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UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCOUNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCOUNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCOUNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCODEPARTAMENTO DE AGRONOMIADEPARTAMENTO DE AGRONOMIADEPARTAMENTO DE AGRONOMIADEPARTAMENTO DE AGRONOMIA
PROGRAMA DE PÓSPROGRAMA DE PÓSPROGRAMA DE PÓSPROGRAMA DE PÓS----GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA GRADUAÇÃO EM AGRONOMIA ––––MELHORAMENTO GENÉTICO DE PLANTAS MELHORAMENTO GENÉTICO DE PLANTAS MELHORAMENTO GENÉTICO DE PLANTAS MELHORAMENTO GENÉTICO DE PLANTAS –––– PPGAMGP PPGAMGP PPGAMGP PPGAMGP
SEMINÁRIO IISEMINÁRIO IISEMINÁRIO IISEMINÁRIO II
Mestranda: Gemima Manço de MeloMestranda: Gemima Manço de MeloMestranda: Gemima Manço de MeloMestranda: Gemima Manço de MeloOrientadora: Profª. Dra. Lilia WilladinoOrientadora: Profª. Dra. Lilia WilladinoOrientadora: Profª. Dra. Lilia WilladinoOrientadora: Profª. Dra. Lilia Willadino
CoCoCoCo----orientador: Profº. Dr. Reginaldo de Carvalhoorientador: Profº. Dr. Reginaldo de Carvalhoorientador: Profº. Dr. Reginaldo de Carvalhoorientador: Profº. Dr. Reginaldo de Carvalho
O EUO EUO EUO EUO EUO EUO EUO EU--------ESTRESSE NA MICROPROPAGAÇÃO DA CANAESTRESSE NA MICROPROPAGAÇÃO DA CANAESTRESSE NA MICROPROPAGAÇÃO DA CANAESTRESSE NA MICROPROPAGAÇÃO DA CANAESTRESSE NA MICROPROPAGAÇÃO DA CANAESTRESSE NA MICROPROPAGAÇÃO DA CANAESTRESSE NA MICROPROPAGAÇÃO DA CANAESTRESSE NA MICROPROPAGAÇÃO DA CANA--------DEDEDEDEDEDEDEDE--------AÇÚCAR: VARIÁVEIS BIOQUÍMICAS E AÇÚCAR: VARIÁVEIS BIOQUÍMICAS E AÇÚCAR: VARIÁVEIS BIOQUÍMICAS E AÇÚCAR: VARIÁVEIS BIOQUÍMICAS E AÇÚCAR: VARIÁVEIS BIOQUÍMICAS E AÇÚCAR: VARIÁVEIS BIOQUÍMICAS E AÇÚCAR: VARIÁVEIS BIOQUÍMICAS E AÇÚCAR: VARIÁVEIS BIOQUÍMICAS E
MOLECULARESMOLECULARESMOLECULARESMOLECULARESMOLECULARESMOLECULARESMOLECULARESMOLECULARES
ROTEIROROTEIROROTEIROROTEIROROTEIROROTEIROROTEIROROTEIRO
� INTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURA
� OBJETIVOS�Geral� Específicos
� METAS
� METODOLOGIA� METODOLOGIA
� CRONOGRAMA
� ORÇAMENTO
� RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIO-ECONÔMICO
� APOIO FINANCEIRO
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AAAAAAAA canacanacanacanacanacanacanacana--------dededededededede--------açúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcar
Setor sucroalcooleiro brasileiro
↑ Competitivo mundialmente↑ Competitivo mundialmente
↑ Níveis de produtividade e rendimento industrial
↓ Custos de produção
INTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURA
AAAAAAAA canacanacanacanacanacanacanacana--------dededededededede--------açúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcar
� Possui cadeia produtiva estruturada
� Domina estágios da tecnologia de produção� Domina estágios da tecnologia de produção
� Gera várias oportunidades de negócios
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AAAAAAAA canacanacanacanacanacanacanacana--------dededededededede--------açúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcar
� Produção nordestina 2008/2009 � 64 milhões detoneladas
Nordeste12%
Brasil88%
Produção Nacional
(CONAB, 2009)
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AAAAAAAA canacanacanacanacanacanacanacana--------dededededededede--------açúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcar
� Produção pernambucana 2008/2009 � 19 milhõesde toneladas
ÁlcoolProdução pernambucana
Açúcar67%
Álcool33%
(CONAB, 2009)
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AAAAAAAA canacanacanacanacanacanacanacana--------dededededededede--------açúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcar
� Uso de tecnologias � matérias genéticos dequalidade superior
� Teor de açúcares� Teor de açúcares� Teor de fibras
� Melhoramento genético � prioridade
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AAAAAAAA canacanacanacanacanacanacanacana--------dededededededede--------açúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcaraçúcar
� Variedades RB � Programa Nacional de
Melhoramento de cana-de-açúcar conduzido pela
RIDESARIDESA
� Produtividade
�Adaptação
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MicropropagaçãoMicropropagaçãoMicropropagaçãoMicropropagaçãoMicropropagaçãoMicropropagaçãoMicropropagaçãoMicropropagação
� Processo
� Benefícios
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SistemasSistemasSistemasSistemasSistemasSistemasSistemasSistemas dededededededede micropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagação
INTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURA
SistemasSistemasSistemasSistemasSistemasSistemasSistemasSistemas dededededededede micropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagação
INTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURAINTRODUÇÃO E SÍNTESE DE LITERATURA
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EstresseEstresseEstresseEstresseEstresseEstresseEstresseEstresse
� Cultivo in vitro x Cultivo em casa de vegetação ecampo
Estresse do cultivo in vitroEstresse do cultivo in vitro
Eu-estresse Dis-estresse
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EstresseEstresseEstresseEstresseEstresseEstresseEstresseEstresse
Estresse oxidativo
↑ ROS
O2•- H2O2 OH•-
Mensageiro molecularMorte celular
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EstresseEstresseEstresseEstresseEstresseEstresseEstresseEstresse
� Controle do nível de ROS � ação de enzimasantioxidantes
� Superóxido desmutase (SOD)
� Catalase (CAT)� Catalase (CAT)
� Peroxidade (POD)
� Compostos sequestradores de radicais livres� 2,2 –difenil-1-picrilhidrazila � atividadeantioxidativa
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FidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidade genéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenética
Micropropagação
Mesmo genótipo da planta doadora
Variações genéticas � cultivo in vitro
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FidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidade genéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenética
Mudanças epigenéticas e genéticas
Variação somaclonal
Nº cromossômico, deleções, rearranjos no genoma e substituição de nucleotídeos
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FidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidade genéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenética
� Polimorfismo nos cinco subcultivos � cultura demeristemas de cana-de-açúcar (ZUCCHI et al., 2002)
� Faixa esperada� Faixa esperada (SKIRVIN et al., 1994)
� Influência do genótipo � diferenças nas variedades
estudadas
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FidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidadeFidelidade genéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenéticagenética
� Variações somaclonais � não podem ser previstas
� Aumento na utilização de sistemas demicropropagação� monitoramento das variaçõesmicropropagação� monitoramento das variações
� Detecção de polimorfismos de DNA amplificado(RAPD)
� Os marcadores (sob efeitos) � ≠ tecidos e estádios de
desenvolvimento
OBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOS
ObjetivoObjetivoObjetivoObjetivoObjetivoObjetivoObjetivoObjetivo geralgeralgeralgeralgeralgeralgeralgeral
Avaliar, por meio de análises bioquímicas e moleculares, a
produção de mudas de cana-de-açúcar micropropagadas pelo
sistema convencional e por imersão temporária.sistema convencional e por imersão temporária.
OBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOS
ObjetivosObjetivosObjetivosObjetivosObjetivosObjetivosObjetivosObjetivos específicosespecíficosespecíficosespecíficosespecíficosespecíficosespecíficosespecíficos
� Aferir o nível de estresse a que está submetido o material
vegetal;
� Definir o nível de eu-estresse adequado à otimização do
processo micropropagativo utilizando análises bioquímicas e suas
correlações com parâmetros de crescimento;
OBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOSOBJETIVOS
ObjetivosObjetivosObjetivosObjetivosObjetivosObjetivosObjetivosObjetivos específicosespecíficosespecíficosespecíficosespecíficosespecíficosespecíficosespecíficos
� Avaliar a fidelidade genética das mudas produzidas nos dois
sistemas de micropropagação por meio da detecção das taxas de
variação somaclonal ao longo dos sucessivos subcultivos;
� Correlacionar os efeitos dos reguladores de crescimento,
utilizados nas distintas fases do cultivo in vitro, sobre o nível de
estresse e a ocorrência de variação somaclonal.
METASMETASMETASMETASMETASMETASMETASMETAS
� Inocular ápices caulinares de cana-de-açúcar de variedades RB
em meio de cultivo semi-sólido e em Sistema de Imersão
Temporária;
� Multiplicar o material inoculado tanto no Sistema� Multiplicar o material inoculado tanto no Sistema
Convencional quanto no Sistema de Imersão Temporária;
� Avaliar o crescimento a cada subcultivo e coletar plantas para
análises bioquímicas e moleculares;
METASMETASMETASMETASMETASMETASMETASMETAS
� Definir o estresse a que estão submetidas às plantas em ambos
os sistemas de micropropagação, por meio de avaliação das
atividades enzimáticas e da quantificação da produção de
radicais livres;
� Detectar a taxa de variação somaclonal por meio de marcador
molecular (RAPD);
� Analisar os resultados visando caracterizar e comparar os dois
sistemas de micropropagação a fim de definir o que resulta em
menor taxa de variação somaclonal associando este dado ao nível
de estresse in vitro ao qual as plantas micropropagadas são
submetidas.
METASMETASMETASMETASMETASMETASMETASMETAS
submetidas.
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
MaterialMaterialMaterialMaterialMaterialMaterialMaterialMaterial vegetalvegetalvegetalvegetalvegetalvegetalvegetalvegetal
RB934465 RB867515
Biofábrica Governador Miguel Arraes
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
CultivoCultivoCultivoCultivoCultivoCultivoCultivoCultivo inininininininin vivivivivivivivi trotrotrotrotrotrotrotro
Segmentos apicais (10 cm)
Detergente neutro
Álcool 70%
Hipoclorito de sódio (3%)
Tríplice lavagem
Segmentos de 2 cm
Inoculação
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
Estabelecimento
Multiplicação
0,3 mg.L-1 de BAP0,1 mg. L-1 de AIA
Meioconvencional
Sistema de imersão temporária
GA3 GA3
0,2 mg.L-1 de BAP1,0 mg.L-1 de AIA
0,2 de BAP1,0 de AIA
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
Sala de Crescimento ⇒ 27 ± 2°CFotoperíodo16 horas
Intensidade luminosa de 47 µmol m-2 s-1.
Análises bioquímicas e molecularesAnálises bioquímicas e moleculares
Nitrogênio líquido
Freezer a -80ºC
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
AvaliaçãoAvaliaçãoAvaliaçãoAvaliaçãoAvaliaçãoAvaliaçãoAvaliaçãoAvaliação dodododododododo crescimentocrescimentocrescimentocrescimentocrescimentocrescimentocrescimentocrescimento (a(a(a(a(a(a(a(a cadacadacadacadacadacadacadacada subcultivosubcultivosubcultivosubcultivosubcultivosubcultivosubcultivosubcultivo))))))))
� Produção de biomassa fresca
Número de plantas� Número de plantas
� Tamanho médio
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
Estudo da atividade Estudo da atividade Estudo da atividade Estudo da atividade Estudo da atividade Estudo da atividade Estudo da atividade Estudo da atividade antiantiantiantiantiantiantianti--------radicalarradicalarradicalarradicalarradicalarradicalarradicalarradicalar
Extratos brutos (0,5 mg.mL-1)
Tubos de ensaio – 5 mL de 2,2-difenil-Tubos de ensaio – 5 mL de 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (100 mM EtOH)
Agitação (30 min.) em aparelho de ultra-som
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
Quantificação de radicais de DPPH
Eficiência anti-radicalar → regressão
UV-Vis –comprimento de onda de 517nm
Eficiência anti-radicalar → regressão linear (GraphPad Prism 4.0)
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
Enzimas antioxidantesEnzimas antioxidantesEnzimas antioxidantesEnzimas antioxidantesEnzimas antioxidantesEnzimas antioxidantesEnzimas antioxidantesEnzimas antioxidantes
�� CatalaseCatalaseCatalaseCatalase –––– CAT CAT CAT CAT 15 µL do extrato
1 mL do tampão fosfato de potássio 100 mM (pH7,5) + 2,5 µL de H O 30%mM (pH7,5) + 2,5 µL de H2O2 30%
Decomposição do H2O2 por 1 min.
Espectrofotômetro (240nm) – 25ºC
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
� AscorbatoAscorbatoAscorbatoAscorbato peroxidaseperoxidaseperoxidaseperoxidase –––– APXAPXAPXAPX
50 µL do extrato
650 µL do tampão fosfato de potássio 80 mM (pH7,0) + 100 µL de ascorbato (5mM) + 100 µL de EDTA (1mM) + 100 µL de H O 1mMµL de EDTA (1mM) + 100 µL de H2O2 1mM
Banho-maria a 30ºC
Espectrofotômetro (290nm)
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
� SuperóxidoSuperóxidoSuperóxidoSuperóxido dismutasedismutasedismutasedismutase –––– SODSODSODSOD::::
Gel de poliacrilamida
5 µL de SOD bovina
Coloração → Azul de nitro tetrazólio(NBT) e riboflavina (CAKMAK E HORST, 1991)
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
� PeroxidasePeroxidasePeroxidasePeroxidase –––– PODPODPODPOD
Processadas → tampão fostato 0,2 M (pH 6,7) à 0-4ºC
Centrifugado por 15 min a 10.000g
Adição de solução H2O2 e fenol → banho-maria (5 min)
Etanol
Atividade expressa em mol de H2O2 decomposto
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
� PolifenoloxidasePolifenoloxidasePolifenoloxidasePolifenoloxidase –––– PPOPPOPPOPPO::::
Será determinada pelo mesmo método daperoxidase.
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
FenóisFenóisFenóisFenóisFenóisFenóisFenóisFenóis totaistotaistotaistotaistotaistotaistotaistotais
1 mL de extrato metanólico
Reagente de Folin-Ciocalteu + Reagente de Folin-Ciocalteu + carbonato de sódio (75 g.L-1)
30 minutos → Leitura em espectrofotômetro UV-Vis a 20ºC a 765 nm
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
AnálisesAnálisesAnálisesAnálisesAnálisesAnálisesAnálisesAnálises molecularesmolecularesmolecularesmolecularesmolecularesmolecularesmolecularesmoleculares –––––––– ExtraçãoExtraçãoExtraçãoExtraçãoExtraçãoExtraçãoExtraçãoExtração dededededededede DNADNADNADNADNADNADNADNA
300 mg – macerada em almofariz contendo
nitrogênio
Adição de 800 µL de tampão de extração
Aquecimento a
65ºC – 40 min
Lavagem em clorofórmio-álcool isoamílico (centrífuga por 5 min
a 14.000 rpm
Adição de álcool isopropílico Repouso de 2 h
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
Centrifugação por 10 min a 14.000 rpm
Re-suspensão em 300 µL de tampão
Contendo RNAseRe-precipitação do DNA com NaCl (5M) e isopropanol
Contendo RNAse(40 µg. mL-1)
Re-precipitação do DNA com NaCl (5M) e isopropanol
Centrifugação por 10 min
Extração avaliada em minigel de agarose 8% a
80 volts por 30 min
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
ReaçõesReaçõesReaçõesReaçõesReaçõesReaçõesReaçõesReações dededededededede AmplificaçãoAmplificaçãoAmplificaçãoAmplificaçãoAmplificaçãoAmplificaçãoAmplificaçãoAmplificação
TermocicladorPrograma –40 ciclos
Etapa de desnaturação a 94ºC (15 seg)
Etapa de ligação Etapa de Etapa de ligação do iniciador a 35ºC ( 30 seg)
Etapa de extensão a 72ºC (60 seg)
Ciclo final de 72ºC (7 min)
Separação em eletroforese
100 volts (4h) em gel de agarose 1,2% com 10 mL-1
de brometo de etídio
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
Visualização das bandas
Luz ultravioleta
Ausência e presença de bandas específicas comparadas ao padrão → detecção de
variantes somaclonais
METODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIAMETODOLOGIA
AnáliseAnáliseAnáliseAnáliseAnáliseAnáliseAnáliseAnálise dosdosdosdosdosdosdosdos dadosdadosdadosdadosdadosdadosdadosdados obtidosobtidosobtidosobtidosobtidosobtidosobtidosobtidos
As médias dos somaclones obtidos serão calculadas,
para cada subcultivo em cada sistema de micropropagação
e as diferenças serão analisadas utilizando-se o teste do
Qui-quadrado (SOKAL e ROHLF, 1981).
CRONOGRAMACRONOGRAMACRONOGRAMACRONOGRAMACRONOGRAMACRONOGRAMACRONOGRAMACRONOGRAMA
ATIVIDADESATIVIDADESATIVIDADESATIVIDADES2009200920092009 2010201020102010 2011201120112011
MMMM JJJJ JJJJ AAAA SSSS OOOO NNNN DDDD JJJJ FFFF MMMM AAAA MMMM JJJJ JJJJ AAAA SSSS OOOO NNNN DDDD JJJJ FFFF
Revisão bibliográfica x x x x x x x x x x x x x x x x x x x x
Inoculação de ápices caulinares
x x
Estabelecimento dos sistemas de micropropagação x x
Subcultivos x x x x x x x x x x x x x
Coleta de amostras x x x x x x x x x x x x xColeta de amostras x x x x x x x x x x x x x
Avaliação de crescimento/ multiplicação x x x x x x x x x x x x x
Análises bioquímicas x x x x x x x
Análises moleculares x x x x x x x
Elaboração de artigos para eventos científicos x x x
Elaboração do relatório x
Escrita da dissertação x x x x x
Defesa da dissertação x
ORÇAMENTOORÇAMENTOORÇAMENTOORÇAMENTOORÇAMENTOORÇAMENTOORÇAMENTOORÇAMENTO
MateriaisMateriaisMateriaisMateriais UnidadeUnidadeUnidadeUnidade QuantidadeQuantidadeQuantidadeQuantidade V. V. V. V. unitário (R$)unitário (R$)unitário (R$)unitário (R$) V.V.V.V. total total total total (R$)(R$)(R$)(R$)
Nitrato de potássioNitrato de amôniaCloreto de CálcioFosfato de potássio monobásicoPeróxido de hidrogênioEDTA6-benzilaminopurinaÁcido giberélicoÁcido indolácetico
KgKgKgKglitroKg
GramaGramaGrama
111121515
338,00338,0018,0058,0018,00110,00122,50233,90112,00
338,00338,0018,0058,0036,00110,00122,50233,90112,00Ácido indolácetico
SacaroseAga bacteriológicoKit de extração de DNALâmina para bisturi nº11Nitrogênio líquidoTubo eppendorf 1,5 mlEtiquetaFita crepeLuva de procedimento tam. PPapel alumínioPlastfilmTOTALTOTALTOTALTOTAL
GramaKgKg–
CaixaLitroCaixaPacoteUnidadeCaixa
UnidadeUnidade
551135025511510
112,0024,00
520,00765,0022,008,50
17,501,393,20
12,002,152,15
112,00120,00520,00765,0066,00
425,0035,006,95
16,0012,0032,2521,50
3.386,10
RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIO--------ECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICO
Utilização de variedades RB (Programa Nacional de
Melhoramento da cana-de-açúcar + micropropagação ⇒ 30%
de produtividade
Sistema de imersão temporária ⇒ 1 milhão de mudas/mêsSistema de imersão temporária ⇒ 1 milhão de mudas/mês
Renovação de até 320.000 ha entre 2009 e 2012
Avaliação dos fatores estressantes ⇒ análises bioquímicas e
moleculares
RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO RELEVÂNCIA E IMPACTO NO DESENVOLVIMENTO CIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIOCIENTÍFICO, TECNOLÓGICO E SÓCIO--------ECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICOECONÔMICO
Avaliação molecular ⇒ controle da sanidade e da fidelidade
genética das mudas
Caracterização do nível de estresse ⇒ avaliar até que ponto o
estresse pode estar correlacionado à variação somaclonal
Contribuir para que os agricultores obtenham mudas
geneticamente fiéis
APOIO FINANCEIRO E INSTITUCIONALAPOIO FINANCEIRO E INSTITUCIONALAPOIO FINANCEIRO E INSTITUCIONALAPOIO FINANCEIRO E INSTITUCIONALAPOIO FINANCEIRO E INSTITUCIONALAPOIO FINANCEIRO E INSTITUCIONALAPOIO FINANCEIRO E INSTITUCIONALAPOIO FINANCEIRO E INSTITUCIONAL
“O “O “O “O “O “O “O “O eueueueueueueueu--------estresseestresseestresseestresseestresseestresseestresseestresse na na na na na na na na micropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagaçãomicropropagação da canada canada canada canada canada canada canada cana--------dededededededede--------açúcar: variáveis açúcar: variáveis açúcar: variáveis açúcar: variáveis açúcar: variáveis açúcar: variáveis açúcar: variáveis açúcar: variáveis bioquímicas e moleculares”bioquímicas e moleculares”bioquímicas e moleculares”bioquímicas e moleculares”bioquímicas e moleculares”bioquímicas e moleculares”bioquímicas e moleculares”bioquímicas e moleculares”
GemimaGemimaGemimaGemima MançoMançoMançoManço de Melode Melode Melode MeloGemimaGemimaGemimaGemima MançoMançoMançoManço de Melode Melode Melode Melo
Mestranda do Programa de Mestranda do Programa de Mestranda do Programa de Mestranda do Programa de PósPósPósPós----graduaçãograduaçãograduaçãograduação em Agronomia em Agronomia em Agronomia em Agronomia ––––Melhoramento Genético de Plantas Melhoramento Genético de Plantas Melhoramento Genético de Plantas Melhoramento Genético de Plantas –––– PPGAMGP da PPGAMGP da PPGAMGP da PPGAMGP da
Universidade Federal Rural de PernambucoUniversidade Federal Rural de PernambucoUniversidade Federal Rural de PernambucoUniversidade Federal Rural de Pernambuco
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