5/25/2018 koreksi kesalahan

1/3

PROSEDUR STANDART

Pengambilan jaringanTahap awal setelah pembiusan adalah pengambilan jaringan. Pengambilan

jaringan juga diusahakan agar tidak banyak darah dan memperhatikan ketebalan

jaringan. Darah yang mengenai jaringan dan segera dicuci agar darah tidak mengering

kita juga harus menjaga jaringan yang diambil agar tidak terkontaminasi.

FiksasiAdapun tujuan fiksasi diatas ialah memberi bentuk menjadi tetap sebelum

melewati tahap berikutnya, mencegah terjadinya perubahan yang bersifat regresif,

mengeraskan, atau akan memberi konsistensi kepada bahan-bahan yang lembut,

terjadinya koagulasi protoplasma atau bahan pembentuk protoplasma.

Bila fiksasi mengalami kesalahan maka jaringan akan mengalami perubahan baik

karena aktivitas bakteri maupun enzim dalam sel. Untuk mengatasi ini setelah jaringan

dikoleksi harus difiksasi segera mungkin dan setah itu jaringan di masukkan ke dalam

lemari pendingin untuk meminimalkan autolisis.

pencucian (Washing)Kesalahan dalam prosedur ini akan menimbulkan efek yang negatif pada tahap

berikutnya. Postfiksasi dilakukan untuk membuang kelebihan zat fiksatif yang mungkindapat menimbulkan interferensi pada tahap berikutnya. Apabila prosedur ini salah maka

kelebihan bahan fiksatif akan mempengaruhi hasil pada tahap-tahap berikutnya yang

harus kita lakukan adalah memberikan konsentrasi fiksativ yang tepat dan durasi yang

cocok.

DehidrasiDehidrasi adalah proses penarikan molekul air dari dalam jaringan. Tujuan dari

dehidrasi adalah agar seluruh ruang-ruang antar sel dalam jaringan dapat diisi dengan

molekul paraffin.

Kesalahan dalam prosedur ini akan menyebabkan tidak adanya ruang antar sel

sehingga molekul paraffin tidak dapat masuk ke ruang antar sel itu. Dalam hal ini akan

menyebabkan tidak mantapnya jaringan dalam memasuki tahap selanjutnya. Maka yang

harus kita lakukan ialah mengikuti prosedur secara lengkap dengan penghidrasi yang

tepat.

PenjernihanClearing berfungsi untuk menarik alkohol atau dehidran yang lain dari dalam

jaringan agar dapat digantikan oleh molekul parafin. Dengan tidak dapat ditariknya

alcohol dan bahan dehidran dari jaringan agar jaringan tampak transparan untuk

kelancaran dalam proses pewarnaan yang selanjutnya. Apabila bahan dehidran masih

ada disana maka sulit untuk mewarnai secara merata. Untuk menghindari iti maka kita

melakukan clearing dengan bahan yang tepat dan durasi yang tepat sehingga tidak

sampai merusak jaringan.

5/25/2018 koreksi kesalahan

2/3

EmbedingTujuannya adalah untuk mempermudah dalam melakukan proses pemotongan

atau pengirisan sampel. Kesalahan dalam preosedur ini bisa saja karena peletakan

jaringan yang kurang tepat atau terjatuh sebelum ditanan atau temperatus dalam oven

terlalu tinggi sehingga jaringan akan meleleh. Keslahan itu kita atasi dengan

mengerahkan kemampuan kita untuk menghasilkan blok paraffin sebaik-baiknya

untuk kelancaran dalam penyayatan dan juga mengatur suhu yang tepat sesuai dengan

jaringan

penyayatanPemotongan akan berhasil jika pisau tidak tumpul, tidak berkarat, dan tidak

terdapat sisa-sisa parafin dari hasil pemotongan sebelumnya dan posisi sampel lurus danbaik. Suhu pisau dan suhu sampel serta ruangan harus sama agar sampel tidak patah atau

terpotong-potong saat pengirisan.

Kesalahan yang timbul umunya disini dimana ketebalan penyayatan telalu tebal,

pisau yang digunakan terlalu tumpul atau suhu pisau yang digunakan saat memotong

tidak tepat sehingga pita-pita yng menghasilkan bergulung pada pisau pemotong. Hal

yang harus sangat diperhatikan adalah keadaan pisau mikrotom yang harus tajam dan

tidak berkarat.

PenempelanKesalahan yang timbul umumnya ialah saat memindahkan pita dari mikrotom ke

slide harus hati-hati dan kebersihan slide yang akan digunakan harus baik dan ukuran

slide harus sesuai, apabila hal ini terjadi maka semua kerja kita akan gagal. Ketelitian

akan mengahisilkan penempelan yang baik sehingga untuk pengamatan naantinya akan

tampak lebih jelas di mikroskop. Dalam penempelan ini juga kita harus menggunakan

reagen yang tepat yakni tidak terlalu bangak dan sedikit, apabila terlalu banya nantinya

akan menyulitkan kita dalam pengamatan dan apabila terlalu sedikit dikhawatirkan akan

bias membuat pita lepas dari slide pada saat pewarnaan dan sebalum penutupan.

StainingStaining adalah proses pewarnaan, dimana sampel diwarnai dengan

menggunakan zat warna baik pewarna alami maupun pewarna sintetik. Tujuannya yaitu

untuk mewarnai jaringan sehingga mudah diamati di mikroskop. Kesalahan dalam

pewarnaan ini bisa karena terlalu tebal dimana hasil tampak hitam dan tidak bisa diamati

sedangkan apabila terlalu tipis maka kita tidak dapat membedakan antar sel dalamjaringan.

Atau kesalahan saat memberikaan pewarna terhadap jaringan yang tidak sesuai

atau cocok. Sehingga sel yang di fokuskan saat pengamatan tidak tampak. Untuk

mengatasi hal ini akan lebih baik sebelum melakukan pewarnaan kita mengetahui

terlebih dahulu jenis pewarna apa yang lebih cocok.

Mounting

5/25/2018 koreksi kesalahan

3/3

Dimana slide yang sudah selesai diwarnai dan kering maka penutupan dilakukan

untuk membuat slide permanen untuk pengamatan secara berulang-ulang. Kesalahan

dalam prosedur ini bisa disebabkan karena banyaknya lem yang digun akan untuk

merekatkan coverglass ke permukaan slide. Hal ini akan menyulitkan dalam

pengamatan.

Atau kesalahan saat penutupan yang tidak hati-hati yang mengakibatkan slide

pecah atau retak yang menutup jaringan sehingga saat pengamatan jaringa tidak tampak.

LabelingDimana keadaan ini digunakan untuk memberikan kiemudahan bagi kita untuk

menempatkan dan menggunakan slide dalam penanganan slide. Labeling sangat

bedrperan untuk membantu kita dalam mengenal jaringan apakan yang ada pada dalamsuatu slide untuk tidak keliru dalam menganalisis. Kesalahan yang timbul ialah pada

penulisan slide menggunakan tinta cair yang mudah terhaous apoabila kena air atau

keringan kita.