Bol. San. Veg. Plagas, 24: 207-218, 1998

Parámetros de reproducción de Phyllocnistis citrellaStainton (Lepidoptera: Gracillariidae) en condiciones controladas

C. MARGAIX, J. JACAS y A. GARRIDO

Se han estudiado los parámetros de reproducción y longevidad de Phyllocnistis ci-trella en condiciones controladas de laboratorio: temperaturas entre 15 °C y 35 °C, hu-medad relativa del 70% y un fotoperíodo de 16 horas luz, tanto de hembras vírgenescomo de hembras en presencia de macho. Las hembras vírgenes no fueron capaces derealizar puesta alguna a 25 °C. Las hembras emparejadas no realizaron puesta ni a15 °C ni a 35 °C, a 30 °C la puesta fue irregular y sólo a 20 °C y 25 °C se obtuvo doscurvas de puesta específicas de la edad, ajustándose a curvas de Pearson Tipo I, consendos máximos de 8,1 ±2,1 y 8,6 ± 1,8 huevos por hembra y día, la fecundidad acu-mulada fue de 31,4 ± 12,3 y 69,8 ± 9,9 huevos, respectivamente.

Las hembras siempre vivieron más que los machos y a medida que la temperaturadisminuyó, la longevidad de los adultos se prolongó, (33,6 ±5,1 y 6,8 ± 2,2 días paralas hembras a 15 °C y 35 °C, respectivamente, y 21,6 ± 5,1 y 5,6 ± 1,9 días para machosa 15 °C y 35 °C, respectivamente).

C. MARGAIX, J. JACAS y A. GARRIDO: Departamento de Protección Vegetal y Biotecno-logía. Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias. Ctra. De Monteada a Naquera,km 5. 46113 Monteada. Valencia.

Palabras claves: Phyllocnistis citrella. fecundidad, longevidad

INTRODUCCIÓN

Un problema importante en todas lasáreas citrícolas a nivel mundial lo constitu-yen los daños causados por el fitófago cono-cido como minador de las hojas de los cítri-cos {Phyllocnistis citrella Stainton).

Phyllocnistis citrella fue descrita por pri-mera vez sobre Citrus spp. en la India porStainton en 1856, aunque no fue citada comoplaga hasta 1960 en Corea. Dado que Citrusspp. es su huésped original, se podría asumirque el área de origen de P. citrella correspon-dería con el área de origen de sus huéspedes(Sureste Asiático) (HOY y NGUYEN, 1997).

Hasta el año 1993 el minador estuvo confi-nado en países de los continentes de África,Asia, Australia e Islas del Pacífico, pero enese año se detectó en América del Norte

(Florida-EE.UU.) y en Europa (España). Apartir de estas nuevas invasiones se incre-mentó el número de países donde se detectó,constatándose su presencia en todos losContinentes. En consecuencia, en todos lospaíses afectados se pusieron en marcha estu-dios encaminados a su control. (GARUÓ yGARCÍA, 1994).

Los daños de P. citrella los efectúan laslarvas en hojas, brotes y, accidentalmente,en frutos, éstas se sitúan entre el parenquimafoliar y la cutícula y van alimentándose delas células epidérmicas, formando galeríasentre ambas capas (NuciFORA y NUCIFORA,1997). La formación de dichas galerías pro-voca, por un lado, la disminución de la ca-pacidad fotosintética y por otro, la separa-ción de cutícula y parenquima que, juntocon el continuo crecimiento de la hoja dará

como resultado la rotura de la cutícula dandopaso a desecación, necrosis, rotura de trozosvegetales y por último desprendimiento dehojas (GARRIDO, 1995C).

La hembra de P. citrella pone indistinta-mente sus huevos en el haz o envés de lashojas a partir de un tamaño determinado, re-alizando la puesta preferentemente en elenvés cuando su tamaño está comprendidoentre 1 y 10 mm (GARRIDO y GASCÓN,1995). Según TAN y HUANG (1996) la pues-ta se realiza en hojas tiernas de longitudescomprendidas entre 5 y 45 mm, en hojasque estén en plena actividad vegetativa cuyaconsistencia asegura la supervivencia de suprogenie, nunca se encuentran estados lar-varios en hojas viejas que hayan terminadosu crecimiento (GARRIDO, 1996). El ataquedel minador afecta siempre a árboles en bro-tación, independientemente de localizacióno estación del año (WILSON, 1991), losdaños son mayores cuando las poblacionesde minador son elevadas y la cantidad dehojas susceptibles a ser dañadas es menor,el riesgo de ataque es mayor en plantacionesjóvenes y viveros (GARRIDO, 1995a; Nuci-

FORA y NUCIFORA, 1997).Desde el punto de vista de la lucha inte-

grada, el éxito del control de P. citrella de-pende de nuestros conocimientos sobre lascaracterísticas biológicas de la plaga, talescomo: fertilidad, fecundidad, período de de-sarrollo, supervivencia, etc. La bibliografíaexistente hasta el momento sobre biologíadel minador es muy variada debido a su am-plia distribución y sólo en algunos de losensayos realizados en campo se dan datossobre los parámetros biológicos menciona-dos. Según BEATTIE (1992) los adultos deP. citrella copulan por la noche, a las nueveo diez horas de su emergencia, las hembrascomienzan la puesta a los cuatro u ocho díasde vida y pueden poner más de 70 huevosdurante quince días, aunque generalmenteviven poco tiempo. Según BEATTIE (1989)si las condiciones en campo son óptimas elciclo se puede completar en 14-17 días,mientras que según HEPPNER (1993) el ciclose puede cerrar en tan sólo 13 días, por lo

que se pueden dar entre 13 y 14 genera-ciones al año.

En condiciones de laboratorio CLAUSEN(1931) indica que los adultos se aparean pocotiempo después de su emergencia, empezan-do la ovoposición a los seis días, no obstante,no se cita cuáles han sido sus condiciones en-sayadas; tanto el desarrollo y supervivenciade todas las fases evolutivas del minadorcomo su reproducción están influidos por latemperatura, aunque los trabajos existentes(MlNSHENG, etal, 1995; BA-ANGOOD, 1978;TAN y HUANG, 1996) dejan todavía seriaslagunas. Por ello, los objetivos de este trabajofueron determinar los parámetros de repro-ducción y la longevidad de adultos de P. ci-trella en condiciones controladas a tempera-turas constantes, que nos puedan permitirluego extrapolar esos resultados al campo.

MATERIALES Y MÉTODOS

Material vegetal

Se utilizaron plantas de naranjo amargo{Citrus aurantium L.) obtenidas a partir desemilla, de aproximadamente tres meses deedad, con hojas receptivas a la puesta de mi-nador, es decir, de una longitud comprendi-da entre 5 y 35 mm (GARRIDO y GASCÓN,1995). Estas plantas se cultivaron en mace-tas pequeñas (6 cm de diámetro y 5 cm dealtura), que contenían una mezcla de turba yarena al 50%. Sobre la turba de la maceta seextendió una capa fina de tierra arcillosa ro-jiza, que nos permitió ver por contraste aladulto tras su muerte.

Insectos

Se utilizaron crisálidas de P. citrella enavanzado estado de desarrollo.

Las crisálidas se obtuvieron a partir demuestras de campo recogidas en distintasplantaciones de cítricos de la Comunidad Va-lenciana. Se sexaron utilizando un microsco-pio estereoscópico WILD DM5. Macho y

hembra se distinguieron en estado de crisáli-da por la distinta morfología del último seg-mento abdominal. (JACAS y GARRIDO, 1996).

La separación de crisálidas por sexos serealizó abriendo la parte más protegida deltapizado de seda que deposita la precrisálidaen la porción de cutícula que sirve de tapa-dera a la cámara pupal, ya que es en este ex-tremo donde se sitúa el abdomen del insecto(GARRIDO, 1995a). Las crisálidas sexadas yen el interior de las cámaras pupales se depo-sitaron sobre placas Petri conteniendo agar al2% (Agar Technical Unipath Ltd., Basings-toke, Hampshire, England) (fig. 1). Las cri-sálidas se mantuvieron a 25 °C hasta laemergencia de adultos. Éstos se utilizaron enlos ensayos que se describen a continuación.

Material de laboratorio

Se utilizaron unas jaulas formadas por cilin-dros de polietileno transparente cuyas dimen-siones fueron: 4,5 cm de diámetro y 12 cm dealtura. El cilindro se colocó sobre la maceta,quedando la planta en el interior del mismo.La parte superior del cilindro se tapó con telade muselina y una goma elástica, permitiendode esta forma la aireación, (fig. 2).

Tanto en las hojas más viejas de la plantacomo en la cara interior del cilindro se hi-cieron pequeñas punteaduras con miel quesirvieron de alimento a los adultos.

El día de la emergencia de adultos, se co-locó en el interior del cilindro un macho yuna hembra en el caso del estudio de los pa-rámetros de reproducción de hembras en pre-sencia del macho, y sólo una hembra en elcaso del estudio de la fecundidad sin el con-curso de macho. Las jaulas fueron introduci-das en cámaras sometidas a las condicionesambientales correspondientes a cada ensayo,comprobándose la temperatura y la humedadmediante sensores adecuados, las condicio-nes de laboratorio ensayadas fueron: 15 ± 0,1°C, 20 ± 0,1 °C, 25 ± 0,1 °C, 30 ± 0,1 °C y 35±0,1 °C en el estudio de la reproducción dehembras fecundadas y 25 ± 0,1 °C en el estu-dio de fecundidad de hembras vírgenes,

ambos ensayos con una humedad relativa de70 ± 10% y un fotoperíodo de 16:8 (luz:os-curidad). Para cada temperatura se realizaronentre 12 y 24 repeticiones.

Se revisó diariamente la puesta observandolas hojas receptivas en el microscopio estere-oscópico, procurando que los adultos perma-necieran en el interior del cilindro sin escapar.En caso de existir puesta, se etiquetó la plan-ta, se anotó el número de huevos contabiliza-dos, tanto en el haz como en el envés; y se in-trodujo la planta en una cámara a 25 °C du-rante tres días, tras los cuales, se comprobó lafertilidad de los huevos al microscopio estere-oscópico. La planta se sustituyó por otranueva que se introdujo en el cilindro para se-guir la evolución de la puesta. Cuando nohubo puesta se siguió con la misma planta,siempre que mantuviera hojas receptivas. Esteproceso se repitió diariamente hasta la muertede los adultos. Los adultos muertos se sumer-gieron en xileno y se comprobó su sexo, basa-do en la observación de unas escamas negrasa ambos lados de la parte posterior del abdo-men en las hembras (GARRIDO, 1995b).

En aquellas temperaturas en que la hem-bra no realizó puesta se llevó a cabo la ex-tracción de la bolsa copulatriz con el fin decomprobar la existencia de espermatóforos.Esta disección se hizo utilizando agujas en-tomológicas del N.° 0.

Los datos obtenidos se sometieron a aná-lisis estadístico mediante el software SAS(1997). Para ver si existían diferenciasentre la puesta en el haz y en el envés seaplicó el test de %2. En el estudio de la lon-gevidad se aplicó un análisis de la varian-za. En ambos casos se aplicó un nivel designificación del 95%.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

La emergencia de adultos siguiendo lametodología utilizada fue de un 90%, supe-rior a la obtenida cuando las pupas se depo-sitan individualmente y sin ninguna protec-ción sobre la capa de agar, que fue en estecaso de 81,8 % (JACAS y GARRIDO, 1996).

Fig. 2.-JauIas utilizadas en el estudio de parámetrosde reproducción y longevidad de P. citrella.

Parámetros de reproducción

En el estudio de la fecundidad de las hem-bras solas no se obtuvo puesta, contraria-mente a lo que suele ocurrir en la mayoríade los lepidópteros (MASÓ et al., 1985). Enconsecuencia se puede concluir que lashembras vírgenes de P. citrella no son capa-ces de realizar puesta sin el concurso delmacho.

Los resultados obtenidos en la fecundidadpor parejas individuales difirieron en fun-ción de la temperatura considerada: a 15 °Cy 35 °C, las 12 hembras ensayadas en cadatemperatura, no realizaron puesta, sin em-bargo, el análisis de sus bolsas copulatricesmostró la existencia de hasta dos espermató-foros, de manera, que aunque las hembrasestaban fecundadas, no hubo estímulo parala puesta.

En la figura 3 se muestra la bolsa copula-triz en la que se puede distinguir un esperma-tóforo y dos escleritos terminados en punta,formando dos garfios, los «signa». La fun-ción de estos escleritos de valor taxonómicono está muy clara entre los autores que hantratado el tema, sin embargo, existen diver-sas citas bibliográficas que indican que lafunción de estas espinas quitinizadas es la de

romper los espermatóforos para facilitar lasalida de los espermatozoides (STOCKEL,1973; GRASSE, 1979; TÜXEN, 1956; DAVEY,1968; MASÓ et a/., 1985). Según ESTEBAN(1975, comunicación personal) los signa sir-ven además como sujeción de los espermató-foros cuando se ha producido la fecundación.

A 30 °C se obtuvo una puesta irregular: de20 hembras ensayadas sólo seis realizaronpuesta, a pesar de que todas ellas presentaronespermatóforos en sus bolsas copulatrices.

Tanto a 20 °C, con un ensayo de 18 hem-bras, como a 25 °C, en que se ensayaron 24hembras, se obtuvieron sendas curvas de fe-cundidad con características similares. Losresultados se pueden observar en el cuadro 1.

Período de preoviposición

El período de puesta comenzó al 2,0 ± 0,0día a 25 °C y al 3,1 ± 0,4 a 20 °C, y se pro-longó en algunas hembras hasta 12 días a20 °C, y 22 días a 25 °C. Los valores del pe-ríodo de preoviposición son sensiblementemenores a los aportados por CLAUSEN(1931), para quien la ovoposición no empie-za hasta transcurridos unos 6 días, y a los deBEATTIE (1992) que daba la cifra de 4 a 8

Fig. 1 .-Crisálidas de P. Citrella en el interior de lascámaras pupales, sobre placas Petri conteniendo

agar al 2%.

días, aunque en ambos casos ignoramos lascondiciones ambientales en que se llevaron acabo los experimentos. Nuestros resultadosson más parecidos a los obtenidos por MiNS-HENG y colaboradores (1995), quienes danun período mínimo de preoviposición de 3,3días a 20 °C y de tan solo 2,3 días a 25 °C.

Fecundidad y fertilidad por hembra

En la figura 4 y 5 puede observarse laevolución de la puesta a lo largo de la vidade las hembras. A 20 °C el número de hue-vos por hembra y día fue aumentando de

* El intevalo de variación se ha analizado a un nivel del 95%.

Fig. 5.-Evolución de la puesta diaria de P. citrella a 25 °C.

Fig. 4.-Evolución de la puesta diaria de P. citrella a 20 °C.

forma paulatina y alcanzó el valor máximode 8,1 ±2,1 al quinto día de vida. A 25 °Ceste máximo fue de 8,6 ± 1,8 huevos alsexto día.

A partir del máximo alcanzado la puestadiaria fue descendiendo progresivamentehasta anularse al decimosegundo y vigésimoprimer día a 20 °C y 25 °C respectivamente.

La cantidad media de huevos por hembraa lo largo de todo su ciclo de vida fue de31,4 ± 12,3 huevos a 20°C y 69,9 ± 9,9 a25°C, alcanzándose el 50% de la puestaentre el cuarto y el quinto día en el primercaso, y entre el sexto y el séptimo día en elsegundo (fig. 6).

Según BEATTIE (1992) las hembras pue-den poner más de 70 huevos durante un perí-odo de quince días. Aunque ignoramos a quétemperatura se hizo ese estudio, este dato esmuy parecido al obtenido por nosotros a 25°C, con una puesta de 70 huevos por hembra.Contrariamente a nuestros resultados, MlNS-

HENG y colaboradores (1995) sí obtuvieronpuesta en todo el rango de temperaturasentre 15 y 34 °C, con una puesta que oscilóentre 22,4 huevos a 34 °C y 69,8 a 25 °C. A20 °C este valor fue de 42,5 huevos por hem-bra. Estas diferencias podrían atribuirse a ladistinta metodología seguida.

El porcentaje de eclosión de huevos fuedel 95% a ambas temperaturas, superior alporcentaje citado por WILSON (1991) encampo, 79,9 %, pero inferior al 100 % obte-nido por MlNSHENG y colaboradores (1995).

La evolución de puesta pudo ajustarse auna curva específica de fecundidad de Pear-son tipo I (CAREY, 1986).

Donde:

( • •W-O-HT

x son los días transcurridos,y el número de huevos por hembra,

0 1

Fig. 6,-Porcentaje acumulado de puesta de P. citrelia a 20 °C y 25 °C.

y0 el máximo número de huevos por hembray día que se produce cuando x = a,; a¡+ a2

son los días de vida de la hembra, que son18 días a 20 °C y 23 días a 25 °C.

El valor de los parámetros estimados sepresentan en el cuadro n° 2. Con estos ajus-tes se consiguieron unos coeficientes de co-rrelación de 0,8958 para la curva obtenidaa 20° C y de 0,8564 para la curva obtenida a25° C.

Las figuras 4 y 5 muestran la evolución dela puesta obtenida a 20 y 25 °C respectiva-mente, con sus ajustes correspondientes.

Preferencia de puesta

A 20°C se contabilizaron un total de 527huevos, 65 % en el envés y 35 % en el haz.A 25°C se contabilizaron un total de 1467huevos, 58 % en el envés y 42 % en elhaz. Se realizó un test %2 (P < 0.05) y secomprobó que existían diferencias signifi-cativas entre haz y envés, por lo que encondiciones de laboratorio existe una ciertapreferencia de puesta sobre el envés de lashojas. En condiciones de campo GARRIDOy GASCÓN (1995) obtuvieron resultadosanálogos cuando el tamaño de la hoja re-ceptiva está comprendido entre 1 y 10 mm.Sin embargo, a partir de ese tamaño lahembra de P. citrella pone indistintamentesus huevos en el haz o en el envés. Por otrolado, ensayos en campo sobre 5 variedadesdistintas dieron como resultado una puestaen el haz de un 32,7% (WlLSON, 1991).Contrariamente a lo obtenido en el ensayo,BEATTIE (1992) indica que la oviposición

en el haz raramente ocurre, sólo bajo con-diciones de humedad elevadas y cuandoexisten densidades de población muy ele-vadas.

Longevidad de adultos

La longevidad de hembras y machos enlas distintas condiciones de temperatura en-sayadas puede observarse en la figura 7. Secomprobó, cómo tanto para machos comopara hembras a medida que aumentó la tem-peratura disminuyó la longevidad, destacan-do el valor tan elevado obtenido a 15°C:33,6 ±5,1 días en las hembras y 21,6 ± 5,1días en machos, y no obteniendo diferenciassignificativas (P ± 0.05) entre las tempera-turas de 20-35 °C. Se pudo observar como,en general, las hembras tuvieron una vidamás prolongada que los machos.

Según BEATTIE (1993) la mayoría deadultos viven menos de una semana, aunquealgunos pueden vivir más de 20 días, comoocurre en nuestros resultados a 15 °C. Sinembargo según BEATTIE (1989) y HEPPNER(1993) los adultos tienen un período de vidamuy corto.

Los resultados obtenidos en nuestro ensa-yo pueden compararse con los obtenidos porMlNSHENG y colaboradores (1995). La lon-gevidad a 20 °C fue similar en ambos ensa-yos, sin embargo en el resto de temperaturasnuestros datos fueron más elevados. La ten-dencia a disminuir la longevidad a medidaque aumenta la temperatura, así como lamayor longevidad de las hembras, fuecomún en ambos trabajos.

Cuadro 2-Parámetros estimados según una curva de Pearson tipo I de la evolución de puesta diaria

215

CONCLUSIONES

Se ha estudiado la influencia de tempera-turas constantes en los parámetros de repro-ducción de hembras vírgenes y emparejadas,y la longevidad de adultos de Phyllocnistiscitrella Stainton. Se concluye que las hem-bras vírgenes del minador no son capaces derealizar puesta y que la temperatura influyósobre los parámetros de reproducción y lalongevidad. Se han hallado dos ecuacionesajustadas a la evolución de la puesta diaria a20°C y 25°C, la puesta comenzó el tercer ysegundo día de vida de la hembra, alcanzóun máximo al quinto y sexto día, de 8,1 y8,6, respectivamente, y se prolongó hasta 18y 23 días a 20°C y 25°C, respectivamente. Lafecundidad media fue de 31 huevos porhembra a 20°C y 70 a 25°C. Concluimos queel minador tiene un potencial biológico ele-vado gracias a su elevada fecundidad.

Se comprobó cómo tanto para machoscomo para hembras la longevidad fue supe-rior a bajas temperaturas, llegando a so-brevivir incluso más de 30 días. Las hem-bras presentaron una vida más prolongadaque los machos. De estos valores conclui-mos que los adultos de minador pueden so-portar durante bastante tiempo las bajastemperaturas del invierno, sin necesidad derealizar puesta, de modo que cuando lastemperaturas les sean favorables y existanbrotes receptivos pueden reanudar su ciclosin dificultad.

AGRADECIMIENTOS

A todo el personal del laboratorio de En-tomología, especialmente a R. Hinarejos porsu colaboración y a E. Carbonell por suayuda en los análisis estadísticos.

Fig. 7.-Longevidad de adultos de P. citrella a diferentes condiciones de temperatura.

ABSTRACT

MARGAIX C ; JACAS, J. y GARRIDO, A., 1988: Parámetros de reproducción de Phy-llocnistis citrella Stainton (Lepidoptera: Gracillariidae) en condiciones controladas.Bol. San. Veg. Plagas, 24(2): 207-218.

A study on the reproductive parameters and longevity of both virgin and mated fe-males of Phyllocnistis citrella Stainton (Lepidoptera: Gracillariidae) was carried outunder laboratory conditions: temperature between 15° and 35 °C, relative humidity of70% and a photoperiod of 16 hours light. Neither virgin females at 25 °C nor mated fe-males exposed to 15° or 35° were able to lay any egg. Oviposition was irregular at30 °C, and only at 20 °C and 25 °C age-specific fecundity curves could be obtained.These were adjusted to Pearson type I curves, reaching a maximal value of: 8,1 ±2,1 at20°C and 8,6 ± 1,8 at 25 °C. Cumulative fecundity was 31.4 ± 12.3 and 69,8 ± 9.9 eggsper female at 20° and 25 °C, respectively. Females always lived longer than males andthe lower the temperatures the longer adults lived (33.6 ± 5.1 and 6.8 ± 2.2 days for fe-males at 15 °C and 35°C, respectively, and 21.6 ± 5.1 and 6 ± 1.9 days for males at15 °C and 35 °C, respectively).

Key words: Phyllocnistis citrella, fecundity, longevity.

REFERENCIAS

BEATTIE, G. A. C , 1989: Citrus leafminer. Biologicaland Chemical Research Institute: Rydalmere. AgfactH2.AE.4, first edition. 4 pp.

BEATTIE, G. A. C , 1992: Biological Control of CitrusLeafminer - Introduction of Natural Enemies. Finalreport to Horticultural Research and DevelopmentCo-operation. NSW Agriculture. 36 pp.

BEATTIE, G. A. C. y SMITH, D., 1993: Citrus Leafmi-ner. Agfact H2. AE.4. NSW Agriculture. 6 pp.

CAREY, J. R., 1993: Applied Demography for Biologistswith Special Emphasis on Insects. Ed. by OxfordUniversity Press. 206 pp.

CLAUSEN, C. P., 1931: Two citrus leaf miner of the fareast. U.S. Dept. Agr. Tech. Bui, 252: 1-13.

DAVEY, K., 1968: La reproducción de los insectos.Edit. Alhambra, S.A. 106 pp.

ESTEBAN, J., 1975: Cría artificial del tortncido Carpo-capsa pomonella L. Tesis doctoral. Escuela TécnicaSuperior de Ingenieros Agrónomos. Madrid. 228 pp.

GARUÓ, C. y GARCÍA, F., 1994: Minador de las hojas delos cítricos Phyllocnistis citrella Stainton. PhytomaEspaña, 58: 56-62.

GARRIDO, A., 1995a: El minador de las hojas de los cí-tricos: estado actual y evolución futura. LevanteAgrícola, yin: 11-12.

GARRIDO, A., 1995b: Phyllocnistis citrella Stainton,Aspectos biológicos y enemigos naturales encontra-dos en España. Levante Agrícola, 330: 13-22.

GARRIDO, A., 1995c: El minador de las hojas de los cí-tricos (Phyllocnistis citrella Stainton): morfología,biología, comportamiento, daños interacción confactores foráneos. Phytoma España, 72: 84-92.

GARRIDO, A. y GASCÓN, I., 1995: Distribución de fasesinmaduras de Phyllocnistis citrella Stainton, según eltamaño de la hoja. Bol. San. Veg. Plagas, 21:559-571.

GARRIDO, A., 1996: Plagas de los cítricos españoles quese disputan el mismo estrato vegetal que el minador

de las hojas de los cítricos (Phyllocnistis citrellaStainton). Levante Agrícola, 335: 141-144.

GRASSÉ, P., 1979: Traite de Zoologie. Anatomie, Systé-matique, Biologie. Tome X. Insectes supérieurs etHémipteroídes (Premier Fascicule). 959 pp.

HEPPNER, J., 1993: Citrus Leafminer, Phyllocnistis ci-trella Stainton (Lepidoptera: Gracillarida: Phylloc-nistinae). Entomology circular, n.° 359. Fia. Dept.Agrie. & Consumer Services Division of Plant In-dustry.

HEPPNER, J. B., 1993: Citrus leafminer, Phyllocnistiscitrella, in Florida. Trop. Lep., 4(1): 49-64.

HOY, M. A. y NGUYEN, R., 1997: Classical biologicalcontrol of the citrus leafminer Phyllocnistis citrellaStainton. Tropical Lepidoptera, 8 (Suppl. 1): 1-19.

HUANG, M. y SHUXIN, L., 1989: «The damage and eco-nomic threshold of citrus leaf miner, Phyllocnistiscitrella Stainton to citrus». In HUANG M. (ed) Stu-dies on the integrated management of citrus insectpests. Academic Book & Periodical Press, Beijing,China: 84-89.

JACAS, J. A. y GARRIDO, A., 1996: Differences in themorphology of male and female pupae of Phylloc-nistis citrella (Lepidoptera: Gracillaridae). FloridaEntomologist, 79(4): 603-606.

KNAPP, J. L.; ALBRIGO, L. G.; BROWNING, H. W., BU-LLOCK, R. C ; HEPPNER, J. B.; HALL, D. G.; HOY,M. A.; NGUYEN, R.; PENA, J. E. y STANSLY, P.A.,1995: Citrus leafminer, Phyllocnistis citrella Stainton:Current Status in Florida. University of Florida-1995.Gainesville: Ins. Food Agrie. Se, Univ. Florida. 35 pp.

MASÓ, A.; PÉREZ, J.; y VALLHONRAT, F., 1985: La vidade les papallones. Iniciado a la biologia dels lepidòp-ters. Soc. Catalana de Lepidopterologia. Memorianum. 1. Ketres Editora Barcelona, 296 pp.

MlSNHENG, Y.; LlANDE, W.; QUIONGHUA, Z. y XlNG-XIAO, F., 1995: Influence of temperature on an expe-

rimental population of citrus leafminer. Journal ofFujian Agricultural University, 24: 4, 414-419.

NUCIFORA, A. y NUCIFORA, M. T., 1997: The citrusbud-miner (Phyllocnistis Citrella Stainton) in citrusnurseries in Sicily. Selective Control Methods. 5"1 In-ternational Congress of Citrus Nurserymen. Univer-sità di Catania. 15 pp.

SAS, 1997: SAS Institute Research Triangle Nord Ca-roline U.S.A.

STOCKEL, J., 1973: Influence de relations sexuelles etdu milieu trophique de l'adulte sur la reproductionde Sitotroga cerealella Oliv. (Lépidoptère Gelechii-dae) Consequences écologiques. Soutenue. France.N°d'enregistrement: A.O. 8233: 18.

TAN, B. y HUANG, M., 1996: «Managing the citrus leaf-miner in China». In HOY, M. A. Managing the citrusleafminer. Proceedings from An International Con-ference. Gainesville, Orlando, 23-25 April 1996.Florida, Editor University of Florida: 49-52.

TÜXEN, S. L., 1956: Taxonomist's glossary of genitaliain insects. Ed. by Scandinavian University Books.Ejnar Munksgaard Copenhagen. 359 pp.

WILSON, G., 1991: Notes on Phyllocnistis citrella Stain-ton (Lepidoptera: Phyllocnistidae) attacking four ci-trus varieties in Darwin. J. Aust. ent. Soc, 30: 77-78.

(Recepción: 12 enero 1998)(Aceptación: 1 abril 1998)