ORTHO- I PARAMYXOVIRIDAE Mixovirusurile reunesc virusuri complexe ARN- care au afinitate pentru mucoproteine (myxo mucus) repartizate n 2 familii:OrthomyxoviridaeParamyxoviridae

FAMILIAOrthomyxoviridaeParamyxoviridaeDIMENSIUNE100 nm200 nmNUCLEOCAPSIDASimetrieDiametruHelicoidal8 nmHelicoidal16 nmGENOMULARN-, transcriptaz asociat, 8 segmenteARN-, transcriptaz asociat, nesegmentatSUPERCAPSIDASpiculi H i NSpiculi FSeparaiabseniAsociaiprezeniREPLICAREA GENOMULUIn nucleun citoplasm

FAMILIA ORTHOMYXOVIRIDAEGenuri: Influenzavirus A (virusul gripal A) Influenzavirus B (virusul gripal B) Influenzavirus C (virusul gripal C) Thogotovirus (virusurile Dhori i Thogoto)Agenii cauzali ai gripei infecie respiratorie acut cu simptome sistemice importante. Tipul A provoac pandemii periodice (1918 20 mln decesuri, 1957, 1968)Tipurile A i B epidemii regionale i locale1933 prima cultur de virus gripal uman (Smith, Andrewes i Laidlaw).

MORFOLOGIA, COMPOZIIA CHIMIC A VIRUSULUI GRIPAL AParticule rotunde, 80-120 nm, sau filamentoase, constituite din:Genom Compus din 8 segmente de ARN-, 6 segmente codeaz cte o protein (P1, P2, P3, HA, NA, NP), 2 cte 2 proteine (M1-M2 i NS1-NS2)Capsida (NC) - tubular de simetrie helicoidal, separat pentru fiecare segment.

SUPERCAPSIDADeriv din MCP a celulei-gazdDublu strat lipidic extern (origine celular)Strat intern proteic (matrice, proteine virale M1, M2) asigur legtura dintre GP de suprafat i NC; M2 - canal ionic2 tipuri de GP nserate n membran: hemaglutinina - HA (H) i neuraminidaza -NA (N), distincte morfologic i biologic (virusul gripal C doar HA)

Hemaglutinina (HA, H) H1 H15Trimer compus din 2 polipeptide HA1 i HA2HA1 fixarea specific a virionilor la receptori celulari (inclusiv hematii), ce conin acid N-acetilneuraminicHA2 fuziunea supercapsidei cu membrana celulei-gazdAnticorpii anti-HA:inhib fixarea virusului de celula-intInhib hemaglutinarea

Neuraminidaza (NA) N1 N9Tetramer, polipeptid unicFuncii : Descompune acidul sialic din mucus Asigur detaarea virionilor nmugurii prin eliminarea acidului neuraminic din receptorii celulariAnticorpii anti-NA limiteaz diseminarea virionilor

STRUCTURA ANTIGENICAg interne NP i M, specifice de tip A,B,CAg externe HA i NA, specifice de subtip i de variant 15 subtipuri de HA (H1-H15) i 9 de NA (N1-N9), asociaiile lor formeaz subtipuri de virus A.La om N1, N2 i H1, H2, H3 (H1N1; H2N2; H3N2)Descrierea unei sue de virus gripal: Ex.: A/Texas/1/77/(H3N2)

VARIAII ANTIGENICE ALE HA I NAVariaii Ag minore drift (mutaii punctiforme, modific civa AA din HA sau/i NA, tipurile A i B) provoac epidemii fiecare 3-4 aniVariaii Ag majore shift (recombinaii genetice, schimbarea complet a unui segment genomic HA sau NA) - provoac pandemii

Cultivarea virusului gripal Ou embrionat de gin (cavitatea amniotic i alantoic)Culturi de celule (fibroblati de pui, culturi primare de rinichi de maimu, linii celulare de rinichi de cine MDCK, linii Vero)Reproducerea infeciei la maimue, dihori

MULTIPLICAREAATAAREA (adsorbia) HA1+acid neuraminicPENETRAREA prin endocitozDECAPSIDAREA prin fuziunea supercapsidei i membranei vacuolei de endocitoza, NC penetreaz n nucleu prin porii membranei nucleareBIOSINTEZA (eclipsa)Transcrierea ARNm (transcriptaze P1, P2, P3)Translaia ARNm i sinteza proteinelor virale (citopl)Replicarea genomului (ARNv....ARNc....ARNv)

ASAMBLAREAn citoplasm: HA i NA se inser n MCP, iar M1 i M2 o cptuesc din interiorn nucleu: NP se asociaz cu ARN-, formnd NC, apoi migreaz spre zonele modificate ale MCP (via aparatul Golgi)ELIBERAREA: prin nmugurire NA ajut la desprinderea virionilor de MCP i evit formarea agregatelor. Celula rmne aparent viabil, dar epuizat i moare. Citoliza este determinat de rspunsul imun citotoxic (NK, LTC).

PATOGENEZA GRIPEIVirusul gripal A se ntlnete la om i animale: porc, cal, psri, foci, balene, etc.Virusul gripal B om (foci)Virusul gripal C om (cine, porc)Sursa de infecie omul bolnav (animale? Cazuri sporadice de grip aviar la om (H7N1, H9N2, H5N1) 2003/04 n Vietnam, 1997 Hong Kong). Virusul este prezent n rinofaringe n primele 2 zile de la debutul bolii

Mecanismul de transmitere aerogen, prin picturi Flugge (tuse, strnut).Virusul se propag n cile respiratorii superioare i inferioare, inducnd o inflamaie a mucoasei i edem al laringelui, traheii i bronhilor. Celulele epiteliale ciliate sunt distruse (fr a afecta celulele bazale). Procesul regenerativ ncepe cu ziua a 5 i repararea complet a epiteliului are loc n 1 lun. Contingent de risc - persoane n vrst, copii, imunodeprimai, bolnavi cu maladii cronice cardiovasculare, respiratorii, insuficien renal, diabet.

Forme cliniceGripa inaparent, asimptomaticGripa comun (benign, durata 4-7 zile). Incubaia cteva ore - 2 zile. Debut brutal, cu frison, febr, cefalee, rinoree, tuse, mialgii, artralgii, anorexie, astenie (IFN?). Complicaii (infecii secundare bacteriene): otite, sinusite, bronite, bronhopneumonii, etc. Complicaii rare: sindromul Reye (encefalit acut cu degenerescena ficatului); sindromul Guillain-Barre (poliradiculonevrit) Gripa malign (pneumonie viral primitiv cu edem pulmonar i IRA)

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL GRIPEIPrelevate: lavaje, aspiraii nazale, traheale, expectoraii bronice (n primele 48 ore)Examenul virusologic - Izolarea n oul embrionat de gin de 10-11 zile sau culturi de celule (MDCK). - Indicarea virusului activitate hemaglutinant fa de eritrocite de cobai, gin, curcan a lichidului amniotic i alantoic, hemadsorbia lor pe cultura de celule. - Identificarea RIHA, RIHAds, RN Detectarea Ag virale n sedimentul celular (RIF, ELISA) Detectarea genomului viral

4. Serodiagnosticul gripei Retrospectiv, de confirmare. Se examineaz seruri perechi. Se determin creterea titrului de Ac de 4 ori, sau prezena Ac Ig M.Reacii: RFC cu Ag NP (determinarea tipului)RIHA cu sua viral circulantELISARNImunitatea: celular (LTC, NK), umoral (Ig G, Ig A), specific de subtip.

TRATAMENTUL GRIPEIAmantadin, rimantadin. mpiedic ptrunderea NC n citoplasma celulei infectate cu virus AZanamivir, oseltamivir. Au structura similar acidului neuraminic. Inhib activitatea NA, mpiedicnd eliberarea virusurilor A i B i diseminarea lor prin mucus, determin agregarea virionilor.Tratament simptomatic (antipiretice, antibiotice, etc)

PROFILAXIA SPECIFIC A GRIPEIVaccinuri inactivate: conin 2 sue de virus A (H1N1 i H3N2) i o su B, cultivate in ovo i inactivate cu beta-propiolacton. Inoculare i/m, s/c; Ig G persist 5-6 luni.Vaccinuri vii atenuate. Suele sunt cultivate in ovo la 25 C, atenuate prin pasaje multiple. Administrare intranazal prin aerozoli, imunitate local (Ig A).Vaccinuri subunitare, constituite din HA i NAn curs de cercetare vaccinuri vii/subunitare recombinante, vaccinuri polinucleotidice.

FAMILIA PARAMYXOVIRIDAEFAMILIA PARAMYXOVIRIDAESUBFAMILII :PARAMYXOVIRINAE (genurile Paramyxovirus, Rubulavirus, Morbillivirus) PNEUMOVIRINAE (genurile Pneumovirus, Metapneumovirus)

CARACTERISTICA GENERAL A PARAMYXOVIRUSURILORVirusuri nvelite, sferice, uneori filamentoase, 150-400 nm.Genomul ARN- nesegmentat (transcriptaza asociat)Capsida de simetrie helicoidal, constituit din proteina NP. n asociaie cu ARN formeaz NC tubular de 18 nm diametruSupercapsida dublu strat lipidic, proteina intern matrice M, spiculi glicoproteici nserai n membran:HN asigur adeziunea la celula-int F asigur fuziunea supercapsidei cu membrana celular n timpul penetrrii virusului n celul (provoac formarea de sinciii n culturi de celule) Reproducerea are loc n citoplasm