Universidad Nacional Federico Villarreal Facultad de Odontologa

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LA CLORHEXIDINA AL 0.12% FRENTE

AL Streptococcus mutans EN SALIVA, LUEGO DEL USO DE UNA PASTA

DENTAL QUE CONTENGA LAURIL SULFATO DE SODIO.

TESIS PARA OBTENER EL GRADO DE

CIRUJANO DENTISTA

PRESENTADA POR EL BACHILLER:

PANEZ BERAN, ALCIDES

LIMA- PER

2009

2

AGRADECIMIENTOS

A todas aquellas personas que gracias

a sus enseanzas, su plena confianza y

su apoyo constante han hecho posible

la realizacin del presente trabajo.

3

DEDICATORIA

Esta tesis esta dedicada con todo el

amor, a mis padres Tefilo Panez y

Estelista Beran, y a mis hermanos,

por su constante comprensin, apoyo

y cario.

4

MIEMBROS DEL JURADO

Mg. CD. MARA INS CASTRO HURTADO (PRESIDENTE)

Mg. CD. VCTOR LVAREZ TAPIA (SECRETARIO)

Mg. CD. MARA ELENA MOSCOSO SNCHEZ (VOCAL)

CD. RENN LIBANO SEGURA (MIEMBRO DEL JURADO)

CD. MARCIAL ROMN QUISPE (SUPLENTE)

5

NDICE

TTULO

RESUMEN

ABSTRACT pg.

I. INTRODUCCIN 9

II. HIPTESIS 28

III. OBJETIVOS 29

IV. MATERIAL Y MTODO 30

V. RESULTADOS 40

VI. DISCUSIN 47

VII. CONCLUSIN 51

VIII. RECOMENDACIONES 52

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 53

X. ANEXOS 57

6

ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LA

CLORHEXIDINA AL 0.12% FRENTE AL

Streptococcus mutans EN SALIVA, LUEGO DEL

USO DE UNA PASTA DENTAL QUE CONTENGA

LAURIL SULFATO DE SODIO.

7

RESUMEN

El objetivo de la presente investigacin fue comparar la actividad

antimicrobiana entre la clorhexidina al 0.12% luego del uso de una pasta

dental que contenga lauril Sulfato de sodio, con el uso de la clorhexidina

sola frente al Streptococcus mutans en saliva, expresada en porcentajes

de inhibicin de unidades formadoras de colonias por mililitro de saliva,

cultivadas en agar mitis salivarius. Este es un ensayo clnico,

comparativo, longitudinal y prospectivo, de diseo cruzado; en la cual se

tomaron muestras de saliva a 20 estudiantes, antes y 60 minutos despus

de aplicada la prueba. Dicha prueba consisti en enjuagarse con una

solucin de pasta dental o agua destilada como control, e inmediatamente

despus con clorhexidina 0.12%.

Los resultados mostraron que el enjuague con clorhexidina 0.12%

inmediatamente despus del uso de una pasta dental inhibi un 71,75%

15.28, y para el grupo que utiliz la clorhexidina inmediatamente

despus al agua destilada inhibi un 88.21% 8.04, diferencias

estadsticamente significativas (p

8

ABSTRACT

The aim of the present investigation was to compare the

antimicrobial activity between the chlorhexidine 0.12% after use of a

toothpaste slurry, containing sodium lauryl sulfate, and chlorhexidine

0.12% alone, reducing Streptococci mutans in saliva, expressed in

percentages of inhibition of colony forming unit per milliliter of saliva

isolated in mitis salivarius agar. This is a clinical trial, comparative,

longitudinal y prospective, 2 way crossover design; twenty students saliva

samples were recollected before and sixty minutes after applied the test.

The test consisted in rinsing with a toothpaste slurry or distilled water, and

immediately after with chlorhexidine 0.12%.

The results showed that chlorhexidine 0.12% rinsed immediately

after the use of a toothpaste reduced 71,75% 15.28, and the group that

used chlorhexidine immediately after the use of distilled water reduced

88.21% 8.04, differences statistically significant (p

9

I. INTRODUCCIN

La caries dental y la enfermedad periodontal, las afecciones

prevalecientes de la denticin, hasta hace algunos aos fueron tratadas

segn medidas sintomticas, es decir reparadoras. En la actualidad se ha

comprendido la etiologa y la patogenia en sus aspectos importantes, y

se cuenta con mtodos teraputicos con los cuales se puede erradicar o

controlar los efectos causales y su recidiva. Las observaciones de

experimentos en animales y estudios longitudinales en seres humanos

demostraron que un tratamiento que incluya la eliminacin o control de la

infeccin de la placa y la introduccin de medidas ms cuidadosas de

control de la placa genera, en la mayora de los casos, la salud

periodontal.

El mecanismo clsico para el control de esta placa es un buen

cepillado con una pasta dental que posee diversos componentes, dentro

de ellos un detergente, el lauril sulfato de sodio que facilitar la remocin

de la placa. Sin embargo, en algunos casos donde el cepillado no es

suficiente, hacindose necesario el empleo de auxiliares qumicos que

pudiesen prevenir, retardar o reducir significativamente la formacin de la

placa dental. As, en estos pacientes, se hace necesario el empleo de

colutorios orales luego del cepillado con pasta dental. El colutorio de

mayor efectividad hasta el momento y aprobado por la ADA viene a ser la

clorhexidina al 0.12% que debido a sus excelentes propiedades

antibacterianas y en la inhibicin de la formacin de placa, se recomienda

10

sobre todo en pacientes con enfermedad periodontal y alto riesgo de

caries, adems de aquellos discapacitados que les es difcil cepillarse.

Existen algunos estudios que indican la existencia de

incompatibilidad de la clorhexidina, una molcula catinica, con el lauril

sulfato de sodio, molcula aninica y que es componente de las pastas

dentales, reduciendo as la propiedad de la clorhexidina de inhibir la

formacin de placa. Es por eso que recomiendan el empleo de dicho

colutorio tras una espera de al menos media hora y poder hacer uso de

sus propiedades al mximo. Sin embargo no se ha encontrado estudios

que demuestre si la interaccin de la clorhexidina con los componentes de

las pastas dentales tambin influye en las propiedades antibacterianas de

la clorhexidina. Es por ello que nuestro estudio pretende dar respuesta a

la siguiente pregunta:

Existir disminucin de la actividad antimicrobiana de la

clorhexidina 0.12% frente al Streptococcus mutans en saliva, luego

del uso de una pasta dental que contenga Lauril Sulfato de sodio, en

alumnos de la Preclnica de Periodoncia de la Facultad de

Odontologa de la Universidad Nacional Federico Villarreal - 2009?

Los cmulos blandos de bacterias se adhieren fuertemente a la

superficie dental, dando lugar a la llamada placa dental, mejor llamada

Biofilm dental desde fines del siglo XX. La adopcin del trmino Biofilm

dental en odontologa, dista mucho de ser una mera sustitucin de la

expresin placa bacteriana por una nueva. La microbiologa

11

tradicionalmente ha estudiado las bacterias creciendo en forma

planctnica en cultivos de laboratorio y solo recientemente ha tomado en

cuenta que en el mundo real estas se agregan en comunidades

denominadas Biofilms. Entonces su comportamiento se muestra de un

modo muy diferente, haciendo patente que sus caractersticas son ms

que la suma de sus propiedades individuales. (14)

La placa dental juega un rol clave en el entendimiento complejo

proceso por el cual ocurren las enfermedades ms comunes de la cavidad

bucal. El concepto bsico de estas enfermedades es semejante al de

otras patologas infecciosas y est enmarcado en el concepto de balance

existente entre la respuesta inmune por un lado y la patognesis

microbiana por el otro. En salud, las respuestas inmunes del husped son

suficientes para detener el potencial patognico tanto de la microflora

normal residente como de los patgenos exgenos. Las enfermedades

infecciosas tales como la caries dental y la enfermedad periodontal

ocurren cuando este equilibrio se rompe. (31,13)

La importancia etiolgica de la placa dental en la iniciacin y

progresin tanto de la caries como de la enfermedad periodontal es

evidente; sin embargo, los estudios sugieren que los patgenos son

necesarios pero no suficientes para desarrollarlas. Algunas caractersticas

de los microorganismos, el medio ambiente local y la susceptibilidad del

husped, juegan un papel importante en el equilibrio entre el husped y

los microorganismos. Por otra parte, tambin es cierto que algunos

12

microorganismos juegan roles claves en la patognesis de estas

infecciones. La poblacin bacteriana est en constante cambio y es

afectada entre otras cosas por la edad de los individuos, los hbitos de

higiene bucal, la dieta y la localizacin de los depsitos sobre los dientes.

(31,13)

La cavidad bucal contiene una de las ms concentradas y variadas

poblaciones microbianas del organismo. Particularmente un gran nmero

de microorganismos son encontrados en el dorso de la lengua, alrededor

del surco gingival y en la superficie dentaria. A nivel del diente las

acumulaciones blandas, no calcificadas de bacterias y sus productos son

referidas como placa dental, definida como una masa bacteriana

fuertemente adherida a la superficie dentaria, y que no est formada

exclusivamente por restos alimenticios. Un concepto ms dinmico es el

propuesto por Marsh y Martn en 1992 quienes sealan que la placa

dental es un trmino general para denominar a la comunidad microbiana

compleja encontrada sobre la superficie dentaria, embebida en una matriz

de polmeros de origen bacteriano y salival.(11,31)

La placa dental puede ser clasificada en trminos de su localizacin

como supragingival y subgingival, de su potencial patgeno como

cariognica o periodontopatognica y de sus propiedades como

adherente o no adherente. Estas clasificaciones no son mutuamente

excluyentes, sin embargo, en general, la placa supragingival es adherente

y contiene una flora predominante Gram positiva, caractersticas de estos

13

organismos cariognicos. Por el contrario, la subgingival, est compuesta

en mayor cantidad de microorganismos Gram negativos, es menos

adherente que la supragingival y es preferentemente periodontopatgena.

(31,13)

La formacin del biofilm dental viene a ser el resultado de una serie

de complejos procesos que involucran una variedad de componentes

bacterianos y de la cavidad bucal del husped. As inmediatamente

despus de cepillar un diente, comienza a depositarse sobre su

superficie, protenas de origen salival y del fluido crevicular, por un

proceso de absorcin altamente selectivo y especfico, formndose como

resultado una pelcula acelular, la pelcula adquirida, que vara de grosor

entre 0,1 y 1 micrmetros con un alto contenido de grupos carboxilo y

sulfatos que incrementan la carga negativa neta del esmalte. (32, 11, 31)

Los mecanismos que intervienen en la formacin de la pelcula

sobre el esmalte incluyen fuerzas electrostticas, es una fuerza que se

manifiesta mediante los efectos de atraccin o repulsin sobre los dems

cuerpos debido a un exceso o defecto de electrones; las fuerzas tipo Van

der walls, son fuerzas de estabilizacin molecular, forman un enlace

qumico no covalente en el que participan dos tipos de fuerzas: las de

dispersin (atraccin) y las de repulsin entre las capas electrnicas de

dos tomos contiguos; y las fuerzas hidrfobas, esta fuerza se origina por

la expulsin de las superficies apolares de la red de molculas de agua

unidas por enlaces de hidrgeno. Es por ello que en la superficie de la

14

hidroxiapatita, que posee grupos fosfato con carga negativa, interacta

con protenas y glucoprotenas salivales y del fluido crevicular con carga

positiva. (7, 14, 32, 8)

La pelcula formada opera como barrera de proteccin,

proporcionando lubricacin a las superficies e impidiendo la desecacin

del tejido. Adems, posee molculas que funcionan como sitios de unin

para la adherencia de microorganismos y enzimas de origen salival como

Lisozima, Peroxidasa y Amilasa, que pueden influenciar la colonizacin

bacteriana sobre la pelcula. Igualmente son incorporadas enzimas

extracelulares de origen bacteriano como la glucosiltransferasa (GTF), e

inmunoglobulinas. (13, 31, 14, 7,11)

Luego de formada la pelcula adquirida, esta comienza a ser

colonizada por microorganismos residentes de la cavidad bucal. Este

proceso ha sido dividido en: Deposicin, fase reversible en la que se

produce un acercamiento inicial de la superficie de la pelcula. Adhesin,

fase irreversible en la que participan componentes tanto de la bacteria

como del husped, que determinan que se produzca uniones fsicas o

qumicas entre los constituyentes bacterianos y los del husped,

determinndose as una estrecha unin a travs de adhesinas, por medio

de puentes de calcio y de magnesio, por medio de polisacridos

extracelulares tipo glucan y enzimas glucosiltransferasas producidas por

microorganismos sacarolticos como el S. mutans, y a travs de fimbrias.

15

Coagregacin, unin renuevas bacterias sobre una primera capa

bacteriana (31,13, 7)

El Streptococcus sanguis es el primer microorganismo que se

adhiere a la superficie de la pelcula adquirida y como tal, inicia la

colonizacin microbiana en la formacin de placa dental supragingival e

inmediatamente se adhiere a Actynomices viscosus, algunos sugieren que

estas dos bacterias son prerrequisito para la colonizacin de otras

bacterias tales como veillonella y fusobacterium. Otras bacterias que

inician el proceso de colonizacin son Streptococcus del grupo oralis (S

oralis, S mitis), Actinomyces sp, Neisseria y Aemophilus. (7,13)

Despus de siete das de formada la placa dental, las especies de

Streptococcus continan siendo el grupo predominante, pero a las dos

semanas comienza a predominar los bacilos anaerobios y las formas

filamentosas. Estos cambios microbianos que se van produciendo van

ligados a diversas causas, tales como: antagonismo por competencia de

sustratos; produccin de perxido de hidrgeno; y especialmente por el

consumo de oxgeno en el ambiente, por lo que ocurre una sustitucin de

especies bacterianas Gram positivas facultativas por especies bacterianas

anaerobias facultativas y estrictas Gram negativas, proceso llamado

sucesin autognica. (13)

Los estreptococos son cocos Gram positivos agrupados en pares o

cadenas no esporulados e inmviles que presentan un metabolismo

fermentativo y son anaerobios facultativos que constituyen el grupo ms

16

numeroso en la cavidad bucal representa del 20 al 80% del total de

bacterias. Los estreptococos orales transportan azucares a travs del

sistema fosfoenolpiruvato fosfotransferasa. (20, 17)

El Streptococcus mutans (S. mutans) es considerado el principal

agente etiolgico de caries dental en humanos y animales

experimentales. Las clulas del S. mutans se caracterizan por ser cocos

Gram Positivos, presentar un dimetro de 0.5 a 0.75 milimicras y

disponerse en forma de cadenas, caractersticas propias de este gnero.

En medios de cultivo conteniendo sacarosa, esta bacteria puede producir

polisacridos extracelulares, adquiriendo una apariencia opaca, rugosa,

de color blanco, no adherente al medio de cultivo (31, 17)

El S. mutans es anaerbica facultativa (puede usar para su

metabolismo oxgeno si se encuentra presente en el medio ambiente,

pero puede tambin sobrevivir cuando existe ausencia total de O2), pero

su crecimiento ptimo ocurre bajo condiciones de anaerobiosis (31)

Los S. mutans son los principales productores de acido lctico en

presencia de sacarosa siendo acidognicos (productores de cidos),

acidfilos (tolerantes al acido) propiedad necesaria para sobrevivir y

desarrollarse con un pH bajo y acidricos (capaces de producir acido con

un pH bajo). El S. mutans fue descrito por primera vez por Clarke en

1924. En la actualidad de las 7 especies de Streptococcus mutans se

distinguen 2 humanas: el S. mutans y el S. sobrinus, y 5 animales: S.

cricetus, S. rattus, S. ferus, S. macacae y S. downei; que antes estaban

17

agrupadas en una nica denominacin de S. mutans. Para los estudios

anteriores, S. mutans designa a la vez a todas las especies y, por lo

tanto, se debe tomar como equivalente de grupo de los estreptococos

mutans (20)

Puesto que la distincin entre S. mutans y S. sobrinus, es muy

reciente, los conocimientos actuales sobre patogenia, bioqumica,

fisiologa y ecologa del S. mutans estn mucho ms adelantados que los

del S. sobrinus. Numerosos estudios previos, en los que no se hacan

diferencias entre S. mutans y S. sobrinus, han atribuido al S. mutans un

papel en la etiologa de la caries que, en algunos casos corresponda al S.

sobrinus (12).

El S. mutans est registrado en The National Collection of Type

Culture con el nombre NTCC 10449 y posee tres serotipos: c, e y f,

siendo el serotipo c, el que se asla en el 70 al 100% de los seres

humanos. Los serotipos c y e son los ms cido-tolerantes, con un

grado ptimo de pH 5.0 para la produccin de cido lctico. Los estudios

epidemiolgicos han demostrado una relacin directa entre el nmero de

S. mutans y la presencia de caries dental. En la actualidad esta relacin

se utiliza para predecir caries dental a partir de S. mutans recuperados de

la saliva. Los recuentos bacterianos altos, como 1x106 UFC por ml de

saliva, indican un alto riesgo de caries dental. (12)

El odontlogo dispone desde hace aproximadamente 30 aos de

anlisis de saliva que le permiten controlar la presencia de S. mutans en

18

la saliva de sus pacientes. Los ndices elevados de S. mutans en la saliva

indican tambin su presencia en el sarro dental (20)

La remocin mecnica de la placa dental con procedimientos tales

como el cepillado dental y la utilizacin de elementos accesorios como el

hilo dental, cepillos interproximales, etc., son los mtodos ms eficaces de

los que se dispone hasta el momento para controlar la formacin de placa

y el clculo dental; no siendo posible descuidarlos sin el riesgo de permitir

nuevas acumulaciones sobre la superficie dentarias y la posible

instalacin de la caries y/o la enfermedad periodontal. Sin embargo, un

efectivo control de la placa dental con estos mtodos no puede ser

llevado a cabo por pacientes con poca habilidad con alguna dificultad

motora que disminuya su destreza manual. Es por esto que el control

qumico de la placa dental se ha venido investigando de manera activa.

(31)

Se ha demostrado la importancia de los colutorios poniendo a

prueba las formas comunes para la higiene dental, el cepillado dental

comn con pasta dental y el uso de enjuagatorios (cloruro de cetil

piridinum y clorhexidina), se demuestra que el uso de enjuagatorios en

combinacin con el cepillado resulta mejor en la reduccin de placa

interproximal comparado al cepillado y uso de hilo dental solo. (37)

Dentro de los colutorios orales utilizados tenemos, la clorhexidina

los enjuagues a base de aceite esencial (timol, eucaliptol, mentol y

salicilato de metilo), los preparados a base de Triclosn, Fluoruro

19

estaoso, cloruro de Cetilpiridina (compuestos de amonio cuaternario), y

Sanguinaria. Sin embargo hasta la fecha, la ADA ha aceptado dos

sustancias para tratar la gingivitis: soluciones de Digluconato de

clorhexidina, y los enjuagues bucales a base de aceite esencial (30,1, 9)

La clorhexidina fue desarrollada en la poca de los 40 por Chemical

Industries en Inglaterra; los cientficos fueron capaces de desarrollar un

grupo de compuestos denominados polibiguanidinas, que demostraron

tener un amplio espectro antibacteriano y sali al mercado en 1954 como

antisptico para heridas de la piel. En odontologa se utiliz inicialmente

para desinfeccin de la boca y endodoncia, el estudio definitivo que

introdujo la clorhexidina en el mundo de la periodoncia fue el realizado por

Le y Schiott en 1970, donde se demostr que un enjuague de 60

segundos dos veces al da con una solucin de gluconato de clorhexidina

al 0,2% en ausencia de cepillado normal, inhiba la formacin de placa y

consecuentemente el desarrollo de gingivitis. (1, 34, 31,7)

La Clorhexidina es una molcula bicatinica simtrica, es un dmero

proguanil por lo que decimos que es una bisguanidina, la cual est

conectada por una cadena central de hexametileno. En cada extremo se

enlaza un radical paraclorofenil (2 anillos 4 clorofenil) resultando su

nombre completo: Paraclorofenilbiguanidina

Este compuesto es una base fuerte dicatinica con dos cargas positivas

en cada extremo del puente de hexametileno, es esta naturaleza

dicatinica la que la hace extremadamente interactiva con los aniones, lo

20

que es relevante para su eficacia, seguridad, efectos secundarios locales

y dificultad para formularla en productos. Aunque es una base, la

clorhexidina se mantiene ms estable en forma de sal y la preparacin

ms comn es la sal de digluconato por su alta solubilidad en agua y por

la capacidad de liberacin a pH fisiolgico del componente activo, con

carga inica positiva. (4, 5, 34, 6)

La clorhexidina es el agente ms efectivo para tratamientos

periodontales. Su mecanismo de accin se realiza mediante una

reduccin de la pelcula adquirida y la alteracin del desarrollo bacteriano

y de la adsorcin al diente. Su efecto se debe a la molcula catinica que

se adhiere a los complejos microbianos, a la hidroxiapatita del esmalte,

pared de las bacterias, se une a los compuestos aninicos como sulfatos,

grupos Carboxilo y Fosfatos de la pelcula y glicoprotenas salivales que

poseen cargas negativas y de esta manera se reduce la absorcin de

protenas a la superficie dentaria necesaria para la formacin de la

pelcula dental. (4, 5, 31, 6)

A bajas concentraciones, produce un aumento de la permeabilidad

con filtracin de los de los componentes intracelulares en particular las

substancias de bajo peso molecular, especficamente potasio y fsforo,

que podran gotear hacia fuera. (Efecto bacteriosttico) A altas

concentraciones, la precipitacin de contenidos citoplasmticos ocurrira

resultando en la muerte celular (Efecto bactericida). (4, 5, 6)

21

La clorhexidina se une fuertemente a la membrana celular

bacteriana provocando una perdida y precipitacin de los contenidos

celulares, por el desequilibrio osmtico. De manera especfica, se une a

las mucinas salivales que reducen la formacin de pelculas e inhibe la

colonizacin de la placa. Tambin se une a las bacterias y dificulta su

adsorcin a los dientes. Se une a los tejidos orales de una manera

reversible, se libera lentamente hacia la boca despus del enjuague,

permitiendo que los efectos antimicrobianos iniciales se mantengan

durante varias horas. (6, 27)

El efecto de la clorhexidina se da a travs de cuatro mecanismos:

1. La clorhexidina bloquea los grupos cidos libres de las

glicoprotenas salivales (salivales), las cuales forman la

pelcula adquirida que permitir la formacin de la placa

bacteriana, siendo esta su primera capa, no permitiendo la

formacin de la misma.

2. La carga inica de la clorhexidina atrae a la superficie

microbiana de la carga negativa, a lo que contribuye el pH del

medio, el cual es neutro o bsico, permitiendo que los

microorganismos se unan a las molculas de clorhexidina y

no se adhieran a la pelcula adquirida.(19)

3. La clorhexidina tambin destruye la placa formada al competir

con el ion calcio, factor coadyuvante de la formacin y

crecimiento de la placa bacteriana que acta como una

22

molcula de enlace que permite a las bacterias fijarse a la

pelcula adquirida sin impedimentos. Cuando la clorhexidina

se une al ion calcio, impide la unin del mismo a las bacterias.

Alteracin de la adherencia de las clulas bacterianas a la

pelcula adquirida por competencia con el ion calcio.

4. A altas concentraciones la clorhexidina produce, tras unirse a

la pared bacteriana, cambios electroforticos que producen

una precipitacin citoplasmtica que conlleva a la muerte

celular hasta un 95% de las bacterias.(24)

La clorhexidina incluso en baja concentracin, inhibe el sistema

fosfoenol piruvato fosfotransferasa. Esto podra explicar el hecho de que a

bajas concentraciones, la clorhexidina puede reducir la produccin de

acido a partir de glucosa por estreptococos orales sin afectar su viabilidad

celular. (20, 21,34)

Las clulas de los microorganismos asociados a la caries dental se

encuentran cargadas negativamente y las molculas catinicas del

gluconato de clorhexidina son rpidamente absorbidas a los grupos

fosfato de dichas clulas bacterianas; esto altera la integridad de la

membrana celular de las bacterias, lo que determina que la droga sea

atrada al interior de la clula donde aumenta la permeabilidad de esta y

permite que los componentes de bajo peso molecular, como los iones

potasio sean liberados al exterior.(26)

23

Una de las propiedades que caracteriza a la clorhexidina es la de

poseer alta sustantividad por lo tanto permanece activa en el sitio de

aplicacin y se libera gradualmente en 8-12 horas en su forma activa.

Despus de 24 horas an puede recuperarse concentraciones bajas de

clorhexidina, lo que evita la colonizacin bacteriana durante este tiempo.

Esto se debe a la fuerte unin aninica que se establece entre la droga y

la carga positiva de los grupos carboxilo con carga negativa presentes en

la cavidad bucal, el calcio salival desplaza en forma lenta a la clorhexidina

prolongando as su efecto.(4,5)

Actualmente el uso de la clorhexidina en la concentracin del 0.12%

se ha convertido en un excelente colutorio, por su amplio espectro, en el

tratamiento coadyuvante en la Gingivitis, Periodontitis, Caries dental, para

el control de placa bacteriana. Es efectivo contra bacterias como el

Streptococcus mutans, Streptococcus salivarius, y Escherichia coli,

Candida albicans por su alta sensibilidad (4,36, 5,31)

En una sola aplicacin de clorhexidina se obtuvieron una reduccin

de 87,6% de streptococcus mutans en saliva y de 93,3% de la carga

microbiana salival, lo cual nos muestra sus excelentes actividades

antimicrobianas. (29,10)

El efecto colateral masa comn de la clorhexidina es la formacin de

manchas amarillentas-parduscas que se desarrollan en el tercio gingival e

interproximal de los dientes afectados. Esto ocurre a pocos das

aproximadamente en 50% de los pacientes; igualmente han sido

24

reportadas pigmentaciones en la lengua. El mecanismo preciso de la

coloracin no ha sido determinado, pero se ha postulado que su etiologa

es de origen diettica, este efecto colateral se controla de alguna manera

disminuyendo la concentracin al 0,05% que puede ser muy bien

tolerado, llamada dosis de mantenimiento. (31, 9, 30)

Se ha afirmado que un dentfrico es una sustancia utilizada sobre un

cepillo con el fin de limpiar las caras accesibles a los dientes. El dentfrico,

a travs de sus surfactantes y agentes espumgenos (lauril sulfato de

sodio), ayuda a desalojar los residuos de alimentos y la placa, y

contribuye tambin debido a sus abrasivos a eliminar manchas, ayudando

as a la limpieza de la boca. El dentfrico ayuda al cepillo en la remocin

de de los restos bucales y promueve tambin su uso ms frecuente

debido a que en su composicin posee agentes saporferos que dan una

sensacin de limpieza. Tambin los dentfricos pueden actuar como

vehculos de medicaciones teraputicas o preventivas. (19)

La composicin de las pastas dentales varia de producto a producto,

pero la mayora parte de una base estndar sobre la cual producen algn

cambio en la concentracin y/o adicionan algn componente. La base del

dentfrico est compuesta por los siguientes elementos: abrasivos,

saborizantes, humectantes, edulcorantes artificiales, conservadores,

agentes colorantes, agentes teraputicos, un agente espumante o

detergente que disminuye la tensin superficial de la pasta dental y ayuda

a eliminar restos de la superficie dental, su accin detergente ayuda a

25

eliminar la grasas de cualquier superficie, el ms usado es el lauril sulfato

de sodio. (3, 16,18)

La pasta dental ampliamente utilizado, posee varios componentes,

dentro de los cuales encontramos el agente surfactante, que en su

mayora utilizan el lauril sulfato de sodio. El Lauril Sulfato de Sodio (LSS)

es un agente surfactante aninico empleado en una variedad de

formulaciones farmacuticas no parenterales. Es un detergente y agente

humectante, efectivo en soluciones cidas y alcalinas y en aguas duras.

Es usado en shampoos medicados, como limpiador de la piel y en

dentfricos. (33, 35)

El LSS, es un alcohol sulfatado superior, emulsificante o surfactante

aninico, potente agente tensioactivo y humectante, utilizado para bases

emulsivas porque absorben agua, aunque son insolubles en ella,

formando emulsiones. Tiene la propiedad de disminuir la tensin

superficial del agua _accin tensioactiva o surfactante_ de manera que el

agua se extiende y moje ms fcilmente las superficies. (24)

La molcula del LSS consta de dos partes; una de ellas se une o

disuelve en agua, grupo hidroflico polar, mientras que la otra lo hace con

el aceite, grupo lipoflico, hidrofbico o no polar; en esta forma, el agente

superficialmente activo o humectante junta las dos molculas de agua y

aceite. (24, 35)

26

El lauril sulfato de sodio es el detergente mayormente utilizado en

pastas dentales en concentraciones de 0.5% a 2%. Es un anfipolo

aninico, el cual tiene gran afinidad por protenas y es un fuerte agente

desnaturalizante. Sin embargo se ha reportado que el LSS es causante

de diferentes efectos colaterales adversos en tejidos orales cuando son

aplicados en la boca como pasta dental o colutorio. Existe una relacin

entre descamacin oral y el uso de pastas de diferentes marcas

comerciales dado que se observa ensanchamiento del estrato crneo por

separacin y perdida de la superficie de la capas epiteliales. (15)

A travs de los aos se han realizado diversos estudios que han

tratado de demostrar la interaccin antagnica que existe entre la pasta

dental y la clorhexidina tales como:

Sheen (2001), quien realiz un estudio in vitro, en el cual utiliz la

propiedad de la clorhexidina (CHX) y el cloruro de cetil piridinum (CCP) de

intervenir con cromgenos de la dieta en producir manchas dentales,

como indicador para tratar de explicar la interaccin de pasta dental (TP) y

clorhexidina y agua (W). Se realiz el estudio en 11 grupos en donde el

acrlico claro se sumergi en TP/CHX; CHX/TP; TP/CPC; CPC/TP:

W/CHX; CHX/W; W/CCP; CPC/W; TP/W; W/TP; W/W. Los resultados

indicaron que las combinaciones de TP/CHX y CHX/TP fueron los que

menos tincin presentaban.

Owens (1997) realiz un estudio de diseo cruzado, basado en

variacin de crecimiento de placa en cuatro das utilizando clorhexidina

27

(CHX), agua (W), pasta dental (TP). Se utiliz regmenes de W/CHX;

CHX/W; CHX/TP; TP/CHX; W/CHX, TP/W; W/W. Como resultados obtuvo

que la combinacin de TP/CHX produjo significativamente un aumento en

el crecimiento de placa comparado con CHX/W.

Barkvoll (1989) realiz un estudio con el propsito de examinar la

posible interaccin entre la clorhexidina y el anin laurel sulfato de sodio

en pacientes a los cuales se les hizo enjuagar con una solucin de lauril

sulfato de sodio para el grupo prueba y agua destilada para el grupo

control, seguido de un enjuague con clorhexidina a diferentes intervalos

desde 3 minutos hasta 30 minutos, al cabo del stimo da se evalu el

ndice de placa. Los resultados obtenidos mostraron que aun al intervalo

de 30 minutos entre el laurel sulfato de sodio y la clorhexidina dio una

significativa reduccin del efecto antiplaca de la clorhexidina, dicha

neutralizacin desapareca luego de dos horas.

Lindhe (1992), cita a Schiott y Col quienes en el ao1976, realizaron

un estudio en 150 estudiantes de medicina que se enjuagaron la boca con

una solucin de digluconato de clorhexidina al 0.2% por dos aos.

Pudieron observar que aparentemente exista alguna interaccin con el

agente saporfero utilizado, dado que disminuy la concentracin efectiva

de Clorhexidina, sin embargo se observ significativa reduccin en placas,

gingivitis y nmero total de bacterias facultativas y anaerobios y de

Streptococcus mutans en la saliva.

28

II. HIPTESIS

Debido a la interaccin antagnica del Lauril Sulfato de Sodio, un

agente aninico presente en la pasta dental, con la clorhexidina, un

agente catinico, es probable que la inhibicin de S. mutans en saliva de

pacientes que utilizaron pasta dental previa al uso de clorhexidina 0.12%

sea menor que en aquellos que utilizaron clorhexidina 0.12% sola.

29

III. OBJETIVOS

3.1. OBJETIVO GENERAL

Comparar la actividad antimicrobiana entre la clorhexidina al 0.12%

luego del uso de una pasta dental que contenga Lauril Sulfato de sodio

con el uso de la clorhexidina sola, frente al Streptococcus mutans en

saliva.

3.2. OBJETIVOS ESPECFICOS

- Determinar el nmero de colonias de S. mutans antes del uso de la

pasta dental y la CHX al 0.12%

- Hallar el nmero de colonias de S. mutans antes del uso de la CHX

al 0.12% sin pasta dental.

- Determinar el nmero de colonias de S. mutans luego de 60

minutos de haber aplicado la solucin de pasta dental y la CHX al

0.12%

- Determinar el nmero de colonias de S. mutans luego de 60

minutos de haber aplicado la CHX al 0.12% sin el uso de la

solucin de pasta dental.

- Comparar el porcentaje de inhibicin de UFC de s. mutans con el

uso de CHX 0.12% sola y CHX al 0.12% con pasta dental

30

IV. MATERIAL Y MTODO

TIPO DE ESTUDIO:

El presente trabajo de investigacin es un ensayo clnico,

comparativo, longitudinal y prospectivo, de diseo cruzado.

Universo: Alumnos de la preclnica de periodoncia de la facultad

de Odontologa de la UNFV.

Muestra: 20 alumnos. El tamao de la muestra se determin

mediante la frmula estadstica de clculo muestral para estudios

comparativos a partir de un estudio piloto de 5 casos, evaluados como

control y como prueba.

N = (Z + Z)2 .2 (DE)2 (X1-X2)2 Donde:

Z: Coeficiente de confiabilidad al 95% (1.96)

Z : Potencia de prueba al 80% (0.84) DE: Desviacin estndar mayor (referencial 22)

X1 : Promedio UFC de la clorhexidina 0.12% luego del enjuague con agua destilada (referencial 89)

X2 : Promedio de UFC de la clorhexidina 0.12% luego del uso de la pasta dental (referencial 69)

Obtenindose N=18,97

31

CRITERIOS DE INCLUSIN

Pacientes de 20- 25 aos

Alumnos dispuestos a colaborar.

Alumnos que sean del turno maana.

Firmen el consentimiento informado.

Presenten CPO-D entre 7 a 12.

Tener una higiene bucal regular.

CRITERIOS DE EXCLUSIN

Con enfermedad sistmica

Bajo medicacin antibitica, antisptica o antiinflamatoria

Hbito de consumo de alcohol o drogas

Portadores de aparatos ortodnticos o prtesis

Presenten remanentes radiculares

Tengan higiene oral mala o buena.

Alumnos que utilicen antispticos orales regularmente.

32

VARIABLES

-Variable Dependiente:

Colonias bacterianas: Streptococcus mutans

-Variable Independiente

Enjuague bucal compuesto por clorhexidina al 0.12% sin uso previo de pasta dental

Enjuague bucal compuesto por clorhexidina al 0.12% previo uso de pasta dental.

OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES

VARIABLES INDICADOR ESCALA VALOR

Efecto

antibacteriano

Nro. de Unidades

Formadoras de

Colonias de S.

mutans en agar

mitis salivarius

De RAZN 0-n x 105 UFC

33

PROCEDIMIENTO

Para la ejecucin del presente estudio se evaluaron, a los alumnos

del turno maana de la pre clnica de periodoncia de la Facultad de

Odontologa de la Universidad Nacional Federico Villarreal con

odontogramas y cuestionarios con autorizacin previa de la facultad, jefe

de curso, y del docente responsable del turno, de ellos se seleccionaron

20 alumnos que cumplieron con los criterios de inclusin. Se les informo

detalladamente acerca de los materiales que se iban a emplear en el

estudio, pero no cual era el objetivo del estudio.

Los 20 alumnos fueron divididos aleatoriamente en dos grupos para

formar parte del grupo prueba o del grupo control. La toma de muestras

se realiz en dos fechas, en sus respectivos turnos de Preclnica. En

cada fecha se analizaron dos muestras por cada alumno: la basal o inicial,

antes del experimento, y la final, luego de 60 minutos de aplicado el

experimento.

En la primera fecha, 10 alumnos fueron del grupo prueba y 10 fueron

del grupo control, y luego de 15 das, la segunda fecha, los que formaban

parte del grupo control esta vez pertenecieron al grupo prueba y

viceversa, siguiendo un diseo experimental de cambio simple.

Los niveles basales de S. mutans se determinaron en muestras de

saliva (0,5-1 ml) obtenidas dos horas despus del desayuno sin cepillado

34

dental previo (23). Para ello se le entreg a cada alumno un frasco estril

codificado.

El rgimen de enjuagatorios de los grupos fue de la siguiente

manera:

GRUPO PRUEBA (PASTA-CHX)

Se procedi a realizar un enjuague con la solucin de la pasta dental

(3 gramos de pasta dental Colgate en 10 ml de agua destilada) por 1

minuto.

Inmediatamente despus se realiz un enjuagatorio con 15 ml de

clorhexidina por 1 minuto

Luego 60 minutos despus se procedi a recoger una segunda

muestra de saliva no estimulada.

GRUPO CONTROL (H2O CHX)

Se procedi a realizar un enjuague con agua destilada por 1 minuto

para simular el efecto fsico de barrido y dilucin de las bacterias causada

por el enjuague con la solucin de pasta dental.

Inmediatamente despus se realiz un enjuagatorio con 15 ml de

clorhexidina 0.12% por 1 minuto

Luego 60 minutos despus se procedi a recoger una segunda

muestra de saliva no estimulada.

35

Los pacientes fueron instruidos a realizar los enjuagues con

movimientos secuenciales para la zona anterior, lateral derecha, lateral

izquierda, involucrando todas las zonas dentarias y la lengua. Controlando

con un cronometro la duracin del enjuague.

DISEO MICROBIOLGICO

En el laboratorio previo al recojo de las muestras se diluy Agar Mitis

Salivarius, de la marca DIFCO, al estado lquido a una temperatura

aproximada de 50, inmediatamente se agreg 0.1 ml de telurito de

potasio por cada 10 ml de agar, esta mezcla se coloc en vibrador por 10

segundos, para luego ser vertido 20ml de agar en cada una de las placas

petri.

Se realiz un piloto para identificar la dilucin de saliva en la placa

sembrando 3 diluciones diferentes de saliva (1:1000, 1:10000 y 1:100000)

encontrando que la dilucin 1:100000 contena la cantidad de UFC

necesarias para realizar el conteo.

Luego de tomadas las muestras se colocaron en vibradora los

frascos conteniendo la saliva durante un minuto, se diluy 0.1 ul en

99999.9 ul de agua estril obteniendo una muestra diluida 1:100000, se

tomo 20 ul de cada dilucin (bien agitada) y se sembr con una asa de col

sobre una placa con 20 ml de agar mitis salivarius anotando en la base de

la placa la numeracin y letra correspondiente dado que el laboratorio no

saba a qu grupo pertenecan las distintas muestras de saliva.

36

Posteriormente se incubaron las placas petri en posicin invertida y

con una atmosfera microaerfila (jarra con vela de extincin) a 37 grados

por un periodo de 48 horas, transcurrido este tiempo se procedi al

conteo de colonias con la ayuda de una lupa y se registr en la ficha de

resultados. El Nro de colonias se multiplic por la dilucin respectiva.

RECURSOS

RECURSOS MATERIALES

20 Placas petri 40 fichas de recoleccin de datos. 10 Tubos de ensayo 80 Frascos estriles 600 ml de clorhexidina al 0.12% 30 gr de pasta dental Colgate 2 litros de agua destilada 1 Micropipetas 2 Asa de col 1 Lupa de aumento 1 Incubadora 8ml de telurito de potasio 1 Vibradora elctrica 1 Balanza analtica 1 frasco agar mitis salivarius Difco 10 bandejas de examen.

37

10 Mascarillas 80 Vasos descartables Una caja de Guantes 1 Cooler

RECURSOS HUMANOS

1 Bachiller en odontologa 1 Microbilogo

38

PROCESAMIENTO Y PRESENTACIN DE RESULTADOS

Los datos obtenidos del nmero de Unidades Formadoras de

Colonias (UFC) por ml de saliva fueron almacenados y procesados con la

ayuda de una computadora Pentium V mediante los programas SAS 8.2,

Excel 2007

La presentacin de resultados se realiz mediante tablas y figuras

que muestran estadsticos de tendencia central (media) y dispersin

(desviacin estndar).

PLAN DE ANLISIS

Para los parmetros de inhibicin de colonias de Streptococcus

mutans, se utiliz el diseo de cambio simple.

El modelo estadstico que se utiliz es el siguiente:

Yijk = + Di + Tj + Pk + eijk

Donde:

Yijk : Inhibicin de Streptococcus mutans en el l-simo paciente,

en el j-simo periodo, con el k-simo tratamiento.

: Media general.

Di : Efecto del i-simo paciente.

Tj : Efecto de la j-simo periodo.

39

Pj : Efecto del k-simo tratamiento.

eij : Error experimental.

Y a fin de obtener normalidad y homogeneidad, los valores de

inhibicin de colonias de S. mutans fueron transformados angularmente

mediante la frmula de Steel & Torrie, 1988:

Y=arc sen %

Donde:

X = representa el porcentaje de reduccin de bacterias obtenida.

Se determin la normalidad de los datos, para lo cual se utiliz las

pruebas de Kolgomorov- Smirnow.

Se aplic la prueba T de Student para muestras independientes con un

nivel de significancia del 95 %, para comparar las medias de los recuentos

iniciales y finales de UFC en ambos grupos. Y la prueba T student para

muestras correlacionadas, para comparar la media del recuento inicial con

respecto a la media final de UFC en cada grupo, y tambin para

comparar el promedio de inhibicin porcentual de UFC de los grupos en

estudio.

40

V. RESULTADOS

Se analizaron las 40 muestras iniciales de saliva, hallando para el grupo Pasta+Clorhexidina una media del recuento de S. mutans de 28.7

x105 UFC/mL de saliva con una desviacin estndar de 25.8 x105 UFC/mL

y para el grupo H2O+ Clorhexidina una media de recuento de S. mutans

de 30.6 x105 UFC/mL con una desviacin estndar de 14.7 x105 UFC/mL.

No se encontr diferencias estadsticamente significativas (P=0.72>0.05)

entre las medias de los recuentos iniciales de UFC/mL de saliva de S.

mutans ambos grupos (Tabla y figura N 1)

Se analizaron las 40 muestras finales de saliva, hallando para el grupo Pasta+ Clorhexidina una media del recuento de S. mutans de 7.35

x105 UFC/mL de saliva con una desviacin estndar de 7.8 x105 UFC/mL

y para el grupo H2O+ Clorhexidina una media de recuento de S. mutans

de 3.34 x105 UFC/mL con una desviacin estndar de 2.5 x105 UFC/mL.

Se encontr diferencias estadsticamente significativas (P=0.02

41

Se hall el promedio de los porcentajes de reduccin de UFC de S. mutans para el grupo Pasta+ Clorhexidina de 71,75% con una desviacin

estndar de 15.28% y para el grupo H2O+ Clorhexidina de 88.21% con

una deviacin estndar de 8.04%. Se aprecia que el porcentaje de

reduccin de UFC de S. mutans para el grupo Pasta+Chx es menor y

estadsticamente significativa en relacin al grupo H2O+ Clorhexidina

(P

42

TABLA N1

RECUENTOS INICIALES DE UNIDADES FORMADORAS DE

COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGN GRUPO.

UNFV-2009

COLUTORIOS NRO X Desviacin standard

PASTA-CHX 20 28.7 x105 25.8x105

H2O-CHX 20 30.6 x105 14.7 x105

P=0.72>0.05 no existe diferencia estadsticamente significativa.

FIGURA N1

RECUENTOS INICIALES DE UNIDADES FORMADORAS DE

COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGN GRUPO.

UNFV-2009

43

TABLA N2

RECUENTOS FINALES DE UNIDADES FORMADORAS DE

COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGN GRUPO.

UNFV-2009

COLUTORIOS NRO X Desviacin standard

(PASTA-CHX) 20 7.35 x105 7.8 x105

(H2O-CHX) 20 3.34 x105 2.5 x105

P=0.02

44

TABLA N3

RECUENTOS INICIALES Y FINALES DE UNIDADES

FORMADORAS DE COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans

PARA EL GRUPO PASTA-CHX

UNFV-2009

RECUENTO NRO X Desviacin standard

INICIAL 20 28.7 x105 25.8x105

FINAL 20 7.35 x105 7.8 x105

P=0.0

45

TABLA N4

RECUENTOS INICIALES Y FINALES DE UNIDADES

FORMADORAS DE COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans

PARA EL GRUPO H20+CHX.

UNFV-2009

RECUENTO NRO X Desviacin standard

INICIAL 20 30.6 x105 14.7 x105

FINAL 20 3.34 x105 2.5 x105

P=0.0

46

TABLA N 5

PORCENTAJES DE REDUCCION DE UNIDADES FORMADORAS

DE COLONIAS (UFC) DE Streptococcus mutans SEGN GRUPO.

UNFV-2009

GRUPO NRO X Desviacin standard

PASTA-CHX 20 71,75% 15.28%

H2O-CHX 20 88.21% 8.04%.

P=0.00

47

VI. DISCUSIN

En el campo de la odontologa muchas veces se hace necesario el

uso de algn enjuagatorio bucal como coadyuvante en el control de la

higiene bucal, una de ellas viene a ser la clorhexidina al 0.12%,

considerada hasta el momento el gold standard por sus excelentes

propiedades antibacterianas y antiplaca, recomendando su uso tras el

cepillado con una pasta dental en pacientes con caries dental o

enfermedad periodontal.

La presente investigacin consciente de la importancia en que todo

antimicrobiano debe ser utilizado aprovechando sus propiedades al

mximo, evitando interacciones que puedan disminuir su efecto; por lo

tanto, es importante tener en cuenta la interaccin antagnica, entre el

digluconato de clorhexidina con el lauril sulfato de sodio (componente de

diversas pastas dentales) por ser agente catinico y aninico,

respectivamente, y que en el medio bucal reaccionan entre s, formando

una sal de baja solubilidad y bajo poder antimicrobiano, disminuyendo las

propiedades de la clorhexidina. Los resultados obtenidos en la presente

investigacin muestran que el poder antimicrobiano de la clorhexidina

frente al Streptococcus mutans se ve disminuido en un 16.46% cuando es

utilizada inmediatamente despus del uso de una pasta dental, que

contiene lauril sulfato de sodio

Existen estudios, aunque siguen una metodologa diferente, que

tratan de demostrar la interaccin antagnica ya mencionada.

48

Barkvol (1989), utiliz una solucin de lauril sulfato de sodio 0.2%

previo al enjuague con clorhexidina 0.2% a diferentes intervalos de tiempo

para evaluar la disminucin de los efectos antiplaca de la clorhexidina

causada por el lauril sulfato de sodio, medida con el ndice de higiene

oral; recomienda el uso de la clorhexidina con un intervalo mnimo de 30

minutos con respecto al cepillado con una pasta dental.

Owens y col (1997) concluyeron que la accin antiplaca de la

clorhexidina 0.12%, evaluada durante cuatro das con el ndice de higiene

oral, disminua cuando es utilizado en un medio qumico de una solucin

de pasta dental, utilizado previo e inmediato al uso del antimicrobiano

mencionado, utilizando al agua destilada como control.

Esta investigacin, a diferencia de Barkvol y col, evalu la

disminucin de la propiedad antibacteriana de la clorhexidina 0.12% tras

un enjuague inmediato con una solucin de pasta dental (que contena

lauril sulfato de sodio), expresada en la reduccin de colonias de S.

mutans, siguiendo los patrones comunes de higiene, donde el cepillado se

realiza con la pasta dental y no con el lauril sulfato se sodio nicamente.

Coincidimos con Owens y col en que la pasta dental debi ser aplicada

con un cepillo dental para ser representativa de la forma de uso habitual;

sin embargo, el efecto de la limpieza mecnica que ejerce el cepillo es

una variable indeterminada y podra alterar los objetivos del modelo.

Sheen y col (2001) realiz un estudio in vitro utilizando la propiedad

de la clorhexidina de intervenir con cromgenos de la dieta en producir

49

manchas dentales, ambos investigadores concluyeron que no importa si la

clorhexidina es empleada antes o despus de la pasta dental, son

incompatibles y no recomienda su uso inmediato.

Aunque es difcil realizar una comparacin con la metodologa

utilizada por Sheen y col, el objetivo de demostrar la incompatibilidad de la

clorhexidina cuando se utiliza inmediatamente despus del uso de una

pasta dental (que contenga lauril sulfato de sodio) es el mismo.

El presente estudio mostr que el uso de la solucin de pasta dental,

previo e inmediato al uso de la clorhexidina, disminuy significativamente

el efecto antibacteriano de la clorhexidina en la reduccin de UFC de

Streptococcus mutans en saliva, comparada con el uso de la clorhexidina

luego de un enjuague con agua destilada. Debemos resaltar que a pesar

de esta disminucin del efecto antibacteriano, hubo una reduccin

significativa de UFC de S. mutans en saliva (71,75%). Datos similares

fueron obtenidos por Schiott y col (1976), quienes pudieron observar

cierta interaccin antagonista entre pasta dental y clorhexidina, a pesar de

ello obtuvieron reduccin en placas, gingivitis, nmero total de bacterias

facultativas y anaerobios y de Streptococcus mutans en saliva aunque no

fue el propsito de su estudio evaluar dicha interaccin.

El promedio de inhibicin de unidades formadoras de colonias del

Streptococcus mutans por la clorhexidina 0.12%, sin el uso previo de la

pasta dental, fue de 88.21%, resultados similares a los obtenidos por

Dalia K y col (2008) quienes obtuvieron una reduccin de 87,6%. Tambin

50

los datos obtenidos por Pineda (2000) quien obtuvo una reduccin del

93,3%, aunque no fue frente al Streptococcus mutans sino en toda la

carga microbiana salival aerobia, dando mayor confiabilidad a los datos

obtenidos en la presente investigacin.

51

VII. CONCLUSIN

1. El uso previo e inmediato de una solucin de pasta dental, que

contiene lauril sulfato de sodio, disminuy significativamente

(16.46%) el efecto antimicrobiano de la clorhexidina frente al S.

mutans en saliva comparado con el grupo control, que utiliz agua

destilada y clorhexidina 0.12%.

2. El enjuague con clorhexidina 0.12% inmediatamente despus de

usar la solucin de pasta dental disminuy significativamente

(71,75%) el nmero de colonias de S. mutans comparado con los

niveles iniciales.

3. El enjuague con clorhexidina 0.12% inmediatamente despus de

usar agua destilada mostr una reduccin significativa (88.21%) del

nmero de colonias de S. mutans comparado con los niveles

iniciales.

52

VIII. RECOMENDACIONES

1. El uso de un enjuagatorio a base de clorhexidina no debe ser

utilizado inmediatamente despus del cepillado con una pasta

dental que contenga lauril sulfato de sodio sino despus de un

intervalo de tiempo, caso contrario se debe utilizar una pasta

dental que no posea dicho componente.

2. Realizar estudios comparativos a diferentes intervalos de tiempo,

entre el uso de la clorhexidina y la pasta dental, para evaluar el

lapso ideal de espera antes del uso de la clorhexidina, aumentando

la poblacin a fin de obtener datos muchos ms precisos.

3. Elaborar un estudio comparado, analizando el efecto

antimicrobiano de la clorhexidina cuando es empleada

inmediatamente despus del uso de una pasta dental que contenga

lauril sulfato de sodio y cuando es usada con una pasta que no lo

contenga.

4. Realizar el recuento de colonias de Streptococcus mutans en saliva

para ayudar a determinar el riesgo de caries y controlar el

mantenimiento de niveles bajos de dicha bacteria mediante el uso

de antispticos como la clorhexidina.

53

IX. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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35. Vega, E. (2001) Lauril Sulfato de Sodio. Centro de Informacin De

Medicamentos (CIME) Boletn Informativo del Dpto de Farmacia.

Universidad Nacional De Crdova, 6.

36. Yevenes, I. (2003) Efecto inhibitorio en placa microbiana y

propiedades antibacterianas de enjuagatorios de clorhexidina.

Avances en Periodoncia e Implantologa Oral, 15,1; 19-24.

37. Zimmer, S. (2006) Clinical efficacy of flossing versus use of

antimicrobial rinses. Journal of Periodontology, 77, 8

57

X. ANEXOS

58

ANEXO 1

59

ANEXO 2

FICHA DE DATOS

APELLIDOS Y NOMBRES

TELEFONO

TURNO..

E-MAIL:

EDAD:

ENFERMEDAD SISTEMICA

RECIBE ALGUNA MEDICACION DE TIPO:

ANTIBIOTICA, ANTISEPTICA, ANTIINFLAMATORIA

CONSUME ALCOHOL O DROGAS

CUANTAS VECES AL DIA SE CEPILLA:

60

ANEXO 3

ODONTOGRAMA

61

ANEXO 4

Resultados obtenidos

Diseo de Cambio Simple SAS 8.3

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

I C C P P C C C P P C C P C P P P C P C P

II P P C C P P P C C P P C P C C C P C P C

I-PRIMERA FECHA II-SEGUNDA FECHA C-CONTROL P-PRUEBA

GRUPO PRUEBA A GRUPO CONTROL B

PACIENTE INICIAL FINAL DIFERENC% INHIB INICIAL FINAL DIFEREN

% INHIB

1 1100000 500000 600000 54,55 1600000 100000 1500000 93,752 800000 200000 600000 75,00 2900000 300000 2600000 89,663 4900000 600000 4300000 87,76 4500000 600000 3900000 86,674 600000 100000 500000 83,33 2700000 300000 2400000 88,895 1500000 200000 1300000 86,67 2500000 200000 2300000 92,006 7300000 600000 6700000 91,78 2100000 190000 1910000 90,957 1600000 300000 1300000 81,25 3000000 100000 2900000 96,678 1300000 600000 700000 53,85 2900000 800000 2100000 72,419 2800000 1500000 1300000 46,43 3100000 1100000 2000000 64,5210 5800000 2600000 3200000 55,17 1200000 200000 1000000 83,3311 400000 100000 300000 75,00 3800000 100000 3700000 97,3712 600000 100000 500000 83,33 3400000 500000 2900000 85,2913 200000 100000 100000 50,00 2100000 200000 1900000 90,4814 1600000 800000 800000 50,00 4800000 100000 4700000 97,9215 700000 200000 500000 71,43 2000000 300000 1700000 85,0016 3300000 1000000 2300000 69,70 1500000 200000 1300000 86,6717 3100000 300000 2800000 90,32 1800000 200000 1600000 88,8918 5800000 1900000 3900000 67,24 3800000 500000 3300000 86,8419 9000000 2500000 6500000 72,22 7700000 400000 7300000 94,8120 5000000 500000 4500000 90,00 3800000 300000 3500000 92,11PROMEDIO 2870000 735000 2135000 71,75 3060000 334500 2725500 88,21

62

ANEXO 5

Alumnos en la preclnica de Periodoncia realizando los enjuagues en

presencia del Dr. Angeles (Docente del turno)

63

Materiales

Pesando 3gr de pasta dental

64

Clorhexidina y solucin de pasta dental.

Muestras salivales en el cooler para transporte al laboratorio

65

Sembrado por estrias en agar mitis salivaris.

Jarra de anaerobiosis

66

Cultivo luego de 48 horas

Placa identificando la colonia de Streptococcus mutans

67

ANEXO 6