Paper Kimia Organik Bahan Alam

8/18/2019 Paper Kimia Organik Bahan Alam

1/29

MAKALAH PRAKTIKUM KIMIA ORGANIK BAHAN ALAM

“Aktivitas Antimikroba Terpenoid dari Sphaeranthus indicus L”

Diajukan untuk memenuhi salah satu tugas dalam mata kuliah Praktikum Kimia

Organik Bahan Alam

Disusun Oleh:

Maulidina Hajar Tunsia (13677!

"a#ella $laudia %ed&s'a (13677!

"urida )l*a Khusnul +atimah (136,--!

Putri Ha.a /&ai*ie (136,-,!

/hela Her&ant (136,,!

POLITKNIK AKA BOGOR

!"n# Pan$eran %o$iri no# &'( Tana) Bar* Bo$or +,-+.'

Ta)*n Akademik &/+.0&/+-


2/29

KATA PNGANTAR

/egala 0uji han&a milik Tuhan ang Maha 2sa atas rahmat dan hida&ah

"&a 0enulis da0at men&elesaikan makalah Akti4itas Antimikr#a Ter0enid dari

Sphaeranthus indicus 5 /hla.at dan salam semga senantiasa ter'urah ke0ada

%asulullah Muhammad /A #eserta keluarga8 saha#at dan umatn&a &ang

isti9mah dalam menegakkan risalahn&a

Makalah ini disusun untuk memenuhi salah satu tugas dalam mata kuliah

Praktikum Kimia Organik Bahan Alam Penulisan makalah ini tidak le0as dari

#im#ingan dan *asilitas &ang di#erikan leh #er#agai 0ihak Penulis mengu'a0kan

terima kasih ke0ada:

+# Bapak 1andra Ira2an3 M#%i8 selaku dsen mata kuliah Praktikum Kimia

Organik Bahan Alam &ang telah mem#erikan #im#ingan dalam 0en&usunan

makalah ini

Oran$ t*a &ang telah mem#erikan dukungann&a #aik se'ara mral dan

material ke0da 0enulis sehingga da0at men&elesaikan makalah ini te0at 0ada

.aktun&a

(# Rekan4rekan se5a2at dan seper5*an$an &ang telah mem#erikan mti4asi

dan masukan ke0ada 0enulis selama 0enulisan makalah ini

Penulis men&adari #ah.a dalam 0en&usunan la0ran ini masih jauh dari

kesem0urnaan Oleh karena itu8 0enulis menghara0kan saran dan kritik &ang

#ersi*at mem#angun /emga makalah ini da0at #erman*aat #agi &ang

mem#utuhkan khususn&a 0enulis dan 0em#a'a 0ada umumn&a

Bgr8 ; /e0tem#er -1

Pen&usun

1


3/29

6A7TAR I%I

Kata Pengantar


4/29

BAB +

PN6AHULUAN

A# LATAR BLAKANG

Alam telah men&ediakan sum#er agen 0eng#atan sejak dahulu kala

Pentingn&a tanaman her#a dalam 0enanganan 0en&akit ringan manusia tidak da0at

terlalu ditekankan @elas #ah.a kingdm tanaman harbours adalah sum#er da&a

alam &ang tidak ada ha#isn&a dari #ahan akti* &ang tak ternilai dalam 0enanganan

#an&ak .a#ah sulit /elanjutn&a8 km0nen akti* dari 0eng#atan her#al memiliki

kele#ihan dalam #entuk km#inasi dengan #an&ak #ahan lainn&a &ang

menunjukan ketidakakti*an Bagaimana0un juga km0nen 0elengka0 ini

mem#erikan tanaman seluruh keamanan dan kee*ekti*an &ang le#ih unggul dari

islasin&a dan km0nen akti* murni

Sphaerantus indicus 5inn meru0akan tanaman her#a &ang #iasa dikenal

se#agai Mundi8 tinggi 3-'m atau 1 kaki dengan ranting men&e#ar8 ditemukan di

seluruh daratan =ndia8 terutama daerah 0er#ukitan8 se#agai rum0ut liar 0ada lahan

0adi /eluruh #agaian tanaman ini digunakan se#agai #at Bagian akarn&adirekmendasikan leh Hakims se#agai stmakik dan anthelmintik dalam dsis

?- grains sehari dalam #entuk ser#uk Bijin&a digunakan se#agai stmakik dan

anthelmintik /er#uk dari akar dan #ijin&a di#erikan dengan madu 0ada

0eng#atan #atuk Bungan&a se#agai alternati*8 de0urati*8 #erguna se#agai

0em#ersih darah 0ada 0en&akit kulit Kulit akar di'am0ur dengan air dadih

(whey) digunakan untuk 0eng#atan 0ada 0endarahan am#eien8 dan juga

digunakan se#agai 0asta untuk 0enggunaan lkal Min&ak &ang di0erleh dari

akar melalui destilasi ua08 dan 0endidihan dalam min&ak sesami (.ijen!8

direkmendasikan leh Hakims se#agai a0rdisiaka &ang #ernilai =ni juga

digunakan untuk 0em#engkakan kelenjar 0ada leher dan juga 0ada 0en&akit

kuning Bu#uk daun keringn&a digunakan dua kali sehari 0ada 0en&akit kulit

krnis se#agai anti si*ilitik dan tnik ner4ine O#at ini juga digunakan 0ada

0em#ehentian urethral

1


5/29

Per#edaan 0erusahaan *armaseutikal dalam dan luar negeri adalah dalam

0eman*aatan tanaman #erdasarkan in*rmasi dalam 0era.atan dari 4ariasi

0en&akit sekitar Ban&ak dari s0esies tanaman &ang telah didkumentasikan

se'ara *armaklgi dan klinis #ah.a tanaman terse#ut memiliki *itkimia dengan

tanda akti*itas 0ada #akteri 0atgen 0ada manusia

%esisten anti#itik menjadi 0erhatian gl#al #ah.a telah terjadi

0eningkatan insiden dari keli0atan resisten mikrrganisme 0atgen 0ada manusia

#e#era0a tahun terakhir8 se'ara luas 0enggunaan &ang sem#arangan dari #at

antimikr#a kmersil #iasan&a terjadi 0ada 0era.atan 0en&akit in*eksi Hal ini

telah mendesak 0ara ilmu.an untuk meneliti suatu antimikr#akteri #aru dari

#er#agai sum#er se0erti tanaman #at umum 0ada #e#era0a negara tr0is

Tanaman ini da0at tum#uh setinggi ?-'m Memiliki #atang &ang ram0ing dan

#iasan&a #er.arna kemerahan8 ditutu0i #ulu kekuningan terutama 0ada #agian

&ang le#ih muda Daunn&a tersusun #erla.anan8 ujungn&a run'ing dan #iasan&a

#er.arna kemerahan atau kehijauandengan ukuran 0anjang #erkisar kurang dari

'm Pada ail terlihat sangat ke'il te#al di#agian sekitar tum0ukan dari #unga

Bunga ke'il #er.arna hijau meru0akan karakteristik susunan #unga dari

eu0hr#ia Tangkai dan daun akan menghasilkan 'airan 0utih susu ketika

di0tng

B# TU!UAN

Penelitian ini #ertujuan untuk mengetahui akti4itas anti mikr#a dari

ter0enid &ang #erasal dari tanaman Sphaeranthus indicus 5

2


6/29

BAB II

TIN!AUAN PU%TAKA

a# Sphaeranthus indiscus L#

Tum#uhan &ang masuk dalam keluarga Asteraceae ini #an&ak tum#uh di

daratan =ndia Tanaman ini memiliki #an&ak 'a#ang (ranting!8 #er#au tajam8

meru0akan tanaman &ang tum#uh tahunan dengan tangkai #ersa&a0 dan #erduri

Ber#unga 0ada #ulan "4em#er sam0ai @anuari 0ada kndisi se0erti negara =ndia

Bungan&a #er#entuk #ulat disertai ram#ut halus Tanamna ini dikenal dengan

nama mundhi atau gundi di =ndia dan #iasa di

temukan di ladang 0adi se#agai rum0ut liar

Tanaman ini juga tum#uh di /ri 5anka8 dan

Australia

Ham0ir dari seluruh #agian tanaman ini da0at

digunakan dalam 0eng#atan se0erti #agian

daun8 #atang8 akar8 kulit #atang8 #unga sam0ai

#iji Menurut A&u4erda8 tanaman her#a ini memiliki rasa 0ahit8 memiliki e*ek

laksati4a8 digesti4a8 #at 0enguat (meta#lisme tu#uh!8 0enam#ahan na*su makan8

antelmintik8 dan alexipharmic

Tanaman ini #isa digunakan untuk meng#ati 0en&akit tu#erkulsis8

masalah 0en'ernaan8 #rnkitis8 0en&akit lim0ha8 kaki gajah (ele0hantiasis!8

anemia8 menghilangkan sakit 0ada 4agina dan uterus8 a#eien8 asma8 leu'derma8

disentri8 dan lainlain

Tanaman ini mengandung metil kha4ikl8 meth& 'innamaldeh&de

se#agai km0nen #esar8 ter0inen8 'itral8 geranil8 geranil asetat8 dan s0harenene

se#agai km0nen ke'il Tanaman ini juga diidenti*ikasi mengandung min&ak

assensial

b# Terpenoid

3


7/29

Dalam tum#uhan #iasan&a terda0at sen&a.a hidrkar#n dan hidrkar#n

terksigenasi &ang meru0akan sen&a.a ter0enid Kata ter0enid men'aku0

sejumlah #esar sen&a.a tum#uhan8 dan istilah ini digunakan untuk menunjukkan

#ah.a se'ara #isintesis semua sen&a.a tum#uhan itu #erasal dari sen&a.a &ang

sama @adi8 semua ter0enid #erasal dari mlekul is0rene

$H$($H3!C$H$H dan kerangka kar#nn&a di#angun leh

0en&am#ungan atau le#ih satuan $ ini Kemudian sen&a.a ini dikelm0kkan

kedalam #e#era0a glngan #erdasarkan jumlah satuan &ang terda0at dalam

sen&a.a terse#ut

Pengelm0kan sen&a.a ter0enid

Ter0enid meru0akan deri4at dehidrgenasi dan ksigenasi dari sen&a.a

ter0en Ter0en meru0akan suatu glngan hidrkar#n &ang #an&ak dihasilkan

leh tum#uhan dan se#agian kelm0k he.an %umus mlekul ter0en adalah

($H,!n Ter0enid dise#ut juga dengan is0renid Hal ini dise#a#kan karena

kerangka kar#nn&a sama se0erti sen&a.a is0ren /e'ara struktur kimia terenid

meru0akan 0engga#ungan dari unit is0rena8 da0at #eru0a rantai ter#uka atau

siklik8 da0at mengandung ikatan rangka08 gugus hidrksil8 kar#nil atau gugus

*ungsi lainn&a

/i*at *isika dari ter0enid adalah :

1 Dalam keadaan segar meru0akan 'airan tidak #er.arna8 teta0i jika

terksidasi .arna akan #eru#ah menjadi gela0

Mem0un&ai #au &ang khas

3 =ndeks #ias tinggi

4


8/29

? Ke#an&akan 0tik akti*

Kera0atan le#ih ke'il dari air

6 5arut dalam 0elarut rganik: eter dan al'hl

/i*at kimia sen&a.a ter0enid:

1 /en&a.a tidak jenuh (rantai ter#uka atau0un siklik!

=s0renid ke#an&akan #entukn&a khiral dan terjadi dalam dua #entuk

enantimer

/e'ara umum #isintesa ter0enid terjadin&a 3 reaksi dasar8 &aitu:

1 Pem#entukan is0rena akti* #erasal dari asam asetat melalui asam

me4alnat Pengga#ungan ke0ala dan ekr unit is0rene akan mem#entuk mn8

seskui8 di8 sester8 dan 0liter0enid

3 Pengga#ungan ekr dan ekr dari unit $1 atau $- menghasilkan

triter0enid dan sterid

Bisintesis sen&a.a ter0en terli#at sen&a.a &ang #er'a#ang Mula mula

gugus ketn dari kar#nil 0ada asetasetil kenim A #eradisi aldl dengan asetil

kenim A menghasilkan deri4at asam glutarat 5angkah #erikutn&a adalah

reduksi dari salah satu gugus kar#ksil 0ada untuk menghasilkan asam me4alnat

%eaksireaksi #erikutn&a ialah *s*rilasi8 eliminasi asam *s*at dan

dekar#ksilasi menghasilkan =PP &ang selanjutn&a #erismerisasi menjadi

DMAPP leh enim ismerase =PP se#agai unit is0ren akti* #erga#ung se'ara

ke0ada keekr dengan DMAPP dan 0engga#ungan ini meru0akan langkah

0ertama dari 0limerisasi is0ren untuk menghasilkan ter0enid

Pengga#ungan ini terjadi karena serangan elektrn dari ikatan rangka0 =PP

terhada0 atm kar#n dari DMAPP &ang kekurangan elektrn diikuti leh

0en&ingkiran isn 0ir*s*at /erangan ini menghasilkan geranil 0ir*s*at (EPP!

&akni sen&a.a antara #agi semua sen&a.a mnter0en Pengga#ungan

selanjutn&a antara satu unit =PP dan EPP dengan mekanisme &ang sama se0erti

antara =PP dan DMAPP menghasilkan *arnesil 0ir*s*at (+PP! &ang meru0akan

sen&a.a antara #agi semua sen&a.a seskuiter0en /en&a.asen&a.a diter0en

diturunkan dari geranilgeranil 0ir*s*at (EEPP! &ang #erasal dari kndensasi

5


9/29

antara

atau satu

unit =PP dan EPP

dengan mekanisme &ang

sama 0ula

8# Esherichia coli

6


10/29

Escherichia coli meru0akan #akteri Eram negati* #er#entuk #atang

0endek &ang memiliki 0anjang sekitar Fm8 diameter -7Fm8 le#ar -? G -7Fm

dan #ersi*at anaer# *akultati* 2 'li mem#entuk klni &ang #undar8 'em#ung8

dan halus dengan te0i &ang n&ata (/mith Kear&8 1;,, : @a.et et al81;;!

Man*aat dan Patgenesitas 2 'li adalah anggta *lra nrmal usus 2

'li #er0eran 0enting dalam sintesis 4itamin K8 kn4ersi 0igmen0igmen

em0edu8 asamasam em0edu dan 0en&era0an #er#agai at makanan 2 'li

termasuk ke dalam #akteri hetertr* &ang mem0erleh makanan #eru0a at

ganik dari lingkungann&a karena tidak da0at men&usun sendiri at rganik &ang

di#utuhkann&a at rganik di0erleh dari sisa rganisme lain Bakteri ini

menguraikan at rganik dalam makanan menjadi at anrganik8 &aitu $O8 HO8

energi8 dan mineral Di dalam lingkungan8 #akteri 0em#usuk ini #er*ungsi se#agai

0engurai dan 0en&edia nutrisi #agi tum#uhan (Eanis.arna8 1;;!

2 'li menjadi 0atgen jika jumlah #akteri ini dalam saluran 0en'ernaan

meningkat atau #erada di luar usus 2 'li menghasilkan entertksin

&angmen&e#a#kan #e#era0a kasus diare 2 'li #erassiasi dengan

enter0atgenik menghasilkan entertksin 0ada sel e0itel (@a.et et al81;;!

Pen&akit &ang dise#a#kan leh E. coli &aitu :

1 =n*eksi saluran kemih

E. coli meru0akan 0en&e#a# in*eksi saluran kemih 0ada kirakira ;- I

.anita muda dengan gejala antara lain sering #uang air ke'il8 disuria8

hematuria8 dan 0iuria "&eri 0inggang #erhu#ungan dengan in*eksi saluran

kemih #agian atas

Diare

7


11/29

E. coli &ang men&e#a#kan diare #an&ak ditemukan di seluruh dunia E.

coli diklasi*ikasikan leh 'iri khas si*at 4irulensin&a8 dan setia0 kelm0k

menim#ulkan 0en&akit melalui m ekanisme &ang #er#eda Ada lima

kelm0k galur 2 'li&ang 0atgen8 &aitu :

a E. coli Enteropatogenik (2P2$!

2P2$ 0en&e#a# 0enting diare 0ada #a&i8 khususn&a di negara

#erkem#ang 2P2$ se#elumn&a dikaitkan dengan .a#ah diare

0ada anakanak di negara maju 2P2$ melekat 0ada sel muksa

usus ke'il

# E. coli Enterotoksigenik (2T2$!

2T2$ 0en&e#a# diare 0ada #a&i di negara #erkem#ang +aktr

klnisasi 2T2$ &ang s0esi*ik untuk manusia menim#ulkan

0elekatan 2T2$ 0ada sel e0itel usus ke'il

' E. coli Enteroinvasif (2=2$!

2=2$ menim#ulkan 0en&akit &ang sangat miri0 dengan shigelsis

Pen&akit &ang 0aling sering 0ada anakanak di negara #erkem#ang

dan 0ara .isata.an &ang menuju negara terse#ut Ealur 2=2$

#ersi*at nnlaktsa atau melakukan *ermentasi laktsa dengan

lam#at serta #ersi*at tidak da0at #ergerak 2=2$ menim#ulkan

0en&akit melalui in4asin&a ke sel e0itel muksa usus

d E. coli Enterohemoragik (2H2K!

2H2K menghasilkan 4ertksin8 dinamai sesuai e*ek sittksisn&a

0ada sel >er8 suatu ginjal dari mn&et hijau A*rika

e E. coli Enteroagregatif (2A2$!J

2A2$ men&e#a#kan diare akut dan krnik 0ada mas&arakat di

negara #erkem#ang

3 Meningitis E. coli dan Streptococcus adalah 0en&e#a# utama meningitis 0ada #a&i E.

coli meru0akan 0en&e#a# 0ada sekitar ?-I kasus meningitis nenatal

(@a.et et al8 1;;6!

d# Klebsiella pneumoniae

Klebsiella sp. 0ertama kali diteliti dan di#eri nama leh #a'terilgist

@erman &ang #ernama 2d.in @kle#s (1,3? G1;13! Klebsiella sp meru0akan

#akteri gram negati* dari *amili Enterobactericeae &ang da0at ditemukan di

traktus gastrintestinal dan traktus res0iratri Be#era0a s0e'ies Kle#siella s0

8


12/29

antara lain Klebsiella pneumoniae Klebsiella oxytoca Klebsiella o!aenae dan

Klebsiella rhinoscleromatis Pada manusia8 K. "neumoniae hidu0 se'ara sa0r*it

dalam sistem 0erna*asan dan tinja manusia nrmal se#esar I8 dengan 1I da0at

men&e#a#kan radang 0aru G 0aru

Berdasarkan ke#utuhann&a akan ksigen8 Klebsiella sp meru0akan #akteri

*akultati* anaer# Klebsiella sp meru0akan kuman #er#entuk #atang 0endek8

tidak memiliki s0ra8 dan tidak memiliki *lagela Klebsiella sp. menguraikan

laktsa dan mem#entuk ka0sul #aik in4i4 atau in4itr dan klnin&a #erlendir

Ka0sul Klebsiella sp terdiri dari antigen O &ang meru0akan li0sakarida

&ang terdiri atas unit 0lisakarida &ang #erulang Plisakarida Os0esi*ik

mengandung gula &ang unik Antigen O tahan terhada0 0anas dan al'hl dan

#isa dideteksi dengan aglutinasi #akteri Anti#di terhada0 antigen O terutama

adalah =gM Antigen kedua adalah antigen K Antigen K ini #erada di luar antigen

O dan meru0akan suatu 'a0sular 0l&sa'harida Antigen K da0at mengganggu

aglutinasi melalui antiserum O dan #erhu#ungan dengan 4irulensi Kedua antigen

ini meningkatkan 0atgenitas Klebsiella sp.

Eam#aran mikrsk0is Kle#siella s0 0ada 0e.arnaan gram

Klebsiella sp. meru0akan #akteri enterik &ang terkadang ditemukan dalam

jumlah ke'il se#agai *lra nrmal saluran na0as atas Bakteri enterik #iasan&a

tidak men&e#a#kan 0en&akit dan mungkin di dalam usus #er0eran terhada0 *ungsi

dan nutrisi nrmal Bakteri menjadi 0atgen a0a#ila #akteri #erada dalam jaringan

diluar jaringan usus &ang nrmal atau di tem0at &ang jarang terda0at *lra nrmal

Bakteri enterik juga da0at men&e#a#kan in*eksi &ang dida0at dari rumah

sakit (nskmial! dan terkadang men&e#a#kan in*eksi &ang dida0at dari

kmunitas +aktr 4irulensi #akteri &ang mem0engaruhi 0atgenesis 0ada tu#uh

manusia adalah ka0sul 0lisakarida8 endtksin8 rese0tr dinding sel

9


13/29

Klebsiella sp.memiliki ka0sul #esar &ang terdiri dari 0lisakarida K &ang

menutu0i antigen smatik dan da0at diidenti*ikasi menggunakan tes 9uellung

dengan antiserum khusus /truktur ka0sul terse#ut #er*ungsi melindungi #akteri

dari *agsitsis leh granulsit 0limr*nuklear8 dan men'egah kematian #akteri

leh serum #akterisidal Adan&a antigen 0ada ka0sul &ang dimiliki Klebsiella sp

meningkatkan 0atgenitas #akteri =n*eksi sistem 0erna*asan leh Klebsiella sp

umumn&a dise#a#kan leh ka0sular antigen ti0e 1 dan

e# Proteus mirabilis

Prteus mira#ilis termasuk dalam tri#e Prteae8 *amili 2nter#a'teria'eae

Bakteri ini sering ditemukan di tanah dan air serta meru0akan *lra nrmal 0ada

saluran 0en'ernaan manusia dan mamalia Bakteri ini memiliki karakteristik

#atang8 gram negati*8 mem0un&ai kemam0uan s.arming 0ada medium agar

Prteus mira#ilis meru0akan salah satu 0en&e#a# ter0enting in*eksi saluran

kemih8 karena in*eksi &ang dise#a#kan leh #akteri ini #ersi*at 0ersisten8 sulit

ditera0i dan da0at #eraki#at *atal Bakteri ini da0at menim#ulkan km0likasi

antara lain 0&elne0hritis akut dan krnik8 '&stitis8 serta 0em#entukan #atu di

ginjal dan 4esi'a urinaria8 #akteremia dan se0sis

"roteus mirabilis mem0un&ai #e#era0a *aktr 4irulensi8 &aitu *im#ria atau

0ili8 hemlisin8 *lagella8 immungl#ulin A 0rtease8 deaminase serta urease

)ntuk da0at men&e#a#kan in*eksi8 mikrrganisme meli#atkan #e#era0a taha08

&aitu dimulai dengan 0elekatanadhesi 0ada 0ermukaan sel inang8 dan selanjutn&a

da0at terjadi in4asi dan men&e#ar se'ara lkal atau sistemik Kemam0uan #akteri

untuk melekat 0ada sel inang di0erantai leh mlekul adhesi &ang terda0at 0ada #akteri dan rese0tr &ang terda0at 0ada sel inang Mlekul adhesi 0ada #akteri

#isa terletak di 0ili atau di uter mem#rane 0rtein (OMP! Pelekatan #akteri ke

sel inang ini #ersi*at s0esi*ik /0esi*itas ini #erhu#ungan dengan ketersediaan

rese0tr &ang sesuai dan hal ini akan menentukan #agian tu#uh &ang akan

diin*eksi leh #akteri

10


14/29

"roteus mirabilis

9# Pseudomonas aerugenusa

Klasi*ikasi Pseudmnas menurut Berge& Ls 2disi ; tahun 1;;? se#agai

#erikut8

Kingdm : Ba'teria

Ph&lum : Prte#a'teria

$lass : Prte#a'teria

Ord : Pseudmnadales

+amil& : Pseudmnada'eae

Eenus : Pseudmnas

/0e'ies : Pseudmnas aeruginsa

Eenus "seudomonas terdiri dari sejumlah gram negati*8 aer#8 #ergerak

dengan *lagel8 #ersi*at 0atgen 0rtunistik dengan meman*aatkan kerusakan

0ada mekanisme 0ertahanan inang untuk memulai suatu in*eksi8 dan

men&e#a#kan in*eksi 0ada manusia 0ada saat kndisi 0ertahan tu#uh menurun

Bakteri #er#entuk #atang #erukuran -6 m #ergerak dengan *lagel

mntrika ( *lagel tunggal 0ada #agian kutu#!8 tidak memiliki s0ra8 tidak

#erslu#ung8 dan #ersi*at gram negati*

"seudomonas aeruginosa menjadi 0atgenik han&a jika #erada 0ada

tem0at dengan da&a tahan tidak nrmal8 misaln&a 0ada sela0ut lendir atau kulit

&ang mengalami kerusakan jaringan Bakteri &ang menem0el akan men&e#ar dan

mem&e#a#kan 0en&akit sistemik

11


15/29

12


16/29

BAB III

MTO6 PR1OBAAN

Ba)an dari berba$ai tanaman

Tanaman Sphaeranthus incidus 5 diam#il dari lingkungan sekitar daerah

%aisen8 MP di india Memiliki #an&ak 'a#ang atau ranting8 #er#au tajam dan

meru0akan tanaman &ang tum#uh tahunan dengan tangkai #ersa&a0 dan #erduri8

tulang daun sejajar8 men&em0it hingga ke #a.ah8 #ergerigi tajam8 #erram#ut

halus

Preparasi sampe" dan prosed*r kstraksi

Daun segar dianginanginkan selama satu minggu dan dihaluskan sam0ai

menjadi #u#uk halus dengan alat 0enggiling - gram #u#uk halus ditim#ang dan

ditam#ahkan -m5 etanl ;I didalam erlenme&er /etelah itu8 larutan

dig&angg&angkan dan disaring dengan kertas saring hatman +iltrat diua0kan

dengan rotary evaporator ( #odel $ype %&' *orning +td.! Di0erleh hasil

se#an&ak ;81I Hasil ekstrak disim0an dalam tem0eratur ruang 2kstrak mentah

dilarutkan dalam 3-I dimetilsul*ksida dan dien'erkan hingga knsentrasi -8

--8 1-8 1--8 dan - mgml lalu disim0an 0ada 1-$ sam0ai di#utuhkan

2kstrak mentah di0i0et dan dile.atkan melalui dinding klm te0at diatas

0en&um#at ka0as &ang telah dialiri 0elarut8 hal ini #ertujuan untuk men'egah agar

ekstraks tidak langsung#erinteraksi dengan sili'a gel@ika semua ekstrak mentah

telah disera0 leh #agian atas klm8 ruang ksng diatas akan terisi dengan

0elarut dan klm akan #erjalan8 sum#er 0elarut dan km#inasi 0elarut telah diisi

ulang dari 'rng 0emisah Be#era0a #agian &ang telah di0isahkan dimasukkan

kedalam gelas 4ial Per#edaan 0elarut &ang digunakan #erdasarkan 0rsedur &ang

di#erikan leh Her#ne Bagian &ang telah ter0isahkan dari #e#era0a ekstrak

tanaman diuji kemurniann&a dengan T5$

13


17/29

Ta#el 1 Menunjukkan Hasil dari 2kstrak Mentah di Ber#agai Pelarut dari

Sphaeranthus indicus 5

/" "ama Tanaman PelarutB#tBu#uk

(gm!

>lume

0elarut (ml!

B#thasil

ekstrak

IHasil

1Sphaeranthus

indicus 5inn

P eter ?-- --

Asetn ?-- -- 6? 6?

Metanl ?-- -- ?1 ?1

U5i Primer dari kstrak Menta) S.indicus L

U5i Libermann4B*r8)ard: /ejumlah ke'il dari ekstrak direaksikan dengan

#e#era0a dr0 asam asetat anhidrat8 didihkan dan dinginkan lalu tam#ahkan

knsentrasi H/O? dari sisi ta#ung8 akan ter#entuk 'i'in 'klat dua la0isan arna

merah gela0 mengindikasikan ke#eradaan ter0enids

U5i %a"ko2ski: Am#il #e#era0a dari ekstrak mentah dan reaksikan dengan

#e#era0a dr0 H/O?8 .arna kuning 0ada la0isan #a.ah akan ter#entuk

mengindikasikan ke#eradaan ter0enids

U5i %*"9*r: Tam#ahkan #e#era0a #u#uk sul*ur ke larutan uji &ang akan terenda0

di dasar 0emurnian dari ekstrak mentah 2kstrak mentah di0erleh dari tanaman

tanaman &ang dilakukan 0rses 0emurnian leh teknik krmatgra*i &ang #er#eda

dilanjutkan dengan metde s0ektrsk0i

a# Kromato$ra9i Ko"om

/en&a.a akti* #ilgis di0isahkan dari ekstrak mentah leh klm

krmatgra*i

Ta#el Menunjukkan Klm Pemisahan Krmatgra*i dari Sphaeranthus

indicus 5

14

/istem Pelarut +raksi @umlah +raksi arna +raksi

nHeane:$hlr*rm

(3:!

+r = Biru Muda

+r G == Biru Tua

+r G === Ke#iru#iruan

+r G => $klat Muda

+r > Biru M)da


18/29

b# Kromato$ra9i Lapis Tipis

+raksi klm &ang telah dimurnikan selanjutn&a dinilai

kemurniann&a 0ada 0lat T5$ 0lat ka'a (- 'm! &ang di#ersihkan

se'ara men&eluruh se#elum digunakan 0ertama di'u'i dengan deterjen

dan air dan lalu dengan asetn untuk menghilangkan min&ak se'ara

men&eluruh Hindari men&entuh 0ermukaan 0lat &ang telah di#ersihkan

Plat &ang telah kering disim0an dan diletakkan 0ada Nm4ing s0reader

5angkah 0ertama adalah mem#uat 0en&era0 silika gel E menjadi #u#ur

dengan 0enam#ahan air8 #iasan&a dengan km0sisi -g gel silika dan -

-'ms air Bu#ur itu se'ara men&eluruh diaduk dan dituangkan dalam

h00er 0ersegi &ang kemudian mele.ati 0lat H00er ini memiliki #agian #a.ah dan men&e#arkan #u#ur sili'a gel di 0ermukaan 0lat8 da0at

disesuaikan untuk menda0at la0isan #ahkan hinga kete#alan -8 mm

/etelah #u#ur terse#ar seragam8 0lat di#iarkan kering selama 1- menit

dan diakti*kan dengan 0emanasan dalam 4en krmatgra*i 0ada 1---$

selama setidakn&a 3 menit Plat ini sudah sia0 untuk digunakan /am0el

&ang telah dimurnikan dittlkan dengan #antuan 0i0a ka0iler 0ada garis

start &ang ditandai dengan garis 1 'm dari te0i 0lat /0t di#iarkan kering

dan diletakkan dengan hatihati dalam ta#ung ka'a #esar &ang #erisi

0elarut )ntuk alkalid8 ter0enid8 sa0nin8 *la4nid dan hidrkar#n8

0elarut &ang digunakan #er#eda sesuai dengan metde Her#rne s0t

&ang ada 0ada 0lat di0erjelas dengan idium atau )>8 jarak s0t dan jarak

0elarut ditandai dan diukur dengan skala sentimeter untuk menentukan

nilai %* &ang dide*inisikan se#agai :

Rf = Jarak Spot Jarak Pelarut

Ta#el 3 Menam0ilkan T5$ 0ada /ili'a Eel E hasil ekstraksi asetn dari


15


19/29

Ta#el ? Menam0ilkan T5$ 0ada /ili'a Eel E hasil ekstraksi Petrleum eter dari


8# %pektroskopi In9ramera)

Alat #antu dalam 0enentuan struktur rganik dan 4eri*ikasi

meli#atkan jenis radiasi elektrmagnetik (2M! dengan *rekuensi antara

?--- dan ?-- 'm1 (#ilangan gelm#ang! Kategri radiasi 2M dise#ut

radiasi in*ramerah (=%!8 dan a0likasi untuk kimia rganik &ang dikenal

se#agai %adiasi s0ektrsk0i =% da0at diman*aatkan dalam 0enentuan

struktur rganik dengan menggunakan *akta #ah.a radiasi terse#ut disera0

leh ikatan antar atm dalam sen&a.a rganik =katan kimia dalam

lingkungan &ang #er#eda akan men&era0 #er#agai intensitas dan *rekuensi

#er4ariasi Dengan demikian s0ektrsk0i =% meli#atkan in*rmasi

0en&era0an klekti* dan menganalisisn&a dalam #entuk s0ektrum

+rekuensi di mana ada sera0an radiasi =% (Q0un'akQ atau Qsin&alQ! da0at

dihu#ungkan langsung ke ikatan dalam sen&a.a terse#ut

16

"mr

/am0el+raksi Tam0ak Mata

Pengamatan

dengan =dine

%* ( 1--!

4alue

1 = Kuning Kuning 1--

== Hijau Eela0 Hijau Eela0 ;,833

3 === Hijau Terang Hijau Terang ;? => A#ua#u A#ua#u ;1867

> Kuning 0u'at Kuning 0u'at ,6867

6 >= Kuning Kuning 678

7 >== Kuning Kuning 1867

, >=== Kuning Kuning ?6867

; =R Kuning Kuning 687

"mr

/am0el+raksi Tam0ak Mata

Pengamatan

dengan =dine

%* ( 1--!

4alue

1 = Kuning Kuning 1--

== Hijau Eela0 Hijau Eela0 ;,833

3 === Hijau Terang Hijau Terang ;

? => A#ua#u A#ua#u ;1867

> Kuning 0u'at Kuning 0u'at ,6867

6 >= Kuning Kuning 678

7 >== Kuning Kuning 1867

, >=== Kuning Kuning ?6867

; =R Kuning Kuning 687


20/29

Karena masingmasing ikatan antar atm mungkin #er4i#rasi

dengan gerakan &ang #er#eda (ulur atau tarik! =katan tunggal mungkin

men&era0 le#ih dari satu *rekuensi =% Peregangan #iasan&a menghasilkan

0un'ak &ang le#ih kuat dari0ada li0atan8 namun sera0an &ang le#ih lemah

da0at #erguna dalam mem#edakan jenis ikatan &ang sama (misaln&a

su#stitusi armatik! Hal ini juga 0enting untuk di'atat #ah.a 4i#rasi

simetris tidak men&e#a#kan 0en&era0an radiasi =% Misaln&a8 tak satu 0un

dari ikatan kar#nkar#n dalam etana atau etilen men&era0 radiasi =%

6aera) %pektr*m IR

Dari .aktu ke .aktu ahli kimia rganik telah men'atat dan

mem#uat katalg jenis serta 0sisi dari sera0an =% &g dihasilkan leh

#er#agai ma'am ikatan kimia dalam berbagai lingkungan kimia

Data terse#ut da0at dijadikan re*erensi melalui tabel rentang nilai

serapan IR dan mem#andingkan dengan s0ektrum. Sebagai aturan

umum8 *aktr ter0enting &ang menentukan di mana ikatan kimia akan

men&era0 adalah jenis ikatan dan jenis atm &g terga#ung leh ikatan

!njugasi dan at!m "ang didekatn"a akan menggeser

#rekuensi ke tingkat "ang lebi$ renda$ Oleh karena itu gugus

*ungsi sama dalam mlekul &ang #er#eda se'ara khas akan menghasilkan

sera0an &ang seru0a 0ada rentang *rekuensi sera0an &ang s0esi*ik

Aki#atn&a ta#el serapan IR disusun #erdasarkan glngan *ungsinal

gugus *ungsi Be#era0a 4ersi mungkin mengelm0kkan le#ih lanjut

untuk mem#erikan in*rmasi &g le#ih akurat

Dalam ta#el sera0an =% 8 intensitas sin&al ( tinggi ! #iasan&a

dilam#angkan leh singkatan:

.eak (lemah!

M medium (sedang!

/ strng (kuat!

> 4aria#le (4ari#el!

Bentuk sin&al &ang mele#ar Terkadang ditandai leh sera0an *rekuensi

&ang di#erikan se#agai taksiran tunggal &ang di tandai dengan sedikit

mele.ati rentang

17


21/29

Pada 0emeriksaan 0ertama 8 s0ektrum in*ramerah &ang khas da0at

dikelm0kkan se'ara 4isual menjadi dua daerah /e#agian daerah kiri

dengan sera0an diatas --- 'm18 Biasan&a terdiri dari 0ik &ang relati*

rendah dan #e#era0a in*rmasi hasil dugaan da0at ditemukan Pertama8

alkana $H ulur menga#sr0si di#a.ah 3--- 'm 1 hal ini menunjukan

adan&a kar#n &ang jenuh dan sin&al diatas 3--- 'm1 menunjukkan

kar#n tidak jenuh

Pik &ang sangat mele#ar di daerah antara 31-- dan 37- 'm 1

menunjukan adan&a 0rtn &ang saling #ertukar8 'nthn&a alkhl8

amina8 amida atau glngan asam kar#ksilat +rekuensi sera0an dari

,-- sam0ai ;-- 'm1 #iasan&a ksng dari sera0an lain Maka adan&a

$H ulur da0at dengan mudah terdeteksi

/e#alikn&a #agian kanan dari ta#el s0ektrum sera0an di#a.ah

--- 'm1 #iasan&a terdiri dari #an&ak 0ik dengan 4ariasi intesitas &ang

#an&ak diantaran&a tidak da0at teridenti*ikasi

Ta#el Menam0ilkan /0ektra =% dari Sphaeranthus indicus 5

18

Bilangangelm#ang

Eugus +ungsi

37, +ree OH stret'hing

3??6-Brad inter mle'ular H&drgen #nded OH

stret'h

;73 $H as&mmetri' stret'h

337, $$ stret'h

16?37 $O stret'h

13;71 $OH #ending #nd

133 $H .agging

1-;; $O stret'h77-- Out * 0lane armati' $H #ending


22/29

19


23/29

va"*asi akti9itas antimikroba

Escheria coli Staphylococcus aureus Salmonella typhi and "sudomonas

aeruginosa di0erleh dari ,epartment of #icrobiology -andhi #edical *ollege

hopal Mikrrganisme terse#ut diislasi kem#ali dan di#iakan se'ara alami

untuk di jual 0ada suhu ?S$ saat di 0erlukan

Metde di*usi agar se0erti &ang telah di jelaskan leh estimne diad0si

untuk 0em#elajaran mengenai 1 ml 'airan nutrien agar steril dalam satu 'a.an

0etri dida0atkan dari #i#it se#an&ak 1 ml kaldu #iakan &ang telah distandardisasi

Pengadukan se'ara 0erlahan untuk memastikan distri#usi mikrrganisme &ang

seragam kemudian di#iarkan untuk memadat 0ada 0ermukaan &ang datar Tiga

lu#ang di#uat dalam 0elat menggunakan cork borer steril dengan 4lumejumlah

&ang sama hasil ekstraksi di0indahkan kedalam lu#ang lu#ang terse#ut

menggunakan 0i0et 0asteur Dua 'a.an 0etri diisi mikrrganisme utama &ang

digunakan untuk masing masing knsentrasi dari ekstrak Pelat di#iarkan selama 1

jam untuk 0redi*usi ekstraksi kemudian di inku#asi selama ? jam 0ada suhu

37S$ Diakhir inku#asi8 na inhi#isi (ham#atan! da0at diukur dan rata rata na

inhi#isi da0at terhitung

20


24/29

21


25/29

BAB +;

HA%IL 6AN PMBAHA%AN

A# HA%IL

Hasil dari skrining anti#akteri dari #e#era0a knsentrasi ekstrak 0ada uji

islasi telah ditam0ilkan Hasil menunjukkan adan&a 0eningkatan daerah

0engham#atan 0ertum#uhan mikrrganisme 2kstrak tidak mengham#at

0ertum#uhan dari / T&0hi di #er#agai knsentrasi &ang terda*tar Daerah tertinggi

dari 0engham#atan 0ertum#uhan 0ada diameter 138 mm &aitu knsentrasi -

mgml ekstrak terhada0 S. Aureus. Han&a knsentrasi -- dan - mgml &ang

memiliki e*ek terhada0 . Subtilis E. *oli dan ". Aeruginosa. Daerah terendah

dari 0engham#atan 0ertum#uhan teramati 0ada knsentrasi ekstrak -- mgml

terhada0 . Subtilis &ang mem#erikan daerah 0engham#atan terukur 6 mm )ji

0endahuluan skrinning *itkimia dari ekstrak metanl menunjukkan ke#eradaan

kar#hidrat8 0rtein8 asam amin *enl8 tanin8 alkalid triter0enid8 *la4nid8

min&ak atsiri dan gliksida 0ada tanaman Sphaeranthus indicus dan turunann&a

/terid tidak ditemukan 0ada ekstrak metanl Akti4itas anti#a'teri dari esktrak

metanl8 etanl8 klr*rm dan air dari Sphaeranthus indicus 5 &ang telah diuji

terhada0 rganisme ur0atigenik Escherichia coli Klebsiella pneumoniae

"roteus mirabils dan "seudomonas aeroginosa Acetobacter. Dari keem0at

ekstrak8 ekstrak metanl memiliki 0engaruh akti4itas antimikr#a 0aling tinggi

terhada0 Escherichia coli. Akan teta0i terhada0 Klebsiella pneumoniae ekstrak

etanl dari tanaman menunjukkan akti4itas &ang le#ih tinggi di#andungkan

dengan ekstrak lain8 se0erti terhada0 "roteus mirabil ekstrak klr*rm

menunjukkan daerah 0engham#atan &ang sama dengan Kanam&'in Begitu jugase0erti Acetobacter dan "seudomonas ekstrak metanl dan etanl menunjukkan

hal &ang sama8 namun le#ih tinggi dari ekstrak klr*rm Knsentrasi

0engham#atan minimum dari ekstrak dari uji islasi ditunjukkan 0ada Ta#el 6

Knsentrasi 0engham#atan 0aling rendah (M=$! dihasilkan leh S. Aureus dengan

knsentrasi 8 mgml ketika M=$ mela.an . Subtils dengan knsentrasu

7?861 mgml 2kstrak &ang dimiliki M=$ se#esar ,8-; dan 786? mgml

22


26/29

Ta#el 6 /krining anti#akteri dari #er#agai knsentrasi dari ektrak etanl

Euphorbia hirta

Knsetrasiekstrak

(mgml!

Daerah Pengham#atan (mm!

E.coli S.aureus ".aeruginosa .subtils S.typhi

- 1;a 1? # 131a 7?' "=

-- ,,a 13; # 13' 66d "=

1- 7-a 1 # 6a 66 "=

1-- 6,a 116 # 61a "= "=

- 6, 7,a "= 66 "=

/ilai tersebut berarti tiga kali pembacaan. /0 1 $idak ada penghambatan a b c

nilai dengan superscripts yang berbeda pada baris yang sama maka berbeda

secara signifikan (p 1 223).

Ta#el 7 Knsentrasi ham#at minimum dari ekstrak etanl Euphorbia hirta

terhada0 islat uji

Tum#uhan E.coli S.aureus ".aeruginosa .subtils S.typhi

E. hirta 6;-;a ? # ,6?a 7;61a "=5a b c nilai dengan superscripts yang berbeda pada baris yang sama maka berbeda

secara signifikan (p 1 223).

B# PMBAHA%AN

Dalam 0enelitian8 hasil &ang di0erleh mengindikasikan #ah.a ektrak

metanl dalam E. 4irta mengham#at 0ertum#uhan dari uji islasi ke'uali S.

$yphi. Oleh karena itu8 hal ini menunjukkan #ah.a ekstrak &ang mengandung

sen&a.a (s! &ang da0at mengham#at 0ertum#uhan dari #e#era0a rganisme

Pengamatan dari akti4itas anti#akteri 0ada islasi di0er'a&ai terjadi karena adan&a

alkalids8 tanin dan *la4nid &ang menunjukkan 0rses si*at anti#akteriPengamatan si*at anti#akteri menguatkan 0enggunaan dari #at tradisinal

/e'ara tradisinal ekstrak tanaman digunakan untuk 0en&em#uhan sakit dan luka8

se0erti tetes telinga untuk #isul di telinga dan 0era.atan #isul Da0at juga

digunakan se#agai #at diare dan disentri

/ejumlah #esar daerah 0engham#atan di0erlihatkan leh ekstrak S. Aureus

dan ". Aerugonosa mem#enarkan kegunaann&a untuk #at tradisinal dalam

0era.atan 0en&akit dan luka S. Aureus dan ". Aeruginosa memiliki im0likasi dari

#isul8 sakit dan luka

23


27/29

/ejumlah #esar daerah 0engham#atan di0erlihatkan leh ekstrak S. Aureus

dan P Aerugnsa mem#enarkan kegunaann&a untuk #at tradisinal dalam

0era.atan 0en&akit dan luka S. Aureus dan ". Aeruginosa memiliki im0likasi dari

#isul8 sakit dan luka Pada jumlah 'aku0an sedang8 0engham#atan terhada0 E.coli

mem#enarkan 0enggunaan&a dalam 0eng#atan diare dan disentri E.coli

umumn&a mengaki#atkan 0enularan diare 0ada manusia @umlah &ang 0alking

sedikit ditunjukkan leh S.aureus &ang signi*ikan dalam 0era.atan in*eksi leh

mikr#a atau &ang le#ih dikenal dengan anti#itik Kegunaan lain&a &aitu da0a&

mengurangi #ia&a 0era.atan kesehatan Daerah 0engha#atan tinggi ditunjukkan

leh ekstrak terhada0 E.coli &ang juga signi*ikan karena E.coli 0en&e#a# diare di

negara #erkem#angKetidakmam0uan ektrak dalam mengham#at Salmonella thypi da0at

di0engaruhi leh mekanisme untuk det*ikasi keakti*an dalam ekstrak Be#era0a

#akteri diketahui untuk mem0engaruhi mekanisme dengan mengu#ah sen&a.a

&ang mengham#at 0ertum#uhan menjadi sen&a.a nntksik8 se0erti S.aereus

menghasilkan enim 0enisilinase &ang mengu#ah anti#itik 0enisilin menjadi

asam 0enisilin &ang tidak da0at mengham#at 0ertum#uhan

Analisis se'ara statistika menunjukkan #ah.a untuk %B$ tidak #er#eda

n&ata (0--! antara nilai &ang di0erleh untuk #er#agai knsentrasi ekstrak

&ang terinjeksi dan terkntrl =ni menunjukkan #ah.a ekstrak tidak #erdamak

0ada sirkulasi darah merah mau0un 0usat eritr0tik 0ada he.an Be#era0a

ekstrak tanaman tidak memiliki dam0ak 0engganggu di %B$ hingga ?-- mgkg

##t setelah , hari Hal ini juga di#enarkan untuk 0erhitungan B$ Dengan

demikian8 ekstrak tidak da0at diinduksi atau didestruksi dengan B$ Teknik

&ang sama diamati untuk kandungan H# &ang terindikasi leh ekstrak &ang tidak

mem0engaruhi sisntesis dari hemgl#in he.an Be#era0a tanaman disarankan

untuk mem0engaruhi sistesis H# dengan 0engaham#atan dan utilitas #esi

24


28/29

BAB ;

PNUTUP

K%IMPULAN

Dari hasil di atas da0at disim0ulkan #ah.a ekstrak tanaman Sphaeranthus

indicus memiliki 0tensi #esar se#agai sen&a.a antimikr#a terhada0 mikr

rganisme dan da0at digunakan dalam 0eng#atan 0en&akit menular &ang

dise#a#kan leh mikrrganisme &ang resisten %esistensi anti#itik telah menjadi

0erhatian gl#al Telah meningkatn&a insiden karena #e#era0a resistensi mikr

rganisme 0atgen 0ada manusia dalam #e#era0a tahun terakhir8 se#agian #esar

karena 0enggunaan sem#arangan #at antimikr#a kmersial &ang umum

digunakan dalam 0eng#atan 0en&akit in*eksi Hal ini telah memaksa ilmu.an

untuk men'ari at antimikr#a #aru dari #er#agai sum#er se0erti tanaman #at

umum untuk negaranegara tr0is Tanaman ini da0at tum#uh sam0ai ketinggian

?- 'm Batangn&a ram0ing dan #iasan&a #er.arna kemerahan8 ditutu0i dengan

ram#ut #ulu kekuningan terutama di #agian &ang le#ih muda

25


29/29

6A7TAR PU%TAKA

htt0:...a'ademiaedu73?6,Makalahalkaliddanter0enid

htt0:e'd'eur0aeuenhealtht0i'ses'heri'hiaU'liPagesindeas0

htt0:0ustakaun0ada'id.0

'ntentu0lads-11-;0ustakaUun0adU2s'heri'hia'li0d*

htt0:e0rintsundi0a'id?37613D2=A)UEA--;1;UBABKT=0d*

htt0:digili#unimusa'id*ilesdisk11-6jt0tunimusgdlnisaakmala,-

#a#0d*
http://www.academia.edu/7345628/Makalah-alkaloid-dan-terpenoidhttp://ecdc.europa.eu/en/healthtopics/escherichia_coli/Pages/index.aspxhttp://pustaka.unpad.ac.id/wp-content/uploads/2011/09/pustaka_unpad_Escherichia-coli.pdfhttp://pustaka.unpad.ac.id/wp-content/uploads/2011/09/pustaka_unpad_Escherichia-coli.pdfhttp://eprints.undip.ac.id/43761/3/DEWIAYU_G2A009195_BAB2KTI.pdfhttp://digilib.unimus.ac.id/files/disk1/106/jtptunimus-gdl-nisaakmala-5280-2-bab2.pdfhttp://digilib.unimus.ac.id/files/disk1/106/jtptunimus-gdl-nisaakmala-5280-2-bab2.pdfhttp://ecdc.europa.eu/en/healthtopics/escherichia_coli/Pages/index.aspxhttp://pustaka.unpad.ac.id/wp-content/uploads/2011/09/pustaka_unpad_Escherichia-coli.pdfhttp://pustaka.unpad.ac.id/wp-content/uploads/2011/09/pustaka_unpad_Escherichia-coli.pdfhttp://eprints.undip.ac.id/43761/3/DEWIAYU_G2A009195_BAB2KTI.pdfhttp://digilib.unimus.ac.id/files/disk1/106/jtptunimus-gdl-nisaakmala-5280-2-bab2.pdfhttp://digilib.unimus.ac.id/files/disk1/106/jtptunimus-gdl-nisaakmala-5280-2-bab2.pdfhttp://www.academia.edu/7345628/Makalah-alkaloid-dan-terpenoid

Documents

Paper Kimia Organik Bahan Alam