LAPORAN RESMI bioanal

8/12/2019 LAPORAN RESMI bioanal

1/19

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM BIOANALISIS

PRAKTIKUM 2

PENETAPAN KADAR SGPT PADA TIKUS TERINDUKSI PARASETAMOL

Disusun oleh :

JURUSAN FARMASI

FAKUKTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN

PURWOKERTO

2014


2/19

PENETAPAN KADAR SGPT PADA TIKUS TERINDUKSI PARASETAMOL

I. Tujua P!"#$%aa

Melakukan penetapan kadar SGPT sampel darah tikus terinduksi parasetamol.

II. P!&a'u(ua

Berbagai sampel biologis dapat diambil untuk penentuan kadar dalam tubuh untuk

penelitian farmakokinetik, sebagai contoh darah, urine, feses, saliva, aringan tubuh, cairan

blister, cairan spinal dan cairan sinovial. Penentuan kadar suatu obat dalam sampel biologis

merupakan hal !ang kompleks disebabkan sampel biologis pada umumn!a merupakan suatu

matriks !ang kompleks. "ika suatu obat atau metabolitn!a dalam sampel biologis dapat

dianalisa langsung tanpa perlu dilakukan perlakuan a#al terhadap sampel !ang diperoleh

maupun pemisahan obat atau metabolit !ang ditentukan maka hal ini merupakan suatu hal

!ang menguntungkan. $kan tetapi perlakuan a#al sampel maupun isolasi obat atau metabolit

!ang akan ditentukan dari matriks biologis !ang diperoleh harus dilakukan %Saucher dan

McPherson, &''&(.

Parasetamol atau asetaminofen adalah obat analgesik dan antipiretik !ang populer dan

digunakan untuk melegakan sakit kepala, sengal)sengal dan sakit ringan, dan demam.

Digunakan dalam sebagian besar resep obat analgesik salesma dan flu. *a aman dalam dosis

standar, tetapi karena mudah didapati, overdosis obat baik sengaa atau tidak sengaa sering

teradi. Berbeda dengan obat analgesik !ang lain seperti aspirin dan ibuprofen, parasetamol

tak memiliki sifat antiradang. "adi parasetamol tidak tergolong dalam obat enis +S$*D.

Dalam dosis normal, parasetamol tidak men!akiti permukaan dalam perut atau mengganggu

gumpalan darah, ginal atau duktus arteriosus pada anin % Murs!idi -ohman, &'' (.

/atiadalah organ terbesar di dalam tubuh !ang terletak disebelah kanan atas rongga

perut, tepat diba#ah diafragma %sekat !ang membatasi daerah dada dan perut(. Bentuk hati

seperti prisma segitiga dengan sudut siku)sikun!a membulat, beratn!a sekitar 0,&1)0,1 kg

dengan berat enis 0,'1. 2kuran hati pada #anita lebih kecil dibandingkan pria dan semakin

kecil pada orang tua, tetapi tidak berarti fungsin!a berkurang. /ati mempun!ai kapasitas

cadangan !ang besar dan kemampuan untuk regenerasi !ang besar pula. "aringan hati dapat

diambil sampai tiga perempat bagian dan sisan!a akan tumbuh kembali sampai ke ukuran

dan bentuk !ang normal. "ika hati !ang rusak han!a sebagian kecil, belum menimbulkan

gangguan !ang berarti %3ia!akusuma, &''4(.
http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/


3/19

5apiler empedu dan kapiler darah di dalam hati saling terpisah oleh deretan sel)sel hati

sehingga darah dan empedu tidak pernah tercampur. +amun, ika hati terkena infeksi virus

seperti hepatitis, sel)sel hati bisa pecah dan akibatn!a darah dan empedu bercampur

%3ia!akusuma, &''4(.

/ati berfungsi sebagai faktor biokimia utama dalam tubuh, tempat metabolisme

keban!akan 6at antara. 7ungsi hati normal harus dikonfirmasi sebelum operasi terencana

%Sabiston, 088&(.

Seperti ukurann!a !ang besar, hati uga mempun!ai peranan besar dan memiliki lebih

dari 1'' fungsi. Berikut ini fungsi)fungsi utama hati :

1. Menampungdarah

&. Membersihkan darah untuk mela#an infeksi

9. Memproduksi dan mengekskresikan empedu

. Membantu menaga keseimbangan glukosa darah %metabolisme karbohidrat(

1. Membantu metabolisme lemak

. Membantu metabolisme protein

;. Metabolisme vitamin dan mineral

4. Menetralisir 6at)6at beracun dalam tubuh %detoksifikasi(

8. Mempertahankan suhu tubuh %3ia!akusuma, &''4(.

glutamate-piruvat transaminase? %GPT(, dan

aspartate aminotransferase %$ST(, !ang dahulu disebut >glutamate-oxaloacetate

transaminase? %G@T(. Baik $=T maupun $ST memerlukan piridoksal fosfat %Aitamin B(

sebagai kofaktor. at ini sering ditambahkan ke reagen pemeriksaan untuk meningkatkan

pengukuran en6im)en6im ini seandain!a teradi defisiensi vitamin b %missal, hemodial!sis,

malnutrisi( %Saucher dan McPherson, &''&(.

$minotransferase tersebar luas di tubuh, tetapi terutama ban!ak diumpai di hati,

karena peran penting organ ini dalam sintesis protein dan dalam men!alurkan asam)asam

amino ke alur)alur biokimia#i lai. /epatosit pada dasarn!aa adalah satu)satun!a sel dengan

konsentrasi $=T !ang tinggi, sedangkan ginal, antung, dan otot rangka mengandung kadar

sedang. $=T dalam umlah !ang lebih sedikit diumpai di pancreas, paru, lima, dan eritrosit.

Dengan demikian, $=T serum memiliki spesifitas !ang relative tinggi untuk kerusakan hati.
http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/


4/19

Seumlah besar $ST terdapat di hati, miokardium, dan otot rangkaC eritrosit uga memiliki

$ST dalam umlah sedang. /epatosit mengandung $ST tiga sampai empat kali lebih ban!ak

daripada $=T %Saucher dan McPherson, &''&(.

$minotransferase merupakan indikator !ang baik untuk kerusakan hati apabila

keduan!a meningkat. edera akut pada hati, seperti karena hepatitis, dapat men!ebabkan

peningkatan baik $ST maupun $=T menadi ribuan *2E=iter. Pngukuran aminotransferase

setiap minggu mungkin sangat bermanfaat untuk memantau perkembangan dan pemulihan

hepatitis atau cedera hati lain %Saucher dan McPherson, &''&(.

III. P")*)+ Aa()*)*

Penetapan kadar SGPT sampel darah tikus !ang terinduksi parasetamol pada

praktikum menggunkan metode spektrofotometri 2A. Glutamat piruvattransaminase atau

alanin transaminase %$=$T( mengkatalis transfer gugus amino dari =)alanin ke &)oFoglutarat

untuk membentuk =)glutamat dan Piruvat. 5emudian =aktat dehidrogenase %=D/(

mengkonversi piruvat menadi D)laktat dengan mengoksidasi +$D/ menadi +$D

Ban!akn!a +$D/ !ang dioksidasi menadi +$Dsebanding dengan ban!akn!a en6im GPT.

/al itulah !ang akan diukur secara fotometri. 5emudian diukur absorbansi dengan

spektrofotometer 2A pada panang gelombang 9' nm karena pada panang gelombangtersebut, sampel akan memberikan serapan maksimum. Dilakukan pengukuran dengan

menggunakan spektrofotometer 2A karena mempun!ai sensitivitas !ang relatif tinggi,

pengeraan!a mudah sehingga pengukuran !ang dilakukan cepat, dan mempun!ai spesifisitas

!ang baik.

IV. Ba'a &a M!,$&!

$lat !ang diperlukan untuk praktikum ini adalah tabung reaksi, sentrifuse,

spektrofotometer, pipet ukur, filler, mikropipet, s!ringe, kuvet, dan beaker glass.

Bahan !ang diperlukan untuk praktikum ini adalah paracetamol, M)+a 0H, reagen

0 %buffer tris p/ ;,1 0'' mmolE=, =)alanine 1'' mmolE=, =D/ I 04'' 2E=(, reagen & %&)

oFoglutarat 01 mmolE=, +$D/ ',04 mmolE=(
http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/http://laporanakhirpraktikum.blogspot.com/


5/19

V. P"$*!&u" K!"ja

Praktikum penetapan kadar SGPT pada tikus terinduksi parasetamol kali ini dia#ali

dengan men!iapkan 9 ekor tikus %0 ekor tikus untuk kontrol dan & ekor tikus untuk

perlakuan(. & ekor tikus perlakuan dipeani menggunakan parasetamol dosis toksik dalam

pelarut M)+a 0H satu hari sebelum pelaksanaan praktikum, kemudian diambil darahn!a

pada keesokan harin!a.

diambil seban!ak J0'' Kl melalui sinus orbitalis mata tikus

ditampung dalam tabung reaksi

didiamkan selama 01 menit

disentrifugasi dengan kecepatan ''' rpm selama 1 menit

masing)masing diambil seban!ak %0' Kl dan 0'' Kl( pada kontrol

dan %&' Kl dan &'' Kl( pada perlakuan

ditambahkan 0''' Kl reagen 0 pada masing)masing tabung kontrol

dan perlakuan


ditambahkan &1' Kl reagen & pada masing)masing tabung kontrol

dan perlakuan


diukur serapann!a menggunakan spektrofotometri 2A pada

panang gelombang 9' nm

Sampel darah

Supernatan

Hasil


6/19

VI. Da,a P!aa,a &a P!"'),ua

$bsorbansi masing)masing serum darah tidak terbaca oleh spektrofotometer karena

umlahn!a !ang terbatas maka kontrol 0 kontrol & dan perlakuan 0 perlakuan &,

sehingga didapat :

Sa+!( A%*$"%a*)

kontrol 0 kontrol & 0,8'

perlakuan 0 perlakuan & 0,&8

Persamaan :

L ',8;0 F ',';

L $=T 2E=

N kadar

P!"'),ua /

5ontrol L ',8;0 F ',';

0,8' ',8;0 F ',';

',8;0F 0,8' O ','; ',8;0F 0,9

N

N 0,4 karena kontrol 0 kontrol &, maka

untuk mendapatkan kadar total kontrol

adalah sebagai berikut dengan

men!amakan perbandingan reagen

%0:(

5ontrol F. .&'

5ontrol 0,4. . &'

N 0,9

Maka kadar total kontrol adalah 0,9 2E=


7/19

Perlakuan L ',8;0 F ',';

0,&8 ',8;0 F ',';

',8;0F 0,&8 O ',';

',8;0F 0,&'&

N

N 0,&94 karena perlakuan0 perlakuan&, maka

untuk mendapatkan kadar total

perlakuan adalah sebagai berikut

dengan men!amakan perbandingan

reagen %0:(

Perlakuan F. . &'

Perlakuan 0,&94. . &'

N &;,&9

Maka kadar total perlakuan adalah &;,&9 2E=

VII. P!%a'a*a

Parasetamol atau asetaminofen adalah obat analgesik dan antipiretik !ang populer dan

digunakan untuk melegakan sakit kepala,sengal)sengal dan sakit ringan,dan demam.

Digunakan dalam sebagian besar resep obat analgesik salesma dan flu. *a aman dalam dosis

standar, tetapi karena mudah didapati, overdosis obat baik sengaa atau tidak sengaa sering

teradi. Berbeda dengan obat analgesik !ang lain seperti aspirin dan ibuprofen, parasetamol

tak memiliki sifat antiradang. "adi parasetamol tidak tergolong dalam obat enis +S$*D.

Dalam dosis normal, parasetamol tidak men!akiti permukaan dalam perut atau mengganggu

gumpalan darah, ginal atau duktus arteriosus pada anin.

Parasetamol !ang diberikan secara oral diserap secara cepat dan mencapaikadar serum

puncak dalam #aktu 9' O 0&' menit. $dan!a makanan dalam lambungakan sedikit

memperlambat pen!erapan sediaan parasetamol lepas lambat.Parasetamol terdistribusi

dengan cepat pada hampir seluruh aringan tubuh. =ebihkurang &1H parasetamol dalam

darah terikat pada protein plasma.3aktu paruh parasetamol adalah antara 0 O 9 am.


8/19

Parasetamol diekskresikan melalui urine sebagai metabolitn!a, !aitu asetaminofen

glukoronid, asetaminofen sulfat, merkaptat dan bentuk !ang tidak berubah. Sebagian

asetaminofen 4'H dikonugasi dengan asam glukoronat dansebagian kecil lainn!a dengan

asam sulfat. Selain itu dapat mengalami hidroksilasi.Metabolit hasil hidroksilasi ini dapat

menimbulkan methemoglobinemia dan hemolisis eritrosit. @bat ini diekskresi melalui ginal,

sebagian kecil sebagaiparasetamol %9H( dan sebagian besar dalam bentuk terkonugasi

%S!amsuni, &'';(.

Parameter farmakokinetika obat dapat diperoleh berdasarkan hasil pengukurankadar

obat utuh dan E atau metabolitn!a di dalam cairan ha!ati %darah, urin, saliva ataucairan tubuh

lainn!a(. @leh karena itu agar nilai)nilai parameter kinetik obat dapatdiperca!a, metode

penetapan kadar harus memenuhi berbagai kriteria !aitu meliputiperolehan kembali

%recover!(, presisi dan akurasi. Pers!aratan !ang dituntut bagisuatu metode analisa adalah

ika metode tersebut dapat memberikan nilai perolehankembali !ang tinggi %;1)8'H atau

lebih(, kesalahan acak dan sistematik kurang dari0'H.5epekaan dan selektivitas merupakan

kriteria lain !ang penting dan nilain!atergantung pula dari alat pengukur !ang dipakai. Dalam

percobaan ini akan dilakukanlangkah)langkah !ang perlu dikerakan untuk optimalisasi

analisis meliputi:

0. Penentuan angka #aktu larutan obat !ang memberikan resapan tetap%khusus untuk reaksi

#arna(

&. Penetapan panang gelombang larutan obat !ang memberikan resapanmaksimum

%parasetamol(

9. Pembuatan kurva baku %parasetamol(

. Perhitungan nilai perolehan kembali, kesalahan acak dan kesalahansistematik

%/aradi, 0889(.

+itrimetri merupakan metode penetapan kadar secara kuantitatif dengan menggunakan

larutan baku natrium nitrit. Metode ini didasarkan pada reaksi dia6otasi !akni reaksi antara

amina aromatic primer dengan asam nitrit dalam suasana asam membentuk garam dia6onium

%ulfikar, &'0'(.

Metode titrasi dia6otasi disebut uga dengan nitrimetri !akni metode penetapan kadar

secara kuantitatif dengan menggunakan larutan baku natrium nitrit. Metode ini didasarkan

pada reaksi dia6otasi !akni reaksi antara amina aromatik primer dengan asam nitrit dalam

suasana asam membentuk garam dia6onium %ulfikar, &'0'(.

Prinsipn!a adalah reaksi dia6otasi :


9/19

0. Pembentukan garam dia6onium dari gugus amin aromatik primer %amin aromatik sekuder

dan gugus nitro aromatik(

&. Pembentukan sen!a#a nitrosamine dari amin alifatik sekunder

9. Pembentukan sen!a#a a6o dari gugus hidra6ida

.Pemasukan gugus nitro !ang arang teradi karena sulitn!a nitrasi dengan menggunakan

asam nitrit dalam suasana asam.

%/aradi, 0889(.

ontoh 6at !ang memiliki gugu amin aromatic primer misaln!a ben6okain, sulfaC !ang

mempun!ai gugus amin alifatis misaln!a +a siklamatC !ang memiliki gugus hidra6ida

misaln!a *+/C !ang memiliki gugu amin aromatis sekunder adalah parasetamol, fenasetin,

dan !ang memiliki gugus nitroaromatik adalah kloramfenikol %S!amsuni, &'';(.

/al)hal !ang harus diperhatikan dalam nitrimetri adalah :

a. Suhu

Pada saat melakukan titrasi, suhu harus antara 1)01'. #alaupun sebenarn!a

pembentukan garam dia6onium berlangsung pada suhu !ang lebih rendah !aitu ')1'. pada

temperature 1)01' digunakan 5Br sebagai stabilisator. Titrasi tidak dapat dilakukan dalam

suhu tinggi karena :

) /+@& !ang terbentuk akan menguap pada suhu tinggi

) Garam dia6onium !ang terbentuk akan terurai menadi fenol

b. 5easaman

Titrasi ini berlangsung pada P/ &, hal ini dibutuhkan untuk :

) Mengubah +a+@& menadi /+@&)

) Pembentukan garam dia6onium

c. 5ecepatan reaksi

-eaksi dia6otasi berlangsung lambat sekali, sehingga agar reaksi sempurna maka titrasi

harus dilakukan perlahan)lahan dan dengan pengocokan !ang kuat. 7rekuensi tetesan pada

a#al titrasi kira)kira 0 mlEmenit, lalu menelang titik)titik akhir menadi & tetesEmenit

%ulfikar, &'0'(.

Titrasi dia6otasi dapat digunakan untuk :

a. Penetapan kadar sen!a#a)sen!a#a !ang mempun!ai gugus amin aromatis primer bebas

seperti sulfamilamid.

b. Penetapan kadar sen!a#a)sen!a#a !ang mana gugus amin aromatic terikat dengan gugus

lain seperti suksinil sulfatia6ol, ftalil sulfatia6ol dan parasetamol. Pada penetapan kadar

sen!a#a !ang mempun!ai gugus aromatic !ang terikat dengan gugus lain seperti suksinil


10/19

sulfatia6ol harus dihidrolisis lebih dahulu sehingga diperoleh gugus amin aromatis bebas

untuk selanutn!a bereaksi dengan natrium nitrit dalam suasana asam membentuk garam

dia6onium

c. Sen!a#a)sen!a#a !ang mempun!ai gugus nitro aromatis seperti kloramfenikol. Sen!a#a)

sen!a#a nitro aromatis dapat ditetapkan kadarn!a secara nitrimetri setelah direduksi

terlebih dahulu untuk menghasilkan sen!a#a amin aromatis primer %ulfikar, &'0'(.

Dalam farmakope *ndonesia, titrasi dia6otasi digunakan untuk menetapkan kadar:

ben6okainC primakuin fosfat dan sediaan tabletn!aC prokain /*C sulfasetamidC natrium

sulfasetamidC sulfameta6inC selfadoksinC sulfametoksa6lC tetrakainC dan tetrakain S*

%ulfikar, &'0'(.

M$$"a) Ba'a

0. Paracetamol

+ama -esmi : Paracetamolum

-umus molekul : 4/8+@&+ama kimia : )hidroksiasetanilida 0'9)8')&Q

Berat molekul : 010,0

5andungan : Tidak kurang dari 84,'H dan tidak lebih dari 0'0,'H

4/8+@& dihitung terhadap 6at anhidrat.

Pemerian : Serbuk hablur, putihC tidak berbauC rasa sedikit pahit.

5elarutan : =arut dalam air mendidih dan dalam natrium hidroksida 0 +C

mudah larutan dalam etanol.

Pen!impanan : Dalam #adah tertutup rapat

%$nonim, 0881(


11/19

Metabolisme Paracetamol

$ktivitas analgesik dan antipiretik, acetaminophen, ditoleransi dengan baik

pada dosis terapi normal. 5eracunan akut dengan parasetamol han!a teradi setelah

konsumsi dosis sekitar 0'')0&1 mg E kg dan dapat men!ebabkan berbagai hepatitis

c!tol!tic centrilobular luas %Proudfoot, 0888(.

Sitotoksisitas parasetamol pada dasarn!a adalah karena aksi dari metabolit

reaktif , + ) asetil ) p ) ben6o ) Ruinoneimine %+$P*( dibentuk terutama dalam hati

oleh monooF!genases untuk P1' dan dalam umlah !ang lebih kecil di ginal oleh

s!nthases prostaglandin. +$P* , elektrofilik dan oksidan kuat, didetoksifikasi oleh

glutation tereduksi % GS/ (, sistein dan turunann!a mercapturic. Setelah menelan

overdosis parasetamol, penipisan glutathione mitokondria dan sitosol berkurang dari &'

H menadi 9' H dari nilai normal, men!ebabkan kematian sel dengan membentuk

ikatan kovalen antara +$P* dan hepatosit. +$ deasetilasi dalam sistein tubuhC


12/19

sistein digunakan dalam sel, dalam kombinasi dengan glisin dan glutamat , untuk

mensintesis glutation. 5etersediaan sistein adalah tingkat membatasi langkah proses C

+$ , !ang memungkinkan pemulihan pasokan !ang cukup dari sistein, dan

memungkinkan pemulihan stok glutathione. @leh karena itu baik di sini , dengan

penggunaan +$ , mengembalikan fisiologis detoksifikasi alur. Mekanisme lain

tindakan +$ dibahas tanpa konfirmasi resmi pada manusia : kontribusi sulfat

mempromosikan sulfation acetaminophen, koneksi langsung ke +$P* sebagai

pengganti glutathione, peningkatan pengurangan +$P*. +$ uga dapat memodulasi

kaskade keadian di pengapian berturut)turut pengikatan +$P* dengan hepatosit.

Terapi +$ harus dimulai dalam kasus risiko hepatotoksisitas dan tidak ada kontra

indikasi ke ) administrasi +$ ada sebelum risiko hati, bahkan kehamilan %Morit6,

0888(.

&. Buffer Tris P/ ;,1

Buffer atau larutan pen!angga adalah larutan !ang terdiri dari asam lemah dan

garam)n!a !ang dapat mempertahankan dan menaga p/. Bidang bioteknologi tidak

bisa dipisahkan dari penggunaan larutan ini. Dalam memilih buffer, !ang harus

diperhatikan adalah p/ optimum serta sifat)sifat biologisn!a. Ban!ak enis buffer

!ang mempun!ai impact terhadap sistem biologis, aktivitas en6im, substrate, atau

kofaktor.Sebagai contoh buffer phosphat akan menghambat aktivitas dari beberapa

metabolik en6im termasuk karboksilase, fumarase, dan phosphoglucomutase.

Barbiturate menghambat phophorilasi oksidatif. Tris buffer bereaksi dengan amin

primer dan memodifikasi transport elektron dan phosphorilasi pada kloroplast. Tris

uga menghambat en6im respirasi di mitokondria. Dan masih ban!ak efek lain !ang

diberikan buffer. @leh karena itu pemilihan buffer terkadang menadi kesulitan !ang

cukup merepotkan. @leh karena itu, gunakan konsentrasi buffer serendah mungkin

!ang masih dapat untuk memaintain p/ -a!mond et all. &''8.


13/19

9. = O alanine

$lanin %$la( atau asam &)aminopropanoat merupakan salah satu asam amino

bukan esensial. Bentuk !ang umum di alam adalah =)alanin %S)alanin( meskipun

terdapat pula bentuk D)alanin %-)alanin( pada dinding sel bakteri dan seumlah

antibiotika. =)alanin merupakan asam amino proteinogenik !ang paling ban!ak

dipakai dalam protein setelah leusin. Gugus metil pada alanina sangat tidak reaktif

sehingga arang terlibat langsung dalam fungsi protein %en6im(. $lanina dapat

berperan dalam pengenalan substrat atau spesifisitas, khususn!a dalam interaksi

dengan atom nonreaktif seperti karbon. Dalam proses pembentukan glukosa dari

protein, alanina berperan dalam daur alanina -a!mond et all. &''8.

. =D/

=aktat dehidrogenase %=D, =D/( adalah en6im intraseluler !ang terdapat pada hampir

semua sel !ang bermetabolisme, dengan konsentrasi tertinggi diumpai di antung,

otot rangka, hati, ginal, otak, dan sel darah merah. =D/ merupakan suatu molekul

tetramerik !ang mengandung empat subunit dari dua bentukC / %antung( dan M

%otot(, !ang berkombinasi sehingga menghasilkan lima isoen6im !ang diberi nama

=D/0 %/( sampai =D/1 %M(.$ktivitas =D/ total dalam serum diperkirakan

meningkat pada hampir semua keadaan pen!akit !ang mengalami kerusakan atau

destruksi sel. Selain itu, aktivitas =D/ total uga merupakan indikator !ang relatif

sensitiv !ang menunukkan sedang berlangsungn!a proses patologik. Peningkatan

=D/ total dan rasio =D/0E=D/& dengan kadar tertinggi =D/0 bermanfaat untuk

memastikan diagnosis infark miokardium %M*(. 5adar =D/ meningkat dalam #aktu

0&)& am setelah teradin!a M*, mencapai puncakn!a dalam &)1 hari dan tetap

tinggi hingga )0& hari, lalu akan menadi normal kembali dalam #aktu 4)0 hari

-a!mond et all. &''8.


14/19

1. +$D/

+$D/ merupakan reduksi dari +$D !ang merupakan koen6im !ang dapat

ditemukan di seluruh makhluk hidup. Dalam metabolisme sel, +$D/ merupakan

reduktor !ang kemudian mengalami oksidasi menadi +$D !ang merupakan

oksidator. +$D/ sendiri merupakan sumber energi setara 9 $TP %$denosinTrifosfat(. +$D/ merupakan bentuk koen6im aktif dari vitamin B9 +iacin. +$D/

memegang peranan penting dalam kehidupan setiap makhluk hidup. Baik itu he#an,

tumbuhan apalagi manusia. +$D/ berfungsi untuk meningkatkan energi sel !ang

berhubungan langsung dengan aktivitas fisik dan mental makhluk hidup. 5etika

+$D/ !ang dibutuhkan tubuh tercukupi, aktivitas makhluk hidup akan beralan

dengan lancar. Begitu pula sebalikn!a. +$D/ uga berfungsi untuk menaga agar sel

dapat bertahan hidup lebih lama dan mencegah timbuln!a pen!akit degenartif !ang

mengurangi kualitas hidup. 5ekurangan +$D/ pada tubuh dapat di penuhi dengan

asupan vitamin B9 +iacin !ang cukup -a!mond et all. &''8.

. +a


15/19

Mengandung tidak kurang dari 88,'H dan tidak lebih dari 0'0,'H

0'/0+&+a&@4, dihitung terhadap 6at !ang telah dikeringkan.

+ama -esmi : D*+$T-**


16/19

!ang lebih akurat karena akurasi mikropipete ini sangat tinggi. Tip !ang digunakan

pun harus diperhatikan kebersihann!a utnuk meminimalisir kontaminasi !ang

mempengaruhi absorbansi sampel. 5edua 6at dicampur dan diinkubasi selama 1 menit

dalam suhu ruang. *nkubasi ini dilakukan agar serum dan reagen bereaksi. -eagen *

!ang digunakan berisi Tris p/ ;,1 0'' mmolEliter, =)$lanin 1'' mmolEliter, =D/

%=aktat Dehidrogenase( I 04'' 2Eliter. Tris p/ ;,01 dalam reagen * berfungsi sebagai

dapar !ang menaga p/ serum selama reaksi pemeriksaan ini supa!a menaga

kestabilan aktivitas GPT karena en6im sangat sensitif terhadap perubahan p/. =)

$lanin berfungsi sebagai asam amino !ang akan diubah menadi =)glutamat dengan

dikatalisis oleh en6im Glutamat Piruvate Transaminase %GPT(. =D/ %=aktat

Dehidrogenase( uga merupakan en6im !ang akan mengkatalisis reaksi dari produk

perubahan =)$lanin !ang dikatalis oleh GPT, !aitu piruvat, !ang akan diubah

menadi laktat %Sacher, &''&(.

Setelah diinkubasi selama 1 menit, campuran dalam tabung reaksi

ditambahkan reagen ** seban!ak &'' Kl. -eagen ** !ang digunakan ini berisi &)

oFoglutarat 01 mmolEliter dan +$D/ ',04 mmolEliter. &)oFoglutarat akan bereaksi

dengan =)$lanin membentuk =)glutamat dan piruvat dengan dikatalisis oleh en6im

GPT.


17/19

!ang dilakukan cepat, dan mempun!ai spesifisitas !ang baik. Setelah dilakukan

pengukuan aborbansi, data dicatat untuk dihitung dan diinterpretasikan %Sacher,

&''&(.

Pada praktikum kali ini, kami melakukan ui analisis penentuan kadar SGPT

pada tikus !ang terinduksi parasetamol. Tikus dibuat & kelompok !aitu kelompok

kontrol dan kelompok perlakuan. /ari sebelumn!a tikus kontrol disuntikkan aRua

bidest dan tikus kelompok perlakuan disuntikkan paracetamol. Setelah itu dilakukan

pengukuran kadar SGPT pada tikus tersebut dengan cara mengambil darah pada sinus

orbitalis. Darah tersebut ditambahkan serbuk +a)


18/19

Da,a" Pu*,aa

$nonim. 0881.Farmakope Indonesia edisi IV. "akarta : Depkes -*

/aradi, 3. 0889.Ilmu Kimia Analitik Dasar. "akarta : PT Gramedia.

Morit6 7, Dro! "M.Le paractamol. *n : Danel A, Barriot P,


19/19

LAMPIRAN

5ontrol

Perlakuan

Serum

Documents

LAPORAN RESMI bioanal