PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU BIJI …repository.ump.ac.id/2976/1/COVER.pdfPENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU BIJI (Psidium guajava) TERHADAP EFEK ANTIPROLIFERASI

1

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU BIJI

(Psidium guajava) TERHADAP EFEK ANTIPROLIFERASI MELALUI

MODULASI SIKLUS SEL FIBROBLAST NIH3T3

SKRIPSI

NUR FINA MAFAZAH

1308010004

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2017

i




SKRIPSI

Diajukan sebagai salah satu syarat

Untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi

NUR FINA MAFAZAH

1308010004

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2017

Pengaruh Pemberian Ekstrak…, Nur Fina Mafazah, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

ii Pengaruh Pemberian Ekstrak…, Nur Fina Mafazah, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

iii Pengaruh Pemberian Ekstrak…, Nur Fina Mafazah, Fakultas Farmasi, UMP, 2017

iv


v

MOTTO

Orang-orang yang sukses telah belajar membuat diri mereka melakukan hal yang

harus dikerjakan ketika hal itu memang harus dikerjakan, entah mereka

menyukainya atau tidak." (Aldus Huxley)

Hanya karena alasan saya punya Allah, saya tetap berani

bermimpi (Ori Rabowo)

"Sesuatu yang belum dikerjakan, seringkali tampak mustahil; kita baru yakin

kalau kita telah berhasil melakukannya dengan baik." (Evelyn Underhill)


vi

HALAMAN PERSEMBAHAN

Dengan segenap rasa syukur atas rahmat dan ridho-Nya kepada Allah SWT, karya

ini dipersembahkan untuk :

1. Kedua orang tuaku bapak H.A. Rochim dan Ibu Hj. Nur Aeni yang selalu

mencurahkan kasih sayang, doa restu, motivasi, semangat dan dukungan

yang tiada henti.

2. Terimakasih untuk ketujuh kakaku tersayang (Ka sufyan, Ka masitoh, Ka

Hasan, Ka Uswah, Ka Nurul, Ka Alfi, Ka Nisa) selalu memberikan

semangat mendengarkan keluh kesah dan selalu memberikan nasehat.

3. Terimakasih untuk dosen-dosen fakultas farmasi, terutama kedua

pembimbingku (Ibu Nunuk dan Ibu Elza) yang tidak pernah lelah

membimbing dan sabar dalam memberikan arahan.

4. Terimakasih untuk bu Sari, mas Arif, dan mas Mamat, yang selalu setia

mendengarkan keluh kesah dan selalu memberikan nasehat serta

semangat.

5. Terimakasih untuk kamu partner skripsi Tim Kultur yang telah mau

melewati susah, seneng bareng selama penelitian.

6. Untuk teman-teman kos Rina, Grevi, Mba Galuh, Anna dan yang tidak

bisa disebutkan satu persatu terimakasih sudah mau mendengarkan keluh

kesah dan tak pernah bosan memberikan semangat.

7. Terimakasih teman-teman farmasi angkatan 2013 sudah menemani dan

berjuang bersama, khususnya anak-anak kelas farmasi B dan FSOA canda

tawa selalu hadir dalam waktu 4 tahun terakhir di Purwokerto

8. Almamaterku Universitas Muhammadiyah Purwokerto.


vii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat ALLAH SWT atas segala rahmat,

hidayah serta inayahNya, sehingga dapat menyelesaikan penelitian skripsi yang

berjudul “Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Jambu Biji (Psidium

guajava) Terhadap Efek Antiproliferasi Melalui Modulasi Siklus Sel Fibroblast

NIH3T3”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi syarat dalam memperoleh gelar S1

Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak, penulis tidak

dapat menyelesaikan tugas ini dengan baik. Oleh karena itu, pada kesempatan ini

penulis mengucapkan terima kasih kepada :

1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. Selaku Rektor Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

2. Dr. Agus Siswanto, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto

3. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing I yang telah

memberikan arahan, masukan dan bimbingan dalam penyusunan skripsi.

4. Elza Sundhani, M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing II yang telah

memberikan arahan, masukan dan bimbingan dalam penyusunan skripsi.

5. Seluruh dosen Fakultas Farmasi UMP yang telah memberikan ilmunya

sehingga dapat membantu penulis dalam menyelesaikan penulisan skripsi.

6. Kedua orang tua tercinta yang selama ini telah memberikan usaha berupa doa

dan dukungan dari segala aspek

7. Kakak-kakak tersayang (Ka sufyan, Ka masitoh, Ka Hasan, Ka Uswah, Ka

Nurul, Ka Alfi, Ka Nisa) yang selalu mendukung dan setia mendengarkan

keluh kesah adiknya.

8. Sahabat-sahabat tersayang yang tak dapat disebutkan satu per satu disini,

terima kasih atas bantuan, doa dan dukungan kalian selama ini yang selama

ini telah mewarnai perjalanan hidup penulis.

9. Tim Kultur yang telah berjuang bersama, terimakasih atas kerjasama,

kesabaran serta suka dukanya selama penelitian berlangsung.

10. Semua pihak yang telah membantu yang tidak dapat saya sebutkan satu-

persatu.


viii

Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kata

sempurna, untuk itu penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang

membangun demi perbaikan penelitian di masa mendatang.

Semoga Allah SWT senantiasa membalas amal baik yang telah

Bapak/Ibu/Saudara berikan, dan harapan penulis semoga skripsi ini dapat

bermanfaat bagi penulis sendiri pada khususnya dan bagi semua pihak yang

membutuhkan..

Purwokerto, 09 Juni 2017

Penulis

Nur Fina Mafazah


ix

RIWAYAT HIDUP

Nama : Nur Fina Mafazah

Tempat, Tanggal Lahir : Tegal, 5 Mei 1995

Orang Tua : H.A Rochim (Ayah), Hj. Nur Aeni (Ibu)

Pendidikan

a. SD : SN Negeri Kajen 01

b. SMP : SMP Ihsaniyah kota Tegal

c. SMA : SMK Nusaputera 2 Semarang

d. S1 : Universitas Muhammadiyah Purwokerto

Kegiatan Ilmiah Mahasiswa

a. Pkm-P (Program Kreativitas Mahasiswa-Penelitian) Aplikasi Metode CBIA

Pada Remaja Putri Di Dalam Penggunaan Kosmetik Di Desa Semondo

Kabupaten Kebumen Jawa Tengah tahun 2013 (ketua)


x




Nur Fina Mafazah1, Nunuk Aries Nurulita2, Elza Sundhani3

ABSTRAK

Keloid merupakan jaringan perut yang tumbuh secara abnormal yang biasanya

akan muncul pada penyembuhan luka yang tidak disempurna. Penyebab

munculnya keloid adalah proliferasi sel fibroblas yang abnormal. Terapi keloid

masih terbatas dan berefek samping. Pencarian obat baru untuk mengatasi keloid

terus berkembang. Kandungan senyawa yang telah diteliti sebagai anti keloid

salah satunya adalah quersetin dan asam oleonolat dan daun jambu biji memiliki

kandungan tersebut. Untuk itulah penelitian ini dilakukan, untuk melihat potensi

ekstrak daun jambu biji terhadap aktifitas sitotoksiknya, menghambat proliferasi

dan memperkirakan penghambatannya pada siklus sel. Percobaan dilakuakan

dengan cara serbuk daun jambu biji diekstraksi secara perkolasi dengan

menggunakan pelarut etanol 70%. Penelitian ini menggunakan ekstrak etanol

daun jambu biji dengan konsentrasi 1000,500, 250, 125, 50 µg/ml. Konsentrasi

tersebut digunakan dalam pengujian sitotoksik dengan metode MTT [3-(4,5-

Dimethylthiazol-2-yl)-2‚5-diphenyl tetrazolium bromide] hasil dari uji sitotoksik

diperoleh IC50 sebesar 268 µg/ml. Uji proliferasi dilakukan dengan dosis 33,5, 67,

134 µg/ml dengan waktu inkubasi 0, 24, 48, dan 72 hasilnya penghambatan

proliferasi terbaik pada dosis 134 µg/ml. Uji Siklus sel dilakukan dengan metode

flowcytometry, dari hasil pengamatan siklus sel menunjukan ekstrak etanol daun

jambu biji konsentrasi 33,5µg/ml dan 134 µg/ml mampu memicu akumulasi sel

pada fase G0-G1.

Kata kunci: keloid, sel fibroblas, ekstrak daun jambu biji (Psidii guajava),

sitotoksik, proliferasi sel, siklus sel.


xi

THE EFFECT OFGUAVA (Psidii guajava) LEAVES EXTRACTS ON

ANTI-PROLIFERATIVE EFFECT THROUGH NIH3T3 FIBROBLAST

CELL CYCLE MODULATION.

Nur Fina Mafazah1, Nunuk Aries Nurulita2, Elza Sundhani3

ABSTRACT

Keloid is a tissue of abdomen growing abnormally; it is usually resulted from

an imperfect wound healing. The factor for it is a proliferation of an abnormal

fibroblas cell. Its therapy is still limited and has a negative side effect. Finding a

new medicine for it is necessary. One of the compounds investigated as an

antikeloid is quersetin and oleonolat acid, and guava leaves contain these

substances. This study is to find out the potential of guava leave extracts to inhibit

the sitotoxic activity, proliferation, and to determine its block over cell cycles.

The experiment was done by extracting the powder of the leaves in the form of

percolation by ethanol solvent of 70%. The ethanol extracts of guava leaves have

various concentration from 1000, 500, 250, 125, and 50 µg/ml. The concentrations

were analyzed by sitotoxic testings using a method of MTT [3-(4,5-

Dimethylthiazol-2-yl)-2‚5-diphenyl tetrazolium bromide]. The result of the test

shows IC50of 268 µg/ml. The proleferation test was done using the substance at

the dosage of 33,5, 67, 134 µg/ml with an incubation times of 0, 24, 48, and 72.

It indicates that the best dosage to inhibit the proliferation is 134 µg/ml.The test of

cell cycle uses flowcytometry. The observation on the cell cycle shows that the

ethanol extracts of guave leaves at the concentrations of 33,5µg/ml and 134

µg/ml can trigger the cell accummulation at the G0-G1 phase.

Keywords: keloid, fibroblast cell, guava leave extracts, sitotoxic, cell

proliferation, cell cycle.


xii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL .............................................................................................. i

HALAMAN PERSETUJUAN ............................................................................. ii

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................. iii

HALAMAN PERNYATAAN ORISINILITAS ................................................. iv

MOTTO .................................................................................................................. v

LEMBAR PERSEMBAHAN ............................................................................. vi

KATA PENGANTAR ........................................................................................ vii

RIWAYAT HIDUP .............................................................................................. ix

ABSTRAK .............................................................................................................. x

ABSTRACT ........................................................................................................... xi

DAFTAR ISI ........................................................................................................ xii

DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xiv

DAFTAR TABEL ............................................................................................... xv

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xvi

DAFTAR SINGKATAN ................................................................................... xvii

BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1

A. Latar Belakang ...................................................................................... 1

B. Perumusan Masalah .............................................................................. 3

C. Tujuan Penelitian................................................................................... 3

D. Manfaat Penelitian................................................................................. 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................ 4

A. Penelitian Terdahulu ............................................................................. 4

B. Landasan Teori ..................................................................................... 5

1. Deskripsi dan Klasifikasi tanaman jambu biji (Psidii guajava) ...... 5

a. Klasifikasi Tanaman Jambu Biji .............................................. 5

b. Deskripsi Daun Jambu Biji ....................................................... 5

c. Kegunaan Daun Jambu Biji ...................................................... 6

d. Kandungan Daun Jambu Biji ................................................... 6

2. Keloid .............................................................................................. 6

a. Definisi Keloid ......................................................................... 6

b. Mekanisme Pembentukan Keloid ............................................. 7

c. Pengobatan Keloid ................................................................... 8

3. Kolagen ............................................................................................ 9

4. Sel Fibroblast ................................................................................. 11

5. Siklus sel ......................................................................................... 12

C. Kerangka Konsep ............................................................................... 15

D. Hipotesis .............................................................................................. 16

BAB III METODE PENELITIAN ..................................................................... 17

A. Jenis dan Rancangan Penlitian ............................................................ 17

B. Variabel Penelitian ............................................................................. 17

C. Definisi Variabel Operasional ............................................................ 18

D. Waktu dan Tempat Penelitian ............................................................ 18

E. Alat dan Bahan Penelitian .................................................................. 18

F. Cara Penelitian ................................................................................... 19


xiii

1. Identifikasi Daun Jambu Biji ......................................................... 19

2. Pembuatan Ekstrak ........................................................................ 19

3. Identifikasi Golongan Senyawa Dengan KLT .............................. 19

4. Uji Sitotoksik ................................................................................. 20

5. Uji Proliferasi ................................................................................ 20

6. Uji Siklus sel dengan metode Flowcytometry ................................ 21

G. Analisis Hasil ..................................................................................... 22

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 24

A. Identifikasi Tanaman ........................................................................... 24

B. Pembuatan Simplisia ........................................................................... 24

C. Pembuatan ekstrak etanol daun jambu biji .......................................... 25

D. Hasil Idenrtifikasi Golongan senyawa Kimia Ekstrak Etanol

daun Jambu biji ................................................................................... 26

E. Uji Sitotoksik Menggunakan Metode MTT ........................................ 29

F. Uji proliferasi Sel pada sel fibroblas ................................................... 32

G. Uji Siklus Sel dengan metode Flowcytometry .................................... 34

H. Keterbatasan Penelitian ....................................................................... 37

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 38

A. Kesimpulan.......................................................................................... 38

B. Saran .................................................................................................... 38

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 39

LAMPIRAN .......................................................................................................... 46


xiv

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Tanaman Daun Jambu Biji ................................................................ 5

Gambar 2.2 Mekanisme Pembentukan Keloid ...................................................... 8

Gambar 2.3 Skema siklus sel ............................................................................... 13

Gambar 2.4 Kerangka Konsep ............................................................................. 15

Gambar 4.1 Hasil ekstraksi daun jambu biji ........................................................ 26

Gambar 4.2 Hasil KLT senyawa flavonoid ......................................................... 27

Gambar 4.3 Hasil KLT senyawa terpenoid pada sinar tampak ............................ 28

Gambar 4.4 Reduksi MTT menjadi formazon ...................................................... 30

Gambar 4.5 Kurva hasil Uji Sitotoksik ................................................................ 32

Gambar 4.6 Kurva hasil uji proliferasi ................................................................ 33

Gambar 4.7 Deteksi ditribusi sel berdasarkan jumlah kromosomnya dengan

menggunakan metode flowcytometry ................................................ 35


xv

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Pengaktifan Cyvlin- CDK (cyclin-dependent kinases) pada siklus sel 13

Tabel 4.1 Hasil identifikasi senyawa dengan KLT ............................................ 25

Tabel 4.2 Hasil persentasi distribusi sel pada uji siklus sel dengan metode

flowcytometry ekstrak etanol daun jambu biji ..................................... 36


xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Cara kerja sistematis ..................................................................... 45

Lampiran 2. Hasil identifikasi tanaman daun jambu biji ................................... 46

Lampiran 3. Tahapan pembuatan ekstrak etanol daun jambu biji ...................... 47

Lampiran 4. Hasil identifikasi golongan senyawa kimia ................................... 48

Lampiran 5. Mapiing uji sitotoksik, proliferasi dan siklus sel ........................... 50

Lampiran 6. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol daun jambu biji untuk

uji sitotoksik pada sel fibroblast ..................................................... 51

Lampiran 7. Perhitungan (%) viabilitas sel fibroblas dengan perlakuan ekstrak

etanol daun jambu biji .................................................................... 54

Lampiran 8. Perhitungan IC50 ekstrak etanol daun jambu biji (waktu inkubasi 24

jamb) dengan metode probit dengan menggunakan program

SPSS16.0 for windows .................................................................... 56

Lampiran 9. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol daun jambu biji untuk

uji proliferasi ................................................................................. 60

Lampiran 10. Hasil uji proliferasi sel fibroblas dengan perlakuan ekstrak etanol

daun jambu biji dengan waktu inkubasi jam 0,24,48,72 ................ 63

Lampiran 11. Perhitungan untuk uji siklus sel dengan metode Flowcytometry ... 64

Lampiran 12. Hasil siklus sel dengan metode flowcytometry ............................... 66


xvii

DAFTAR SINGKATAN

DMEM (Dulbeco’s Modified Eagle Medium)

DMSO (Dimethyl Sulfoxide)

EEDJB (ekstrak etanol daun jambu biji)

ELISA (Enzym-Linked Immunosorben assay)

FBS (Fetal Bovine Serum)

IC 50 (Inhibition Concentration 50)

LAF (Laminar air Flow)

MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2‚5-diphenyl tetrazolium bromide)

PBS (Phosphate Buffer saline)

SDS (Sodium Dodecyl Sulfate)

TCD (Tissue Culture Disk)


Documents

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU BIJI …repository.ump.ac.id/2976/1/COVER.pdfPENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN JAMBU BIJI (Psidium guajava) TERHADAP EFEK ANTIPROLIFERASI