Upload
vuongdien
View
242
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
MielomaMieloma M Múúltiploltiplo
DoenDoençça Residual Ma Residual Míínimanima
por por CitometriaCitometria de Fluxo de Fluxo
Dra Maura R Valério IkomaLaboratório de Citometria de Fluxo
MONITORAMENTO DE DRMMONITORAMENTO DE DRM
• Avaliação rápida do potencial de respostaterapêutica
• Forte parâmetro prognóstico
• Detecção precoce de recidiva
PODE SER A BASE PARA ESTABELECERPODE SER A BASE PARA ESTABELECERTERAPTERAPÊÊUTICA ADAPTADA AO RISCOUTICA ADAPTADA AO RISCO
EM MIELOMA MEM MIELOMA MÚÚLTIPLOLTIPLO
DRM - / DRM –
DRM + / DRM –
DRM + / DRM +
DRM + / DRM +
DRM + / DRM –
DRM - / DRM –
SLP
SG
PaivaPaiva et al. Blood, 2008; 112 (10): 4017-23 et al. Blood, 2008; 112 (10): 4017-23
MIELOMA MMIELOMA M ÚÚLTIPLOLTIPLO PROGN PROGNÓÓSTICO CONFORME DRM PRSTICO CONFORME DRM PRÉÉ E E
PPÓÓS TCTHS TCTH
DRM - DRM +
• PFS = 71 meses (60% /5 anos)
• OS = NA ( 82% / 5 anos)
• PFS: Ifx+ = mediana 65 meses
• PFS : Ifx neg = mediana 71 meses
• PFS = 37 meses (22% /5anos)(p <0,001)
• OS = 89 meses (60% / 5 anos)(p <0,002)
• PFS: Ifx neg = mediana 36 meses
PaivaPaiva et al. Blood, 2008; 112 (10): 4017-23 et al. Blood, 2008; 112 (10): 4017-23
DRM+ x DRM –
RR Progressão = 3,64 (p= 0,002)
RR Óbito = 2.02 (p = 0,02)
DRM D+ 100 PDRM D+ 100 PÓÓS TCTH POR CFS TCTH POR CFFATOR PROGNFATOR PROGNÓÓSTICO INDEPENDENTE MAISSTICO INDEPENDENTE MAIS
IMPORTANTEIMPORTANTE
DRM - DRM +
• PFS = 71 meses (60% /5 anos)
• OS = NA ( 82% / 5 anos)
• PFS: Ifx+ = mediana 65 meses
• PFS : Ifx neg = mediana 71 meses
• PFS = 37 meses (22% /5anos)(p <0,001)
• OS = 89 meses (60% / 5 anos)(p <0,002)
• PFS: Ifx neg = mediana 36 meses
PaivaPaiva et al. Blood, 2008; 112 (10): 4017-23 et al. Blood, 2008; 112 (10): 4017-23
DRM+ x DRM –
RR Progressão = 3,64 (p= 0,002)
RR Óbito = 2.02 (p = 0,02)
DRM D+ 100 PDRM D+ 100 PÓÓS TCTH POR CFS TCTH POR CFFATOR PROGNFATOR PROGNÓÓSTICO INDEPENDENTE MAISSTICO INDEPENDENTE MAIS
IMPORTANTEIMPORTANTE
DRM EM PACIENTES NDRM EM PACIENTES NÃÃO CANDIDATOSO CANDIDATOSAO TCTHAO TCTH
• 102 pacientes > 65 anos recém diagnosticados• RC – redução componente M em > 70% com 6 ciclos de
tratamento• RC versus RC estrita (relação normal cadeias leves séricas
livres - sFLC) versus RI
DRM DRM negneg com IF +: com IF +: componente M desaparecia nas outras componente M desaparecia nas outras avalia avalia çõçõ eses
DRM + com IF DRM + com IF negneg :: reaparecimento componente M em 3 meses reaparecimento componente M em 3 meses
DRM + com DRM + com sFLCsFLC anormal: anormal: progress progress ãão de doeno de doen çça em 13a em 13 meses meses
Paiva B Paiva B etet alal , J , J ClinClin OncolOncol , 2011 20;29(12):1627-33 , 2011 20;29(12):1627-33
DISCREPDISCREPÂÂNCIAS DE QUANTIFICANCIAS DE QUANTIFICAÇÃÇÃOODE PLASMDE PLASMÓÓCITOS PELA MORFOLOGIA ECITOS PELA MORFOLOGIA E
CITOMETRIA DE FLUXOCITOMETRIA DE FLUXO
• Qualidade da amostra (diluiçã o)
• Distribuiçã o irregular dos plasm ócitosna MO tratada
• Moléculas de ades ão
MARCADORES PARA IDENTIFICAMARCADORES PARA IDENTIFICA ÇÃÇÃO EO EQUANTIFICAQUANTIFICA ÇÃÇÃO DE POPULAO DE POPULA ÇÃÇÃOO
PLASMOCITPLASMOCIT ÁÁRIARIA
• CD 38
• CD 138
• CD 45
MARCADORES MARCADORES ÚÚTEIS PARA DETECTEIS PARA DETEC ÇÃÇÃO DEO DEPLASMPLASM ÓÓCITOS ABERRANTESCITOS ABERRANTES
EM MIELOMA M EM MIELOMA M ÚÚLTIPLOLTIPLO
ANTANTÍÍGENOSGENOS ExpressExpress ããooNORMALNORMAL
ExpressExpress ããooALTERADAALTERADA
%MM com%MM comexpressexpress ããooalteradaalterada
RequisitosRequisitosparapara DRM DRM
CD 19 + (>70%) - 95% Essencial
CD 56 - (> 85%) ++ 75% Essencial
CD 20 - (100%) + 10% Preferível
CD 117 - (100%) + 30% Preferível
CD 28 - /+fraco(100%)
++ 15 – 45% Recomendável
CD 81 + -/+ fraco NA Recomendável
CD 27 ++(100%) -/+ fraco 40-50% Recomendável
RawstronRawstron et al. EMN Consensus. et al. EMN Consensus. HaematologicaHaematologica , 2008; 93(3):431-8, 2008; 93(3):431-8
PESQUISA DE DRMPESQUISA DE DRMMETODOLOGIAMETODOLOGIA
• Painel 4 cores:1) CD 19FITC/ CD 56PE / CD 45PerCP /CD38 APC2) cLambda FITC / cKappa PE / C45PerCP/ CD 38 APC
• Técnica: Lise – Wash Fixação e permeabilização para as Ig citoplasmática s
• Gate : CD 38 x SSC
• Aquisição de 1000000 de eventos totais:
no mínimo de eventos para definição de população de p lasmócitos =100
• 1º passo: determinar no total de plasmócitos na amo stra de MO
• 2º passo: % de plasmócitos anormais do total de pla smócitos da MO
DETECDETECÇÃÇÃO DE DRM EMO DE DRM EMMIELOMA MMIELOMA M ÚÚLTIPLOLTIPLO
PlasmPlasm óócitoscitos nlsnls (CD 56 -) = 14% (CD 56 -) = 14%
DRM = 86% (CD 56+) = 0,6%DRM = 86% (CD 56+) = 0,6%
CD 38+++CD 38+++ CD 45CD 45 CD 19CD 19
PLASMÓCITOS TOTAIS DA MO = 0,68%
SSSSCC
CCDD5566
GATE :1.000.000 eventosGATE :1.000.000 eventos
MMíínimo = 100 nimo = 100 plasmplasm óócitoscitos
GATE PARA DRM EM CD 38+GATE PARA DRM EM CD 38+
MM CD 56 negativo, MM CD 56 negativo, clonalidadeclonalidadeKappaKappa
PLASMPLASM ÓÓCITOS TOTAIS = 0,88%CITOS TOTAIS = 0,88%
LimitaLimita çõçõ es da CF para Pesquisa de DRMes da CF para Pesquisa de DRMem em MielomaMieloma M Múúltiploltiplo
• Qualidade da amostra
• Citômetro de fluxo com menos 4 de cores
• Perdas de expressões ou superexpressõesde marcadores ap ós tratamento (até 78%)
• Sensibilidade : 10 -4 = 0,01%
DRM em portadores de DRM em portadores de MielomaMieloma M MúúltiploltiploAvaliaAvalia çãção pro pr éé e p e póós TCTHs TCTHServiServi çço de TMO HAC Jauo de TMO HAC Jau
(janeiro/2008 a setembro/2011)(janeiro/2008 a setembro/2011)
• Faixa etária: 33 a 92 anos
• No pacientes: 138 (93 elegíveis para TCTH)
• No exames: 225 (143 com DRM e 82 sem DRM)
• Das 143 DRM+:
31 expressão aberrante de marcadores CD 56 / CD 45/ CD 1921 definidas pela clonalidade91 por ambos
• 62 pacientes tratados, sem fenotipagem ao diagnósti co
DRM+ pré e/ou pós TCTH:
17 pacientes por fenótipo aberrante 7 pacientes DRM definida pela monoclonalidade38 expressavam ambos
• Nível mínimo de detecção: 0,004%
CASO CLCASO CL ÍÍNICONICO
• JHG, 42 anos, gênero masculino
• Diagnóstico de Mieloma Múltiplo IIb (Durie Salmon) e ISS II em abril/ 2009
• MO = 35% de plasmócitos
• EPS: pico monoclonal γγγγ = 5,9g/dL
• Cadeias leves urinárias negativas
� ββββ2 micro = 4 mg/ dL Alb =2,3g/dL DHL = 156U/L Cr = 2 ,0mg/dL Ca++ = 8,9 mg/dL
• Hb = 10,1g/dL, Leucócitos = 5700/ mm 3 Plaquetas = 126000/ mm 3
• Lesões osteolíticas em coluna e bacia, lesões infil trativas de T5 a L2,colapsos de L1 e L2
• Utilizou Dexa Thal por 6 meses
• Em novembro/2009: MO = 10% plasmócitosEPS = pico monoclonal γγγγ = 4,37g/dL
• Realizou 1 ciclo de VAD e mantido com pulsos de Dex a.
• Encaminhado para TCTH autólogo em abril/ 2010. MO < 1% de plasmócitos
CASO CLCASO CL ÍÍNICONICO
Condicionamento: Melfalan 200 mg / m 2
Não fez DRM por CF pré TCTH
TCTH: Infusão Aférese: 2,1 x 10 6 céls CD 34+ / Kg em 06/06/2011
1ª DRM por CF em 05/10/2010: 0,97% (D+120 pós TCTH)
EPS: pico monoclonal γγγγ = 2,2g/dL ββββ2 micro = 1,6mg/L
Morfologia: hipoplasia global, raros plasmócitos.
Iniciado Talidomida
Evoluiu com pancitopenia em 24/03/2011: 27,6% de pl asmócitos pela CF
Iniciou Bortezomib conforme informações
Óbito no serviço de origem.
MM D+ 120 pMM D+ 120 póós TCTHs TCTH
PlasmPlasm óócitoscitos totais (CD 38+) = 1% totais (CD 38+) = 1%
PlasmPlasm óócitoscitos neopl neopl áásicos (CD 56+/ CD 19 sicos (CD 56+/ CD 19 negneg ) = 97% = 0,97%) = 97% = 0,97%
APAPÓÓS 5 MESES DA 1S 5 MESES DA 1ªª DRM+ DRM+
PlasmPlasm óócitoscitos neopl neopl áásicossicos (CD 56+/ (CD 56+/ cKappacKappa +/CD 19 +/CD 19 negneg ) = 27,6%) = 27,6%
OBRIGADAOBRIGADA