Upload
others
View
16
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
86
LAMPIRAN
Lampiran 1. Determinasi Tanaman
87
Lampiran 2. Ethical Clearance
88
Lampiran 3. Surat Keterangan Bebas Laboratorium Parasitologi UGM
89
Lampiran 4. Skrining Fitokimia
90
Lampiran 5. Kadar Air Ekstrak Buah Tin
Kadar air ekstrak kental
Lampiran 6. Perhitungan Rendemen Ekstrak Buah Tin
𝑛 𝑛 𝑛
𝑛 𝑛
𝑛 𝑛
Lampiran 7. Perhitungan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Buah Tin dan
Minyak Zaitun
Perhitungan Kensentrasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun
Konsentrasi ekstrak (%)=
Setara dengan
Konsentrasi sampel uji = 1 mg/ml
91
Pembuatan Absorbasi Larutan Sampel
1 ml larutan sampel + 0,3 ml NaNO2 5% + 0,3 ml AlCl3 10% + 2 ml NaOH 1 M +
ad 10 ml aquadest
Pembuatan Larutan Baku Kuersetin
Konsentrasi 1000 ppm Kuersetin =
𝜇
Pembuatan Larutan Standar
Konsentrasi 20 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 20 ppm
=
= V1 = 0,2 ml
Konsentrasi 40 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 40 ppm
=
= V1 = 0,4 ml
Konsentrasi 60 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 60 ppm
=
= V1 = 0,6 ml
Konsentrasi 80 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 80 ppm
=
= V1 = 0,8 ml
92
Konsentrasi 100 ppm Kuersetin = V1.C1 = V2. C2
= V1. 1000 ppm = 10 ml . 100 ppm
=
= V1 = 1 ml
Kurva Kalibrasi
1 ml larutan standar + 0,3 ml NaNO2 5% + 0,3 ml AlCl3 10% + 2 ml NaOH 1 M +
ad 10 ml aquadest
Larutan Blangko
0,3 ml NaNO2 5% + 0,3 ml AlCl3 10% + 2 ml NaOH 1 M + ad 10 ml aquadest
Pembuatan NaNO2 5%
NaNO2 5% p.a=
Pembuatan AlCl3 10 %
AlCl3 10 % p.a =
Pembuatan NaOH 1 M
M =
1 =
1 =
1 =12,5 g
g =
g = 0,08 gram
93
Penentuan Operating Time Kadar Flavonoid Total
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
0 5 1 0 1 5 2 0 2 5 3 0 3 5 4 0 4 5 5 0 5 5 6 0 6 5
Ab
sorb
ansi
Waktu (Menit)
Kurva Penentuan Operating Time
Uji Kadar Flavonoid Total
Absorbansi
Absorbansi Menit Ke-
2,5613 0
2,4893 5
2,4181 10
2,3299 15
2,2558 20
2,1840 25
2,1118 30
2,0450 35
1,9827 40
1,9198 45
1,8648 50
1,8136 55
1,7611 60
94
Kurva Baku Kuersetin
Konsentrasi
[µg/ml]
Absorbansi
510nm
20 ppm 0,4015
40 ppm 0,5496
60 ppm 0,6101
80 ppm 0,7463
100 ppm 0,8933
Perhitungan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun
A = 0,2861
B = 0,0059
R = 0,9852
Persamaan regresi linier :
y = B + A
y = 0,0059 + 0,2861
y = absorbansi sampel
y = 0,0059x + 0,2861 R² = 0,9852
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1
0 2 0 4 0 6 0 8 0 1 0 0 1 2 0
Ab
sorb
ansi
Konsentrasi Kuersetin (Ppm)
Kurva Baku Kuersetin
Absorbansi
95
= kadar flavonoid sampel (g/ml)
Hasil Absorbansi Ekstrak Buah Tin (Ficus carica L.) dan Minyak Zaitun
Ekstrak Buah Tin Minyak Zaitun
Absorbansi x (mg/g) Absorbansi x (mg/g)
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
0,3911 0,3921 0,3925 17,9322 0,4204 0,4169 0,4302 231,1863
Konsentrasi larutan uji = 1 mg/ml
1. Konsentrasi Flavonoid Total Ekstrak Buah Tin (x)
Replikasi I
y = B + A
y = 0,0059 + 0,2861
0,3911 = 0,0059 + 0,2861
0,3911 - 0,2861 = 0,0059
0,1050 = 0,0059
=
= 17,7966 μg/ml
Replikasi II
y = B + A
y = 0,0059 + 0,2861
0,3921 = 0,0059 + 0,2861
0,3921 - 0,2861 = 0,0059
0,1060 = 0,0059
=
= 17,9661 μg/ml
96
Replikasi III
y = B + A
y = 0,0059 + 0,2861
0,3925 = 0,0059 + 0,2861
0,3925 - 0,2861 = 0,0059
0,1064 = 0,0059
=
= 18,0339 μg/ml
2. Perhitungan Kadar % b/b Flavonoid Total Ekstrak Buah Tin
Replikasi I
Kadar % b/b =
=
= 177,966 mg/g
Replikasi II
Kadar % b/b =
=
= 179,661 mg/g
Replikasi III
Kadar % b/b =
=
= 180,339 mg/g
3. Rata-rata Kadar % b/b Flavonoid Total Ekstrak Buah Tin
Rata-rata = ∑ ⁄
=
= 179,322 mg/g
Kadar % b/b ± SD = 179,322 mg/g ± 1,2223
4. Konsentrasi Flavonoid Total Minyak Zaitun (x)
Replikasi I
y = B + A
97
y = 0,0059 + 0,2861
0,4204 = 0,0059 + 0,2861
0,4204 - 0,2861 = 0,0059
0,1343 = 0,0059
=
= 22,7627 μg/ml
Replikasi II
y = B + A
y = 0,0059 + 0,2861
0,4169 = 0,0059 + 0,2861
0,4169 - 0,2861 = 0,0059
0,1308 = 0,0059
=
= 22,1695 μg/ml
Replikasi III
y = B + A
y = 0,0059 + 0,2861
0,4302 = 0,0059 + 0,2861
0,4302 - 0,2861 = 0,0059
0,1441 = 0,0059
=
= 24,4237 μg/ml
5. Perhitungan Kadar % b/b Flavonoid Total Minyak Zaitun
Replikasi I
Kadar % b/b =
98
=
= 227,627 mg/g
Replikasi II
Kadar % b/b =
=
= 221,695 mg/g
Replikasi III
Kadar % b/b =
=
= 244,237 mg/g
6. Rata-rata Kadar % b/b Flavonoid Total Ekstrak Buah Tin
Rata-rata = ∑ ⁄
=
= 231,1863 mg/g
Kadar % b/b ± SD = 231,1863 mg/g ± 11,6849
Lampiran 8. Perhitungan pada Uji Sitotoksik Ekstrak Buah Tin, Minyak
Zaitun, Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun,
serta Kontrol Positif Doxorubicin Terhadap Sel HeLa
1. Perhitungan Sel HeLa dan Jumlah Sel Per Well
Rata-rata = ∑
x 10
4/ml
=
x 10
4/ml
= 19,5 x 104/ml
Jumlah sel HeLa yang dibutuhkan per well
=
=
= 5,128 mL
99
= 5 mL sel ad 10 mL MK
2. Prepare Sampel Ekstrak Tin dan Minyak Zaitun
Menimbang ± 10 mg sampel di larutkan dalam 100 µl DMSO
= 10 mg/100 µl
= 10000 µg/100 µl
= 100.000 µg/mL
3. Preparasi Stok Sampel
Pembuatan Stok Sampel Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun
Konsentrasi sampel = 100.000 µg/mL
= V1 . N1 = V2 . N2
= 1000 µl . 1000 ppm = V2 . 100.000 ppm
V2 = 10 µl + 990 MK
Dengan konsentrasi berturut- turut = 1000 µg/ml ; 500 µg/ml ; 250 µg/ml ;
125 µg/ml ; 62,5 µg/ml ; 31,25 µg/ml ; 15,625 µg/µl
990µl
MK + 10 µl
Sampel 500 µl MK
(Ekstrak Buah Tin /Minyak Zaitun)
Pembuatan Larutan Stok Kontrol Positif Doxorubicin
Konsentrasi Doxorubicin = 2000 µg/mL (ppm)
V1 . N1 = V2 . N2
1 mL . 100 ppm = V2 . 2000 ppm
V2 = 50 µl + 950 MK
100
Dengan konsentrasi berturut- turut = 100 µg/ml ; 50 µg/ml ; 25 µg/ml ; 12,5
µg/ml ; 6,25 µg/ml ; 3,125 µg/ml ; 1,5625 µg/µl
950µl
MK + 50 µl
Doxorubicin 500 µl MK
Pembuatan Larutan Stok Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun
Perbandingan 1:3 dengan IC50 Ekstrak Buah Tin yang sudah diketahui
sebesar 13063,915 µg/mL dan Minyak Zaitun sebesar 679,593 µg/mL
Konsentrasi sampel (ekstrak buah tin dan minyak zaitun) = 100.000 µg/mL
- Ekstrak Buah Tin 25%
= V1 . N1 = V2 . N2
= 1000 µl . ( 25% IC50 Tin x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . (3265,9787 x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . 6531,9575 ppm = V2 . 100.000 ppm
V2 =
V2 = 65,32 µl
- Minyak Zaitun 75%
= V1 . N1 = V2 . N2
= 1000 µl . (75% IC50 Zaitun x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . (509,6947 x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . 1019,3895 ppm = V2 . 100.000 ppm
V2 =
V2 = 10,19 µl
101
Dengan konsentrasi berturut- turut = 1000 µg/µl ; 500 µg/µl ; 250 µg/µl ;
125 µg/µl ; 62,5 µg/µl ; 31,25 µg/µl ; 15,625 µg/µl
924,49 µl
MK +
(65,32 µl Ekstrak Buah Tin 500 µl MK
+ 10,19 µl Minyak Zaitun)
Pembuatan Larutan Stok Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun
Perbandingan 1:1 dengan IC50 Ekstrak Buah Tin yang sudah diketahui
sebesar 13063,915 µg/mL dan Minyak Zaitun sebesar 679,593 µg/mL
Konsentrasi sampel (ekstrak buah tin dan minyak zaitun) = 100.000 µg/mL
- Ekstrak Buah Tin 50%
= V1 . N1 = V2 . N2
= 1000 µl . (50% IC50 Tin x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . (6531,9575 x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . 13063,915 ppm = V2 . 100.000 ppm
V2 =
V2 = 130,64 µl
- Minyak Zaitun 50%
= V1 . N1 = V2 . N2
= 1000 µl . (50% IC50 Zaitun x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . (339,7965 x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . 679,593 ppm = V2 . 100.000 ppm
V2 =
V2 = 6,80 µl
102
Dengan konsentrasi berturut- turut = 1000 µg/µl ; 500 µg/µl ; 250 µg/µl
; 125 µg/µl ; 62,5 µg/µl ; 31,25 µg/µl ; 15,625 µg/µl
862,56 µl
MK +
(130,64 µl 500 µl MK
Ekstrak Buah Tin
+ 6,80 µl Minyak Zaitun)
Pembuatan Larutan Stok Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun
Perbandingan 3:1 dengan IC50 Ekstrak Buah Tin yang sudah diketahui
sebesar 13063,915 µg/mL dan Minyak Zaitun sebesar 679,593 µg/mL
Konsentrasi sampel (ekstrak buah tin dan minyak zaitun) = 100.000 µg/mL
- Ekstrak Buah Tin 75%
= V1 . N1 = V2 . N2
= 1000 µl . (75% IC50 Tin x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . (9797,9362 x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . 19595,8725 ppm = V2 . 100.000 ppm
V2 =
V2 = 195,96 µl
- Minyak Zaitun 25%
= V1 . N1 = V2 . N2
= 1000 µl . (25% IC50 Zaitun x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . (169,8982 x 2) = V2 . 100.000 ppm
= 1000 µl . 339,7965 ppm = V2 . 100.000 ppm
V2 =
V2 = 3,40 µl
103
Dengan konsentrasi berturut- turut = 1000 µg/µl ; 500 µg/µl ; 250 µg/µl ;
125 µg/µl ; 62,5 µg/µl ; 31,25 µg/µl ; 15,625 µg/µl
800,64 µl
MK +
(195,96 µl Ekstrak Buah Tin 500 µl MK
+ 3,40 µl Minyak Zaitun)
4. Hasil Absorbansi Ekstrak Buah Tin
Konsentrasi Absorbansi (ppm) Rata - Rata
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
A 0,407 0,416 0,404 0,409
B 0,400 0,413 0,421 0,411
C 0,441 0,440 0,454 0,445
D 0,422 0,453 0,454 0,443
E 0,430 0,435 0,453 0,439
F 0,426 0,443 0,443 0,437
G 0,443 0,447 0,465 0,452
H (Kontrol Sel) 0,414 0,453 0,454 0,440
Kontrol Media 0,080 0,082 0,090 0,084
5. Hasil Absorbansi Minyak Zaitun
Konsentrasi Absorbansi (ppm) Rata – Rata
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
A 0,157 0,160 0,180 0,129
B 0,781 0,789 0,590 0,538
C 0,891 0,918 0,849 0,938
D 0,943 0,966 0,783 0,963
E 1,013 0,950 0,849 1,020
F 0,866 0,892 0,832 1,021
G 0,921 0,928 0,809 1,009
H (Kontrol Sel) 0,817 0,814 0,793 0,808
Kontrol Media 0,089 0,099 0,092 0,093
104
6. Hasil Absorbansi Kontrol Positif Doxorubicin
Konsentrasi Absorbansi (ppm)
Rata – Rata Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
A 0,146 0,134 0,142 0,141
B 0,219 0,215 0,213 0,216
C 0,288 0,275 0,264 0,276
D 0,296 0,282 0,282 0,287
E 0,299 0,296 0,299 0,298
F 0,310 0,318 0,319 0,316
G 0,341 0,325 0,328 0,331
H (Kontrol Sel) 0,414 0,453 0,454 0,440
Kontrol Media 0,080 0,082 0,090 0,084
7. Hasil Absorbansi Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun 1:3
Konsentrasi Absorbansi (ppm)
Rata – Rata Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
A 0,408 0,410 0,401 0,406
B 0,822 0,930 0,815 0,856
C 0,708 0,685 0,622 0,672
D 0,680 0,708 0,665 0,684
E 0,658 0,653 0,668 0,660
F 0,671 0,668 0,707
0,682
G 0,675 0,668 0,663
0,669
H (Kontrol Sel) 0,607 0,665
0,666 0,646
Kontrol Media
0,083 0,089 0,090 0,087
8. Hasil Absorbansi Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun 1:1
Konsentrasi Absorbansi (ppm) Rata – Rata
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
A 0,332 0,337 0,371 0,334
B 0,377 0,430 0,450 0,403
C 0,662 0,641 0,638 0,640
D 0,709 0,682 0,759 0,696
E 0,664 0,651 0,736 0,658
F 0,736 0,729 0,683 0,706
G 0,675 0,668 0,722 0,672
105
H (Kontrol Sel) 0,658 0,701 0,638 0,666
Kontrol Media 0,083 0,089 0,090 0,087
9. Hasil Absorbansi Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun 3:1
Konsentrasi Absorbansi (ppm) Rata – Rata
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
A 0,148 0,275 0,144 0,146
B 0,459 0,593 0,555 0,507
C 0,524 0,619 0,891 0,572
D 0,519 0,650 0,610 0,565
E 0,572 0,671 0,684 0,622
F 0,562 0,661 0,675 0,612
G 0,591 0,742 0,689 0,640
H (Kontrol Sel) 0,658 0,701 0,638 0,666
Kontrol Media 0,083 0,089 0,090 0,087
10. Perhitungan Presentase Sel Hidup dan Analisis Harga IC50
sel hidup =(Absorbansi perlakuan Absorbansi kontrol media)
(Absorbansi kontrol sel Absorbansi kontrol media) x 100
Presentase Hidup Sel HeLa pada Ekstrak Buah Tin
% sel hidup (A) =
x 100% = 91,2067
% sel hidup (B) =
x 100% = 91,8616
% sel hidup (C) =
x 100% = 101,3096
% sel hidup (D) =
x 100% = 100,7484
% sel hidup (E) =
x 100% = 99,7194
% sel hidup (F) =
x 100% = 99,1581
% sel hidup (G) =
x 100% = 103,1805
106
Presentase Hidup Sel HeLa pada Minyak Zaitun
% sel hidup (A) =
x 100% = 10,1213
% sel hidup (B) =
x 100% = 87,6866
% sel hidup (C) =
x 100% = 110,9142
% sel hidup (D) =
x 100% = 112,5000
% sel hidup (E) =
x 100% = 118,0970
% sel hidup (F) =
x 100% = 107,7425
% sel hidup (G) =
x 100% = 110,9142
Presentase Hidup Sel HeLa pada Kontrol Positif Doxorubicin
% sel hidup (A) =
x 100% = 15,9027
% sel hidup (B) =
x 100% = 36,9504
% sel hidup (C) =
x 100% = 53,7886
% sel hidup (D) =
x 100% = 56,8756
% sel hidup (E) =
x 100% = 60,0561
% sel hidup (F) =
x 100% = 65,0140
% sel hidup (G) =
x 100% = 69,4107
Presentase Hidup Sel HeLa pada Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak
Zaitun Perbandingan 1:3
% sel hidup (A) =
x 100% = 57,1002
107
% sel hidup (B) =
x 100% = 137,5298
% sel hidup (C) =
x 100% = 104,5943
% sel hidup (D) =
x 100% = 106,8616
% sel hidup (E) =
x 100% = 102,4463
% sel hidup (F) =
x 100% = 106,4439
% sel hidup (G) =
x 100% = 104,0573
Presentase Hidup Sel HeLa pada Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak
Zaitun Perbandingan 1:1
% sel hidup (A) =
x 100% = 42,7089
% sel hidup (B) =
x 100% = 54,5821
% sel hidup (C) =
x 100% = 95,4755
% sel hidup (D) =
x 100% = 105,1585
% sel hidup (E) =
x 100% = 98,5879
% sel hidup (F) =
x 100% = 106,9741
% sel hidup (G) =
x 100% = 101,0086
Presentase Hidup Sel HeLa Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak
Zaitun Perbandingan 3:1
% sel hidup (A) =
x 100% = 10,1441
% sel hidup (B) =
x 100% = 72,5648
108
% sel hidup (C) =
x 100% = 83,7176
% sel hidup (D) =
x 100% = 82,5072
% sel hidup (E) =
x 100% = 92,3631
% sel hidup (F) =
x 100% = 90,6340
% sel hidup (G) =
x 100% = 95,5620
11. Kurva % Sel Hidup Sel HeLa pada Ekstrak Buah Tin, Minyak Zaitun,
Doxorubicin, Serta Kombinasi Perbandingan 1:3 ; 1:1; 3:1
Kurva % Hidup Sel HeLa pada Ekstrak Buah Tin
Konsentrasi
(ppm)
% Sel
Hidup
1000 91,2067
500 91,8616
250 101,3096
125 100,7484
62,5 99,7194
31,25 99,1581
15,625 103,1805
Kurva % Hidup Sel HeLa pada Minyak Zaitun
Konsentrasi
(ppm)
% Sel
Hidup
1000 10,1213
500 87,6866
250 110,9142
125 112,5000
62,5 118,0970
31,25 107,7425
15,625 110,9142
y = -0,0114x + 101,41 R² = 0,7544
88
90
92
94
96
98
100
102
104
0 500 1000 1500
% S
el H
idup
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Hidup Sel HeLa pada
Ekstrak Buah Tin
% Sel Hidup
Linear (% SelHidup)
y = -0,1016x + 122,79 R² = 0,9079
0
20
40
60
80
100
120
140
0 500 1000 1500
% S
el H
idup
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Hidup Sel HeLa pada
Minyak Zaitun
% Sel Hidup
Linear (% SelHidup)
109
Kurva % Hidup Sel HeLa pada Kontrol Positif Doxorubicin
Konsentrasi
(ppm)
% Sel
Hidup
100 15,9027
50 36,9504
25 53,7886
12,5 56,8756
6,25 60,0561
3,125 65,0140
1,5625 69,4107
Kurva % Hidup Sel HeLa pada Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak
Zaitun Perbandingan 1:3
Konsentrasi
(ppm)
% Sel
Hidup
1000 57,1002
500 137,5298
250 104,5943
125 106,8616
62,5 102,4463
31,25 106,4439
15,625 104,0573
y = -0,5149x + 65,738 R² = 0,9782
0
10
20
30
40
50
60
70
80
0 50 100 150
% S
el H
idup
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Hidup Sel HeLa pada
Kontrol Positif Doxorubicin
% Sel Hidup
Linear (% SelHidup)
y = -0,0352x + 112,69 R² = 0,2864
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 500 1000 1500
% S
el H
idu
p
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Hidup Sel HeLa pada Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 1:3
% Sel Hidup
Linear (% SelHidup)
110
Kurva % Hidup Sel HeLa pada Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak
Zaitun Perbandingan 1:1
Konsentrasi
(ppm)
% Sel
Hidup
1000 42,7089
500 54,5821
250 95,4755
125 105,1585
62,5 98,5879
31,25 106,9741
15,625 101,0086
Kurva % Hidup Sel HeLa pada Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak
Zaitun Perbandingan 3:1
Konsentrasi
(ppm)
% Sel
Hidup
1000 10,1441
500 72,5648
250 83,7176
125 82,5072
62,5 92,3631
31,25 90,6340
15,625 95,5620
y = -0,0801x + 98,075 R² = 0,9318
0
20
40
60
80
100
120
0 500 1000 1500
% S
el H
idu
p
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Hidup Sel HeLa pada Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 3:1
% Sel Hidup
Linear (% SelHidup)
y = -0,0691x + 105,95 R² = 0,8891
0
20
40
60
80
100
120
0 500 1000 1500
% S
el H
idu
p
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Hidup Sel HeLa pada Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 1:1
% Sel Hidup
Linear (% SelHidup)
111
Lampiran 9. Hasil Pembacaan SPSS Probit Ekstrak Buah Tin
Confidence Limits
Proba
bility
95% Confidence Limits for konsentrasi
95% Confidence Limits for
log(konsentrasi)b
Estimate Lower Bound Upper Bound Estimate Lower Bound Upper Bound
PROBITa 0.01 1.267E6 27231.252 1.948E46 6.103 4.435 46.290
0.02 7.412E5 20531.257 2.170E43 5.870 4.312 43.337
0.03 5.275E5 17158.524 2.904E41 5.722 4.234 41.463
0.04 4.084E5 14989.331 1.132E40 5.611 4.176 40.054
0.05 3.317E5 13427.238 8.079E38 5.521 4.128 38.907
0.06 2.779E5 12225.501 8.545E37 5.444 4.087 37.932
0.07 2.379E5 11259.821 1.192E37 5.376 4.052 37.076
0.08 2.070E5 10459.426 2.043E36 5.316 4.020 36.310
0.09 1.824E5 9780.474 4.110E35 5.261 3.990 35.614
0.1 1.624E5 9194.072 9.390E34 5.210 3.964 34.973
0.15 1.003E5 7113.561 2.082E32 5.001 3.852 32.318
0.2 68360.498 5796.888 1.619E30 4.835 3.763 30.209
0.25 49212.729 4859.971 2.512E28 4.692 3.687 28.400
0.3 36635.616 4145.619 5.965E26 4.564 3.618 26.776
0.35 27869.631 3575.290 1.865E25 4.445 3.553 25.271
0.4 21499.480 3104.528 6.964E23 4.332 3.492 23.843
0.45 16725.775 2705.880 2.896E22 4.223 3.432 22.462
0.5 13063.915 2361.241 1.268E21 4.116 3.373 21.103
0.55 10203.765 2058.008 5.559E19 4.009 3.313 19.745
0.6 7938.139 1786.961 2.321E18 3.900 3.252 18.366
0.65 6123.722 1540.986 8.728E16 3.787 3.188 16.941
0.7 4658.469 1314.202 2.759E15 3.668 3.119 15.441
0.75 3467.921 1101.191 6.670E13 3.540 3.042 13.824
0.8 2496.557 895.959 1.066E12 3.397 2.952 12.028
0.85 1702.060 689.471 8.783E9 3.231 2.839 9.944
112
0.9 1051.109 459.464 2.260E7 3.022 2.662 7.354
0.91 935.597 405.070 5507034.389 2.971 2.608 6.741
0.92 824.448 344.667 1217190.431 2.916 2.537 6.085
0.93 717.414 275.252 242713.339 2.856 2.440 5.385
0.94 614.214 192.956 44483.453 2.788 2.285 4.648
0.95 514.509 99.260 8327.191 2.711 1.997 3.920
0.96 417.844 24.885 2124.300 2.621 1.396 3.327
0.97 323.522 1.981 908.198 2.510 .297 2.958
0.98 230.252 .038 531.563 2.362 -1.422 2.726
0.99 134.712 .000 327.446 2.129 -4.287 2.515
a. A heterogeneity factor is used.
b. Logarithm base = 10.
113
Lampiran 10. Hasil Pembacaan SPSS Probit Minyak Zaitun
Confidence Limits
Proba
bility
95% Confidence Limits for konsentrasi
95% Confidence Limits for
log(konsentrasi)b
Estimate Lower Bound Upper Bound Estimate Lower Bound Upper Bound
PROBITa 0.01 2446.230 1355.043 25869.720 3.388 3.132 4.413
0.02 2105.313 1227.755 17501.652 3.323 3.089 4.243
0.03 1914.087 1152.387 13668.900 3.282 3.062 4.136
0.04 1781.771 1098.213 11355.233 3.251 3.041 4.055
0.05 1680.918 1055.637 9768.930 3.226 3.024 3.990
0.06 1599.586 1020.389 8597.211 3.204 3.009 3.934
0.07 1531.519 990.192 7688.097 3.185 2.996 3.886
0.08 1473.034 963.686 6957.617 3.168 2.984 3.842
0.09 1421.785 939.994 6355.085 3.153 2.973 3.803
0.1 1376.189 918.516 5847.858 3.139 2.963 3.767
0.15 1202.453 832.587 4154.583 3.080 2.920 3.619
0.2 1080.158 767.061 3178.523 3.033 2.885 3.502
0.25 985.201 712.104 2536.265 2.994 2.853 3.404
0.3 907.062 663.154 2080.148 2.958 2.822 3.318
0.35 840.199 617.601 1740.023 2.924 2.791 3.241
0.4 781.315 573.712 1477.969 2.893 2.759 3.170
0.45 728.275 530.219 1271.578 2.862 2.724 3.104
0.5 679.593 486.181 1106.669 2.832 2.687 3.044
0.55 634.165 440.988 973.659 2.802 2.644 2.988
0.6 591.114 394.440 865.551 2.772 2.596 2.937
0.65 549.687 346.792 776.783 2.740 2.540 2.890
0.7 509.167 298.679 702.619 2.707 2.475 2.847
0.75 468.784 250.880 638.893 2.671 2.399 2.805
0.8 427.573 204.057 581.870 2.631 2.310 2.765
114
0.85 384.087 158.529 527.918 2.584 2.200 2.723
0.9 335.598 114.044 472.583 2.526 2.057 2.674
0.91 324.835 105.178 460.745 2.512 2.022 2.663
0.92 313.534 96.281 448.433 2.496 1.984 2.652
0.93 301.561 87.320 435.493 2.479 1.941 2.639
0.94 288.729 78.252 421.712 2.460 1.893 2.625
0.95 274.758 69.011 406.774 2.439 1.839 2.609
0.96 259.206 59.496 390.175 2.414 1.774 2.591
0.97 241.288 49.534 371.019 2.383 1.695 2.569
0.98 219.372 38.778 347.425 2.341 1.589 2.541
0.99 188.799 26.307 313.914 2.276 1.420 2.497
a. A heterogeneity factor is used.
b. Logarithm base = 10.
115
Lampiran 11. Hasil Pembacaan SPSS Probit Kontrol Positif Doxorubicin
Confidence Limits
Proba
bility
95% Confidence Limits for konsentrasi
95% Confidence Limits for
log(konsentrasi)b
Estimate Lower Bound Upper Bound Estimate Lower Bound Upper Bound
PROBITa 0.01 29181.560 1883.374 1.761E8 4.465 3.275 8.246
0.02 11888.196 1037.683 2.661E7 4.075 3.016 7.425
0.03 6724.782 710.103 8033512.370 3.828 2.851 6.905
0.04 4380.669 533.406 3265162.545 3.642 2.727 6.514
0.05 3091.233 422.393 1570786.376 3.490 2.626 6.196
0.06 2297.519 346.130 843045.183 3.361 2.539 5.926
0.07 1771.181 290.549 488738.390 3.248 2.463 5.689
0.08 1403.100 248.298 300091.339 3.147 2.395 5.477
0.09 1135.205 215.147 192654.231 3.055 2.333 5.285
0.1 934.061 188.487 128164.499 2.970 2.275 5.108
0.15 416.579 108.450 23827.664 2.620 2.035 4.377
0.2 219.276 69.287 6311.683 2.341 1.841 3.800
0.25 126.440 46.676 2040.838 2.102 1.669 3.310
0.3 77.119 32.269 751.138 1.887 1.509 2.876
0.35 48.774 22.442 303.846 1.688 1.351 2.483
0.4 31.578 15.380 133.078 1.499 1.187 2.124
0.45 20.735 10.110 63.186 1.317 1.005 1.801
0.5 13.707 6.159 32.976 1.137 .790 1.518
0.55 9.060 3.380 19.107 .957 .529 1.281
0.6 5.949 1.665 12.106 .774 .221 1.083
0.65 3.852 .746 8.109 .586 -.127 .909
0.7 2.436 .306 5.564 .387 -.514 .745
0.75 1.486 .114 3.815 .172 -.945 .582
0.8 .857 .037 2.557 -.067 -1.433 .408
116
0.85 .451 .010 1.628 -.346 -2.008 .212
0.9 .201 .002 .934 -.697 -2.738 -.030
0.91 .165 .001 .818 -.781 -2.915 -.087
0.92 .134 .001 .709 -.873 -3.107 -.150
0.93 .106 .000 .605 -.974 -3.319 -.218
0.94 .082 .000 .508 -1.087 -3.555 -.294
0.95 .061 .000 .416 -1.216 -3.825 -.381
0.96 .043 .000 .329 -1.368 -4.143 -.482
0.97 .028 .000 .247 -1.554 -4.534 -.607
0.98 .016 .000 .169 -1.801 -5.054 -.772
0.99 .006 .000 .093 -2.191 -5.875 -1.031
a. A heterogeneity factor is used.
b. Logarithm base = 10.
117
Lampiran 12. Hasil Pembacaan SPSS Probit Kombinasi Ekstrak Buah Tin
dan Minyak Zaitun Perbandingan 1:3
Confidence Limits
Proba
bility
95% Confidence Limits for konsentrasi
95% Confidence Limits for
log(konsentrasi)b
Estimate Lower Bound Upper Bound Estimate Lower Bound Upper Bound
PROBITa 0.01 13591.902 3246.776 2.560E11 4.133 3.511 11.408
0.02 10548.497 2818.935 4.922E10 4.023 3.450 10.692
0.03 8981.363 2576.172 1.730E10 3.953 3.411 10.238
0.04 7957.892 2406.830 7.878E9 3.901 3.381 9.896
0.05 7212.028 2276.911 4.156E9 3.858 3.357 9.619
0.06 6632.518 2171.554 2.412E9 3.822 3.337 9.382
0.07 6162.844 2082.939 1.497E9 3.790 3.319 9.175
0.08 5770.600 2006.453 9.766E8 3.761 3.302 8.990
0.09 5435.589 1939.148 6.624E8 3.735 3.288 8.821
0.1 5144.429 1879.025 4.634E8 3.711 3.274 8.666
0.15 4095.865 1647.558 1.057E8 3.612 3.217 8.024
0.2 3417.200 1481.808 3.269E7 3.534 3.171 7.514
0.25 2925.324 1350.943 1.196E7 3.466 3.131 7.078
0.3 2544.252 1241.344 4858640.023 3.406 3.094 6.687
0.35 2235.591 1145.709 2111853.417 3.349 3.059 6.325
0.4 1977.401 1059.553 959876.299 3.296 3.025 5.982
0.45 1756.016 979.788 448781.197 3.245 2.991 5.652
0.5 1562.356 904.003 213107.683 3.194 2.956 5.329
0.55 1390.053 830.014 101691.837 3.143 2.919 5.007
0.6 1234.427 755.434 48306.263 3.091 2.878 4.684
0.65 1091.861 677.076 22654.936 3.038 2.831 4.355
0.7 959.400 589.807 10433.291 2.982 2.771 4.018
0.75 834.422 484.313 4741.735 2.921 2.685 3.676
118
0.8 714.315 345.889 2215.398 2.854 2.539 3.345
0.85 595.956 179.242 1189.397 2.775 2.253 3.075
0.9 474.485 54.571 781.103 2.676 1.737 2.893
0.91 449.069 39.618 729.319 2.652 1.598 2.863
0.92 422.999 27.756 682.378 2.626 1.443 2.834
0.93 396.076 18.633 638.844 2.598 1.270 2.805
0.94 368.029 11.861 597.456 2.566 1.074 2.776
0.95 338.456 7.041 556.996 2.530 .848 2.746
0.96 306.734 3.792 516.106 2.487 .579 2.713
0.97 271.780 1.761 472.929 2.434 .246 2.675
0.98 231.403 .631 424.157 2.364 -.200 2.628
0.99 179.589 .124 361.033 2.254 -.908 2.558
a. A heterogeneity factor is used.
b. Logarithm base = 10.
119
Lampiran 13. Hasil Pembacaan SPSS Probit Kombinasi Ekstrak Buah Tin
dan Minyak Zaitun Perbandingan 1:1
Confidence Limits
Proba
bility
95% Confidence Limits for konsentrasi
95% Confidence Limits for
log(konsentrasi)b
Estimate Lower Bound Upper Bound Estimate Lower Bound Upper Bound
PROBITa 0.01 5589.767 2313.729 84835.954 3.747 3.364 4.929
0.02 4415.354 1971.718 51911.292 3.645 3.295 4.715
0.03 3801.702 1780.359 38034.745 3.580 3.251 4.580
0.04 3396.961 1648.118 30111.361 3.531 3.217 4.479
0.05 3099.734 1547.387 24907.634 3.491 3.190 4.396
0.06 2867.326 1466.175 21198.216 3.457 3.166 4.326
0.07 2677.933 1398.207 18406.853 3.428 3.146 4.265
0.08 2518.993 1339.794 16223.728 3.401 3.127 4.210
0.09 2382.650 1288.589 14466.202 3.377 3.110 4.160
0.1 2263.679 1243.004 13019.083 3.355 3.094 4.115
0.15 1831.101 1068.885 8430.320 3.263 3.029 3.926
0.2 1547.079 945.504 5984.384 3.190 2.976 3.777
0.25 1338.792 848.770 4472.143 3.127 2.929 3.651
0.3 1175.757 768.114 3452.885 3.070 2.885 3.538
0.35 1042.459 697.891 2726.107 3.018 2.844 3.436
0.4 929.973 634.655 2187.197 2.968 2.803 3.340
0.45 832.708 576.066 1776.217 2.920 2.760 3.249
0.5 746.923 520.387 1456.412 2.873 2.716 3.163
0.55 669.976 466.246 1204.034 2.826 2.669 3.081
0.6 599.904 412.556 1003.030 2.778 2.615 3.001
0.65 535.171 358.582 841.982 2.728 2.555 2.925
0.7 474.498 304.116 712.155 2.676 2.483 2.853
0.75 416.714 249.626 606.215 2.620 2.397 2.783
0.8 360.611 196.165 517.509 2.557 2.293 2.714
120
0.85 304.677 144.971 439.709 2.484 2.161 2.643
0.9 246.455 96.947 366.128 2.392 1.987 2.564
0.91 234.149 87.748 351.169 2.369 1.943 2.546
0.92 221.475 78.675 335.890 2.345 1.896 2.526
0.93 208.330 69.716 320.139 2.319 1.843 2.505
0.94 194.569 60.854 303.704 2.289 1.784 2.482
0.95 179.981 52.059 286.282 2.255 1.716 2.457
0.96 164.233 43.285 267.400 2.215 1.636 2.427
0.97 146.748 34.450 246.234 2.167 1.537 2.391
0.98 126.353 25.383 221.092 2.102 1.405 2.345
0.99 99.806 15.634 187.180 1.999 1.194 2.272
a. A heterogeneity factor is used.
b. Logarithm base = 10.
121
Lampiran 14. Hasil Pembacaan SPSS Probit Kombinasi Ekstrak Buah Tin
dan Minyak Zaitun Perbandingan 3:1
Confidence Limits
Proba
bility
95% Confidence Limits for konsentrasi
95% Confidence Limits for
log(konsentrasi)b
Estimate Lower Bound Upper Bound Estimate Lower Bound Upper Bound
PROBITa 0.01 27751.450 2967.137 8.478E11 4.443 3.472 11.928
0.02 17578.604 2268.664 1.081E11 4.245 3.356 11.034
0.03 13157.354 1910.871 2.930E10 4.119 3.281 10.467
0.04 10580.891 1677.994 1.098E10 4.025 3.225 10.041
0.05 8862.061 1508.708 4.948E9 3.948 3.179 9.694
0.06 7620.901 1377.436 2.511E9 3.882 3.139 9.400
0.07 6676.528 1271.210 1.386E9 3.825 3.104 9.142
0.08 5930.701 1182.609 8.144E8 3.773 3.073 8.911
0.09 5324.994 1107.013 5.023E8 3.726 3.044 8.701
0.1 4822.273 1041.366 3.221E8 3.683 3.018 8.508
0.15 3198.463 805.240 5.135E7 3.505 2.906 7.711
0.2 2307.947 652.362 1.201E7 3.363 2.814 7.079
0.25 1744.402 541.149 3473263.282 3.242 2.733 6.541
0.3 1356.640 454.351 1148152.198 3.132 2.657 6.060
0.35 1074.710 383.209 415072.060 3.031 2.583 5.618
0.4 861.564 322.650 159717.823 2.935 2.509 5.203
0.45 695.669 269.429 64279.103 2.842 2.430 4.808
0.5 563.626 221.293 26759.721 2.751 2.345 4.427
0.55 456.645 176.610 11464.915 2.660 2.247 4.059
0.6 368.718 134.299 5066.883 2.567 2.128 3.705
0.65 295.591 94.197 2340.483 2.471 1.974 3.369
0.7 234.163 57.946 1160.071 2.370 1.763 3.064
0.75 182.111 29.354 635.599 2.260 1.468 2.803
0.8 137.644 11.555 387.425 2.139 1.063 2.588
122
0.85 99.321 3.328 254.816 1.997 .522 2.406
0.9 65.876 .611 171.128 1.819 -.214 2.233
0.91 59.657 .401 157.368 1.776 -.397 2.197
0.92 53.564 .252 144.199 1.729 -.598 2.159
0.93 47.581 .151 131.471 1.677 -.820 2.119
0.94 41.685 .085 119.025 1.620 -1.070 2.076
0.95 35.847 .044 106.681 1.554 -1.356 2.028
0.96 30.023 .020 94.209 1.477 -1.695 1.974
0.97 24.144 .008 81.258 1.383 -2.113 1.910
0.98 18.072 .002 67.185 1.257 -2.672 1.827
0.99 11.447 .000 50.301 1.059 -3.557 1.702
a. A heterogeneity factor is used.
b. Logarithm base = 10.
Lampiran 15. Perhitungan Indeks Kombinasi
Rumus persamaan indeks kombinasi :
Harga IC50 :
- Ekstrak Buah Tin = 13063,915 µg/mL
- Minyak Zaitun = 679,593 µg/mL
- 1 : 3 = 1562,356 µg/mL
- 1 : 1 = 746,923 µg/mL
- 3 : 1 = 563,626 µg/mL
Perhitungan :
1. Kombinasi perbandingan 1:3
=
= 2,42
IK = (D)1/(Dx)1 + (D)2/(Dx)2
123
2. Kombinasi perbandingan 1:1
=
= 1,16
3. Kombinasi perbandingan 1:1
=
= 0,87
Lampiran 16. Uji Antioksidan
1. Perhitungan Uji Antioksidan
Pembuatan Larutan DPPH
Membuat larutan DPPH (1,1 difenil-2-pikrilhidrazil) 1000 ppm dengan cara
menimbang serbuk DPPH 10 mg kemudian dimasukkan dalam labu ukur 10
mL dan diencerkan dengan etanol pa sampai tanda batas labu ukur. Kemudian
ambil 1 ml dari larutan induk lalu dilarutkan dengan etanol pa sampai batas
labu ukur 10 mL. Labu ukur dilapisi dengan aluminium foil dan di simpan
dalam lemari tertutup agar terhindar dari cahaya.
Perhitungan Uji Antioksidan Ekstrak Buah Tin
Diketahui IC50 Ekstrak Buah Tin sebesar 13063,915 µg/mL
Perhitungan
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . (13063,915 ppm x 2) = V2 . 100.000 ppm
V2 = 2.612,78 µl
V1 . N1 = V2 . N2
2.612,78 µl . 100.000 ppm = 10.000 µl . N2
124
N2 = 2.6127,8 ppm
Konsentrasi 5 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 5 ppm = V2 . 2.6127,8 ppm
V2 = 1,9 µl 2 µl
Konsentrasi 10 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 10 ppm = V2 . 2.6127,8 ppm
V2 = 3,8 µl 4 µl
Konsentrasi 15 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 15 ppm = V2 . 2.6127,8 ppm
V2 = 5,7 µl 6 µl
Konsentrasi 20 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 20 ppm = V2 . 2.6127,8 ppm
V2 = 7,6 µl 8 µl
Konsentrasi 25 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 25 ppm = V2 . 2.6127,8 ppm
V2 = 9,6 µl 10 µl
125
Uji Antioksidan Minyak Zaitun
Diketahui IC50 Minyak Zaitun sebesar 679,593 µg/mL
Perhitungan
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . (679,593 ppm x 2) = V2 . 100.000 ppm
V2 = 135,92 µl
V1 . N1 = V2 . N2
135,92 µl . 100.000 ppm = 10.000 µl . N2
N2 = 1359,2 ppm
Konsentrasi 5 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 5 ppm = V2 . 1359,2 ppm
V2 = 36,8 µl
Konsentrasi 10 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 10 ppm = V2 . 1359,2 ppm
V2 = 73,6 µl
Konsentrasi 15 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 15 ppm = V2 . 1359,2 ppm
V2 = 110,4 µl
Konsentrasi 20 ppm
126
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 20 ppm = V2 . 1359,2 ppm
V2 = 147,1 µl
Konsentrasi 25 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 25 ppm = V2 . 1359,2 ppm
V2 = 183,9 µl
Uji Antioksidan Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun
Perbandingan 3:1
Diketahui IC50 kombinasi ekstrak buah tin dan minyak zaitun perbandingan 3:1
sebesar 563,626 µg/mL
Perhitungan 75% Ekstrak Buah Tin
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . (75% IC50 kombinasi x 2) = V2 . 100.000 ppm
10.000 µl . (422,7195 ppm x 2) = V2 . 100.000 ppm
V2 = 84,54 µl
Perhitungan 25% Minyak Zaitun
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . (25% IC50 kombinasi x 2) = V2 . 100.000 ppm
10.000 µl . (140,9065 x 2) = V2 . 100.000 ppm
V2 = 28,18 µl
V1 . N1 = V2 . N2
127
112,72 µl . 100.000 ppm = 10.000 µl . N2
N2 = 1127,2 ppm
Konsentrasi 5 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 5 ppm = V2 . 1127,2 ppm
V2 = 44,4 µl
Konsentrasi 10 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 10 ppm = V2 . 1127,2 ppm
V2 = 388,7 µl
Konsentrasi 15 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 15 ppm = V2 . 1127,2 ppm
V2 = 133,1 µl
Konsentrasi 20 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 20 ppm = V2 . 1127,2 ppm
V2 = 177,4 µl
Konsentrasi 25 ppm
V1 . N1 = V2 . N2
10.000 µl . 25 ppm = V2 . 1127,2 ppm
V2 = 221,8 µl
128
2. Hasil Absorbansi Ekstrak Buah Tin, Minyak Zaitun, dan Kombinasi 3:1
Hasil Absorbansi Ekstrak Buah Tin
Konsentrasi (ppm)
Absorbansi Ekstrak Buah Tin
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
5 ppm 0,9721 0,9720 0,9739
10 ppm 0,9466 0,9461 0,9465
15 ppm 0,9253 0,9250 0,9251
20 ppm 0,9171 0,9171 0,9175
25 ppm 0,8993 0,8991 0,8991
DPPH 1,2236
Hasil Absorbansi Minyak Zaitun
Konsentrasi (ppm)
Absorbansi Ekstrak Minyak Zaitun
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
5 ppm 0,7346 0,7328 0,7321
10 ppm 0,7251 0,7235 0,7219
15 ppm 0,6663 0,6674 0,6670
20 ppm 0,6242 0,6269 0,6226
25 ppm 0,6037 0,6030 0,6021
DPPH 1,2236
129
Hasil Absorbansi Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun
Perbandingan 3:1
Konsentrasi (ppm)
Absorbansi Ekstrak Minyak Zaitun
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
5 ppm 0,6435 0,6436 0,6436
10 ppm 0,6352 0,6342 0,6345
15 ppm 0,6235 0,6234 0,6234
20 ppm 0,6156 0,6156 0,6155
25 ppm 0,6028 0,6029 0,6028
DPPH 1,2236
3. Perhitungan Persen Inhibisi Ekstrak Buah Tin, Minyak Zaitun, dan
Kombinasi 3:1
Aktivitas penangkal radikal bebas (%) =
x100%
Perhitungan Persen Inhibisi Ekstrak Buah Tin
Replikasi 1
% Inhibisi 5 ppm =
x 100% = 20,5541
% Inhibisi 10 ppm =
x 100% = 22,6381
% Inhibisi 15 ppm =
x 100% = 24,3789
% Inhibisi 20 ppm =
x 100% = 25,0490
% Inhibisi 25 ppm =
x 100% = 26,5038
Replikasi 2
% Inhibisi 5 ppm =
x 100% = 20,5623
130
% Inhibisi 10 ppm =
x 100% = 22,6790
% Inhibisi 15 ppm =
x 100% = 24,4034
% Inhibisi 20 ppm =
x 100% = 25,0490
% Inhibisi 25 ppm =
x 100% = 26,5201
Replikasi 3
% Inhibisi 5 ppm =
x 100% = 20,4070
% Inhibisi 10 ppm =
x 100% = 22,6463
% Inhibisi 15 ppm =
x 100% = 24,3952
% Inhibisi 20 ppm =
x 100% = 25,0163
% Inhibisi 25 ppm =
x 100% = 26,5201
Konsentrasi
(ppm)
% Inhibisi Ekstrak Buah Tin Rerata %
Inhibisi SD
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
5 ppm 20,5541 20,5623 20,4070 20,5078
0,0874
10 ppm 22,6381 22,6790 22,6463 22,6545
0,0216
15 ppm 24,3789 24,4034 24,3952 24,3925
0,0125
20 ppm 25,0490 25,0490 25,0163 25,0381
0,0189
25 ppm 26,5038 26,5201 26,5201 26,5147
0,0094
Perhitungan Persen Inhibisi Minyak Zaitun
Aktivitas penangkal radikal bebas (%) =
x100%
Replikasi 1
% Inhibisi 5 ppm =
x 100% = 39,9640
131
% Inhibisi 10 ppm =
x 100% = 40,7404
% Inhibisi 15 ppm =
x 100% = 45,5459
% Inhibisi 20 ppm =
x 100% = 48,9866
% Inhibisi 25 ppm =
x 100% = 50,6620
Replikasi 2
% Inhibisi 5 ppm =
x 100% = 40,1111
% Inhibisi 10 ppm =
x 100% = 40,8712
% Inhibisi 15 ppm =
x 100% = 45,4560
% Inhibisi 20 ppm =
x 100% = 48,7659
% Inhibisi 25 ppm =
x 100% = 50,7192
Replikasi 3
% Inhibisi 5 ppm =
x 100% = 40,1684
% Inhibisi 10 ppm =
x 100% = 41,0020
% Inhibisi 15 ppm =
x 100% = 45,4887
% Inhibisi 20 ppm =
x 100% = 49,1174
% Inhibisi 25 ppm =
x 100% = 50,7927
132
Konsentrasi
(ppm)
% Inhibisi Minyak Zaitun Rerata %
Inhibisi SD
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
5 ppm 39,9640 40,1111 40,1684 40,0812
0,1054
10 ppm 40,7404 40,8712 41,0020 40,8712
0,1308
15 ppm 45,5459 45,4560 45,4887 45,4969
0,0455
20 ppm 48,9866 48,7659 49,1174 48,9566
0,1776
25 ppm 50,6620 50,7192 50,7927 50,7246
0,0656
Perhitungan Persen Inhibisi Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak
Zaitun Perbandingan 3:1
Aktivitas penangkal radikal bebas (%) =
x100%
Replikasi 1
% Inhibisi 5 ppm =
x 100% = 47,4093
% Inhibisi 10 ppm =
x 100% = 48,0876
% Inhibisi 15 ppm =
x 100% = 49,0438
% Inhibisi 20 ppm =
x 100% = 49,6894
% Inhibisi 25 ppm =
x 100% = 50,7355
Replikasi 2
% Inhibisi 5 ppm =
x 100% = 47,4011
% Inhibisi 10 ppm =
x 100% = 48,1693
% Inhibisi 15 ppm =
x 100% = 49,0520
% Inhibisi 20 ppm =
x 100% = 49,6894
133
% Inhibisi 25 ppm =
x 100% = 50,7274
Replikasi 3
% Inhibisi 5 ppm =
x 100% = 47,4011
% Inhibisi 10 ppm =
x 100% = 48,1448
% Inhibisi 15 ppm =
x 100% = 49,0520
% Inhibisi 20 ppm =
x 100% = 49,6976
% Inhibisi 25 ppm =
x 100% = 50,7355
Konsentrasi
(ppm)
% Inhibisi Kombinasi 3:1 Rerata %
Inhibisi SD
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
5 ppm 47,4093 47,4011 47,4011 47,4038
0,0047
10 ppm 48,0876 48,1693 48,1448 48,1339
0,0419
15 ppm 49,0438 49,0520 49,0520 49,0493
0,0047
20 ppm 49,6894 49,6894 49,6976 49,6922
0,0047
25 ppm 50,7355 50,7274 50,7355 50,7328
0,0047
134
y = 0,2862x + 19,532 R² = 0,9711
0
5
10
15
20
25
30
0 10 20 30
% In
hib
isi
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Inhibisi Ekstrak Buah Tin Replikasi 1
% Inhibisi
Linear (% Inhibisi)
y = 0,2857x + 19,557 R² = 0,9693
0
5
10
15
20
25
30
0 10 20 30
% In
hib
isi
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Inhibisi Ekstrak Buah Tin Replikasi 2
% Inhibisi
Linear (% Inhibisi)
4. Kurva % Inhibisi Ekstrak Buah Tin, Minyak Zaitun, dan Kombinasi
Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 3:1
Kurva % Inhibisi Ekstrak Buah Tin
Replikasi 1
Konsentrasi
(ppm)
%
Inhibisi
5 ppm 20,5541
10 ppm 22,6381
15 ppm 24,3789
20 ppm 25,0490
25 ppm 26,5038
Replikasi 2
Konsentrasi
(ppm)
%
Inhibisi
5 ppm 20,5623
10 ppm 22,6790
15 ppm 24,4034
20 ppm 25,0490
25 ppm 26,5201
135
y = 0,2919x + 19,418 R² = 0,9651
0
5
10
15
20
25
30
0 10 20 30%
Inh
ibis
i
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Inhibisi Ekstrak Buah Tin Replikasi 3
% Inhibisi
Linear (% Inhibisi)
y = 0,5928x + 36,287 R² = 0,9593
0
10
20
30
40
50
60
0 10 20 30
% In
hib
isi
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Inhibisi Minyak Zaitun Replikasi 1
% Inhibisi
Linear (% Inhibisi)
y = 0,5822x + 36,451 R² = 0,9644
0
10
20
30
40
50
60
0 10 20 30
% In
hib
isi
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Inhibisi Minyak Zaitun Replikasi 2
% Inhibisi
Linear (% Inhibisi)
Replikasi 3
Konsentrasi
(ppm)
%
Inhibisi
5 ppm 20,4070
10 ppm 22,6463
15 ppm 24,3952
20 ppm 25,0163
25 ppm 26,5201
Kurva % Inhibisi Minyak Zaitun
Replikasi 1
Konsentrasi
(ppm)
%
Inhibisi
5 ppm 39,9640
10 ppm 40,7404
15 ppm 45,5459
20 ppm 48,9866
25 ppm 50,6620
Replikasi 2
Konsentrasi
(ppm)
%
Inhibisi
5 ppm 40,1111
10 ppm 40,8712
15 ppm 45,4560
20 ppm 48,7659
25 ppm 50,7192
136
y = 0,1651x + 46,517 R² = 0,9944
47
47,5
48
48,5
49
49,5
50
50,5
51
0 10 20 30
% In
hib
isi
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Inhibisi Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 3:1 Replikasi 1
% Inhibisi
Linear (% Inhibisi)
y = 0,5873x + 36,505 R² = 0,9625
0
10
20
30
40
50
60
0 10 20 30
% In
hib
isi
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Inhibisi Minyak Zaitun Replikasi 3
% Inhibisi
Linear (% Inhibisi)
Replikasi 3
Konsentrasi
(ppm)
%
Inhibisi
5 ppm 40,1684
10 ppm 41,0020
15 ppm 45,4887
20 ppm 49,1174
25 ppm 50,7927
Kurva % Inhibisi Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun
Perbandingan 3:1
Replikasi 1
Konsentrasi
(ppm)
%
Inhibisi
5 ppm 47,4093
10 ppm 48,0876
15 ppm 49,0438
20 ppm 49,6894
25 ppm 50,7355
137
y = 0,1635x + 46,556 R² = 0,9957
47
47,5
48
48,5
49
49,5
50
50,5
51
0 10 20 30
% In
hib
isi
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Inhibisi Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 3:1 Replikasi 2
% Inhibisi
Linear (% Inhibisi)
y = 0,1644x + 46,54 R² = 0,9957
47
47,5
48
48,5
49
49,5
50
50,5
51
0 10 20 30
% In
hib
isi
Konsentrasi (ppm)
Kurva % Inhibisi Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 3:1 Replikasi 3
% Inhibisi
Linear (% Inhibisi)
Replikasi 2
Konsentrasi
(ppm)
%
Inhibisi
5 ppm 47,4011
10 ppm 48,1693
15 ppm 49,0520
20 ppm 49,6894
25 ppm 50,7274
Replikasi 3
Konsentrasi
(ppm)
%
Inhibisi
5 ppm 47,4011
10 ppm 48,1448
15 ppm 49,0520
20 ppm 49,6976
25 ppm 50,7355
138
5. Hasil IC50 Uji Antioksidan Ekstrak Buah Tin, Minyak Zaitun, dan
Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 3:1
Hasil IC50 Uji Antioksidan Ekstrak Buah Tin
Replikasi Regresi Linier
Persamaan IC50
a b r
1 19,532 0,2862 0,9711 y = 0,2862x + 19,532 106,4570
2 19,557 0,2857 0,9693 y = 0,2857x + 19,557 106,5558
3 19,418 0,2919 0,9651 y = 0,2919x + 19,418 104,7688
Hasil IC50 Uji Antioksidan Minyak Zaitun
Replikasi Regresi Linier
Persamaan IC50
a b r
1 36,287 0,5928 0,9593 y = 0,5928x + 36,287 23,1326
2 36,451 0,5822 0,9644 y = 0,5822x + 36,451 23,2721
3 36,505 0,5873 0,9625 y = 0,5873x + 36,505 22,9780
Hasil IC50 Uji Antioksidan Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak
Zaitun Perbandingan 3:1
Replikasi Regresi Linier
Persamaan IC50
a b r
1 46,517 0,1651 0,9944 y = 0,1651x + 46,517 21,0963
2 46,556 0,1635 0,9957 y = 0,1635x + 46,556 21,0642
3 46,54 0,1644 0,9957 y = 0,1644x + 46,54 21,0462
Kesimpulan
Replikasi
IC50
Ekstrak Buah Tin Minyak Zaitun Kombinasi Perbandingan
3:1
I 106,4570 23,1326 21,0963
II 106,5558 23,2721 21,0642
III 104,7688 22,9780 21,0462
Rerata 105,9272 23,1276 21,0689
SD 1,0045 0,1471 0,0254
Rerata ± SD 105,9272 ± 1,0045 23,1276 ± 0,1471 21,0689 ± 0,0254
139
Lampiran 17. Dokumentasi Penelitian
Produk Buah Zaitun Kering Produk Minyak Zaitun
Penimbangan Buah Tin Kering Pengecilan Partikel Buah Tin
140
Maserasi Penyaringan
Pengentalan Ekstrak Buah Tin Ekstrak Kental Buah Tin
141
Skrining Fitokimia
A B
Keterangan :
A. Flavonoid Ekstrak Buah Tin
B. Flavonoid Minyak Zaitun
Penetapan Kadar Flavonoid Total
Keterangan :
1. 20 ppm 4. 80 ppm
2. 40 ppm 5. 100 ppm
3. 60 ppm
1 2 3 4 5
142
Uji Sitotoksik
Perhitungan sel HeLa Pengamatan bilik hitung sel
Penanaman sel HeLa Proses Inkubasi
143
Pembuangan media setelah proses Treatmen Sampel Uji
inkubasi 24 jam
Penambahan MTT Proses Inkubasi
144
Pemberian Stopper SDS Pembacaan hasil dengan ELISA Rider
96 Well Plate
a. Ekstrak Buah Tin
Sebelum pemberian MTT Sesudah pemberian MTT
Konsentrasi 1000 µg/mL
145
b. Minyak Zaitun
Sebelum pemberian MTT Sesudah pemberian MTT
Konsentrasi 1000 µg/mL
c. Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 1:3
Sebelum pemberian MTT Sesudah pemberian MTT
Konsentrasi 1000 µg/mL
d. Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 1:1
Sebelum pemberian MTT Sesudah pemberian MTT
Konsentrasi 1000 µg/mL
146
e. Kombinasi Ekstrak Buah Tin dan Minyak Zaitun Perbandingan 3:1
Sebelum pemberian MTT Sesudah pemberian MTT
Konsentrasi 1000 µg/mL
f. Kontrol Positif Doxorubicin
Konsentrasi 100 µg/mL Konsentrasi 1,5625 µg/mL
Setelah pemberian MTT
g. Kontrol Negatif Kontrol Sel
Sebelum pemberian MTT Sesudah pemberian MTT
147
Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Buah Tin, Minyak Zaitun Serta
Kombinasi Tin dan Minyak Zaitun Dengan perbandingan 3:1
Penimbangan DPPH Penimbangan Sampel Tin
Penimbangan Sampel Minyak Zaitun
Ekstrak Buah Tin Minyak Zaitun
Kombinasi Ekstrak Buah Tin
dan Minyak Zaitun 3:1