日皮会誌:97 (9), 991-997, 1987 (昭62）

Papillon-Lefevre症候群における64KD及び58～56KD

　　　　　　　ケラチンサブユニットの異常

　　　レチノイド治療による症状の改善に伴うその異常の正常化

　　　　　麻生　和雄　　下浦　孝子　　片方陽太郎

　　　　　　　　　　要　　旨

　Papillon･LefSvre症候群の１症例を経験，レチノイ

ド治療で症状の著明な改善をみた．治療前病巣部足詐

皮膚のケラチンを検索，健康人と比較し64KDケラチ

ンをみず，また58～56KDケラチンの大幅な増加がみ

られた.

’レチノイド治療による症状改善と一致し, 64KDの

角層への出現をみた．ケラチソ異常は本症候群の病因

に関連すると考えられた．本症候群でのケラチソ遺伝

形質発現異常，その形質発現に対するレチノイドの作

用について考察する．

　　　　　　　　　　はじめに

　著者らはPapillon-Lefevre症候群の１症例を経験，

レチノイド治療によって著明な症状の改善をみた．電

気泳動による分析の結果足駄病巣部角層で健康人と比

較して64KDケラチソがみられず，また58～56KDケ

ラチンポリペプチドの増加がみられた. 64KDケラチ

ンはレチノイド治療による症状改善と一致して角層に

出現し，58～56KDケラチンの異常も改善された．

　症例を報告し，本症候群でのケラチソ遺伝形質発現

異常，その形質発現に対するレチノイドの作用につい

ての考えを述べる．

　　　　　　　　　　症　　例

　症例:27歳，男初診：昭和60年ｎ月18日．

山形大学医学部皮膚科教室

Kazuo Aso, Takako Shimoura, Yohtaro Katagata :

　Abnormal 64 and 58～56KD keratin in Papillon･

　LefSver syndrome ； Its recovery following the

　normalization of lesions after retinoid therapy･

Department of Dermatology, Yamagata University

　School of Medicine, Zao-Iida, Yamagata 990-23,

　Japan.

Key words :　Papillon･LefSvre syndrome, retinoid.

defect of 64KD keratin subunit

昭和61年８月28日受付，昭和62年２月６日掲載決定

別刷請求先：山形市蔵王飯田　山形大学医学部皮膚科

　教室　麻生和雄

　家族歴：家族に同症はない．祖父母はいとこ同士．

　現病歴および現症：乳幼児期から手駄にはじまるメ

レダ病型角化異常があり，乳歯・永久裾は歯周炎で同

様の経過で脱落した．

　掌脈，手，足背，アキレス腱部，膝蓋，肘部におよ

ぶ局面性，境界明瞭な紅斑・角化性病変をみる（図１

Ａ）．腹･背部に米粒大～小指頭大の萎縮銀痕が散発し

てみられるが，幼児期に頻発した化膿性皮膚疾患の銀

痕という．

　臨床検査成績：血清ビタミソＡ値正常,免疫グロプ

リｙ値を含めて血液・尿一般検査正常，頭部レ線像で

脳梗膜石灰沈着像をみない．

　病理組織像：病巣部足駄の生検像では，表皮肥厚及

び部分的錯角化，穎粒層軽度増加，真皮上層の軽度の

血管周囲性小円形細胞浸潤を認めた（図２）．

　電顕所見：病巣部足駄の角質細胞の形態，ケラチン

filament, marginal band に特に異常はない.辣細胞の

トノフィラメソトは一部濃縮して認められる所もあっ

た（図3, 4).

　治療および経過：レチノイド50mg/日で２週間頃か

ら改善傾向がみられ，１ヵ月後には肘，膝，アキレス

腱部を含めて掌駄角化は，紅斑を残し正常化し，その

効果は劇的とも例えられるものであった（図IB).以

来レチノイドを25mg/日として経過観察中であるが，

わずかに掌駄に紅斑性角化を再発してみるのみであ

る．

　　　　　　　　　　実験成績

　1）実験方法：

　ａ）ケラチソ抽出とsodium dodecylsulfate polya-

crylamide gel electrophoresis（SDS･ＰＡＧＥ）:病巣部

足駄の表皮～角層の連続水平切片標本および角層から

ケラチンを抽出しSDS･ＰＡＧＥを行った．表皮～角層

連続水平切片試料は４ｍｍパソチビオプシーで得た試

料を角層を底片として－20℃で固定，クレオスタット

で10μｍの厚さに水平連続して切って得られたもので

ある1)2)それぞれの試料を1mlのlOmMトリス塩酸，

992 麻生　和雄ほか

Ａ

図１　レチノイド治療前（Ａ），治療後（Ｂ）の臨床像

レチノイド50mg/日投与１ヵ月，著明な改善をみる．

Papillon-Lefevre症候群，ケラチソサブユニット

lOmM EDTA 2Na, 10μg/ml phenylmethanesulfonyl

fluoride (pH 7.6)でホモジナイズ後, 20,000xg 15分

　　　　　　図２　足駄病巣病理組織像

錯角化を混じた角層肥厚，穎粒層の増加，真皮上層の

軽度の血管周囲性円形細胞浸潤．

993

遠心して上清を除いた．残ったペレットには同じ緩衡

液を添加し，同様な操作を３回繰り返した．最終的に

得られたペレットに10μ1の2 %SDS, lOmMジチオス

ライトールを添加し100°C 2分処理することによりケ

ラチンを抽出した.それぞれ5μ1をLaemmliの方法に

従い, SDS-PAGEに供した(8.5%アクリルアミド）．

泳動後ゲルを0.2%Coomassie Brilliant Blue R-250

で染色した．対照としてフォスフォリラーゼａ

（92,500），牛血清アルブミソ（68000），オボアルブミ

ソ（45,000），キモトリプシノーゲソＡ（25,000）を同

時に泳動した．

　ｂ）病巣部足脈と健康人足脈角層ケラチンの電気泳

動による比較：病巣部足駄と健康人（28歳男a, 28歳男

b, 27歳男c, 26歳女d）足駄角層からａ）と同様の方法

でケラチンを抽出，SDS-ＰＡＧＥを行った．短時間染色

しバンドの位置を確認後，58～56KD部領域のゲルを

切り取り,新たに調整したSDSポリアクリルアミドス

ラブゲル（アクリルアミド14%)のウェルに挿入し，

20％のグリセロールを含む, 0.8mg/mlのトリプシン

溶液5μ1をウェル底部に添加,直ちに泳動した.泳動後

のゲルは0.25%Coomassie Brilliant Blu R-250で染

　　　　　　　　　　　　図３　穎粒層から角層の電顕像

層板穎粒(K),錯角化(Ｐ)，デスモゾーム①)，角質細胞のkeratin filament は粗造

　(ＫＦ)にみえる．

994 麻生　和雄ほか

　　図４　基底細胞（Ａ），煉細胞（Ｂ）の電顕像

基底細胞間隙の拡大と一部の凝集がみられる（※）．

Ｔ：トノフィラメソト，Ｂ：基底膜．

色した.

　2）実験結果：

　ａ）病巣部水平連続切片標本のSDS-PAGE所見：

基底細胞層から45, 48, 50, 56, 58, 67, 68KD(アソ　　　　　　　　　　　　　　　ー一一

ダーライソは濃いバンド)が認められ，前述で報告し

たように，健康人でみられる様な分化に伴ってみられ

る明瞭なバンドの変化(terminal modification)を示

すことなく，そのまま角層へ移行した(図５)．

　ｂ)病巣部足脈と健康人足駄角層のSDS-ＰＡＧＥ:

健康人(男a, 28歳，男b, 28歳，男c, 29歳，女d，

26歳)の角層には64, 63, 58, 56, 50, 48KDケラチソ　　　　　　　　一一　　　－の６バンドが認められた．健康人の間でも，ａ(図６

－１)とｂは似たバンドパターンを示し，65～67KD部

分にほとんどバソドがみられないのに対し，ｃとd(図

７Ａ-Ｎ)は65～67KD部分にうすいバソドがみられるな

ど，若干の違いが存在したが, abed共に，63～64KD

部分には濃いバソ,ドがみられた，病巣部角層では健康

人と比較し63, 64KD部分にバソドはみられなかった．

　レチノイド治療後の病巣部SDS-PBGE所見では健

康人のそれと略同様となり，56～58KDのバンドの減

少と, 64KDバンドの出現が認められた(図6).

　58～56KD部分のバンドのトリプシンによる限定分

解では病巣部と健康人の間に明らかな相違が認められ

た(図７)．Ｎで未消化のバンド｀が残っているが，再試

験してバンドが残らないように消化した場合も同様の

結果を得た．

　　　　　　　　考察およびまとめ

　Papillon-Lefevre症候群はノレダ病型の掌駄角化と

歯周症で乳歯・永久歯の脱落を来す疾患で, 1964年

Gorlinら3)は文献例46例を集計，本症候群が常染色体

劣性遺伝であることを明かにし，またしばしば脳硬膜

に石灰化がみられることを指摘した．

　掌駄からはじまる異常角化は１～３歳頃から生じ，

手・足背の指趾関節，アキレス腱部，更に肘・膝にお

よぶ．歯周症は乳歯萌出後から歯槽膿漏様に歯肉は発

赤，排膿，ポケットを形成，歯芽動揺し脱落する．永

久歯萌芽と共に歯周症は再燃，永久歯も脱落，歯周症

は止む.本症候群ではまた易感染症が指摘されている．

　本症候群は現在まで欧米で135例(Hanekeらの1979

年までの120症例の集計以降,著者らの1985年までの集

計15症例),本邦では自験例を含めて29症例が報告され

ている．

　最近になって本症候群に対するレチノイドの有効性

が明らかとなり，古田ら6)(1981)，Ｄｒibanら7)，楠ら8)

(1982), Bravo-Pirisら9)(1983)，田嶋ら'≫' (1984),

森嶋ら川(1984)の掌駄角化への著効報告例がある．森

嶋ら11)の８歳男児症例は皮疹のみならず歯周症も著明

に改善された注目すべき報告で，その改善は歯科主治

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Papillon-Lefevre症候群，ケラチソサブユニット

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図５　Paillon-Lefever症候群の表皮･角層のケラチソ

　の電気泳動

　足駄試料をクリオスタットで角層側から基底層にむ

　かって10μｍ厚さでスライス，それぞれからヶラチ

　ソを抽出．正常足駄でみられる63－64KDのサブユ

　ニットは，角層(No. 6)から基底層（Ｎ０.101）に

　いたるまでみられていない．

医が全く予想もしえなかった程であったという．著者

らも皮疹に対するその有効性を確認した．

　自験例では角層ケラチンの電気泳動の結果病巣部足

脈では健康人で一番濃いバンドが存在する63～64KD

部分にバソドがみられなかった．また，病巣部足駄で

一番濃い58－56KDのバンドと健康人の58～56KD部

分のバンドのトリプシン限定分解の結果を比較したと

ころ，明瞭な差がみられた．これは，健康人の56～58

KDのポリペプチドが病巣部で量的に増加しているの

みならず，この部分のバンドを構成しているポリペプ

チドの質的な変化を示唆するものと考えられる．

　レチノイド治療による症状の改善に伴って角層での

64KDケラチンの出現をみたがバンドのパターンは図

6-1 (28歳健康人男ａ)より図7A-Ｎ(26歳健康人，

女d)のパターンに類似していた．

　角層の64KDケラチンはII型ケラチソとしてケラチ

ソ細線維(keratin filament)の形成に必要であり12)13)

その欠如は本症候群での異常角化に関連していると思

われる．レチノイドの効果は，本症候群でのケラチソ

遺伝形質発現異常のレチノイドによる修正

(modification of abnormal keratin gene expression)

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　　　　　図６　角層ケラチンの電気冰勣

健康人にみられる63－64KDザソト1……，Iヽ1よ

Papillon-Lefever症候群で認められない(＊)が，レ

チノイド治療により症状が改善されると共に出,現して

認められるようになった.

1.健康人(28歳男a), 2. Papillon-Lefever症候群(お

療前), 3. Papillon-Lefgvre症候群(治療後), 4.標

準タソパク質

によって正常なケラチソ線維のassemblyに必要であ

る64KDケラチソ生成が回復されることによるとぢえ

られた．

　イ）本症候群の病巣部角層ケラチン線細維構成異

常：角層のケラチソ細線組(kertin filament)はそれ

ぞれ１分子づつのＩ型，II型ケラチンの二量体を基本

単位として，それが複数連なり，線維を形成してい

る12)13)従って角層線組形成でI, II型のサブユニット

の量的，質的バランスは重要な意味をもつと考えられ

る．

　自験例の健康人角層には56, 50, 48KDのＩ型ヶラチ

ソ65, 64, 58KDのII型ケラチンが存在して認められ

た．本症候群足駄病巣部Ｉ型ケラチンの種類は健康人

と同一の構成であるがII型ケラチンは健康人と比較し

て64KDのポリペプチドが欠如しており，56～58KD

のポリペプチドが増加していた．したがって，本症候

群での角層ケラチソ細線維は正常人と異質のＩ型, II

型ケラチンによって構成されているということがで

き，また，レチノイドによってそれら異常ヶラチソが

部分的に正常化し同時に臨床的にも異常角層が正常化

することをみると，本症での異常角化は異常な角質ヶ

ラチソ線維構造に関連すると考えられた．

　口）本症候群でのケラチン遺伝子発現異常：角質ヶ

ラチソの一部は表皮で生成されたケラチンが表皮細胞

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　　　　　　　　　　　図７　ケラチンの限定分解

Ａ．健康人（26歳，女d, N)およびPapillon-LefSvre症候群（Ｐ）の角層ケラチンの

　SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動

Ｂ．Ａの56～58KD部分のバンドを切り出し，トリプシン限定分解を行なった. N.Pと

　も左側のレーソ対照としてトリプシン非存在下に泳動を行った．

の角化過程で翻訳後修飾されたものであることが推定

されている1)が，著者らもその所見を前報で詳しく報

告している．

　表皮基底層～角層の連続水平切片標本のSDS-

ＰＡＧＥで自験例病巣部では，ケラチンの細胞の分化に

伴ったバンドパターンの変化(terminal modification)

は見られず，表皮living layerの68～48KDのケラチ

ンはそのまま角層に移行している．したがって，病巣

部角質での68, 67KDケラチンの存在は,それらが健康

人躯幹で推定されているような65KDへの翻訳後修

飾1)を受けずに角層へ移行したためと考えられる．

　著者らは，乾癖，あるいはＵｎｎａ-ThoSt型掌計遺伝

性角化腫病巣でも表皮ケラチンのバンドパターンの変

化が認められなかったことを報告した14)したがって，

本症候群でのその欠如は本症候群に特異的のものでな

い．その欠如と基底層から角層までのケラチンの推移

をみると，本症候群での角層の64KDの欠落あるいは

58～56KDポリペプチドの増加などの異常はケラチソ

転写調節の異常であることを充分に示唆すると思われ

ＩＩ！ＩＩ

・

・

る．

　各ケラチンはそれぞれに対納するｍ･ＲＮΛから生

成される.Ｆｕchs＆Ｇrｅｅｎ１５），Ｆｕchｓ12）は培養大皮細

胞からケラチソｍ-ＲＮＡを分離，それを利川し調整し

たｃＤＮＡがクロモゾームの約10ヵ所の遺伝子座に

hybridizeすることからケラチソ遺伝子は多重遺伝子

族(multigene family)であろうと推定している．

　ハ）本症候群でのケラチン遺伝子発現異常とレチノ

イド:retinoid reactive dermatosisといわれるよう

にレチノイドは遺伝性，炎症性の多様な皮膚疾患に有

効である．レチノイドはケラチンあるいは角質細胞の

envelop生成を含めて，多様な表皮細胞の分化に影響

を与える.Schｕltｚ-Ehｒｅｎｂｅrｇ＆Ｏｒｆａｎｏs16）はレチノ

イドの臨床効果をdifferentiation modulation作用と

説明している．

　遺伝情報の発現がｍ-ＲＮＡ合成の過程で調節され

ることを転写調節というが，形質蛋白であるケラチン

の合成は，それをコードするｍ-ＲＮＡの供給量によっ

て規定され，またm-RNA供給量は転写の場合あるい

Papillon･Lefevre症候群，ケラチンサブユニット

は減少によって調節される．

　最近ビタミソＡおよびその誘導体であるレチノイ

ドがm-RNAレベルでケラチソ生合成に関与してい

ることが明らかにされた. Kimら17）は培養諒細胞癌細

胞でビタミソＡは40KDケラチンを増加, 67KDケラ

チンを減少させることを観察, Eckertら18）は人培表皮

細胞でレチノイドは40KD, 52KDケラチンに対補する

ｍ･ＲＮＡをそれぞれ40,20倍増加させるか,一方56KD,

58KDに対補するm-RNAには影響を与えなかったと

報告している．

　自験例でのケラチンポリペプチドの異常は，本症候

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　文

　1) Fuchs E， Green Ｈ :　Change in keratin gene

　　　expression during terminonal differentiation of

　　　the keratinocyte, Cell, 19 : 1033-1042, 1980.

　2）Ｔｏｋｕ S， Aso Ｋ, Katagata Ｙ :　Modification of

　　　human epidermal prekeratin in the region of

　　　granular and tansient ｃｅ１口avers, / Ｄｅｒｍａtol，

　　　4 : 305-311, 1983.

　3) Gorlin RJ, Sedano H, Anderson ｖＥ:　The Syｎ･

　　　drome of polmo･plamtar hyfperkeratosis with

　　　premature periodontal destruction of the teeth :

　　　Ａ clinical and genetic analysis of papillon･

　　　Leffivre syndrome, /八'.diat, 65 : 895-908, 1964.

　　4) Schroeder　HE, Seger　RA, Keller　HU,

　　　Rateitschak･Pluss EM :　Behavior of neutro･

　　　philic granulocytes in a case of Papillon･

　　　Lefgvre syndromｅ, J ＣＫｗ Ｐｅｒｉｏｄｏｎt,　＼0 :

　　　618-635, 1983.

　　5) Haneke Ｅ: The Papillon･LefSvre syndrome :

　　　Keratosis palmoplantaris with periodontopath･

　　　y, report of ａ case and review of the cases in the

　　　literature, Hum Genet, 51 : 1-35, 1979.

　　6）吉田春美，松中成浩，浦　敦子:Papillon･Lefevre

　　　syndromeの１例―Retinoid著効例－,皮膚，23:

　　　270, 1980.

　　7) Priban NE, Jung JR :　Papillon-LefSvre Ｓyｎ･

　　　drome, A clinical and therapeutical contribu-

　　　tion, Deﾀ77z政治）がca, 165 : 653-659, 1982.

　　8）楠万左子，石川豊祥，森嶋隆文:Papillon･Lefevre

　　　症候群一レチノイド奏効例一，皮膚病診療，4:

　　　1139-1142, 1982.

　　9) Bravo-Piris J， Aparico Ｍ， Moran Ｍ， Armiio

　　　Ｍ :　Papillon･LefSvre syndrome. report of ａ

　　　case treated with oral retinoid R0 10-9359,

　　　Z）四回友加がca, 166 : 97-103, 1083.

　10）田嶋裕美子，田上八朗，大迫武治：乾癖様皮疹を

　　　伴ったPapillon･Lefgvre症候群の１例，臨皮，

　　　39 : 45-49, 1985.

　11）森嶋隆文,檜垣美奈子:Papillon･Lefe!Ｖrｅ症候群，

　　　皮膚病診療，6 : 515-518, 1984.

997

群でのケラチソ遺伝形質の遺伝的発現異常を示すもの

で，レチノイドはＯｍｏriら19)のいうような，その異常

形質発現を転写レベルで修正(modification of abnor-

mal gene expression)しうる効果を有すると説明され

る．

　本症候群での臨床的角化異常が，その異常なケラチ

ンの正常化と平行してみられることは,少なくともI，

II型ケラチソ分子の２量体基本単位の質的バランスを

もった組合せが，正常角層の形成に重要な意味を有す

ることを思わせるものであった．

献

　12) Fuchs Ｅ :　Evolution and complexity of the

　　　genes encoding the keratin of human epidermal

　　　cellｓ, J　InｖｅｓtＤｅｒｍａtol81(Suppl) : 141-144,

　　　1983.

　13) Steinert PM, Parry DAD, Racoosin EL, Idler

　　　WW, Steven AC, Trus BL, Roop ＤＲ:　The

　　　complete　cDNA　and　deduced　amino　acid

　　　sequence　cDNA　and　deduced　amino　acid

　　　sequence of ａ type II mouse epidermal ketatin

　　　of 60,000 Da ； Analysis of squence differences

　　　between type ｌ and type II keratin, ？れ9C Natll

　　　Ａｃａｄ Ｓｄ,81 : 5709-5713, 1984.

　14）麻生和雄，片方陽太郎，下浦孝子，徳　成吉：掌胆

　　　角化腫の表皮ケラチンと角層ケラチソンのtermi･

　　　nal　modification ； 特にThost-Unna型での

　　　68KD, 66KD, 63KDの表皮ケラチンの欠落異常と

　　　terminal modificationの欠陥，日皮会誌，96 :

　　　913-919, 1986.

　15) Fuchs E, Green Ｈ :　Multiple keratins of cultur･

　　　eed human epidermal cell are translated from

　　　different mRNA molecules. Cell. 17 : 573-582,

　　　1979.

　16) Schurz-Ehrenburg Ｕ， Orfanos CE :　Light and

　　　electron microscopic changes of human epider･

　　　・mis under oral retinoid treatment. Retinoids,

　　　EDS. Orfanos CE, et a1， Springer-Verlag, pp85

　　　-92, 1981.

　17) Kim KH, Schwartz Ｆ, Fuchs Ｅ:　Differences in

　　　keratin synthesis between normal epithelial

　　　cells and squamous cell carcinomas are mediat･

　　　ed by vitamin Ａ，ＰｒｏｃＮａｉｌＡｃａｄＳｄ USA, 81ト

　　　4280-4284, 1984.

　18) Eckert　RL, Green　Ｈ :　Cloning　of cDNAs

　　　specifying vitamin A―responsive human ker-

　　　atinｓ, ＰｒｏｃＮａtｌＡｃａｄ　ＳｅtＵＳＡ,81 : 4321-4325,

　　　1984.

　19) Omori M， Chytil F :　Mechanism of vitamin Ａ

　　　action : Gene expression in retilnol･deficient

　　　rats, / Biol Chem, 257 : 14370-14374, 1982.