LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR

LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAREAP Gentica y biotecnologa. UNMSMPERMEABILIDAD CELULAR Y ORGANELAS PERMEABILIDAD CELULARLa permeabilidad de las membranas es fundamental para el funcionamiento de la clula viva y para el mantenimiento de condiciones fisiolgicas intracelulares adecuadas. Esta funcin determina qu sustancias pueden ingresar a la clula, muchas de las cuales son necesarias para mantener los procesos vitales y la sntesis de diversas sustancias. Tambin regula el pasaje de agua y salida de productos de desecho que deben ser eliminados de la clula. La permeabilidad de una membrana celular, depende de un conjunto de factores que afectan el movimiento de solutos a travs de los lpidos, como el tamao molecular del soluto. Las membranas celulares a menudo se definen como selectivamente permeables debido a que permiten que ciertos solutos la atraviesen por difusin con mayor facilidad que otros. Una de las causas de permeabilidad selectiva es la representacin relativa de los diferentes tipos de canales inicos de una membrana. Por ejemplo si una membrana contiene una alta densidad de canales de Na+ y una densidad reducida de canales del Ca2+ ser ms permeable al Na+ que al Ca2+.

ORGANELAS LISOSOMASLos lisosomas actan como organelos digestivos de la clula. Dentro de un lisosoma tpico se encuentra confinado un grupo de casi 50 enzimas hidrolticas diferentes, sintetizadas en el RE rugoso y enviadas a esos organelos. En conjunto, las enzimas lisosmicas son capaces de hidrolizar prcticamente cualquier tipo de macromolcula biolgica para convertirla en productos de bajo peso molecular que puedan ser transportados a travs de la membrana lisosmica al interior del citoplasma. Las enzimas de un lisosoma comparten una propiedad importante: todas tienen actividad ptima a pH cido: son hidrolasas acidas.

MITOCONDRIASSon organelas de doble membrana y contienen una gran cantidad de enzimas y coenzimas que participan en los procesos de transformacin de energa, tales como la respiracin celar, ciclo de Krebs, etc.

PLASTIDIOSSon organelas presentes en clulas vegetales, las cuales se hallan ausentes en clulas animales, pueden ser leucoplastos, que son incoloros y participan en el almacenamiento de almidn y cromoplastos como los cloroplastos que contiene un pigmento verde llamado clorofila.

OBJETIVOS

Reconocer a la permeabilidad de membrana como un fenmeno importante para la fisiologa celular. Reconocer lisosomas y mitocondrias mediante colorantes vitales. Observacin e identificacin de cloroplastos.

MATERIALES

DEL ALUMNO Lminas y laminillas Hoja de afeitar Goteros Lanceta estril Pinzas Alcohol Hojas de Elodea Bulbo de cebolla Algodn

DEL LABORATORIO Papel filtro Agua destilada Solucin de Verde de Janus (1/10000) Solucin rojo neutro (1/20000) Soluciones salinas al 0,2%, 0,9% y 5% Cultivo de Protozoarios

PROCEDIMIENTO1. PERMEABILIDAD CELULARa) Clulas vegetalesSe prepar muestras de epidermis de cebolla en una solucin salina al 5%, en 0,2% y al 0.9% , luego se observa en el microscopio con un aumento total de 100X.b) Clulas animales Limpiamos y desinfectamos la lanceta para luego obtener con ella muestras de sangre. Colocamos 3 gotas de sangre, cada una en una lmina, luego le agregamos las soluciones antes mencionadas y analizamos en el microscopio a 400X.

2. ORGANELAS CELULARES

a) Observacin de lisosomasColocamos una gota de cultivo de protozoarios en una lmina, cubrimos con una laminilla y luego observamos al microscopio tratando de identificar unos pequeos grnulos de color rojo o roza que vendran a ser los lisosomas.b) Observacin de Mitocondrias Con una muestra de epitelio bucal mediante raspado se realiza el frotis, dejamos secar para luego cubrir la muestra con verde Janus por 5min. Luego eliminamos el resto del colorante y posteriormente dejamos secar y observamos.c) Observacin de Cloroplastos Elegimos una hoja de elodea y la colocamos sobre una lmina que contiene una gota de agua. Con ayuda del estilete la extendemos y luego cubrimos con una laminilla. Observar la muestra.

CUESTIONARIO1. Defina plasmlisis, turgencia y crenacin.a)PlasmlisisSe da cuando las clulas vegetales colocadas en un medio hipertnico sufren una reduccin del volumen en funcin de la prdida de agua debida al fenmeno de smosis, es decir, la membrana celular se separa de la pared celular.b)CrenacinEs un fenmeno en donde la clula animal se somete a una solucin hipertnica. Al estar en esta solucin con gran cantidad de soluto, tiende a liberar su agua, lo que conlleva a la destruccin de la clula se produce por deshidratacin.c)TurgenciaOcurre con la clula vegetal en solucin hipotnica, ya que ingresa agua y esta es almacenada en la vacuola, donde la presin por turgencia es generada por la elevada presin osmtica de la vacuola, haciendo que la clula aumente su volumen. 2. Defina citosol, estroma y matriz. CitosolEs la parte liquida del citoplasma y constituye el verdadero medio interno celular, ya que contiene las principales estructuras vinculadas con la forma y el movimiento de la clula, en el tienen lugar a la sntesis proteica y diversas actividades metablicas. EstromaEs la disolucin acuosa que presentan los cloroplastos, donde estn contenidos los tilacoides, enzimas, material gentico y donde se realizan diversas actividades metablicas. MatrizConstituye el medio ambiente de los componentes que hay en una clula, consta de una parte liquida, citosol, y otra ms consistente que son estructuras como el sistema de endomembranas, el complejo de Golgi, el citoesqueleto, etc.3. En qu tipo de clulas vegetales encontraramos mayor cantidad de cloroplastos y por qu?En las clulas del tejido del parnquima clorofiliano o clornquima, ya que estos se encuentran en hojas y tallos verdes de las plantas y es all donde se realiza la fotosntesis.

CONCLUSIONES Reconocimos las clulas en soluciones hipotnicas e hipertnicas y comparamos con las soluciones isotnicas. En soluciones hipertnicas las membranas celulares se constrien debido a que pierden agua. En las soluciones hipotnicas las clulas se hinchan debido a que ingresa agua. Identificamos las mitocondrias con un color verdoso debido a la tincin verde Janus. Reconocimos a los lisosomas en los protozoos de un color rojo debido a la coloracin. Los cloroplastos d la elodea se mueven gracias al movimiento protoplsmico que presenta la clula.

BIBLIOGRAFA

Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L. Case. Introduccin a la Microbiologa. 9 Edicin. Buenos Aires: Ed. Medica Panamericana. Robertis, Hib, Ponzio. Biologa Celular y molecular. Editorial El Ateneo. Argentina.

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