LABORATORIUM BIOKIMIA
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MAKASSARLAPORAN PRAKTIKUM
BIOKIMIA
SISTEM ENDOKRIN DAN METABOLISME
Oleh :
KELOMPOK
: 3A
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MAKASSARMAKASSAR2009DAFTAR
ISIMETABOLISME GLUKOSAA. PENDAHULUAN
Glukosa darah puasa
Ada 2 jenis cara sekresi insulin, yaitu :
Sekresi basal, yaitu sekresi insulin yang terus-menerus tanpa
dipengaruhi oleh ada tidaknya makanan yang masuk kedalam tubuh.
Sekresi prandial, yaitu sekresi insulin yang pengeluarannya
dirangsang oleh adanya makanan.
Oleh karena itu kadar glukosa darah akan memuncak satu jam
setelah makan, kemudian menurun seiring dengan oksidasi atau
perubahan glukosa menjadi bentuk simpanan bahan bakar oleh
jaringan.Dua jam setelah makan, kadar kembali ke rentang
puasa.Penurunan glukosa darah ini menyebabkan pancreas menurunkan
sekresi insulinnya, dan kadar insulin turun.Hati berespon terhadap
sinyal hormone ini dengan memulai degradasi simpanan glikogen dan
melepaskan glukosa ke dalam aliran darah.Keadaan rentang puasa ini
apabila berlangsung selama 12 jam, maka sekresi akan masuk ke dalam
keadaan basal.Pada saat ini insulin sangat rendah dan glucagon
meningkat.Pada pokoknya selama fase awal puasa puasa, kadar glukosa
dipertahankan dalam rentang 80-100mg/dl, dan kadar asam lemak serta
badan keton meningkat.Hati berperanan penting dalam mempertahankan
kadar glukosa darah, yakni dengan glikogenolisis dan
glukoneogenesis.
Uji toleransi glukosa oral (UTGO)
Diagnose diabetes dapat ditegakkan secara langsung tanpa
memperhatikan jenis sekresi insulin, apabila plasma darah vena
jelas meningkat 220 mg/dl.Terutama pada orang yang menunjukkan
gejala klasik dari hiperglikemia kronik.Untuk kepastian diagnose,
penderita harus berpuasa satu malam (10-16 jam), dan pengukuran
gula darah harus diulang.Nilai yang kurang dari 115 mg/dl masih
dianggap normal.Nilai yang lebih dari 140 mg/dl mengisyaratkan
diabetes mellitus.Dalam uji ini penderita yang tidak hamil dan
telah berpuasa semalam, minum 75gr glukosa dalam bentuk
larutan.Dilakukan pengambilan sampel darah sebelum pemberian
glukosa darah oral dan pada 30, 60, 90, dan 120 menit
kemudian.Apabila salah satu dari sampel >200mg/dl, diindikasikan
adanya diabetes mellitus.
Penetapan kadar glukosa darah merupakan salah satu pemeriksaan
kimia darah yang paling sering dilakukan.Pemeriksaan ini dapat
dilakukan terhadap darah, plasma, atau serum.
Bermacam-macam cara digunakan dalam penetapan kadar gula darh,
baik secara makro (dengan menggunakan darah vena), maupun secara
mikro (darah kapiler).Cara yang paling sering digunakan pada
dasarnya dapat dibedakan dalam beberapa golongan:1. Penetapan
kolorimetri berdasarkan sifat mereduksi glukosa, misalnya metode
Folinwu dan somogyinelson.
2. Penetapan dengan cara titrasi berdasarkan sifat mereduksi
glukosa (iodemetri), misalnya metode Hagedord-Jensen dan
Somogyi-schaffer-Hartmann.
3. Pembentukan kompleks berwarna oleh glukosa dngan suatu zat,
misalnya otuluidin (kolorimetri).
4. Reaksi enzim dengan menggunakan glukosa-oxidase.Hidrogen
peroksida yang terbentuk akan mengoksidasi zat kromogen seperti
o-diasidin (CH3O.C6H3.NH2)2)
Penafsiran
Pemeriksaan harus segera dilakukan setelah pengambilan darah,
sebab aktivitas glikolitik yang terdapat pada darah menyebabkan
berkurangnya kadar glukosa dengan berlalunya waktu.Penggunaan anti
koagulan, misalnya asam oksalat yang berlebihan dapat menyebabkan
hasil tesnya lebih rendah dari yang sebenarnya.Natrium florida
biasa juga digunakan sebagai anti koagulan sekaligus sebagai
pengawet.
Penetapan yang berdasarkan reaksi reduksi, merupakan cara yang
tidak spesifik.Darah mengandung banyak zat yang berdaya reduksi
selain glukosa (saccharoid) sehingga menyebabkan hasil yang
diperoleh menjadi lebih tinggi daripada yang sebenarnya.
Reaksi enzimatik dngan glukosaoksidase dianggap dapat member
hasil yang sebenarnya, tetapi harus diperhatikan pula zat-zat yang
dapat menghambat aktivitasnya.Dengan demikian, dalam menilai hasil
pemeriksaan, hendaknya diperhatikan metode yang digunakan, hasil
yang mendekati sebenarnya diperoleh dengan metode o-tuluidin dan
juga dengan glukosa oksidase.B. TUJUANUntuk mengetahui dan memahami
metode pelaksanaan pemeriksaan Tes
Toleransi Glukosa (TTG) dan menginterpretasi hasilnya.C. DASAR
REAKSIGlukosa oksidase (GOD) mengkatalisa oksidasi dari glukosa
menurut persamaan :
Glukosa + O2 + H2O Asam glukonat +H2O2Hydrogen peroksida yang
terbentuk bereaksi dengan 4-aminoantipyrin dan
2,4-diklorofenol.Dengan adanya peroksidase (POD), dan menghasilkan
antipyrilquinonimin, yakni suatu zat warna merah.Intensitas warna
sebanding dengan kadar glukosa, diukur secara fotometrik.D. BAHAN
DAN ALAT
Reagensia
1. Reagen warna (Fosfat buffer 200 mmol/l, GOD 250 kat, POD 20
kat, 4-aminoantipyrin 0,75 mmol/l, 2,4-diklorofenol, 1,1
mmol/l)
2. Standar Glukosa 100 mg/dl
Alat-alat
Spektrofotometer, pipet, tabung reaksi.E. METODE KERJA
Cara kerja :
1. Menyiapkan tabung reaksi sebanyak tiga buah, kemudian diberi
label dengan tulisan : sampel, standar, dan blanko pada
masing-masing tabung reaksi.
2. Memipetkan reagensi warna sebanyak 2 ml pada setiap tabung
reaksi.
3. Menambahkan larutan standar sebanyak 20 l pada tabung standar
dan menambahkan serum/plasma pada tabung sampel, kemudian dicampur
baik-baik.4. Menginkubasi selama 15 menit pada temperature
kamar.Mengukur absorban sampel dan standar terhadap blanko pada
panjang gelombang 510 nm.
5. Mencatat hasil dan menghitungnya
Hasil percobaan Absorbans sampel = 0,31
Absorbans standar = 0,33
Kadar glukosa = 0,31/0,33 100 mg/dl
= 93,9394 mg/dl
Nilai normal1. GDP antara 60 110mg/dl (normoglikemia), jika 110
mg/dl dan
