ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE GLUKOZE

ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Download PDF Report

Upload
nguyenphuc
View
217
Download
2

Embed Size (px)

Citation preview

ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i

TEST TOLERANCIJE GLUKOZE

• Ponoviti: – varenje ugljenih hidrata

– regulacija glikemije

• Odgovotiti na sledeća pitanja:– Kako različiti hormoni utiču na glikemiju?

– Zašto je održavanje glikemije važno?

• Eksperimentalno pokazati kako insulin i deksametazon utiču na glikemiju

• Eksperimentalno pokazati kako rastvor šećerautiče na glikemiju

• Objasniti rezultate dobijene eksperimentom

CILJ

Page 3: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Varenje ugljenih hidrata

• Pljuvačna -amilaza

• Pankreasna -amilaza

Page 4: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Varenje ugljenih hidrata

• Oligosaharidaze

Page 5: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Šta je glikemija?

koncentracija šećera u krvi

4.4 - 6.6 mmol/l

Fiziološke vrednosti

Page 6: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

• Insulin

– hipoglikemični efekat

– omogućava preuzimanje, deponovanje i iskorišćavanjeglukoze u skoro svim ćelijama, naročito u ćelijama jetre, mišića i masnog tkiva

– omogućava deponovanje glukoze u jetri, aktivacijom glikogen sintaze i inhibicijom glikogen fosforilaze

– inhibira glukoneogenezu i omogućava sintezu MK iz glukoze

Page 7: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

• Glukagon

– hiperglikemični efekat

– aktivira glikogen fosforilazu u hepatocitama

Page 8: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Page 9: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

DRUGI HORMONI

• Adrenalin - aktivira fosforilaze i deluje na glikogenolizu u ćelijama jetre i poprečno prugastim mišićima

• Glukokortikoidi i hormon rasta smanjuju iskoriščavanje glukoze tako što deluju na nivou ćelijske membrane i sprečavaju ulazak glukoze u ćeliju

Page 10: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Insulin-zavisni

Tip I

Juvenilni

Insulin-nezavisni

Tip II

Insulinska rezistencija

Diabetes mellitus

Page 11: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

TEST TOLERANCIJE GLUKOZE

• Koristi se za postavljanje dijagnoze dijabetesa

o Određuje se glikemija natašte

o Popije se koncentrovani rastvor glukoze (1g/kg telesne mase)

o U određenim vremenskim intervalima ponovo se određuje glikemija

Page 12: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Kriva tolerancije glukoze kod dijabetičara i zdravih ljudi

Page 13: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

1) Anestezirati pacova etrom

2) Pacovu ubaciti sondu u želudac i dati koncentrovani rastvor glukoze (11%)

3) Amputacijom vrha repa uzeti krv za analizu, kap krvi naneti direktno na reagens trake i izmeriti glikemiju

4) Odrediti glikemiju u određenim vremenskim intervalima (20 min)

Page 14: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Princip metode

• Enzim glukozo-oksidaza se nalazi na kristalnim poljima Dekstostix reagens traka

Glukoza + O2 + H2O ―› glukonska kiselina + H2O2

• Reaguje sa drugim komponentama kristala gradeći obojeno jedinjenje

• Intenzitet boje proporcionalan je koncentraciji glukoze u krvi

• Izražava koncentraciju glukoze u mmol/l

GOD

Page 15: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Coca Cola sadrži 108g/l

Ako čovek od 70 kg popije jednu čašu (200 ml) koliko treba da popije pacov od 300 gr da bi unos šećera bio isti?

Page 16: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

Metoda za određivanje glikemije po Trinder-u

Glukoza + O2 + H2O ―› glukonska kiselina + H2O2

H2O2 + 4-aminofenazon + fenol ―›

4-(p-benzohinomonoimin)-fenazon + 4H2O

• Hinonimin - jedinjenje roze boje sa maksimumom apsorpcije svetlosti talasne dužine od 510 nm

GOD

POD

1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa

2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije 5.56 mmola/l i 1 ml radnog reagensa

3) Slepa proba sadrži 10 µl destilovane vode i 1ml radnog reagensa

4) Promućkati na vorteksu i inkubirati 30 min na sobnoj temperaturi

5) Očitavati apsorbance na spektrofotometru, na 510 nm, prema slepoj probi

Cst : Ast = Cx : Ax

Radni reagens: 200 mM fosfatni pufer (pH 7.5), glukozo oksidaza 11IU/ml, peroksidaza 0.02 IU/ml, 0.77 mM 4-aminofenazon, 11 mM fenol

Page 18: ODREĐIVANJE GLIKEMIJE i TEST TOLERANCIJE · PDF file1) Odmeriti 10 µl seruma i dodati 1 ml radnog reagensa 2) U epruvetu sa standardom se sipa 10 µl standardnog rastvora koncentracije

KONTROLA INSULIN DEKSAMETAZON

Deksametazon je sintetički glukokortikoid

Primerdesign Ltd TM Mycoplasma · 2019-01-07 · 2 x 105 per µl 2 x 104 per µl 2 x 103 per µl 2 x 102 per µl 20 per µl 2 per µl Standard Curve Copy Number Tube 1 Positive control

Documents

2. * 2009 6 · 450 nm 440 nm 460 nm 630 nm 30 1A, (1B) 1C 1F 1G 12H 1 101 2 50 µL 50 µL 50 µL 3 1 15 30 1 4 5 5 50 µL 50 µL 6 2 15 30 1 7 5 8 50 µL 9 15 30 30 10 50 µL 11 450

Documents

SofTouch...8707-06XX 8-Channel 5 - 100 µl1 µl 200 µl, 300 µl 8707-07XX 8-Channel 25 - 250 µl5 µl 300 µl 8707-08XX 8-Channel 50 - 1200 µl 10 µl 1200 µl 8707-09XX 12-Channel

Documents

AriaMx Real-Time PCR Software...Primer (200-600 nM) X µL X µL Probe (150-600 nM) None X µL Template X µL X µL DW Up to 20 µL Up to 20 µL AriaMxリアルタイムPCRシステムの反応液量は10

Documents

pET Express & Purify Kits User Manual - Takara Bio Manual/PT5018-1.pdf15 µl pET6xHN-C Vector (In-Fusion Ready) [100 ng/µl] 10 µl pET6xHN-GFPuv Vector [500 ng/µl] 15 µl 1.1 kb

Documents

1.Set up 110 µl mix for each primer/DNA combo on ice! 1.1.1 µl 100x F primer (1 pMol/µl = 1µM final []) 2.1.1 µl 100x R primer 3.11 µl 10x PCR buffer 4.2.2

Documents

Culture and Molecular Identification of Helicobacter ... · Also, 2.5 µl of each primer (40 ng/µl) were used, together with 12 µl molecular biology grade water and 5 µl of DNA

Documents

Stepper · 2020. 1. 3. · Aufnahme-Volumen ml Volume prélevé ml 0.5 2.5 12.5 25 Delivery volume µl Dispensier-Volumen µl Volume distribué µl Volumen de dispensacion µl 1020304050

Documents

Agilent 6470 Triple Quadrupole LC/MS System and EMR-Lipid ...EMR vs QuEChERS workflow 400 µL extract + 600 µL water in autosampler vial. (Spinach: 200 µL extract + 800 µL water)

Documents

Transferpette ¡Primicia mundial! Ergonomía: comprobada y ... · 0,5 - 10 µl, 2 - 20 µl, 20 - 200 µl, 100 - 1000 µl, 0,5 - 5 ml – Aparatos multicanal: ... do es un principio

Documents

Practical 3. Analyzing DNA fragments · the components of your digests on ice ... 6 12 µl 2 µl 2 µl 2 µl 1 µl ... Flick the tube with your finger to mix well and spin for 5 sec

Documents

Analysis of Submergence Tolerant Gene (Sub-1 on BC F … · 2017. 12. 26. · Marker, 1 µl R-Marker, 0.2 µl enzim . Taq Polymerase, 2 µl . polymerase, and 10.8 µl . MiliQ-water

Documents

PERUBAHAN MIOGLOBIN TUNA MATA BESAR SELAMA ...30%; 50 µL larutan APS 10 %; 16 µL TEMED) dan 4 % stacking gel (lapisan atas) terdiri dari 3.050 µL dH 2 O ditambahkan 1.250 µL larutan

Documents

Novedades 2015 - Cromlab · 2017-03-16 · 2 infochroma ag · Sumpfstrasse 3 · CH-6300 Zug · info@infochroma.ch · Tel. +41 41 748 50 6060 infoNews 2015 250 µl 25 µl 8 µl 5 µl

Novedades 2015 - Cromlab · 2017-03-16 · 2 infochroma ag · Sumpfstrasse 3 · CH-6300 Zug · [email protected] · Tel. +41 41 748 50 6060 infoNews 2015 250 µl 25 µl 8 µl 5 µl

Documents

KAPA RNA HyperPrep Kit Roche Platforms · 2019. 9. 20. · KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X) 300 µL 300 µL 25 µL 780 µL 50 µL 1 mL ... and is the polymerase of choice for NGS

Documents

Verification Procedure for Accuracy and Precision · P10, P10N, U10 1.0 µL to 10 µL D10, DL10 DF10, DFL10 C10, C8x10, C1 x10 0. to 10 µL P 0, P 0N, U 0 µL to 0 µL U8x 0, U1 x

Documents

Supplementary Information - Royal Society of Chemistry · time (3 min to 1020 min), different AgNO3 content (0 µL to 450 µL) and different seed content (12 µL to 60 µL) were evaluated

Documents

Thermo Scientific ClipTip Pipetting System · When Thermo Scientific ... • F1-ClipTip 12-ch 1-10 µL 1-10 µL 0.02 µL 4661220N 12.5 Ext µL Tips* Packaging

Documents

PRECISION LIQUID HANDLING - Microlab Tech · 2010-06-22 · MICROLAB ® Robotic ... 55019-09 100 µL 200 µL 21 and 22 55019-11 200 µL 200 µL 21 and 22 55019-13 250 µL 300 µL

Documents

In vivo sledování doxorubicinu ve svalové tkáníweb2.mendelu.cz/af_239_nanotech/data/phd/2.seminar.pdf · Chicken muscle tissue ... Max intensity 50 µl 400 µl 100 µl 150 µl

Documents

TransIT X2® Dynamic Delivery System for CRISPR/Cas9 ...€¦ · Serum-free medium 50 µl 100 µl 250 µl guide RNA 50 µM stock, 12 nM final in well 0.12 µl 0.24 µl 0.6 µl as9

Documents

Human Lactate Dehydrogenase A subunit (LDHA) AlphaLISA … · 2017. 11. 15. · Vol. of [LDHA (µL) Vol. of diluent (µL) * LDHA] in standard curve (g/mL in 5 µL) (pg/mL in 5 µL)

Documents

PROCEDURE FOR CANINE MAJOR CROSSMATCH - alvedia.com · 10 µl 10 µl 10 µl 10 µl N°3 : RBCs suspension preparation Drop gently the suspension on the top of the gel without touching

Documents

Métodos para el estudio de microorganismos en … Curie Research Training/10_Gonzalez.pdf · hasta 50 µl 10 x 50 mM 20-50 µl 20-50 µl 1-5 u/µl Componentes Concentración final

Documents

Fine Care Biosystems - ENDO...VARIABLE 0.1 - 2.5 µl 0.5 - 10 µl 2 - 20 µl FIXED 2.5, 5, 10 µl MUL TI 0.5 - 10 µl VARIABLE 5 - 50 µl FIXED 20, 25 µl MULTI 5 - 50 µl VARIABLE

Documents

20202017 ALEXMK2 Quick Guide A4...ALEX2 Stop Solution 8 Min 100 µL 400 µL 100 µL 500 µL 500 µL 500 µL 500 µL 500 µL Title 20202017_ALEXMK2_Quick_Guide_A4 Created Date 2/17/2020

Documents

Supporting Information Boosting CRISPR/Cas9 …...Bsa I (10 U/µl, NEB) 0.5 µl T7 DNA Ligase (3000 U/µl, NEB) 0.5 µl Total Volume 20 µl For GG assembly reactions to construct PTG1-PTG8,

Documents

Instruction Manual Bedienungsanleitung Mode d’ emploi ......Cat.No. Range Tip Standard Plus 722001 5 µl 10, 300, 350 µl - - 722004 10 µl 10, 300, 350 µl - - 722010 20 µl 300,

Documents

BIOHEMIJA Inewton.pmf.unsa.ba/hemija/kohbh/predmeti/1-III/biohemija_I... · BIOHEMIJA I–laboratorijske ... U epruvetu sipati 1 ml reagensa Fehling I i Fehling II i zagrijavati na

Documents

10 µl 10 µl 10 µl 20 µl 100 µl 200 µl 300 µl 1.000 µl 1.250 µl … · 2017. 3. 9. · w w .nerbe-lus conformity tested (ISO 8655) Certified RNase/DNase Pyrogen, DNA, ATP

Documents