FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

LABORATORIO DE FARMACOLOGÍA

Práctica II y III

Sinergismo y Antagonismo

Agonistas y Antagonistas de receptores adrenérgicos

PRÁCTICA II: SINERGISMO Y ANTAGONISMO

Experimento N°1: SINERGISMO COCAÍNA - ADRENALINA

FármacosCocaína, Clorhidrato, solución al 1%

Adrenalina solución al 1%

Animales 1 conejo albino grande

Procedimiento

1.º. Exponer las pupilas de los conejos a un mismo grado de iluminación, para no alterar el reflejo fotomotor; abrir los párpados de los conejos con los dedos pulgar e índice de la mano izquierda y con la mano derecha acercar una regla graduada, evitando el contacto con las pestañas, y determinar el diámetro pupilar en ambos ojos, tomándolos como datos basales.

2.º. Luego aplicar en el saco conjuntival derecho 2 gotas de solución de Cocaína al ¡%, evitando el escape de la sustancia, durante 1 minuto.

3.º. Diez minutos después medir nuevamente el diámetro de la pupila derecha e instilar, en ambos sacos conjuntivales, 2 gotas de adrenalina en sol. Al 1% de modo que al final el ojo derecho habrá recibido ambas drogas.

4.º. Cinco minutos después de la última aplicación, medir ambas pupilas.

Resultados

--------------------- B3--- ----------------C3 -----------Basal Cocaina EpinefrinaOjo Derecho diametro de la pupila (mm) 4 5 6.5

reflejo corneal +++ Presente PresenteSaco conjuntival Normal Rosado Blanquecino

Ojo Izquierdo diametro de la pupila (mm) 4 - 5.5reflejo corneal +++ - PresenteSaco conjuntival Normal - Rosado

Conclusiones

o La cocaína, al inhibir la recaptación de noradrenalina, provoca su acumulación en el espacio sináptico, aumentando sus efectos. Esto origina una sobreestimulación simpática a nivel ocular que provoca midriasis, observada por el aumento del diámetro de la pupila en el conejo.

o Asimismo la cocaína tiene propiedades anestésicas locales, sin embargo ya no es utilizado por sus propiedades irritantes y porque produce esfacelo corneal. En la práctica se pudo observar hinchazón en el ojo derecho del conejo, lo que indicaba irritación.

o Al aplicar cocaína y luego epinefrina, se produjo un sinergismo entre ambos, puesto

Cocaína(Benzoilmetilecgonina)

Es un alcaloide que se extrae de la hoja de coca.

Acciones deseables Efectos adversos

Bloqueo de los impulsos nerviosos

(Anestésico local)

Alta toxicidad

Inquietud y

que más adrenalina se encontrará presente en el espacio sináptico y la cocaína evitará su recaptación, con lo que se anula la culminación de los efectos adrenérgicos. Por este motivo, la pupila del ojo derecho del conejo aumento 3 mm más en su diámetro que el ojo izquierdo, el cual sólo recibió epinefrina.

Discusiones

o Al inicio de la práctica, el conejo fue atado en sus 4 patas y esto le originó estrés que provocó la liberación de catecolaminas con la consiguiente midriasis; por esto la pupila del conejo se encontraba dilatada sin haberle aplicado ningún fármaco. Quizá hubiésemos obtenido resultados más exactos de no haber atado inicialmente al conejo.

o En todo lo demás, la práctica estuvo bien realizada y los resultados obtenidos son acordes con la teoría.

Experimento N°2: ANTAGONISMO FISIOLÓGICO

Fármacos Estricnina, Sulfato, solución al 1%Diazepam solución 10mg en 2ml

Animales 2 ratones blancos, de 25 a 30 g de peso

Procedimiento

1.º. A un ratón se le administrará por vía subcutánea 1.8 mg/Kg de peso de sulfato de estricnina en solución al 1%. Servirá de animal control.

2.º. Al otro ratón se le inyectará, previamente, Diazepam a la dosis de 10 mg/Kg de peso, vía intraperitoneal. Dos minutos después se le administrará estricnina, vía subcutánea, a la misma dosis que en el primer ratón.

3.º. En ambos casos, se anotará el tiempo de inyección de la estricnina y el período de latencia de las convulsiones y la duración de efectos de los fármacos.

4.º. Anotar y comparar los resultados obtenidos en ambos animales.

Resultados

RatónFármaco

Diámetro de la Pupila en mm DosisPeríodo de

LatenciaIntensidad mg ml

Blanco 24g

Estricnina 4min ++++(muerte)

X = 0.0432

1.8mg -----1000gx------------24g

Y= 0,04

10mg--------1ml0,0432mg-----y

Cocaína(Benzoilmetilecgonina)

Es un alcaloide que se extrae de la hoja de coca.

Acciones deseables Efectos adversos

Bloqueo de los impulsos nerviosos

(Anestésico local)

Alta toxicidad

Inquietud y

Cola 22g

Estricnina + Diazepam 2 min.

++(convulsiones)

X= 0,22

1.8mg -----1000gx------------22g

Z= 0,04

10mg--------1ml0,0432mg-----Y

Diazepam10g--------2ml

0,22-------Z

Conclusiones

o La estricnina es un alcaloide que produce la sobreestimulación del SNC, predominantemente sobre la médula espinal; su mecanismo de acción es por antagonismo selectivo y competitivo del receptor de glicina. Los efectos que produce en el animal intoxicado son: piloerección, hiperreflexia, hiperflexión e hiperextensión, convulsiones tónicas y clónicas, y muerte. Todos estos efectos fueron observados al administrar estricnina al primer ratón.

o Si se administra Diazepam(depresor del SNC) se provocará una hiperpolarización de la membrana por medio del ingreso de cloro a través del receptor gabaérgico. Posteriormente, la administración de estricnina bloqueará a los receptores de glicina, y sus efectos serán notorios conforme el Diazepam deje de ejercer los suyos. Por ello, podemos observar que el segundo ratón, que recibió primero Diazepam su período de latencia es mucho mayor que el de estricnina, tardó más tiempo en presentar los signos característicos de la estricnina que el primero, así como su muerte fue mucho más lenta. Incluso podría decirse que la muerte del segundo animalito fue menos dura que la del primero.

o Por lo tanto, entre la estricnina y el diazepam existe un antagonismo fisiológico, puesto que ambos tiene acciones opuestas pero actúan sobre diferentes estructuras de la neurona: el primero lo hace sobre el receptor de glicina; mientras que el segundo, sobre el receptor GABA.

Discusiones

o El advenimiento de la muerte del primer ratoncito fue mucho más tardía de lo que se esperaba. Esto puede deberse a que se le administró estricnina por vía subcutánea, en la cual el flujo sanguíneo está disminuido.

Experimento N°3: ANTAGONISMO CIANURO - NITRITO

Procedimiento

- Administrar a una paloma, por vía intramuscular, 4 mg/Kg de peso de cianuro de potasio en solución al 1%.

- Al presentar los síntomas tóxicos (aleteo, ataxia, convulsiones), inyectarle rápidamente por vía endovenosa 35 mg/Kg. de peso de nitrito de sodio en sol. al 2%. Observe la recuperación.

Resultados

Discusiones

En la clínica, ante una intoxicación por cianuro, es más recomendable usar TIOSULFATO DE SODIO al 25% que nitrito de sodio, ya que aquel produce una desintoxicación irreversible y permanente. En cambio, el nitrito de sodio convierte una fracción tolerable de la hemoglobina circulante total en metahemoglobina que tiene mayor afinidad por el cianuro que la citocromo oxidasa, por lo que lo capta y forman Cianometahemoglobina, que de todas maneras es tóxica, aunque en menor proporción.

Conclusiones

El cianuro es un veneno que produce hipoxia citotóxica (asfixia tisular) por medio de la inhibición de la cadena respiratoria tisular. Conlleva al metabolismo anaerobio y, como consecuencia de éste, a la formación de ácido láctico, el cual sumado a la hipoxia provoca depresión del SNC, conllevando al paro respiratorio y la muerte. Al administrar este veneno en la paloma se pudo observar que progresivamente iba presentando síntomas cada vez más letales, entre los que menciono:

Debilidad. Aleteo desesperante. Ataxia. Apertura del pico (signo de ahogo).

El nitrito de sodio es uno de los antídotos del cianuro. Su administración rápida garantiza la supervivencia del ser intoxicado. En la práctica se pudo administrar a tiempo el nitrito de sodio, por lo que la paloma pudo vivir, y su recuperación fue progresiva.

Por lo tanto, entre el cianuro y el nitrito de sodio existe un antagonismo químico o antidotismo. Es importante mencionar que el nitrito de sodio también es tóxico, ya que forma metahemoglobina, pero la unión de ésta con el cianuro forma un compuesto que es menos tóxico que el cianuro por sí solo.

Observaciones

Droga Apariencia General Movimiento de cabeza

Posición de pie

Cianuro de Potasio0.5 ml

Debilidad, hipóxico (podía notarse porque

abría el pico desesperadamente)

Tieso (sin movimiento)

No podía mantenerse en esa

posición.

Nitrito de Sodio4.1ml

Recuperaba la fuerza, podía respirar.

Mejoraba su movimiento de

cabeza

Recuperaba su capacidad para

mantenerse en pie.

Experimento N°4: ANTAGONISMO CALCIO- MAGNESIO

Procedimiento

- A un conejo de 4 kg se le inyecta por via intravenosa sulfato de Mg al 20 %, dosis de 4 ml, provoca depresión.

- Se administra por via endovenosa cloruro de calcio al 10%, dosis de 6 ml y se observa reacciones.

Resultados

Droga Apariencia GeneralReflejo anti

gravídicoFrecuencia respiratoria

Frecuencia cardiaca

Basal Ansiedad Cabeza Caída Normal Normal

Sulfato de Magnesio

Depresión Normal Apnea Bradicardia

Cloruro de Calcio

Ansiedad aumentada Cabeza Caída Regreso a su estado normal

Regreso a su estado normal

Discusiones

En este experimento se observó el efecto antagonista del magnesio y del cloruro de calcio en un conejo de 4 kg de peso.

En un principio, el conejo tenía una apariencia general algo ansiosa, con buen tono muscular, un reflejo anti gravídico atípico ya que el conejo mantenía la cabeza caida, y una frecuencia respiratoria dentro de los parámetros normales. También tenía una frecuencia cardíaca normal.

Primero se le administró sulfato de magnesio. El mecanismo de acción del magnesio se basa en evitar la salida de calcio del retículo sarcoplásmico para que este no pueda ingresar a la célula causando así contracción muscular, reduciendo así el bombeo cardiaco y la vasoconstricción. Además, disminuye la frecuencia respiratoria y se genera una ausencia de reflejos (patelar).

Al aplicar el cloruro de calcio, vimos que el conejo rápidamente volvió a una situación estable, recuperó el tono muscular pues el calcio entra y antagoniza el efecto anti cálcico del magnesio, haciendo así, que los músculos puedan contraerse.

Conclusiones

El sulfato de magnesio inhibe el ingreso de calcio al axoplasma de la placa motora, lo que disminuye la movilización vesicular y por lo tanto la liberación de acetilcolina. Esto produce pérdida del tono muscular, del reflejo anti gravídico, midriasis y disminución de las frecuencias cardiaca y respiratoria. El cloruro de calcio tiene un efecto antagonista, ya que bloquea el efecto del magnesio al aumentar las concentraciones de calcio. Por lo tanto aumenta la liberación de

acetilcolina y los efectos antes mencionados se ven revertidos, con la recuperación del tono muscular.