Laboratório de Saúde Pública da Guarda

Ana Marília Bidarra Monteiro Dionísio

11 de Abril de 2018

Introdução de métodos

rápidos na rotina de

um Laboratório de

Saúde Pública

2

Localiza-se no edifício da

Unidade de Saúde Pública e

serviços centrais da ULS da

Guarda.

O Laboratório de Saúde Pública da Guarda

Para além das atividades inerentes ao apoio à vigilância e programas de saúde

pública, realiza também a prestação de serviços a clientes externos, outras

entidades públicas, empresas e a particulares.

3

O Laboratório de Saúde Pública da Guarda

12 14 15

2124

2731

0

10

20

30

40

2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017

Núm

ero

de p

arâ

metr

os

acre

dit

ados

Ano

Evolução do número de parâmetrosAcreditados

É acreditado pelo IPAC segundo a norma NP EN ISO 17025:2005 desde 2011, com

o anexo técnico L0570-1, onde constam 31 parâmetros acreditados.

4

Avaliação da qualidade da água nas vertentes Físico-química e Microbiológica,

de acordo com as exigências da legislação nacional e comunitária e com as

recomendações da OMS, numa abordagem de problemas ambientais que

representam risco para a saúde humana.

Planos de vigilância e monitorização de fatores de risco, em articulação

com os Serviços de Saúde e outros com âmbito alargado de utilização

pública.

O Laboratório de Saúde Pública da Guarda

Águas de consumo

Águas minerais naturais

e de nascente

Águas naturais

doces superficiais

Águas termais

Águas naturais

doces subterrâneas

Águas naturais

doces balneares

Águas de processo

(hemodiálise)

Águas de processo

(uso industrial)

5

Águas de piscina

Matrizes analisadas no Laboratório de Saúde Pública da Guarda

Realiza ainda análises para a execução e desenvolvimento dos programas deâmbito regional:

Vigilância de cantinas escolares e refeitórios públicos

Projeto «minorsal.saúde»

«pão.come»

«sopa.come»6

Projetos de pesquisa e investigação propostos pela DGS e ARS Centro e de

iniciativa da ULS e/ou em articulação com a UBI, IPG, IPCB – Escola Superior de

Saúde Dr. Lopes Dias, Instituto Piaget – Bragança e outras entidades públicas ou

privadas.

Programas em que o Laboratório de Saúde Pública da Guarda

está envolvido

7

0500

1000

1500

2000

2500

3000

3500

4000

2038

88 93

1434

54 16513

2 1162 11

846

6453 587

16

2502

704

3543

Núm

ero

de a

most

ras

Total por tipo de amostra

Volume de Amostras 2017

8

Os métodos rápidos no

LSP da Guarda

9

Os métodos rápidos no Laboratório de Saúde Pública da Guarda

Colilert ® – ISO9308-2

Colilert ® 44ºC – Coliformes fecais

(Procedimento Interno)

Enterolert ® (E e DW) – Procedimento Interno

Pseudalert ® – Procedimento Interno

Legiolert® - Procedimento Interno (implementado e levado a

auditoria interna a 09-04-2018)

Métodos Rápidos versus Membrana Filtrante

10

Incubar durante 18-22h a

(36±2)ºC

Leitura de resultados:

Reação positiva para coliformes

Contar os poços amarelos.

Reação positiva para

E.coli

Sob luz UV contar os

poços com

fluorescência.

Verter todo o

conteúdo do

frasco para

um Quanti-

Tray ou

Quanti-Tray

2000

Agitar de modo a dissolver todo o

substrato

A 100 mL de amostra adicionar o

substrato

1

2

3

4

5Expressão dos resultados:

Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo às

respetivas tabelas incluídas na norma.

Fechar o Quanti-Tray usando o selador

Para quantificação de coliformes fecais, incubar durante 18-22h a (44±0,5)ºC.

Procedimento para Pesquisa e Quantificação de Coliformes e E. coli

(Método do Número Mais Provável – NMP)

Procedimento interno para Pesquisa e Quantificação de Enterococos fecais

(Método do Número Mais Provável – NMP)

A 100 mL de amostra adicionar o

substrato Enterolert- E / Enterolert

DW

Agitar de modo a dissolver

todo o substrato

Verter todo

o conteúdo

do frasco

para um

Quanti-Tray

ou Quanti-

Tray 2000

1

2

3

4

5

Incubar durante (41±0,5)ºC durante 24h-28h

Leitura de resultados:

Reação positiva para

Enterococos

Sob luz UV contar os

poços com fluorescência

azul

Reação positiva para

Enterococos Contar

os poços verdes

Enterolert - E

Enterolert - DW

Expressão dos resultados:

Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo às tabelas

dos kits

Fechar o Quanti-Tray usando o selador.

12

13

1

A 100 mL de amostra adicionar o substrato

Verter todo

o conteúdo

do frasco

para um

Quanti-Tray

ou Quanti-

Tray 2000

Agitar de modo a dissolver

todo o substrato

2

3

4

Fechar o Quanti-Tray usando o selador

5

Incubar durante (38±0,5) ºC durante 24h

Leitura de resultados:

Reação positiva para Pseudomonas

aeruginosa

Sob luz UV contar os poços com

fluorescência azul

Expressão dos resultados:

Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo à tabela

do kit

Procedimento interno para Pesquisa e Quantificação de Pseudomonas aeruginosa

(Método do Número Mais Provável – NMP)

14

Medir a dureza da amostra usando a

fita de teste da dureza Suplemento a adicionar a

100mL de amostra:

▪ Dureza baixa: 0.33 mL

▪ Dureza alta adicionar 1,0 mL

Colocar no Quanty-Tray e fechar

usando o selador.

Incubar a (39±0.5)ºC

Adicionar o substrato e agitar bem.2

3

Leitura de resultados:

Expressão dos resultados:

Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo à tabela do kit

Reação positiva – qualquer cor

castanha e/ou turvação maior do que o

controlo negativo

Reação negativa– sem alteração de

cor e sem turvação

5

Nº quadrados rosa 0 1 2 3 4

CaCO3 < 3 > 4 > 7 > 14 > 21

Dureza Baixa Baixa Baixa Alta Alta

Protocolo para Águas potáveis

Pré tratamento para águas de consumo

Colocar 100 mL de amostra num frasco1

4

Procedimento interno para Pesquisa e Quantificação de Legionella pneumophila

(Método do Número Mais Provável – NMP)

Expressão dos resultados:

Converter os poços em NMP/ 100 mL recorrendo à

tabela do kit

15

Protocolo para Águas não potáveis

Num frasco colocar 100 mL de água desionizada

estéril. Adicionar o substrato Legiolert e agitar bem.1

2 Pipetar 2mL de reagente de pré

tratamento para um tubo estéril

Adicionar 2mL de amostra

de água não potável

Deixar incubar à temperatura

ambiente durante 60 segundos

Homogeneizar e transferir 2mL para o frasco

de 100mL com Legiolert.

3

Colocar no Quanty-Tray e fechar usando o selador.

Incubar a (37±0.5)ºC

4

Leitura de resultados:

Reação positiva – qualquer cor castanha

e/ou turvação maior do que o controlo

negativo

Reação negativa– sem alteração de

cor e sem turvação

5

Procedimento interno para Pesquisa e Quantificação de Legionella pneumophila

(Método do Número Mais Provável – NMP)

Piscinas

AMNN e Termais

Processo (T. Refrigeração e HD)

16

Legiolert e RT-PCR

O LSP está acreditado pelo IPAC para a Pesquisa e Quantificação de

Legionella spp e Legionella pneumophila segundo a norma ISO 12869

Não tem implementado método cultural pela técnica clássica

Legiolert como complemento da RT-PCR

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Legiolert versus Método Cultural Clássico

Facilidade de implementação e de execução

Rapidez dos resultados sem necessidade de testes confirmatórios

Especificidade para Legionella pneumophila

Espécie associada à maioria dos casos de doença (DDO)

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3 Técnicas Superiores

7 Técnicas de Análises Clínicas e de Saúde Pública

2 Assistentes Operacionais 1 Técnico Saúde Ambiental

A equipa do Laboratório de Saúde Pública da Guarda

19

Obrigada