PENETAPAN KADAR SAKARIN DALAM MINUMAN RINGAN BERSODA DENGAN

METODE KCKT

TUJUAN

Setelah praktikum ini mahasiswa diharapkan mampu melakukan analisis kadar sakarin dengan metode KCKT

Bahan dan alat Bahan

- natrium sakarin baku

- amonium asetat

- acetonitrile

- asam asetat glasial

- aqua pro injeksi

- metanol

- produk minuman ringan Alat

- seperangkat KCKT

- pH meter

- alat-alat gelas

- mikro pipet

- penyaring vakum

Cara kerja

Pembuatan larutan fase gerak

dibuat campuran asetonitril dan dapar asetat. (5 : 95)

*dapar asetat 2% asam asetat dan 0,5% amonium asetat dalam air hingga ph 5.

pembuatan larutan baku sakarin

- sebanyak 50 mg natrium sakarin dimasukkan dalam labu 100 ml ad kan dengan aquades sampai tanda, kocok dan divortek.

pembuatan kurva baku

- dari larutan baku sakarin 500 ppm dipipet 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; dan 5,0 masukan dalam labu takar 5 ml diencerkan dengan fase gerak sampai tanda sonikator masing-masing larutan disuntikkan ke alat kckt catat waktu retensi dan luas area

Kondisi KCKT

Kolom : C18 shimpack CLC ODS

Dimensi kolom : 25 cm x 4,6 mm

Detektor : UV-VIS

Fase gerak : asetonitril : dapar asetat anhidrat pH 5

Kec. Alir : 1,0 mL/menit

Panjang gelombang : 254 nm

validasi

Presisi

sebanyak 20 µL lar baku sakarin disuntikkan ke alat kckt diulang selama 6 kali dengan laju alir 1,0 mL/menit. Catat waktu retensi dan luas area hitung koefisien variasinya.

Uji linearitas Larutan baku sakarin dgn seri konsentrasi 10,

20, 30, 40, 50 ppm yang disuntikkan ke alat kckt

Catat dan hitung luas area dibuat kurva hubungan konsentrasi sakarin baku dengan luas area. Didapat persamaan regresi linear y = bx+a

LOD/LOQ

Batas deteksi dan batas kuantisasi dihitung secara statistik melalui garis regresi linier dari kurva kalibrasi.

AKURASI

Dari beberapa sampel minuman ringan dihilangkan gasnya dengan sonikator selama 30 menit

Sampel 1a tanpa penambahan baku sakarin 3ml sampel yg sudah dihilangkan gasnya + akuades ad 10 ml saring 0,45 µm injek kckt catat dan hitung luas ara dan uji perolehan kembali. Rep 3 X

sampel 1b dengan penambahan baku sakarin 1 ml larutan sampel + 2ml larutan baku sakarin-->+ akuades ad 10 ml saring 0,45 µm injek kckt catat dan hitung luas ara dan uji perolehan kembali. Rep 3 X

Analisis data

Data perhitungan uji presisi, linieritas, lotd loq, akurasi, dan uji penetapan kadar kafein pada sampel

Penetapan kadar sakarin

Dari beberapa sampel minuman ringan dihilangkan gasnya dengan sonikator selama 30 menit1ml diadkan 10 ml dengan akuades saringinjek kckt dan catat luas areanya an hitung menggunakan persamaan kurva baku.

Sekian………