение 1-го Московскогомединститута (1959). Работает в ГП ГНЦЛС (с1958). Д.фарм.н. (1980). Чл.-корр. НАН Украины.Директор ГП ГНЦЛС. Директор ГП НЭФЦ. Засл.деятель науки и техники Украины. Руководительработ по созданию Государственной ФармакопеиУкраины.

24


ПРОЕКТ

ЛІКАРСЬКА РОСЛИННА

СИРОВИНА

Plantae medicinales

ВИЗНАЧЕННЯ

Лікарська рослинна сировина - головним чи-ном, цілі, здрібнені або нарізані рослини абочастини рослин, у тому числі водорості, гри-би або лишайники в необробленому – зви-чайно у висушеному , іноді - у свіжому ви-гляді. Соки рослин, які не були піддані спе-ціальній обробці, також є сировиною длялікарських рослинних засобів. Назва рослин-ної сировини точно визначається ботанічноюнауковою назвою вихідної рослинної сирови-ни згідно з біномінальною системою (рід, вид,тип, автор).

ВИРОБНИЦТВО

Лікарську рослинну сировину одержуютькультивуванням або збором дикорослих рос-лин. Для гарантії якості рослинної сировинисуттєвими є умови культивування, збору, сор-тування, сушіння, здрібнення та зберігання.

Лікарська рослинна сировина має бути, поможливості, вільною від забруднень, таких якгрунт, пил, сміття, а також грибів, комах та ін-ших забруднень тваринного походження. Усировині не мають виявлятися ознаки гнит-тя.

Якщо проводилася деконтамінація, слід пока-зати, що компоненти рослинної сировини непошкоджені та що в сировині не залишилосяшкідливих домішок. При проведенні деконта-мінації лікарської рослинної сировини забо-роняється застосування етиленоксиду.

ІДЕНТИФІКАЦІЯ

Лікарську рослинну сировину ідентифіку-ють, використовуючи її макроскопічні і, якщонеобхідно, мікроскопічні характеристики, атакож інші необхідні випробування (наприк-лад, тонкошарову хроматографію).

ВИПРОБУВАННЯ НА ЧИСТОТУ

Якщо немає інших зазначень в окремійстатті, проводять випробування на вміст сто-ронніх домішок (2.8.2).

Лікарська рослинна сировина, яка може бутифальсифікована, має піддаватися відповіднимспецифічним випробуванням.

Якщо необхідно, лікарська рослинна сирови-на має витримувати інші випробування, на-приклад, визначення загальної золи (2.4.16),золи, не розчинної у кислоті хлористовод-невій (2.8.1), показника набрякання (2.8.4),показника гіркоти (2.8.15), речовин, що екст-рагуються.

Якщо немає інших зазначень в окремих стат-тях, визначається втрата в масі при висушу-ванні (2.2.32). Визначення води (2.2.13) прово-дять для лікарської рослинної сировини з ви-соким вмістом ефірних олій.

Лікарська рослинна сировина має відповіда-ти вимогам щодо вмісту залишкових кілько-стей пестицидів (2.8.13). При цьому врахову-ють індивідуальні особливості рослини, в яко-му лікарському засобі вона буде використо-вуватися і, за наявністю, вичерпні відомостіщодо обробки даної серії рослинної сирови-ни. Визначення залишкових кількостей пес-тицидів може бути проведене методом, опи-саним у доповненні до загального методу ви-значення.

Слід враховувати ризик забруднення лікарсь-кої рослинної сировини важкими металами.Якщо в окремій статті не зазначені межівмісту важких металів або окремих еле-ментів, зазначення таких меж може вимага-тися в обгрунтованих випадках.

Рекомендації з мікробіологічної чистоти про-дуктів, що складаються тільки з одного чи де-кількох видів лікарської рослинної сировини,наведені в статті «Мікробіологічна чистоталікарських засобів» (5.1.4. – Категорія 4).

Якщо необхідно, може вимагатися регламен-тація вмісту афлатоксинів.

У деяких специфічних випадках має бути вра-хований ризик радіоактивного забруднення.

КІЛЬКІСНЕ ВИЗНАЧЕННЯ

Якщо немає інших зазначень, проводятькількісне визначення лікарської рослинноїсировини підхожим методом.

ЗБЕРІГАННЯ

У захищеному від світла місці.

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________NNNNN

Важкі метали (2.4.8, метод А). Не більше0.01 % (100 ppm), якщо лікарська рослинна

25


сировина призначена для приготуваннязборів або чаїв.

До 1.00 г тонко здрібненого порошку лікарсь-кої рослинної сировини додають 1 мл кисло-ти сірчаної Р, обережно спалюють і прожа-рюють. До одержаного залишку додають принагріванні 5 мл розчину 615 г/л амонію аце-тату Р, фільтрують крізь знезолений фільтр,промивають 5 мл води Р і доводять об’ємфільтрату водою Р до 100 мл.

12 мл одержаного розчину мають витримува-ти випробування на важкі метали. Еталон го-тують із використанням еталонного розчинусвинцю (1 ppm Pb) Р.

Радіонукліди. Лікарська рослинна сировинамає витримувати вимоги, встановлені компе-тентним уповноваженим органом для про-дуктів харчування та питної води.

ЛІКАРСЬКІ РОСЛИННІ

ЗАСОБИ

Plantae medicinales praeparatore


Лікарські рослинні засоби одержують ізлікарської рослинної сировини за допомогоюекстракції, дистиляції, віджиму, фракціону-вання, очищення, концентрування або фер-ментації. До них належать стовчена або по-дрібнена в порошок рослинна сировина, на-стойки, екстракти, ефірні олії, віджаті соки йоброблені соки рослин.

Лікарські рослинні чаї мають відповідати ви-могам статті Рослинні чаї.

Розчинні лікарські рослинні чаї складаютьсяз порошку або гранул одного або декількохрослинних лікарських засобів, призначенихдля приготування орального розчину безпо-середньо перед використанням.

ПРОЕКТ

ЛІКАРСЬКІ РОСЛИННІ

ЗАСОБИN

Plantae medicinales praeparatore


Лікарські рослинні засоби являють собоюцілу, нарізану, стовчену або подрібнену в по-

рошок рослинну сировину, збори, брикети,чаї, екстракти, настойки, ефірні олії, жирнімасла, віджаті соки, оброблені соки рослин,слизи, смоли. Лікарські рослинні засоби одер-жують із лікарської рослинної сировини задопомогою екстракції, дистиляції, віджиму,фракціонування, очищення, концентруванняабо ферментації.

Вимоги до окремих лікарських рослинних за-собів наведені також у статтях «Екстракти»,«Ефірні олії», «Рослинні жирні масла», «Лікар-ські рослинні чаї».

Сировина, що використовується для приготу-вання лікарських рослинних засобів, має ви-тримувати вимоги статті «Лікарська рослин-на сировина».

ЗБОРИ

Species


Збори являють собою суміші декількох видівподрібненої, рідше суцільної, лікарської рос-линної сировини з морфологічними ознака-ми, характерними для компонентів, що вхо-дять до складу зборів і використовуються яклікарські засоби. Збори для орального засто-сування аналогічні рослинним чаям. Іноді доних додають солі, ефірні олії.

ВИРОБНИЦТВО

Складові компоненти зборів мають витриму-вати вимоги відповідних окремих статей надану лікарську рослинну сировину. Сирови-ну, що входить до складу зборів, подрібню-ють окремо. Ступінь подрібнення сировини,що входить до складу зборів, використовува-них для приготування настойок і відварів, маєвідповідати вимогам нормативної докумен-тації на конкретний лікарський засіб.

Листя, трави та кору ріжуть; шкірясте листяперетворюють у крупний порошок; корінняі кореневища в залежності від форми, роз-мірів і твердості ріжуть або дроблять; плодита насіння подрібнюють на млині або пропус-кають крізь вальці; деяке насіння й ягоди ви-користовують суцільними; квітки та дрібніквіткові кошики використовують суцільнимиабо подрібнюють.

Компоненти, що входять до складу збору, пе-ремішують до одержання рівномірної суміші.

26


Якщо до складу збору входить сіль, із неї го-тують насичений розчин і обприскують нимзбір при перемішуванні, після чого висушу-ють при температурі не вище 60 °С.

Сировину, гігроскопічну і що легко псуєтьсявід зволоження, слід додавати до збору післяобприскування інших компонентів розчиномсолі та висушування з подальшим перемішу-ванням.

Ефірну олію вносять до збору у вигляді спир-тового розчину (1:10) обприскуванням приперемішуванні.


Збори ідентифікують, використовуючи їхмакроскопічні і, якщо необхідно, мікро-скопічні характеристики, а також інші не-обхідні випробування (наприклад, тонкоша-рову хроматографію).


У зборах визначають запах і смак. Смак ви-значають у водному витяганні.

Якщо необхідно, збори мають витримувативимоги випробування, наприклад, із визна-чення загальної золи (2.4.16), золи, нерозчин-ної в кислоті хлористоводневій (2.8.1), речо-вин, що екстрагуються, показника набрякан-ня (2.8.4), показника гіркоти (2.8.15), важкихметалів (2.4.27, 2.4.8), втрати в масі при вису-шуванні (2.2.32) або визначення води (2.2.13)для зборів із високим вмістом ефірних олій,мікробіологічної чистоти та ін.

КІЛЬКІСНЕ ВИЗНАЧЕННЯ

Де можливо, проводять кількісне визначеннявмісту діючих речовин компонентів зборупідхожим методом.

БРИКЕТИ


Брикети являють собою ті самі збори - сумішідекількох видів подрібненої, рідше суцільної,лікарської рослинної сировини з морфологіч-ними ознаками, характерними для компо-нентів, що входять до складу зборів, спресо-вані у брикети і що використовуються яклікарські засоби. Вони мають витримувативимоги, наведені для зборів.

ПРОЕКТ

ЛІКАРСЬКІ РОСЛИННІ ЧАЇ

Plantae ad ptisanam


Лікарські рослинні чаї складаються винятко-во з одного або декількох видів лікарськоїрослинної сировини і призначені для приго-тування водних розчинів для орального за-стосування за допомогою заварювання, на-стоювання або мацерації. Ці препарати готу-ють безпосередньо перед використанням.

Лікарські рослинні чаї звичайно поставляють«in bulk» або в пакетах.

Використовувана лікарська рослинна сиро-вина має відповідати вимогам відповіднихмонографій Фармакопеї або, за їхньої відсут-ності, загальній статті «Лікарська рослиннасировина».

Рекомендації з мікробіологічної чистотилікарських рослинних чаїв (5.1.4. – Катего-рія 4) мають враховувати запропонованийспосіб застосування (використання киплячоїабо некиплячої води).


Ідентифікація лікарської рослинної сирови-ни, що входить до складу лікарських рослин-них чаїв, проводиться ботанічним досліджен-ням.


Перевірку співвідношення лікарської рослин-ної сировини, що входить до складу лікарсь-ких рослинних чаїв, проводять підхожим ме-тодом.

Лікарські рослинні чаї у пакетах мають ви-тримувати таке випробування.

Однорідність маси. Визначають середнюмасу 20 випадково обраних одиниць у такийспосіб: зважують кожен повний пакет лі-карського рослинного чаю, відкривають йогобез втрати будь-якого фрагмента, звільняютьйого цілком, використовуючи щітку. Зважу-ють порожній пакет і визначають масу вмістуза допомогою віднімання. Повторюють опе-рацію з іншими дев’ятнадцятьма пакетами.Якщо немає відповідного обґрунтування, небільше двох із двадцяти індивідуальних мас

27


вмісту можуть відхилятися від середньої масивмісту більш ніж на величину, зазначенунижче в таблиці, і жодна маса не може вихо-дити за межі, що у два рази перевищують цювеличину.

Ñåðåäíÿ ìàñàÏðèïóñòèìå

â³äõèëåííÿ, %

Ìåíøå 1.5 ã 15 %

Á³ëüøå 1.5 ã, àëå ìåíøå 2.0 ã 10 %

Á³ëüøå 2 ã 7.5 %

ЗБЕРІГАННЯ

У захищеному від світла місці._________________________________________N


Розчинний лікарський рослинний чай скла-дається з порошку або гранул одного або де-

кількох лікарських рослинних засобів, при-значених для приготування водного розчинудля орального застосування безпосередньоперед використанням. Вони також маютьвитримувати вимоги статей «Порошки дляорального застосування» і «Гранули», відпо-відно.

Розчинний лікарський рослинний чай зви-чайно контролюють за такими показникамиякості: опис, ідентифікація, розмір гранул,здрібненість порошку, маса вмісту контейне-ра, час розчинення, рН, втрата в масі при ви-сушуванні, мікробіологічна чистота, кількісневизначення.

ÓÄÊ 615.11:615.322

Êîòîâ À.Ã., Êîòîâà Ý.Ý., Òèõîíåíêî Ò.Ì., Òîâìàñÿí Ý.Ê.,Õîâàíñêàÿ Í.Ï., Âîëîâèê Â.Ã., Ãåîðãèåâñêèé Â.Ï.Ãîñóäàðñòâåííîå ïðåäïðèÿòèå «Ãîñóäàðñòâåííûé íàó÷íûé öåíòð ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ»Ãîñóäàðñòâåííîå ïðåäïðèÿòèå «Íàó÷íî-ýêñïåðòíûé ôàðìàêîïåéíûé öåíòð»

Âîïðîñû ââåäåíèÿ â Ãîñóäàðñòâåííóþ Ôàðìàêîïåþ Óêðàèíû ìîíîãðàôèè«Ïëîäû áîÿðûøíèêà»

Проведен сравнительный анализ показателей качества плодов боярышника, регламентируемых ЕФ и ГФ ХI. Суще-ственные отличия в описании и макроскопических характеристиках делают невозможным безоговорочное приня-тие монографии ЕФ ко введению в ГФУ. Показано, что в основном и по основным показателям качества отечествен-ное лекарственное растительное сырье соответствует требованиям ЕФ, а содержание процианидинов зависит откачества сырья и его вида. Предложено включить в национальные требования монографии ГФУ описание расте-ний, а также раздел «Внешние признаки», приведенные в ГФ ХI. Показана необходимость дополнительных иссле-дований по показателю «Количественное определение».

Наряду со значительным прогрессом со-временной органической химии, обеспечива-ющим производство высококачественныхсинтетических лекарственных средств, попу-лярность препаратов на основе лекарствен-ного растительного сырья неуклонно растетблагодаря их «шрапнельному» эффекту воз-действия на различные системы и органы,более мягкому действию с меньшими побоч-ными и токсическими эффектами [1].

Несмотря на неослабевающий интерес кизучению растительного материала ботани-ков, фармакогностов, фитохимиков, фито-аналитиков, проблемы унификации и совер-шенствования нормативной документациипо контролю качества лекарственного расти-тельного сырья и средств на его основе оста-ются актуальными, особенно в условиях над-

лежащей производственной практики [2].Это связано с тем, что на состав биологичес-ки активных веществ (БАВ) в растениях вли-яют как различные факторы окружающейсреды, так и процессы их переработки, хра-нения и др. [3].

Особое внимание вопросам стандартиза-ции лекарственного растительного сырьяуделяет Всемирная Организация Здравоохра-нения (ВОЗ). Изданы рекомендации по об-щим методам контроля лекарственного рас-тительного сырья, а также монографии наотдельные лекарственные растения, где опи-саны 58 растений [4, 5, 6].

В Государственную Фармакопею Украины1-го издания (ГФУ 1) и Дополнение 1 к ГФУ 1(ГФУ 1.1) по ряду причин не включены ста-тьи по контролю качества лекарственного ра-

28


стительного сырья и препаратов на его осно-ве [7, 8]. В настоящее время в Украине конт-роль качества лекарственного растительногосырья осуществляется в основном в соответ-ствии с требованиями общих и частных ста-тей ГФ ХI, где лекарственное растительноесырье классифицируется как листья, травы,цветки, плоды, корни, корневища, луковицы,клубни, клубнелуковицы [9, 10]. Для каждойгруппы сырья приведено описание, обычныесроки сбора, внешние признаки, микроско-пические характеристики. Описание вне-шних признаков (макроскопия), так же как имикроскопические характеристики каждогоконкретного вида растительного сырья, при-ведены в соответствующей частной статье вразделе «Идентификация». Кроме того, про-должают действовать ГОСТ, ОСТ, аналити-ческие нормативные документы (АНД). Вход-ной контроль импортного сырья осуществля-ется по соответствующим монографиям веду-щих фармакопей или спецификациям фирм.

В Европейской Фармакопее (ЕФ) [11] какв монографиях, так и в общих статьях нет ин-формации о правилах приемки, отборе сред-них и аналитических проб лекарственногорастительного сырья (товароведческий ана-лиз), технике макроскопического и микро-скопического исследования (фитохимичес-

кий анализ). Эта информация по каждой мор-фологической группе растительного сырья,введенная в ГФ ХI, более детально приводит-ся в любой книге по ботанике, фармакогно-зии, имеется ряд учебных пособий по микро-скопическому исследованию растительногосырья. Однако переводных изданий зарубеж-ных авторов и, тем более, концепции самойЕФ мы не имеем.

В общей статье ЕФ «Лекарственное расти-тельное сырье» очень обобщенно дается оп-ределение лекарственного растительногосырья, приводятся требования к производ-ству, проведению испытаний по определе-нию подлинности, чистоты и количественно-му определению.

В связи с вышесказанным следует особоподчеркнуть, что сравнение частных статейна лекарственное растительное сырье, пред-ставленных в ГФ ХI и ЕФ, выявляет как мно-го общего, так и ряд существенных отличий.

Исходя из концепции разработки ГФУ, т.е.требований по гармонизации национальнойзаконодательной базы по контролю качествалекарственных средств с Европейской Фар-макопеей, в качестве базового документа приразработке статей ГФУ следует использоватьсоответствующие статьи ЕФ.

ÅÔ «Hawthorn berries» ÃÔ ÕI «Ïëîäû áîÿðûøíèêà»

Îïèñàíèå

Âûñóøåííûå ëîæíûå ïëîäû

Crataegus monogyna Jacq.(Lindm.), èëè Crataeguslaevigata (Poir.) D.C.synonym: Crataegusoxyacantha L.) èëè èõ

ãèáðèäû, èëè ñìåñü ýòèõ

ëîæíûõ ïëîäîâ.

Ñîáðàííûå â ôàçó ïîëíîãî ñîçðåâàíèÿ è âûñóøåííûå ïëîäû

äèêîðàñòóùèõ è êóëüòèâèðóåìûõ êóñòàðíèêîâ èëè íåáîëüøèõ

äåðåâüåâ ðàçëè÷íûõ âèäîâ áîÿðûøíèêà (Crataegus), ñåì.

ðîçîöâåòíûõ - Rosaceae:

Áîÿðûøíèêà ñãëàæåííîãî - Ñ. laevigata (Poir.) DC. (áîÿðûøíèêàêîëþ÷åãî - Ñ. oxyacantha sensu Pojark.), áîÿðûøíèêà Êîðîëüêîâà -

Ñ. korolkovii L., Henry [áîÿðûøíèêà àëòàéñêîãî - Ñ, altaica (Lond.)

Lange], áîÿðûøíèêà æåëòîãî - Ñ. chlorocarpa Lenne et Ñ. koch

[áîÿðûøíèêà àëòàéñêîãî - Ñ. altaica (Lond.) Lange], áîÿðûøíèêà

äàóðñêîãî - Ñ. dahurica Koehne ex Schneid., áîÿðûøíèêàîäíîïåñòè÷íîãî - Ñ. monogina Jacq., áîÿðûøíèêà ãåðìàíñêîãî - Ñ.

alemanniensis Ñin., áîÿðûøíèêà ïÿòèïåñòè÷íîãî - Ñ. pentagynaWaldst et Kit áîÿðûøíèêà âîñòî÷íî-áàëòèéñêîãî - Ñ. orientobaltica

Cin., áîÿðûøíèêà îòîãíóòî÷àøåëèñòèêîâîãî - Ñ. curvisepalaLindm, áîÿðûøíèêà êóðçåìñêîãî - Ñ. õ curonica Cin, áîÿðûøíèêà

äàóãàâñêîãî - Ñ. õ dunensis Cin.

Ïîñòîðîííèåïðèìåñè

Íåäîïóñòèìî ñîäåðæàíèå

äðóãèõ âèäîâ áîðûøíèêà

(C. nigra Waldst. et Kit., C.pentagyna Waldst. et Kit. exWilld. and C. azarolus L.),

êîòîðûå õàðàêòåðèçóþòñÿ

íàëè÷èåì áîëåå 3 êîñòî÷åê

Таблица 1Сравнительные данные по описанию и наличию посторонних примесей в плодах боярышника

по монографии ЕФ и статье ГФ XI

Примечание.Жирным шрифтом отмечены виды боярышника, произрастающие на территории Украины.

29


Должны ли мы автоматически приниматьмонографии ЕФ на лекарственные растенияи вводить их в национальную Фармакопеюбез учета требований ГФ ХI и сложившихсятрадиций национальной фитофармации? За-интересованы ли производители, предприя-тия по переработке растительного сырья впроведении на базе ГП ГНЦЛС и ГП НЭФЦфармакогностических исследований отече-ственного лекарственного растительного сы-рья на соответствие требованиям ЕФ?

Для решения этих и многих других вопро-сов, связанных со стандартизацией лекар-ственного растительного сырья, мы открыва-ем дискуссию, предложенную в статье «Про-блемы введения монографий на лекарствен-ное растительное сырье в ГосударственнуюФармакопею Украины» (Гризодуб А.И., Геор-гиевский Г.В., Тихоненко Т.М., Георгиевс-кий В.П.), начав публикации результатов на-учных исследований.

Объектом таких исследований выбранолекарственное растительное сырье, которое,во-первых, описано как в ЕФ так и в ГФ ХI,во-вторых - стандартизация которого прово-дится по фенилпропаноидам. Это - плоды бо-ярышника, листья и цветки боярышника,цветки ноготков, цветки бузины и цветки

липы. Наиболее проблемными для указанныхисследований являются плоды боярышника.

Боярышник (Crataegus L.), пожалуй, одиниз самых популярных родов, плоды, цветки илистья многих видов которого широко ис-пользуются как в народной, так и в научноймедицине. Плоды и цветки боярышника яв-ляются официнальными практически во всехевропейских странах и станах СНГ.

Боярышник — кустарник или деревцо, ча-сто с колючками, с очередными перистолопа-стными или раздельными листьями и неболь-шими двуполыми белыми (есть виды и с крас-ными) пятилепестковыми цветами, собран-ными в щитковидное соцветие. Имеет евро-сибирский тип ареала. На Украине произра-стает около 30 видов этого растения [12], наи-более распространенным из них является бо-ярышник украинский (Crataegus ucrainicaPojark.). Заросли боярышников сосредото-ченны преимущественно в лесостепных, насевере - в степных, на юге - лесных районах(Закарпатская, Львовская, Ивано-Франко-вская, Черновицкая, Сумская, Полтавская,Харьковская, Луганская, Донецкая, Днепро-петровская, Черкасская, Винницкая, Хмель-ницкая, Одесская области) [13].

Целью настоящей работы является иссле-дование возможности гармонизации нацио-


Ìàêðîñêîïèÿ(Âíåøíèåïðèçíàêè)

Ëîæíûé ïëîä Áîÿðûøíèêà îäíîïåñòè÷íîãî èìååò

ôîðìó îò ÿéöåâèäíîé äî ñôåðè÷åñêîé. Îáû÷íî îò

6 ìì äî 10 ìì â äëèíó è îò 4 ìì äî 8 ìì â øèðè-

íó, îò êðàñíîâàòî-êîðè÷íåâîãî äî òåìíî-êðàñíîãî

öâåòà. Ïîâåðõíîñòü ÿì÷àòàÿ, ðåæå ñåò÷àòàÿ. Âåðõ-

íèé êîíåö ïëîäà óâåí÷àí îñòàòêàìè ïÿòè çàâåðíó-

òûõ ÷àøåëèñòèêîâ, îêðóæåííûõ íåáîëüøîé ãëó-

áîêî ñèäÿùåé îòîðî÷êîé ñ ìåëêèì ðåëüåôíûì

êðàåì. Â öåíòðå îòîðî÷êè îáíàðóæèâàþòñÿ îñòàò-

êè ñòîëáèêà ñ ïó÷êàìè æåñòêèõ, áåñöâåòíûõ âî-

ëîñêîâ ó îñíîâàíèÿ. Íà íèæíåì êîíöå ïëîäà èìå-

þòñÿ êîðîòêèå ó÷àñòêè ïëîäîíîæêè èëè ÷àùå íå-

áîëüøèå áëåäíûå êðóãëûå ðóáöû, ãäå ïëîäîíîæêà

ïðèêðåïëÿëàñü. Ïëîäîíîæêà ñî÷íàÿ ñ æåëòîâàòî-

êîðè÷íåâûì ÿéöåâèäíûì ïëîäîì ñ òâåðäîé òîíêîé

îáîëî÷êîé, ñîäåðæàùèì îäíó ïðîäîëãîâàòóþ,

ãëàäêóþ ñâåòëî-êîðè÷íåâóþ è áëåñòÿùóþ êîñòî÷-

êó.

Ëîæíûé ïëîä Áîÿðûøíèêà ñãëàæåííîãî îêîëî 13

ìì â äëèíó. Îí ñîäåðæèò îò äâóõ äî òðåõ òâåðäûõ

ñïëþùåííûõ ïëîäîâ, ñ êîðîòêèìè âîëîñêàìè íà

âåðõóøêå. ×àñòî â öåíòðå îòîðî÷êè ëîæíîãî ïëîäà

îáíàðóæèâàþòñÿ îñòàòêè äâóõ ñòîëáèêîâ.

Ïëîäû ÿáëîêîîáðàçíûå, îò øàðîâèäíîé äî

ýëëèïñîèäàëüíîé ôîðìû, òâåðäûå, ìîðùè-

íèñòûå, äëèíîé 6-14 ìì, øèðèíîé 5-11 ìì,

ñâåðõó ñ êîëüöåâîé îòîðî÷êîé, îáðàçîâàíîé

ññîõøèìèñÿ ÷àøåëèñòèêàìè. Â ìÿêîòè ïëîäà

íàõîäÿòñÿ 1-5 äåðåâÿíèñòûõ êîñòî÷åê,

èìåþùèõ íåïðàâèëüíóþ òðåóãîëüíóþ

îâàëüíóþ èëè ñæàòóþ ñ áîêîâ ôîðìó. Ïî-

âåðõíîñòü êîñòî÷åê ÿì÷àòî-ìîðùèíèñòàÿ èëè

áîðîçä÷àòàÿ ïî ñïèíêå. Öâåò ïëîäîâ îò æåë-

òî-îðàíæåâîãî è áóðîâàòî-êðàñíîãî äî òåì-

íî-áóðîãî èëè ÷åðíîãî, èíîãäà ñ áåëîâàòûì

íàëåòîì âûêðèñòàëëèçîâàâøåãîñÿ ñàõàðà.

Çàïàõ îòñóòñòâóåò. Âêóñ ñëàäêîâàòûé.

Таблица 2Сравнительные данные по макроскопическим характеристикам плодов боярышника


Примечание.Отличительные признаки плодов боярышника различных видов приведены в [2].

30


нальной законодательной базы (ГФУ) по кон-тролю качества лекарственного растительно-го сырья, в частности монографии на плодыбоярышника, с ЕФ.

Для достижения данной цели были постав-лены следующие задачи: провести сравни-тельный анализ показателей качества плодовбоярышника, регламентируемых монографи-ей ЕФ «Hawthorn berries» и статьей ГФ ХI«Плоды боярышника», исследовать плоды бо-ярышника отечественного производства насоответствие требованиям данных докумен-тов.

При сравнении требований к качествуплодов боярышника, описанных в ЕФ иГФ ХI, выяснено следующее.

Описание. В ЕФ описаны только два видабоярышника, их гибриды и смеси, которыетакже описаны в ГФ ХI среди 12 видов, раз-решенных к применению. Кроме того, в раз-деле «Посторонние примеси» ЕФ не допуска-ет содержание трех видов боярышника (одиниз которых также описан в ГФ ХI - боярыш-ник пятипестичный - С. pentagyna Waldst etKit), характеризующиеся наличием более3 косточек (Табл. 1).

Макроскопия (Внешние признаки). ЕФ со-ответственно дает информацию только обэтих двух видах плодов боярышника (Табл. 2).В ГФ ХI кроме общей характеристики плодовдано описание всех 12 видов боярышника, иххарактеристика представлена в виде табли-


Ìèêðîñêîïèÿ

Ñûðüå èçìåëü÷àþò â ïîðîøîê (355). Ïîðîøîê ñåðî-

âàòî-êðàñíîãî öâåòà. Ïðîñìàòðèâàþò â ìèêðîñêîï,

èñïîëüçóÿ ðàñòâîð õëîðàëüãèäðàòà Ð. Âèäíû äëèí-

íûå, îäíîêëåòî÷íûå, ÷àñòî èçîãíóòûå, ñóæèâàþ-

ùèåñÿ â òî÷êó, ñ ãëàäêèìè ñèëüíî óïëîòíåííûìè è

îäåðâåíåâøèìè ñòåíêàìè òðèõîìû âíóòðåííåé ñòî-

ðîíû êîëüöåâîé îòîðî÷êè; ïàðåíõèìíûå ôðàãìåíòû

âíåøíåãî ñëîÿ öâåòîíîæêè ñ îêðàøåííûìè â êðàñ-

íûé öâåò ÷àñòèöàìè, íåêîòîðûå êëåòêè âíóòðåííèõ

ñëîåâ ñîäåðæàò íåáîëüøèå ïó÷êè êðèñòàëëîâ îêñà-

ëàòà êàëüöèÿ; èíîãäà âèäíû ôðàãìåíòû, âêëþ÷àþ-

ùèå ãðóïïû ñêëåðåèäîâ è âàñêóëÿðíûõ òÿæåé ñî

ñâÿçàííûìè ðÿäàìè êëåòîê, ñîäåðæàùèìè ïðèçìû

êàëüöèÿ îêñàëàòà; âèäíû ôðàãìåíòû ïåðèêàðïèÿ,

ñîñòîÿùèå èç áîëüøèõ òîíêîñòåííûõ ñêëåðåèäîâ ñ

ìíîãî÷èñëåííûìè óãëóáëåíèÿìè, íåêîòîðûå èç êî-

òîðûõ ðàçâåòâëåíû; íåêîòîðûå ôðàãìåíòû êîæóðû

èìåþò ñëîé ýïèäåðìèñà, ñîñòîÿùèé âíèçó èç ãåêñà-

ãîíàëüíûõ ñëèçèñòûõ êëåòîê, êîòîðûå ÿâëÿþòñÿ

æåëòîâàòî-êîðè÷íåâûì ïèãìåíòíûì ñëîåì, ñîäåð-

æàùèì ìíîãî÷èñëåííûå óäëèíåííûå ïðèçìû êàëü-

öèÿ îêñàëàòà; çàìåòíû òîíêîñòåííàÿ ïàðåíõèìà ýí-

äîñïåðìû è ñåìÿäîëè, ñîäåðæàùèå àëåéðîíîâûå

çåðíà è êàïëè æèðíîãî ìàñëà.

Ïðè ðàññìîòðåíèè ýïèäåðìèñà ïëîäà ñ ïî-

âåðõíîñòè âèäíû ÷åòûðåõ-øåñòèóãîëüíûå

êëåòêè ñ ðàâíîìåðíî óòîëùåííûìè ñòåí-

êàìè è æåëòî-áóðûì ñîäåðæèìûì. Íà ïî-

âåðõíîñòè ýïèäåðìèñà ðåäêèå îäèíî÷íûå

îäíîêëåòî÷íûå, ñëåãêà èçâèëèñòûå, íà

êîíöàõ çàîñòðåííûå, òîëñòîñòåííûå âîëîñ-

êè. Íà êîëüöåâîé îòîðî÷êå ïëîäà âîëîñêè

ìíîãî÷èñëåííûå, îäíîêëåòî÷íûå, ñî âçäó-

òèÿìè, ïðèòóïëåííûå ó âåðõóøêè è ðàñøè-

ðåííûå ó îñíîâàíèÿ, ñ òîíêèìè ñòåíêàìè è

áóðîâàòûì ñîäåðæèìûì. Ìÿêîòü ïëîäà ñî-

ñòîèò èç êëåòîê îêðóãëîé èëè îâàëüíîé

ôîðìû, ñîäåðæàùèõ âêëþ÷åíèÿ îðàíæåâî-

êðàñíîãî èëè áóðîâàòî-æåëòîãî öâåòà (êà-

ðîòèíîèäû), ìåëêèå äðóçû è ïðèçìàòè÷å-

ñêèå êðèñòàëëû îêñàëàòà êàëüöèÿ. Âî âíóò-

ðåííåé ÷àñòè ìÿêîòè ïëîäà ïðîõîäÿò êîë-

ëàòåðàëüíûå ïó÷êè, âñòðå÷àþòñÿ îäèíî÷-

íûå ñêëåðåèäû. Áëèç êðóïíûõ ïó÷êîâ ðàñ-

ïîëîæåíû ïëàñòû êàìåíèñòûõ êëåòîê; êðè-

ñòàëëû îêñàëàòà êàëüöèÿ ìåñòàìè îáðàçóþò

êðèñòàëëîíîñíóþ îáêëàäêó.

Таблица 3Сравнительные данные по микроскопическим характеристикам плодов боярышника



ÒÑÕ

Íà õðîìàòîãðàììå èñïûòóåìîãî ðàñòâîðà äîëæíû îáíàðó-

æèâàòüñÿ òðè çîíû, ñîâïàäàþùèå ïî ïîëîæåíèþ è ôëóî-

ðåñöåíöèè ñ çîíàìè êèñëîòû õëîðîãåíîâîé, ãèïåðîçèäà è

êèñëîòû êîôåéíîé íà õðîìàòîãðàììå ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ,

òðè çîíû ñëàáî-êðàñíîâàòîé ôëóîðåñöåíöèè, îäíà èç êîòî-

ðûõ ñîâïàäàåò ïî ïîëîæåíèþ è ôëóîðåñöåíöèè ñ çîíîé ðó-

òèíà íà õðîìàòîãðàììå ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ, äâå äðóãèå

ðàñïîëîæåíû âûøå çîíû ãèïåðîçèäà íà õðîìàòîãðàììå

ðàñòâîðà ñðàâíåíèÿ. Íèæå è âûøå çîíû êèñëîòû êîôåéíîéïðîÿâëÿþòñÿ íåñêîëüêî çîí ñâåòëî-ãîëóáîé ôëóîðåñöåíöèè.

Íà óðîâíå ïÿòíà ÃÑÎ ãèïåðîçèäà äîëæíà

ïîÿâèòüñÿ ïîëîñà òåìíî-êîðè÷íåâîãî öâåòà.

Çàòåì ïëàñòííêó îáðàáàòûâàþò 5 % ñïèðòî-

âûì ðàñòâîðîì àëþìèíèÿ õëîðèäà è íàãðå-

âàþò â òå÷åíèå 2-3 ìèí â ñóøèëüíîì øêàôó

ïðè òåìïåðàòóðå 100-105 °Ñ. Ïðè ýòîì ïÿòíî

ïðèîáðåòàåò ÿðêî-æåëòóþ îêðàñêó â âèäèìîì

è ÿðêóþ æåëòî-çåëåíóþ ôëóîðåñöåíöèþ â

ÓÔ-ñâåòå (ãèïåðîçèä).

Таблица 4Сравнительные данные по идентификации (метод ТСХ) плодов боярышника


31


цы, прилагаемой к статье. Основными разли-чиями являются также цвет - от красновато-коричневого до темно-красного (ЕФ), от жел-то-оранжевого и буровато-красного до тем-но-бурого или черного (ГФ ХI), а также раз-меры ложного плода Боярышника сглаженно-го - 13 мм в длину (ЕФ), 5-9 мм (ГФ ХI).

Микроскопия. В ЕФ существенных отли-чий от ГФ ХI не имеется (Табл. 3), а если срав-нивать с ГОСТ 3852-75 [14] на плоды боярыш-ника – микроскопические характеристикипрактически идентичны. Различие наблюда-ется в проведении эксперимента: в ЕФ иссле-дования проводят на измельченном порошкеплодов, а в ГФ ХI - на поперечных срезах пло-дов.

Идентификация. Метод тонкослойнойхроматографии (Качественные реакции). ВЕФ идентификация проводится методом тон-кослойной хроматографии (2.2.27). Приведенполный хроматографический профиль испы-туемого раствора, полученный в условияхопределения и состоящий из флавоноидов(рутин, гиперозид), фенилкарбоновых кислот(хлорогеновая и кофейная кислоты), а такжеблизлежащих родственных соединений. ВГФ ХI идентификация проводится также ме-тодом тонкослойной хроматографии и регла-ментируется наличие одного пятна на уров-не ГСО гиперозида (Табл. 4).

Посторонние примеси. Как было сказановыше, ЕФ не допускает содержание трех ви-дов боярышника, кроме того, монографиейЕФ регламентируется содержание повреж-денных плодов и других примесей (минераль-

ной и органической). ГФ ХI дополнительнорегламентирует количество подгоревших ибуровато-зеленых плодов (Табл. 5).

Как в ЕФ, так и в ГФ ХI приведены показа-тели «Общая зола», «Потеря в массе при вы-сушивании», однако нормирование разное.

ГФ ХI дополнительно регламентирует ко-личество золы, нерастворимой в 10 % раство-ре кислоты хлористоводородной.

Количественное определение. По этомуразделу наблюдается существенная разницав подходах указанных Фармакопей к классусоединений, выбранному для определенияколичественного содержания. ЕФ регламен-тирует содержание процианидинов (не менее1 %), а ГФ ХI — флавоноидов (не менее0.06 %).

Таким образом, сравнительный анализ мо-нографий показал, что при довольно большомвидовом разнообразии рода боярышник натерритории Украины, приняв в ГФУ без из-менений монографию ЕФ, производители ипотребители лишаться 10 видов этого попу-лярного растительного лекарственного сы-рья. Если даже не принимать во вниманиеописание сырья, такие виды как боярышникКоролькова, боярышник желтый, боярыш-ник пятипестичный в соответствии с моно-графией ЕФ формально подпадают под дей-ствие раздела «Посторонние примеси» (со-держание более трех косточек в плоде) и немогут быть использованы в качестве лекар-ственного растительного сырья. Несомненнотакже и то, что такие виды как боярышникдаурский, боярышник восточно-балтийский,

ÏîêàçàòåëèÃÔ ÕI

«Ïëîäû áîÿðûøíèêà»ÅÔ «Hawthorn berries»

ñîäåðæàíèå ïîäãîðåâøèõ ïëîäîâ íå áîëåå 2 %

ñîäåðæàíèå íåäîçðåëûõ ïëîäîâ (áóðîâàòî-çåëåíûõ) íå áîëåå 1 %

ñîäåðæàíèå ïîâðåæäåííûõ ïëîäîâ íå áîëåå 5 %

ñîäåðæàíèå ïëîäîâ, ïîâðåæäåííûõ âðåäèòåëÿìè,

äðîáëåíûõ, îòäåëüíûõ êîñòî÷åê, âåòî÷åê,

ïëîäîíîæåê, â ò.÷. îòäåëåííûõ ïðè àíàëèçå

íå áîëåå 5 %

îðãàíè÷åñêàÿ ïðèìåñü íå áîëåå 1 %

ìèíåðàëüíàÿ ïðèìåñü íå áîëåå 0.5 %íå áîëåå 2 %

ïîòåðÿ â ìàññå ïðè âûñóøèâàíèè (âëàæíîñòü) íå áîëåå 14 % íå áîëåå 12 %

îáùàÿ çîëà íå áîëåå 3 % íå áîëåå 5 %

çîëà, íåðàñòâîðèìàÿ â 10 % ðàñòâîðå êèñëîòû

õëîðèñòîâîäîðîäíîéíå áîëåå 1 %

êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå

íå ìåíåå 0.06 %

ôëàâîíîèäîâ, â

ïåðåñ÷åòå íà ãèïåðîçèä

íå ìåíåå 1 % ïðîöèàíèäèíîâ, â

ïåðåñ÷åòå íà öèàíèäèíà õëîðèä

(Ñ15Í11ÑlO6) è íà ñóõîå ñûðüå

Таблица 5Сравнительные данные по числовым показателям и количественному определению

плодов боярышника по монографии ЕФ и статье ГФ XI

32


боярышник даугавский, описанные в ГФ ХI,на территории Украины не произрастают. Сдругой стороны, такое сырье может экспор-тироваться с ближнего зарубежья (Россия,Белоруссия, Казахстан).

Сравнение показателей качества действу-ющей на территории Украины статьи ГФ ХI«Плоды боярышника» и одноименной моно-графии ЕФ показало, насколько сложно и не-безболезненно может произойти гармониза-

Ïîêàçàòåëè Íîðìèðîâàíèå 1 2 3 4 5 6 7 8

îïèñàíèå ñîîòâ. ñîîòâ. ñîîòâ. ñîîòâ. ñîîòâ. ñîîòâ. ñîîòâ. ñîîòâ.

âíåøíèå ïðèçíàêè + + + + + + + +

ìèêðîñêîïèÿ + + + + + + + +

êà÷åñòâåííûå ðåàêöèè ÒÑÕ + + + + + + + +

ñîäåðæàíèå ïîäãîðåâøèõ

ïëîäîâíå áîëåå 2 % íå îáí. íå îáí. 1.9 íå îáí. íå îáí. íå îáí. íå îáí. íå îáí.

ñîäåðæàíèå íåäîçðåëûõ ïëîäîâ

(áóðîâàòî-çåëåíûõ)íå áîëåå 1 % íå îáí. íå îáí. 0.8 íå îáí. íå îáí. íå îáí. íå îáí. íå îáí.

ñîäåðæàíèå ïëîäîâ,

ïîâðåæäåííûõ âðåäèòåëÿìè,

äðîáëåíûõ, îòäåëüíûõ

êîñòî÷åê, âåòî÷åê, ïëîäîíîæåê,

â ò.÷. îòäåëåííûõ ïðè àíàëèçå

íå áîëåå 5 % 0.1 0.3 4.1 0.2 íå îáí. 0.4 íå îáí. íå îáí.

îðãàíè÷åñêàÿ ïðèìåñü íå áîëåå 1 % 0.1 0.1 0.9 0.3 íå îáí. 0.1 íå îáí. 0.1

ìèíåðàëüíàÿ ïðèìåñü íå áîëåå 0.5 % 0.1 0.1 0.45 0.4 0.3 0.2 íå îáí. 0.1

âëàæíîñòü íå áîëåå 14 % 8.6 9.4 13.9 11.43 7.9 7.98 6.7 9.29

îáùàÿ çîëà íå áîëåå 3 % 2.1 2.2 2.3 2.1 1.95 2.2 2.0 2.1

çîëà, íåðàñòâîðèìàÿ â 10 %

ðàñòâîðå êèñëîòû

õëîðèñòîâîäîðîäíîé

íå áîëåå 1 % 0.55 0.49 0.48 0.41 0.52 0.63 0.54 0.48


íå ìåíåå 0.06 %

ôëàâîíîèäîâ, â

ïåðåñ÷åòå íà

ãèïåðîçèä

0.08 0.068 0.062 0.086 0.155 0.091 0.16 0.065

Таблица 6Результаты анализа образцов плодов боярышника в соответствии с требованиями ГФ ХI

Ïîêàçàòåëè Íîðìèðîâàíèå 1 2 3 4 5 6 7 8

îïèñàíèå - - - - - - - -

ñâîéñòâà + + + + + + + +

ìàêðîñêîïèÿ - - - - - - - -

ìèêðîñêîïèÿ + + + + + + + +

ÒÑÕ + + + + + + + +

ïîñòîðîííèå ïðèìåñè + + - + + + + -

ñîäåðæàíèå ëîæíûõ è

ïîâðåæäåííûõ ïëîäîâ

íå áîëåå 5 %0,1 0.3 4.1 0.2 íå îáí. 0.4 íå îáí. íå îáí.

îðãàíè÷åñêàÿ ïðèìåñü 0.1 0.1 0.9 0.3 íå îáí. 0.1 íå îáí. 0.1

ìèíåðàëüíàÿ ïðèìåñü

íå áîëåå 2 %

0.1 0.1 0.45 0.4 0.3 0.2 íå îáí. 0.1

ïîòåðÿ â ìàññå ïðè

âûñóøèâàíèè

íå áîëåå 12 %8.6 9.4 13.9 11.43 7.9 7.98 6.7 9.29

îáùàÿ çîëà íå áîëåå 5 % 2.1 2.2 2.3 2.1 1.95 2.2 2.0 2.1


íå ìåíåå 1 %

ïðîöèàíèäèíîâ, â

ïåðåñ÷åòå íà

öèàíèäèíà õëîðèä

(Ñ15Í11ÑlO6) è íà

ñóõîå ñûðüå

1.69 1.2 0.79 1.71 2.77 1.77 2.41 0.82

Таблица 7Результаты анализа образцов плодов боярышника в соответствии с требованиями ЕФ

33


ция с требованиями ЕФ без проведения фар-макогностических исследований отечествен-ного лекарственного растительного сырья насоответствие этим требованиям.

В качестве обьектов исследования былииспользованы образцы плодов боярышника,собранные в Николаевской (1-2), Винницкой(3), Сумской (4), Кировоградской (5), Львов-ской (6), Харьковской (7), Симферопольской(8) областях. Данные образцы представляютсобой, в основном, смеси таких видов боя-рышника: колючий, однопестичный, отогну-точашелистиковый. Образец 8 - боярышникКоролькова.

Товароведческий (отбор проб, содержа-ние примесей, степень измельчения, пораже-ние амбарными вредителями, содержаниевлаги и золы), макроскопический, микроско-пический анализ проводили в соответствии стребованиями ГФ ХI, ГОСТ, [15], фитохими-ческий анализ – по методикам, описаннымив ЕФ и ГФ ХI.

Результаты анализа образцов боярышни-ка в соответствии с требованиями ГФ ХIпредставлены в Табл. 6. Все проанализиро-ванные образцы удовлетворяли требованиямданной статьи по всем показателям.

В связи с тем, что исследуемые образцысырья представляют собой смеси различныхвидов плодов боярышника, не описанных в

ЕФ, они не удовлетворяли требованиям ЕФпо описанию и макроскопическим характе-ристикам. Кроме того, образец 3 забракованиз-за наличия подгоревших и недозрелыхплодов (по требованиям ЕФ таких вообще недолжно быть), а образец 8 - из-за цвета плода(буровато-оранжевый), шаровидной при-плюснутой с полюсов формы и наличия 5 ко-сточек в плоде. Результаты анализа приведе-ны в Табл. 7.

При проведении микроскопических ис-следований во всех образцах были обнаруже-ны характерные диагностические признаки.Исследования по ГФ ХI проводили в соответ-ствии с требованиями статьи «Методы анали-за лекарственного растительного сырья», вкоторой описана техника микроскопическо-го анализа для плодов. Аналогичная статья вЕФ отсутствует.

При проведении исследований, связанныхс идентификацией сырья по методике ТСХ,описанной в ЕФ, были использованы хрома-тографические пластинки «Сорбфил» ПТСХ-АФ-А-УФ, ПТСХ-АФ-В-УФ и «Silica gel 60F254» фирмы «Merck» (Германия). На всехтрех пластинах отмечалось хорошее разделе-ние веществ, входящих в состав растворасравнения, а также разделение компонентовиспытуемого раствора. Однако на двух изпяти пластинах ПТСХ-АФ-А-УФ, наблюдалсязаметный краевой эффект [16], что приводи-ло к значительному «перекосу» хроматограм-мы. Рисунки типичных хроматограмм пред-ставлены (Рисунок).

По показателю «Посторонние примеси»практически все проанализированные образ-цы соответствовали требованиям ЕФ. Какбыло сказано выше, исключение составляютобразцы 3 и 8. Кроме того, образец 3 не соот-ветствует требованиям ЕФ по показателю«Потеря в массе при высушивании» (13.9 %).

В монографии ЕФ на плоды боярышникапроводится количественное определениепроцианидинов, в пересчете на цианидинахлорид (не менее 1 %).

Как видно из Табл. 7 в двух образцах пло-дов боярышника (3 и 8) содержание проциа-нидинов ниже регламентируемого значения,т.е. данные образцы не удовлетворяют требо-ваниям ЕФ. Это связано с наличием в образ-це 3 подгоревших плодов и недозревших, аобразец 8 является по цвету буровато-оран-жевым, шаровидной формы и др., т.е. не опи-санным в ЕФ.

Таким образом, за исключением образцов3 и 8, проанализированные образцы плодов

À Á Â

1 2 1 12 2

Типичные хроматограммы образцов

плодов боярышника

Рисунок

Примечания:1 — испытуемый раствор;2 — раствор сравнения (рутин Р, хлорогеновая кисло-

та Р, гиперозид Р, кофейная кислота Р);А — пластинка ПТСХ-АФ-А-УФ;Б — пластинка ПТСХ-АФ-В-УФ;В — пластинка «Silica gel 60 F254» («Merck», Германия).

34


боярышника удовлетворяют требования ЕФпо количественному содержанию проциана-динов, в пересчете на цианидина хлорид.

Выводы

1. Проведенный сравнительный анализпоказателей качества плодов боярышника всоответствии с требованиями ЕФ и ГФ ХI по-казал, что в анализируемых статьях набор по-казателей качества кардинально не отличает-ся. Существенные различия в описании имакроскопических характеристиках делаютневозможным безоговорочное принятие ста-тьи ЕФ к включению в ГФУ.

2. Проведенные исследования показали,что в основном и по основным показателямкачества отечественное лекарственное рас-тительное сырье соответствует требованиямЕФ. Фенольный состав проанализированныхобразцов по методике ТСХ соответствуеттребованиям ЕФ, а содержание процианиди-нов зависит от качества сырья и его вида (со-держание процианидинов может колебатьсяот 0.79 % до 2.77 %).

3. При введении в ГФУ монографии ЕФ наплоды боярышника в национальную частьнеобходимо включить описание растений, атакже раздел «Внешние признаки», приве-денные в ГФ ХI.

4. Стандартизация плодов боярышника поколичественному содержанию иного классадействующих веществ (процианидины) по-требует пересмотра большого массива АНДна лекарственные препараты из данного ра-стительного сырья, которое стандартизиру-ется по количественному содержанию флаво-ноидов.

ЛИТЕРАТУРА1. Сур С.В., Гриценко Э.Н. Проблемы и перспективыразработки и внедрения современных лекарственныхсредств растительного происхождения // Фармате-ка. – 2001. - № 9/10. - С. 10-14.2. Good manufacturing practices: supplementary guide-lines for the manufacture of herbal medicinal products:WHO Expert Committee on Specifications for Pharmaceu-tical Preparation. Thirty-fourth Report. – Geneva: WoldHeals Organization, 1996. - Annex 8. (WHO Technical Re-port Series. - No. 863.)3. Растения для нас / Под ред. Г.П. Яковлева и К.Ф. Бли-новой. - Санкт-Петербург: Учебная книга, 1996. - 654 с.4. Quality control methods for medicinal plant materials. –Geneva: Wold Heals Organization, 1998. - 123 p.5. WHO monographs on selected medicinal plants. –Geneva: World Heals Organization, 1999. – Volume 1. –299 p.6. WHO monographs on selected medicinal plants. - Ge-neva: World Heals Organization, 2002. - Volume 2. - 357 p.7. Державна Фармакопея України / Державне підприєм-ство «Науково-експертний фармакопейний центр». -Харків: РІРЕГ, 2001. - 556 с.

8. Державна Фармакопея України / Державне підприєм-ство «Науково-експертний фармакопейний центр». –1-е вид. – Харків: РІРЕГ, 2001. – Доповнення 1. –2004. – 520 с.9. Государственная фармакопея СССР: Вып. 1. Общиеметоды анализа / МЗ СССР. – 11-е изд., доп. – М.: Ме-дицина, 1987. – 336 с.10. Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общиеметоды анализа. Лекарственное растительное сырье /МЗ СССР. – 11-е изд., доп. – М.: Медицина, 1989. –400 с.11. European Pharmacopoeia. 4th ed. - Strasbourg: Councilof Europe, 2002. – 2416 p.12. Определитель высших растений Украины / Отв. ред.Ю.Н. Прокудин. – Киев: Наукова думка, 1987.13. Лекарственные растения Украины / Ивашкин Д.С.,Катина З.Ф., Рыбачук И.З., Иванов В.С., Бутенко Л.Т. -Киев: Урожай, 1975. - 360 с.14. Лекарственное растительное сырье. – М.: Изд-востандартов, 1980. – С. 204-208.15. Лікарська рослинна сировина та фітопрепарати:Навч. посіб. - 2-е вид. -Х.: Вид-во НФаУ, 2003. - 408 с.16. Розділяюча здатність пластинок для тонкошаровоїхроматографії: відповідність вимогам Державної Фар-макопеї України / Зволінська Н.М., Герасимчук Т.В.,Макаренко О.Г., Левін М.Г, Гризодуб О.І. // Фармацев-тичний журнал. – 2002. – № 2. – С. 72-84.

РезюмеКотов А.Г., Котова Е.Е., Тихоненко Т.М.,Товмасян Е.К., Хованська Н.П.,Воловик В.Г., Георгієвський В.П.

Питання введення у Державну Фармакопею України

монографії «Плоди глоду»

Наведено порівняльний аналіз показників якостіплодів глоду, що регламентуються ЄФ та ГФ XI. Суттєвівідмінності в описі та макроскопічних характеристикахунеможливлюють беззаперечне прийняття монографіїЄФ до введення у ДФУ. Показано, що в основному таза основними показниками якості вітчизняна лікарсь-ка рослинна сировина відповідає вимогам ЄФ, а вмістпроціанідинів залежить від якості сировини та йоговиду. Запропоновано включити до національних вимогмонографії ДФУ опис рослин, а також розділ «Зовнішніознаки», наведені у ГФ XI. Показано необхідність додат-кових досліджень за показником «Кількісне визначен-ня».

SummaryKotov A.G., Kotova E.E., Tikhonenko T.M.,Tovmasyan E.K., Khovanskaya N.P.,Volovic V.G., GeorgiyevskiyV.P.

Matters of «Hawthorn berries» monograph introduction

to the State Pharmacopoeia of Ukraine

The comparative analysis of hawthorn berries qualityattributes, regulated by EP and SP XI, was conducted. Con-siderable distinctions in specification and macroscopiccharacters make impossible implicit accept of EP mono-graph for introduction to SPU. It was shown that generallyand at the basic quality index of domestic herbal drugs sa-tisfies requirements of EP, but procyanidins content de-pends on herbal drugs quality and its species. It was sug-gested to include in national parts SPU monographs theplant description, and also the section «External charac-ters», which were given in SP XI. The necessity of additionalstudies under Assay was shown.

Котов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей Георгиевич (р. 1960). ОкончилХарьковский фармацевтический институт (1982).

35

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-2004Ст. науч. сотр. сектора природных гетероцикли-ческих соединений ГП ГНЦЛС (2001). К.фарм.н.(1996). Ст. науч.сотр. (2004).

Котова Элина Эдуардовна. Котова Элина Эдуардовна. Котова Элина Эдуардовна. Котова Элина Эдуардовна. Котова Элина Эдуардовна. Окончила Харь-ковский государственный университет (1983).Науч.сотр. лаборатории фармакопейного анализаГП НЭФЦ.

Тихоненко Татьяна Михайловна. Тихоненко Татьяна Михайловна. Тихоненко Татьяна Михайловна. Тихоненко Татьяна Михайловна. Тихоненко Татьяна Михайловна. ОкончилаХарьковский государственный университет (1989)и Национальную фармацевтическую академиюУкраины. Работает в ГП НЭФЦ (с 1997). Науч.сотр. группы «Монографии на лекарственныесубстанции» отдела ГФУ ГП НЭФЦ. Ответствен-ный редактор журнала «Фармаком».

Товмасян Ерануи Карапетовна. Товмасян Ерануи Карапетовна. Товмасян Ерануи Карапетовна. Товмасян Ерануи Карапетовна. Товмасян Ерануи Карапетовна. ОкончилаЕреванский государственный университет (1984).К.б.н. Руководитель направления «Общие статьина дозированные лекарственные средства и фар-

мако-технологические испытания» отдела ГФУ ГПНЭФЦ.

Хованская Наталья Петровна. Хованская Наталья Петровна. Хованская Наталья Петровна. Хованская Наталья Петровна. Хованская Наталья Петровна. ОкончилаХарьковский государственный университет. Ра-ботает в ГНЦЛС (с 1970). Зав. лабораторией фар-макопейного анализа ГП «Научно-экспертныйфармакопейный центр». К.фарм.н. (1992).

Воловик Виктор Григорьевич. Воловик Виктор Григорьевич. Воловик Виктор Григорьевич. Воловик Виктор Григорьевич. Воловик Виктор Григорьевич. Окончил Харь-ковский государственный университет. Науч.сотр. сектора химии и технологии фенольныхпрепаратов ГП ГНЦЛС.

Георгиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор ПетровичГеоргиевский Виктор Петрович. Окончилфармацевтическое отделение 1-го Московскогомединститута (1959). Работает в ГП ГНЦЛС (с1958). Д.фарм.н. (1980). Чл.-корр. НАН Украины.Директор ГП ГНЦЛС. Директор ГП НЭФЦ. Засл.деятель науки и техники Украины. Руководительработ по созданию Государственной ФармакопеиУкраины.

ÓÄÊ 615.11:615.322

Êîòîâà Ý.Ý., Êîòîâ À.Ã., Õîâàíñêàÿ Í.Ï.Ãîñóäàðñòâåííîå ïðåäïðèÿòèå «Íàó÷íî-ýêñïåðòíûé ôàðìàêîïåéíûé öåíòð»Ãîñóäàðñòâåííîå ïðåäïðèÿòèå «Ãîñóäàðñòâåííûé íàó÷íûé öåíòð ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ»

Ñòàíäàðòèçàöèÿ ïëîäîâ áîÿðûøíèêà è ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ íà èõîñíîâå ïî ïîêàçàòåëþ «Êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå»

Изучено качество плодов боярышника и настоек, приготовленных на их основе, по показателю «Количественноеопределение» с целью выяснения возможности стандартизации данных объектов в соответствии с требованиямиЕФ. Показано, что при стандартизации как плодов боярышника, так и препаратов, приготовленных на их основе,проблематично руководствоваться только требованиями ЕФ, регламентирующими количественное содержание про-цианидинов. Разработана методика количественного определения флавоноидов в плодах боярышника, которая пред-ложена для включения в национальную часть монографии ГФУ «Плоды боярышника».

Как лекарственное сырье в фармации ис-пользуются плоды, цветки, листья и побегибоярышника. Из данного сырья готовят и ис-пользуют в качестве лекарственных препара-тов отвары, экстракты, настойки и таблетки.

В литературе в качестве биологически ак-тивных действующих веществ данного лекар-ственного сырья называют флавоноиды, ан-тоцианы, тритерпеноиды [1].

В связи с таким широким набором биоло-гически активных веществ медицинскийспектр применения всех видов сырья, а так-же препаратов, приготовленных на его осно-ве, достаточно широк. Так, для медицинско-го использования предложены выделенныеиз плодов некоторых видов боярышника ан-тоцианидиновые пигменты. При этом учиты-вается их способность образовывать комп-лексы с ионами некоторых металлов, кото-рые сравнительно быстро выводятся из орга-

низма, что очень важно для защиты организ-ма от попавших в него радиоактивных эле-ментов [2].

Широко используется антиишемическаяактивность флавоноидов из Crataegus [3]. Га-леновые препараты боярышника усиливаюткровообращение в коронарных сосудах серд-ца и сосудах мозга, оказывают антиаритми-ческий эффект [4].

Предложены также препараты, приготов-ленные на основе экстрактов листьев, цвет-ков и плодов Crataegus, для терапии и профи-лактики онкологических заболеваний. Гото-вые препараты содержат (0.1-13) % флаво-ноидов, (0.05-10) % процианидинов [5].

В Росси зарегистрировано более 25 лекар-ственных препаратов, содержащих в своемсоставе боярышник. Данные препараты изплодов, цветков и листьев боярышника обла-дают широким спектром фармакологической

36


активности. Установлено, что фитохимичес-кий состав цветков, плодов и листьев боя-рышника сходен, и активность обусловленавсем комплексом биологически активных ве-ществ [6].

Из флавоноидов, присутствующих в лис-тьях, цветках и плодах боярышника, в лите-ратуре отмечают сантин, 5-гидроксиауране-тин, апигенин, кемпферол, кверцетин, 7-глю-козид апигенина, 3-галактозид кемпферола,гиперозид (3-галактозид кверцетина), витек-син (С-гликозид апигенина), 4'-рамнозид ви-тексина, 4'-рутинозид витексина а также (-)и (+) эпикатехины [7]. С-гликозиды домини-руют в листьях боярышника, в цветках син-тезируются биозиды, ди- и олигогликозидылейкоантоцианидинов и другие производныефлавана [4].

Из листьев, цветков и плодов боярышни-ка вида Crataegus stevenij выделено и охарак-теризовано 7 флавоноидов, причем впервыевыделен липофильный флавоноид 4',7-диме-тиловый эфир скутеллареина [8].

Основным компонентом флавоноиднойфракции во всех частях данного растения,независимо от вида, является гиперозид. Со-держание суммы флавоноидов в плодах боя-рышника находится в пределах от 0.057 % до0.085 % [9], минимальное содержание флаво-ноидов в листьях и цветах составляет: 1.39 %в цветках и 0.89 % - в листьях [8]. Содержаниегиперозида в цветках находится в пределах от0.6 % до 0.9 %, в плодах — от 0.028 % до 0.04 %,в побегах — от 0.25 % до 0.39 % [10].

В настойках плодов боярышника содержа-ние гиперозида, в зависимости от сорта ис-пользуемого сырья, колеблется от 0001 % до0.0036 % [11], содержание суммы флавонои-дов — от 0.004 % и выше.

Из тритерпеновых соединений, присут-ствующих в побегах, цветках и плодах боя-рышника, отмечают прежде всего олеаноло-вую и маслиновую кислоты [12], находят так-же урсуловую, кратеговую, акантовую кисло-ты [4]. Содержание суммы тритерпеновыхсоединений в сырье различных видов колеб-лется: в цветках — от 2.08 % до 3.7 %, в пло-дах — от 1.8 % до 3.1 %, в побегах от 0.7 % до1.7 % [12].

Антоцианы в плодах боярышника темно-окрашенных видов представлены производ-ными цианидина и пеонидина, причем значи-тельно преобладают производные цианиди-на [1] — от 1.3 % до 3.1 %, в зависимости отсорта.

Среди методов, применяемых для опреде-ления действующих веществ боярышника,описаны следующие.

Методика определения содержания гипе-розида в плодах боярышника. Она включаетэкстракцию сырья 96 % спиртом, затем али-квоты полученного экстракта после выпари-вания и обработки раствором NaCl пропус-кают через колонку с полиамидным сорбен-том, элюируют сумму флавоноидов 96 %спиртом. Выделенный элюат хроматографи-руют на жидкостном хроматографе на колон-ке размером (250×4.6) мм Ultrasfere ODS с раз-мером частиц 5 мкм, подвижная фаза: вода —ацетонитрил — кислота уксусная (80:16:4),скорость подвижной фазы 1 мл/мин, длинаволны детектирования 257 нм. Содержаниегиперозида в сырье определяют, используякалибровочный график для гиперозида-стан-дарта. Данную методику авторы также ис-пользовали для определения содержания ги-перозида в жидком экстракте боярышни-ка [13].

Методика фотоколометрического опреде-ления суммы флавоноидов, в пересчете на ги-перозид, для стандартизации сырья плодовбоярышника. Она включает экстракцию сум-мы флавоноидов 96 % спиртом, очистку на ко-лонке с полиамидным сорбентом и определе-ние оптической плотности элюата при при-бавлении спиртового раствора щелочи [9].

Методика количественного определенияфлавоноидов в настоях и отварах. Описаныспектрофотометрические методики, осно-ванные на реакции комплексообразования сAlCl3 [14].

Для стандартизации таблеток из плодовбоярышника разработаны: метод ТСХ дляидентификации флавоноидов, тритерпено-вых соединений, каротиноидов, методВЭЖХ — для определения количественногосодержания гиперозида, метод ГЖХ – дляопределения жирнокислотного состава [15,16].

Методика спектрофотометрического оп-ределения содержания суммы флавоноидов вплодах боярышника. Это методика с исполь-зованием в качестве стандартного образцакверцетина. Данную методику авторы, с уче-том коэффициента пересчета, предлагаютрассматривать как альтернативную для стан-дартизации плодов боярышника по содержа-нию суммы флавоноидов, в пересчете на ги-перозид [17].

Методика определения количественногосодержания суммы тритерпеновых соедине-

37


ний в цветках, плодах и побегах некоторыхвидов боярышника. Предложен гравиметри-ческий метод [12].

В статье ГФ ХІ «Плоды боярышника» про-водится количественное определение суммыфлавоноидов, в пересчете на гиперозид, и ихсодержание регламентируется на уровне неменее 0.06 %. Методика количественного оп-ределения суммы флавоноидов заключаетсяв следующем: проводится экстракция из сы-рья 95 % спиртом при нагревании, получен-ный экстракт пропускают через колонку сполиамидным сорбентом, собирая фракциюсуммы флавоноидов, затем измеряют опти-ческую плотность полученного раствора придлине волны 365 нм. Параллельно аналогич-ным образом обрабатывают раствор СО ги-перозида [18]. Данная методика определенияколичественного содержания суммы флаво-ноидов, в пересчете на гиперозид, трудоем-ка и трудновоспроизводима.

В монографии Европейской Фармакопеи(ЕФ) на плоды боярышника «Hawthorn be-rries» проводится количественное определе-ние процианидов, в пересчете на цианидинахлорид, и их содержание регламентируетсяна уровне не менее 1 %. Методика определе-

ния процианидинов заключается в следую-щем: проводится экстракция из сырья 70 %спиртом при нагревании, полученный экст-ракт нагревают с раствором кислоты хлори-стоводородной для получения окрашенныхсолей цианидинов, полученные соли экстра-гируют бутанолом и измеряют оптическуюплотность окрашенных растворов при длиневолны 545 нм. Расчет количественного содер-жания проводят, используя значение удель-ного показателя поглощения цианидина хло-рида, который при измеряемой длине волныравен 75 [19].

Как видно из сказанного выше, спектрподходов к стандартизации как сырья боя-рышника, так и препаратов, приготовленныхна его основе, достаточно широк, причемпреобладающим является стандартизацияданных объектов по содержанию суммы фла-воноидов, в пересчете на гиперозид. В то жевремя стандартизация плодов боярышникапо показателю «Количественное определе-ние» в ЕФ и ГФ ХІ кардинально отличаются.

Цель данной работы — изучение качестваплодов боярышника и препаратов, приготов-ленных на их основе, по показателю «Коли-чественное определение» для выяснения воз-

Wavelength 450 475 500 525 550 575 600

Abs

orba

nce

(AU

)

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

0.9

Рисунок 1

Типичные спектры поглощения испытуемых растворов, полученные при определении

количественного содержания антоцианидинов в плодах боярышника

«#» «Name» «Abs<545nm>»1 «Boyaryshnik 1» 0.9366912 «» 0.9439553 «» 0.9384694 «Boyaryshnik 2» 0.8291785 «» 0.8306096 «» 0.8326977 «Boyaryshnik 3» 0.488368 «» 0.4864329 «» 0.486443

38


можности стандартизации данных объектовв соответствии с требованиями ЕФ. Такжерешалась задача разработки менее трудоем-кой методики определения количественногосодержания суммы флавоноидов в плодахбоярышника.

Экспериментальна часть

В качестве объектов исследования исполь-зованы образцы плодов боярышника, со-бранные в Николаевской (1-2), Винниц-кой (3), Сумской (4), Кировоградской (5),Львовской (6), Харьковской (7), Симферо-польской (8) областях Украины.

Данные образцы были проанализированыпо методике ЕФ, в них определено содержа-ние процианидинов (типичные спектры по-глощения, полученные при определении про-цианидинов, приведены на Рис. 1).

Параллельно было проведено определе-ние количественного содержания суммыфлавоноидов, в пересчете на гиперозид. Всвязи с тем, что методика определения коли-чественного содержания суммы флавонои-дов, описанная в ГФ ХІ, достаточно трудоем-ка, перед нами стал вопрос о ее переработке.За основу была взята методика, разработан-ная в лаборатории фарманализа ГП НЭФЦдля введения в АНД «Настойка боярышни-ка».

Разработанная нами методика количе-ственного определения заключается в следу-ющем: измельченное сырье экстрагируют70 % спиртом при нагревании, полученное из-влечение фильтруют и с аликвотой получен-ного фильтрата проводят реакцию с раство-ром AlCl3, измеряя оптическую плотность ис-пытуемого раствора и раствора СО гиперози-да при длине волны 409 нм.

Правильность данной методики проверя-лась методом добавок известных количествгиперозида к аликвоте испытуемого раство-ра. Графики линейной зависимости получен-ных при этом оптических плотностей раство-ров от концентрации добавок гиперозида (снулевой точкой и без нее) и типичные спект-ры поглощения испытуемого раствора боя-рышника и раствора СО гиперозида приве-дены на Рис. 2, 3, 4, 5. Как видно из Рис. 4, 5,во-первых, получен удовлетворительный ко-эффициент корреляции линейной зависимо-сти (R=0.9989), во-вторых, параметры Ауравнения линейной зависимости в случаепостроения графика с использованием нуле-вой точки (раствор без добавок гиперозида)и без нулевой точки статистически значимо

не различаются (в первом случае это величи-на 0.27123 ± 0.0066, во втором — 0.25994 ±0.00974), что свидетельствует о достовернос-ти получаемых результатов определения ко-личественного содержания суммы флавоно-идов по данной методике.

Данные анализа по содержанию проциа-нидинов и суммы флавоноидов представленыв Табл. 1. Как видно из Табл. 1, в двух образ-цах плодов боярышника (в 3 и 8) содержаниепроцианидинов ниже регламентируемогозначения, т.е. данные образцы не удовлетво-ряют требованиям ЕФ. В то же время содер-жание суммы флавоноидов в указанных об-разцах удовлетворяет требованиям ГФ ХІ.Следует отметить, что результаты определе-ния количественного содержания суммыфлавоноидов по разработанной нами методи-ке и методике ГФ ХI (данные представленыпредыдущей работе) коррелируют и отлича-ются в среднем на 3 %.

Также были проанализированы на содер-жание процианидинов 13 образцов настоекиз плодов боярышника различных украин-ских производителей по методике ЕФ, кото-рая была доработана применительно к дан-ной лекарственной форме. Кроме того, па-раллельно по методике утвержденных АНДна настойки из плодов боярышника в тех жеобразцах настоек было проведено определе-ние содержания суммы флавоноидов, в пере-счете на гиперозид. Данные представлены вТабл. 2.

Для определения пределов содержанияпроцианидинов в настойке из плодов боя-рышника в расчет принимали, во-первых,регламентируемое ЕФ содержание проциа-нидинов в плодах боярышника (не менее 1 %),во-вторых, учитывали степень экстракцииопределяемых веществ в процессе полученияпрепарата. Для этого нами был проведен сле-дующий эксперимент: из трех различных об-разцов плодов боярышника, в которых пред-варительно определено содержание проциа-нидинов, были получены настойки боярыш-ника, и в них также определялось содержа-ние процианидинов. В результате данного эк-сперимента было установлено, что в процес-се получения настойки экстрагируется от61 % до 63 % процианидинов. Учитывая разве-дение при получении настойки (1: 10), полу-чаем, что теоретическое содержание проци-анидинов в свежеприготовленной настойкеможет быть около 0.06 %.

Как видно из Табл. 2, содержание проци-анидинов в настойках боярышника меняется

39


Wavelength 350 400 450 500 550

Abs

orba

nce

(AU

)

-0.1

-0.05

0

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

Рисунок 2

«#» «Name» «Abs<409nm>»1 «SO giperozid» 0.290072 «m=0.0327g/50» 0.290764

Типичный спектр поглощения раствора СО гиперозида, полученный при определении содержания

суммы флавоноидов в плодах боярышника

Wavelength (360 380 400 420 440 460

Abs

orba

nce

(AU

)

-0.1

-0.05

0

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

Рисунок 3

«#» «Name» «Abs<409nm>»1 «Boyar» 0.2881592 «»m=4.0011g 0.288445

Типичный спектр поглощения испытуемого раствора, полученный при определении содержания

суммы флавоноидов в плодах боярышника

График зависимости оптических плотностей

испытуемых растворов боярышника от

концентрации добавок гиперозида (с нулевой

точкой)

Рисунок 4 Рисунок 5

График зависимости оптических плотностей

испытуемых растворов боярышника от

концентрации добавок гиперозида (без нулевой

точки)

0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,400,40

0,45

0,50

0,55

0,60

0,65

0,70

0,75

0,80

Linear Regression for Data1_B:Y = A + B * XParam Value sdA 0,25994 0,00974B 1,25058 0,03509R = 0,99882SD = 0,00726, N = 5P = 0,00005

Îï

òè÷

åñêàÿ

ïëî

òíî

ñòü

Äîáàâêè ãèïåðîçèäà (ìã)

0,0 0,1 0,2 0,3 0,40,2

0,3

0,4

0,5

0,6

0,7

0,8

Linear Regression for Data1_B:Y = A + B * XParam Value

sdA 0,27123 0,00656B 1,21222 0,02592R = 0,99909SD = 0,00819, N = 6P = 1,2497E-6

Îï

òè÷åñ

êàÿ

ïëî

òíî

ñòü

Äîáàâêè ãèïåðîçèäà (ìã)

40


в процессе хранения. Если по содержаниюсуммы флавоноидов практически все проана-лизированные серии настоек удовлетворяютрегламентируемым требованиям (не менее0.004 %), то содержание процианидинов в на-стойках 2000 года выпуска и даже 2002 годавыпуска (Николаев, серия 032002) находитсяниже теоретически ожидаемого (не менее0.06 %), несмотря на то, что срок годностиданных серий еще не истек. Это может бытьсвязано, во-первых, с использованием припроизводстве настойки сырья с заниженнымсодержанием процианидинов, во-вторых, сразложением определяемых веществ в про-цессе хранения.

Выводы

1. При введении монографии на плоды бо-ярышника в ГФУ проблематично руковод-ствоваться только требованием ЕФ, регла-ментирующим количественное содержаниепроцианидинов.

2. Не все описанные в ГФ ХІ виды боярыш-ника соответствуют требованиям ЕФ по со-держанию процианидинов.

3. Если, по аналогии с плодами боярышни-ка, в настойках из плодов боярышника пере-ходить на регламентацию в них содержанияпроцианидинов, большинство выпускаемыхотечественных настоек не будет соответство-вать регламентируем требованиям в течениеустановленного срока годности.

4. Разработанная нами методика определе-ния количественного содержания суммыфлавоноидов в плодах боярышника менеетрудоемка по сравнению с методикой, приве-денной в статье ГФ XI «Плоды боярышника»,и позволяет получить достоверные результа-ты количественного определения суммы фла-воноидов.

5. Рекомендуем в национальную часть мо-нографии «Плоды боярышника» ГФУ вклю-чить раздел «Количественное определение.

Таблица 1Содержание процианидинов и суммы флавоноидов в образцах плодов боярышника

Îáðàçöû ïëîäîâ áîÿðûøíèêà Ñîäåðæàíèå ñóììû ôëàâîíîèäîâ(íå ìåíåå 0.06 %)

Ñîäåðæàíèå ïðîöèàíèäèíîâ(íå ìåíåå 1 %)

1 0.078 1.69

2 0.067 1.2

3 0.063 0.79

4 0.085 1.71

5 0.16 2.7

6 0.09 1.7

7 0.162 2.4

8 0.064 0.82

Таблица 2Содержание процианадинов и суммы флавоноидов в образцах настоек из плодов боярышника

Примечание.* — приготовлено из образцов сырья 2, 1, 6, соответственно.

Îáðàçöû íàñòîåêèç ïëîäîâ áîÿðûøíèêà

Ñðîê ãîäíîñòè Ñîäåðæàíèå ñóììûôëàâîíîèäîâ (%)

Ñîäåðæàíèåïðîöèàíèäèíîâ (%)

0301/2004 (Íèêîëàåâ) äî 01.2008 0.0063 0.09

1011/2003 (Íèêîëàåâ) äî 11.2007 0.00507 0.085

050902 (Ñàðåïòà) äî 09.2006 0.0062 0.062

030702 (ÃÍÖËÑ) äî 07.2006 0.0051 0.06

010504 (ÃÍÖËÑ)* äî 05.2008 - 0.074

020504 (ÃÍÖËÑ)* äî 05.2008 - 0.105

030504 (ÃÍÖËÑ)* äî 05.2008 - 0.108

50498 (ÔÔ Ëóãàíñê) äî 05.2002 0.0039 0.03

02.2000 (Íèêîëàåâ) äî 03.2003 0.0040 0.031

07.2000 (Íèêîëàåâ) äî 08.2004 0.0043 0.043

11.2000 (Íèêîëàåâ) äî 12.2004 0.0043 0.044

08.2001 (Íèêîëàåâ) äî 09.2005 0.0050 0.046

03.2002 (Íèêîëàâ) äî 04.2006 0.0046 0.043

41


Флавоноиды» с использованием разработан-ной методики определения количественногосодержания суммы флавоноидов, в пересче-те на гиперозид.

ЛИТЕРАТУРА1. Лікарські рослини: Енциклопедичний довідник / Відп.ред. А.М. Гродзінський. – Київ: Гол.ред. УРЕ, 1990. –С 112.2. Бенькович Е.И., Кличко Ю.А. Пищевые красители изплодов темно-окрашенных видов боярышника // Хи-мия пищевых добавок: Тез. докл. Всесоюзной конф.Черновцы, 25-27 апреля 1989 года. - Киев, 1989. - С. 115.3. Antiischamische Winkung von Flavonoiden aus Cratae-gus / Schuessler M., Acar D., Cordes A., Holze J., RumpA.F.E., Fricke U. // Arch. Pharm. - 1993. – V. 326, No. 9. -S. 706.4. Ковальов В.М., Павлій О.І., Усакова Т.І. Фармакогно-зія з основами біохімії рослин. – Харків: «Прапор»,2000. – 704 с.5. Verwendung von Crataegus-Zuebereitungen zur Proph-ylaxe und Therapie neoplastisher Erkrankungen. Заявка19823679. Германия, МПК6 А 61 К 35/78 / SchumacherKatrin (Nativia Health Products GmbH). - № 19823679.4;Заявлено 20.05.1998; Опубл. 25.11.1999.6. Перспективы создания экстракционных препаратовбоярышника / Марченко Н.В., Лесиовская Е.Е., Сака-нян Е.И., Гончарук О.В., Мясноков В.Ю., Иванов Е.В. //Актуальные проблемы создания новых лекарственныхпрепаратов природного происхождения: Материалы VМеждународного съезда. Санкт-Петербург - Петродво-рец, 5-7 июля 2001 года. – СПб: Изд-во НИИХ СпбГУ,2001. - С. 97-100.7. Mericli A.H., Ergezen K. Flavonoids of Crataegustanacetifolia (Lam.) Pers. (Rosaceae), an epidemic speciesfrom Turkey // Sci. Pharm. - 1994. – V. 62, No. 3. - P. 277-281.8. Melikoglu G., Mericli A.H. Flavonoids of Crataegusstevenii // Pharmazei. - 2000. – V. 55, No. 4. - P. 326-327.9. Киселева Т.А., Самылина И.А. Количественное опре-деление суммы флавоноидов в плодах боярышника //Фармация. – 1987. – Т. 36, № 5. - С. 30-32.10. Применение метода ВЭЖХ в анализе сырья боя-рышника / Евдокимова О.В., Осокин Д.М., Самыли-на И.А., Соколов И.В.: Сб. науч. тр. НИИ фармацииМинистерства здравоохранения Российской Федера-ции. - 1995. – Вып. 34. - С. 105-109.11. Стандартизация настойки плодов боярышника ме-тодом ВЭЖХ / Евдокимова О.В., Осокин Д.М., Самы-лина И.А., Соколов И.В.: Там же. - 1996. – Вып. 35. -С. 85-87.12. Евдокимова О.В., Самылина И.А. Изучение тритер-пеновых соединений сырьевых источников боярышни-ка: Там же. - 1995. – Вып. 34. - С. 172-177.13. Количественное определение гиперозида в сырье ижидком экстракте боярышника методом ВЭЖХ / Мо-рев С.Н., Киселева Т.Л., Попов Д.М., Самылина И.А. //Химико-фармацевтический журнал. - 1989. – Т. 23,№ 7. - С. 853-855.14. Совершенствование анализа и технологии настоеви отваров, содержащих флавоноиды / Аносова О.Г.,Колпакова М.В., Минникова Н.И., Мухамеджемо-ва Д.М., Попов Д.М. // Фармация. - 1994. – Т. 43, № 1. -С. 30-34.15. Стандартизация таблеток плодов боярышника / Са-мылина И.А., Евдокимова О.Р., Девяткина И.А., Ерма-кова В.А. // Тез. докл. ІІІ Рос. нац. конгр. «Человек и ле-

карство» (Москва, 16-20 апреля 1996 года). - М., 1996. -С. 320.16. Евдокимова О.В., Самылина И,А,, Девяткина И.А.Исследование по разработке и стандартизации табле-ток плодов боярышника: Сб. науч. тр. НИИ фармацииМинистерства здравоохранения Российской Федера-ции. - 1998. – Вып. 37. - Ч. 2. - С. 150-158.17. Спектрофотометрическое определение суммы фла-воноидов в пересчете на гиперозид / Евдокимова О.В.,Служаева З.П., Самылина И.А., Казьмина Э.М., Аппо-лонова Л.С.: Там же. - С. 158-165.18. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 2. Общиеметоды анализа. Лекарственное растительное сырье /МЗ СССР. - 11-е изд., доп. - М.: Медицина, 1989. - 400 с.19. European Pharmacopoeia. 4th ed. - Strasbourg: Councilof Europe, 2002. - 2416 p.

РезюмеКотова Е.Е., Котов А.Г., Хованська Н.П.

Стандартизація плодів глоду та лікарських

препаратів на їх основі за показником «Кількісне

визначення»

Вивчено якість плодів глоду та настойок, пригото-ваних на їх основі, за показником «Кількісне визначен-ня» з метою з’ясування можливості стандартизації да-них об’єктів у відповідності до вимог ЄФ. Показано, щопри стандартизації як плодів глоду, так і препаратів,приготованих на їх основі, проблематично керуватисялише вимогами ЄФ, що регламентують кількісний вмістпроціанідинів. Розроблено методику кількісного визна-чення флавоноїдів у плодах глоду, що запропонованадля введення в національну частину монографії ДФУ«Плоди глоду».

SummaryKotova E.E., Kotov A.G., Khovanskaya N.P.

The standardization of hawthorn berries and

preparations on the basis of ones by Assay

The quality of hawthorn berries and tinctures preparedon the basis of ones, by Assay for the purpose of determi-nation of the capacity of those objects standardization inaccordance with EP requirements was studied. It was shownthat under the standardization of hawthorn berries, as wellas preparations on the basis of ones, problematically dire-cted only by EP requirements, which regulated quantita-tive procyanidins content. Procedure of flavonoids assay inhawthorn berries, which was suggested for inclusion in na-tional part of SPU monograph «Hawthorn berries», were de-veloped.

Котова Элина Эдуардовна. Котова Элина Эдуардовна. Котова Элина Эдуардовна. Котова Элина Эдуардовна. Котова Элина Эдуардовна. Окончила Харь-ковский государственный университет (1983).Науч. сотр. лаборатории фармакопейного анали-за ГП НЭФЦ.

Котов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей ГеоргиевичКотов Андрей Георгиевич (р. 1960). ОкончилХарьковский фармацевтический институт (1982).Ст. науч. сотр. сектора природных гетероцикли-ческих соединений ГП ГНЦЛС (2001). К.фарм.н.(1996). Ст. науч.сотр. (2004).

Хованская Наталья Петровна. Хованская Наталья Петровна. Хованская Наталья Петровна. Хованская Наталья Петровна. Хованская Наталья Петровна. ОкончилаХарьковский государственный университет. Ра-ботает в ГНЦЛС (с 1970). Зав. лабораторией фар-макопейного анализа ГП «Научно-экспертныйфармакопейный центр». К.фарм.н. (1992).

42


Ô³òîõ³ì³÷í³ äîñë³äæåííÿ

ÓÄÊ 615:322:577.127.4:577.114

Ëèòâèíåíêî Â.È., Áóáåí÷èêîâà Â.Í., Äðîçäîâà È.Ë.Ãîñóäàðñòâåííîå ïðåäïðèÿòèå «Ãîñóäàðñòâåííûé íàó÷íûé öåíòð ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ»Êóðñêèé ãîñóäàðñòâåííûé ìåäèöèíñêèé óíèâåðñèòåò, Ðîññèÿ

Èçó÷åíèå ñîñòàâà ôëàâîíîèäîâ è ïîëèñàõàðèäîâ òðàâû ìàëüâû íèçêîé(Malva pusilla Smith.)

В статье приведены результаты исследования флавоноидов и полисахаридов травы Malva pusilla Smith. методамибумажной хроматографии и ВЭЖХ. Указанными методами обнаружено 7 флавоноидов, 6 из них в данном растенииидентифицированы впервые. Установлено, что углеводный комплекс травы Malva pusilla Smith. представлен водо-растворимыми полисахаридами, пектиновыми веществами, гемицеллюлозами; определен их моносахаридный со-став.

Семейство Мальвовые включает 75 родови около 1000 видов, распространенных вовсех частях света, за исключением очень хо-лодных областей. В странах СНГ произраста-ет 12 родов и около 90 видов этого семей-ства [5]. Одним из широко распространенныхродов семейства Мальвовые является родМальва, многие представители которого из-давна и широко применяются в научной инародной медицине различных стран для ле-чения ряда заболеваний.

Мальва низкая — Malva pusilla Smith. —одно- или двулетнее травянистое растениесемейства мальвовые (Malvaceae), широкораспространенное на всей территории Евро-пейской части СНГ, Западной и ВосточнойСибири, на Дальнем Востоке [6].

Мальва низкая растет как обыкновенныйи широко распространенный рудеральныйсорняк у дорог, вблизи жилья, по улицам, наогородах, в садах и парках; встречается поущельям в горах, по сухим каменистым рус-лам на высоте до 2500 м над уровнем моря [5,6].

Листья этого растения в качестве офици-нального лекарственного сырья описаны в I-IV изданиях Российской Фармакопеи [10].Цветки этого вида являлись официнальнымсырьем в Японии [6, 13].

В настоящее время мальва низкая широ-ко применяется в народной медицине привоспалительных заболеваниях верхних дыха-тельных путей, как отхаркивающее, обвола-кивающее средство, при легочных заболева-ниях (в частности, при туберкулезе), гастри-тах, колитах. Наружно его используют в видепримочек при кожных заболеваниях, язвен-ных процессах, опухолях, геморрое. Этот видприменяют в качестве заменителя Althaeaofficinalis L. [6]. Такое использование объяс-

няется наличием в корнях и листьях мальвынизкой большого количества слизи.

Известно, что мальва содержит также ви-тамин С, стероидные соединения (фитосте-рин), жирное масло (в состав которого входитпальмитиновая, стеариновая, олеиновая кис-лоты), воск, каротиноиды, дубильные вещест-ва. В цветках обнаружен антоциан (мальвин)[6].

Прежде всего, мальва низкая известна какрастение, содержащее полисахариды. Ранеенами показано, что этот вид содержит комп-лекс БАВ фенольной природы, в том числе ифлавоноиды [2].

Целью нашей работы явилось исследова-ние компонентного состава флавоноидов иполисахаридов надземной части мальвы низ-кой.

Материалы и методы

Обьектом исследования служила воздуш-но-сухая измельченная надземная частьмальвы низкой. Сырье заготовлено в 2000-2002 гг. в Курской области (окр. г. Курска;Курчатовский р-н, п. Дичня) в период массо-вого цветения растений.

Для выделения полифенольных соедине-ний воздушно-сухое сырье измельчали доразмера частиц, проходящих сквозь сито сразмером отверстий 2 мм. 100 г сырья экстра-гировали 70 % спиртом этиловым при соотно-шении сырье-экстрагент 1:5 путем нагрева-ния на кипящей водяной бане в колбе с об-ратным холодильником. Объединенные из-влечения упаривали под вакуумом до водно-го остатка, охлаждали, фильтровали (для от-деления хлорофилла и смол). Фильтрат ис-пользовали для последовательной жидкост-ной экстракции органическими растворите-лями с увеличивающейся полярностью: хло-

43


роформом, этилацетатом. Водный остатокспирто-водного извлечения обрабатывали 7-8 раз в делительной воронке равным объемомхлороформа. Водный остаток после экстрак-ции хлороформом нагревали на водяной банедля удаления хлороформа, охлаждали и обра-батывали этилацетатом. Объединенные эти-лацетатные извлечения упаривали и получа-ли этилацетатную фракцию.

Наличие флавоноидов определяли в этил-ацетатных фракциях и водном остатке извле-чения из травы мальвы низкой с помощью ха-рактерных качественных реакций (цианиди-новой пробы и цианидиновой пробы по Бри-анту, с 2 % раствором алюминия хлорида, с10 % раствором натрия гидроксида) [1, 11, 12].Положительные реакции свидетельствуют оприсутствии флавоноидов в исследуемом сы-рье.

Также нами была использована хромато-графия на бумаге («Ленинградская средняя»)в системах растворителей: 15 % раствор кис-лоты уксусной; бензол — этилацетат - кисло-та уксусная (50:50:1) с использованием дляпроявления специфических реактивов (парыаммиака, 10 % раствор натрия гидроксида в96 % спирте этиловом, 2 % раствор цирконияхлороксида в спирте метиловом) [9]. Хрома-тограммы просматривали в УФ-свете до ипосле обработки хромогенными реактивами.

Для детального изучения компонентногосостава флавоноидных соединений травымальвы низкой применяли метод ВЭЖХ.

Для исследования надземную часть маль-вы низкой измельчали до размера частиц,проходящих сквозь сито с размером отвер-стий 2 мм. 10.0 г сырья помещали в колбу вме-стимостью 250 мл, прибавляли 50 мл 70 %спирта этилового. Колбу присоединяли к об-ратному холодильнику и нагревали на кипя-щей водяной бане в течение 2 ч с момента за-кипания спирто-водной смеси. После охлаж-дения смесь фильтровали через бумажныйфильтр в мерную колбу вместимостью 100 мли доводили объем 70 % спиртом этиловым дометки (испытуемый раствор). Параллельноготовили серию 0.05 % растворов сравненияфлавоноидов в спирте метиловом.

Анализ проводили на высокоэффектив-ном жидкостном хроматографе фирмы «GIL-SON» (Франция) (модель 305) с ручным ин-жектором RHEODYNE-7125 (USA) с последу-ющей компьютерной обработкой результа-тов исследования (программа «МультиХромдля «Windows»). Хроматографическая колон-ка PLATINUM EPS C 18 100 A, размером

(4.6 × 250) мм с размером частиц 5 мкм. Под-вижная фаза: ацетонитрил - вода - кислотафосфорная концентрированная (400:600:5).Скорость подвижной фазы 0.8 мл/мин. Де-тектирование проводилось с помощью УФ-детектора GILSON UV-VIS (модель 151), рабо-чая длина волны 254 нм. Объем вводимойпробы — 10 мкл. Температура колонки ком-натная.

Идентификацию разделенных веществпроводили путем сопоставления относитель-ных времен удерживания пиков, полученныхна хроматограмме пробы, с относительнымивременами удерживания стандартных ра-створов.

Оценку количественного содержанияидентифицированных веществ в исследуе-мом образце проводили по средним значени-ям площадей пиков, используя метод внут-ренней нормализации.

Из шрота, оставшегося после полученияполифенольных соединений, последователь-но выделяли полисахариды по методикеН.К. Кочеткова [3]: сначала водорастворимыеполисахаридные комплексы (ВРПС), затемпектиновые вещества (ПВ)и гемицеллюлозы(ГЦ А, ГЦ Б).

Для получения ВРПС использовали воз-душно-сухой шрот сырья после экстракцииполифенольных соединений 70 % спиртомэтиловым [1]. 100 г воздушно-сухого шротаэкстрагировали 2 л горячей воды при нагре-вании до температуры 95 °С в течение 1 ч припостоянном перемешивании. Повторное из-влечение полисахаридов проводили дваждыпри соотношении сырье-экстрагент 1:10. Ра-стительный материал отделяли центрифуги-рованием, а объединенные экстракты упари-вали до 1/5 первоначального объема. Поли-сахариды осаждали трехкратным (по отноше-нию к извлечению) объемом 96 % спирта эти-лового при комнатной температуре. Выпав-шие плотные осадки отфильтровывали, про-мывали 96 % спиртом этиловым, ацетоном,затем высушивали и взвешивали.

Из шрота, оставшегося после полученияВРПС, выделяли ПВ. Экстракцию сырья про-водили трехкратно смесью 0.5 % растворовкислоты щавелевой и оксалата аммония (1:1)в соотношении 1:20 при температуре (80-85) °С в течение 2 ч. Объединенные экстрак-ты концентрировали и осаждали пятикрат-ным объемом 96 % спирта этилового. Полу-ченные осадки отфильтровывали, промывалиспиртом этиловым, высушивали и взвешива-ли.

44


Из шрота, оставшегося после выделенияПВ, выделили ГЦ А и ГЦ Б. Экстракцию про-водили 10 % раствором натрия гидроксида всоотношении 1:5 при комнатной температу-ре в течение 12 ч. При прибавлении кислотыуксусной ледяной образовался осадок ГЦ А,который отфильтровывали, высушивали ивзвешивали. К фильтрату прибавляли дву-кратный объем 96 % спирта этилового, приэтом образовывался осадок ГЦ Б, которыйпромывали 96 % спиртом этиловым, высуши-вали и взвешивали [3].

Для установления моносахаридного соста-ва ВРПС, ПВ, ГЦ проводили их гидролиз кис-лотой серной (1 моль/л) [7].

Моносахариды определяли в гидролизатахметодом хроматографии на бумаге в систе-мах растворителей: н.бутанол - пиридин -вода (6:4:3) и этилацетат - кислота уксусная -кислота муравьиная - вода (18:3:1:4) парал-лельно с достоверными образцами моносаха-ридов. Хроматограммы после высушиванияна воздухе обрабатывали анилинфталатнымреактивом и нагревали в сушильном шкафупри температуре (100-105) °С; моносахаридыпроявлялись в виде красновато-коричневыхпятен.

Определение количественного содержа-ния сахаров в гидролизатах выделенныхВРПС и ПВ проводили денситометрическипосле хроматографии в тонком слое сорбен-та [8].

Результаты и их обсуждение

В результате хроматографического анали-за в траве мальвы низкой в УФ-свете при дли-не волны 366 нм обнаружено не менее 10 ве-ществ в виде темных пятен и пятен с желтойфлуоресценцией, отнесенных к флавоноид-ным соединениям.

В траве мальвы низкой методом ВЭЖХбыло установлено наличие 7 веществ флаво-ноидной природы, которые по относитель-ным временам удерживания стандартных об-

разцов были идентифицированы как лютео-лин, виценин, ориентин, рутин, гиперозид,гесперидин, апигенин. Методом внутреннейнормализации определено, что преобладаю-щим флавоноидом является ориентин (3.59 %)(Табл. 1).

В траве мальвы низкой лютеолин, вице-нин, ориентин, гиперозид, гесперидин, апи-генин идентифицированы впервые.

В результате проведенных исследованийбыли выделены ВРПС, ПВ, ГЦ А, ГЦ Б. ВыходВРПС составил 13.6 %, ПВ — 13.1 %, ГЦ А —1.7 %, ГЦ Б — 0.9 % от воздушно-сухого сырья(Табл. 2).

Проведенный гравиметрический анализпоказал преобладание во всех исследуемыхполисахаридных комплексах водораствори-мой фракции полисахаридов и пектиновыхвеществ.

ВРПС, выделенный из изучаемого расте-ния, представляет собой аморфный порошоксветло-коричневого цвета; при растворениив воде образует опалесцирующий раствор(рН 1 % водного раствора 5-6); растворим так-же в водных растворах кислот и щелочей и нерастворим в органических растворителях.Полисахаридный комплекс дает положитель-ные реакции осаждения со спиртом, ацето-ном, реакцию с реактивом Фелинга послекислотного расщепления полисахаридов [7].

ПВ из травы мальвы низкой представляетсобой аморфный порошок светло-серого цве-та, хорошо растворим в воде с образованиемвязких растворов (рН 1 % водного раствора 3-4). Водный раствор пектиновых веществосаждается 1 % раствором алюминия сульфа-та с образованием пектатов [4].

Методом хроматографии на бумаге парал-лельно с достоверными образцами сахаров вгидролизате ВРПС идентифицировали глю-козу, галактозу, арабинозу, рамнозу, ксило-зу, глюкуроновую и галактуроновую кисло-ты. По величине пятен на хроматограммах иинтенсивности их окраски, по предваритель-

Âåùåñòâî Âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ, ìèí. Êîëè÷åñòâåííîå ñîäåðæàíèå, %

îðèåíòèí 15.81 3.59

ãèïåðîçèä 26.31 0.37

ðóòèí 27.66 0.61

ãåñïåðèäèí 30.87 1.71

âèöåíèí 41.69 0.03

ëþòåîëèí 83.57 0.04

àïèãåíèí 96.44 0.35

Таблица 1Количественное содержание флавоноидов в траве мальвы низкой

45


ной оценке, основными по содержанию вВРПС являются глюкоза и арабиноза, в гид-ролизате ПВ – галактуроновая кислота. Кро-ме того, в выделенных ПВ обнаружены и мо-носахариды – глюкоза, галактоза, арабино-за, рамноза, ксилоза. Данные качественного,а также количественного анализа моносаха-ридного состава ВРПС и ПВ, определенныеденситометрически, представлены в Табл. 2.

ГЦ А и ГЦ Б представляют собой аморф-ные порошки желтовато-коричневого цвета.В гидролизате ГЦ А и ГЦ Б обнаружены кси-лоза, рамноза, арабиноза, глюкоза и галакто-за. По величине пятен и интенсивности их ок-раски определено, что преобладающим моно-сахаридом является ксилоза.

Выводы

1. Методами бумажной хроматографии иВЭЖХ изучен компонентный состав флаво-ноидных соединений в траве мальвы низкой.Методом ВЭЖХ обнаружено 7 веществ фла-воноидной природы, которые были иденти-фицированы как ориентин, гиперозид, рутин,гесперидин, виценин, лютеолин, апигенин;преобладающим из них является ориентин. 6веществ (ориентин, гиперозид, гесперидин,виценин, лютеолин, апигенин) в траве маль-вы низкой обнаружены впервые.

2. Из травы мальвы низкой были выделе-ны и разделены на фракции полисахариды.Установлено, что углеводный комплекс дан-ного растения представлен ВРПС, ПВ, ГЦ; ме-тодом бумажной хроматографии установлених качественный моносахаридный состав.Денситометрически определено количе-ственное содержание моносахаридов в ВРПСи ПВ. Преобладающими в полисахаридномкомплексе являются ВРПС и ПВ.

ЛИТЕРАТУРА1. Бандюкова В.А., Шинкаренко А.А., Казаков А.Л. Ме-тоды исследования природных флавоноидов. - Пяти-горск, 1977. – 72 c.

2. Дроздова И.Л. Фармакогностическое изучение маль-вы низкой (Malva pusilla Smith.) // Фармация на совре-менном этапе – проблемы и достижения: Сб. науч. тр. -Т. XXXIX. - Ч. II. - М., 2000. - С. 219-222.3. Кочетков Н.К. Химия биологически активных при-родных соединений. - М., 1970. – 378 с.4. Лигай Л.В., Рахимов Д.А., Бандюкова В.А. Изучениеуглеводов Malva neglecta L. // Химия природных соеди-ненений. - 1989. - № 2. - С. 280-281.5. Никитин В.В. Сорные растения флоры СССР. - Л.,1983. – 451 с.6. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения,их химический состав, использование; СемействаPaeoniaceae-Thymelaeaceae. - Л., 1985. – 336 с.7. Степаненко Б.Н. Химия и биохимия углеводов (По-лисахариды). - М., 1978. – 256 с.8. Филиппов М.П. Колориметрическое определениеуронидной части в пектиновых веществах // Изв. АНМССР. Сер. биол. и хим. наук. - 1973. - № 3. - С. 76-79.9. Хроматография на бумаге / Под ред. И.М. Хайца,К. Мацека. - М., 1962. – 851 с.10. Шретер Г. К. Лекарственные растения и раститель-ное сырье, включенные в отечественные фармакопеи. -М., 1972. – 328 c.11. Briant E.T. // J. Amer. Pharm. Assoc. - 1950. - Vol. 39,No. 8. - P. 480-488.12. Geissman T.A. Chemistry of flavonoid compounds. -Oxford, 1962.13. Klan Z. Drogy vsech likopisu v prehledu. - Praha,1948. – 78 s.

РезюмеЛитвиненко В.І., Бубєнчікова В.М., Дроздова І.Л.

Вивчення складу флавоноїдів і полісахаридів трави

Malva pusillaMalva pusillaMalva pusillaMalva pusillaMalva pusilla Smith.

У статті наведені результати дослідження флаво-ноїдів і полісахаридів трави Malva pusilla Smith. мето-дами паперової хроматографії та ВЕРХ. Зазначенимиметодами виявлено 7 флавоноїдів, 6 із них в даній рос-лині ідентифіковано вперше. Встановлено, що вуглевод-ний комплекс трави Malva pusilla Smith. представленийводорозчинними полісахаридами, пектиновими речови-нами, геміцелюлозами; визначений їхній моносахарид-ний склад.

SummaryLitvinenko V.I., Bubenchikova V.N., Drozdova I.L.

Study of flavonoids and polysaccharides composition of

Malva pusilla Malva pusilla Malva pusilla Malva pusilla Malva pusilla Smith. herb

In the article the results of the study of Malva pusillaSmith herb flavonoids and polysaccharides by the methodsof paper chromatography and HPLC are given. Seven fla-

Ìîíîñàõàðèäíûé ñîñòàâ, % ê ïîëèñàõàðèäíîìó êîìïëåêñó

Ïîëèñà-õàðèäû

Âûõîä,% îò âîçäóøíî-

ñóõîãî ñûðüÿ Ãëþêîçà Ãàëàêòîçà Êñèëîçà Àðàáèíîçà ÐàìíîçàÊèñëîòà

ãàëàêòóðî-íîâàÿ

Êèñëîòàãëþêóðî-

íîâàÿ

ÂÐÏÑ 13.6 9.09 2.45 0.70 6.29 0.70 4.20 2.10

ÏÂ 13.1 4.31 1.17 1.97 1.57 0.78 88.07 -

ÃÖ À 1.7 + + + + + - -

ÃÖ Á 0.9 + + + + + - -

Таблица 2Характеристика полисахаридов, выделенных из травы мальвы низкой

Примечания:«+» — малые количества моносахарида;«-» — моносахарид не обнаружен.

46


vonoids have been revealed by above-mentioned methods;six from those ones have been identified in this plant forthe first time. It was established that Malva pusilla Smithherb carbohydrate complex is represented by water-solu-ble polysaccharides, pectic substances, hemicelluloses;their monosaccharidic composition was established.

Литвиненко Василий ИвановичЛитвиненко Василий ИвановичЛитвиненко Василий ИвановичЛитвиненко Василий ИвановичЛитвиненко Василий Иванович (р. 1932).Окончил Харьковский фармацевтический инсти-тут (1959). Д.х.н. (1990). Профессор (1991). Акаде-мик ИА Украины (2000). Зав. сектором химии итехнологии фенольных препаратов ГП ГНЦЛС.

Бубенчикова Валентина Николаевна.Бубенчикова Валентина Николаевна.Бубенчикова Валентина Николаевна.Бубенчикова Валентина Николаевна.Бубенчикова Валентина Николаевна. Окон-чила Курский государственный медицинский ин-

ститут (1974). Д.ф.н. (1993). Профессор (1994). Зав.кафедрой фармакогнозии с курсом ботаники Кур-ского государственного медицинского универси-тета (1994).

Дроздова Ирина Леонидовна.Дроздова Ирина Леонидовна.Дроздова Ирина Леонидовна.Дроздова Ирина Леонидовна.Дроздова Ирина Леонидовна. Окончила Кур-ский государственный медицинский универси-тет (1998). К.ф.н. (2000). Ассистент кафедры фар-макогнозии с курсом ботаники Курского государ-ственного медицинского университета (2000).

ÓÄÊ 547.814.5:577.152.311:542.978:542.947:582.736:582.893.6

ßí÷åíêî Ï.Ñ., Êîâàëüîâà À.Ì., Ãåîðã³ºâñüêèé Ã.Â., Êîì³ñàðåíêî À.Ì.Íàö³îíàëüíèé ôàðìàöåâòè÷íèé óí³âåðñèòåòÄåðæàâíå ï³äïðèºìñòâî «Äåðæàâíèé íàóêîâèé öåíòð ë³êàðñüêèõ çàñîá³â»

Âèä³ëåííÿ òà âèâ÷åííÿ ôëàâîíî¿ä³â äåÿêèõ ðîñëèí ðîäèí Áîáîâ³ òàÑåëåðîâ³ òà ¿õ ë³ïàçîòðîïíà àêòèâí³ñòü

Виділено та встановлено структуру 19 речовин флавоноїдної природи із рослин родин Бобові (Vicia tenuifolia Roth.,Coronilla varia L., Melilotus albus Medik.) і Селерові (Heracleum sphondylium L., Daucus carota L.) та субстанції піфламін.Із субстанції флаванабол виділено ізофлавоноїдний глікозид ононін. Уперше встановлено ліпазотропну активність11 речовин флавоноїдної природи (кверцетин, дактилін, гіперозид, полістахозид, астрагалозид, рутин, кемпферол,астрагалін, нікотифлорин, байкалеїн, лютеолін) та ізофлавоноїдного глікозиду ононіну. Найбільш перспективнимидля подальшого дослідження визначені активатори байкалеїн, астрагалозид і лютеолін та інгібітор ононін.

На сучасному фармацевтичному ринкуприблизно кожний третій із препаратів, щокористуються найбільшим попитом, - препа-рат природного походження або похідне при-родної сполуки, що розроблені на базі етно-ботаніки [1].

Одним із яскравих прикладів таких препа-ратів є препарат Ксенікал (орлістат), розроб-лений та впроваджений компанією «Хоф-фманн-Ля Рош». Цей лікарський засібвідкрив нову групу препаратів для терапіїожиріння – селективні інгібітори панкреа-тичної ліпази. Ксенікал розроблений на ос-нові гідрованого похідного природної сполу-ки ліпстатину, що продукується Streptomycestoxytricini [2, 3].

Природні, зокрема рослинні, біологічноактивні речовини є перспективним джереломліпазотропних, тобто здатних впливати наактивність ліпаз, агентів, які можуть застосо-вуватися при різноманітних порушенняхліпідного метаболізму (ожиріння, атероскле-роз, дісліпідемія тощо), або патологічних ста-нах, що пов’язані з порушенням нормальноїактивності ліпаз (ліпаземічні стани, недо-статність травних ліпаз тощо). При цьому слідвідзначити, що активатори ліпаз, на відміну

від інгібіторів, недостатньо досліджені та уданий момент не знаходять застосування вмедицині. Тому ми вважаємо доцільним по-шук активаторів ліпаз рослинного походжен-ня, зокрема сумарних препаратів, що маютьвласну фармакологічну активність, для ство-рення комбінованих ферментних засобів ізпідвищеною ліполітичною активністю.

Відомо багато праць, присвячених інгібіто-рам ліпаз флавоноїдної структури. Так, виз-начена інгібуюча активність танінів катехіно-вої природи [4], флавоноїду 3-метоксигалан-гіну (3-метокси-5,7-дигідроксифлавону), ви-діленого з Alpinia officinarum (деякі інші фла-воноїди даної рослини також мають ліпазо-тропну активність) [5]. Досліджені такожфлавоноїди гесперидин та неогесперидин,виділені з Citrus unshiu, які пригнічують ак-тивність свинячої панкреатичної ліпази таліпази Pseudomonas [6]. Вивчено механізм діїінгібіторів ліпази - ізофлавоноїдів біоханіну Ата формононетіну, виділених із Cicer arieti-num [7].

В результаті попередніх досліджень буловстановлено позитивну ліпазотропну ак-тивність екстрактів рослин родин Бобові таСелерові, що є об’єктами даного досліджен-

47


ня, та сумарних препаратів із рослинної си-ровини піфламін і флаванабол [8].

Все це доводить надзвичайно високу пер-спективність пошуку ліпазотропних агентівсаме серед речовин флавоноїдної структури.

Ми продовжуємо публікацію результатівдосліджень із пошуку ліпазотропних агентівсеред фенольних сполук рослин родин Бобовіта Селерові. Метою даної роботи є виділен-ня, хімічне дослідження (ідентифікація) тавизначення ліпазотропної активності деякихпохідних бензо-γ-пірону (флавоноїди та ізо-флавоноїди із деяких рослин родин Бобові таСелерові та із сумарних рослинних препа-ратів).

Матеріали та методи

Сировиною для виділення індивідуальнихречовин була трава рослин Heracleum spho-ndylium L., Daucus carota L. (Apiaceae); Viciatenuifolia Roth., Coronilla varia L., Melilotusalbus Medik. (Fabaceae), зібрана у липні2003 року в Харківському та Дергачівськомурайонах Харківський області, та субстанціїпіфламін та флаванабол.

Виділення суми флавоноїдів із сировинипроводили екстракцією 80 % спиртом із на-ступним упарюванням до водного залишку тайого фракціонуванням органічними розчин-никами (петролейним ефіром, хлороформом,етилацетатом, спирто-етилацетатними сумі-шами) у порядку зростання полярності роз-чинника. Фракції, що містили цільову групуречовин, упарювали. Одержані суми флаво-ноїдних сполук розділяли за допомогою хро-матографії на колонках, заповнених поліамід-ним сорбентом або силікагелем із 5 % гіпсу,контроль за хроматографуванням проводилив УФ-світлі, за допомогою хроматографії напапері та тонкошарової хроматографії. Деякісуміші, що не вдалося розділити на зазначе-них колонках, були повторно розділені на ко-лонках, заповнених силікагелем із 5 % гіпсу[9, 10].

Ононін із субстанції флаванабол виділеноекстракцією водою з наступним фракціону-ванням н-бутанолом із 15 % бензолу та виді-ленням речовини на колонці, заповненоюполіамідним сорбентом.

Ідентифікацію виділених речовин прово-дили після підтвердження їх флавоноїдноїструктури за допомогою загальних якіснихреакцій. У попередніх дослідженнях вивченохроматографічну поведінку, спектральні ха-рактеристики та проведені кольорові реакції[11, 12]. Для ідентифікації речовин порівню-

вали їх фізико-хімічні властивості із власти-востями достовірних зразків. Температуруплавлення визначали за допомогою приладу«Buchi Melting Point B-545» (Швейцарія), ІЧ-спектри зняті на приладі «Nicolet Avatar320 IR» (США), УФ-спектри одержані наспектрофотометрі «Hewlett Packard HP 8452».Елементний аналіз проведено на автоматич-ному аналізаторі «С-H-N Hewlett PackardM-185» (США).

Визначення ліпазотропної активності про-водили за допомогою розробленої нами моди-фікації методу рН-статування для рослиннихБАР [13, 14]. Суть даного методу полягає упідтримці певного значення рН протягомліполітичної реакції за допомогою титран-ту – розчину лугу (0.33 М та 0.1 М розчининатрію гідроксиду). Активність ліпази про-порційна швидкості витрати титранту. Ліпа-зотропну активність речовини встановлюва-ли при визначенні достовірної різниці міжшвидкістю витрати титранту у досліді з ви-пробовуваною речовиною та контрольномудосліді. Використовували методи статистич-ної обробки та інтерпретації результатів, опи-сані в [15].

Для проведення екстракції, хроматографу-вання, кристалізації та ін. використовувалиреактиви та розчинники марок х.ч. та ч.д.а.

Як модельний фермент використовувалипанкреатин (Pancreatin from hog pancreas,«Fluka», кат. № 76190, номінальна активністьне менше 8 ЛО/мг, паспортна активність пре-парату 27 ЛО/мг), який вводили в концент-рації 5.1×10-4 г/мл. Як субстрат використову-вали оливкову олію фармакопейної якості.Речовини вводили в концентрації 1×10-4 г/мл.

Зразки байкалеїну, авікулярину, гіперози-ду, полістахозиду та дактиліну, що були вико-ристані для визначення ліпазотропної актив-ності, предоставлені д.ф.н., професором Ко-місаренко Н.Ф.

Обговорення результатів із виділенняіндивідуальних речовин

Використання методів багаторазової тадробної екстракції і розділювальної хрома-тографії з подальшою перекристалізацієюречовин дозволило виділити з наведеної си-ровини флавони, флавоноли (як аглікони, такі глікозиди) та ізофлавоноїдний глікозидононін (Таблиця).

Таким чином, із трави зазначених вищерослин було виділено та ідентифіковано 5 ре-човин, що є флавонами (із них 2 — С-гліко-зиди), 5 флавонолів групи кемпферолу (із них

48


Ðå÷îâèíà Äæåðåëî âèä³ëåííÿÁðóòòî-ôîðìóëà

Ò.ïë.(°Ñ)

Îïòè÷íåîáåðòàííÿ Ìåòîäè ³äåíòèô³êàö³¿

Ôëàâîíè

àï³ãåí³í(5,7,4'-òðèã³äðîêñèôëàâîí)

òðàâàD. carota

Ñ15Í10Î5 343 � 345 -

- äàí³ åëåìåíòíîãî ñêëàäó;- ²×-ñïåêòð (3310 ñì-1 (ã³äðîêñèãðóïè),

1650 ñì-1 (îêñîãðóïà ã-ï³ðîíó),

1608 ñì-1, 1578 ñì-1, 1515 ñì-1 òà1445 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëüöå));

- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;

- äàí³ àöåòèëóâàííÿ (òðèàöåòèëüíåïîõ³äíå ç ò. ïë. (178 � 181)°Ñ);

- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðèïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³ùóâàííÿ ç äîñ-

òîâ³ðíèì çðàçêîì àï³ãåí³íó.

ñàïîíàðåòèí(5,7,4'-òðèã³äðîêñè-6-Ñ-â-

D-ãëþêîï³ðàíîçèëôëàâîí)

òðàâàC. varia

Ñ21Í20Î10 194 � 197[ ]20

Dα =

� 48.5° (ìåòàíîë)

- äàí³ åëåìåíòíîãî ñêëàäó;- îïòè÷íå îáåðòàííÿ;

- ²×-ñïåêòð (3300 ñì-1, 3000 ñì-1

(ã³äðîêñèãðóïè), 1669 ñì-1 (îêñîãðóïàã-ï³ðîíó), 1580 ñì-1, 1515 ñì-1 òà

1500 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëüöå);

- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;- äàí³ ã³äðîë³çó 7% ñ³ð÷àíîþ êèñëî-

òîþ (ã³äðîë³ç íå â³äáóâàºòüñÿ);

- äàí³ ðîçùåïëåííÿ éîäèñòîâîäíåâîþêèñëîòîþ â ñåðåäîâèù³ ð³äêîãî

ôåíîëó òà îöòîâîãî àíã³äðèäó

(àï³ãåí³í òà D-ãëþêîçà);- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðè

ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-òîâ³ðíèì çðàçêîì ñàïîíàðåòèíó.

ëþòåîë³í

(5,7,3',4'-òåòðà-ã³äðîêñèôëàâîí)

òðàâà

D. carota,V. tenuifolia (âïåðøå),

ñóáñòàíö³ÿ ï³ôëàì³í

Ñ15Í10Î6 232 � 241 -

- äàí³ åëåìåíòíîãî ñêëàäó;

- ²×-ñïåêòð (3410 ñì-1 (ã³äðîêñèãðóïè),1652 ñì-1 (îêñîãðóïà ã-ï³ðîíó),

1610 ñì-1, 1580 ñì-1, 1518 ñì-1 òà

1444 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëüöå));- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;

- äàí³ àöåòèëóâàííÿ (òåòðàöåòèëüíå

ïîõ³äíå ç ò. ïë.. (204 � 226)°Ñ;- äàí³ ëóæíî¿ äåñòðóêöèè (ôëîðîãëþ-

öèí òà 3,4-äèã³äðîêñèáåíçîéíà êèñ-

ëîòà);- â³äñóòí³ñòü äåïðåññ³¿ òåìïåðàòóðè

ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-òîâ³ðíèì çðàçêîì ëþòåîë³íó.

ãîìîîð³ºíòèí

5,7,3',4'-òåòðàã³äðîêñè-6-Ñ-â-D-ãëþêîï³ðàíîçèë-

ôëàâîí

òðàâà

C. variaC21H20O11 226 � 230

[ ]20

Dα =

+ 23° (ìåòàíîë)



1580 ñì-1, 1550 ñì-1, 1505 ñì-1 (àðîìà-

òè÷íå ê³ëüöå));- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;

- äàí³ ã³äðîë³çó 7 % ñ³ð÷àíîþ êèñëî-

òîþ (ã³äðîë³ç íå â³äáóâàºòüñÿ);- äàí³ ðîçùåïëåííÿ éîäèñòîâäíåâîþ

êèñëîòîþ â ñåðåäîâèù³ ð³äêîãî ôåíî-

ëó òà îöòîâîãî àíã³äðèäó (ëþòåîë³í òàD-ãëþêîçà);

- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðè

ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³ùóâàííÿ ç äîñ-òîâ³ðíèì çðàçêîì ãîìîîð³ºíòèíó.

Таблиця 1Характеристика фізико-хімічних властивостей виділених речовин

Ä

49



Ò.ïë.(°Ñ)


ä³îñìåòèí

(5,7,3'-òðèã³äðîêñè-4'-

ìåòîêñèôëàâîí)

òðàâà

D. carota,

V. tenuifolia (âïåðøå)

C16H12O6 260 � 263 -


- ²×-ñïåêòð (2985 ñì-1 (ìåòîêñèëüíàãðóïà), 3395 ñì-1 (ã³äðîêñèãðóïè),


1580 ñì-1 òà 1520 ñì-1 (àðîìàòè÷íå

ê³ëüöå));


- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðèïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-

òîâ³ðíèì çðaàçêîì ä³îñìåòèíó.

Ôëàâîíîëè

Ãðóïïà êåìïôåðîëó

êåìïôåðîë

(3,5,7,4'-òåòðà-

ã³äðîêñèôëàâîí)

Òðàâà

V. tenuifolia (âïåðøå),

Ñ. varia òàD. carota, ñóáñòàíö³ÿ

ï³ôëàì³í

Ñ15Í10Î6 273 � 275 -


- ²×-ñïåêòð (3340 ñì-1 òà 3200 ñì-1

(ã³äðîêñèãðóïè), 1650 ñì-1 (îêñîãðóïàã-ï³ðîíó), 1570 ñì-1 òà 1510 ñì-1 (àðî-

ìàòè÷íå ê³ëüöå));

- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;- äàí³ àöåòèëóâàííÿ (òåòðàöåòèëüíå

ïîõ³äíå ç ò. ïë. (181 � 184)°Ñ);

- äàí³ ëóæíî¿ äåñòðóêö³¿ (âèçíà÷åíîôëîðîãëþöèí òà ï-îêñèáåíçîéíó

êèñëîòó);

- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðèïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç

äîñòîâ³ðíèì çðàçêîì êåìïôåðîëó.

àñòðàãàë³í(3-(Î-â-D-ãëþêî-

ï³ðàíîçèë)-5,7,4'-

òðèîêñèôëàâîí

òðàâàÑ. varia òà

D. carotaÑ21Í20Î11 196 � 198

[ ]20

Dα =


- äàí³ åëåìåíòíîãî ñêëàäó;- ²×-ñïåêòð (3425 ñì-1, 3180 ñì-1 (ã³ä-

ðîêñèãðóïè), 1657 ñì-1 (îêñîãðóïà ã-

ï³ðîíó), 1577 ñì-1, 1510 ñì-1, 1456 ñì-1

(àðîìàòè÷íå ê³ëüöå) òà ñìóãà 890 ñì-1

(â-ãë³êîçèäíèé çâ�ÿçîê));


- îïòè÷íå îáåðòàííÿ;

- äàí³ ã³äðîë³çó ôåðìåíòîì âèíîãðàä-

íîãî ðàâëèêà (êåìôåðîë òà D-ãëþêî-çà);

- äàí³ ëóæíîãî ã³äðîë³çó 0.5 % ðîç÷è-íîì êàë³þ ã³äðîêñèäó (ðå÷îâèíà íå

çàçíàº çíà÷óùèõ ïåðåòâîðåíü ïðîòÿ-

ãîì 3 ãîä);- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðè

ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-òîâ³ðíèì çðàçêîì àñòðàãàë³íó.

òðèôîë³í

(3-(Î-â-D-ãàëàêòî-

ï³ðàíîçèë)-5,7,4'-òðèã³äðîêñèôëàâîí

òðàâà

Ñ. variaÑ21Í20Î11 192 � 194

[á]20D=



- ²×-ñïåêòð (3430 ñì-1, 3182 ñì-1 (ã³ä-

ðîêñèãðóïè), 1660 ñì-1 (îêñîãðóïàã-ï³ðîíó), 1580 ñì-1, 1513 ñì-1,

1503 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëüöå) òà ñìóãà

890 ñì-1 (â-ãë³êîçèäíèé çâ�ÿçîê));- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;


- äàí³ ôåðìåíòàòèâíîãî ã³äðîë³çóôåðìåíòîì âèíîãðàäíîãî ðàâëèêà

(êåìïôåðîë òà D-ãàëàêòîçà);

- äàí³ ëóæíîãî ã³äðîë³çó 0.5 % ðîç÷è-íîì êàë³þ ã³äðîêñèäó (ðå÷îâèíà íå

çàçíàº çíà÷óùèõ ïåðåòâîðåíü ïðîòÿ-

ãîì 3 ãîä);- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðè

ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-

òîâ³ðíèì çðàçêîì òðèôîë³íó.

Таблиця 1 (продовження)

Ä

50



Ò.ïë.(°Ñ)


í³êîòèôëîðèí

(3-Î-(6''-Î-á-L-ðàìíîï³ðàíîçèë-â-D-

ãëþêîï³ðàíîçèë)-5,7,4'-

òðèã³äðîêñèôëàâîí)

ñóáñòàíö³ÿ ï³ôëàì³í Ñ27Í30Î15 220 � 223[ ]20

Dα =

� 24.0° (åòàíîë)


- îïòè÷íå îáåðòàííÿ;- ²×-ñïåêòð (3430 ñì-1, 3185 ñì-1

(ã³äðîêñèãðóïè), 1659 ñì-1 (îêñîãðóïà

ã-ï³ðîíó), 1580 ñì-1, 1519 ñì-1,1505 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëüöå) òà ñìóãà

890 ñì-1 (â-ãë³êîçèäíèé çâ�ÿçîê));

- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;- äàí³ ôåðìåíòàòèâíîãî ã³äðîë³çó ôåð-

ìåíòîì âèíîãðàäíîãî ðàâëèêà (êåìï-

ôåðîë, D-ãëþêîçà òà L-ðàìíîçà);- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðè

ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-òîâ³ðíèì çðàçêîì í³êîòèôëîðèíó.

ðîá³í³í

(3-Î-â-D-(6''-Î-á-L-ðàìíîï³ðàíîçèë-â-D-

ãàëàêòîï³ðàíîçèë)-5,4'-

äèã³äðîêñè-7-Î-á-L-ðàìíîï³ðàíîçèë-ôëàâîí)

òðàâà

M. albus (âïåðøå)Ñ33Í40Î19 187 � 189

[ ]20

Dα =

� 84.0° (åòàíîë ñ

ÄÌÔÀ 99:1)



- ²×-ñïåêòð (3400 ñì-1, 3030 ñì-1 (ã³ä-

ðîêñèãðóïè), 1660 ñì-1 (îêñîãðóïà



- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;- äàí³ êèñëîòíîãî ã³äðîë³çó 2 % ñ³ð÷à-

íîþ êèñëîòîþ (êåìïôåðîë, D-ãàëàê-

òîçà òà L-ðàìíîçà);- äàí³ ôåðìåíòàòèâíîãî ã³äðîë³çó

ðàìíîä³àñòàçîþ (3,5,4'-òðèã³äðîêñè-7-

Î-á-L-ðàìíîï³ðàíîçèëôëàâîí òà 6''-Î-

á-L-ðàìíîï³ðàíîçèë-â-D-ãàëàêòîï³-

ðàíîçà);

- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðèïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç

äîñòîâ³ðíèì çðàçêîì ðîá³í³íó.

Ãðóïà êâåðöåòèíó

êâåðöåòèí

(3,5,7,3',4'-ïåíòà-

ã³äðîêñèôëàâîí)

òðàâà

V. tenuifolia (âïåðøå)

òà D. carota,

ñóáñòàíö³ÿ ï³ôëàì³í

Ñ15Í10Î7 309 � 311 -


- ²×-ñïåêòð (3385 ñì-1, 3300 ñì-1

(ã³äðîêñèãðóïè), 1665 ñì-1, 1625 ñì-1

(îêñîãðóïà ã-ï³ðîíó), 1581 ñì-1, 1565

ñì-1, 1515 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëüöå));- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;

- äàí³ àöåòèëóâàííÿ (ïåíòààöåòèëüíå

ïîõ³äíå ñ ò.ïë. (196 � 198)°Ñ);- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðè

ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-òîâ³ðíèì çðàçêîì êâåðöåòèíó.

³çîêâåðöèòðèí

(3-Î-â-D-ãëþêîï³ðàíîçèë-

5,7,3'4'-

òåòðàã³äðîêñèôëàâîí

ñóáñòàíö³ÿ ï³ôëàì³í Ñ21Í20Î11220 �

222°C

[ ]20

Dα =

� 72.0° (ï³ðèäèí)


- îïòè÷íå îáåðòàííÿ;- ²×-ñïåêòð (3350 ñì-1, 2965 ñì-1

(ã³äðîêñèãðóïè), 1657 ñì-1 (îêñîãðóïà

ã-ï³ðîíó), 1565 ñì-1, 1500 ñì-1

(àðîìàòè÷íå ê³ëüöå) òà ñìóãà 890 ñì-1

(â-ãë³êîçèäíèé çâ�ÿçîê));

- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;- äàí³ êèñëîòíîãî ã³äðîë³çó 2 %

ñ³ð÷àíîþ êèñëîòîþ (êâåðöåòèí òà

D-ãëþêîçà);- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðè

ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ çäîñòîâ³ðíèì çðàçêîì ³çîêâåðöèòðèíó.


Ä

51



Ò.ïë.(°Ñ)


ðóòèí

(3-Î-(6''-Î-á-L-ðàìíîï³ðàíîçèë-â-D-

ãëþêîï³ðàíîçèë)-5,7,3',4'-

òåòðàã³äðîêñèôëàâîí)

òðàâà

V. tenuifolia (âïåðøå),ñóáñòàíö³ÿ ï³ôëàì³í

Ñ27Í30Î16 188 � 190[ ]20

Dα =

+ 11° (åòàíîë)


- îïòè÷íå îáåðòàííÿ;- ²×-ñïåêòð (3390 ñì-1 (ã³äðîêñèãðóïè),


1612 ñì-1, 1575 ñì-1, 1510 ñì-1,1455 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëüöå) òà ñìóãà


- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;- äàí³ êèñëîòíîãî ã³äðîë³çó 2 %

ñ³ð÷àíîþ êèñëîòîþ (êâåðöåòèí,

D-ãëþêîçà òà L-ðàìíîçà);- äàí³ ôåðìåíòàòèâíîãî ã³äðîë³çó

ðàìíîä³àñòàçîþ (êâåðöåòèí òà

ðóòèíîçà);- äàí³ ñòóï³í÷àñòîãî ã³äðîë³çó 0.2 %

ñ³ð÷àíîþ êèñëîòîþ (äîñë³äæóâàíèé

á³îçèä ã³äðîë³çóºòüñÿ ïðèáëèçíî íà50 % çà 30 õâ äî ìîíîçèäó, ùî ³äåí-

òè÷íèé ³çîêâåðöèòðèíó);

- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðèïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-

òîâ³ðíèì çðàçêîì ðóòèíó.

åï³ðóòèí

(3-Î-(6''-Î-â-L-

ðàìíîôóðàíîçèë-â-D-ãëþêîï³ðàíîçèë)- 5,7,3',4'-


òðàâà

H. sphondylium

(âïåðøå)

Ñ27Í30Î16 187 � 189[á]20

D=

+ 6°

(åòàíîë)


0- îïòè÷íå îáåðòàííÿ;

- ²×-ñïåêòð (3400 ñì-1, 3100 ñì-1 (ã³ä-ðîêñèãðóïè), 1661 ñì-1 (îêñîãðóïà

ã-ï³ðîíó), 1612 ñì-1, 1575 ñì-1,

1515 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëüöå) òà ñìóãà890 ñì-1 (â-ãë³êîçèäíèé çâ�ÿçîê));

- ðå÷îâèíà ìàº ñïåêòðàëüíó õàðàêòå-

ðèñòèêó â ÓÔ-îáëàñò³, ÿêà äîñòîâ³ðíîíå â³äð³çíÿºòüñÿ â³ä ñïåêòðàëüíî¿ õà-

ðàêòåðèñòèêè ðóòèíó*;

- äàí³ êèñëîòíîãî ã³äðîë³çó 2 %ñ³ð÷àíîþ êèñëîòîþ (êâåðöåòèí, D-

ãëþêîçà òà L-ðàìíîçà);

- äàí³ ôåðìåíòàòèâíîãî ã³äðîë³çóðàìíîä³àñòàçîþ (êâåðöåòèí òà á³îçà,

ùî º ³äåíòè÷íîþ á³îç³ ôëàâàíòàçèäó);

- äàí³ ñòóï³í÷àñòîãî ã³äðîë³çó 0.2 %ñ³ð÷àíîþ êèñëîòîþ (ìîíîçèä (³çî-

êâåðöåèòðèí) âèçíà÷àºòüñÿ â ïîð³âíÿ-

íî á³ëüø³é ê³ëüêîñò³ (â³äíîñíî ðóòè-íó) âæå ÷åðåç 10 õâ â³ä ïî÷àòêó ã³äðî-

ë³çó)).

êâåðöåòèí-3-Î-ñîôîðîçèä

(3-Î-(2''-Î-â-D-

ãëþêîï³ðàíîçèë-â-D-ãëþêîï³ðàíîçèë)-5,7,3',4'-


ñóáñòàíö³ÿ ï³ôëàì³í C27H30O17 204 � 260[ ]20

Dα =

� 26° (ìåòàíîë)




1580 ñì-1, 1513 ñì-1, 1452 ñì-1 (àðîìà-

òè÷íå ê³ëüöå) òà ñìóãà 890 ñì-1 (â-ãë³-êîçèäíèé çâ�ÿçîê));


- äàí³ ã³äðîë³çó 2 % ñ³ð÷àíîþ êèñëî-òîþ (êâåðöåòèí òà ñîôîðîçà);


ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-òîâ³ðíèì çðàçêîì êâåðöåòèí-3-Î-ñî-

ôîðîçèäó.


Ä

52



Ò.ïë.(°Ñ)


àíòîçèä

(3-Î-â-D-ãëþêîï³ðàíîçèë-5,3',4'-òðèã³äðîêñè-7-Î-á-

L-ðàìíî-ï³ðàíîçèëôëàâîí)

òðàâà

H. sphondylium(âïåðøå)

Ñ27Í30Î16 190 � 192[ ]20

Dα =

� 106.0° (åòàíîë)


- îïòè÷íå îáåðòàííÿ;- ²×-ñïåêòð (3405 ñì-1, 3030 ñì-1 (ã³ä-

ðîêñèãðóïè), 1658 ñì-1 (îêñîãðóïà



- ÓÔ-ñïåêòðàëüíà õàðàêòåðèñòèêà*;- äàí³ êèñëîòíîãî ã³äðîë³çó 2 % ñ³ð÷à-

íîþ êèñëîòîþ (êâåðöåòèí, D-ãëþêîçà

òà L-ðàìíîçà);- äàí³ ëóæíîãî ã³äðîë³çó 0.5 %

ðîç÷èíîì êàë³þ ã³äðîêñèäó (3-Î-â-D-

ãëþêîï³ðàíîçèë-5,7,3',4'-òåòðàã³äðî-êñèôëàâîí);


ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-òîâ³ðíèì açðàçêîì àíòîçèäó.

ôëàâàíòàçèä(3-Î-(6''-Î-â-L-

ðàìíîôóðàíîçèë-â-D-

ãëþêîï³ðàíîçèë)-5,3',4'-òðèã³äðîêñè-7-Î-á-L-

ðàìíî-ï³ðàíîçèëôëàâîí)

òðàâà H. sphondylium

(âïåðøå)

Ñ33Í40Î20 183 � 186

[ ]20

Dα =

� 23.3°

(50 % ñïèðò)

- äàí³ åëåìåíòíîãî ñêëàäó;- îïòè÷íå îáåðòàííÿ;

- ²×-ñïåêòð (3400 ñì-1, 3100 ñì-1 (ã³ä-

ðîêñèãðóïè), 1654 ñì-1 (îêñîãðóïàã-ï³ðîíó), 1608 ñì-1, 1579 ñì-1,

1505 ñì-1, 1440 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëü-

öå) òà ñìóãà 890 ñì-1 (â-ãë³êîçèäíèéçâ�ÿçîê));

- äàí³ êèñëîòíîãî ã³äðîë³çó 5 %

ñ³ð÷àíîþ êèñëîòîþ (êâåðöåòèí,D-ãëþêîçà òà L-ðàìíîçà);


ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ çäîñòîâ³ðíèì çðàçêîì ôëàâàíòàçèäó.

Ãðóïà ³çîðàìíåòèíó

àñòðàãàëîçèä

(3-Î-(6''-Î-â-D-

ãëþêîï³ðàíîçèë-â-D-ãëþêîï³ðàíîçèë)-5,7,4'-

òðèã³äðîêñè-3'-

ìåòîêñèôëàâîí)

ñóáñòàíö³ÿ ï³ôëàì³í Ñ28Í32Î17201 -

205°C

[ ]20

Dα =

� 58.0° (ÄÌÔÀ)



- ²×-ñïåêòð (3380 ñì-1, 3300 ñì-1 (ã³ä-ðîêñèãðóïè), 1660 ñì-1 (îêñîãðóïà

ã-ï³ðîíó), 1575 ñì-1, 1512 ñì-1,

1455 ñì-1 (àðîìàòè÷íå ê³ëüöå) òà ñìóãà890 ñì-1 (â-ãë³êîçèäíèé çâ�ÿçîê));

- äàí³ êèñëîòíîãî ã³äðîë³çó 2 %

ñ³ð÷àíîþ êèñëîòîþ (³çîðàìíåòèí òàD-ãëþêîçà);

- äàí³ ôåðìåíòàòèâíîãî ã³äðîë³çó

(³çîðàìíåòèí, ãåíö³îá³îçà òà D-ãëþ-êîçà);


ïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ çäîñòîâ³ðíèì çðàçêîì àñòðàãàëîçèäó.

²çîôëàâîíî¿äè

îíîí³í

(7-Î-â-D-ãëþêîï³ðàíîçèë-

4'-ìåòîêñè³çîôëàâîí

ñóáñòàíö³ÿ

ôëàâàíàáîëÑ22Í22Î9 212 � 214

[ ]20

Dα =




- ²×-ñïåêòð (3500 - 3100 ñì-1 (ã³äðîê-ñèãðóïè), 2990 � 2800 (ìåòîêñèëüíà

ãðóïà), 1620 ñì-1 (îêñîãðóïà ã-ï³ðîíà),

1570 ñì-1 òà 1506 ñì-1 (àðîìàòè÷íåê³ëüöå), òà ñìóãà 890 ñì-1 (â-ãë³êîçèä-

íèé çâ�ÿçîê));

- äàí³ ôåðìåíòàòèâíîãî ã³äðîë³çó ôåð-ìåíòîì âèíîãðàäíîãî ðàâëèêà (ôîð-

ìîíîíåòèí òà D-ãëþêîçà);

- â³äñóòí³ñòü äåïðåñ³¿ òåìïåðàòóðèïëàâëåííÿ ó ïðîá³ çì³øóâàííÿ ç äîñ-òîâ³ðíèì çðàçêîì îíîí³íó.


* — в Табл. 2 наведені УФ-спектральні характеристики досліджуваних речовин у дослідах з іонізуючими та комп-лексоутворюючими реагентами.

53

ÔÀ

ÐÌ

ÀÊ

ÎÌ

4 -2004Таблиця 2Характеристика УФ-спектрів досліджуваних флавоноїдів

* — плече

54


4 — глікозиди), 7 флавонолів групи кверцети-ну (із них 5 — глікозиди), 1 флавоноловийглікозид групи ізорамнетину та 1 ізофлаво-ноїдний глікозид ононін. При цьому одержа-но 8 речовин у кількості, достатній для виз-начення їх ліпазотропної активності.

Обговорення результатів із визначенняліпазотропної активності виділенихречовин

Нами була визначена ліпазотропна ак-тивність 11 речовин флавоноїдної структурита 1 ізофлавоноїдного глікозиду. Більшістьречовин в умовах експерименту виявлялаліпазотропну активність. Дані про середнювідносну активність панкреатичної ліпази за10 хвилин у дослідах із випробовуваними ре-човинами та контрольному досліді представ-лені на Рис. 1.

Визначено, що тільки ононін та астрагалінвиявляли здатність пригнічувати активністьліпази в умовах експерименту, інші речови-ни прискорювали ліполіз, при цьомунайбільш виражений активуючий вплив ви-явили авікулярин та астрагалозид серед гліко-зидів та байкалеїн серед агліконів флаво-ноїдів, у той час як для кверцетину, дактилі-

ну та рутину різниця швидкості ліполізу буланедостовірною (nк=76, nд=3, р=0.05).

Для одержання більш конкретних данихпро вплив випробовуваних речовин на пе-ребіг реакції ліполізу вимірювали середнюшвидкість ліполізу через 3 хв, 5 хв, 7 хв та10 хв від початку реакції. Динаміка ліпазо-тропного ефекту представлена на Рис. 2.

Із Рис. 2 видно, що для більшості флаво-ноїдів спостерігається збільшення впливу наактивність ліпази протягом перших 5 – 7 хвреакції із подальшим зменшенням ефекту,що, можливо, обумовлено хімічними змінамиречовин (гідроліз), які призводять до змінихарактеру міжфазового розподілу речовинита чинять вплив на поверхню розділу фаземульсії, що є «суперсубстратом» ліпази. Та-кож можливо присутнє конкурування випро-бовуваної речовини із продуктами ліполітич-ної реакції.

Винятком є динаміка розвитку інгібуючо-го ефекту астрагаліну, для якого, навпаки, всередині часового інтервалу спостерігалосядеяке зменшення ефекту із подальшим йогонаростанням до 10 хвилини реакції; лютеолі-ну, активуючий ефект якого послідовно зро-стає, та ононіну, інгібуючий ефект якого має

Рисунок 1

Відносна активність ліпази в дослідах з виділеними речовинами

0.0%

50.0%

100.0%

150.0%

200.0%

250.0%

300.0%

Xcp-ÄX 92.8% 94.3% 96.4% 132.8% 190.6% 177.5% 218.2% 97.9% 107.2% 58.8% 114.9% 222.7% 116.5% 78.0%

Xcp+ÄX 107.2% 106.5% 107.2% 142.7% 207.0% 182.8% 260.4% 111.9% 127.4% 68.9% 132.4% 232.2% 128.7% 93.0%

Xcp 100.0% 100.4% 101.8% 137.8% 198.8% 180.2% 239.3% 104.9% 117.3% 63.8% 123.7% 227.5% 122.6% 85.5%

êîíòðîëüêâåð-

öåòèí*äàêòèë³í* ã³ïåðîçèä

àâ³êó-

ëÿðèí

ïîë³-

ñòàõîçèä

àñòðà-

ãàëîçèäðóòèí*

êåìï-

ôåðîë

àñòðà-

ãàë³í

í³êîòè-

ôëîðèí

áàéêà-

ëå¿íëþòåîë³í îíîí³í

* — значуще не відрізняються від контролю (nk = 76, nд = 3, р = 0.05).

55

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-2004Рисунок 2

Динаміка розвитку ліпазотропної активності в дослідах з виділеними речовинами

-50%

-40%

-30%

-20%

-10%

0%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

100%

110%

120%

130%

140%

150%

160%

170%

Ç õâ 5 õâ 7 õâ 10 õâ

×àñ ðåàêö³¿

áàéêàëå¿í

àñòðàãàëîçèä

O

OH

HO

O

OH

O-Glu-Glu

OCH3

ã³ïåðîçèä

O

OH

HO

O

OH

O-Gal

OH

í³êîòèôëîðèí

O

OH

HO

O

OH

OH

ëþòåîë³í

O

OH

HO

O

OH

OH

OH

êâåðöåòèí

O

OH

HO

O

OH

O-Glu

àñòðàãàë³íîíîí³í

O

OH

HO

O

O-Glu

O-Glu

OCH3

äàêòèë³í

O

OH

HO

O

OH

OH

êåìïôåðîë

ðóòèí

àâ³êóëÿðèí

O

OH

HO

O

HO

O

OH

HO

O

OH

O-Ara(ôóðàí)

OH

O

OH

HO

O

OH

O-Ara(ïèðàí)

OH

ïîë³ñòàõîçèä

O

OH

HO

O

OH

O-Glu-Ramn

O

OH

HO

O

OH

O-Glu-Ramn

OH

O

O

Glu-O

OCH3

(ï³ðàí)

56


досить невеликі коливання (недостовірнарізниця при nд1=3, nд2=3, р=0.05).

Дані сполуки слід визначити як перспек-тивні для подальшого дослідження, перспек-тивними також ми вважаємо виражені акти-ватори ліпази байкалеїн та астрагалозид.

Висновки

1. Виділено та встановлено структуру19 речовин флавоноїдної структури з рослинродини Бобові (Vicia tenuifolia Roth., Coronillavaria L., Melilotus albus Medik.) і Селерові(Heracleum sphondylium L., Daucus carota L.) тасубстанції піфламін, що є флавоноїдами, таодного ізофлавоноїдного глікозиду (ононін) ізсубстанції флаванабол.

2. Вперше встановлено ліпазотропну ак-тивність 11 флавоноїдів (кверцетин, дактилін,гіперозид, полістахозид, астрагалозид, рутин,кемпферол, астрагалін, нікотифлорин, байка-леїн, лютеолін), а також інгібуючий впливізофлавоноїдного глікозиду ононіну.Найбільш перспективними для подальшогодослідження визначено байкалеїн, астрагало-зид, лютеолін (активатори ліпази) та астра-галін, ононін (інгібітори ліпази).

ЛІТЕРАТУРА1. Verpoorte R. Pharmacognosy in the new millenium:leadfinding and biotechnology // J. of Pharm. andPharmacol. – 2000. – Vol. 52, No. 3. – P. 253-262.2. Даниленко В.С., Чубенко А.В., Нижерадзе Т.И. Ана-лиз динамики исследований по созданию новых лекар-ственных препаратов в развитых странах // Фармако-логический вестник. – 1998. - № 2. – С. 24 – 36.3. Пат. 5540917 США, МКИ6 А 61 К 31/74. Biomass lipaseinhibitor useful for treating adiposity / Isler D., Rehm W.,Widmer E. (Швейцария); Hoffmann-La Roche Inc. -№ 447164; Заявл. 19.05.1995; Опубл. 30.07.1996. – 5 с.4. Пат. 5629338 США, МКИ 6 А 61 К 31/35. Tannins andlipase inhibitors containing the same as active ingredients /Okuda T., Yoshida T., Hatano T., Hashimoto T. et al. (Япо-ния); Lotte Co Ltd. - № 608815; Заявл. 29.02.1996; Опубл.13.05.1997; НКИ 514/451. – 9 с.5. Ji-Eun Shin, Myung Joo Han, Dong-Hyun Kim. 3-Methylethergalangin isolated from Alpinia officinaruminhibits pancreatic lipase // Biol. Pharm. Bull. – 2003. –Vol. 26, No. 6. – P. 854-857.6. Kawaguchi K, Mizuno T, Aida K, Uchino K. Hesperidinas an inhibitor of lipases from porcine pancreas andPseudomonas // Biosc. Biotechnol. Biochem. – 1997. –Vol. 61, No. 1 – P. 102-104.7. Siddiqui MT, Siddiqi M. Hypolipidemic principles ofCicer arietinum: biochanin-A and formononetin // Lipids.– 1976. – Vol. 11, No. 3. – P. 243 – 246.8. Янченко П.С., Ковальова А.М., Комісаренко А.М.Ліпазотропна активність екстрактів з рослин деякихвидів родин Бобові та Селерові // Актуальні питанняфармацевтичної та медичної науки та практики: Зб.наук. ст. – Т. 3. – Запоріжжя: Вид-во ЗДМУ, 2004. –С. 308 - 314.9. Комиссаренко Н.Ф., Корзенникова Э.П. Флавоноидыи кумарины листьев H. lehmannianum // Химия природ-ных соединений. – 1971. – № 4. – С. 523.

10. Комиссаренко Н.Ф., Зоз И.Г. Химическое исследо-вание Coronilla varia L. и некоторых близких видов //Растительные ресурсы. – 1969. – Т. 5. - Вып. 2. –С. 178 – 181.11. Георгиевский В.П. Применение хроматографии втонких слоях сорбента для идентификации и количе-ственного определения биологически активных ве-ществ растительного происхождения. – М.: ЦБНТИ-медпром, 1975. – 64 с.12. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмит-рук С.Е. Биологически активные вещества лекарствен-ных растений. – Новосибирск: Наука, Сибирское отд-ние, 1990. – 333 с.13. Янченко П.С., Комісаренко А.Н., Георгієвский Г.В.Метод визначення ліпазотропної активності речовин //Фармаком. – 2001. - № 3. – С. 44 – 47.14. Исследование липазотропной активности силибо-ра / Янченко П.С., Пашнев П.П., Казаринов Н.А., Ко-миссаренко А.Н. // Фармаком. – 2003. – № 1. –С. 75 – 77.15. Статистичний аналіз результатів хімічного експери-менту // Державна Фармакопея України / Державнепідприємство «Науково-експертний фармакопейнийцентр». – 1-е вид. – Харків: РІРЕГ, 2001. – Доповнен-ня 1. – 2004. – С. 187-214.

РезюмеЯнченко П.С., Ковалёва А.М.,Георгиевский Г.В., Комиссаренко А.Н.

Выделение и изучение флавоноидов некоторых

растений семейств Бобовые и Сельдерейные и их

липазотропная активность

Выделены и установлена структура 19 веществ фла-воноидной природы из растений семейств Бобовые(Vicia tenuifolia Roth., Coronilla varia L., Melilotus albusMedik.) и Сельдерейные (Heracleum sphondylium L.,Daucus carota L.) и субстанции пифламин. Из субстан-ции флаванабол выделен изофлавоноидный гликозидононин. Впервые установлена липазотропная актив-ность 11 веществ флавоноидной природы (кверцетин,дактилин, гиперозид, полистахозид, астрагалозид, ру-тин, кемпферол, астрагалин, никотифлорин, байкалеин,лютеолин) и изофлавоноидного гликозида ононина.Наиболее перспективными для дальнейшего исследова-ния определены активаторы байкалеин, астрагалозид,лютеолин и ингибитор ононин.

SummaryYanchenko P.S., Kovalyova A.M.,Georgieyvskiy G.V., Komissarenko A.N.

Isolation and study of flavonoids from some legume and

celeriac plants and their lipasetropic activity

Nineteen flavonoid substances were isolated from leg-ume plants (Vicia tenuifolia Roth., Coronilla varia L., Me-llilotus alba L.) and celeriac plants (Heracleum sphondyl-lum L., Daucus carota L.) and as well as from piflamin su-bstance, and their structure was established. Isoflavonoidglycoside ononin was isolated from flavanabol substance.The lipasetropic activity of eleven flavonoid substances(quercetin, dactilin, hiperosid, polistahosid, astragalosid,rutin, kaempferol, astragalin, nicotiflorin, baicalein, luteo-lin) and ononin isoflavonoidic glycoside was determinedfor the first time. Activators baicalein, astragalosid, luteo-lin and inhibitor ononin were concidered to be the mostperspective for the further study.

Янченко Павло СергійовичЯнченко Павло СергійовичЯнченко Павло СергійовичЯнченко Павло СергійовичЯнченко Павло Сергійович (н. 1978). ЗакінчивНаціональну фармацевтичну академію (2000). Ас-пірант кафедри фармакогнозії Національногофармацевтичного університету.

57

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-2004Ковальова Алла МихайлівнаКовальова Алла МихайлівнаКовальова Алла МихайлівнаКовальова Алла МихайлівнаКовальова Алла Михайлівна. Закінчила Хар-

ківський фармацевтичний інститут. Д.фарм.н.Професор кафедри фармакогнозії Національногофармацевтичного університету.

Георгієвський Геннадій ВікторовичГеоргієвський Геннадій ВікторовичГеоргієвський Геннадій ВікторовичГеоргієвський Геннадій ВікторовичГеоргієвський Геннадій Вікторович (н. 1969).Закінчив Харківський фармацевтичний інститут(1992). К.фарм.н. (1995). Ст. наук. співр. відділуДержавної Фармакопеї України ДП НЕФЦ. Керів-

ник групи «Монографії на лікарські субстанції».Зав. лабораторії фізико-хімічних процесів ДПДНЦЛЗ (2001).

Комісаренко Андрій МиколайовичКомісаренко Андрій МиколайовичКомісаренко Андрій МиколайовичКомісаренко Андрій МиколайовичКомісаренко Андрій Миколайович (н. 1962).Закінчив Харківський фармацевтичний інститут(1984). Д.фарм.н. (2000). Професор кафедри«Хімія природних сполук» Національного фарма-цевтичного університету.

ÓÄÊ 615.07:615.322:615.451.16:582.883.4

Êîøîâèé Î. Ì., Êîì³ñàðåíêî À. Ì.Íàö³îíàëüíèé ôàðìàöåâòè÷íèé óí³âåðñèòåò

Àì³íîêèñëîòíèé òà ì³íåðàëüíèé ñêëàä åêñòðàêò³â ³ç ëèñòÿ åâêàë³ïòó

В результаті дослідження хімічного складу екстрактів із листя евкаліпту та їх шроту після одержання екстракту хло-рофіліпту встановлено наявність в них фенольних сполук, полісахаридів та 30 амінокислот, п’ять із яких є незамін-ними. В результаті вивчення елементного складу відмічено високий вміст кальцію, калію, фосфору, магнію, марган-цю, міді та нікелю.

В останній час широке застосування в ме-дичній практиці знаходять лікарські засобирослинного походження, що містять комп-лекс амінокислот, пептидів і мінеральнихкомпонентів.

Маючи широкий спектр фармакологічноїдії, амінокислоти беруть участь у процесахнервової, судинної та інших видах регуляціїрізних функцій організму [1].

Макро- та мікроелементи суттєво вплива-ють на обмін речовин, серцево-судинну си-стему, а також є складовою частиною фер-ментів. Так, на молекулу церулоплазміну при-падає 16 атомів Cu, які обумовлюють оксидаз-ну активність цього білка - захисного компо-нента крові від токсичної дії активних формкисню. Крім того, Cu міститься в супероксид-дисмутазі, дофамін-β-гідроксилазі, цитохром-с-оксидазі та амінооксидазі. Металофермен-ти (оксидоредуктаза, трансферази, гідрокси-лази, супероксиддисмутази) містять Zn. Обо-в’язковим учасником синтезу всіх нейропеп-тидів у головному мозку є Mg, він входить доскладу 13 металопротеінів, більш ніж 300 фер-ментів, у т.ч. глутатіонсинтетази [2, 3].

Мікроелементи також мають важливе зна-чення у функціональній діяльності нервовоїсистеми. Так, солі Cu, Zn, Mn у біотичних кон-центраціях суттєво впливають на функціо-нальний стан центральної та периферичноїнервової системи. Mn тривалий час підтри-мує збудливість нерва. Доказано потенцію-вання дії багатьох лікарських препаратів підвпливом мікроелементів [4].

Найкращим природним джерелом макро-та мікроелементів є лікарські рослини.

В рослинах макро- та мікроелементи утво-рюють металоорганічні сполуки, що сприяє їхкращому засвоюванню організмом людини[1].

Крім того, вивчення елементного складулікарської рослинної сировини є актуальниму зв’язку із впливом техногенних факторів назабруднення навколишнього середовища [1].

Раніше повідомлялося про вивчення вод-них екстрактів, одержаних із листя евкаліп-ту Eucalyptus L’Her та його шроту після отри-мання екстракту хлорофіліпту [5, 6].

В результаті дослідження хімічного скла-ду водних екстрактів із листя та шроту листяевкаліпту встановлено наявність таких групБАР: дубильні речовини, флавоноїди, похіднікоричної кислоти, полісахариди, вільні цукрита амінокислоти [5, 6].

У зв’язку з недостатньою вивченістю, ме-тою нашого дослідження стало вивчення які-сного складу та кількісного вмісту амінокис-лот, а також мікроелементів в екстрактах ізлистя та шроту листя евкаліпту.


Для дослідження використовували листяевкаліпту (Грузія) та його шрот після одер-жання густого екстракту хлорофіліпту, наданіДП «ДЗ ДНЦЛЗ» ДАК «Укрмедпром». Із да-ної сировини були одержані сухі екстракти[5].

Амінокислотний аналіз

Якісний і кількісний аналіз вільних аміно-кислот в одержаних екстрактах проводили задопомогою амінокислотного аналізатора

58


Т 339 («Мікротехніка», Прага, ЧРСР) на ко-лонках із водяним кожухом розміром(0.37 × 25) дм з іонітом остеон LGANB, вико-ристовуючи як рухому фазу літій-цитратнібуферні розчини рН 2.9±0.01; 2.95±0.01;3.2±0.02; 3.8±0.02 і 5±0.02 різної іонної сили.Швидкість потоку буферних розчинів –12 мл/год, швидкість реагенту - 8-10 мл/год.

Детектування проводили з використаннямпостколонкового забарвлення розчиномнінгідрину в ДМСО за довжини хвилі 570 нм.Кількісне визначення проводили з викорис-танням стандартних розчинів амінокислот(«Sigma Chemical Company», stockN AA-S-18).

До 1.0 г (точна наважка) сухого екстрактуз листя евкаліпту (шроту листя евкаліпту) уколбу зі шліфом додавали 10.0 мл 80 % спир-ту [7]. Розчин кип’ятили протягом 5 хв зі зво-ротнім холодильником, охолоджували докімнатної температури та залишали на ніч ухолодильнику. Наступного дня сумішфільтрували, фільтр промивали 80 % спиртом.

Очищення фільтрату проводили на катіо-нообмінній смолі в Н+ формі. Для цього за-стосовували сильнокислий сульфанованийполістирольний катіоніт КУ-2.

Фільтрат наносили на колонку, що містить16 мл іоніту в Н+ формі (у цю форму іоніт пе-реводили 2 М розчином кислоти хлористо-водневої та промивали водою до нейтральноїреакції). Після повного всмоктуванняфільтрату колонку промивали 300 мл водиочищеної. Амінокислоти вимивали поступо-вим витисненням 100 мл 2 М розчину аміакута 100 мл 4 М розчину аміаку при швидкостівитікання близько 5 мл/хв. Аміак видаляли увакуумному роторному випарнику. Залишокрозчиняли в 2.5 мл 10 % спирту ізопропілово-го та зберігали у холодильнику. За 1 год до по-чатку аналізу нагрівали розчин до кімнатноїтемператури, відміряли 2.0 мл у мірну колбумісткістю 5.0 мл, додавали 1.0 мл 1.5 М літій-цитратного буферного розчину, доводилиоб’єм розчину водою очищеною до позначкита витримували у холодильнику протягом 1год. Перед внесенням зразка в аналізаторосад центрифугували. До аналізатора вноси-ли 50 мкл зразка.

Результати дослідження наведені в Табл. 1.

Мінеральний склад

Для вивчення елементного складу екст-рактів використаний атомно-емісійний спек-трографічний метод із фотографічною реєст-рацією [8].

Наважки екстрактів, попередньо оброб-лені кислотою сірчаною розведеною, обвуг-лювали при нагріванні у муфельній печі (тем-пература не більш 500 °С). Випарюваннязразків проводили із кратерів графітовихелектродів у розряді дуги змінного струму(джерело збудження спектрів типу ИВС-28)при силі струму 16 А й експозиції 60 с. Дляодержання спектрів та їхньої реєстрації нафотопластинках використовували спектро-граф ДФС-8 із дифракційними гратами600 штр/мм. Вимірювання інтенсивності емі-сійних ліній у спектрах аналізованих і граду-ювальних зразків (ГЗ) проводили за допомо-гою мікрофотометра МФ-1.

Фотографування спектрів проводили в та-ких умовах: сила струму дуги змінного стру-му - 16 А, фаза підпалювання – 60 °С, часто-та підпалювальних імпульсів - 100 розрядів засекунду; аналітичний проміжок - 2 мм; шири-на щілини спектрографа - 0.015 мм; експози-ція – 60 с. Спектри фотографували в областідовжин хвиль (230 - 330) нм.

Фотопластинки проявляли, сушили, потімфотометрували емісійні лінії (нм) у спектрахвипробовуваних зразків і ГЗ, а також фонбіля них:

Ag – 328.0 нм Cu – 324.7нмMo – 317.0 нм V – 318.3 нмCd – 326.1 нм Ga – 294.3 нмNi – 305.0 нм Sn – 303.4 нмCo – 345.3 нм Ge – 303.9 нмPb – 283.3 нм Sr – 346.4 нмCr – 302.1 нм Mn – 280.1 нмTi – 307.8 нм Zn – 328.2 нм.

Для кожного елемента за результатамифотометрування розраховували різниці по-чорніння емісійної лінії та фону (S = Sл+ф –Sф) для спектрів випробовуваних зразків (S ін)і ГЗ (SГЗ). Потім будували градуювальнийграфік у координатах: середнє значеннярізниці почорніння емісійної лінії та фону(Sгз) - логарифм вмісту елемента (С) в ГЗ (lg C),де С виражено у відсотках.

За цим графіком знаходили вміст елемен-та в золі (а), у відсотках.

Вміст елемента у рослинному матеріалі, увідсотках, обчислювали за формулою:

à mõ

M

⋅= ,

де:m — маса золи, у грамах;M — маса екстракту, взята для аналізу, у

грамах;à — вміст елемента в золі, у відсотках.

59


При аналізі враховували нижні границівмісту домішок, які складають: для Сu -1.10-4 %; Co, Cr, Mo, Mn, V - 2.10-4 %; Ag, Ga, Ge,Ni, Pb, Sn, Ti - 5.10-4 %; Sr, Zn - 1.10-2 %.

Результати аналізу наведено в Табл. 2.

Результати та їх обговоренняВ результаті дослідження амінокислотно-

го складу екстрактів із листя та шроту листяевкаліпту встановлено наявність 30 вільнихамінокислот (Табл. 1), п’ять із яких є незамін-ними (треонін, валін, ізолейцин, фенілаланіні аргінін). Із Табл. 1 видно, що в екстрактах ізлистя евкаліпту переважають пролін, аланін,

аргінін, цистин, фенілаланін і кислота аспара-гінова. Заслуговує уваги наявність значноїкількості проліну – амінокислоти, що вхо-дить до складу синтетичних ноотропних за-собів і близька за структурою до пірацетаму.

Сума вільних амінокислот в екстракті з ли-стя евкаліпту склала 0.30 %, в екстракті з йогошроту після одержання густого екстрактухлорофіліпту вона зменшилася до 0.22 %. Цевказує на те, що у процесі виробництва гус-того екстракту хлорофіліпту значна частинаамінокислот залишається у шроті листя евка-ліпту, який надалі не використовується.

Ìîëåêóëÿðíà ìàñàÅêñòðàêò ³ç ëèñòÿ

åâêàë³ïòóÅêñòðàêò ³ç øðîòó ëèñòÿ

åâêàë³ïòó¹ Àì³íîêèñëîòàã/ìîëü ìêìîëü/ã ìêã/ã ìêìîëü/ã ìêã/ã

1. öèñòå¿í 175 0.15 26.25 0.06 10.5

2. òàóðèí 125 0.06 7.5 0.03 3.75

3. ôîñôîåòàíîëàì³í 223 -- -- 0.083 18.5

4. óðå¿äè 60 6 360 6 360

5. àñïàðàã³íîâà êèñëîòà 133 1.1 146.3 0.77 102

6. òðåîí³í 119 0.3 35.7 0.14 17

7. ñåðèí 105 0.56 59 0.3 31.5

8. àñïàðàã³í 132 -- -- 0.1 13.2

9. ãëóòàì³íîâà êèñëîòà 147 0.95 139.7 0.18 26.5

10. ïðîë³í 115 1.0 115 0.6 69

11. ãë³öèí 75 0.68 51 0.7 52.5

12. àëàí³í 89 1.6 142.5 0.83 74

13. öèòðóë³í 175 0.1 17.5 0.086 15

14. α-àì³íî-í-áóòèðèí 103 0.32 33 0.125 13

15. âàë³í 117 0.14 16.4 0.02 2.3

16. öèñòèí 240 0.1 24 3.8 912

17. öèñòàò³îí³í 222 0.18 40 0.16 35.5

18. ìåò³îí³í 149 0.24 36 0.16 23.8

19. ³çîëåéöèí 131 0.38 50 -- --

20. òèðîçèí 181 0.27 49 0.23 41.6

21. ôåí³ëàëàí³í 165 0.83 137 0.43 71

22. β-àëàí³í 89 0.36 32 -- --

23. åòàíîëàì³í 61 0.45 27.5 0.27 16.5

24. îðí³òèí 132 0.46 60.7 0.1 13.2

25. ë³çèí 146 0.2 29 -- --

26. 1-ìåòèëã³ñòèäèí 187 0.22 41.1 -- --

27. 3-ìåòèëã³ñòèäèí 169 0.22 37.2 -- --

28. àðã³í³í 210 4.5 945 0.33 69.3

29. γ-àì³íî-í-áóòèðèí 103 1.0 103 0.56 58

30. àì³îí³í 35 3.4 120 2.1 74

Âñüîãî -- 25.77 2881.35 18.164 2123.65

Ñåðåäíÿ ìîëåêóëÿðíà ìàñà 137 112 117

Таблиця 1Вміст вільних амінокислот в екстрактах із листя та шроту листя евкаліпту

Примітка.— дану амінокислоту не виявлено.

60


В результаті вивчення мінерального скла-ду екстрактів із листя та шроту листя евкаліп-ту встановлено наявність 18 елементів, ізяких 6 — макроелементи, 10 — мікроелемен-ти (Табл. 2). Із виявлених елементів 10 —есенційні або умовно есенційні.

При вивченні елементного складу екст-рактів із листя та шроту листя евкаліптувідмічено високий вміст кальцію, калію, фос-фору, магнію, марганцю, міді та нікелю.

В усіх досліджених зразках екстрактів умежах можливостей виявлення методом емі-сійної спектрометрії були відсутні арсен,ртуть, кобальт, сурма, ванадій та германій.

ВисновкиВ результаті проведених досліджень вста-

новлено амінокислотний та мінеральнийсклад екстрактів із листя та шроту листя ев-каліпту після одержання густого екстрактухлорофіліпту.

В результаті досліджень ідентифіковано 30вільних амінокислот та 18 мікроелементів.

ЛІТЕРАТУРА1. Аминокислотный и минеральный состав надземнойчасти Atragene speciosa Weinm. / Шилова И.В., Крас-нов Е.А., Барановская Н.В. и др. // Химико-фармацев-тический журнал. – 2002. – Т. 36, № 11. - С. 36-38.2. Ноздрюхина Л.Р., Гринкевич Н.И. Нарушение мик-роэлементного обмена и пути его коррекции. – Моск-ва: Наука, 1980. – 135 с.

3. Микроэлементозы человека: этиология, классифика-ция, органопатология / Авцын А.П., Жаворонков А.А.,Риш М.А. и др. – Москва: Медицина, 1991. – 283 с.4. Райцес В.С. Нейрофизиологические основы действиямикроэлементов. – Ленинград: Медицина, 1981. –186 с.5. Кошевой О.Н., Комиссаренко А.Н., Ковалева А.М.Разработка методов стандартизации экстрактов из ли-ста эвкалипта // Запорожский медицинский журнал. –Вып. 1. – Т. 2. – 2004. – С. 103-106.6. Кошовий О.М., Тімченко М.М., Комісаренко А.М.Комплексна переробка листа евкаліпту // Наука та соці-альні проблеми суспільства: медицина, фармація, біо-технологія: Тези допов. III Міжнар. наук.-практ. конф.21 – 23 травня 2003 року. – Ч. 1. – Харків: Вид-воНФаУ, 2003. – С. 169.7. Крыщенко В.П. Комплексная методика определенияаминокислот в различных фракциях азотного комплек-са растений. – Известия АН СССР, Сер. биология. –1978 - № 3. –112 с.8. Тарасевич Н.И., Семененко К.А., Хлыстова А.Д. Ме-тоды спектрального и химико-спектрального анали-за. – Москва: МГУ, 1973. – 213 с.

РезюмеКошевой О. Н., Комиссаренко А. Н.

Аминокислотный и минеральный состав экстрактов

из листьев эвкалипта

В результате исследования химического состава эк-страктов из листьев эвкалипта и их шрота после полу-чения экстракта хлорофиллипта установлено наличиев них фенольных соединений, полисахаридов и 30 ами-нокислот, пять из которых являються незаменимыми.В результате изучения элементного состава экстрактовотмечено высокое содержание кальция, калия, фосфо-ра, магния, марганца, меди и никеля.

Âì³ñò åëåìåíòà, ìã/100 ã çîëè¹ Åëåìåíò

Åêñòðàêò ³ç ëèñòÿ åâêàë³ïòó Åêñòðàêò ³ç øðîòó ëèñòÿ åâêàë³ïòó

1. Fe 14 13

2. Si 290 270

3. B 0.7 1.2

4. Mn 140 170

5. Al 10 8.5

6. Pb 0.08 0.1

7. Cr 0.4 < 0.03

8. Mg 540 590

9. Ga 0.06 0.08

10. Ni 1.4 1.7

11. Ca 750 680

12. Mo 0.7 0.2

13. Cu 14 17

14. P 120 190

15. Zn 0.14 0.17

16. K 5100 5700

17. Sr 1.4 1.7

18. Sn 0.3 0.5

Таблиця 2Результати аналізу мінерального складу екстрактів із листя та шроту листя евкаліпту

Примітка.— в усіх зразках: Со < 0.05 мг/100 г; Ge < 0.01 мг/100 г; V < 0.02 мг/100 г; Sb < 0.03мг/100 г; Cd < 0.01 мг/100 г;As < 0.01 мг/100 г; Hg < 0.01 мг/100 г.

61

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-2004SummaryKoshevoy O.N., Komissarenko A.N.

Amino acid and mineral composition of eucalyptus

leaves extracts

As a result of the study of chemical composition fromeucalyptus leaves extract and their extracted meal after thechlorophyllipt extract production, the presence in them ofphenolic compounds, polysaccharides and thirty aminoacids, five of which are essential, was established. As a re-sult of the study of extracts elemental composition, the highcontent of calcium, potassium, phosphorus, magnesium,manganese, copper and nickel was established.

Кошовий Олег МиколайовичКошовий Олег МиколайовичКошовий Олег МиколайовичКошовий Олег МиколайовичКошовий Олег Миколайович (н. 1981). Закін-чив Національний фармацевтичний університет(2003). Аспірант кафедри «Хімія природних спо-лук» НФаУ.

Комісаренко Андрій Миколайович Комісаренко Андрій Миколайович Комісаренко Андрій Миколайович Комісаренко Андрій Миколайович Комісаренко Андрій Миколайович (н. 1962).Закінчив Харківський фармацевтичний інститут(1984). Д.фарм.н. (2000). Професор кафедри«Хімія природних сполук» НФаУ.

ÓÄÊ 547.466:581.45:633.931].001

Äåìåøêî Î.Â., Êîâàëüîâ Ñ.Â., Êîì³ñàðåíêî Ñ.Ì.Íàö³îíàëüíèé ôàðìàöåâòè÷íèé óí³âåðñèòåò

Âèâ÷åííÿ àì³íîêèñëîòíîãî ñêëàäó ëèñòÿ Robinia pseudoacacia L.

За допомогою амінокислотного аналізатора LКВ 4151 «Альфа Плюс» (Швеція) вперше визначено якісний та кількіснийсклад амінокислот листя Robinia pseudoacacia L. Виявлено наявність 16 зв’язаних та 15 вільних амінокислот. Із нихтреонін, валін, метіонін, ізолейцин, лейцин, фенілаланін, гістидин, лізин та аргінін - незамінні амінокислоти. Домі-нуючими є глутамінова кислота (3.491 %), аспарагінова кислота (1.513 %), аланін (1.675 %), лейцин (1.631 %).

Із давніх-давен відомо, що бобові рослинине мають потреби в азотистому удобрюванні,бо в їхній кореневій системі знаходятьсябульбочки з бактеріями роду Rhirobium, якізв’язують атмосферний азот і таким чиномзбагачують грунт. Тому лікарські рослини ро-дини Fabaceae можуть розглядатися як сиро-вина для одержання легкозасвоюваних формамінокислот у комплексі з іншими фармако-логічно активними речовинами [1, 2, 3, 4, 6].

Робінія ложноакація, акація біла, робініязвичайна - Robinia pseudoacacia L. (родинаFabaceae) - найбільш розповсюджений рідRobinia L. на території України.

Акацію білу широко використовують в на-родній медицині як спазмолітичний, протиза-пальний, жарознижуючий, в’яжучий, відхар-кувальний, гіпотензивний, кровоспиннийзасіб, її застосовують при захворюваннях се-чового міхура, гінекологічних хворобах тапри суглобному ревматизмі [7, 8, 9]. Аналізлітературних джерел свідчить про недостатнєвивчення листя акації білої в хімічному тафармакологічному аспектах.

Метою нашої роботи було вивчення якіс-ного складу та кількісного вмісту амінокислоту листі акації білої.


Для визначення амінокислотного складувикористовували листя акації білої, заготов-лені у Харківській області у 2003 році.

Попереднє хроматографічне вивченняякісного складу амінокислот у листі акаціїбілої

Аналітичну пробу сировини подрібнювалидо розміру частинок, які проходять крізь ситоз отворами розміром 2 мм. 20.0 г (точна на-важка) подрібненого листя акації білої по-міщали у колбу, заливали 70 % спиртом (1:10)і настоювали. Спиртовий витяг випарювалидо близько 10 мл і наносили на хроматограму.Попереднє вивчення якісного складу аміно-кислот у досліджуваній сировині проводилиметодом висхідної хроматографії на папері«Filtrak FN-4» у системі розчинників н-бута-нол - кислота оцтова - вода (4:1:2). Для по-рівняння використовували стандартнийнабір амінокислот (ТУ 6-09-3147-83) у кон-центрації 0.1 %. Хроматограми обробляли0.2 % розчином нінгідрину в ацетоні та вису-шували у сушильній шафі при температурі(60-80) °С. Амінокислоти ідентифікували з до-стовірними зразками за забарвленням плям ізначенням Rf при паралельному хроматогра-фуванні [11]. Виявлено 16 амінокислот(Табл. 1).

Визначення кількісного вмісту амінокис-лот у досліджуваній сировині проводили задопомогою амінокислотного аналізатораLKB 4151 «Альфа Плюс» (Швеція) на колонці,заповненій катіонообмінною смолою марки«Ultropac». Сировину попередньо витримува-ли у сушильній шафі при температурі 100 °Сдо постійної маси.

62


Зв'язані амінокислоти

0.1 г (точна наважка) висушеної сировинивносили в ампулу (скло Пірекс), заливали 6 Мрозчином кислоти хлористоводневої успіввідношенні 1:200, відкачували повітря,запаювали, поміщали у термостат при темпе-ратурі 80 °С і гідролізували протягом 24 год.Після цього ампулу розкривали, надлишоккислоти хлористоводневої відганяли і прово-дили нейтралізацію проб в ексикаторі над

натрію гідроксидом протягом 2 діб. Потімпробу розводили 10 мл цитратного буферно-го розчину рН 2.2, перемішували та фільтру-вали. Одержаний фільтрат вносили у колон-ку високого тиску, заповнену катіонообмін-ною смолою марки «Ultropac» в Na+ формі.Діаметр колонки 0.5 см, довжина 20 см. Длякращого розділення амінокислот крізь колон-ку за допомогою насоса пропускали цитратнібуферні розчини рН 2.2 – 7.8.

Рисунок 1

Хроматограма, одержана при визначенні вмісту зв’язаних амінокислот у листі акації білої

Рисунок 2

Хроматограма, одержана при визначенні вмісту вільних амінокислот у листі акації білої

63


Елюат, що виходив із колонки, змішував-ся у реакторі з нінгідриновим реагентом притемпературі 135 °С. У реакторі проходила ре-акція між нінгідрином і амінокислотами з ут-воренням забарвлених сполук у кількості,прямо пропорційній кількості амінокислоти велюаті. Потім суміш надходила до спектрофо-тометра, де вимірювалася інтенсивність по-глинання забарвленої сполуки. УФ-спектрпоглинання одержували за довжини хвилі440 нм для проліну та за довжини хвилі 570 нмдля інших амінокислот [12].

Вихідний сигнал фотометра надходив надвоканальний самописець, який реєструвавамінокислоти на хроматограмі у вигляді піків.Час утримування піка характеризує кожнуіндивідуальну амінокислоту. Площа пікавідповідає вмісту амінокислоти. Електричнийсигнал самописця поступав на інтегратор,який автоматично обчислював площу кожно-го піка. Для калібровки амінокислотного ана-лізатора крізь катіоніт пропускали стандарт-ну суміш амінокислот [ 1, 5, 10]. Одержані ре-зультати наведені у Табл. 1.

Вільні амінокислоти

0.5 г (точна наважка) сухої подрібненої си-ровини вичерпно екстрагували 70 % спиртом.Одержані витяги об'єднували, центрифугува-ли та випарювали на водяній бані при темпе-ратурі 80 °С насухо і розчиняли у 50 мл цит-ратного буферного розчину рН 2.2. Для ви-значення кількісного вмісту вільних аміно-кислот використовували 10 мл одержаного

розчину. Визначення проводили на амінокис-лотному аналізаторі. Одержані дані наведеніу Таблиці.

Результати досліджень та їх обговорення

Результати досліджень амінокислотногоскладу листя Robinia pseudoacacia L. наведенів Табл. та представлені на Рис. 1, 2.

У листі акації білої виявлено 16 зв’язанихта 15 вільних амінокислот, у тому числі 9 не-замінних: треонін, валін, метіонін, ізолейцин,лейцин, фенілаланін, гістидин, лізин тааргінін. Встановлено, що домінуючими улисті акації білої є кислота глутамінова(3.491 %), аланін (1.675 %), лейцин (1.63 %) такислота аспарагінова (1.513 %).

Вільні амінокислоти здогадно можуть бутипродуктом розпаду рослинного білка, якимбагаті рослини родини Бобові, або розпадулектинів, що становить інтерес для подаль-ших досліджень.

Висновки

Вперше вивчено якісний склад та кіль-кісний вміст амінокислот у листі акації білої.У випробовуваній сировині виявлено 16 зв’я-заних та 15 вільних амінокислот, у тому числі9 незамінних. Домінуючими є кислота глута-мінова (3.491 %), кислота аспарагінова(1.513 %), аланін (1.675 %) та лейцин (1.631 %).

ЛІТЕРАТУРА1. Бородіна Н.В., Ковальов С.В. Амінокислотний складPopulus tremula L. // Фармаком. - 2003. - № 4. - С. 32-36.2. Гудвин Т., Мерсер Э. Введение в биохимию растений:В 2 т: Пер. с англ. - Т. 1. – М.: Мир, 1986. – С. 355.

Âì³ñò àì³íîêèñëîòè (%)ó ïåðåðàõóíêó íà ñóõó ñèðîâèíó¹ Íàçâà àì³íîêèñëîòè Çàãàëüíà ôîðìóëà

Rf

ÁÎÂ (4:1:2)çâ�ÿçàí³ â³ëüí³

1. êèñëîòà àñïàðàã³íîâà Ñ4Í6Î4N 0.16 1.513 0.350

2. òðåîí³í Ñ4Í9Î2N 0.18 0.480 0.205

3. ñåðèí Ñ3Í7Î3N 0.15 0.753 0.255

4. êèñëîòà ãëóòàì³íîâà Ñ5Í8Î4N 0.12 3.491 1.080

5. ïðîë³í Ñ5Í9Î2N 0.31 0.947

6. ãë³öèí Ñ2Í5Î2N 0.17 0.605 0.082

7. àëàí³í Ñ3Í7Î2N 0.25 1.675 0.204

8. âàë³í Ñ5Í11Î2N 0.59 0.693 0.282

9. ìåò³îí³í Ñ5Í10Î2NS 0.14 0.348 0.310

10. ³çîëåéöèí Ñ6Í13Î2N 0.86 0.613 0.285

11. ëåéöèí Ñ6Í13Î2N 0.83 1,631 0.047

12. òèðîçèí Ñ9Í13Î3N 0.40 0.669 0.640

13. ôåí³ëàëàí³í Ñ9Í12Î2N 0.71 0.783 0.286

14. ã³ñòèäèí Ñ6Í11Î2N3 0.10 0.315 0.072

15. ë³çèí Ñ6Í13Î2N2 0.05 0.573 0.145

16. àðã³í³í Ñ6Í15Î2N4 0.06 0.552 0.244

ТаблицяЯкісний склад та кількісний вміст амінокислот у листі акації білої

64


3. Западнюк В.И., Купраш Л.П., Заика М.У., Безвер-хая И.С. Аминокислоты в медицине. – Киев: Здоров’я,1982. - 200 с.4. Кисличенко В.С., Борисенко О.І., Хворост О.П., Карт-мазова Л.С. Анатомічна будова, вивчення амінокислот-ного та мікроелементного складу листя берези бородав-частої // Вісник фармації. – 2002. - № 4 (32). – С. 23-27.5. Комисаренко С.Н. Аминокислоты Aesculus Hip-pocastanum L. // Фармаком. - 2001. - № 3. - С.29-31.6. Кретович В.Л. Биохимия растений: Учеб. – 2-е изд.,перераб. и доп. – М.: Высшая школа, 1986. – С. 382.7. Лікарські рослини: Енциклопедичний довідник //Відп. ред. А.М. Гродзінський. – Київ: Вид-во «Укр. Ра-дянська енциклопедія ім. М.П. Бажана», 1992. - С. 376-377.8. Смик Г.С. Корисні та рідкісні рослини України: Слов-ник-довідник народних назв. Київ: Вид-во «Укр. Ра-дянська енциклопедія ім. М.П. Бажана», 1991 - С. 339.9. Современная фитотерапия / Под ред. В. Петкова. -София: Медицина и физкультура, 1988. - С. 236.10. Черонис Н.Д., Ма Т.С. Микро- и полумикрометодыорганического анализа / Под ред. В.А. Климова. – М.:Химия, 1973. – 576 с.11. Хайс, Мауек. Хроматография на бумаге. - М.: Ино-странная литература, 1962. - С. 852.12. Химическая энциклопедия / Под ред. И.Л. Кну-нянц. - Москва: Советская энциклопедия, 1988.

РезюмеДемешко О.В., Ковалев С.В., Комиссаренко С.Н.

Изучение аминокислотного состава листьев RobiniaRobiniaRobiniaRobiniaRobiniapseudoacaciapseudoacaciapseudoacaciapseudoacaciapseudoacacia L.

С помощью аминокислотного анализатора LКВ 4151«Альфа Плюс» (Швеция) впервые определен качествен-ный и количественный состав листьев Robinia

pseudoacacia L. Установлено содержание 16 связанныхи 15 свободных аминокислот. Из них треонин, валин,метионин, изолейцин, лейцин, фенилаланин, гистидин,лизин и аргинин являются незаменимыми аминокисло-тами. Доминирующими являются глутаминовая кисло-та (3.491 %), аспарагиновая кислота (1.513 %), аланин(1.675 %) и лейцин (1.631 %).

SummaryDemeshko O.V., Kovalyov S.V., Komissarenko S.N.

Study of amino acid composition of RobiniaRobiniaRobiniaRobiniaRobiniapseudoacacia pseudoacacia pseudoacacia pseudoacacia pseudoacacia L. leaves

By the amino acid analyzer LKB 4151 «AlphaPlus»(Sweden), qualitative and quantitative composition ofRobinia pseudoacacia L. leaves has been determined for thefirst time. The presence of sixteen bound and fifteen freeamino acids have been revealed. From those ones, threo-nine, valine, methionine, isoleucine, leucine, phenyla-lanine, histidine, lysine and arginine are essential aminoacids. Glutamic (3.491 %) and aspartic (1.513 %) acids,alanine (1.675 %) and leucine (1.631 %) are dominating.

Демешко Ольга Володимирівна.Демешко Ольга Володимирівна.Демешко Ольга Володимирівна.Демешко Ольга Володимирівна.Демешко Ольга Володимирівна. Закінчила На-ціональну фармацевтичну академію України(2002). Аспірант кафедри фармакогнозії Націо-нального фармацевтичного університету (НФаУ).

Ковальов Сергій Володимирович.Ковальов Сергій Володимирович.Ковальов Сергій Володимирович.Ковальов Сергій Володимирович.Ковальов Сергій Володимирович. ЗакінчивНаціональну фармацевтичну академію України(1994). К.фарм.н. (1997). Доцент кафедри фарма-когнозії НФаУ.

Комісаренко Сергій Миколайович.Комісаренко Сергій Миколайович.Комісаренко Сергій Миколайович.Комісаренко Сергій Миколайович.Комісаренко Сергій Миколайович. ЗакінчивХарківський фармацевтичний інститут (1989).К.фарм.н. (2002). Асистент кафедри фармако-гнозії НФаУ.

Àíàë³ç

ÓÄÊ 546.72+544.226

Ëåâ³ò³í ª.ß., Êóíöåâ³÷ Ñ.Ï., Àëåêñàíäðîâ Î.Â.,Îíîïð³ºíêî Ò.Î., Öèõàíîâñüêà ².Â., Âåäåðí³êîâà ².Î.Íàö³îíàëüíèé ôàðìàöåâòè÷íèé óí³âåðñèòåòÕàðê³âñüêèé íàö³îíàëüíèé óí³âåðñèòåòÓêðà¿íñüêà ³íæåíåðíî-ïåäàãîã³÷íà àêàäåì³ÿ

Ôiçèêî-õiìi÷íi äîñëiäæåííÿ ÷àñòîê ìàãíåòèòó � êîìïîíåíòà ìàãíiòíèõëiêàðñüêèõ ôîðì

У статтi наведено результати фiзико-хiмiчних дослiджень дрiбнодисперсних часток магнетиту. На пiдставi вивчен-ня їх магнiтних характеристик було встановлено, що метод хiмiчної конденсацiї дозволяє одержати частки магнети-ту з намагнiченiстю насичування Js=340кА/м. Запропоновано метод якiсного та кiлькiсного визначення основноїречовини часток магнетиту.

Нинi набутий досвiд використання дрiбно-дисперсного синтетичного магнiтного напов-нювача в магнітних лікарських формах(МЛФ) [9-11, 13-15]. При створеннi магнети-тової мазi на гiдрофiльнiй основi було прове-дено ряд дослiджень, що пiдтверджуютьефективнiсть використання дрiбнодисперс-них часток магнетиту у складi мазi [1, 6]. На

пiдставi цього було розроблено спосiб лi-кування з використанням зовнiшнього маг-нiтного поля [5].

Магнетит належить до класу феритiв, се-ред яких виявляє однi з найкращих значеньмагнітних характеристик та температуриКюрі [7]. Тому в незначних кількостях у ши-рокому температурному діапазоні він може

65


забезпечувати певнi магнiтнi властивостiМЛФ. Вiн є економічно доступним – містить-ся в гірських породах, а також може бутиодержаний простим синтетичним шляхом(низькотемпературний синтез за нормальнихумов). Унікальні специфічні властивості маг-нетиту, досліджені американськими вченими[3], пов’язані з його наявністю в організмахрізних представників тваринного світу, утому числі й людини. Це обумовлює існуван-ня в більшості організмів „магнітної стрілки”,що відіграє роль компаса для перелітнихптахів, поштових голубів, бджіл. Установле-но факт утворення магніточутливими бакте-ріями кристалів магнетиту розміром до0.1 мкм, що відповідає суперпарамагнітномустану речовини. Дані, наведені в літературі,доводять наявність біологічної сумісностімагнетиту з живим організмом [3].

Подальшi вивчення фiзико-хiмiчних влас-тивостей магнетиту необхiднi для визначен-ня оптимальних показникiв та методiв конт-ролю якостi дрiбнодисперсного синтетично-го магнетиту в МЛФ, що на цей час вiдсутнi.

Метою даної роботi було дослiдженняякiсного та кiлькiсного складу дрiбнодис-персних часток синтезованого магнетиту тавизначення впливу методу синтезу на йогомагнiтнi характеристики.

Експериментальна частина

Зважаючи на склад магнетиту – наявнiстькатiонiв феруму дво- та тривалентного, ви-значення їх за умов сумiсної наявностi вiдо-мим методом окисно-вiдновного титрування[9] є досить сумнiвним. Тому було запропоно-вано ренгенофлуоресцентний метод визна-

чення складу дрiбнодисперсного магнетиту[4]. Метод передбачає використання сучасно-го обладнання, що дозволяє з високою екс-преснiстю iдентификувати елементний складзразка у дiапазонi вiд кальцiю до урану тазнайденi елементи кiлькiсно визначати. Ви-значення проводили на енергодисперсiйномуаналiзаторi «Quan X» (TN Spectrase), крис-талдифракцiйному скануючому рентгено-флуоресцентному аналiзаторi «Спектроскан»із Li-F 2000 кристаланалiзатором. На Рис. 1наведено спектр дослiджуваного зразка удiапазонi довжин хвиль вiд 1450 mÅ до2050 mÅ, де знаходяться характеристичнiхвилi рентгенофлуоресцентного випромi-нювання Zn, Cu, Ni, Со, Fе, Мn. Визначеноінтенсивність характеристичного випромі-нювання зразка в геометрії під кутом 45°зверху-вниз.

При дослiдженнi магнiтних характеристикмагнетиту була визначена залежнiсть намаг-нiчування дослiджуваних зразкiв вiд величи-ни зовнiшнього магнiтного поля. Криві намаг-нічування були одержані індукційним мето-дом на зразках приблизно сферичної форми(діаметр ≈ 2 мм), виготовлених пресуваннямдрібнодисперсного магнетиту. В експеримен-тах фіксувалася (мікровеберметр Ф-190)зміна магнітного потоку ∆Ф в індукційній ка-тушці при висмикуваннi зразка з мiжполюс-ного простору електромагніту ФЛ-1. Напру-женість магнітного поля в зазорі електромаг-ніту визначалася вимірниками магнітноїіндукції Ш-1-1 і Ш-1-8. Величина зміни пото-ку ∆Ф пропорційна магнітному моментовізразка. Монтаж установки проводили за ви-могами ГОСТ 8.377-80. Калібрування при-

Рисунок1

Рентгенофлуоресцентний спектр часток магнетиту

66


строю виконувалося за допомогою сферич-ного зразка фериту BaFe12O19 із відомим маг-нітним моментом.

Результати та їх обговорення

Однією з основних вимог, що пред’явля-ються до магнетиту, який застосовується яккомпонент МЛФ, є його високодисперсність.Використання у фармацевтичних цілях при-родного Fe3O4 (магнітні залізняки) усклад-нюється наявністю в ньому різного роду до-мішок, а також проблемами, пов’язаними зйого диспергуванням. Через це більш доціль-ним є одержання дрібнодисперсного магне-титу синтетичним шляхом методом хiмiчноїконденсацiї з розчинів солей дво- і тривалент-ного феруму в лужному середовищі:

2Fe3+ + Fe2+ + 8OH–

→ Fe3O4 + 4H2O

Як вихідні речовини використовувалисякристалогідрати FeCl3 · 6H2O; FeSO4 · 7 H2O ірозчин NH3 · H2O із масовою часткою 25 %, усіреактиви кваліфікації ч.д.а.

Одержаний у даних умовах осад чорногокольору відповідає сполуці Fe · Fe2O4, має фе-ромагнітні властивості і являє собою фериттипу шпінелі (магнетит) [12]. Вихід склав95.3 %.

Якiсний та кiлькiсний склад одержаних ча-сток магнетиту визначали рентгенофлуорес-центним методом. Спектр дослiджуваногозразка (Рис. 1) має два головних пiки Fе - Ка=1936 mÅ та Кb = 1757 mÅ. Кiлькiсний вмiстферуму визначали за стандартним зразком

особливо чистого залiза по лiнiї Ка. Булиодержанi такі значення iнтенсивностiвипромiнювання:

Стандарт Fe — 157937.6 ± 4302.9 iмп/с.Зразок — 113654.0 ± 4211.6 iмп/с.

При (n=6, P=0.95) та метрологiчних ха-рактеристиках методики:

X=113654.0S2=256843.85S=506.797t(P,f)=2.78∆X=630.1A=±1.2 %

Розрахунки масової частки феруму таiнших елементiв проводилися за методамифундаментальних параметрiв на «Quan X».Методика використовується для визначенняконцентрацiй металiв у природних, питних тасточних водах (свiдоцтво про метрологiчнуатестацiю Держстандарту УкраїниХЦСМ № 8-9096). Межі встановленої похиб-ки вимiрювання концентрацiї елементiввiдповiдають ГОСТ 27384-87.

Масова частка елементiв у зразку стано-вить:

Fe 69.84 %, S 1.22 %, Ca 0.58 %, Si 0.07 %,Al 0.07 %, Mg 0.07 %, Mn 0.07 %, Cr 0.06 %,К, Br, Ni — не виявлено.

Перерахунок масової частки ферумуω(Fe) % на масову частку магнетитуω(Fe3O4) % проводили за формулою:

ω (Fe3O4) % = 1.37 ω (Fe)%,де:1.37 — коефіцієнт перерахунку.

Таким чином, було визначено наявність удослiджуваному зразку дрiбнодисперсногомагнетиту феруму загального з концен-трацiєю 69.84 %, що вiдповiдає вмiсту основ-ної речовини (Fe3O4) 95.68 %. При цьому буловизначено наявність iнших елементiв у не-значній кiлькості.

Проведені дослідження дозволяють зро-бити висновок, що одержана речовина за еле-ментним складом відповідає речовинам, яківідносяться до IV класу небезпеки [2], і можебути використана в МЛФ для зовнішньогозастосування.

Однiєю з основних магнiтних характери-стик речовин є намагніченість насичення Js

[8]. Тому для одержаних часток магнетитубула вивчена залежність величини його на-магніченості від величини накладеного зовн-ішнього магнітного поля (Рис. 2, крива 1). Як

0

100

200

300

400

500

0 5 10 15 20 H, êÀ/ì

J, êÀ/ì

1

2

3

Криві намагнічування

1 — синтезований магнетит;2 — порошок монокристалічного магнетиту;3 — монокристалічний сферичний зразок

магнетиту.

Рисунок 2

67


порiвняльнi були вивченi залежностiнамагнiченостi монокристалічного магнетиту(Рис. 2, крива 3) та порошку здрібнених мо-нокристалів (Рис. 2, крива 2).

Технічне насичення у всіх зразках дося-гається в полях H ≥ 15 кА/м. Величина намаг-ніченості насичення монокристалаFe3O4 (490 кА/м) погоджується з літературни-ми даними [12]. Значення намагніченості на-сичення порошку подрiбнених монокрис-талiв магнетиту (350 кА/м) і синтетичного(340 кА/м) розрізняються на 3 %. Незважаю-чи на зменшення намагніченості насиченняпорошкового матеріалу на 30 %, вона доситьзначна. Істотне розходження намагніченостінасичення порошкових матеріалів і монокри-стала обумовлено наявністю в порошку знач-них площ відкритих поверхонь. Крім того, занаявністю розкиду за об’ємом малих частокфериту частина з них, очевидно, знаходить-ся у суперпарамагнітному стані, що і призво-дить до зменшення величини Js для порошко-вих матеріалів.

Висновки

1. Одержаний методом хiмiчної конден-сацiї магнетит має задовільнi магнітнi харак-теристики (Js=340кА/м) та ступiнь дисперс-ності, що дозволяє рекомендувати його длявикористання як компонента магнітнихлікарських форм.

2. Із метою визначення якiсного та кiлькiс-ного складу одержаного магнетиту а такождомішок, наявність яких досить істотна привикористанні даної речовини у фармацевтич-них цілях, запропоновано метод рентгено-флуоресцентного аналізу, що відрізняєтьсяекспресністю і дає достовірні результати.

3. Запропоновані методи дослідження маг-нітних властивостей і визначення елементно-го складу можуть бути використані як ос-новні для перевірки якості та підтвердженняфармацевтичної придатності одержаної ре-човини.

ЛІТЕРАТУРА1. Ведерникова I.O., Левiтiн Є.Я., Онопрiєнко Т.О. та iн.Вивчення властивостей мазi на гiдрофiльнiй основi змагнетитовим компонентом // Медична хiмiя. –2004. – Т. 6, № 2. – С. 101-104.2. ДСТ 12.1.007-76. ССБТ. Шкідливі речовини. Класифі-кація і загальні вимоги безпеки.3. Киршвинк Д.Д. Биогенный магнетит и магниторецеп-ция. - М.: Мир, 1989. - Т. 1. – 352 с.4. Левитин Е.Я., Оноприенко Т.А., Цихановская И.В. Ве-дерникова И.А. Рентгенофлуоресцентный метод опре-деления элементного состава магнетита для фармацев-тической промышленности // Физические явления втвердых телах: Материалы VI Междунар. конф. – Х.,2003 – С. 72.

5. Пат. 47059А Україна, МПК А61K9/06, А61N2/06.Спосіб лікування інфікованих ран / Левiтiн Є.Я.,Онопрiєнко Т.О., Ведерникова І.О., Дикий І.Л. (Украї-на). - № 2001074841; Заявл. 10.07.01; Опубл. 17.06.02, Бюл.№ 6. - 4 с.6. Пат. 59838А Україна, МПК А61K9/06, А61N2/06. Маг-нетитова мазь багатоспрямованої дiї на гідрофільнійоснові / Левiтiн Є.Я., Онопрiєнко Т.О., Ведернико-ва І.О., Дмитрiєвський Д.I., Дикий І.Л. (Україна). -№ 20021210457; Заявл. 23.12.02; Опубл. 15.09.03, Бюл.№ 9. - 4 с.7. Розенцвейг Р. Феррогидродинамика. - М.: Мир,1989. – 356 с.8. Такетоми С., Тикадзуми С. Магнитные жидкости /Под ред. В.Е. Фертмана. - М.: Мир, 1993. – 272 с.9. Черкасова О.Г. Мелкодисперсный магнетит – маг-нитный наполнитель лекарственных средств. Химико-фармацевтический журнал. - 1992. - Т. 26, № 8. - С. 84-88.10. Черкасова О.Г. Физико-химические основы приме-нения мелкодисперсных магнитных материалов в фар-мации: Дис. … д.фарм.н. – М., 1993. – 285 с.11. Цыбусов С.Н. Применение ферромагнитных мате-риалов для диагностики и лечения хирургических забо-леваний: Дис. … д.мед.н. - Нижний Новгород, 1995. –182 с.12. Яковлев Ю.М., Генделев С.Ш. Монокристаллы фер-ритов в радиоэлектронике. – М.: Мир, 1978. – 360 с.13. Ishii F., Takamura A., Noro S. Magnetic microcapsulesfor in vitro testing as carrier for intravascular administrationof anticancer drug: preparation and physicichеmicalproperties // Chem. Pharm. Bull. – 1984. – Vol. 32,No. 4. – P. 679-684.14. Shimazaki Ch., Wienewski D. Biomedical applicationof magnetic fluids // Blood. – 1988. – Vol. 72, No. 4. –P. 1248-1254.15. Muller-Schulte D., Fussl F. A new AIDS therapyapproach using magnetoliposomes // Scientific andclinical applications of magnetic carriers. - New York,1997. – P. 517-526.

РезюмеЛевитин Е.Я., Кунцевич С.П., Александров А.В.,Оноприенко Т.А., Цихановская И.В., Ведерникова И.А.

Физико-химические исследования частиц

магнетита — компонента магнитных лекарственных

форм

В статье представлены результаты физико-химичес-ких исследований мелкодисперсных частиц магнетита.На основании изучения их магнитных характеристикбыло установлено, что метод химической конденсациипозволяет получить частицы с намагниченностью насы-щения Js=340кА/м. Предложен метод качественного иколичественного определения основного вещества ча-стиц магнетита.

SummaryLevitin Ye.Ya., Kuncevich S.P., Alexsandrov A.V.,Onoprienko T.A., Tcikhanovskaya I.V., Vedernikova I.A.

Physicochemical investigations of the magnetic

particles — the component of magnetic drug dosage

form

Results of physicochemical studies of fine–dyspersat-ed magnetic particles are given. On the basis of their mag-netic properties it was established that the chemical con-densation method allows to obtain particles with saturationmagnetization JS =340 kA/m. The method of qualitativeand quantitative determination of basic substance of mag-netic particles was proposed.

68


Левітін Євген Якович. Левітін Євген Якович. Левітін Євген Якович. Левітін Євген Якович. Левітін Євген Якович. К.фарм.н. Доцент. Зав.кафедри неорганічної хімії Національного фарма-цевтичного університету (НФаУ).

Кунцевіч Станіслав Петрович. Кунцевіч Станіслав Петрович. Кунцевіч Станіслав Петрович. Кунцевіч Станіслав Петрович. Кунцевіч Станіслав Петрович. Д.ф.-м.н.Професор кафедри фізики Харківського націо-нального університету.

Александров Олексій Вікторович.Александров Олексій Вікторович.Александров Олексій Вікторович.Александров Олексій Вікторович.Александров Олексій Вікторович. К.х.н. До-цент кафедри неорганічної хімії Української інже-нерно-педагогічної академії (УІПА).

Онопрієнко Тетяна Олексіївна. Онопрієнко Тетяна Олексіївна. Онопрієнко Тетяна Олексіївна. Онопрієнко Тетяна Олексіївна. Онопрієнко Тетяна Олексіївна. К.х.н. Доценткафедри неорганічної хімії НФаУ.

Цихановська Ірина Василівна. Цихановська Ірина Василівна. Цихановська Ірина Василівна. Цихановська Ірина Василівна. Цихановська Ірина Василівна. К.х.н. Доценткафедри неорганічної хімії УІПА.

Ведернікова Ірина Олексіївна. Ведернікова Ірина Олексіївна. Ведернікова Ірина Олексіївна. Ведернікова Ірина Олексіївна. Ведернікова Ірина Олексіївна. Ассистент ка-федри неорганічної хімії НФаУ.

Ñèíòåç òà âèâ÷åííÿ ôàðìàêîëîã³÷íî¿ ä³¿

ÓÄÊ 615.26:615.272.4.014.425

Ñèäîðîâà ².Â., Íåñòåðîâà Í.Î., Áåëºí³÷åâ ².Ô., Êîâàëåíêî Ñ.².Çàïîð³çüêèé äåðæàâíèé ìåäè÷íèé óí³âåðñèòåò

Âïëèâ ïîõ³äíèõ 4-ã³äðàçèíîõ³íàçîë³íó íà îêèñíó ìîäèô³êàö³þ á³ëêàâ óìîâàõ ³í³ö³þâàííÿ â³ëüíîðàäèêàëüíîãî îêèñíåííÿ in vitroЕкспериментальними дослідженнями підтверджено, що окисна модифікація білка (ОМБ) відіграє ключову роль умолекулярних механізмах окисного стресу і є пусковим механізмом окисної деструкції інших молекул. При цьомувідмічається достовірне підвищення рівня продуктів вільнорадикального окиснення (ВРО) (карбонільних та карбок-сильних груп) та інтенсивне утворення низькомолекулярних білкових компонентів. Похідні 4-гідразинохіназолінувиявляють виражену антиоксидантну активність (АОА) при ОМБ в умовах ініціювання ВРО in vitro, запобігаючидефрагментації білка і накопиченню продуктів окисної модифікації. Вивчення цього процесу дозволить глибше зро-зуміти роль окисного стресу у патогенезі ішемічних пошкоджень головного мозку та надасть змогу вивчити механізмцеребропротекторної дії похідних 4-гідразинохіназоліну за різних ішемічних патологій.

Дослідженнями останнього десятиліттявстановлено, що гіперпродукція активнихформ кисню (АФК) біоенергетичними та амі-носпецифічними системами головного мозкупризводить до окисної модифікації білка(ОМБ), появи у структурі макромолекул, кар-бонільних і карбоксильних груп [9, 13, 14].Подібні зміни модифікують білкові фрагмен-ти мембран нейронів, погіршують чутливістьі специфічність рецепторів, генерацію утво-рення і провідність нервового імпульсу, пору-шують синаптичну передачу і, унаслідок, при-зводять до дисбалансу процесів гальмуванняі збудження у центральній нервовій системі(ЦНС), зниження когнітивно-мнестичнихфункцій та ініціації загибелі нейронів по типуапоптозу або некрозу [5, 7, 8, 10, 11]. Усе цеобґрунтовує застосування антиоксидантів укомплексній терапії захворювань ЦНС, де-структивного або дегенеративного генезу, якімають чітко окреслену вільнорадикальнуфазу [5, 10, 11]. Однак, як показав клінічнийдосвід, антиоксиданти «прямого» типу дії –дибунол, α-токоферол, як речовини з високи-ми ліпофільними властивостями, не вплива-ють на ОМБ, і тим самим виявляють низькутерапевтичну активність у лікуванні вищеза-

значених патологій [5, 11]. У цьому зв’язкуперспективним напрямком є пошук антиок-сидантів, які б специфічно гальмували ОМБ,знижуючи деструктивні явища в нейроні, щовиникають у процесі «окисного» стресу.

Метою даного дослідження є вивчення ан-тиоксидантної активності (АОА) похідних 4-гідразинохіназоліну при окисній модифікаціїбілка в умовах ініціювання вільнорадикально-го окиснення (ВРО) in vitro.


Об’єктами дослідження є похідні 4-гідра-зинохіназоліну, синтезовані на кафедрі фар-мацевтичної хімії Запорізького державногомедичного університету (зав. кафедрою про-фесор, д.фарм.н. Мазур І.А.), такої принципо-вої структури:

N

N

NN

R1

R2

R3

R4

R

1.1-1.20

69


N

N

NN

R1

R2R

2.1-2.5

N

N

NN (CH2)n

R

OR13.1-3.4

1.1 - R=H, R1=H, R2=H, R3=Cl, R4=H; 1.2 - R=H,R1=H, R2=H, R3=Br, R4=H; 1.3 - R=H, R1=H,R2=H, R3=OH, R4=H; 1.4 - R=H, R1=H, R2=H,R3=NO2, R4=H; 1.5 - R=H, R1=H, R2=NO2, R3=H,R4=H; 1.6 - R=H, R1=NO2, R2=H, R3=H, R4=H;1.7 - R=H, R1=H, R2=H, R3=N(CH3)2, R4=H; 1.8 -R=H, R1=OCH2-C6H4-Cl-o, R2=H, R3=H, R4=H;1.9 - R=H, R1=Cl, R2=H, R3=Cl, R4=H; 1.10 -R=H, R1=OH, R2=H, R3=H, R4=NO2; 1.11 - R=H,R1=OCH2-COOH, R2=H, R3=H, R4=H; 1.12 -R=H, R1=COOH, R2=H, R3=H, R4=H; 1.13 -R=H, R1=H, R2=OCH3, R3=OH, R4=H; 1.14 -R=H, R1=OH, R2=Br, R3=H, R4=Br; 1.15 - R=H,R1=H, R2=OCH3, R3=OCH2-C6H5, R4=H; 1.16 -R=H, R1=OH, R2=H, R3=H, R4=Br; 1.17 - R=H,R1=OH, R2=OCH3, R3=H, R4=H; 1.18 - R=H,R1=COOH, R2=OCH3, R3=OCH3, R4=H; 1.19 -R=CH3, R1=H, R2=H, R3=OH, R4=H; 1.20 -R=CH3, R1=COOH, R2=H, R3=H, R4=H

2.1 - R=H, R1=H, R2=H; 2.2 - R=CH3, R1=H,R2=H; 2.3 - R=H, R1=NO2, R2=H; 2.4 - R=Br,R1=H, R2=H; 2.5 - R=Cl, R1=H, R2=NO2

3.1 - R=CH3, R1=OH, n=0; 3.2 - R=COOH,R1=OH, n=2; 3.3 - R=CH3, R1=OCH3, n=0; 3.4 -R=CH3, R1=OCH3, n=1

Окисну модифікацію білка проводили вгомогенаті мозку щурів лінії Вістар [8]. До0.25 г гомогенату тканини додають 7 мл 0.5 Мфосфатного буферного розчину (температу-ра розчину 5 °С) і центрифугують при 11000 gпротягом 30 хв (вихідний гомогенат). До0.1 мл вихідного гомогенату додають 0.1 млдосліджуваної речовини (10-6 М), 0.1 мл 2.8 %розчину заліза (II) сульфату, 0.1 мл 4 % роз-чину водню пероксиду й інкубують протягом2 год. Потім додають 1 мл 25 % розчину кис-лоти трихлороцтової та центрифугують про-тягом 30 хв із частотою обертання 3000 об/хв.До 0.5 мл надосадової рідини додають 12.0 мл0.9 % розчину натрію хлориду і вимірюютьоптичну густину за довжин хвиль 254 нм,272 нм і 280 нм [8], використовуючи як ком-пенсаційний розчин 0.5 М фосфатний буфер-

ний розчин. (Визначення проводили на спек-трофотометрі СФ-46). АОА (%) визначають заступенем гальмування дефрагментації білката обчислюють за формулою:

100 %k o

k

D DAOA

D

−= ⋅ ,

де:Dk — оптична густина контрольного розчи-

ну;Dо — оптична густина розчину, в який дода-

вали досліджувані сполуки.

До осаду, що залишився після центрифу-гування, додають 1 мл 2.2 % розчину 2,4-диніт-рофенілгідразину (приготовленого на 7 %розчині кислоти хлористоводневої), інкубу-ють протягом 1 год при температурі 37 °С,центрифугують 10 хв із частотою обертання3000 об/хв. Осад промивають 3 мл етилацета-ту, розчиняють у 3 мл 50 % розчину сечови-ни, додають 1 краплю 7 % розчину кислотихлористоводневої та розводять водою дисти-льованою 1:12. Визначають оптичну густинуодержаного розчину за довжини хвилі274 нм, 363 нм, використовуючи як компенса-ційний розчин 0.5 М фосфатний буфернийрозчин. (Визначення проводили на спектро-фотометрі СФ-46). АОА (%) визначали загальмуванням утворення карбонільних (274нм) і карбоксильних (363 нм) груп за вищена-веденою формулою.

При визначенні АОА за ступенем гальму-вання дефрагментації білка та за гальмуван-ням утворення карбонільних і карбоксильнихгруп як контрольний розчин використовува-ли холостий розчин, як інтакт – розчин,одержаний без додавання до вихідного гомо-генату 0.1 мл 2.8 % розчину заліза (II) сульфа-ту, 0.1 мл 4 % розчину водню пероксиду.


Аналіз одержаних даних зі спонтанноїОМБ показав, що в гомогенаті відмічаєтьсядостовірне підвищення рівня продуктів ВРО(Табл. 1). Так, рівень карбонільних та карбо-ксильних груп – основних маркерів ОМБ,які кількісно реагують із 2,4-динітрофенілгі-дразином (2,4-ДНФГ), утворюючи при цьому2,4-динітрофенілгідразони, був у 8 разів (λ =274 нм) та у 3.3 рази (λ=363 нм) вище у по-рівнянні з інтактом. Крім карбонільних такарбоксильних груп білка вивчався ступіньйого дефрагментації (Табл. 2). Слід відмітити,що при ОМБ відбувається інтенсивне утво-рення низькомолекулярних компонентів упорівнянні з інтактом.

70


Введення до гомогенату мозку щурів вумовах ОМБ похідних 4-гідразинохіназолінупризводить до достовірного зниження рівня2,4-динітрофенілгідразонів, що характеризуєзменшення утворення карбонільних та кар-боксильних груп (Табл. 1). Найбільше при-

гнічують утворення 2,4-динітрофенілгідра-зонів 4-бензиліденгідразинохіназоліни (1.2,1.3, 1.5-1.7, 1.9, 1.10, 1.11-1.17, 1.18, 1.20), якімають замісники з переважним індуктивним(бром, нітро-, карбоксигрупи) або переваж-ним мезомерним ефектом (окси-, диметил-

ÑïîëóêàÊàðáîí³ëüí³ ãðóïè,

(ó.î./ã òêàíèíè)ÀÎÀ, (%)

Êàðáîêñèëüí³ ãðóïè,(ó.î./ã òêàíèíè)

ÀÎÀ, (%)

³íòàêò 0.1 ± 0.001 � 0.20 ± 0.0005 �

êîíòðîëü 0.80 ± 0.001 � 0.70 ± 0.001 �

1.1 0.60 ± 0.002* 25.00 0.53 ± 0.001* 24.29

1.2 0.55 ± 0.001* 31.25 0.56 ± 0.001* 20.00

1.3 0.56 ± 0.002* 30.00 0.45 ± 0.002* 35.71

1.4 0.6 ± 0.002* 25.00 0.60 ± 0.001* 14.29

1.5 0.54 ± 0.002* 32.50 0.54 ± 0.001* 22.86

1.6 0.50 ± 0.001* 37.50 0.54 ± 0.001* 22.86

1.7 0.40 ± 0.001* 50.00 0.50 ± 0.001* 28.57

1.8 0.62 ± 0.002* 22.50 0.68 ± 0.002* 2.86

1.9 0.56 ± 0.001* 30.00 0.54 ± 0.001* 22.86

1.10 0.54 ± 0.001* 32.50 0.51 ± 0.002* 27.14

³íòàêò 0.20 ± 0.001 � 0.30 ± 0,001 �

êîíòðîëü 0.78 ± 0.001 � 0.68 ± 0,001 �

1.11 0.44 ± 0.001* 43.59 0.5 ± 0.001* 26.47

1.12 0.35 ± 0.001* 55.13 0.40 ± 0.001* 41.18

1.13 0.36 ± 0.001* 53.85 0.48 ± 0.001* 29.41

1.14 0.44 ± 0.001* 43.59 0.50 ± 0.001* 26.47

1.15 0.34 ± 0.001* 56.41 0.44 ± 0.024* 35.29

1.16 0.60 ± 0.001* 23.08 0.70 ± 0.001* -2.94

1.17 0.38 ± 0.001* 51.28 0.40 ± 0.002* 41.18

³íòàêò 0.07 ± 0.0112 � 0.074 ± 0.004 �

êîíòðîëü 0.54 ± 0.023 � 0.53 ± 0.020 �

1.18 0.32 ± 0.026* 40.74 0.33 ± 0.030* 37.74

1.19 0.51 ± 0.018 5.56 0.53 ± 0.018 0

1.20 0.30 ± 0.001* 44.44 0.29 ± 0.027* 45.28

³íòàêò 0.20 ± 0.001 � 0.30 ± 0.001 �

êîíòðîëü 0.80 ± 0.001 � 0.70 ± 0.001 �

2.1 0.40 ± 0.001* 50.00 0.56 ± 0.001* 20.00

2.2 0.46 ± 0.001* 4250 0.60 ± 0.001* 14.29

2.3 0.50 ± 0.001* 37.50 0.62 ± 0.001* 11.43

2.4 0.55 ± 0.001* 31.25 0.64 ± 0.001* 8.57

2.5 0.32 ± 0.001* 60.00 0.50 ± 0.001* 28.57

³íòàêò 0.06 ± 0.001 � 0.72 ± 0.0034 �

êîíòðîëü 0.53 ± 0.014 � 0.55 ± 0.014 �

3.1 0.31 ± 0.018* 41.51 0.37 ± 0.095* 32.73

3.2 0.35 ± 0.040* 33.96 0.35 ± 0.120* 36.36

3.3 0.59 ± 0.018* -11.32 0.69 ± 0.032* -25.45

3.4 0.59 ± 0016* -11.32 0.68 ± 0.064* -23.64

Таблиця 1Антиоксидантна активність похідних 4-гідразинохіназоліну в умовах ініціювання ОМБ у гомогенаті

мозку щурів у дослідах in vitro in vitro in vitro in vitro in vitro (за гальмуванням утворення карбонільних і карбоксильних груп)

Примітка.* – достовірно по відношенню до контролю (р ≤ 0.05).

71


Ñòóï³íü äåôðàãìåíòàö³¿ á³ëêà

Ñïîëóêà îïòè÷íà ãóñòèíà(ë = 254 íì)

ÀÎÀ (%)îïòè÷íà ãóñòèíà

(ë = 272 íì)ÀÎÀ (%)

îïòè÷íà ãóñòèíà(ë = 280 íì)

ÀÎÀ(%)

³íòàêò 0.30 ± 0001 � 0.03 ± 0.001 0005 ± 0.001 �

êîíòðîëü 2.0 ± 0.001 � 0.70 ± 0.001 0.45 ± 0.001 �

1.1 1.4 ± 0.01* 30.0 0.55 ± 0.002* 21.43 0.35 ± 0002* 22.22

1.2 1.3 ± 0.02* 35.0 0.49 ± 0.001* 30.0 0.30 ± 0.002* 33.33

1.3 1.6 ± 0.01* 20.0 0.60 ± 0.002* 14.29 0.40 ± 0.002* 11.11

1.4 1.4 ± 0.01* 30.0 0.52 ± 0.001* 25.71 0.34 ± 0.001* 24.44

1.5 1.4 ± 0.001* 30.0 0.52 ± 0.001* 25.71 0.35 ± 0.001* 22.22

1.6 1.3 ± 0.01* 35.0 0.54 ± 0.001* 22.86 0.30 ± 0.001* 33.33

1.7 1.3 ± 0.03* 35.0 0.48 ± 0.002* 31.43 0.30 ± 0.001* 33.33

1.8 1.7 ± 0.01* 15.0 0.70 ± 0.001 0 0.45 ± 0.001 0

1.9 1.2 ± 0.01* 40.0 0.48 ± 0.001* 31.43 0.30 ± 0.001* 33.33

1.10 1.5 ± 0.01* 25.0 0.60 ± 0.002* 14.29 0.40 ± 0.04* 11.11

³íòàêò 0.30 ± 0.007 � 0.20 ± 0.001 � 0.20 ± 0.001 �

êîíòðîëü 1.30 ± 0.001 � 0.60 ± 0.001 � 0.55 ± 0.001 �

1.11 1.23 ± 0.054* 5.38 0.64 ± 0.001* 6.67 0.48 ± 0.001* 12.73

1.12 1.32 ± 0.56 -1.54 0.40 ± 0.001* 33.33 0.34 ± 0.001* 38.18

1.13 1.46 ± 0.111* -12.3 0.60 ± 0.001 0 0.44 ± 0.001* 20.0

1.14 1.34 ± 0.068 -3.08 0.60 ± 0.001 0 0.64 ± 0.001* -16.36

1.15 1.00 ± 0.001* 23.08 0.50 ± 0.001* 16.67 0.35 ± 0.001* 36.36

1.16 1.00 ± 0.001* 23.08 0.60 ± 0.001 0 0.60 ± 0.001* -9.09

1.17 1.20 ± 0.001* 7.69 0.60 ± 0.001 0 0.40 ± 0.011* 27.27

³íòàêò 0.54 ± 0.008 � 0.055 ± 0.01 � 0.034 ± 0.004 �

êîíòðîëü 1.2 ± 0.26 � 0.93 ± 0.138 � 0.90 ± 0.111 �

1.18 0.92 ± 0.046 2.33 0.87 ± 0.018 6.45 0.82 ± 0.024* 8.89

1.19 0.92 ± 0.079 2.33 0.90 ± 0030 3.23 0.85 ± 0.008* 5.56

1.20 0.90 ± 0.001* 25.0 0.90 ± 0.001 3.23 0.82 ± 0.064* 8.89

³íòàêò 0.30 ± 0.001 � 0.20 ± 0.001 � 0.20 ± 0.001 �

êîíòðîëü 1.40 ± 0.001 � 0.72 ± 0.001 � 0.60 ± 0.001 �

2.1 0.77 ± 0.001* 45.0 0.60 ± 0.001* 16.67 0.44 ± 0.001* 26.67

2.2 1.00 ± 0.001* 28.57 0.64 ± 0.001* 11.11 0.50 ± 0.001* 16.67

2.3 1.0 ± 0.001* 28.57 0.70 ± 0.001* 2.78 0.50 ± 0.001* 16.67

2.4 0.96 ± 0.001* 31.43 0.70 ± 0.001* 2.78 0.48 ± 0.006* 20.0

2.5 0.64 ± 0.001* 54.29 0.60 ± 0.001* 16.67 0.32 ± 0.001* 46.67

³íòàêò 0.42 ± 0.021 � 0.61 ± 0.003 � 0.32 ± 0.0034 �

êîíòðîëü 0.72 ± 0.031 � 0.35 ± 0.002 � 0.29 ± 0.0022 �

3.1 0.84 ± 0.040* -16.7 0.21 ± 0.016* 40.0 0.18 ± 0.001* 37.93

3.2 0.39 ± 0.001* 45.83 0.27 ± 0.018* 22.86 0.16 ± 0.024* 44.83

3.3 0.89 ± 0.040* -23.6 0.63 ± 0.014* -80.0 0.53 ± 0.018* -82.76

3.4 0.90 ± 0.001* -25.0 0.61 ± 0.024* -74.3 0.53 ± 0.048* -82.76

Таблиця 2Антиоксидантна активність похідних 4-гідразинохіназоліну в умовах ініціювання ОМБ у гомогенаті

мозку щурів у дослідах in vitro in vitro in vitro in vitro in vitro (за ступенем гальмування дефрагментації білка)

Примітка.* – достовірно по відношенню до контролю (р ≤ 0.05).

аміно-, метокси-, карбоксиметоксигрупи) убензиліденовій субституенті. Дані сполуки(1.1-1.20) крім того, що є ефективними інгібі-торами пероксидації білка, також запобіга-ють його деструкції та руйнуванню (Табл. 2).

Із Табл. 2 видно, що монозаміщені 4-бензил-іденгідразинохіназоліни (1.1-1.10) більшефективно пригнічують утворення низькомо-лекулярних компонентів у порівнянні з диза-міщеними (1.11-1.17). Слід відмітити, що на-

72


ведені ствердження цілком погоджуються злітературними даними [8, 13, 14], де обгово-рюється здатність АФК, а саме гідроксилра-дикалу, атакувати бензольні кільця ароматич-них сполук, утворюючи при цьому гідрокси-льовані сполуки, зокрема стеричні ізомерифенолів. Однак, говорити про роль заміс-ників та співвідношення ізомерів ароматич-ного гідроксилювання у даних випадках не єдостатньо обгрунтованим. По-перше, цеможе бути пов’язане з різною реакційноюздатністю АФК по відношенню до сполук(1.1-1.20), які містять у бензиліденовій компо-ненті різноманітні замісники. По-друге,співвідношення орто-, мета- та параізомерівгідроксильованих фенолів, що утворюютьсяв результаті такої взаємодії, може бутирізним.

Цікавим є той факт, що всі 4-фенілетил-іденгідразинохіназоліни (2.1-2.5) також вияв-ляють значну антиоксидантну активність(АОА). Дані сполуки достовірно знижуютьрівень 2,4-динітрофенілгідразонів і ступіньдефрагментації білка гомогенату мозку щурівв умовах ініціювання ВРО (Табл. 1, Табл. 2).На нашу думку, це пов’язано з наявністюспряженої подвійної системи у молекулі, якає ефективною «пасткою» АФК та вільних ра-дикалів.

Менш ефективними сполуками є ряд по-хідних (хіназолін-4-іл-гідразоно)алкілкарбо-нових кислот, що виявляють іншу спрямо-ваність АОА. Так, метилові ефіри 2-(хіна-золін-4-іл-гідразоно)пропіонової кислоти (3.3)та 3-(хіназолін-4-іл-гідразоно)бутанової (3.4)кислоти збільшують рівень 2,4-динітрофеніл-гідразонів на 11.32 % та на 23.64 %-25.45 %,відповідно (Табл. 1). Крім того, сполуки 3.3 та3.4 значно сприяють дефрагментації білка,збільшуючи при цьому вміст низькомолеку-лярних компонентів від 23.6 % до 82.76 %(Табл. 2).

Отже, проведені дослідження показали,що похідні 4-гідразинохіназоліну виявляютьвиражену АОА при ОМБ в умовах ініціюван-ня ВРО in vitro. Дані сполуки запобігаютьдефрагментації білка і накопиченню про-дуктів окисної модифікації. Подібний ме-ханізм дії похідних 4-гідразинохіназолінуможна пояснити: по-перше, базуючися напопередніх дослідженнях, якими встановле-но їх здатність інгібувати АФК у модельнихсистемах in vitro [4, 6]. Можна припустити,що дані сполуки пригнічують ОМБ черезінгібування супероксид-, гідроксидрадикалів,які утворюються в реакціях Фентона. По-дру-

ге, відновними властивостями бензил-(феніл-етил)-іліденгідразонової групи у молекуліхіназоліну. Тобто, дані сполуки виявляютьпрямий інгібуючий вплив на ОМБ, що є пред-метом наших подальших досліджень за допо-могою електрохімічних методів.

Подібне уявлення про одну із ланок анти-оксидантної дії похідних 4-гідразинохіназо-ліну знайшло підтвердження при дослідженнінейропротективної та антиамнестичної ак-тивності в умовах гіпоксії та амнезії умовно-го рефлексу [1, 2]. В експериментах показа-но, що дані похідні, маючи високу антиокси-дантну активність, виявляють значну нейро-протективну та антиамнестичну дію, знижу-ючи явища когнітивного дефіциту та норма-лізуючи неврологічний статус тварин.

Таким чином, слід відмітити, що ОМБвідіграє ключову роль у молекулярних меха-нізмах окисного стресу і є пусковим механіз-мом окисної деструкції інших молекул. Вив-чення цього процесу дозволить глибше зро-зуміти роль окисного стресу в патогенезі іше-мічних пошкоджень головного мозку та на-дасть змогу вивчити механізм церебропро-тективної дії похідних 4-гідразинохіназолінуза різних ішемічних патологій.

Висновки

1. Окисна модифікація білка (ОМБ) віді-грає ключову роль у молекулярних механіз-мах окисного стресу і є пусковим механізмомокисної деструкції інших молекул.

2. Похідні 4-гідразинохіназоліну виявля-ють виражену АОА при ОМБ в умовах ініцію-вання ВРО in vitro, запобігаючи дефрагмен-тації білка і накопиченню продуктів окисноїмодифікації.

3. Вивчення цього процесу дозволить глиб-ше зрозуміти роль окисного стресу у патоге-незі ішемічних пошкоджень головного мозкута надасть змогу вивчити механізм церебро-протективної дії похідних 4-гідразинохіназо-ліну за різних ішемічних патологій.

ЛІТЕРАТУРА1. Коррекция экспериментальных нарушений когнитив-ных функций антиоксидантами производными 4-гидра-зинохиназолина / Сидорова И.В., Нестерова Н.А., Бе-леничев И.Ф. и др. // Biomedical and Biosocial Anthro-pology. - 2004. - № 3. - С. 113-115.2. Нейропротективні ефекти 4-іліденгідразинохіна-золінів в умовах моделювання судом та амнезії / Несте-рова Н.О., Бєленічев І.Ф., Коваленко С.І. та ін. // Ліки. -2004. - № 1-2. - С. 65-69.3. Синтез та антиоксидантна активність 4-іліденгідрази-нохіназолінів / Нестерова Н.О., Коваленко С.І, Карпен-ко О.В. та ін. // Фармацевтичний журнал. - 2004. - № 1. -C. 5-10.

73

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-20044. Производные хиназолина – перспективные нейро-протективные средства с антиоксидантным механиз-мом действия / Коваленко С.И., Беленичев И.Ф., Бух-тиярова Н.В. // Запорожский медицинский журнал. -2004. - T. 2, № 1. - C. 9-15.5. Церебропротективные эффекты антиоксидантов принейродеструктивных нарушениях, обусловленных ток-сическим действием кислородных радикалов / В.В. Ду-наев, Ю.И. Губский, И.Ф. Беленичев и др. // Современ-ные проблемы токсикологии. – 2004. - № 1. – С. 7-14.6. Формування комбінаторної бібліотеки хіназолін-4-іл-гідразонів з антиоксидантною активністю / Нестеро-ва Н.О., Коваленко С.І., Бєленічев І.Ф. та ін. // Медич-на хімія . - 2004. - Т. 6, № 3. - С. 14-21.7. Halliwell B., Auroma O. Molecular biology of freeradicals in human diseases. - St. Lucia London: OICA Int,1999. – 352 p.8. Halliwell B. Free radicals biology medecine. - OxfordPress, 1999. – 248 p.9. Heinecke J., Li W., Dityrosine a specific marker ofoxidation, is synthesized by the myeloperoxidase-hydrogenperoxide system of human neutrophiles and macropha-ges // J. Biol. Chem. - 1999. - Vol. 25, No. 11. - P. 4069-4079.10. Ferrer I., Bianco R. Role of oxigen radicals in ischemiademage // Neuropathol. Appl. Neurobiol. - 2000. - Vol. 26,No. 5. - P. 237-242.11. Floid R.A. Oxidative stress and neurodegerativediseases // PSEBM. - 1999. - Vol. 222, No. 1. - P. 236-245.12. Giulivi C., Davies V.J. Dityrosine and tyrosine oxyda-tione products are endogenous markers for the selectiveproteolysis of oxidatively modified red flood cell hemo-globin by proteasome // J. Biol. Chem. - 1998. - Vol. 12,No. 11. - P. 8759-8762.13. Witko-Sarsat V., Friedlander M. Advamed oxidationprotein products as a novel markers of oxidative stress inischemia // J. Neurochem. - 2000. - Vol. 22, No. 6. - P. 342-350.14. Winter M.L. Free radical induced carbonyl contect inprotein // J. Biol. Chem. - 1997. - Vol. 22, No. 6. - P. 14446-14450.

РезюмеСидорова И.В., Нестерова Н.А.,Беленичев И.Ф., Коваленко С.И.

Влияние производных 4-гидразинохиназолина на

окислительную модификацию белка в условиях

инициирования свободнорадикального окисления inininininvitrovitrovitrovitrovitro

Экспериментальными исследованиями подтвержде-но, что окислительная модификация белка (ОМБ) игра-ет ключевую роль в молекулярных механизмах окисли-тельного стресса и является пусковым механизмомокислительной деструкции других молекул. При этомотмечается достоверное повышение уровня продуктовсвободнорадикального окисления (СРО) (карбонильныхи карбоксильных групп) и интенсивное образованиенизкомолекулярных белковых компонентов. Производ-

ные 4-гидразинохиназолина проявляют выраженнуюантиоксидантную активность при ОМБ в условиях ини-циирования СРО in vitro, предотвращая дефрагмента-цию белка и накопление продуктов окислительной мо-дификации. Изучение этого процесса позволит глубжепонять роль окислительного стресса в патогенезе ише-мических повреждений головного мозга и предоставитвозможность изучить механизм церебропротективногодействия производных 4-гидразинохиназолина при раз-личных ишемических патологиях.

SummarySidorova I.V., Nesterova N.A.,Belenichev I.F., Kovalenko S.I.

An influence of 4-hydrazinoquinazoline derivatives on

oxidative modification of protein at conditions of

initiation of free radical oxidation in vitroin vitroin vitroin vitroin vitroIt was conformed by experimental studies that oxida-

tive modification of protein plays main part in molecularmechanisms of oxidative stress and serves as starting me-chanism of other molecules oxidative destruction. In addi-tion certain increase of the level of free radical oxidationproducts (carbonyl and carboxyl groups) and intense for-mation of low-molecular protein components is presented.4-hydrazinoquinazoline derivatives show distinct antioxi-dant activity at oxidative modification of protein on con-ditions of initiation of free radical oxidation in vitro, pre-vent protein defragmentation and cumulation of productsof oxidative modification. The study of this process allowsdeeply understand the part of oxidative stress in pathogen-esis of ischemic brain damages and affords an opportunityto study the mechanism of cerebroprotective action of 4-hydrazinoquinazoline derivatives at various ischemicpathologies.

Сидорова Ірина Володимирівна.Сидорова Ірина Володимирівна.Сидорова Ірина Володимирівна.Сидорова Ірина Володимирівна.Сидорова Ірина Володимирівна. Закінчиламедичний факультет Запорізького державногомедичного університету (1997). Асистент кафедрифармакології і медичної рецептури ЗДМУ.

Нестерова Наталія Олександрівна.Нестерова Наталія Олександрівна.Нестерова Наталія Олександрівна.Нестерова Наталія Олександрівна.Нестерова Наталія Олександрівна. Закінчи-ла фармацевтичний факультет Запорізького дер-жавного медичного університету (1992). Аспіранткафедри фармацевтичної хімії ЗДМУ.

Белєнічев Ігор Федорович.Белєнічев Ігор Федорович.Белєнічев Ігор Федорович.Белєнічев Ігор Федорович.Белєнічев Ігор Федорович. Закінчив фарма-цевтичний факультет Запорізького державногомедичного університету (1988). Д.б.н. (2003). До-цент (2003) кафедри фармакології і медичної ре-цептури ЗДМУ.

Коваленко Сергій Іванович.Коваленко Сергій Іванович.Коваленко Сергій Іванович.Коваленко Сергій Іванович.Коваленко Сергій Іванович. Закінчив фарма-цевтичний факультет Запорізького державногомедичного університету (1985) Д.фарм.н. (2002).Професор кафедри фармацевтичної хімії ЗДМУ.

74


Ôàðìàêîëîã³÷í³ äîñë³äæåííÿ

ÓÄÊ 615.322:615.451:615.33

Äèêèé ².Ë., Ìàíñüêèé Î.À., Ô³ë³ìîíîâà Í.²., Äîìàðüîâ À.Ï.Íàö³îíàëüíèé ôàðìàöåâòè÷íèé óí³âåðñèòåòÍàö³îíàëüíèé òåõí³÷íèé óí³âåðñèòåò «ÕÏ²»

Ïîòåíö³þþ÷èé âïëèâ ðàä³àö³éîíîãî îïðîì³íþâàííÿ íà áàêòåðèöèäíóàêòèâí³ñòü àíòèá³îòèê³â

Наведено результати спрямованого використання γ-опромінювання як фактора, що здатний суттєво підвищуватибактерицидні властивості стрептоміцину сульфату та бензилпеніциліну натрієвої солі з одночасним зниженням їхньоїздатності щодо формування відповідних антибіотикорезистентних штамів.

Ураховуючи виражені селективні власти-вості антибіотиків перших поколінь, щоздатні формувати лікарсько стійкі штамизбудників інфекційних захворювань, основ-ною вимогою для перспективних антимікроб-них препаратів є надання їм вибіркових абопереважних антисептичних властивостей [1,2, 7, 8]. Одночасно набутий досвід широкогоклінічного використання сучасних антисеп-тиків переконливо свідчить, що і по відно-шенню до них мікроорганізми, хоча уповіль-нено та обмежено, але закономірно форму-ють певну стійкість [3, 4, 9]. Останнє принци-пово пов’язане з тим, що антимікробні пре-парати, поряд із мікробоцидними, мають та-кож і мікробостатичні властивості [5]. Отже,актуальною є розробка заходів, що ведуть донівелювання вихідних розбіжностей у рівняхмікробоцидних та мікробостатичних власти-востей антибіотиків і антисептиків. Внаслідокцього слід очікувати зниження або зникнен-ня селективного потенціалу антимікробнихпрепаратів.

Метою даної статті є обгрунтування як та-кого заходу дозованого використання γ-опро-мінювання.


Об'єктом дослідження були зразки бен-зилпеніциліну натрієвої солі та стрептоміци-ну сульфату, що мають виражені селективнівластивості щодо формування антибіотико-резистентних штамів.

Антимікробну активність зразків до тапісля γ-опромінювання досліджено по відно-шенню до набору референс-штамів S. au-reus – ATCC 25923 та E. coli – ATCC 25922методом дворазових серійних розведень ум'ясо-пептонному бульйоні. Статистичну об-робку проводили із використанням коефіці-єнта Стьюдента.

Встановлено, що розвиток лікарськоїстійкості мікроорганізмів залежить відхіміко-біологічних властивостей антибіо-тиків. При цьому виділяють «пеніциліновий»тип формування антибіотикорезистентностів умовах постійного використання вихідноїсубактивної концентрації антибіотика та«стрептоміциновий» — при використаннізростаючих концентрацій досліджуваних ан-тибіотиків [6].

Джерелом γ-опромінювання обраний Со60,що використаний у дозах 1 Гр, 2 Гр, 3 Гр, 4 Гр,5 Гр, 7 Гр, 8 Гр, 10 Гр.


Показано, що в інтервалі доз опроміню-вання 1-4 Гр зразки стрептоміцину сульфатута бензилпеніциліну натрієвої солі не зміню-вали органолептичних характеристик та ви-хідних рівнів бактеріостатичної активності повідношенню до тест-культур S.aureus і E.coli,а в дозах 5-10 Гр позитивні відхилення булистатистично незначущими (Табл. 1).

Одночасно встановлено, що під впливомопромінювання на рівні 10 Гр зразки стреп-томіцину сульфату та бензилпеніциліну нат-рієвої солі суттєво підвищують початковубактерицидну здатність, яка за своїми рівня-ми сягає показників мінімальної інгібуючоїконцентрації (МІК) випробовуваного анти-біотика. Таким чином, проведені досліджен-ня свідчать, що опромінювання Со60 на рівні10 Гр виявляє позитивний ефект, який поля-гає у наданні опроміненим зразкам стрепто-міцину сульфату переважних бактерициднихвластивостей. Одержані результати показу-ють, що дозоване γ-опромінювання можебути використане як фізичний фактор, прин-ципово здатний надавати бактеріостатичнимантибіотикам антисептичних властивостей засуттєвого зниження селективної здатності.

75


Для експериментальної перевірки даногоприпущення було доцільним у порівняльно-му співставленні простежити зміну селектив-них властивостей антибіотиків до і після оп-ромінювання. Як було зазначено вище, меха-нізми антибіотикорезистентності умовнопідрозділяються на «пеніциліновий» тип, щодосягається в умовах культиваційного кон-такту тест-мікробів із постійною субактив-ною концентрацією відповідного препарату,та «стрептоміциновий» тип, що відрізняєть-ся ефективним набуттям антибіотикорезис-тентності в умовах послідовного збільшеннясубактивної концентрації антибіотика.

Безперервне послідовне культивуваннятест-мікробів у присутності комерційного таопроміненого зразків бензилпеніциліну нат-рієвої солі проводили по відношенню доS.aureus у дозі 12.5 мкг/мл та E.coli в дозі22.8 мкг/мл. При використанні комерційногота опроміненого зразків стрептоміцину суль-фату його вихідна субактивна концентраціяпо відношенню до S.aureus становила3.5 мкг/мл, по відношенню до E.coli –

10.0 мкг/мл. У подальшому, із набуттям стреп-томіциностійкості, відповідно збільшуваласясубактивна концентрація комерційного таопроміненого зразків стрептоміцину сульфа-ту. Загальний цикл спрямованого селективно-го культивування становив 25 послідовних па-сажів.

Порівняння селективного потенціалу ко-мерційного та опроміненого зразків бензил-пеніциліну натрієвої солі та стрептоміцинусульфату проведено шляхом безперервногопослідовного культивування референтнихтест-штамів S.aureus та E.coli у присутностісубактивних доз відповідного антибіотика.

Результати проведених досліджень наве-дені в Табл. 2, із якої видно, що комерційнізразки бензилпеніциліну натрієвої солівідрізнялися вираженою селективною здат-ністю, забезпечуючи на рівні 25-го остаточ-ного висівання зростання вихідної стійкостіS.aureus до бензилпеніциліну натрієвої солі у5.8 разів, E.coli – у 4.5 рази. Одночасно в ана-логічних умовах селекціювання опроміненийзразок бензилпеніциліну натрієвої солі забез-

S.aureus E.coliÄîçàîïðîì³íþâàííÿ,

ÃðÀíòèá³îòèê

Ì²Ê, ìêã/ìë ÌÁÊ, ìêã/ìë Ì²Ê, ìêã/ìë ÌÁÊ, ìêã/ìë

ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 5.9 ± 1.4 12.6 ± 1.2 18.4 ± 2.2 27.8 ± 1.6êîíòðîëü

(êîìåðö³éíèé

çðàçîê) áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü 12.5 ± 1.6 18.5 ± 1.4 22.8 ± 2.7 37.6 ± 2.3

ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 6.2 ± 1.6 13.5 ± 1.0 22.6 ± 1.8 30.5 ± 1.41

áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü 13.0 ± 1.2 20.5 ± 1.6 25.4 ± 1.6 35.8 ± 1.7









ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 5.3 ± 0.5 8.5 ± 1.2 15,6 ± 1,2 20.5 ± 1.67


ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 6.0 ± 1.3 (7.5 ± 0.6)× 16.2 ± 0.8 22.3 ± 1.58

áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü (11.4 ± 1.2)× (14.3 ± 1.5)× 20.5 ± 1.5 (25.3 ± 1.8)*×

ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 5.7 ± 0.6 (6.4 ± 0.8)*× 19.7 ± 1.3 (20.6 ± 0.5)*×

10áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü 10.3 ± 1.2 (12.5 ± 0.6)*× 21.3 ± 1.4 (22.5 ± 1.3)*×

Таблиця 1Дозозалежний вплив γγγγγ-опромінювання на специфічну активність антибіотиків, n = 6

Примітки:МІК — мінімальна інгібуюча концентрація;МБК — мінімальна бактерицидна концентрація;* — результати достовірні по відношенню до контролю, р ≤ 0.05;× — кількісні розбіжності у значеннях МІК і МБК не достовірні;± — розбіг між мінімальним і максимальним значеннями.

76


печив підвищення вихідної стійкості S.aureusлише у 2.2 рази, E.coli — в 1.8 рази. Тобто, підвпливом проведеного опромінювання до-сліджуваний зразок бензилпеніциліну нат-рієвої солі знизив вихідну селективну здат-ність по відношенню до S.aureus у 2.6 рази, повідношенню до E.coli – у 2.5 рази.

Аналогічна тенденція простежена і для оп-ромінених зразків стрептоміцину сульфату.Так, внаслідок проведеного селективногокультивування у присутності комерційногозразка стрептоміцину сульфату референтнакультура S.aureus підвищила свою вихіднустійкість до цього антибіотика у 8.4 разів, доE.coli – у 4.9 рази (Табл. 2).

На протилежність цьому спрямоване се-лективне культивування S.aureus у присут-ності субактивної концентрації опромінено-го зразка стрептоміцину сульфату забезпечи-ло зростання стрептоміциностійкості у 2.3рази, E.coli – у 2.1 рази.

Таким чином, по відношенню до стрепто-міцину сульфату також підтверджений анти-селективний вплив проведеного γ-опроміню-вання. По відношенню до S.aureus антиселек-тивний ефект γ-опромінювання виявився упорівняльному співставленні з комерційним

зразком стрептоміцину сульфату знижениму 3.6 рази, по відношенню до E.coli - у 2.3 рази.Представлені результати свідчать про до-цільність використання дозованого γ-опромі-нювання для підвищення бактерицидних вла-стивостей антибіотиків та зниження їхньогоселективного потенціалу щодо формуванняантибіотикорезистентних варіантів S.aureusта E.coli.

Висновки

1. Встановлено, що дозоване γ-опроміню-вання Со60 на рівні 10 Гр не змінює органо-лептичних і фізико-хімічних характеристикстрептоміцину сульфату і бензилпеніцилінунатрієвої солі та не супроводжується залиш-ковою радіоактивністю опромінених зразків.

2. Під впливом дозованого γ-опромінюван-ня зразки бензилпеніциліну натрієвої солі тастрептоміцину сульфату суттєво підвищуютьвихідні бактерицидні властивості та суттєвознижують притаманний їм селективний по-тенціал у формуванні відповідних лікарськостійких штамів S.aureus та E.coli.

ЛІТЕРАТУРА1. Сидоренко С.В. Перспективы в области создания пре-паратов для лечения инфекций, вызываемых грамполо-

Àíòèáàêòåð³àëüíà àêòèâí³ñòü, ìêã/ìë

S. aureus E.coli¹ ïàñàæó

êîìåðö³éíèéçðàçîê

îïðîì³íåíèéçðàçîê

êîìåðö³éíèéçðàçîê

îïðîì³íåíèéçðàçîê

êîíòðîëü


çðàçîê)


êîíòðîëü


çðàçîê)


5 áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü 13.9 ± 1.6 10.6 ± 1.2 26.3 ± 2.9 20.9 ± 1.8

5 ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 8.2 ± 1.9 7.6 ± 0.9 20.5 ± 1.9 21.0 ± 1.4

10 áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü 25.2 ± 2.6* 12.3 ± 1.6 47.3 ± 4.2* 22.4 ± 2.3

10 ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 18.1 ± 2.2* 8.2 ± 1.2 45.1 ± 3.6* 23.7 ± 2.6

15 áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü 40.3 ± 5.2* 16.8 ± 2.2 66.2 ± 7.8* 26.8 ± 2.9

15 ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 25.3 ± 1.6* 10.5 ± 1.5 58.5 ± 4.6* 27.8 ± 1.9

20 áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü 48.4 ± 5.3* 20.7 ± 1.8* 86.1 ± 7.9* 30.4 ± 2.2*

20 ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 35.4 ± 4.2* 13.6 ± 1.6 70.2 ± 8.4* 34.2 ± 2.8*

25 áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü 72.6 ± 8.9* 26.3 ± 2.5* 103.2 ± 8.8* 38.7 ± 3.1*

25 ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 49.5 ± 7.7* 16.6 ± 1.9* 91.2 ± 10.2 42.4 ± 4.1*

êðàòí³ñòü áåíçèëïåí³öèë³íó íàòð³ºâà ñ³ëü 5.8 2.2 4.5 1.8

êðàòí³ñòü ñòðåïòîì³öèíó ñóëüôàò 8.4 2,3 4.9 2.1

Примітка.* — результати достовірні по відношенню до контролю, р ≤ 0.05.

Таблиця 2Порівняльна оцінка селективної здатності комерційних та опромінених зразків бензилпеніциліну

натрієвої солі та стрептоміцину сульфату

77

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-2004жительными микроорганизмами // Антибиотики и хи-миотерапия. - 2000. - № 10. - С. 3-4.2. Давыдова В.А., Карачурина Л.Т., Исмагилова З.Ф.,Трорынина Ю.Г. Повышение эффективности антибио-тикотерапии производными пиримидина при репара-тивной регенерации кожи у крыс // Там же. - 1997. -№ 3.- С. 19-21.3. Васина Т.А. Комбинированная антибиотикотера-пия – один из путей повышения эффективности анти-биотиков // Там же. - 1998. - № 5.- С. 42-43.4. Семина Н.А., Ковалева Е.П., Сколовский В.Т. и др.Внутрибольничные инфекции – актуальная проблемаздравоохранения // Эпидемиология и инфекционныеболезни. - 1999. - № 2. - С. 22-25.5. Меньшиков Д.Д., Лазарева Е. Б., Попова Т.С. и др.Антимикробные свойства пектинов и их влияние на ак-тивность антибиотиков // Антибиотики и химиотера-пия. - 1997. - № 12. - С. 10-15.6. Першин Г.Н. Методы экспериментальной химиотера-пии. – М.: Медицина, 1971. – 539 с.7. L-658,310 - new injectable cephalosporin II. In vitro andin vivo interaction between L-658,310 and variousaminoglycosides or ciprofloxacin versus clinical isolates ofPseudomonas aeruginosa / M.E. Valiant, E.C. Gilfillan, B.A.Pelak et al. // Antibiot. - 1989. - Vol. 42, No. 5. – P. 807-814.8. Karlowsky James A., Zelenitsky Sheryl A., ZhanelGeorge G. Aminoglycoside adaptive resistance // Pharma-cotherapy. - 1997. - Vol. 17, No. 3. – P. 549-555.9. Watanabe Masoto, Mitsuhashi Sasumu. Imipenemresistance between imipenem and other β-lactamantibiotics // Chemotherapy. - 1991. - Vol. 39, No. 11. -P. 1014-1019.

РезюмеДикий И.Л., Манский А.А.,Филимонова Н.И., Домарев А.П.

Потенцирующее влияние радиационного облучения

на бактерицидную активность антибиотиков

Приведены результаты направленного использова-ния γ-облучения как фактора, способного существенно

повысить бактерицидные свойства стрептомицинасульфата и бензилпенициллина натриевой соли с одно-временным снижением их способности к формирова-нию соответствующих антибиотикорезистентныхштаммов.

SummaryDikiy I.L., Manskiy A.A., Filimonova N.I., Domaryov A.P.

The potentiative influence of radiative irradiation on

antibiotics bactericidal activity

Results of directional use of gamma irradiation as a fac-tor that can essentially increase the bactericidal activity ofstreptomycin sulfate and benzylpenicillin sodium with si-multaneous decrease of their capacity to form the appro-priate antibiotic–resistant strains were given.

Дикий Ігор ЛеонідовичДикий Ігор ЛеонідовичДикий Ігор ЛеонідовичДикий Ігор ЛеонідовичДикий Ігор Леонідович (н. 1940). Закінчив Хар-ківський державний медичний університет.Д.мед.н. Професор. Зав. кафедрою мікробіологіїНаціонального фармацевтичного університету(НФаУ).

Манський Олександр Анатолійович Манський Олександр Анатолійович Манський Олександр Анатолійович Манський Олександр Анатолійович Манський Олександр Анатолійович (н. 1976).Закінчив Національний технічний університет«Харківський політехнічний інститут». Асистенткафедри біотехнології НФаУ.

Філімонова Наталя Ігорівна.Філімонова Наталя Ігорівна.Філімонова Наталя Ігорівна.Філімонова Наталя Ігорівна.Філімонова Наталя Ігорівна. Закінчила Хар-ківський державний медичний університет.Д.мед.н. Доцент кафедри мікробіології НФаУ.

Домарьов Анатолій Павлович.Домарьов Анатолій Павлович.Домарьов Анатолій Павлович.Домарьов Анатолій Павлович.Домарьов Анатолій Павлович. Закінчив Хар-ківський державний університет. К.т.н. Доценткафедри біотехнології та аналітичної хімії Націо-нального технічного університету «Харківськийполітехнічний інститут».

ÓÄÊ: 615.276:615.01.

ßêîâëåâà Ë.Â., Ýëü Äèëàòè Êàìàëü ÒóôèêÍàöèîíàëüíûé ôàðìàöåâòè÷åñêèé óíèâåðñèòåò

Èçó÷åíèå ýôôåêòèâíîñòè ãåëÿ àíàëüáåíà ïðè ýêñïåðèìåíòàëüíîìàäúþâàíòíîì àðòðèòå ó êðûñ

Изучена эффективность 2.5 % геля анальбена на модели адъювантного артрита у крыс в сравнении с 1 % гелем ди-клофенака натрия. Эффективность 2.5 % геля анальбена на модели адъювантного артрита у крыс соответствует эф-фекту препарата сравнения — 1 % геля диклофенака натрия. Гель анальбена в большей мере, чем гель диклофенаканатрия, предупреждает разрушение суставного хряща.

Ревматоидным артритом (РА) страдаетоколо 1 % населения всего мира, а экономи-ческие потери от РА сопоставимы с затрата-ми, связанными с ишемической болезньюсердца. Фармакотерапия РА остается однойиз наиболее сложных проблем как медицины,так и фармации [6, 10, 13]. В комплексной те-рапии в качестве противоревматическихсредств широко используются нестероидные

противовоспалительные препараты (НПВП)[5, 6]. Течение РА требует длительного при-менения НПВП, что может привести к разви-тию типичных для этой группы лекарствен-ных средств осложнений. Несмотря на всеболее частое использование НПВП новогопоколения (селективных ингибиторовЦОГ-2), что существенно позволяет снизитьпроявление побочных эффектов со стороны

78


желудочно-кишечного тракта, применениенеселективных НПВП, как значительно бо-лее дешевых и доступных, остается актуаль-ным. Это может привести к целому ряду по-бочных эффектов: гастропатий, гепатитов,нефропатий и др. Одним из возможных пу-тей предупреждения развития побочных эф-фектов НПВП, наряду с использованием се-лективных ингибиторов циклооксигеназы-2(ЦОГ-2), является применение смешанныхингибиторов ЦОГ-1/ЦОГ-2 в виде лекар-ственных форм для местной терапии. Такойподход позволяет уменьшить выраженностьвоспалительной реакции, отечность околосу-ставных тканей и боль при практическом от-сутствии системных побочных эффектов [5,6, 11]. В связи с этим актуальным являетсясоздание эффективных лекарственных формНПВП для местного применения.

Учитывая противовоспалительное, аналь-гетическое действие и эффективность ново-го отечественного НПВП - анальбена при РАв доклинических и клинических исследова-ниях [1, 11], целесообразным явилось созда-ние и изучение специфической активностиформы для местного применения на его ос-нове.

Целью наших исследований явилось изу-чение эффективности разработанного 2.5 %геля анальбена при экспериментальном адъ-ювантном артрите у крыс в сравнении с 1 %гелем диклофенака натрия.

Материалы и методы

Ревматоидный артрит у крыс вызывалисубплантарным введением 0.1 мл адъювантаФрейнда, содержащего в 1 мл 4.6 мг ослаб-ленных микробных тел [2]. Исследованияпроводили по схеме А.И. Венгеровского иА.С. Саратикова в течение 22 сут [9]. В экс-перименте использовали три группы по 8животных в каждой. Первая группа живот-ных – контрольная патология. Животнымвторой группы в лапу втирали 2.5 % гельанальбена. Животных третьей группы лечи-ли препаратом сравнения – 1 % гелем дикло-фенака натрия (ОАО «ФК «Здоровье»).

Противовоспалительную активность пре-парата оценивали по его способности умень-шать отек конечностей у подопытных живот-ных по сравнению с контрольными [5, 6].

Резорбтивное действие изучаемых препа-ратов и интенсивность общей воспалитель-ной реакции оценивали по показателю обще-го количества лейкоцитов, скорости оседанияэритроцитов (СОЭ) [8] и активности щелоч-

ной фосфатазы в сыворотке крови [7]. Спо-собность препаратов предотвращать деструк-тивные изменения соединительной ткани впораженных суставах оценивали по количе-ству оксипролина в моче [3]. Проводили мак-роскопическое и микроскопическое исследо-вания голеностопных суставов.

Результаты и их обсуждение

После субплантарного введения адъюван-та Фрейнда у всех крыс наблюдалась местнаявоспалительная реакция: быстрое развитиегиперемии и отека пораженной конечности.Максимальный отек развивался на 5-7 сут сначала эксперимента. В группе контрольнойпатологии объем лап к этому времени увели-чился по сравнению с исходным в 2 раза. На9-11 сут после инъекции адъюванта в конт-рольной группе животных наблюдалосьуменьшение симптомов острого воспаления.На 13-15 сут у большинства контрольных жи-вотных появились признаки генерализован-ного артрита, что проявлялось поражениемпарной лапы и хвоста, а также наблюдалосьповторное усиление явлений экссудации(Табл. 2).

Развитие патологии сопровождалось лей-коцитозом, повышением скорости оседанияэритроцитов, уровня общего белка и актив-ности щелочной фосфатазы в сыворотке кро-ви (Табл. 1). Динамика изучаемых показате-лей крови коррелировала с динамикой разви-тия отека – как проявлением местной воспа-лительной реакции.

Количественный анализ процесса экскре-ции аминокислоты оксипролина с мочой уэкспериментальных животных дал возмож-ность судить о структурных изменениях со-единительной ткани при экспериментальномревматоидном артрите. Содержание окси-пролина в моче тесно связано с состояниемобмена коллагена. Оксипролин специфичендля коллагена и его выделение из организмасвидетельствует об интенсивности деструк-тивных процессов в соединительной ткани.

Динамика экскреции оксипролина в груп-пе контрольной патологии свидетельствует овозрастании деструктивных процессов со-единительной ткани, что подтверждается иданными гистологических исследований.

Макроскопические исследования голено-стопных суставов крыс контрольной патоло-гии свидетельствовали об отечности сустава.При вскрытии обнаруживались деструктив-ные массы. Суставной хрящ матовый, отме-чены очаги эрозии и разрушения. Суставная

79


капсула отечная, утолщена и гиперемирова-на. Периартикулярные ткани отечны. Гисто-логические исследования голеностопных су-ставов и периартикулярных тканей у всехкрыс контрольной патологии свидетельство-вали о развитии артрита и соответствовалиморфологической картине артрита с выра-женным синовитом, начальными эрозивны-ми проявлениями развития деструкции кост-ной ткани, обширными периваскулярнымиинфильтратами. Были выявлены очаги лим-фо-макрофагальной инфильтрации, которыерасполагались на всем протяжении синови-альной мембраны. В фиброзном слое капсу-лы грануляционная ткань занимала значи-тельное место. Наряду с локальными очагами

лимфо-макрофагальной инфильтрации на-блюдались и диффузные лимфоидные ин-фильтраты.

На большинстве микропрепаратов в кра-евых отделах суставного хряща на границе ссиновиальной тканью наблюдалось четко вы-раженное формирование паннуса, практи-чески полностью занимающего просвет су-става.

В субхондриальной костной ткани преоб-ладали процессы остеокластической резорб-ции костных трабекул и их лизис.

В течение всего эксперимента антиэкссу-дативная активность геля анальбена была до-стоверно значимой и колебалась в пределахот 20 % до 37 % (Табл. 2). С переходом воспа-

Êîíòðîëüíàÿ ïàòîëîãèÿ Ãåëü àíàëüáåíà, 2.5 % Ãåëü äèêëîôåíàêà íàòðèÿ, 1 %Ñðîêè èññëåäî-âàíèÿ (ñóò.) Âåëè÷èíà îòåêà, óñë. åä. Âåëè÷èíà îòåêà, óñë. åä. À, % Âåëè÷èíà îòåêà, óñë. åä. À, %

1 29.2 ± 1.3 26.0 ± 1.4 24.25 ± 1.53*

3 34.7 ± 1.2 25.89 ± 1.10* 25 26.00 ± 2.35* 25

5 36.9 ± 2.40 28.33 ± 0.91* 23 28.50 ± 1.44* 21

7 36.0 ± 1.6 27.33 ± 1.55* 24 25.50 ± 1.32* 29

9 29.6 ± 1.4 22.89 ± 1.34* 23 23.71 ± 1.46* 20

11 29.6 ± 0.86 21.78 ± 1.56* 25 22.71 ± 3.14* 18

13 31.0 ± 1.3 24.67 ± 1.56* 20 22.43 ± 2.08* 28

15 32.6 ± 0.69 22.78 ± 3.35* 33 24.14 ± 3.16 26

17 33.4 ± 1.3 22.00 ± 0.55* 32 22.30 ± 3.48* 33

19 33.3 ± 4.56 21.00 ± 4.24* 37 21.30 ± 3.16* 36

22 35.6 ± 5.45 22.37 ± 1.88* 37 21.83 ± 3.23* 39

* — различия достоверны по отношению к данным контрольной патологии, р ≤ 0.05.

Таблица 2Антиэкссудативная активность (A) геля анальбена и геля диклофенака натрия на модели

адъювантного артрита у крыс

* — различия достоверны по отношению к исходным данным, р ≤ 0.05;** — различия достоверны по отношению к данным контрольной патологии, р ≤ 0.05.

Таблица 1Влияние изучаемых препаратов на динамику показателей крови крыс с адъювантным артритом (АА)

Ãðóïïà æèâîòíûõ

Ïîêàçàòåëè

Ãðóïïà æèâîòíûõñ ÀÀ

Ãðóïïà æèâîòíûõñ ÀÀ + 2.5 % ãåëü

àíàëüáåíà

Ãðóïïà æèâîòíûõñ ÀÀ + 1 % ãåëü

äèêëîôåíàêàíàòðèÿ

èñõîäíûå äàííûå 10.98 ± 1.44 10.58 ± 1.47 10.78 ± 1.78

12 ñóò 26.50 ± 1.73 21.70 ± 2.34 22.20 ± 2.43îáùåå êîëè÷åñòâîëåéêîöòîâ × 109/ë

22 ñóò 24.04 ± 2.54* 17.25 ± 1.74*/** 16.94 ± 3.03*/**

èñõîäíûå äàííûå 4.20 ± 0.37 4.25 ± 0,93 4.20 ± 0.37

12 ñóò 12.0 ± 1.15* 6.50 ± 0.48*/** 5.33 ± 0.67**ÑÎÝ, ìì/÷

22 äåíü 8.80 ± 1.62* 3.40 ± 0.51** 3.20 ± 0.73**

èñõîäíûå äàííûå 77.52 ± 7.37 73.61 ± 6.96 73.61 ± 6.96îáùèé áåëîê, ã/ë

22 ñóò 111.32 ± 1.75* 100.15 ± 1.70*/** 90.88 ± 0.65*/**

èñõîäíûå äàííûå 1.02 ± 0.06 1.08 ± 0.06 1.0 ± 0.07ùåëî÷íàÿ ôîñôàòàçà, ìêêàò/ë

22 ñóò 4.81 ± 0.41* 2.81 ± 0.35*/** 2.24 ± 0.31*/**

80


ления в хроническую стадию (с 13 сут) инги-бирование экссудации гелем анальбена воз-растало до 37 %. Гель анальбена по противо-воспалительному эффекту не уступал дей-ствию препарата сравнения — геля диклофе-нака натрия.

В результате локального лечения 2.5 % ге-лем анальбена и препаратом сравнения на-блюдалось уменьшение и общей воспали-тельной реакции организма леченных живот-ных по сравнению с животными группыконтрольной патологии. Так, под действиемпрепаратов отмечалось уменьшение выра-женности лейкоцитоза, снижение СОЭ,уровня общего белка в крови и показателяинтенсивности воспалительного процесса –активности щелочной фосфатазы. По сравне-нию с группой контрольной патологии дина-мика изучаемых показателей под влияниемгеля анальбена и геля диклофенака натрияимела более благоприятную тенденцию(Табл. 2).

В группе животных, леченных гелеманальбена, имело место снижение экскрецииоксипролина, а, следовательно, проявлялисьлишь незначительные нарушения соедини-тельной ткани, что подтверждается гистоло-гическими исследованиями голеностопныхсуставов крыс. В отличие от геля диклофена-ка натрия, под воздействием геля анальбенана 22 сут эксперимента экскреция оксипро-лина была на уровне исходных данных(Табл. 3).

Макроскопические исследования голено-стопных суставов животных, леченных гелеманальбена, свидетельствовали об уменьше-нии отека сустава по сравнению с животны-ми группы контрольной патологии. На вскры-тии сустава – просвет чистый. Синовиальнаямембрана отечна и гиперплазирована пре-имущественно в краевых отделах, участкамигиперемирована. Суставной хрящ в основном

сохраняет блеск. Мышечная ткань в областисустава умеренно отечна.

При микроскопическом исследовании су-ставов крыс, леченных гелем анальбена, ус-тановлены следующие преимущества посравнению с группой контрольной патоло-гии: сохранение неповрежденной поверхно-сти суставного хряща; отсутствие паннуса;уменьшение разрастания грануляционнойткани; отсутствие деструкции компактногослоя кости.

Микроскопическая картина сустава жи-вотных, леченных гелем диклофенака на-трия, в целом соответствовала микроскопи-ческой картине тканей у крыс, леченных ге-лем анальбена. Однако гель анальбена оказы-вал более существенное влияние на сохране-ние хрящевой ткани.

Таким образом, 2.5 % гель анальбена на мо-дели адъювантного артрита у крыс уменьша-ет выраженность местной воспалительнойреакции - отека лап, а также снижает прояв-ление общего воспалительного процесса,уменьшая уровень лейкоцитоза, СОЭ, актив-ности щелочной фосфатазы, снижает экскре-цию оксипролина с мочой, предупреждаетразвитие паннуса и сохраняет суставнойхрящ.

Выводы

1. Эффективность 2.5 % геля анальбена намодели адъювантного артрита у крыс соот-ветствует эффекту препарата сравнения —1 % геля диклофенака натрия.

2. В отличие от геля диклофенака натриягель анальбена препятствует разрушению со-единительной ткани в суставе в процессеимунного воспаления.

ЛИТЕРАТУРА1. Безугла Н.П. Клініко-фармакологічне обгрунтуваннязастосування нового ненаркотичного анальгетикаанальбену для лікування ревматоїдного артриту та де-формуючого остеоартрозу. Автореф. дис. … к.м.н. –Київ, 2002. - 16 с.

Таблица 3Динамика экскреции оксипролина у крыс с адъювантным артритом (АА) под влиянием изучаемых

препаратов

* — различия достоверны по отношению к исходным данным, р ≤ 0.05;** — различия достоверны по отношению к данным контрольной патологии, р ≤ 0.05.

Ãðóïïà æèâîòíûõ ñ ÀÀÃðóïïà æèâîòíûõ

ñ ÀÀ + 2.5 % ãåëü àíàëüáåíàÃðóïïà æèâîòíûõ ñ ÀÀ +

1 % ãåëü äèêëîôåíàêà íàòðèÿ Ãðóïïà æèâîòíûõÑðîêèèññëåäîâàíèÿ Êîëè÷åñòâî îêñèïðîëèíà â ìî÷å, ìêã/ã ìàññû òåëà æèâîòíîãî â ñóòêè

èñõîäíûå äàííûå 0.56 ± 0.02

12 ñóò. 1.14 ± 0.15* 0.75 ± 0.02** 0.76 ± 0.05**

22 ñóò. 1.27 ± 0.07* 0.65 ± 0.07** 0.79 ± 0.06*/**

81

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-20042. Доклінічні дослідження лікарських засобів: Мето-дичні рекомендації / За ред. чл.-кор. АМН України Сте-фанова О.В. - Київ, 2001. - 528 с.3. Дьячкова А.Я. К определению оксипролина в моче //Лабораторное дело. - 1979. - № 9. - С. 532.4. Зупанець І.А., Дєдух Н.В., Безугла Н.П. Вивченнявпливу анальбену на метаболізм суглобового хряща примоделюванні порушень у суглобі // Клінічна фармація. -2001. - Т. 5, № 2. - С. 56-59.5. Зупанец И.А., Попов С.Б., Бездетко Н.В. и др. Совре-менные аспекты рационального обезболивания в меди-цинской практике: Практическое руководство / Подред. А.И. Трещинского, Л.В. Усенко, И.А. Зупанца. - К.:МОРИОН, 2000. - С. 31-34.6. Коваленко В.Н., Ангелуца П.А., Викторов А.П. Кли-ническая фармакология и фармакотерапия в ревмато-логии. – К., 1995. – 504 с.7. Колб В.Г., Камышников В.С. Справочник по клини-ческой химии. - Минск: Беларусь, 1982. - 366 с.8. Саратиков А.С., Венгеровский А.И., Прищеп Т.П.Адъювантная болезнь. –1983. - Томск: Изд-во Томско-го ун-та. – 103 с.9. Шуба Н.М. Ранній ревматоїдний артрит: клініко-па-тофізіологічні аспекти // Мистецтво лікування. -2004. – № 3. – С. 12-15.10. Шуба Н.М. Оценка локальной терапии фастум гелему больных ревматоидным артритом и остеопорозом //Фармакологічний вісник. – 1999. - № 2. - С. 43 – 44.11. Яковлєва Л.В., Нєвзоров В.П., Карпенко О.Я., Шапо-вал О.М. Вивчення впливу нового протизапального за-собу анальбену на протікання хронічного аутоімунно-го запалення // Вісник фармації. - 1995. - № 3-4. - С. 81-85.12. Ozava M., Okaue M. // J. Nihon Univ. Sch. Dent. -1996. - Vol. 38, No. 1. - P. 1-10.13. Simon L.S. Management of osteoarthritis: perspectiveson the American College of Rheumatology guidelines //New standards in Artritis Care. - 1996. - Vol. 5, No. 2. -P. 2-5.

РезюмеЯковлєва Л.В., Ель Ділаті Камаль Туфік

Вивчення ефективності гелю анальбену в умовах

експериментального ад’ювантного артриту у щурів

Вивчено ефективність 2.5 % гелю анальбену на мо-делі ад’ювантного артриту у щурів у порівнянні з 1 % ге-лем диклофенаку натрію. Ефективність 2.5 % гелюанальбену на моделі ад’ювантного артриту у щуріввідповідає ефекту препарату порівняння — 1 % гелюдиклофенаку натрію. На відміну від 1 % гелю диклофе-наку натрію, гель анальбену в більшій мірі запобігає де-струкції суглобового хряща.

SummaryYakovleva L.V., El Dilati Kamal Toufik

Study of Analben gel effectiveness on experimental

adjuvant–introduced arthritis in rats

The effectiveness of Analben, 2.5 % gel, at adjuvant–introduced arthritis model in rats compared with diclofenacsodium, 1 % gel, was studied. The effectiveness of Analben,2.5 % gel on adjuvant–introduced arthritis model in ratsconformes to the effect of reference preparation. Analbengel prevents the decay of articular cartilage to a greaterextend than diclofenac sodium gel.

Яковлева Лариса ВасильевнаЯковлева Лариса ВасильевнаЯковлева Лариса ВасильевнаЯковлева Лариса ВасильевнаЯковлева Лариса Васильевна. ЗакончилаХарьковский фармацевтический институт (1973).Д.фарм.н. (1991). Профессор (1992). Зав. Цент-ральной научно-исследовательской лабораторией(ЦНИЛ) НФаУ.

Эль Дилати Камаль Туфик. Эль Дилати Камаль Туфик. Эль Дилати Камаль Туфик. Эль Дилати Камаль Туфик. Эль Дилати Камаль Туфик. Закончил Харь-ковскую фармацевтическую академию (2001). Ас-пирант ЦНИЛ НФаУ.

ÓÄÊ: 615.076.9:615.2.212.3:615.276

Ãåðàñèìîâà Î.Î., ßêîâëºâà Ë.Â., Øàïîâàë Î.Ì.Íàö³îíàëüíèé ôàðìàöåâòè÷íèé óí³âåðñèòåò

Ïîð³âíÿëüíèé àíàë³ç àíòèåêñóäàòèâíî¿ ä³¿ íîâîãî ïðåïàðàòó àíàëüáåíóòà íåñòåðî¿äíèõ ïðîòèçàïàëüíèõ çàñîá³â ð³çíèõ ïîêîë³íü

В результаті проведених досліджень встановлено, що в механізмі протизапальної дії анальбену-ретард та селектив-ного інгібітора ЦОГ-2 мелоксикаму має місце інгібування медіаторів запалення: гістаміну, серотоніну, кінінів та про-стагландинів (ПГ). Вольтарен-рапід – неселективний, немісулід – селективний інгібітор ЦОГ-2 сильніше за новийпрепарат пригнічують біосинтез ПГ, що може бути причиною розвитку побічних ефектів. Специфічний інгібіторЦОГ-2, на відміну від анальбену-ретард й інших випробовуваних препаратів, має менш тривалий антиексудативнийефект та не чинить впливу на вивільнення гістаміну та серотоніну.

Зважаючи на світову тенденцію до зрос-тання тривалості життя, кількість людей, якіпідлягатимуть НПЗЗ-терапії, буде збільшува-тися в міру старіння популяції та природногозбільшення розповсюдженості ураженьопорно-рухового апарату [16, 17]. На сьогоднііснує значний арсенал сучасних нестероїднихпротизапальних засобів (НПЗЗ) різних по-колінь: неселективних та селективних

інгібіторів ЦОГ-2, який нараховує близько 20оригінальних препаратів. Але найновiші пре-парати – інгібітори ЦОГ-2, хоч і є на фарма-цевтичному ринку України, через високу цінунедоступні для широкого кола споживачів.Тому в українській медичній практиці спос-терігається широке використання традицій-них НПЗЗ та обмежене – найновіших, що незабезпечує ефективного та безпечного ліку-

82


вання. Останнє обумовлено розвитком спе-цифічних, пов’язаних із механізмом дії, по-бічних ефектів як при застосуванні тради-ційних, так і при застосуванні селективнихінгібіторів ЦОГ-2. Установлено, що на фонілікування ЦОГ-2 інгібіторами, як і при засто-суванні неселективних інгібіторів ЦОГ-1/ЦОГ-2, спостерігаються периферичні набря-ки, пов’язані із пригніченням клубочковоїфільтрації та затримкою солей, симптомидиспепсії, гепатотоксичної дії та навіть тяж-ких гастроентерологічних побічних ефектів.Розвиток небажаних ефектів НПЗЗ часто маєдозозалежний характер. Для більшості препа-ратів цього класу простежується тенденція допідсилення протизапальних властивостей уразі призначення більш високих доз та добільш виразних анальгетичних – при при-значенні низьких доз. У цілому НПЗЗ пере-достаннього та останнього поколінь виявля-ють близьку ефективність, але суттєвовідрізняються за токсичністю. Зараз основнаувага приділяється створенню та використан-ню не стільки більш ефективних, скільки не-шкідливих НПЗЗ.

Вченими НФаУ створений та фармаколо-гічно вивчений новий вітчизняний високо-ефективний НПЗЗ – анальбен , який є по-хідним бензойної кислоти. В експерименталь-них дослідженнях установлено, що анальбенвиявляє виражені анальгетичні, протиза-пальні, жарознижувальні та гепатопротек-торні властивості, малотоксичний, не викли-кає алергізуючої та ульцерогенної дії [4, 6, 8,9, 10]. За результатами двох фаз клінічнихвипробувань таблетки «Анальбен», 0.001 г єефективним та безпечним засобом для ком-плексного лікування дистрофічних захворю-вань опорно-рухового апарату, реактивногополіартриту, ревматизму, обмінного артриту,коксоартрозу, хвороби Бєхтєрєва, спонділо-артрозу поперекового відділу хребта, больо-вого синдрому, радикуліту та остеохондрозу[7]. Але анальбен швидко виводиться з орга-нізму: період його напівелімінації складає 1.45год, відповідно до чого препарат призначав-ся по 4-5 прийомів на добу [5, 7].

Зважаючи на вищевикладене, вченимиНФаУ була створена пролонгована лікарськаформа анальбен-ретард, яка дозволить знизи-ти кратність прийому нового препарату до 1-2 разів на добу.

Метою даної роботи є вивчення впливу наперебіг ексудативного запалення нового пре-парату «Анальбен-ретард» у порівнянні із за-собами пролонгованої дії вольтареном-рапід -

неселективним інгібітором ЦОГ-1/ЦОГ-2 та«золотим стандартом» НПЗЗ за ефективні-стю та нешкідливістю [12, 16, 19, 20], мело-ксикамом та німесулідом - селективнимиінгібіторами ЦОГ-2 [14, 17, 18] і целебрек-сом – специфічним інгібітором ЦОГ-2 [13,15]. Останні три препарати є найсучасніши-ми із групи НПЗЗ на світовому фармацевтич-ному ринку.


Для досягнення поставленої мети антиек-судативну дію досліджуваних препаратів ви-вчали на моделі карагенінового набряку сто-пи у щурів [1].

Досліди проводили на 5 групах білих щурівмасою 180-200 г, по 6 тварин у групі. Набряквикликали субплантарним уведенням 0.1 мл1 % розчину карагеніну [1]. Досліджувані пре-парати вводили інтрагастрально за одну годи-ну до ін’єкції карагеніну в дозах: анальбен-ретард – 5.0 мг/кг, вольтарен – 8.0 мг/кг,мелоксикам – 1 мг/кг, німесулід – 12 мг/кг,целебрекс – 12 мг/кг. Доза анальбену-ретард5.0 мг/кг обрана емпірично (умовнотерапев-тична доза субстанції анальбену складає1.0 мг/кг, враховуючи повільне вивільненняанальбену з лікарської форми, його доза булазбільшена для досягнення ефекту) [4]. Воль-тарен вивчали у дозі 8.0 мг/кг=ЕД50 на ціймоделі [1, 4]. Дози інших препаратів порівнян-ня були перераховані з добової дози для лю-дини на дозу для тварин із використаннямконстанти біологічної активності за Ю.П. Ри-боловлєвим [3]. Контрольні тварини одержу-вали еквівалентну кількість розчинника. Пророзвиток набряку судили за збільшеннямоб’єму стопи, який вимірювали в динаміці че-рез 1 год, 2 год, 3 год, 4 год, 5 год, 6 год і 24 годза допомогою механічного онкометра заА.С. Захаревським [1]. Антиексудативну ак-тивність речовин визначали за здатністюзменшувати набряки у дослідних тварин упорівнянні з контрольними, у відсотках. Ре-зультати дослідження представлені у Таблиціта на Рисунку.

Усіх дослідних тварини утримували у стан-дартних санітарних умовах. Під час експери-менту тварини знаходилися у віварії при тем-пературі (19-24) °С, вологості не більше 50 %,природному світловому режимі «день-ніч», упластикових клітках, на збалансованому хар-човому раціоні. Дослідження проведені іздотриманням правил гуманного поводженняіз тваринами згідно з Директивою Ради ЄС ізпитань захисту тварин, які використовують-

83


ся для експериментальних та інших науковихцілей [2].


За результатами проведеного дослідженнявстановлено, що анальбен-ретард у дозі5 мг/кг рівномірно пригнічує ексудативне за-палення протягом 24 годин. Динаміка антиек-судативної активності селективного інгібіто-ра ЦОГ-2 мелоксикаму відповідає такій дляанальбену-ретард (Табл., Рис.). Неселектив-ний інгібітор ЦОГ-1/ЦОГ-2 вольтарен досто-вірно сильніше за анальбен-ретард інгібуєрозвиток ексудативної запальної реакції від2 до 4 години, а селективний інгібітор ЦОГ-2німесулід – від 3 до 5 години (Табл., Рис.).Антиексудативна дія специфічного інгібітора

ЦОГ-2 починається від 2 години і триває до6 години (Табл., Рис.).

Враховуючи дані літератури про те, що упатогенезі розвитку карагенінового набрякустопи у щурів у перші 30-90 хв беруть участьгістамін та серотонін, в інтервалі між 1.5-2.5 годинами – кініни, а між 2.5-5 година-ми – ПГ [11], а також динаміку антиексуда-тивної активності випробовуваних препа-ратів (Табл., Рис.), можна вважати, що в ме-ханізмі протизапальної дії анальбену-ретардта селективного інгібітора ЦОГ-2 мелоксика-му має місце інгібування всіх зазначених біо-логічно активних речовин. Неселективнийінгібітор ЦОГ-1/ЦОГ-2 вольтарен та селек-тивний інгібітор ЦОГ-2 німесулід сильніше зановий препарат пригнічують біосинтез ПГ,

Àíòèåêñóäàòèâíà ä³ÿ, %Ïðåïàðàò, äîçà

1 ãîä 2 ãîä 3 ãîä 4 ãîä 5 ãîä 6 ãîä 24 ãîä

àíàëüáåí-ðåòàðä,

5 ìã/êã48.55 ± 6.32 45.14 ± 5.09 38.79 ± 4.61 36.01 ± 2.61 39.28 ± 5.68 38.05 ± 5.57 37.65 ± 4.02

âîëüòàðåí,

8 ìã/êã54.82 ± 6.92 65.97 ± 4.86* 61.21 ± 6.90* 58.86 ± 9.57* 52.98 ± 10.36 53.01 ± 11.27 33.71 ± 11.58

ìåëîêñèêàì,

1 ìã/êã53.21 ± 9.81 52.78 ± 9.72 49.18 ± 7.79 45.62 ± 9.52 40.48 ± 9.61 44.62 ± 10.08 37.87 ± 10.87

í³ìåñóë³ä,

12 ìã/êã35.47 ± 5.40 54.17 ± 3.23 56.83 ± 2.60* 52.58 ± 6.35* 59.52 ± 7.00* 50.96 ± 6.05 26.40 ± 10.57

öåëåáðåêñ,

12 ìã/êã17.69 ± 6.51* 52.78 ± 3.67 53.42 ± 9.43 53.15 ± 8.61 42.86 ± 8.74 36.23 ± 9.44 12.11 ± 7.01*

ТаблицяАнтиексудативна дія досліджуваних препаратів

Примітка.* — відхилення достовірно по відношенню до групи тварин, яким вводили анальбен-ретард; р ≤ 0.05.

Рисунок

Динаміка антиексудативної дії досліджуваних препаратів

10

20

30

40

50

60

70

1ãîä 2 ãîä 3 ãîä 4 ãîä 5 ãîä 6 ãîä 24 ãîäÄèíàì³êà â ÷àñ³

% à

êòè

âí

îñò

³

àíàëüáåí-ðåòàðä, 5 ìã/êã âîëüòàðåí, 8 ìã/êã ìåëîêñèêàì, 1 ìã/êã

í³ìåñóë³ä, 12 ìã/êã öåëåáðåêñ, 12 ìã/êã

84


що може бути причиною розвитку побічнихефектів. А специфічний інгібітор ЦОГ-2 це-лебрекс, на відміну від анальбену-ретард таінших досліджуваних препаратів, не впливаєна вивільнення гістаміну та серотоніну і ви-являє менш тривалу антиексудативну дію.

Висновки

1. Установлено, що пролонгована форманового вітчизняного НПЗЗ анальбену-ретарду формі таблеток у дозі 5 мг/кг рівномірнопригнічує ексудативне запалення протягом24 годин.

2. Зважаючи на динаміку антиексудатив-ної дії та літературні дані, можна зробити вис-новок, що одним із механізмів антиексуда-тивної дії анальбену-ретард та селективногоінгібітора ЦОГ-2 мелоксикаму є інгібуваннямедіаторів запалення гістаміну, серотоніну,кінінів та простагландинів.

3. На відміну від анальбену-ретард, спе-цифічний інгібітор ЦОГ-2 целебрекс не здат-ний інгібувати гістамін та серотонін і виявляєменш тривалу за інші досліджувані препара-ти антиексудативну дію.

4. Препарати порівняння неселективнийінгібітор ЦОГ-1/ЦОГ-2 вольтарен та селек-тивний інгібітор ЦОГ-2 німесулід інгібуютьвивільнення простагландинів сильніше заанальбен-ретард, що обумовлює побічну діюпрепаратів порівняння.

ЛІТЕРАТУРА1. Дроговоз С.М., Зупанець І.А., Мохорт М.А., Яковлє-ва Л.В., Клєбанов Б.М. Експериментальне (доклінічне)вивчення фармакологічних речовин, які пропонуютьсяяк нестероїдні протизапальні засоби // Доклінічні до-слідження лікарських засобів (методичні рекомен-дації) / За редакцією чл.-кор. АМН України О.В. Стефа-нова. – К.: Авіцена, 2002. – С. 292-306.2. Надлежащая производственная практика лекарствен-ных средств / Под. ред. Н.А. Ляпунова, В.А. Загория,В.П. Георгиевского, Е.П. Безуглой. - К.:МОРИОН,1999. - С. 508-545.3. Рыболовлев Ю.Р., Рыболовлев Р.С. Дозирование ве-ществ для млекопитающих по константам биологичес-кой активности // Доклады АН СССР.- 1979.- Т. 247.-№ 6.- С. 1513-1516.4. Шаповал О.М. Порівняльний аналіз фармакодинамі-ки анальбену, анальгіну та вольтарену // Лекарства –человеку. – Харьков, 2001. – С. 521-525.5. Яковлєва Л.В., Шаповал О.М., Серікова І.І., Безуг-ла Н.П. Вивчення фармакокінетики нового ненаркотич-ного анальгетика анальбену // Клінічна фармація. -1999. – Т. 3, № 1. – С. 96-98.6. Яковлева Л.В., Шаповал О.Н. Изучение влияния но-вого ненаркотического анальгетика анальбена на цент-ральные механизмы боли // Фармакологічний віст-ник. – 1999. – № 2. – С. 39-42.7. Яковлєва Л.В., Шаповал О.М. Аналіз результатівклінічних випробувань лікарських препаратів, розроб-лених в НФАУ // Клінічна фармація. – 2000. – Т. 4,№ 2. – С. 41-45.

8. Яковлева Л.В., Шаповал О.Н., Зупанец И.А. Механиз-мы фармакологического действия ненаркотическиханальгетиков и нестероидных противовоспалительныхпрепаратов // Современные аспекты рациональногообезболивания в медицинской практике: Практическоеруководство / Под ред. А.И. Трещинского, Л.В. Усенко,И.А. Зупанца. – К.: МОРИОН, 2000. – С. 6-12.9. Яковлєва Л.В., Шаповал О.М., Левітін Е.Я. Вивченнявпливу нового препарату анальбену на функціональнийстан шлунково-кишкового тракту // Лекарства – чело-веку – Харьков, 2001. – С. 590-593.10. Яковлєва Л.В., Шаповал О.М., Левітін Є.Я. Вивчен-ня гепатотропної дії нового препарату «Анальбен» //Фізіологічно активні речовини. – 2001. - № 1. - С. 52-55.11. A new writhing model of factor XII activator-inducedpain for assessment of non-steroidal anti-inflammatoryagents. I. Kaolin-induced writhing mice / Toshio Fujiyoshi,Miho Kuwashima etc. // J. Pharmacobio. - 1989. – No. 12. -P. 132-136.12. Catella-Lawson F. Effects of specific inhibition ofcyclooxygenase-2 on sodium balance, hemodynamics, andvasoactive eicosanoids. // Journal of Pharmacology andExperimental Therapeutics. – 1999. – No. 289. – P. 735-741.13. Emery P. Celecoxib versus diclofenac in long-termmanagement of rheumatoid arthritis: randomised double-blind comparison // Lancet. – 1999. – No. 354. – P. 2106-2111.14. Distel M., Mueller C., Bluhmki E, Fries J. Safety ofmeloxicam: a global analysis of clinical trials // Br. J. Rheu-matol. – 1996. – No. 35, Suppl. 1. - P. 68-77.15. Gannedahloand E-L, Yue Q-Y. Coxibs and the reportingof adverse reactions // Medical Products Agency. - 2000. –No. 11. - P. 74-77.16. Kolaczkowska E. Cyclooxygenases I. Role in inflam-mation // Cell Biology. - 2002. – No. 29. – P. 533-554.17. Kolaczkowska E. Cyclooxygenases II. Nonsteroidalanti-inflammatory drugs as their inhibitor // Cell Biology. -2002. – No. 29. – P. 555-578.18. Lichtenstein DR, Wolfe MM. COX-2-selectiveNSAIDs // Journal of the American Medical Association. -2000. – No. 284. – P. 1297-1299.19. Vane J.R, Bakhle Y.S, Botting R.M. Cyclooxygenases 1and 2 // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. – 1998. –No. 38. – P. 97-120.20. Warner TD. et al. Nonsteroid drug selectivities forcyclooxygenase-1 rather than cyclooxygenase-2 areassociated with human gastrointestinal toxicity: a full invitro analysis // Proceedings of the National Academy ofSciences. – 1999. – No. 96. – P. 7563-7568.

РезюмеГерасимова О.А., Яковлева Л.В., Шаповал О.Н.

Сравнительный анализ антиэкссудативного

действия нового препарата анальбена и

нестероидных противовоспалительных средств

различных поколений

В результате проведенных исследований установле-но, что в механизме противовоспалительного действияанальбен-ретарда и селективного ингибитора ЦОГ-2мелоксикама имеет место ингибирование медиатороввоспаления гистамина, серотонина, кининов и простаг-ландинов (ПГ). Вольтарен-рапид – неселективный, инимесулид – селективный ингибитор ЦОГ-2 сильнеенового препарата угнетают биосинтез ПГ, что можетбыть причиной развития побочных эффектов. Специ-фический ингибитор ЦОГ-2 целебрекс, в отличие отанальбен-ретарда и других исследуемых препаратов,имеет менее продолжительный антиэкссудативный эф-

85

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-2004фект и не оказывает влияния на высвобождение гиста-мина и серотонина.

SummaryGerasimova O.A., Yakovleva L.V., Shapoval O.N.

Comparative analysis of antiexudative effect of Analben

new preparation and NSAIDs of different generations

As a result of conducted studies it was established thatin the mechanism of antiinflammatory action of Analben-retard and Meloxicam COX-2-selective inhibitor the inhi-bition of inflammation mediators histamine, serotonin, ki-nins and prostaglandins (PG) takes place. Voltaren-rapid,a non-selective - and Nimesulid, a COX-2-selective inhib-itor, oppress PG biosynthesis to a greater extent than thenew preparation, that could be a reason for the side effects

development. Celebrex COX-2-selective inhibitor asagainst Analben-retard and another preparations underexamination, has less prolonged antiexudative effect andhas no impact on histamine and serotonin release.

Яковлєва Лариса ВасилівнаЯковлєва Лариса ВасилівнаЯковлєва Лариса ВасилівнаЯковлєва Лариса ВасилівнаЯковлєва Лариса Василівна. Закінчила Харків-ський фармацевтичний інститут (1978). Д.фарм.н.Професор. Завідувачка Центральної науково-дос-лідної лабораторії (ЦНДЛ) НФаУ.

Герасимова Ольга ОлександрівнаГерасимова Ольга ОлександрівнаГерасимова Ольга ОлександрівнаГерасимова Ольга ОлександрівнаГерасимова Ольга Олександрівна. К.фарм.н.Наук. співр. ЦНДЛ НФаУ.

Шаповал Ольга Миколаївна.Шаповал Ольга Миколаївна.Шаповал Ольга Миколаївна.Шаповал Ольга Миколаївна.Шаповал Ольга Миколаївна. К.б.н. Ст. наук.співр. ЦНДЛ НФаУ.

Ì³æíàðîäí³ êîíôåðåíö³¿, ñåì³íàðè, âèñòàâêè

Óñïåõè õèìèè ïðèðîäíûõ ôåíîëüíûõ ñîåäèíåíèé

С 1966 года по 2004 год в бывшем Совет-ском Союзе проведено шесть симпозиумовпо фенольным соединениям (в 1966 году – вМоскве, в 1972 году — в Алма-Ате, в 1976 го-ду — в Тбилиси, в 1982 году — в Ташкенте, в1987 году - в Таллинне, в 2004 году — в Моск-ве). На каждом из симпозиумов подводилисьитоги исследований за прошедшие 5-7 лет, впоследнем случае — за 17 лет, и намечалисьперспективы на будущее.

Одним из самых содержательных стал Vсимпозиум.

На V Всесоюзном симпозиуме по феноль-ным соединениям (г. Таллинн, 1987 год) док-лады и тезисы были представлены в четырехсекциях.

Секция (А) посвящена биохимии и физио-логии, на ней было представлено 82 доклада.Наиболее важные сообщения были сделаныМ.Н. Запрометовым («Метаболизм феноль-ных соединений – достижения и перспекти-вы» [20а]), У.В. Маргна («Фондовая структу-ра фенилаланина в качестве предшественни-ка фенольных соединений и ее исследованиес помощью специфических ингибиторов фе-нольного биосинтеза» [38а]), А.Г. Шалашвилии С.В. Дурмишидзе («Расщепление флавоно-идных соединений в растениях» [59а]) и др.

М.Н. Запрометов в своем докладе отметил,что на долю фенольных соединений, образу-ющихся в процессе биосинтеза, приходится20-30 % биомассы земли. Из этого количестваоколо 2 % фиксируемого растениями углеро-да включается во флавоноиды, что в масшта-бах земного шара составляет около одногомиллиарда тонн [20а].

Секция (Б) «Химия» была представлена176 участниками, на ней прозвучало 75 док-ладов.

Секции В и Г были посвящены медицин-ским и прикладным проблемам и представле-ны 21 докладом. От ВНИИХТЛС (нынеГП ГНЦЛС) с сообщениями выступили Ва-сильченко Е.А. «Фармакотерапевтические ас-пекты применения растительных фенольныхсоединений при заболеваниях почек», Гризо-дуб А.И. «Стандартизация полифенольныхпрепаратов при отсутствии стандартов иссле-дуемых соединений» и др.

Анализ материалов симпозиума показыва-ет, что исследования в области химии фе-нольных соединений проводились более чемв 10 республиках Советского Союза. Россий-скими учеными было представлено 37, укра-инскими — 23, грузинскими — 9, узбекски-ми - 8 докладов. Работа семинара показала,что основные центры исследований сосредо-точены в городах Москва, Ленинград, Ир-кутск, Харьков, Тбилиси, Ташкент и др.

Наряду с докладами, посвященными от-дельным частным вопросам (выделение иидентификация флавоноидов), значительноеколичество докладов было обобщающими,методологическими. Например, Бандюко-ва В.А. и Бандюков А.Б в своем докладе « Из-влечение структурной информации из масс-и УФ-спектроскопии агликонов флавоноидовпри помощи АВМ» предложили три програм-мы для установления структуры природныхсоединений. Сегодня это направление полу-чило значительно большее развитие, включаяИК- и ЯМР-спектроскопию и другие инстру-ментальные методы.

86


В докладе Запесочной Г.Г. «Структурныеисследования флавоноидов» [16] обобщенопыт исследований автора с сотрудниками илитературных данных по установлениюструктуры флавоноидных соединений с ис-пользованием УФ-, ИК-, ПМР- и ЯМР (13С),масс-спектрометрии, оптических методовполяриметрии, спектрополяриметрии, дис-персии оптического вращения и круговогодихроизма, а также тонкослойной и высоко-эффективной жидкостной хроматографии.Замечание о том, что поляриметрия с исполь-зованием удельного оптического вращения(метод Клайна) утрачивает свое значение, некорректно. Автор далее отмечает, что величи-на оптического вращения зависит от местагликозилирования и других факторов, и придостаточном материале это позволит выявитьопределенные закономерности в структурахфлавоноидных гликозидов.

В докладе отражен определенный этап иуровень методических приемов с использова-нием химических, физико-химических и ин-струментальных методов, которые в комплек-се дополняют и уточняют информацию оструктуре природных соединений.

Важно отметить систему в работах автораи стремление выявить особенности в струк-турах флавоноидов и их гликозидов.

В работе [15] и в обзоре [14] уделено вни-мание структуре углеводных заместителей.По данным ПМР- и ЯМР-спектров флавоно-идных О-арабинозидов, ксилозидов и рамно-зидов и теоретическим расчетам выявленыпредпочтительные циклические формы (фу-ранозы или пиранозы), а также ориентациягликозидной связи (α- или β-).

Если первая часть работы относится к изу-чению структуры моногликозидов, вторая итретья посвящены определению строениябиозидов, а также строению природныхацильных производных и определению поло-жения ацильной группы в углеводной части.

Это очень важная работа, которая моглабыть дополнена и сравнена с аналогичнымиисследованиями, проведенными И.Ф. Мака-ревичем [9] с углеводными заместителями всердечных гликозидах.

В работе по структурному анализу при-родных флавоноидных гликозидов и ихацильных производных [14] отмечается, чтомногие годы (начиная с 1965 года) общепри-нятым было установление структуры угле-водного заместителя и конфигурации глико-зидной связи по ИК-спектрам и величине мо-лекулярного оптического вращения флавоно-

идных гликозидов. Однако использованиетолько такого подхода приводило к суще-ственному искажению представлений о стро-ении тех или иных соединений [33, 34, 38].

Можно возразить авторам, что только та-кой подход использовать недостаточно, темболее что в последние годы появились новыеинструментальные методы.

Но сами эти методы не всегда дают одно-значный ответ во всем многообразии струк-тур природных гликозидов. Утверждение, чтоглюкоза в гликозидах должна быть только впиранозной форме и с β-конфигурацией гли-козидной связи - не совсем точное. В этойчасти можно сделать ссылку на монографиюЕвропейской Фармакопеи на рутозид тригид-рат [68, 69]. В рутине (3-β-D-глюкопиранозил-6-α-L-рамнопиранозид кверцетина) в каче-стве примеси приводится изокверцитрин (3-О-моноглюкозид кверцетина) Этот моноглю-козид описан как β-глюкофуранозид (и, веро-ятно, является артефактом в гидролизе соот-ветствующего биозида).

Своеобразные кетогексофуранозиды апи-генина выделены из листьев боярышника пе-ристонадрезанного (Crataegus pinnatifida Bgevar. major N.E.Br.)

Пиннатифинозиды А, В, D охарактеризо-ваны как 7-О-α-D-фруктофуранозиды, а пин-натифинозид С — как 7-O-β-D-фруктофура-нозид. Дополнительно фруктоза связанаС-связью с С-8 углеродом апигенина и С-1'углеводного остатка, образуя син- (гликози-ды А, В и D) и антиизомеры (гликозид С) [35,92].

Еще одним направлением исследованийЗапесочной Г.Г. по установлению структурыфлавоноидов является использованиеУФ-спектроскопии с применением диагнос-тических реактивов. В данном случае удалосьна значительном числе образцов производ-ных гербацетина выявить влияние 5,8- и 3,8-дигидроксильных группировок на нестабиль-ность таких соединений в щелочных реакти-вах [17, 77], что ранее отмечалось для 3,3',4'-три- или 3,3',4',5'-тетрагидроксипроизводныхкверцетина и мирицетина. При этом отмеча-ется, что в растениях флавонолы с 5,7,8-три-гидроксизамещением встречаются главнымобразом в виде 7- или 8-гликозидов, а 3-гли-козиды находят редко. Аналогичное явлениемы наблюдали с производными кверцетаге-тина (6-гидроксикверцетина), распростра-ненными в растениях семейства сложноцвет-ные [5].

87


Необходимо отметить и обстоятельное ис-следование Н.А. Тюкавкиной «Использова-ние ВЭЖХ в области фенольных соедине-ний» [53]. Выявлены определенные законо-мерности связи хроматографических пара-метров со структурными фрагментами фе-нольных соединений. Эти закономерностиположены в основу определения набора при-знаков объектов при использовании методаавтоматической классификации в структур-ном анализе.

С использованием современных методовисследований к настоящему времени выделе-ны и установлена химическая структура бо-лее 5 тысяч фенольных соединений.

Предприняты попытки классификацииэтих веществ и прогноза появления новых.Согласно гипотезе о путях биосинтеза [32-34]только среди флавоноидов можно выделитьтри основные подгруппы дифенилпропанои-дов (собственно флавоноиды, изофлавонои-ды и неофлавоноиды), а также четыре под-группы, производные от основных (секофла-воноиды, бифлавоноиды, олигофлавоноиды иполифлавоноиды или флаволаны).

В каждой подгруппе выделены ряды. Впервой подгруппе - ряды халканоидов, фла-ваноидов и аураноидов; во второй – изохал-каноидов, изофлаваноидов, птерокарпанои-дов, кумаринохромонов, ротеноидов, гомои-зофлаваноидов; в третьей – неохалканоидов,неофлаваноидов, бразилиноидов и др. Рядыподразделены на классы в зависимости отстепени окисления. Речь идет об около 250классах, представители которых либо выде-лены и охарактеризованы, либо высказанопредположение об их возможном наличии.

Известно, что халконы являются предше-ственниками в образовании различных клас-сов флавоноидов [34, 86, 89, 91].

Мы полагаем, что все классы флавоноидовобразуются непосредственно из халконов вопределенной степени их гидратации, окис-лениия и восстановления в биохимическихреакциях, катализируемых специфическимиферментными системами.

Гидратация может проходить по двойнойсвязи пропанового фрагмента с присоедине-нием гидроксила к β- или α-углеродному ато-му. Последующая дегидратация приводит кобразованию циклических производных: пи-рановых – при взаимодействии β-гидрокси-с о-гидроксигруппой А-кольца или фурано-вых – при аналогичной реакции с α-гид-роксигруппой пропанового фрагмента.

Следующим этапом может быть окисле-ние по β- или α-углеродному атому халкона.Окисленный халкон в результате кетоэноль-ной таутомерии образует β- или α-кетопроиз-водное. Гидратация кетохалконов приводит кобразованию кеталей. При дегидратации ке-талей образуются пирановые или фурановыеполукетали. Вторичная дегидратация являет-ся этапом в образовании циклических произ-водных с двойной связью в пирановых илиэкзоциклической двойной связи в фурано-вых гетероциклах.

Для 1,3-дифенилпропаноидов (собственнофлавоноидов) возможны две ступени окисле-ния, а для 1,2-дифенилпропаноидов(изофлаво-ноидов) и 1,1-дифенилпропаноидов (неофлаво-ноидов) – три. Это объясняется тем, что в пер-вой подгруппе на первой ступени образуютсягидрокси-, а на второй – кетопроизводные; вовторой и третьей подгруппах — по β-углеродуреализуется и третья ступень окислениия с об-разованием карбоновых кислот.

Рассматриваемые реакции являются об-щими для флавоноидов и проходят в опреде-ленной последовательности для каждогокласса. Одни из них образуются только в ре-зультате гидратации и дегидратации (халко-ны – флаваноны), другие – после окис-лительных реакций с последующими гидрата-ционно-дегидратационными превращения-ми.

Наряду с окислительными процессами вобразовании классов флавоноидов могут уча-ствовать и восстановительные реакции. Мыполагаем, что и эти реакции сначала прохо-дят на стадии халконов. В образовании новыхклассов из восстановленных халконов могутпринимать участие только производные с со-хранившейся α,β -двойной связью в пропано-вом фрагменте.

Изофлавоноиды образуются из исходногохалкона или продуктов его частичного вос-становления на стадии гидратов при мигра-ции В-фенильного радикала от С-3 к С-2 про-панового фрагмента. Дальнейшие преобразо-вания проходят так же, как и для классов 1,3-дифенилпропаноидов.

Неофлавоноиды синтезируются в резуль-тате двойной ступенчатой миграции В-коль-ца (от С-3, к С-2 и далее к С-1) на стадии гид-рата халкона или продуктов его частичноговосстановления.

В изофлавоноидах и неофлавоноидах кар-боновые кислоты, образовавшиеся на тре-тьей ступени окисления, могут превращать-

88


ся в циклические лактоны кумариновоготипа.

Предполагаемые биогенетические путипревращений в группе (семействе) флавоно-идов приведены на Схеме.

Как следует из Схемы, превращения про-ходят через α- или β-гидроксихалконы, 2-гид-роксифлаваноны и др.

Впервые природные α-гидроксихалконы,β-кетохалконы (дибензоилметаны), 2-гидро-ксифлаваноны были исследованы Chopin J.[66] и Willliams A.H. [93] в листьях и коре яб-лони, в надземной части Unona bawii и др.Ими было высказано предположение, чтофлавоны образуются из 2-гидроксифлавано-нов.

В последующие годы α-гидроксидигидро-халконы находили во многих растениях и онирассматриваются как промежуточные соеди-нения в биосинтезе 2-гидрокси-, 2-бензилку-маранонов, 2,3-цис- и 2,3-транс-флаваноидов[64, 65, 89].

В семенах клевера александрийского най-дены α'-халканолы в виде α,β-дигидрокси- иα,β-эпоксипроизводных [85].

В культуре ткани из корневых волосковразличных видов солодки наряду с α-гидрок-сихалконами выделяли 6а-гидроксиптерокар-паны, куместаны, 3-арилкумарины и другиеклассы флавоноидов и изофлавоноидов [63,78, 79].

В литературе появились сведения об ис-пользовании терминов для обозначения ря-дов классов флавоноидов, например, халка-ноидов, стильбеноидов и др. [70, 80], введен-ных нами в работах по классификации [32,34].

Таким образом, гипотеза о биогенетичес-ких превращениях халконов в различныеклассы флавоноидов находит все большееподтверждение в экспериментальных иссле-дованиях различных авторов [62, 64, 83, 89-91].

Продолжались работы по структурнымисследованиям халконов и флаванонов сН.А. Тюкавкиной и ее сотрудниками [3, 4, 46,46а, 47], в ходе которых определяли составсуммарных флаваноновых, халконовых пре-паратов: халкорина и ликвиритона из корнейсолодки, фламина из соцветий бессмертника,изомеризацию халконов и флаванонов с ис-пользованием ВЭЖХ, УФ-, ЯМР- спектромет-рии и методов кругового дихроизма. Приэтом экспериментально доказано существо-вание стереоизомеров халконового гликози-да изосалипурпозида (Е- и Z-изомеры). При

анализе продуктов изомеризации методомВЭЖХ в буферных растворах выявлены ипредполагаемые гидраты халконов, более по-лярные, чем исходные соединения [33, 54].

Подтверждались особенности изомериза-ции гликофлавоноидов, которых в настоящеевремя описано несколько сот соединений[35]. Эти соединения в большом разнообра-зии структур найдены в растениях семействагвоздичные [12] и др.[5].

В работах В.А. Куркина, В.И. Глызина,Г.Г. Запесочной особое внимание уделено но-вому направлению в установлении структу-ры полулигнанов среди флавоноидов, ксанто-нов и других групп лигноидов [27, 76].

Авторы попытались провести определен-ную классификацию и разделяют лигноидына четыре группы: 1. флаволигнаны (флава-но- и флаваноноллигнаны), 2. ксантонолигна-ны, 3. кумаринолигнаны и 4. неолигнаны.

Поскольку во всех четырех группах соеди-нений общим структурным элементом явля-ется остаток кониферилового спирта илидругих подобных фрагментов, для удобстваможет быть принята во внимание такая клас-сификация и номенклатура, которые четкопоказывают составные части молекулы и вы-деляют боковую цепь остатка кониферилово-го спирта.

В новых подразделениях каждая из группотличается типом присоединения остатка ко-ниферилового спирта с образованием раз-личных систем.

В соответствии с этой классификациейсреди флаволигнанов выделяются:— 1,4-диоксаны (силибин, изосилибин и др.),— бензофураны (силикристин, изосиликри-

стин и др.),— трициклические кетоны (силидианин, си-

лимонин и др.),— циклогексаноиды (неогиднокарпин),– простые эфиры (лигнозид, изолигнозид и

др.).

Правомерно дополнить классификациюпо второму фрагменту молекулы, где опреде-лены флаваноны (нарингенин, эриодиктиол),флаванонолы (таксифолин), флавоны (люте-олин, скутеллареин, изоскутеллареин, трице-тин, байкалеин, норвогонин и др.) и флавоно-лы (кверцетин, гербацетин) [ 27, 74, 75].

Среди фенилпропаноидов, и, как элемен-тов биосинтеза, флаволигнанов обнаруженобольшое разнообразие производных оксико-ричных кислот, кумаринов, оксикоричныхспиртов и фенилэтаноидов.

89

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-2004Схема

Пути биогенетических превращений в группе флаваноидов (дифенилпропаноидов)

(подгруппы — 1,3-, 1,2- и 1,1-дифенилпропаноидов)

O

O

OH OH

O

OH

OH

OH

O

OHOH

O

O

6a 5a 4a 7a

α

±HOHHOH-+

±HOH

O

O

OH HOH-+

OH

O

OH

OH

OH

O

β

OH

OH

O OH

OH

±HOH /O/

8a

12

6 5 4 11

O

O3

OH

O OH2

OH

Oβ

/O/

1

αOH

O O7

8±HOH

±HOHHOH-+

O

O

3a

CH2OHOH

O

OH

OH

OH

OH OH17

H

H

18

±HOH

/H/

HOH-+

2a 16

CHOOH

O

COOHOH

O

/O/

/O/

21 22

OH

OH

OH

OH

7a O

O

9a

OH

8a

O

OHOH-

+

10a

11OH

O

OH

O

OH

O

OH

OH

OHO

O

OH

OHO

O

OHHOH-+±HOH

HOH-+

HOH-+

7OH

O

OH

OH

O

O

OHO

O

HOH-+ HOH-+

12 13 14 15

8 9 10

CH2OHOH

OH

17CH2OH

OH

OH

O

OHCHOOH

OHCOOHOH

OH

HOH-+

/O/ /O/

18 19 20 23 24

19

/O/

90


Систематизацию этих соединений прове-ли В.А. Куркин, Г.Г. Запесочная и др. [ 28, 29,30, 31].

Близкими по происхождению можно рас-сматривать и соединения коричных кислот сфлавоноидами, которые впервые были обна-ружены среди агликонов флавоноловых гли-козидов Hymenosporum flavum [73]. Одно изпроизводных было охарактеризовано как8-α-метил-С-(р-гидроксибензил)кемпферол.Предположено, что это артефакт, образовав-шийся при взаимодействии р-гидроксико-ричной кислоты с кемпферолом в кислой сре-де гидролизата. Предположение подтвержде-но в модельном синтезе [73].

Позже подобные соединения обнаруженысреди нативных агликонов в листьях перцастручкового. Флавоноиды выделены и оха-рактеризованы как 8-α-(ацетил)-С-(3,4-дигид-роксибензил)лютеолин, 6-α—ацетил-С-(3,4-дигидроксибензил)лютеолин и 6,8-ди(α-аце-тил-С-(3,4-дигидроксибензил)лютеолин.Структура флавоноидбензильных производ-ных подтверждена встречным синтезом пометоду Джея [73]. При этом выявлено, что вболее мягких условиях конденсации не теря-ется карбоксильная группа α-замещеннойуксусной кислоты, в отличие от ранее опи-санных соединений [41, 42].

Таким образом, в листьях перца стручко-вого впервые были обнаружены нативныебензильные производнные флавонов.

Позже подобные соединения найдены и вдикой водяной лилии (Nymphaea lotus L.) [67].Один из гликозидов идентифицирован как 3'-О-(6''-р-кумароил)глюкозид мирицетина (А),два других оказались эпимерными макроцик-лическими производными (В и С). Эти соеди-нения (В и С) вероятно образовались из гли-козида А при конденсации коричного замес-тителя с мирицетином по С-8 углероду.

В природных условиях синтезирован 8-α-ацетил-С-(р-гидроксибензил)мирицетин ввиде α и β-эпимеров (Д и Е). Вещества Д и Еобразовали 3'-О-глюкопиранозиды, которыезатем внутримолекулярно ацилованы по 6-уг-леродному атому глюкозного остатка замес-тителем у С-8- дигидро-р-гидроксикоричнойкислоты, образуя макроциклические произ-водные.

Следующей группой бензильных произ-водных оказались 8-С-р-гидроксибензилапи-генин, 8-С-р-гидроксибензиллютеолин, 8-С-р-гидроксибензилдиосметин, 8-С-р-гидро-ксибензилкемпферол и 8-С-р-гидроксибен-зилкверцетин, выделенные из надземной ча-

сти тимьяна жестковолосого (Thymus hi-rtus L.) [84].

Из листьев Desmos chinensis выделен 3-С-(2,6-дигидроксибензил)2,4-дигидрокси,6-ме-токсихалкона [88].

Следовательно, тенденция образованияпродуктов конденсации флавоноидов с фе-нилпропаноидами прослеживается более чет-ко, чем среди флаволигнанов [71, 82, 88].

В анализируемый период проведена боль-шая работа по получению веществ — стан-дартов и по химической стандартизации ра-стительного сырья и лекарственных форм[19, 20].

Одновременно с химическими исследова-ниями проведены работы по созданию лекар-ственных препаратов на основе фенольныхсоединений.

Такие исследования состоят в поиске оп-тимальных источников действующих ве-ществ среди ряда видов растений и сопро-вождаются переработкой значительныхобъемов сырья, что позволяет выделить мно-гие минорные компоненты.

В частности, при разработке препаратовна основе флавоноидов из корней солодки,обследованы 12 видов этого рода [2, 33], со-зданы флаваноновый (ликвиритон) и халко-новый (халкорин) суммарные препараты, атакже получен индивидуальный гликозид –ликуразид и препарат флакарбин на его ос-нове.

Состав препаратов и качество ликуразида-стандарта изучали с ипользованием жидко-стной хроматографии [2, 3, 4, 10, 46, 46а, 47].

В последующие годы в России повторилинаши работы и создали свою технологию по-лучения ликвиритона и других препаратовсолодки [7, 18].

Для создания препарата фламина (суммахалконовых, флаваноновых и других глико-зидов) обследовано 16 видов бессмертникаотечественной флоры. Отобраны наиболееперспективные виды (б.песчаный, б.душис-тый, б.самаркандский и др.) [33, 36, 45]. Впер-вые выделен халконарингенин — агликонизогелихризина, который ранее получалитолько в виде флаванонового изомера — на-рингенина [45].

Сырье (соцветия бессмертника песчаного)перерабатывается на заводах во фламин иэкстракт. Анализ флавоноидов сырья и пре-паратов из него в последние годы проведен сиспользованием ВЭЖХ и других современ-ных методов [46а, 47].

91


Из плодов расторопши пятнистой в Укра-ине, России и в других странах созданы пре-параты на основе флаволигнанов (силибор,силимар, карсил, легалон) и стандарты дляконтроля сырья и препаратов (силибин и си-лидианин) [13, 27, 76].

Для создания препаратов на основе фла-воноидов шлемника обследовано более 100видов рода из флоры СССР [1, 11, 33, 43, 44].На основе флавоноидных глюкуронидов идругих веществ из корней шлемника бай-кальского созданы такие препараты как гра-нулы корня в капсулах «Cкутелла», жидкийэкстракт, таблетки «Cкутекс», зилинат (инъ-екционный раствор байкалината лизина вампулах), байкамин (таблетки байкалинатализина с другими аминокислотами), аспали-нат (таблетки байкалината лизина с аспарка-мом), гистинат (таблетки байкалината гисти-дина) и др. [30].

Результатом многолетних исследованийфлавоноидов древесины хвойных стал препа-рат диквертин (дигидрокверцетин или такси-фолин), который предложен как лекарствен-ное средство и биологически активная добав-ка (пищевой антиоксидант) [51, 55, 56, 57].

Работы сибирских авторов [26] по изуче-нию видов родиолы были продолжены вВИЛАР [8, 20, 28, 30] созданием фитопрепа-ратов и стандартов для контроля качества наоснове фенилпропаноидов.

Наряду с флавоноидами, флаволигнанами,фенилпропаноидами в виде гликозидов всеболее популярными вновь оказались оксико-ричные кислоты, кумарины, фурокумариныи др.

Например, розмариновая кислота и еепроизводные из растений семейства губо-цветные, бурачниковые и др., кофейная кис-лота и ее эфиры с хинной кислотой из расте-ний семейства сложноцветные являются ис-ходными веществами для создания антиокси-дантных, гепатопротекторных, противоопу-холевых препаратов [52, 81, 87].

VI симпозиум по фенольным соединениям(Москва, 2004 год) был посвящен 85-летиюпрофессора Михаила Николаевича Запроме-това — организатора и активного участникавсех предыдущих симпозиумов.

В симпозиуме участвовало 256 ученых изРоссии, Украины, Узбекистана, Грузии, Фин-ляндии, Чехии и Нидерландов.

На заседаниях было заслушано 35 докла-дов, в том числе пленарные доклады Н.А. Тю-кавкиной («Некоторые аспекты современ-ных исследований в области фенольных со-

единений» [58]), В.И. Литвиненко («Этапыразвития химии природных фенольных со-единениий» [37]), Т.А. Сокольской («Лекар-ственные средства на основе фенольных ве-ществ растений» [52а]) и др.

VII симпозиум по фенольным соединени-ям предполагается провести через 2-3 года вгороде Самара, Россия.

Таким образом, на основе работ М.Н. За-прометова [21, 22], У.В. Маргна [39, 40],А.Г. Шалашвили [60] и др. [24, 25, 48, 49, 50,61] в настоящее время созданы предпосылкидля дальнейших исследований в области хи-мии природных фенольных соединений, по-иска новых источников биологически актив-ных соединений и создания на их основе но-вых лекарственных средств.

ЛИТЕРАТУРА1. Абдуллаев Ш.В. Химия ароматических соединенийрастений семейств бобовых и губоцветных: Науч. докл.д.х.н. – Харьков, 1992. - 61 с.2. Аммосов А.С., Литвиненко В.И. Фенольные соедине-ния родов Glycyrrhiza L. и Meristotropis Fisch. Еt Mey. //Растительные ресурсы. - 1995. - Т. 31. - Вып. 3. - С. 116-145.3. Ахтанова Н.К. Исследование халкон-флаваноновыхпрепаратов солодки голой методом высокоэффектив-ной жидкостной хроматографии: Автореф. дисс. …к.фарм.н. – М., 1991. - 24 с.4. Ахтанова Н.К., Колесник Ю.А., Попова Т.П., Амо-сов О.С. Аналіз компонентів ліквіритону і халкоринуметодом високоефективної рідинної хроматографії //Фармацевтичний журнал. – 1992. - № 4. - С. 54-58.5. Бубенчикова В.Н. Фармакогностическое изучениенекоторых видов семейства астровых и перспективы ихпрактического использования: Автореф. дисс. …д.фарм.н. – Пятигорск, 1993. - 50 с.6. Бубенчикова В.Н., Литвиненко В.И., Королев В.А.Флавоноидные соединения донника лекарственного:Науч. тр. НИИ фармации. - 1998. - Т. 37. – Ч. 2. - С. 210-213.7. Бибикова Н.Е. Комплексная технология переработ-ки корня солодки: Автореф. дисс. … к.фарм.н. – Моск-ва, 1999. - 24 с.8. Быков В.А., Запесочная Г.Г., Куркин В.А. Родиола ро-зовая (Rhodiola rosea L.) – традиционные и биотехно-логические аспекты получения лекарственных средств(Обзор) // Химико-фармацевтический журнал. - 1999. -Т. 33, № 1. - С. 28-39.9. Георгиевский В.П., Макаревич И.Ф., Литвинен-ко В.И., Комисаренко Н.Ф. Новые природные и полу-синтетические биологически активные соединенияГНЦЛС. - Харьков: Основа, 1995. - 470 с.10. Георгиевский В.П., Комисаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е.Биологически активные вещества лекарственных рас-тений. - Новосибирск: Наука, 1990. - 332 с.11. Гольдберг Е.Д., Дыгай А.М., Литвиненко В.И., Попо-ва Т.П., Суслов Н.И. Шлемник байкальский: фитохимияи фармакологические свойства. – Томск: Изд-во ТГУ,1994. - 223 с.12. Дармограй В.Н. Фармакогностическое изучение не-которых видов семейства гвоздичних и перспективыиспользования их в медицинской практике: Дисс. вформе науч. докл. … д.фарм.н. – Рязань,1996. - 92 с.

92


13. Драник Л.И., Долганенко Л.Г. Флаволигнаны Silybummarianum // Тез. докл. V Всесоюзного симпозиума пофенольным соединениям: Секция химии (Б). - Тал-линн. - 1987. - С. 31.14. Запесочная Г.Г. Структурный анализ природныхфлавоноидных гликозидов и их ацилпроизводных //Состояние и перспективы исследований биологическиактивных веществ из растений и создание на их осно-ве новых лекарственных препаратов: Сб. науч. тр.ВИЛР. – Москва, 1983. - С. 53-77.15. Запесочная Г.Г. Исследование природных флавоно-идных гликозидов и их ацилпроизводных: Автореф.дисс. … д.х.н. - М., 1984. - 49 с.16. Запесочная Г.Г. Структурные исследования флаво-ноидов // Тез. докл. V Всесоюзного симпозиума по фе-нольным соединениям. Секция химии (Б). - Таллинн. -1987. - С. 32-34.17. Запесочная Г.Г., Куркин В.А. Спектральные и хими-ческие свойства производных гербацетина // Там же. -С. 35-36.18. Запесочная Г.Г., Быков В.А. Комплексная техноло-гия переработки солодки – Glycyrrhiza L. // Химия. Тех-нология. Медицина: Тр. ВИЛАР. - М., 2000. – С. 137-146.19. Запесочная Г.Г., Куркин В.А. Структурный анализприродных соединений в химической стандартизациирастительного сырья и фитопрепаратов // Там же. –С. 147-150.20. Запесочная Г.Г., Куркин В.А., Авдеева Е.В. Фенил-пропаноиды лекарственных растений: создание и стан-дартизация фитопрепаратов // Там же. – С. 150-158.20а. Запрометов М.Н. Метаболизм фенольных соедине-ний - достижения и перспективы // Тез. докл. V Всесо-юзного симпозиума по фенольным соединениям. Сек-ция биохимии и физиологии (А). – Таллинн, 1987. -С. 51-53.21. Запрометов М.Н. Фенольные соединения растенийи их биосинтез. - М.: ВИНИТИ, 1988. - Т. 27. - 188 с.22. Запрометов М.Н. Фенольные соединения: распрос-транение, метаболизм, и функции в растениях. - М.:Наука, 1993. - 272 с.23. Ковальов І.П., Литвиненко В.І. Стереохімія природ-них флавоноїдів // Фармацевтичний журнал. - 1990. -№ 3. - С. 17-20.24. Ковалев И.П. Спектроскопическое исследованиеприродных гликозидов и других соединений и созданиена их основе лекарственных препаратов: Автореф. дисс.… д.х.н. – Харьков, 1992. - 50 с.25. Комиссаренко Н.Ф. Исследование биологически ак-тивных природных кислородсодержащих гетероцикли-ческих соединений: Автореф. дисс. … д.фарм.н. – Харь-ков, 1979. - 49 с.26. Краснов Е.А. Химическое изучение и возможностииспользования в медицине ряда растений семействатолстянковых флоры СССР: Автореф. дисс. …д.фарм.н. – М, 1990. - 46 с.27. Куркин В.А., Запесочная Г.Г. Флаволигнаны и дру-гие природные лигноиды. Проблемы структурного ана-лиза (Обзор) // Химия природных cоединений. - 1987. -№ 1. - С. 11-35.28. Куркин В.А. Фенилпропаноиды некоторых лекар-ственных растений и перспективы создания препара-тов на их основе: Автореф. дисс. … д.фарм.н. - М., 1992. -50 с.29. Куркин В.А., Запесочная Г.Г., Толкалев В.О. Мас-спектры электронного удара природных фенилэтанои-дов // Химия природных соединений. - 1994. - № 4. -С. 506-509.30. Куркин В.А. Фенилпропаноиды – перспективныеприродные биологически активные соединения. - Сама-ра: СамГМУ,1996. - 80 с.

31. Куркин В.А. Фенилпропаноиды как биологическиактивные соединения и стандартные вещества расте-ний // VI cимпоз. по фенольным соединениям. - М.,2004. - С. 100.32. Литвиненко В.И. Биогенез и классификация флаво-ноидов // Тез. докл. V Всесоюзного симпозиума по фе-нольным соединениям. Секция химии (Б). - Таллинн. -1987. - С. 53-55.33 Литвиненко В.И. Химия природных флавоноидов исоздание препаратов при комплексной переработкерастительного сырья: Дисс. … д.х.н. - Харьков. - 1990. -79 с.34. Литвиненко В.И. Природные флавоноиды // Техно-логия и стандартизация лекарств: Сб. науч. тр. – Харь-ков: ООО «РИРЕГ», 1996. - С. 103-153.35. Литвиненко В.И., Попова Т.П., Аммосов А.С. Гли-кофлавоноиды // Технология и стандартизация ле-карств: Сб. науч. тр. – Харьков: ИГ «РИРЕГ», 2000. -Т. 2. - С. 81-199.36. Литвиненко В.І., Попова Н.В., Волькович О.О. Цми-ни: ботанічна характеристика, хімічний склад, застосу-вання // Фармаком. - 2001. - № 1. - С. 9-15.37. Литвиненко В.И. Этапы развития химии природныхфенольных соединениий // VI cимпоз. по фенольнымсоединениям. - М., 2004. - С. 9-10.38. Максютина Н.П., Литвиненко В.И. Робинин: Доп. АНУРСР. Секція геологія, геофізика, хімія та біологія. -1967. - № 5. - С. 443-447.38а. Маргна У.В., Вайнярв Т.Р. Фондовая структура фе-нилаланина в качестве предшественника фенольныхсоединений и ее исследование с помощью специфичес-ких ингибиторов фенольного биосинтеза // Тез. докл.V Всесоюзного симпозиума по фенольным соединени-ям. Секция биохимии и физиологии (А). - Таллинн. -1987. - С. 86-88.39. Маргна У.В. Образование флавоноидов в растени-ях: взаимосвязь с основным обменом, регуляция и био-логическое значение: Автореф. дисс. … д.б.н. - Тбили-си. - 1983. - 46 с.40. Маргна У.В. Взаимосвязь биосинтеза флавоноидовс первичным метаболизмом растений. - М.: ВИНИТИ,1990. - 175 с.41. Оккерт І.Л. Фармакогностичне дослідження рапон-тикуму сафлоровидного та отримання речовин-стан-дартів: Автореф. дисс ... к.фарм.н. – Харків, 2002. - 19 с.42. Попова Н.В. Фитохимическое изучение растенийрода перец стручковый: Автореф. дисс. … к.фарм.н. –Харьков, 1985. - 20 с.43. Попова Т.П. Химическое и хемосистематическоеизучение видов шлемника: Автореф. дисс. … к.фарм.н. -Харьков, 1984. - 20 с.44. Попова Т.П., Воловик В.Г., Литвиненко В.И. Флаво-ноиды шлемника байкальського // Тез. докл. V Всесо-юзного симпозиума по фенольным соединениям. Сек-ция химии (Б). - Таллинн. - 1987. - С. 73-74.45. Попова Т.П., Литвиненко В.І. Ізогеліхризин суцвітьцмину // Фармацевтичний журнал. - 1993. - № 1. - С. 60-65.46. Руленко И.А., Ручкин В.Е., Тюкавкина Н.А., Колес-ник Ю.А., Георгиевский В.П., Попова Т.П., Литвинен-ко В.И. Количественный анализ изосалипурпозида -стандарта методом высокоэффективной жидкостнойхроматографии // Современные методы химико-токси-кологического анализа: Сб. науч. работ. - М., 1986. -С. 167-172.46. Ручкин В.Е., Руленко И.А., Колесник Ю.А., Литви-ненко В.И., Попова Т.П. Исследование химических пре-вращений изосалипурпозида методом ВЭЖХ // Тез.докл. V Всесоюзного симпозиума по фенольным соеди-нениям. Секция химии (Б). - Таллинн. - 1987. - С. 89-90.

93

ÔÀÐÌÀÊÎÌ 4-200447. Ручкин В.Е., Руленко І.А., Литвиненко В.І., Тюкавки-на Н.А., Колесник Ю.А., Попова Т.П. Халкон-флавано-нова ізомеризація компонентів фламіну // Фармацев-тичний журнал. - 1988. - № 3. - С. 63-66.48. Сабиров Р.С. Лекарственные растения традицион-ной медицины Средней Азии, их изучение и использо-вание: Дисс. в форме науч. докл. … д.фарм.н. – Харь-ков, 1991. - 59 с.49. Сампиев А.М., Литвиненко В.И., Попова Т.П., Аммо-сов А.С. Природные комплексы флавоноидов и сапони-нов. Сообщение 1. Некоторые аналитические аспектысоздания препаратов на основе флавоноидов и сапони-нов // Фармаком. - 1998. - № 6. - С. 46-51.50. Сампиев А.М., Литвиненко В.И., Попова Т.П., Аммо-сов А.С. Природные комплексы флавоноидов и сапони-нов. Сообщение 2. Особенности извлечения из расти-тельного сырья // Фармаком. - 1999. - № 1. - С. 36-40.51. Селиванова И.А. Физико-химические основы созда-ния лекарственных средств и пищевых добавок на базебиологически активных веществ древесины LarixGmelinii Rupr. (Rupr.) и Larix sibirica Ledeb.: Автореф.дисс. … д.фарм.н. – М, 1998. - 39 с.52. Сластья Е.А., Роботягов В.Д., Литвиненко В.И. Же-лезницы Крыма (Sideritis L.).Химический состав и при-менение // Фармаком. - 2001. - № 3. - С. 1-4.52а. Сокольская Т.А. Лекарственные средства на осно-ве фенольных веществ растений // Тез. докл. VI сим-позиума по фенольным соединениям. – Москва, 2004. -С. 129.53. Тюкавкина Н.А. Использование ВЭЖХ в областифенольных солединений // Тез. докл. V Всесоюзногосимпозиума по фенольным соединениям. Секция химии(Б). - Таллинн. - 1987. - С. 112 -113.54. Тюкавкина Н.А., Ручкин В.Е., Руленко И.А., Колес-ник Ю.А., Литвиненко В.И., Попова Т.П. п-Диастерео-меризация содержащегося во фламине изосалипурпо-зида // Фармация. - 1989. - Т. 38, № 2. - С. 28-30.55. Тюкавкина Н.А., Руленко И.А., Колесник Ю.А. При-родные флавоноиды как пищевые антиоксиданты ибиологически активные добавки (Обзор) // Вопросыпитания. - 1996. - № 2. - С. 33-38.56. Тюкавкина Н.А., Руленко И.А., Колесник Ю.А. Ди-гидрокверцетин – новая антиоксидантная и биологи-чески активная пищевая добавка // Там же. - 1997. -№ 6. - С. 12-15.57. Тюкавкина Н.А. Биофлавоноиды: Химия, пища, ле-карства, здоровье: Актовая речь. - М.:ММА, 2002. - 56 с.58. Тюкавкина Н.А. Некоторые аспекты современныхисследований в области фенольных соединений // Тез.докл. VI симпоз. по фенольным соединениям. - М.,2004. - С. 11-13.59. Тюкавкина Н.А. Лекарственные препараты и биоло-гически активные добавки на основе диквертина // Тамже. - С. 11-12.59а. Шалашвили А.Г., Дурмишидзе С.В. Расщеплениефлавоноидных соединений в растениях // Тез. докл.V Всесоюзного симпозиума по фенольным соединени-ям. Секция биохимии и физиологии (А). – Таллинн,1987. - С. 160.60. Шалашвили А.Г. Флавоноиды культивируемых вГрузии растений родов Citrus и Vitis: Химический со-став и метаболизм. - Автореф. дисс. ... д.б.н. - М, 1988. -50 с.61. Фурса Н.С. Изучение веществ первичного и вторич-ного обмена аеществ у видов семейств крестоцветныхи валериановых как хемотаксономических признаков ифармакологически активных средств. - Автореф. дисс.… д.фарм.н. – Москва, 1990. - 42 с.62. Alvarez L., Delgado G. C- and O-Glycosyl-α-hydroxy-dihydrochalcones from Eysenhardtia polystachya // Phy-tochemistry. - 1999. - Vol. 50, No. 4. - P. 681-687.

63. Ayabe S.I., Yoshikawa T., Kobayashi M., Furuya T. Bio-synthesis of a retrochalcone echinatin: Involvement of O-methyltransferase to licodione // Phytochemistry. - 1980. -Vol. 19, No. 11. - P. 2331-2336.64. Beltrami E., De Bernardi M., Fronza G., Mellerio G., Vi-dari G., Vita-Finzi P. Coatline A and B, two C-glucosyl-α-hydroxydihydrochalcones from Eysenhardtia polystach-ya // Phytochemistry. - 1980. - Vol. 21, No. 12. - P. 2931-2933.65. Bhakuni D., Bittner M., Sammes M.S.P.G. Nubigenol:an α-hydroxydihydrochalcone from Podocarpus nubige-na // Phytochemistry. - 1973. - Vol. 12, No. 11. - P. 2777-2779.66. Chopin J., Hauteville M., Joshi B.S., Gavad D.H. A novelexample of a natural 2,5-lihydroxyflavanone from Unonalawii // Phytochemistry. - 1978. - Vol. 17, No. 2. - P. 332-334.67. Elegami A.A., Bates C., Gray A.I., Mackay S.P., Skel-lern G.G., Waigh R.D. Two very unusual macrocyclic fla-vonoids from the water lily Nymphaea lotus // Phytoche-mistry. - 2003. - Vol. 63, No. 6. - P. 727-731.68. European Pharmacopoeia, 4th ed. Supplement 4, 2003. -Strasbourg: Council of Europe, 2002.69. European Pharmacopoeia, 4th ed. Supplement 5, 2003. -Strasbourg: Council of Europe, 2003.70. Fuendjiep V., Wandji J., Tillequin F., Mulholland D.A.,Budziikiewicz H., Fomum Z.T., Nyemba A.M., Koch M.Chalcasnoid and stilbenoid glycosides from Guibourtiatessmanii // Phytochemistry. - 2002. - Vol. 60, No. 8. -P. 803-806.71. Gupta B.K., Gupta G.K., Dhar K.L., Atal C.K. A C-formylated chalcone from Psoralea corylifolia // Phyto-chemistry. - 1980. - Vol. 19, No. 9. - P. 2034-2035.71a. Hatano T., Aga Y., Shintani Y., Ito H., Okuda T., Yosh-ida T. Minor flavonoids from licorice // Phytochemistry. -2000. - Vol. 55, No. 8. - P. 959-963.72. Iinuma M., Mizuno M. Natural occurrence and synthe-sis of 2' -oxygenated flavones, flavonols, flavanones andchalcones // Phytochemistry. - 1989. - Vol. 28, No. 3. -P. 681-694.73. Jay M., Voirin B., Favre-Bonvin J., Gonnet J.F. Sur lecaractere proble – ment artificiel d’un C-benzyl flavonoideobtenu a partir d’un hydrolysat de feuilles d’Hymeno-sporum flavum // Phytochemistry. - 1974. - Vol. 13, No. 8. -P. 1565-1569.74. Kikuchi Y., Miyaichi Y., Tomimori T. Studies on Nepa-lense crudе drugs. XIV. New flavonoids from root of Scutel-laria prostrata Jacq.ex Benth // Chem. Pharm. Bull. - 1991. -Vol. 39, No. 6. - P. 1466-1472.75. Кikuchi Y., Miyaichi Y., Tomimori T. Total synthesis offlavolignans, Scutellaprostins A, B, C, G, E and F // Yaku-gaku Zasshi. - 1991. - Vol. 111, No. 8. - P. 424-435.76. Kurkin V.A., Lebedev A.A., Zapesochnaya G.G., Avdee-va E.V., Simonova G.V., Lebedev P.A., Pervushkin S.V.,Egorov V.A., Mizina P.G., Bulatova M.V. The new possi-bilities of the use of Silybum marianum (L.) Gaertn.Fruits // 2nd Intern. Electronic Conf. on Synthetic OrganicChemistry (ESCOS-2), http://www/mdpi.org/escos/. -September 1-30, 1998.77. Kurkin V.A., Zapesochnaya G.G. Ezhkov V.N., Avdee-va E.V., Kurkina A.V. The study of the physical - chemicalproperties of the flavonoids contained 5,8-dihydroxygrou-ping // 2nd. Intern. Electronic Conf. on Synthetic OrganicChemistry (ESCOS-2), http://www/mdpi.org/escos/. -September 1-30, 1998.78. Li W., Asada Y., Yoshikawa T. Flavonoid constituentsfrom Glycyrrhiza glabra hairy root cultures // Phytoche-mistry. - 2000. - Vol. 55, No. 5. - P. 447-456.79. Li W., Koike K., Asada Y., Hirotani M., Rui H.,Yoshikawa T., Nikaido T. Flavonoids from Glycyrrhiza pa-

94


llidiflora hairy root cultures // Phytochemistry. - 2002. -Vol. 60, No. 4. - P. 351-355.80. Lien T.P., Porzel A., Schmidt J., Sung T.V., Adam G.Chalcanoids from Fissistigma bracteolatum // Phytoche-mistry. - 2000. - Vol. 53, No. 8. - P. 991-995.81. Lu Y., Foo L.Y. Rosmarinic acid derivatives from Salviaofficinalis // Phytochemistry. - 1999. - Vol. 51, No. 1. - P. 91-94.82. Ma J., Jin X., Yang L., Liu Z.L. Diarylheptanoids fromthe rhizomes of Zingiber officinale // Phytochemistry. -2004. - Vol. 65, No. 8. - P. 1137-1143.83. Martin M., Dewick P.M. Biosynthesis of pterocarpan?Isoflavan and coumestan metabolites of Medicago sativa:the role of an isoflav-3-ene // Phytochemistry. - 1980. -Vol.19, No. 11. - P. 2341-2346.84. Merghem R., Jay M., Viricel M.R., Bayet C., Voirin B. nFive 8-C-benzylated flavonoids from Thymus hirtus (Labia-teae) // Phytochemistry. - 1995. - Vol. 38, No. 3. - P. 637-640.85. Mohamed K.M., Hassanean H.A., Ohtani K., Yama-saki K. Chalcanol glucosides from seeds of Trifoliumalexandrinum // Phytochemistry. - 2000. - Vol. 53, No. 3. -P. 401-404.86. Mol J.N.M., Robbinst M.P., Dixon R.A., Veltkamp E.Spontaneous and enzymic rearrangemewnt of naringenin

chalcone to flavanone // Phytochemistry. - 1985. - Vol. 24,No. 10. - P. 2267-2269.87. Petersen M., Simmonds M.S.J. Rosmarinic acid // Phy-tochemistry. - 2003. - Vol. 62, No. 2. - P. 121-125.88. Rahman M.M., Qais N., Rashid M.A. A new benzylatedchalkone from Desmos chinensis // Fitoterapia. - 2003. -Vol. 74, No. 5. - P. 511-514.89. Roux D.G., Ferreira D. a-Hydroxychalcones as interme-diates in flavonoid biogenesis: the significance of recentchemical analogies // Phytochemistry. - 1974. - Vol. 13,No. 10. - P. 2039-2048.90. Saini K.S., Ghosal S. Naturally occurring flavan unsub-stituted in the heterocyclic ring // Phytochemistry. - 1984. -Vol. 23, No. 11. - P. 2415-2421.91. Yenesew A., Midiwo J.O., Guchu S.M., Heydenreich M.,Peter M.G. Three isoflav-3-enes and a 2-arylbenzofuranfrom the root bark of Erythrina burttii // Phytochemistry. -2002. - Vol. 59, No. 3. - P. 337-341.92. Zhang P.C., Xu S.X. Flavonoid ketohexosefuranosidesfrom the leaves of Crataegus pinnaatifida Bge. Var. MajorN.E.Br. // Phytochemistry. - 2001. - Vol. 57, No. 8. - P. 1249-1253.93. Williams A.H. Dibenzoylmethanes and flavones ofMalus // Phytochemistry. - 1979. - Vol. 18, No. 11. - P. 1897-1898.

Литвиненко В.И., д.х.н., профессор(Государственное предприятие «Государ-ственный научный центр лекарственныхсредств»)

95


²ñòîð³ÿ â³ò÷èçíÿíî¿ ôàðìàö³¿

В 2004 году исполнилось 100 лет со днярождения профессора Дмитрия Григорьеви-ча Колесникова — известного ученого-фито-химика, сотрудника УИЭФ - ВНИИХТЛС(ныне Государственное предприятие «Госу-дарственный научный центр лекарственныхсредств»).

Дмитрий Григорьевич Колесников родил-ся в с. Боровая Боровского района Харьковс-кой области 8 ноября 1904 года.

Трудовой, научный и жизненный путьДмитрия Григорьевича тесно связан сУИЭФ - ВНИИХТЛС.

С 1928 года, по окончании Одесского фар-мацевтического института по специальностифармакохимик, Дмитрий Григорьевич про-шел все ступени становления: ст. препарато-ра, лаборанта, ст. лаборанта, научного со-трудника, заведующего лабораториями фи-тохимии (с 1934 года) и изыскания раститель-ных препаратов (до 1974 года), ст. научногосотрудника — консультанта (до 1984 года).

Одновременно Дмитрий Григорьевич ис-полнял обязанности заместителя директораинститута по научной части (1936-1940 гг. и1941-1946 гг.), главного инженера Главногоуправления химико-фармацевтической про-мышленности Минздрава СССР (1946-1964 гг. по совместительству).

В 1954 году Дмитрий Григорьевич защитилдиссертацию на тему «Гликозиды наперстян-ки пурпурной» и ему была присвоена ученаястепень кандидата химических наук.

В 1965 году защищена докторская диссер-тация на тему «Получение и химическое изу-чение сердечно-сосудистых препаратов рас-тительного происхождения» с присвоениемученой степени доктора фармацевтическихнаук.

В 1969 году Дмитрию Григорьевичу при-своено звание профессор.

Непросто перечислить все лекарственныепрепараты, созданные непосредственноДмитрием Григорьевичем и под его руковод-ством. Это коргликон, дигитоксин, кордигит,строфантин, аймалин, эрготал, раунатин, па-стинацин, алантон, сироп крушины, кафиол,ламинарид и многие другие.

Важно отметить, что Дмитрий Григорье-вич до последних дней жизни (1990 год) про-должал успешно работать над поиском и со-зданием новых лекарственных препаратов,охотно передавал свой богатейший научныйи жизненный опыт молодым исследователям.

Д.Г. Колесников – основатель школы фи-тохимии в Украине. Он автор более 200 науч-ных работ, имеет 30 авторских свидетельств.Им подготовлено 22 доктора и кандидатанаук, среди них Прокопенко А.П., Черно-бай В.Т., Максютина Н.П., Комиссарен-ко Н.Ф., Макаревич И.Ф., Бугрим Н.А., Лит-виненко В.И. и др.

Дмитрий Григорьевич награжден ордена-ми «Трудового Красного Знамени», «Знак по-чета», медалью «За трудовую доблесть» и др.

Ученики Дмитрия Григорьевича Колесни-кова и все сотрудники ГП ГНЦЛС хранятсветлую память о выдающемся ученом.

ЛИТЕРАТУРА1. Ученые Украины – фармации. - Харьков: Основа,1991. - С. 98-99.2. Історія фармації України. - Харків: Прапор,1999. -С. 488-489.3. Харків фармацевтичний. - Харків: Золоті сторінки,1999. - С. 210.4. Энциклопедический словарь лекарственных расте-ний и продуктов животного происхождения: Учебноепособие. - СПб.: Спецлит, 2002. - 408 с.5. Семенченко В.Ф. История фармации. – Москва,2003. - 640 с.6. Фармаком. – 2000. - № 1-3.

Ê 100-ëåòèþ ñî äíÿ ðîæäåíèÿÊîëåñíèêîâà Äìèòðèÿ Ãðèãîðüåâè÷à

96


ПОПРАВКА

В № 3, 2004 журнала «Фармаком» в статье Гризодуба А.И., Леонтьева Д.А., Денисенко Н.В.,Подпружникова Ю.В. «Рациональная схема валидации методик количественного анализа

лекарственных средств методом стандарта» в Таблице 2 (с. 7) была допущена техническаяошибка.

Приводим указанную таблицу и приносим извинения авторам и читателям.Редакция

Èñïûòàíèå

Äèàïàçîíïðèìåíå-íèÿ ìåòî-äèêè, %

Äîïóñêèñîäåðæàíèÿ,

(Â), %

Ïðåäåëüíàÿíåîïðåäå-ëåííîñòü,maxÄAs %

Ïðåäåëüíàÿñèñòåìàòè-÷åñêàÿ ïî-ãðåøíîñòü,

max ä%

Êðèòè÷åñêîåçíà÷åíèå,RSDo, %

Êðèòè÷åñêîåçíà÷åíèå, Rc

Êðèòè÷åñ-êîå ïðàêòè-÷åñêè íåçíà-÷èìîå çíà-÷åíèå, a, %

Ñóáñòàíöèè1.0 0.32 0.10 0.53 0.99926 1.6

1.5 0.48 0.15 0.79 0.99833 2.4

2.0 0.64 0.20 1.06 0.99702 3.2

2.5 0.80 0.26 1.32 0.99535 4.0

ÊÎ 80-120

3.0 0.96 0.31 1.58 0.99329 4.8

Ãîòîâûå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà5 1.60 0.51 0.84 0.99810 2.6

7.5 2.40 0.77 1.27 0.99571 3.8

10 3.20 1.02 1.69 0.99236 5.1

15 4.80 1.54 2.53 0.98273 7.7

ÊÎ 80-120

20 6.40 2.05 3.38 0.96909 10.2

ÎÑ 70-130 9.26 2.96 0.95 1.56 0.99710 3.1

55-135 9.26 2.96 0.95 1.56 0.99839 2.1Ð

60-135 9.26 2.96 0.95 1.56 0.99837 2.4

5 1.60 0.51 0.84 0.99952 2.1

7.5 2.40 0.77 1.27 0.99893 2.1

10 3.20 1.02 1.56 0.99837 2.1

15 4.8 1.54 1.56 0.99837 2.1

ÊÎ + ÎÑ + Ð 55-135

20 6.40 2.05 1.56 0.99837 2.1

5 1.60 0.51 0.84 0.99946 2.4

7.3 2.34 0.75 1.23 0.99885 2.4

7.5 2.40 0.77 1.27 0.99878 2.4

10 3.20 1.02 1.56 0.99814 2.4

15 4.80 1.54 1.56 0.99814 2.4

ÊÎ + ÎÑ + Ð 60-135

20 6.40 2.05 1.56 0.99814 2.4

Таблица 2Критические значения систематической и полной неопределенности методики анализа и параметров

линейной зависимости YYYYYiiiii = b · X = b · X = b · X = b · X = b · Xiiiii + a + a + a + a + a для различных испытаний, g = g = g = g = g = 9 точек и различных допусков

содержания В В В В В (КО – количественное определение, ОС – однородность содержания, Р – тест

«Растворение»)

Documents

Komponovka 4 2004sphu.org/wp-content/uploads/2017/08/farmacom_4_2004.pdf1 ÔÀ—ÌÀ˚˛Ì 4-2004 ˙ì‡æò ˜î âŁäàííÿ ˜îïîâíåííÿ 2 äî ˜åðæàâíî¿ ÔàðìàŒîïå¿