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Méthodes de dosage d’un antigène par ELISA

(Enzyme-linked immunosorbent assay)

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Principe généralDosage d’un antigène par le test ELISA en sandwich

(sans compétition)

(1) Fixation de l’anticorps de capture (+ lavage)(2) Ajout de l’échantillon à tester (+ lavage)(3) Ajout d’un anticorps de détection (+ lavage)(4) Ajout de l’anticorps secondaire lié à l’enzyme (+ lavage)(5) Ajout du substrat de l’enzyme => mesure du signal et

report sur la courbe d’étalonnage => dosage

Jeffrey M. Vinocur

3

Principe généralDosage grâce au test ELISA par compétition

Source : BMedia

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Applications

• Dosage de protéines en recherche

(nécessité de contrôles)

• Dosage d’allergènes alimentaires

• Dépistage de nombreuses

pathologies en particulier du VIH

• Exemples d’enzymes utilisées : peroxydase, béta-galactosidase

plaque de microtitrage à 96 puits

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Avantages

• Test simple, rapide, peu coûteux

• Détection spécifique

• Technique sensible

• Pas besoin d’appareil spécialisé pour détecter

le signal

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Inconvénients

• Dépendante des conditions du milieu

• Limité par la disponibilité en anticorps

spécifique

• Risque de faux positifs

• Limite de détection moins bonne qu’en RIA